AURINETE DAIENN BORGES DO VAL

QUEBRA DE DORMNCIA DE SEMENTES DE VIDEIRAS

NIGARA ROSADA E ITLIA

Tese apresentada Universidade

Federal de Viosa, como parte das
exigncias do Programa de PsGraduao em Fitotecnia para
obteno do ttulo de Magister
Scientiae.

VIOSA
MINAS GERAIS BRASIL
2005

Ficha catalogrfica preparada pela Seo de Catalogao e

Classificao da Biblioteca Central da UFV

T
V135q
2005

Val, Aurinete Daienn Borges do, 1974Quebra de dormncia de sementes de videiras Nigara rosada e Itlia. / Aurinete Daienn Borges do Val.
Viosa: UFV, 2005.
xii, 51f : il. ; 29cm.
Inclui apndice.
Orientador: Srgio Yoshimitzu Motoike.
Dissertao (mestrado) - Universidade Federal de
Viosa.
Referncias bibliogrficas: f. 43-46
1. Uva - Semente. 2. Germinao. 3. Plantas - Reguladores. 4. cido giberlico. 5. Sementes - Fisiologia.
I. Universidade Federal de Viosa. II.Ttulo.
CDD 22.ed. 634.8821

AURINETE DAIENN BORGES DO VAL

QUEBRA DE DORMNCIA DE SEMENTES DE VIDEIRAS

NIGARA ROSADA E ITLIA

Tese apresentada Universidade

Federal de Viosa, como parte das
exigncias do Programa de PsGraduao em Fitotecnia para
obteno do ttulo de Magister
Scientiae.

APROVADA EM: 25 de agosto de 2005.

_______________________________ _______________________________
Prof. Jos Maria Moreira Dias
Prof. Paulo Roberto Cecon
(Conselheiro)

_______________________________ _______________________________
Prof. Dalmo Lopes de Siqueira
Dr. Antnio de Pdua Alvarenga

_______________________________
Prof. Srgio Yoshimitzu Motoike
(Orientador)

Aos meus pais, Bernardo e Maria do Carmo, que sempre me ensinaram,

atravs do exemplo, as lies de honestidade, perseverana, dedicao e
disposio para o trabalho; pr-requisitos sem os quais no teria chegado at
aqui.
Aos meus irmos, que me apoiaram em todos os momentos nesse longo
desafio.

DEDICO.

ii

Aos agricultores do serto nordestino.

MINHA HOMENAGEM.

iii

AGRADECIMENTOS

A DEUS, pelo dom da existncia e pela presena constante em minha

vida, proporcionando-me todas as condies necessrias a essa conquista.
Aos meus pais e irmos, pelo apoio incondicional em todos os
momentos, sobretudo nos mais difceis, fazendo-se sempre presentes ao longo
desta caminhada.
A Universidade Federal de Viosa, pela oportunidade de aprendizado e
subsdio para realizao deste trabalho.
Aos que fazem o Departamento de Fitotecnia da Universidade Federal
de Viosa, pelo ambiente acolhedor, pelos ensinamentos e oportunidade de
realizao deste curso.
Ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico
(CNPq), pelo auxlio financeiro mediante concesso de bolsa.
Ao professor Srgio Yoshimitzu Motoike, pela orientao e por fornecer
todos os meios necessrios ao desenvolvimento do trabalho.
Ao professor Jos Maria Moreira Dias pelos ensinamentos e boas
recomendaes, pela amizade, incentivo, apoio e disposio em nos ajudar.
Professora Marlia Contin Ventrella, pela disponibilidade em ajudar.
Aos professores Dalmo Lopes de Siqueira e Paulo Roberto Cecon pelas
crticas, sugestes, e participao na banca examinadora deste trabalho.
Ao Dr. Antnio de Pdua Alvarenga pelas sugestes e participao na
banca examinadora deste trabalho.
iv

Ao pesquisador da EMBRAPA Meio Norte, Lcio Flavo Lopes

Vasconcelos que sempre torceu por mim.
Janina, companheira e amiga deste os tempos de graduao, pelo
apoio constante e convivncia fraterna nesse feliz reencontro em Viosa.
Aos amigos Neide, Maria Augusta e Marcelo pelos momentos de alegria e
descontrao.
secretria do Programa de Ps-Graduao em Fitotecnia, Mara
Rodrigues, pela ateno dispensada sempre que precisamos do seu auxlio.
Aos funcionrios do Laboratrio de Cultivo de Clulas e Tecidos Vegetais
do Departamento de Fitotecnia, Mrcio e Cenira.
Aos colegas de Ps-graduao pelo aprendizado em conjunto e convvio
descontrado.
A todos que, de alguma forma, contriburam positivamente para minha
formao profissional e realizao do presente trabalho, meu sincero
agradecimento.

BIOGRAFIA

AURINETE DAIENN BORGES DO VAL, filha de Bernardo Jos do Val e

Maria do Carmo Borges do Val, nasceu em Teresina, Piau, onde cursou o
ensino fundamental e mdio.
Em maro de 1992, ingressou no Curso de Agronomia da Universidade
Federal do Piau (UFPI), em Teresina-PI, diplomando-se em dezembro de
1997.
Durante o perodo de maio de 1999 a junho de 2001 trabalhou na
Fundao de Apoio a Pesquisa do Corredor de Exportao Norte FAPCEN ,
em Balsas MA, junto aos produtores de sementes de soja da regio do
Cerrado dos Estados do Maranho e Piau. Em agosto de 2001 iniciou
trabalhos, como bolsista,

na EMBRAPA Meio Norte, em Teresina, onde

permaneceu at julho de 2003.

Em agosto de 2003 iniciou o curso de Mestrado em Fitotecnia na
Universidade Federal de Viosa (UFV), defendendo tese em 25 de agosto de
2005.

vi

NDICE

Pgina
RESUMO ..............................................................................................

ix

ABSTRACT ...........................................................................................

xi

1. INTRODUO GERAL .....................................................................

2. REVISO DE LITERATURA .............................................................

2.1. Origem e classificao botnica.................................................

2.2. Dormncia das sementes ..........................................................

2.3. Germinao in vitro ....................................................................

CAPTULO 1 .........................................................................................

10

GERMINAO IN VITRO DE SEMENTES DE UVA VITIS X

LABRUSCANA L.H. BAILEY CV. NIGARA ROSADA E VITIS
VINIFERA L. CV. ITLIA .....................................................................

10

RESUMO ..............................................................................................

10

1. INTRODUO ..................................................................................

12

2. MATERIAIS E MTODOS ................................................................

14

3. RESULTADOS..................................................................................

17

3.1. Porcentagem de germinao das sementes..............................

17

3.2. Velocidade de germinao das sementes .................................

20

4. DISCUSSO .....................................................................................

23

5. CONCLUSES .................................................................................

27

vii

Pgina
CAPTULO 2 .........................................................................................

28

GERMINAO IN VITRO E EX VITRO DE SEMENTES DE UVA

VITIS X LABRUSCANA L.H. BAILEY CV. NIGARA ROSADA.........

28

RESUMO ..............................................................................................

28

1. INTRODUO ..................................................................................

30

2. MATERIAL E MTODOS..................................................................

32

3. RESULTADOS..................................................................................

36

3.1. Porcentagem de germinao das sementes..............................

36

3.2. Velocidade de germinao das sementes .................................

37

4. DISCUSSO .....................................................................................

39

5. CONCLUSES .................................................................................

42

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS......................................................

