QUE ES CROMATOGRAFIA DE GASES ?

Sistema cromatografico
Gases de
soporte

Muestra

Gas de arrastre

Puerto de
inyeccin

Columna

Detector

Sistema de
datos

Esquema de un cromatgrafo de gases

Puerto de
inyeccin

Sistema de datos

Detector

Horno
Carrier

Columna

Gas de arrastre

El gas de arrastre cumple dos funciones principales

1. Transportar los componentes de la muestra
2. Crear una matriz adecuada para el detector
Inerte
Puro
Fcilmente adquirible
Econmico
Adecuado para el detector
No debe interferir con el
anlisis

Para el suministro de gas se necesita una tanque de gas comprimido,

un regulador de presin y una vlvula de control
Actualmente se cuenta con sofisticados sistemas para control de
suministro de gas al cromatgrafo

Gases mas utilizados

Hidrogeno
Helio
Nitrgeno

Tanto los gases como los sistemas

de suministro ( reguladores, tuberas,
vlvulas, etc ) deben tener
caractersticas adecuadas para ser
utilizados en cromatografa

Argn
Mezcla Argn/metano

Gases grado AP o UAP

Reguladores con diafragmas de

acero
Buena parte del xito de la
cromatografa depende de la
eleccin de los gases y de
su grado de pureza

Tubera tratada

Requerimiento de gases
depende del tipo de
detector

Tanque

Generador

Seleccin del gas portador

INYECCION DE MUESTRAS

Algunas muestras son gaseosas y se pueden inyectar directamente por

medio de jeringa o con una vlvula de muestreo de gases

La mayoria de las muestras son liquidas y se deben vaporizar para

analizarlas por cromatografia de gases
En este caso se utiliza un puerto de inyeccin con control de
temperatura y una jeringa para lquidos o una vlvula de muestreo de
lquidos

Sistema de entrada de muestra

Puerto de inyeccin
Funciones
Evaporar la muestra e
introducirla en la columna

Tinj 50o C

sobre Tcol

La inyeccin se hace a
travs del septum

El septum debe
Ser estable a Tinj
Mantener el sello del puerto

Sistema de entrada de muestra

Liner

Proporciona un volumen y una superficie inerte para la evaporacin de

la muestra

Generalmente fabricado en vidrio aun cuando los hay metlicos

Deben ser reemplazados o limpiados regularmente pues con el tiempo

presentan depsitos de material no voltil y productos de degradacin

Existen liners especficamente diseados para cada tipo de inyeccin

INYECCION DE MUESTRAS

Puerto de inyeccin
Empacada / megabore

puerto empacado

Megabore / capilar

puerto split/splitless

Columna

Puerto empacado
La muestra se inyecta con
jeringa a travs de la
septa, se vaporiza en el
puerto y es arrastrada a la
columna

Sistema de inyeccin
Inyeccin con divisin (split)

septum

Entrada gas
portador

Purga septum

Salida divisin
columna

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

10

Sistema de inyeccin
Inyeccin sin divisin (splitless)

septum

Entrada gas
portador

Purga septum

Vlvula cerrada
Salida divisin
columna

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

11

Sistema de entrada de muestra

Jeringas

Se utilizan para introducir un volumen conocido de gas o lquido al

cromatgrafo

Existen adaptadores para ayudar a controlar el volumen inyectado

Sistema de entrada de muestra

La principal fuente de errores de precisin es una tcnica de inyeccin
deficiente

Se pueden tener mtodos de inyeccin tanto manuales como

automticos

Un equipo de inyeccin automtico mejora notablemente la

reproducibilidad en los anlisis

Tambin ofrece facilidad para automatizar los anlisis

Sistema de entrada de muestra

Se requiere rapidez y
consistencia en la
inyeccin para obtener
buenos resultados

Se pueden utilizar diferentes tcnicas

para mejorar la reproducibilidad con
inyeccin manual

Tcnica de inyeccin
Inyeccin manual
Llenar la jeringa con muestra y
graduar la cantidad a inyectar
Introducir la aguja en el puerto
Bajar el embolo
Sacar la aguja del puerto

Lo ms importante es la
velocidad

RSD 3-5%

Inyeccin autmatica

Solucin al problema de la
inyeccin
Reproducibilidad permite
cuantificar con estandar
externo

Anlisis completamente
automatizado

QUE ES CROMATOGRAFIA DE GASES ?