43

APNDICES .........................................................................................

47

viii

RESUMO

VAL, Aurinete Daienn Borges do, M.S. Universidade Federal de Viosa, agosto
de 2005. Quebra de dormncia de sementes das videiras nigara
rosada e itlia. Orientador: Srgio Yoshimitzu Motoike. Conselheiros:
Jos Maria Moreira Dias e Marlia Contin Ventrella.

A viticultura possui um relevante papel econmico, social e cultural na

fruticultura nacional e mundial. No Brasil, a atividade apresentou uma
considervel expanso nas ltimas dcadas, tanto pelo aumento da rea
cultivada nas regies tradicionais, como pelo surgimento de novos plos de
produo. Atualmente, a grande maioria das cultivares comerciais utilizadas no
Brasil oriunda de zonas temperadas. Por conta disso, nos programas de
melhoramento da videira busca-se a obteno de cultivares adaptados s
diferentes regies do pas, que apresentem alta produtividade e resistncia s
principais doenas fngicas, bem como qualidade compatvel com as
exigncias do mercado. Dentro desse processo de melhoramento da cultura, o
baixo ndice e o longo perodo requerido para a germinao das sementes so
os principais gargalos. A baixa germinao dessas sementes atribuda
dormncia, que segundo a literatura causada pela ao de inibidores
qumicos presentes nas sementes e/ou fruto. Em geral, os mtodos utilizados
atualmente na quebra dessa dormncia so o uso do cido giberlico e da
estratificao. No entanto, esses mtodos proporcionam porcentagens de
ix

germinao que raramente ultrapassam o valor de 50%, alm de demandar um

considervel perodo de tempo para a germinao. Os objetivos gerais desse
trabalho foram avaliar tratamentos fsicos e qumicos aplicados s sementes,
bem como o efeito das condies in vitro e ex vitro sobre a porcentagem e
velocidade de germinao dessas sementes.Os tratamentos fsicos aplicados
s sementes consistiram em cortes nas regies mediana e da micrpila. A
imerso das sementes em solues de cido giberlico com diferentes
concentraes por 24 horas foi o tratamento qumico utilizado. No ambiente in
vitro as sementes foram inoculadas em tubos de ensaio contendo meio MS e
na condio ex vitro utilizou-se o substrato Plantmax, esterilizado e distribudo
em caixas de Gerbox de dimenses 63 x 98 mm. Os tratamentos fsicos foram
fundamentais para a porcentagem e velocidade de germinao das sementes
dentro do perodo de avaliao do experimento. O GA3 teve efeito significativo
na germinao das sementes das duas espcies utilizadas, Vitis vinifera L. cv.
Itlia e Vitis x Labruscana L.H. Bailey cv. Nigara Rosada, entretanto,
somente a velocidade de germinao do cv.Itlia foi aumentada com o uso de
cido giberlico. Observou-se tambm que o ambiente in vitro no
imprescindvel germinao das sementes e que apesar de apresentar menor
porcentagem, a germinao ocorreu normalmente em ambiente ex vitro.

ABSTRACT

VAL, Aurinete Daienn Borges do, M.S. Universidade Federal de Viosa, August
2005. Breaking the dormancy of grapevine seeds nigara rosada and
itlia. Adviser: Srgio Yoshimitzu Motoike. Committee Members: Jos
Maria Moreira Dias and Marlia Contin Ventrella.

Viticulture plays a very important economic, social and cultural role in the
national and world horticulture. In Brazil, the activity has grown considerably in
the last decades, increasing the area cultivated in traditional regions, as well as
bringing about new production regions. Recently, most commercial cultivars
used in Brazil come from temperate regions. For these reasons, grapevine
breeding programs aim for obtaining cultivars adapted to the different regions of
the Country, which have high productivity and resistance to the main fungal
diseases, as well as meeting the quality market demands. Within the process of
grape breeding, the low rate and long period for seed germination are the main
bottlenecks. Low germination, according to the literature, is attributed to
dormancy, which is caused by the action of chemical inhibitors present in the
seeds and/or fruit. In general, the current methods used for overcoming seed
dormancy are gibberellic acid application and stratification. However, these
methods provide germination rates rarely surpassing 50%, and demand a long
period of time for germination. The objectives of this work were to evaluate
physical and chemical treatments applied to the seeds, as well as the effect of
xi

in vitro and ex vitro conditions on the rate and speed of germination of these
seeds. Physical treatments applied to seeds were done by cuts on the middle of
the seeds and at the micropyle regions. Chemical treatment used was
immersion of the seeds in gibberellic acid solution with different concentrations
during 24 hours. Seeds treated were innoculated in vitro in MS medium, and at
ex vitro condition in sterilized Plantmax substratum distributed in Gerbox
boxes with dimensions of 63 x 98 mm. The physical treatments applied were
fundamental for the rate and speed of seed germination within the period of
evaluation of the experiment. GA3 had significant effect on seed germination for
both species, Vitis vinifera L. cv. 'Italia' and Vitis x Labruscana L.H. Bailey cv.
Niagara Rosada'. However, the speed of germination of cv.' Italia' was the only
increased with the gibberellic acid application. It was also verified that in vitro
environment is not essential to germination, and in spite of presenting lower rate
and speed, the germination occurred normally at ex vitro environment.

xii

1. INTRODUO GERAL

O melhoramento gentico da videira, como de outras espcies vegetais,

tem em sua essncia a realizao de hibridaes controladas para gerar a
necessria variabilidade. Devido s caractersticas morfo-anatmicas da flor,
esse procedimento rduo e meticuloso.
A realizao de hibridaes controladas na cultura da videira requer a
emasculao para a eliminao do androceu nos genitores femininos, uma vez
que nos cultivares comerciais as flores so hermafroditas. Devido
inflorescncia da videira, do tipo cacho com botes florais minsculos e em
grande nmero, o rendimento operacional da emasculao muito baixo, alm
de exigir pessoal especializado para o trabalho. Em mdia, so realizados em
torno de 10 cachos em um dia de trabalho. Aliado a este fato, o perodo do
incio do florescimento, quando os estigmas esto receptivos, para a realizao
dos cruzamentos, muito curto, em torno de trs dias, e todo o trabalho tem
que ser concentrado neste curto perodo. Um outro aspecto o baixo nmero
de sementes por baga, que de no mximo quatro sementes, o que leva a
necessidade de se realizar grandes nmeros de cruzamentos.
Contudo, a sntese do processo reflete-se, ao final, nas sementes
obtidas, que vo originar os novos indivduos para incio da seleo. Dessa
forma, as sementes obtidas a partir dos cruzamentos controlados em um
programa de melhoramento, so materiais de propagao muito importantes
para produzir novas variedades de uvas para propsitos especiais.
1

Entretanto, a relevncia das sementes de videira para o melhoramento

gentico coexiste com um problema, o baixo ndice de germinao da semente
Pommer et al. (1988). Ergenoglu et al. (1997), estudando a germinao de
sementes de Vitis vinifera cv. cardinal, tarsus bevari e itlia durante dois
anos, obtiveram no tratamento controle a porcentagem de germinao mdia
de 5,9, 2,0 e 4,4, respectivamente. Pommer et al. (1988), estudando o efeito da
estratificao na germinao de sementes de Vitis x labruscana cv. nigara
rosada, observaram que as sementes do tratamentos testemunha no
germinaram.
A baixa germinao da semente de uva tem sido atribuda pela maior
parte dos autores, incluindo Ellis et al. (1983), Gray & Meredith (1992) e Reisch
& Pratt (1996), dormncia da semente. Segundo os mesmos autores, a
estratificao (3 a 5C), por intervalos de 60 a 90 dias o mtodo mais
utilizado para a quebra de dormncia da semente da uva. Porm, este
tratamento raramente promove a germinao de todas as sementes, ficando a
mdia em torno de 50% (Ellis et al., 1983).
Portanto, a baixa germinao da semente de uva constitui-se,
atualmente, em um gargalo do processo de melhoramento gentico da videira,
o qual tem de ser compensado pela realizao de cruzamentos em um maior
nmero de inflorescncias, para a obteno de prognies com um nmero
mnimo de indivduos para posterior seleo.
Por outro lado, os recursos humanos e financeiros limitados dos
programas de pesquisa no Brasil e no mundo levam a necessidade de se
buscar tcnicas que aumentem a eficincia do processo de hibridao
controlada da videira. Uma das formas de se aumentar a sua eficincia
aumentando a germinao das sementes. Isto levaria, conseqentemente,
reduo do nmero de cruzamentos e dos custos em um programa de
melhoramento gentico.
O presente trabalho teve por objetivo estudar o efeito de diferentes
fatores relacionados com a quebra de dormncia da semente da videira.

2. REVISO DE LITERATURA

2.1. Origem e classificao botnica

A videira surgiu no perodo tercirio, provavelmente na atual
Groenlndia, de onde se dispersou seguindo duas direes principais, uma
amrico-asitica e outra eurasitica (Sousa , 1996).
Vestgios de sementes e de plen encontrados permitem afirmar que o
gnero Vitis estava difundido no final da era Terciria em todo o hemisfrio
norte, representado por duas categorias de sementes: umas rugosas ou
estriadas (Vitis ludwiggi) e outras lisas (Vitis teutonica) que representam os
antecessores das Muscadneas e das Euvitis atuais, respectivamente
(Alvarenga et al., 1998). Uma hiptese provvel considera que todas as
espcies desaparecidas ou atuais foram derivadas de um arqutipo cuja
existncia sugerida pelas modalidades das meioses dos hbridos
(Giovannini,1999; Pommer, 2002)
Durante a era glacial, a videira restringiu-se a reas que permitiam a
sobrevivncia da espcie, atualmente consideradas centros de origem: um
americano, um europeu e um asitico-ocidental. O centro asitico-ocidental
compreende as reas ao sul do mar Negro, na regio do Cucaso, enquanto
que o centro europeu corresponde atualmente s regies prximas ao mar
mediterrneo, de onde se originaram espcimes da Vitis vinifera caucasiana e

Vitis vinifera silvestres, respectivamente, consideradas as precursoras da Vitis

vinifera (Sousa, 1996; Alvarenga et al., 1998).
As videiras so arbustos sarmentosos e trepadores, pertencentes
classe das Dicotiledneas, ordem Rhamnales e famlia das Vitceas, que
compreende cerca de 11 gneros vivos e dois gneros fsseis e mais de 1000
espcies, amplamente distribudas nas zonas tropicais e subtropicais, e que se
estende at as regies temperadas (Giovannini, 1999; Pommer, 2002).
Os gneros Parthenocissus, Ampelopis e Cissus possuem espcies de
importncia ornamental, enquanto que o gnero Vitis de grande importncia
econmica e alimentar (Sousa, 1996).
A classificao feita por Gallet (1967), baseada na morfologia das
espcies e na origem agrupa o gnero Vitis em duas sees ou subgneros: o
Muscadinea que possue 40 cromossomos, gavinhas simples, crtex estriado e
aderente, bagas pouco aucaradas e ns sem diafragma, e o Euvitis com 38
cromossomos, gavinhas bifurcadas, crtex esfolivel e ns com diafragma.
(Alvarenga et al., 1998; Pommer, 2002).
De acordo com a classificao de Galet (1967), o subgnero
Muscadnea composto por trs espcies, V. rotundifolia, V. munsonisna e V.
popenoeil, sendo constitudo por videiras exclusivamente do sudeste dos
Estados Unidos e Mxico. (Sousa, 1996; Pommer, 2002).
O subgnero Euvitis composto por 11 sries: Candicansae, Labruscae,
Caribaea, Arizonae, Cinereae, Aestivalae, Cordifoliae, Flexuosae, Spinosae,
Ripariae e Viniferae. As estimativas do nmero de espcies do Euvitis variam
muito, dependendo da opinio taxonmica, prolongando-se de 28 a 43. Estas
so separadas em um grupo Americano de 18-28 espcies, em um grupo
Asitico de 10-15 espcies e um grupo Europeu ou Asitico central com uma
espcie (Vitis vinifera L.) (Alvarenga et al., 1998).
As espcies de cada subgnero Muscadinea (40 cromossomos) e
Euvitis (38 cromossomos) so interfrteis, sendo apenas parcialmente frteis
entre os subgneros, sendo difcil obteno de hbridos viveis, que
apresentam 39 cromossomos. As espcies da seo Euvitis so frteis entre si
e separadas apenas por barreiras geogrficas, fenolgicas e ecolgicas
(Reisch & Pratt, 1996).

A espcie Vitis vinfera, a uva do velho mundo ou europeu, originou mais

de 14000 cultivares, desenvolvendo hoje, em muitas das reas de uva no
mundo. Com a exceo das variedades muscadines, muitas uvas cultivadas
so variedades puras ou hbridos de V. vinifera. A domesticao de Vitis
vinifera e a conseqente constatao da sua grande diversidade morfolgica e
gentica, aliadas fcil propagao vegetativa, proporcionaram o surgimento
de elevado nmero de cultivares (Reisch & Pratt, 1996; Pommer, 2002).
Formas poliplides de videira aparecem espontaneamente em muitas
regies, o que leva a crer que se trata de uma estratgia de sobrevivncia da
espcie. Os ramos poliplides podem surgir de gemas laterais formadas nas
adjacncias dos ferimentos da poda, provavelmente pela duplicao somtica
em clulas meristemticas (Pommer, 2002).
Do ponto de vista do melhoramento, no mais de 10-15 espcies
representam importantes fontes de germoplasma. As espcies americanas da
seco Euvitis constituem a base para a obteno de todos os portas-enxertos
utilizados atualmente na viticultura, enquanto que as espcies de origem
asitica, principalmente a Vitis amurensis Ruprecht, desperta interesse para o
melhoramento por sua elevada resistncia ao frio (Alvarenga et al., 1998;
Giovannini, 1999).
A Vitis rotundifolia Michaux, a principal espcie da seco muscadnea,
bastante utilizada como fonte gentica de resistncia a patgenos. A Vitis
vinifera amplamente utilizada em trabalhos de melhoramento, sendo a
principal espcie para a elaborao de vinhos e seus derivados, para consumo
in natura e para a produo de passas (Giovannini, 1999).