La columna

Lugar donde ocurre la separacin

Separacin es dependiente de la
temperatura

Columna asociada a un horno con

buen control de temperatura

Columna

La columna es el componente
clave en el proceso de
separacin
Un mismo instrumento puede
usarse para diferentes anlisis
solamente cambiando la
columna

SEPARACION DE LOS COMPONENTES

Tipos de columnas

Columna empacada

Tubo capilar con la fase

estacionaria recubriendo su
superficie interna

La fase estacionaria esta

recubriendo un material
inerte finamente dividido y
este a su vez est
empacado en un tubo

0.1 a 0.5 mm de diametro interno

Diametros de 1/16 a

Longitud tpica 30 metros

Longitud tpica 2 metros

Columna capilar

Instrumentacin
(Columna)

Columna empaquetada

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

25

Instrumentacin
(Columna)

Columna capilar

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

26

Instrumentacin
(Columna)
Comparacin columnas capilares - empaquetadas

Las columnas capilares tienen:

- Mayor resolucin
- Menor capacidad de muestra

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

27

SEPARACION DE LOS COMPONENTES

Caractersticas de la columna
El propsito de una columna es producir picos finos y bien separados
de una muestra multicomponente

Eficiencia de la columna
La eficiencia est
determinada por la
construccin de la
columna (ID,
Longitud, espesor
de la fase) y por el
flujo y tipo de gas
de arrastre

SEPARACION DE LOS COMPONENTES

Resolucin de la columna

Una columna de alta resolucin separa los picos a nivel de lnea base

La resolucin es proporcional a la raz cuadrada de la longitud

Selectividad de la columna

Que tan bien la fase estacionaria diferencia dos componentes

Si se presenta baja selectividad entonces hay coelucin de

componentes

Soporte Slido
Caractersticas:
a. Superficie especfica grande (de 1 a 20 m2/g)
b. Estructura porosa con dimetro uniforme igual o
inferior a 10 mm por poro.
c. Debe ser inerte, no tener interaccin qumica
absorcin por la muestra.
d. Las partculas deben ser de tamao y forma
uniforme
e. Debe tener resistencia mecnica y no romperse
fcilmente.

Tipos ms empleados
Tierras diatomceas

Esferas de vidrio
Tefln

Caractersticas de algunos soportes slidos

Chromosorb A: Se usa en cromatografa preparativa, puede emplearse hasta con
25% de fase estacionaria, no es frgil ni absorbente.
Chromosorb W: es frgil pero de muy alta eficiencia. Uso general
Chromosorb G: compuestos polares, tiene ms resistencia mecnica que el
Chromosorb W. El rea especfica no es muy grande, se emplea con un
porcentaje muy bajo de fase lquida.
Chromosorb P: Tiene mayor absorcin que los dems, se emplea sobre todo para
hidrocarburos, rea especfica grande. ase estacionaria, no es frgil ni
absorbente.
Chromosorb T: Muy inerte, se recomienda para compuestos muy polares o
reactivos como agua, SO2, hidrazna, halgenos. Es poco eficiente y slo se
debe usar cuando se requiere un soporte inerte.
Tefln: Se emplea sobre todo con detectores de conductividad trmica para
separaciones de H2O, amonaco, etc. Es muy difcil de recubrir y el porcentaje
de fase estacionaria no debe ser mayor al 10%.
Esfera de vidrio: Debido a que el vidrio es prcticamente inerte, se ha empleado
para compuestos muy polares. El recubrimiento es muy bajo (mximo 3%).
ando se requiere un soporte inerte.

Fase lquida
"La fase lquida debe tener caractersticas fisicoqumicas semejantes a
la muestra a analizar".
Caractersticas:
Viscosidad: no muy alta para facilitar el equilibrio
Tensin superficial: adecuada para mojar el soporte slido.

Tensin de vapor: mnima, para evitar la evaporacin.