2.2. Dormncia das sementes

Definem-se como dormentes as sementes que no germinam mesmo
quando submetidas a condies ambientais aparentemente favorveis, pois
apresentam alguma restrio interna germinao. Dessa forma, a dormncia
em sementes causada por um bloqueio situado na prpria semente (Cardoso,
2004).
O fenmeno da dormncia tido como um recurso pelo qual a natureza
distribui a germinao das sementes ao longo do tempo. A dormncia tambm
5

 considerada como um mecanismo que funciona como um sensor remoto, que

controla a germinao, de modo que esta venha a ocorrer, no somente
quando as condies ambientais sejam propcias para a prpria germinao,
mas tambm para o crescimento da planta (Carvalho & Nakagawa, 2000).
A dormncia de sementes pode ser devido imaturidade do embrio,
impermeabilidade do tegumento da semente gua ou gases, preveno do
desenvolvimento do embrio devido causas mecnicas, necessidades
especiais de luz ou temperatura ou ainda a presena de substncias inibidoras
da germinao (Mayer & Mayber, 1975).
Baseando-se na causa da incapacidade germinativa da semente viva
sob condies ambientais favorveis, a dormncia pode ser classificada em
diferentes categorias: impermeabilidade do tegumento gua e/ou oxignio,
embrio imaturo ou rudimentar, embrio dormente, restries mecnicas ou
resistncia ao crescimento do embrio e combinao de causas (Popinigis,
1977; Fraga, 1982; Ferri, 1986).
O mtodo a ser empregado na superao da dormncia depende da
origem. Em caso onde o motivo seja impermeabilidade e restries mecnicas
do tegumento gua e/ou oxignio, prticas como imerso em solventes (gua
quente, lcool, acetona e outros), escarificao mecnica ou qumica utilizando
cido sulfrico, resfriamento rpido, exposio alta temperatura, aumento da
tenso do oxignio e choque e impactos contra superfcies duras podero
resolver o problema. Presena de embrio dormente ou rudimentar so outras
situaes que levam as sementes dormncia, onde o emprego de
estratificao baixa temperatura e de substncias promotoras de germinao
podem levar ao fim do perodo de latncia (Fraga, 1982).
Walker (1970) props o conceito de balano entre os dois grupos de
compostos presentes nas sementes - inibidores e promotores. Se a semente
contm mais unidades inibidoras que promotoras, ento ela permanece
dormente e no germina, quando as unidades promotoras superam em nmero
as inibidoras, a germinao ocorre sob condies ambientais timas. A
superao da dormncia da semente acompanhada por pronunciadas
mudanas no equilbrio hormonal, envolvendo as giberelinas (Halinska et al.,
1987), as auxinas (Cme, 1981) e as citocininas (Zhang & Lespinasse, 1991).
Alm disto, as interaes entre estes fitorreguladores afetam a superao da
6

dormncia e a subseqente germinao das sementes (Dunlap & Morgan,

1977).
As sementes de uva geralmente germinam insuficientemente. A
germinao de sementes de uva muito pobre se influncias indutivas, tais
como estratificao, resfriamento, reguladores de crescimento no so
aplicados.
As sementes de videira tm um revestimento duro de espessura
varivel, rico em tanino (Terra et al.,1993; Reisch & Pratt, 1996), substncia
que de acordo com Carvalho & Nakagawa (2000), juntamente com a suberina,
lignina, cutina, pectina e outros derivados da quinona so exemplos de
compostos

presentes

no

tegumento

das

sementes

que

conferem

impermeabilidade gua.
A escarificao, tanto qumica como fsica, um mtodo empregado
para sobrepor os efeitos do envoltrio que interfere na absoro de gua, nas
trocas gasosas e que impede a sada de inibidores presentes no interior das
sementes (Cardoso, 2004).
De acordo com Amen (1987), o tegumento de sementes como as da
espcie Luzula spicata, por exemplo, exibe uma impermeabilidade parcial ao
oxignio e gua, e que um inibidor da germinao, possivelmente o cido
abscsico, est concentrado na regio micropilar dessas sementes. Dessa
forma, a principal maneira de aumentar a germinao a remoo da regio
da micrpila das sementes, o que permitiria a entrada do oxignio para o
interior, oxidando o agente inibidor, bem como, permitiria a sada da radcula
pela proximidade entre o corte realizado e o embrio da semente.
Chohan & Dhillon (1976) estudando as relaes entre diferentes
perodos de estratificao e a quantidade de substncias inibidoras tipo cido
abscsico, auxinas e giberelinas presentes em sementes de uva observaram
que existiu um aumento no percentual de germinao de sementes com a
extenso do perodo de estratificao acima de 60 dias, aps o qual ele
declinou. Esta germinao mxima de sementes aps o perodo de 60 dias de
estratificao coincide com a fase de maior atividade de giberelinas. Esses
resultados mostram que no foi apenas o nvel dos inibidores que controlou a
germinao das sementes, mas que tambm foi relativo ao nvel das
substncias promotoras de crescimento.
7

A exposio de sementes de uvas a baixas temperaturas por longos

perodos o mtodo recomendado como sendo o mais eficiente na quebra de
dormncia.
Celik et al. (2001) concluram que sementes de uvas facilmente
germinaram quando estratificadas sob baixas temperaturas ( 5 C) por vrios
meses. Quando a estratificao procede, giberelinas so sintetizadas ou
liberadas a partir da forma ligada.
A germinao satisfatria de sementes de uva geralmente ocorre
somente aps um perodo de maturao em aproximadamente 18 C seguida
por um perodo de estratificao fria de aproximadamente 5 C (Pandey &
Singh, 1988).
Alm do cido giberlico (GA3), vrios outros reguladores qumicos de
plantas, alm do cido giberlico, como a tiuria, cido indol actico, quinetina,
etefon e cianamida foram verificados para substituio completa ou parcial das
condies necessrias para melhorar a germinao das sementes, no entanto
foram pouco eficientes se comparados com o uso do GA3 associado com a
estratificao. Contudo, a utilizao dessa metodologia demanda tempo para o
incio do processo germinativo.

2.3. Germinao in vitro

A germinao in vitro um procedimento recomendado, por alguns
pesquisadores, pois permite uma disponibilidade estvel de luz e umidade ao
longo do perodo de durao dos experimentos, alm de permitir um controle
eficiente de contaminaes microbianas (Vzquez-Yanes & Orozco-Segovia,
1996).
Estudos de meios de cultura que favoream a germinao in vitro so
importantes tanto para maximizar a taxa de germinao, como para obter
plntulas axnicas, vigorosas e bem formadas.
Com o desenvolvimento de tcnicas de propagao in vitro, tornou-se
possvel, obter plntulas viveis em menos tempo. Isto pode ser obtido em
meios de cultura adequados que permitam a superao da dormncia, o
desenvolvimento embrionrio e a germinao (Nakayama et al., 1974).

A obteno de um protocolo para o estabelecimento in vitro de plantas

provenientes de sementes importante, pela obteno de plantas axnicas,
alm de proporcionar oportunidade de manuteno de bancos de germoplasma
in vitro (Passos et al., 2004).
Durante o cultivo in vitro, as solues de minerais nutrientes e acares
que compem os meios de cultura no exercem efeito puramente nutritivo, mas
tambm influenciam a atividade celular e a morfognese por meio das
propriedades osmticas (George, 1996). Diversas formulaes de meios
bsicos tm sido utilizadas no cultivo in vitro. No h uma formulao-padro,
mas o meio MS (Murashine & Skoog, 1962), original ou modificado, e contendo
diferentes doses de distintos fitorreguladores, tem sido utilizado com sucesso
para diversas espcies (Dantas et al., 2002). Com relao fonte de carbonos
(carboidratos), alguns autores consideram os carboidratos meramente uma
fonte de energia; enquanto que outros o consideram como principal fator de
controle da presso osmtica (Sousa-Lang & Pinto Junior, 1996).
Para a germinao de sementes, empregam-se usualmente meios de
cultivo no estado slido, pois alm de suporte adequado, proporciona a
umidade relativa constante e condies aerbicas adequadas para uma boa
germinao.

CAPTULO 1

GERMINAO IN VITRO DE SEMENTES DE UVA VITIS X LABRUSCANA

L.H. BAILEY CV. NIGARA ROSADA E VITIS VINIFERA L. CV. ITLIA

RESUMO

O presente trabalho foi desenvolvido no Departamento de Fitotecnia da

Universidade Federal de Viosa com o objetivo de verificar o efeito de
tratamentos fsicos e qumicos na porcentagem e velocidade de germinao,
em ambiente in vitro, de sementes de videira (Vitis sp.). Os tratamentos
qumicos consistiram da aplicao de cinco doses de cido giberlico: 0, 1000,
2000, 3000 e 4000 mg L-1 , as quais foram aplicadas s sementes inteiras
atravs da imerso em soluo aquosa de GA3 por 24 horas , antes do
tratamento fsico. Os tratamentos fsicos consistiram em cortes transversais
nas regies medianas e da micrpila das sementes. Foram usadas sementes
extradas de frutos maduros e selecionados das espcies Vitis x Labruscana
L.H. Bailey cv. nigara rosada e Vitis vinifera L. cv. itlia, provindos de
vinhedos comerciais, os quais foram adquiridos no comrcio local. As
sementes foram removidas, manualmente, das bagas e lavadas em gua
corrente

seca

sobre

papel

toalha

sob

condio

ambiente,

onde

permaneceram por uma noite. O meio de cultura utilizado foi o MS acrescido de

vitaminas de White (1951), 2,5 g L-1 carvo ativado, 30 g L-1 de sacarose, 100
10

mg L-1 de mio-inositol e gar Isofar 8 g L-1, distribudo em tubos de ensaio. O

experimento foi um fatorial do tipo 2 x 5 no delineamento em blocos ao acaso
com 4 repeties, sendo cada repetio constituda de uma grade com 25
tubos de ensaio cada, com 1 semente por tubo. O perodo de avaliao do
experimento foi de 28 dias. Atravs dos resultados, pode-se concluir que
tratamento fsico na semente foi essencial germinao, sendo o corte na
micrpila das sementes proporcionou a maior precocidade e porcentagem de
germinao. O cido giberlico teve efeito significativo na porcentagem de
germinao in vitro das sementes de uva, entretanto, somente a velocidade de
germinao da cv. Itlia foi aumentada com o uso do GA3, sendo o seu efeito
no significativo para a cultivar nigara rosada.

11

1. INTRODUO

A espcie Vitis vinifera, forma o agrupamento de uvas do velho mundo

ou europeu. a uva da antiguidade, sendo nativa do sul da Europa, na regio
entre os mares Negro e Cspio. As variedades dessa espcie so
responsveis pela maior parte da produo mundial. A introduo das
variedades itlia, cardinal, perlette e flame seedless nos pomares
comerciais de uva de mesa foi um grande avano na viticultura mundial durante
o sculo 20. As cultivares cardinal e itlia so cultivados, cada uma em mais
de 20. 000 ha por todo o mundo (Gray & Meredith, 1992; Alvarenga et al.,
1998).
No Brasil, a Itlia a mais importante cultivar de uvas finas no Brasil.
resultado do cruzamento entre os cultivares bicane x moscatel de hamburgo,
realizado na Europa no incio do sculo passado e foi introduzida no Brasil por
volta de 1930-1935 no estado de So Paulo (Terra et al, 1993; Souza, 1996).
A espcie Vitis x labruscana L.H. Bailey tem origem norte-americana. As
espcies labruscanas so de grande importncia na viticultura brasileira. Os
cultivares Nigara Rosada e Isabel so responsveis pela maior parte da
produo nacional de uva de mesa popular ou comum, do tipo de uvas para
chupar, alm de serem utilizadas na produo de sucos e de vinhos (Souza,
1996).

12

A cultivar nigara rosada surgiu de uma mutao somtica natural da

nigara branca, diferindo-se desta pela cor, o que a torna mais atraente ao
consumidor brasileiro.
De acordo com Pommer (2002), a uva itlia foi utilizada entre os anos
de 1978 a 1985, como genitor feminino em 11,2% de todos os cruzamentos
realizados pelo programa de melhoramento de videiras do Instituto Agronmico
de Campinas - IAC, ficando atrs apenas da nigara rosada, que foi usado em
24,2% das hibridaes controladas.
Hbridos complexos entre V. vinifera e vrias espcies americanas
nativas tambm foram desenvolvidos na Europa e formam uma srie de
hbridos tolerantes ou resistentes a doenas, que so principalmente, usadas
para produo de vinho (Gray & Meredith, 1992).
Atualmente, a propagao seminfera da uva no tem valor prtico nos
pomares comerciais. Entretanto, as sementes obtidas a partir da combinao
entre genitores, realizada em programas de melhoramento so materiais de
propagao muito importante para produzir novos cultivares de uvas, seja para
mesa, vinho, sucos ou porta-enxertos.
Contudo, as sementes das videiras apresentam baixa porcentagem de
germinao. Os principais mtodos empregados na quebra de dormncia
proporcionam uma taxa de germinao que em geral, no ultrapassam 50% de
germinao.
Ergenoglu et al. (1997) obtiveram porcentagens de germinao de 28,7
e 29,6%, considerados os melhores resultados, ao utilizarem a imerso por 24
horas em cido giberlico a 500 e 1000 mg L-1, respectivamente, como mtodo
de quebra de dormncia para sementes da uva itlia.
O estudo de novas alternativas que visem o aumento da eficincia do
processo germinativo desejvel, uma vez que as metodologias empregadas
atualmente apresentam uma baixa eficincia na quebra da dormncia, e para
tanto demandam um considervel perodo de tempo.
O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de tratamentos
qumicos e fsicos na quebra de dormncia de sementes de videira, cvs.
nigara rosada e itlia.

13

2. MATERIAIS E MTODOS

O presente trabalho foi realizado no Laboratrio de Cultura de Clulas e

Tecidos Vegetais do Departamento de Fitotecnia, da Universidade Federal de
Viosa, e foi constitudo de dois experimentos.
Nestes experimentos foram estudados os efeitos de dois fatores:
tratamentos fsicos e tratamentos qumicos.
Os tratamentos fsicos consistiram em um corte transversal na regio
mediana (Figura 1a) ou na eliminao da regio da micrpila da semente
(Figura 1b).
Os tratamentos qumicos consistiram da aplicao de cinco doses de
cido giberlico: 0, 1000, 2000, 3000 e 4000 mg L-1, as quais foram aplicadas
atravs da imerso em soluo aquosa de GA3 por 24 horas, antes do
tratamento fsico.
Os tratamentos fsicos foram aplicados s sementes, utilizando-se bisturi
e alicate de cutcula, sendo os mesmos realizados nas sementes aps o
perodo de embebio em GA3.
O perodo de avaliao do experimento foi de 28 dias, durante o qual
foram realizadas 4 leituras do nmero de sementes germinadas. A primeira
leitura ocorreu aos sete dias aps a inoculao, e as demais aos 14, 21 e 28
dias.

14

Figura 1 Tratamentos fsicos aplicados s sementes de uva, cvs. nigara

rosada e itlia. (a) corte na regio mediana; (b) corte na regio da
micrpila.