Selectividad: define el reparto y la separacin
Reversibilidad del reparto: se debe favorecer la absorcin y
desabsorcin.
Estabilidad trmica: no se debe descomponer.

Instrumentacin
(Horno)

Resistencia elctrica, ventilador, sensor de temperatura

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

19

Instrumentacin
(Horno)
-Isotermo
-Temperatura programada
-Isotermo: Temperatura constante durante la separacin

THorno Peb
-Temperatura programada: Aumentar la temperatura de la
columna durante la separacin
Aumentar la presin de vapor de los solutos, disminuyendo
los tiempos de retencin

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

20

SEPARACION DE LOS COMPONENTES

Horno

Programa de temperatura
50 oC (10 min) 200 0C a 7,5 oC/min (7 min)

250
Iso 2
200
Temp, oC
150
rampa
100
Iso 1
50

10

20

30

40
Tiempo, min

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

22

 Para qu rampas de temperatura ?

Cuando el tiempo de retencin se incrementa el ancho de pico aumenta y la
altura disminuye, hacindose difcil la determinacin de componentes que
eluyen al final de un anlisis

Dado que la solubilidad de un gas en un liquido disminuye cuando se

aumenta la temperatura, se puede disminuir el tiempo de retencin
aumentando la temperatura de la columna

Programas de temperatura Factores a considerar

Variacines en la solubilidad de los solutos

Cambios en la volatilidad de los solutos

Estabilidad de los solutos

Cambios de flujo

Estabilidad de la fase estacionaria

Programas de temperatura Factores a considerar

Pasos generales para crear un programa de temperatura asumiendo que
la separacin es posible
1. Determinar la temperatura inicial y tiempo basado en la mejor
separacin posible de los primeros componentes
2. Determinar la temperatura final y tiempo basado en la mejor
separacin posible de los ltimos componentes
3. Establecer rampas para los componentes intermedios

Sistemas de deteccin
Para que nuestro sistema cromatografico sea til, necesita una forma de
medir los componentes que eluyen de la columna, un detector
Como detector sirve cualquier mtodo que directa o indirectamente
produzca una seal a la salida de los componentes

Los detectores se pueden clasificar como

Destructivos

No destructivos

Universales

Selectivos

QUE ES CROMATOGRAFIA DE GASES ?

El detector

Gases de
soporte

Detector

Cromatograma
Hay diferentes tipos de detectores, pero todos tienen la misma
funcin
Producir una seal estable cuando pasa solo gas de arrastre
(linea base)
Producir una seal diferente cuando pasa un componente de la
muestra

Propiedades de un buen detector

Alta sensibilidad - Selectividad en algunas aplicaciones

Respuesta rpida a los cambios de concentracin
Amplio rango de respuesta lineal
Estable con respecto a ruido y deriva
Baja sensibilidad a variaciones de flujo, presin y temperatura
Debe producir una seal fcil de manejar
Robusto y de fcil mantenimiento

Detectores
Conductividad trmica
Catarmetro, TCD (Thermal Conductivity Detector)

Salida gas al exterior

Entrada gas desde la columna

filamento caliente

Cambios en la composicin del gas modifican la temperatura del filamento

Al cambiar la temperatura del filamento cambia su resistencia elctrica

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

39

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TERMICA

Universal
NO destructivo
USOS: anlisis de gases permanentes, hidrocarburos ligeros y otros tipos de
compuestos
Sensibilidad: entre 10-6 y 10-8 g

Conductividad trmica de algunos compuestos

Aun cuando el hidrogeno tiene una
conductividad trmica mas alta que el
helio, este se usa ms como gas de
arrastre por ser menos reactivo

El hidrogeno da picos negativos y

baja respuesta cuando se usa helio
como gas de arrastre

Detector de ionizacin de llama (FID)

Es el detector a elegir para determinacin de la mayora de compuestos
orgnicos. Es un detector destructivo

La produccin de iones en
una llama genera una
corriente que puede ser
medida

Emplea un gas auxiliar (make-up)

para mantener un flujo optimo con
columnas capilares

Detectores
Ionizacin de llama (FID)
Los tomos de carbono (excepto carbonilos y carboxilos) producen
radicales CH, que forman iones CHO+