Antes da instalao dos experimentos definitivos, foram realizados

ensaios preliminares onde se utilizou ambiente in vitro para a germinao de
sementes inteiras e cortadas tratadas com cido giberlico. Foi verificado que
as sementes inteiras no germinaram durante o perodo de observao de 28
dias, o que levou a sua excluso nos experimentos.
O experimento foi um fatorial do tipo 2 x 5 no delineamento em blocos ao
acaso, com 4 repeties, sendo cada repetio constituda de uma grade com
25 tubos de ensaio cada, com 1 semente por tubo.
As sementes utilizadas neste trabalho foram extradas de frutos maduros
e selecionados, provenientes de vinhedos comerciais, os quais foram
adquiridos no comrcio local. As sementes foram removidas, manualmente,
das bagas, lavadas continuao em gua corrente e postas a secar sobre
papel toalha sob condies ambiente, onde permaneciam por uma noite.
Passado

esse

tempo,

as

sementes

foram

desinfestadas

posteriormente submetidas aos tratamentos com cido giberlico. O protocolo

de desinfestao consistiu na imerso em uma soluo de fungicida mais gua,
na proporo de 2,5% (p/v), por um perodo de 15 minutos, lcool etlico
hidratado 92,8 por um minuto, seguidas de hipoclorito de sdio a 5% por 40
minutos. As imerses, em cada uma das solues, eram seguidas de trs
lavagens com gua desionizada estril.
Aps o perodo de embebio nas solues de GA3, as sementes
inteiras foram retiradas das solues, submetidas aos tratamentos fsicos e
15

inoculadas em tubos de ensaio, contendo 10 mL de meio MS (Murashine &

Skoog, 1962), acrescido de vitaminas de White (1951), 2,5 g L-1 de carvo
ativado, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de mio-inositol e gar Isofar 8 g L-1.
A seguir foram inoculadas em sala de cultivo com temperatura
controlada de 27 2 C e fotoperodo de 16/8 luz/escuro e irradincia de 52
Mol m-2 s-1, fornecidas por tubos fluorescentes luz do dia e 40 W de potncia.
O perodo de incubao foi de 45 dias.
O meio utilizado teve o pH ajustado para 5,7 0,1 antes da distribuio
em tubos de ensaio, e ento autoclavado durante 20 minutos temperatura de
121 C.
Foram realizadas as seguintes avaliaes: porcentagens de germinao
e velocidade de germinao (VG), em dias. A velocidade de germinao foi
calculada atravs da frmula descrita por Vieira & Carvalho (1994).

VG =

(N1.G1) + (N2.G2) + ... + (Nn.Gn)

, onde:

G1 + G2 +...+Gn

G1, G2, ..., Gn = nmero de plntulas normais computadas na primeira,

segunda e ltima contagem;
N1, N2, ..., Nn = nmero de dias da inoculao primeira, na segunda e ltima
contagem.
Apenas

as

sementes

que

originaram

plntulas

normais

foram

consideradas na avaliao.
Os dados foram submetidos aos Testes de Liliefors e de Cochran para
verificao da normalidade e homogeneidade do erro.
Atendidas as essas exigncias, os dados foram submetidos anlise de
varincia, utilizando-se o teste F aos nveis de probabilidade de 1 e de 5%.
Para melhor anlise dos efeitos dos tratamentos fsicos e das doses de
cido giberlico nas variveis estudadas, convencionou-se avaliar apenas a
interao entre os fatores, independente da sua significncia.
Os fatores qualitativos tiveram suas mdias submetidas ao teste de
Tukey a 5% de probabilidade, enquanto que os quantitativos foram submetidos
anlise de regresso. (Pommer et al., 1988; Pinheiro et al. 2001).
16

3. RESULTADOS

3.1. Porcentagem de germinao das sementes

Baseados nos resultados da porcentagem de germinao (Quadro 1)
pode-se afirmar que o efeito do corte na micrpila das sementes da uva itlia
foi superior ao corte na metade para todas as concentraes, com exceo da
dosagem de 2000 mg L-1.

Quadro 1 Valores mdios da germinao das sementes de uva cv. itlia (%)
em funo dos tratamentos fsicos e qumicos

Concentraes de cido
giberlico (mg L-1)
0
1000
2000
3000
4000
CV(%)

Tratamento fsico
Corte na metade
Corte na micrpila
48,0 b
87,0 a
76,0 b
96,0 a
77,0 a
85,0 a
69,0 b
87,0 a
76,0 b
91,0 a
11,67

Mdias seguidas pela mesma letra na linha no diferem estatisticamente entre si pelo
teste de Tukey a 5% de probabilidade.

17

Ao estudar os efeitos das concentraes para os respectivos

tratamentos fsicos, no se verificou efeitos das concentraes para o
tratamento fsico corte na micrpila, sendo o valor y = 89,20% (Figura 2). J
para o tratamento corte na metade verificou-se o efeito das concentraes de
cido giberlico, tendo a mxima germinao de 76.8% encontrada para a
germinao de cido giberlico de 2118,09 mg L-1.

? Trao contnuo corte na metade das sementes

Trao pontilhado - corte a micrpila das sementes
y = 89,20

Germinao (%)

100
80
60
y = 48,52 + 1,215x 1/2 **- 0,0132*x
R2 = 0.90

40
20
0
0

1000

2000

3000

4000

Dose de cido giberlico (mg/L)

Figura 2 Estimativa da porcentagem de germinao das sementes de uva cv.

itlia em funo das doses de cido giberlico para os respectivos
tratamentos fsicos.

Para a cultivar nigara rosada, no houve diferena estatstica entre os

tratamentos fsicos nas concentraes utilizadas, com exceo das doses de 0
e 4000 mg L-1, sendo, com essas concentraes, o corte na micrpila superior
ao corte na metade (Quadro 2).
Para essa mesma cultivar e de acordo com a equao de regresso
referente ao efeito das dosagens de GA3 na porcentagem de germinao
dentro do tratamento corte na micrpila, ocorreu um aumento de 0,006 pontos
na porcentagem a cada incremento unitrio de GA3 utilizado (Figura 3).

18

Quadro 2 Valores mdios da germinao das sementes do cv. nigara

rosada (%) em funo dos tratamentos fsicos e qumicos

Concentraes de cido
giberlico (mg L-1)
0
1000
2000
3000
4000
CV(%)

Tratamento fsico
Corte na metade
Corte na micrpila
19,0 b
52,5 a
51,0 a
58,0 a
53,0 a
64,0 a
67,0 a
69,0 a
59,0 b
76,0 a
27,91

Mdias seguidas pela mesma letra na linha no diferem estatisticamente entre si pelo
teste de Tukey a de 5% de probabilidade.

? Trao contnuo corte na metade das sementes

Trao pontilhado - corte a micrpila das sementes
Germinao (%)

100
y = 52,1 + 0.006*x
r 2 = 0.99

80
60
40

y = 20,88 + 0.0290**x - 0.00000485*x 2

R2 = 0.93

20
0
0

1000

2000

3000

4000

Dose de cido giberlico (mg/L)

Figura 3 Estimativa da porcentagem de germinao das sementes de uva cv.

nigara rosada em funo das doses de cido giberlico para os
respectivos tratamentos fsicos.

O efeito do GA3 dentro do tratamento corte ao meio das sementes

permitiu uma germinao mxima de 64,23% associada concentrao de
2989,69 mg L -1 de GA3 (Figura 2).

19

3.2. Velocidade de germinao das sementes

A aplicao de diferentes tratamentos fsicos s sementes de uva cv.
Itlia no surtiu efeito significativo para as respectivas doses de GA3 (Quadro
3).

Quadro 3 Valores mdios da velocidade de germinao das sementes de uva

cv. itlia, em dias, em funo dos tratamentos fsicos e qumicos

Concentraes de cido
giberlico (mg L-1)
0
1000
2000
3000
4000
CV(%)

Tratamento fsico
Corte na metade
Corte na micrpila
10,90 a
8,86 a
10,69 a
9,31 a
10,35 a
8,18 a
9,75 a
7,07 a
9,81 a
7,00 a
15,93

Mdias seguidas pela mesma letra na linha no diferem estatisticamente entre si pelo
teste de Tukey a nvel de 5% de probabilidade.

Com relao ao efeito das doses de cido giberlico, dentro de

sementes cortadas ao meio, este, no foi significativo para a velocidade de
germinao. J para as sementes cortadas na micrpila, o efeito foi linear
(Figura 4). A equao da regresso indica que houve um decrscimo na
velocidade de germinao dessas sementes medida que havia um
incremento de cido giberlico.
Para

a cultivar nigara rosada, o efeito do corte da micrpila das

sementes foi superior em relao ao efeito do corte na metade para as doses

1000 e 2000 mg L-1 (Quadro 4).
J o efeito das doses do cido giberlico no foi significativo na
velocidade de germinao em nenhuma das circunstncias testadas (Figura
5).

20

V e loc idade de germinao (dias )

? Trao contnuo corte na metade das sementes

Trao pontilhado - corte a micrpila das sementes
14
12
10
8
6
4
2
0

y = 10.31

y = 9,28 - 0,000596*x
R2 = 0,76

1000

2000

3000

4000

Dose de cido giberlico (mg/L)

Figura 3 Estimativa da velocidade de germinao, em dias, das sementes de

uva cv. itlia em funo das doses de cido giberlico para os
respectivos tratamentos fsicos.

Quadro 4 Valores mdios da velocidade de germinao de sementes de uva

cv. nigara rosada, em dias, em funo dos tratamentos fsicos e
qumicos

Concentraes de cido
giberlico (mg L-1)
0
1000
2000
3000
4000
CV(%)

Tratamento fsico
Corte na metade
Corte na micrpila
11,06 a
9,68 a
12,49 a
9,16 b
13,51 a
9,80 b
11,35 a
9,93 a
12,25 a
8,05 a
21,89

Mdias seguidas pela mesma letra na linha no diferem estatisticamente entre si pelo
teste de Tukey a nvel de 5% de probabilidade.

21

Velocidade de germinao (dias)

?Trao contnuo corte na metade das sementes

Trao pontilhado - corte a micrpila das sementes
y = 12,13

14
12
10
8
6

y = 9,33

4
2
0
0

1000

2000

3000

4000

Dose de cido giberlico (mg/L)

Figura 4 Estimativas da velocidade de germinao das sementes do cv.

nigara rosada em funo da dose de cido giberlico para os
respectivos tratamentos fsicos.

22

4. DISCUSSO

No presente trabalho, onde se estudou a germinao in vitro de

sementes de uva Vitis vinifera cv.itlia e Vitis x labruscana cv.nigara rosada,
obteve-se dois resultados marcantes: o aumento significativo da porcentagem e
da velocidade de germinao. Estes resultados constituem uma contribuio
valiosa para o melhoramento da videira no Brasil e no mundo, que tem como
gargalo do processo a baixa porcentagem e o longo perodo requerido para a
germinao de suas sementes.
A porcentagem de germinao de sementes de uva cv.itlia e nigara
Rosada alcanou 96,0 e 76%, respectivamente (Quadros 1 e 2). Comparado
aos resultados registrados por Ergenoglu et al. (1997), que obtiveram 28,7% de
germinao das sementes de itlia, e Pommer et al. (1988) que conseguiram
41,53% de sementes germinadas do cv. nigara rosada, verificou-se que os
resultados obtidos so pelo menos 66,4 e 34,65% superiores aos citados,
respectivamente.
J a velocidade de germinao alcanada foi em mdia de 9,19 dias,
para o cv. itlia e de 10,73 dias para o cv. nigara rosada. Em mtodos
empregados atualmente, o tempo necessrio para a germinao maior que
os obtidos neste trabalho.
O ambiente de germinao in vitro de sementes de uva pode ter sido
fundamental para o resultado desta pesquisa, uma vez que a germinao in
vitro proporciona condies de estabilidade em relao disponibilidade de luz,
23

umidade, nutrientes, alm de permitir controle efetivo de contaminaes

microbianas e do potencial osmtico (Vzquez-Yanes & Orozco-Segovia,
1996).
Infelizmente, neste estudo, no h como discriminar o efeito do
ambiente dos efeitos dos tratamentos fsicos e qumicos aplicados, uma vez
que a germinao foi testada somente em ambiente in vitro. Dentro das
circunstncias deste trabalho, pode-se verificar que a aplicao de tratamentos
fsicos nas sementes de uva foi fundamental para a sua germinao, uma vez
que sementes no tratadas no germinaram dentro do perodo avaliado.
Egley (1989) citado por Perez (2004) relaciona a presena de ceras e
compostos graxos sobre a superfcie ou de uma camada de clulas abaixo da
cutcula formao de uma barreira contra a entrada de gua nas sementes,
inviabilizando a germinao. Dessa forma, a escarificao fsica realizada na
forma dos cortes nas regies mediana e micropilar das sementes das videiras
atua na desestruturao desses compostos e estruturas, expondo o embrio
gua e ao oxignio presentes no ambiente.
A ruptura do tegumento das sementes, mesmo sendo um processo
muitas vezes trabalhoso, produz aumentos substanciais na velocidade e na
porcentagem de germinao de sementes de espcies como o amendoim do
campo (Pterogyne nitens Tul.), por exemplo (Nassif & Perez,1997). O exemplo
apresentado por estes autores pode tambm ser aplicado s sementes de uva,
uma vez que as sementes inteiras utilizadas nos experimentos preliminares
no germinaram, diferentemente das que foram submetidas aos cortes.
Dentre os tratamentos fsicos aplicados semente de uva, o corte na
regio da micrpila apresentou os melhores resultados tanto para a
porcentagem e velocidade de germinao. Isto pode ser devido localizao
do embrio da videira, o que pode ter contribudo para a expulso do embrio
do interior da semente e justificar os resultados obtidos.
O efeito do cido giberlico na porcentagem de germinao de
sementes in vitro cvs.itlia e nigara rosada foi significativo na maior parte
dos tratamentos. Este efeito s no foi significativo para as sementes de uva
cv.itlia cortadas na regio da micrpila.
O modo de ao do cido giberlico, durante a quebra de dormncia das
sementes, est relacionado com o controle da sntese da -amilase na camada
24