CH + O CHO + + e
CHO+

CHO+
CHO+
CHO+

CHO+
CHO+

CHO+

CHO+

CHO+

Eluato con compuestos orgnicos carbonados

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

43

Detectores
Ionizacin de llama
FID (Flame Ionization Detector)

Salida gas al exterior

Sistema
electromtrico

V = 170 v

Entrada gas desde la columna

Entrada de aire

Entrada de hidrgeno

La formacin de iones en la llama induce una intensidad de corriente elctrica

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

42

Detectores
Captura electrnica
ECD (Electron Capture Detector)

Ar+
Ar+

Ar+

Ar+

Fuente radiactiva

(63Ni)

e-

Sistema
electromtrico

V = 200 v

Ar+

Entrada gas portador (N2, Ar con CH4) desde la columna

El gas portador se ioniza por el impacto de las partculas

Molculas con tomos electronegativos
(halgenos) captan electrones
22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

Disminuye ionizacin
gas portador
45

DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES

Detectores
Fotomtrico de llama
FPD (Flame Photometric Detector)
Aplicaciones:
-plaguicidas organofosforados
Filtro interferencia

-compuestos azufrados
-organoestnnicos
h

Tubo fotomultiplicacor

Entrada gas desde la columna

Entrada de aire

Entrada de hidrgeno

Los compuestos con S, P, Sn en la molcula emiten radiacin en la llama

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

48

Detectores
Ionizacin de llama alcalina
NP-FID (Nitrogen Phosphorous - Ionization Detector)
Aplicaciones:
-plaguicidas (organofosforados,
triazinas)
-drogas de abuso (coana, herona)
Sistema
electromtrico
Gas make up
Entrada gas desde la columna

Entrada de aire

Entrada de hidrgeno

La presencia de la perla alcalina (vidrio con Rb2SO4) sensibiliza el detector a

los compuestos con N y/o P en la molcula

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

47

Detectores
Espectrmetro de masas (MS)

Fuente de ionizacin

Analizador de masas

Detector

Vaco (10-7 torr)

Bomba de vaco

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

52

Detectores
Espectrmetro de masas (MS)
Fuente de ionizacin: La molcula se fragmenta en iones que son
acelerados hacia el analizador de masas
Fuente de impacto electrnico

filamento
columna CG

Placas
aceleradoras

e- e

M+

rechazador

Placas
focalizadoras

Analizador de masas

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

53

Ionizacin qumica
Ionizacin en presencia de un gas reactivo (CH4)
El gas se ioniza y los iones formados ionizan la molcula

CH 4 + e - CH 4+ + 2e CH +4 + CH 4 CH 5+ + CH 3

CH 5+ + M CH 4 + MH +
Fuente de ionizacin blanda

Espectro sencillo

Siempre aparece el in molecular

Obtencin de la masa molecular

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

55

Detectores
Espectrmetro de masas (MS)
Analizador de masas
Discrimina los fragmentos en funcin de su valor m/z
-Sector magntico
-Doble enfoque
-Cuadrupolo
-Tiempo de vuelo
-Trampa de iones

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

56

Analizador de tiempo de vuelo

No acta ningn campo magntico ni electrosttico
Los iones de menor masa llegan antes al detector
Detector

Fuente
iones
M+

M+

-Rango de masas ilimitado

Biomolculas

-Alta sensibilidad
-Baja resolucin

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

60

Analizador de trampa de iones

Electrodo anular sobre el que se aplica un campo de radiofrecuencia
que estabiliza la rbita de los iones

colu
mna
CG
M

e-

M+

Detector

-Diseo sencillo

CG-MS

-Baja resolucin
22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

61

Detector de masas
Channeltron
Multiplicador de iones
Superficie material que libera
e- cuando impactan los iones
M+

ee- -

e- ee- -

ee- ee-- e

ee- -

Carga negativa, que disminuye hacia el

electrodo colector

Electrodo colector

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

62

Detectores
Espectrmetro de masas

Espectros de masas

TIC

Cromatograma

Total Ion
Current

-modo SCAN (Barrido)

-modo SIR (Single Ion Recording)
(Registro nico de in)

22/11/2005

Qumica Analtica Avanzada

63