de aleurona que leva hidrlise do amido do endosperma, disponibilizando-o

para o embrio (Mayer & Mayber, 1975).
Atualmente, os mtodos recomendados pela literatura na quebra da
dormncia das sementes de videiras so o uso combinado ou no da
estratificao, sob temperaturas de 3-5C pelo perodo de 60 a 90 dias e a
imerso por 24 horas das sementes inteiras em cido giberlico (GA3).
No entanto, esses mtodos proporcionam porcentagens de germinao
que raramente ultrapassam o valor de 50%, alm de demandar um
considervel perodo de tempo para a germinao. Este perodo corresponde o
tempo necessrio para a estratificao das sementes (60 a 90 dias) mais o
tempo para a germinao, que geralmente desuniforme podendo perdurara
por alguns meses.
Segundo Baskin & Baskin (1998) e Carvalho (1994) citados por Cardoso
(2004), a dormncia existente na espcie Vitis vinfera (L.) como exgena
qumica de natureza primria e causada pela ao de inibidores qumicos
presentes na semente e/ou no fruto, o que inibe o processo de germinao de
embries no-dormentes. Contudo, Ergenoglu et al. (1997), consideram que
existe mais de um fator envolvido na quebra de dormncia de sementes de
uva, alm dos mencionados pela literatura.
De acordo com Carvalho & Nakagawa (2000) os sistemas de entrada de
gua no interior das sementes e o de controle do equilbrio entre substncias
promotoras e inibidoras de crescimento parecem estar envolvidos no processo
de dormncia das sementes. Ainda de acordo com os autores, esses fatores
podem atuar de maneira integrada entre si.
Observou-se que a dormncia de sementes de videira no pode ser
atribuda exclusivamente ao equilbrio entre substncias promotoras e
inibidoras do processo germinativo, conforme apresentado por Cardoso (2004).
Pois, foi possvel obter germinao de sementes de uva atravs de
escarificao

mecnica,

independente

da

aplicao

de

substncias

promotoras.
Por outro lado, no se pode afirmar que a causa da dormncia de
sementes das videiras, aqui estudadas, seja do tipo fsica, uma vez que outros
autores obtiveram germinao atravs de outros mtodos, e no pelo uso dos

25

tratamentos fsicos. Alm do que, a aplicao de cido giberlico neste

experimento aumentou a germinao das sementes de uva.
Dessa forma, pode-se afirmar que existe mais de um fator determinante
envolvido na dormncia de sementes de uva e que os mesmos interagem entre
si. Estes fatores so de ordem fsica, como a barreira imposta pelo tegumento,
e fisiolgica, como o equilbrio entre as substncias inibidoras e promotoras
existente durante o estado de dormncia, como mencionado por Chohan &
Dhillon (1976).
Entretanto, o uso do corte na regio da micrpila em sementes de
videira pode vir a substituir de modo eficiente estratificao empregada na
superao da dormncia destas sementes, uma vez que estas germinaram
sem esse tratamento. Contudo, h necessidade de se verificar a possibilidade
do emprego deste mtodo de superao da dormncia em ambiente ex vitro.
No houve efeito das doses em cada tratamento fsico. Entretanto, o
tempo mdio de germinao das sementes cortadas na micrpila foi inferior ao
das sementes seccionadas pela metade.

26

5. CONCLUSES

Pode-se concluir que possvel de obter altas porcentagens de

germinao de sementes de uva in vitro, aplicando-se tratamentos fsicos e
qumicos s mesmas. O tratamento fsico na semente foi essencial
germinao. Destes, o corte na micrpila das sementes foi o que proporcionou
a maior precocidade e porcentagem de germinao.
O GA3 teve efeito significativo na porcentagem de germinao in vitro
das sementes de uva, entretanto, somente a velocidade de germinao do cv.
itlia foi aumentada com o uso deste fitorregulador, sendo o seu efeito no
significativo para a cultivar nigara rosada.

27

CAPTULO 2

GERMINAO IN VITRO E EX VITRO DE SEMENTES DE UVA VITIS X

LABRUSCANA L.H. BAILEY CV. NIGARA ROSADA

RESUMO

O presente trabalho foi desenvolvido no Laboratrio de Cultivo de

Clulas e Tecidos Vegetais do Departamento de Fitotecnia da Universidade
Federal de Viosa com o objetivo de verificar o efeito de trs fatores na
germinao de sementes de uva cv. nigara rosada (Vitis x Labruscana L.H.
Bailey). Estes fatores foram: tratamentos fsicos, tratamentos qumicos, e
ambiente de germinao. Os tratamentos fsicos consistiram em cortes
transversais nas regies medianas e da micrpila das sementes. Os
tratamentos qumicos foram aplicados mediante imerso das sementes inteiras
em soluo aquosa de cido giberlico (GA3) nas concentraes de 0 e 4000
mg L-1 e deixadas em repouso por 24 horas em ambiente sem luz, antes do
tratamento fsico. Os ambientes avaliados foram: in vitro e ex vitro. O substrato
utilizado nas condies in vitro foi o meio contendo os sais minerais de MS
(Murashine & Skoog, 1962), vitaminas de White (1951), 2,5 g L-1 carvo
ativado, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de mio-inositol e gar Isofar 8 g L-1,
distribudo em tubos de ensaio. O ambiente ex vitro consistiu em um aparelho
BOD. O substrato utilizado foi o Plantmax, distribudo em caixas de Gerbox
28

de dimenses 63 x 98 mm. Foram usados 50 g do substrato por recipiente. As

condies de temperatura, fotoperodo e intensidade luminosa do BOD foram
semelhantes s encontradas na sala de cultivo in vitro. As sementes usadas
foram extradas de frutos maduros, os quais foram adquiridos no comrcio
local. As sementes foram removidas, manualmente, das bagas e lavadas em
gua corrente e seca sobre papel toalha sob condio ambiente, onde
permaneceram por uma noite. O experimento foi um fatorial do tipo 2 x 2 x 2 no
delineamento em blocos ao acaso com 4 repeties, sendo cada repetio
constituda de um Gerbox, contendo 25 sementes ou uma grade com 25
tubos de ensaio, com 1 semente por tubo. Os parmetros avaliados foram
porcentagem e velocidade de germinao das sementes. O perodo de
avaliao do experimento foi de 28 dias. Os resultados indicaram que a
germinao das sementes ocorreu de maneira normal nos dois ambientes. O
corte na regio da micrpila das sementes foi o tratamento fsico que permitiu
maior porcentagem e precocidade de germinao. O cido giberlico, na
concentrao de 4000 mg L-1, influenciou de maneira significativa na
porcentagem de germinao, aumentando a taxa de sementes germinadas.

29

1. INTRODUO

Os ambientes mais comumente utilizados para germinao de sementes

de videiras tm sido os leitos levantados basicamente com solos ou as
bandejas de polietileno ou isopor formadas por clulas, ou ainda sistemas de
tubetes confeccionados para tal finalidade, sendo todos esses recipientes que
so enchidos com substratos apropriados e onde so depositadas uma ou
duas sementes. A germinao geralmente ocorre, mais satisfatoriamente, no
interior de um ripado, telado ou cada de vegetao..
A baixa qualidade das condies dos locais de germinao pode
comprometer toda uma seqncia de trabalho dentro de um programa de
melhoramento, que vai desde as atividades de polinizaes controladas at a
obteno de mudas bem formadas, passando pelo processo de quebra de
dormncia das sementes. Os substratos utilizados tm servidos, geralmente,
apenas como suporte para a fixao e crescimento da plntula, e
eventualmente podem ser fonte de inculo de patgenos, o que reduz a
germinao.
A dormncia das sementes de uva considerada um problema dentro
dos programas de melhoramento, e sua causa considerada de ordem
fisiolgica. No entanto, os mtodos atualmente utilizados para a superao do
problema no proporcionam porcentagens satisfatrias de germinao,
restringindo-se a resultados muitas vezes insuficientes.

30

A germinao in vitro um procedimento recomendado, por alguns

pesquisadores, para trabalhos de germinao com espcies selvagens ou que
apresentam dormncia, pois possibilita uma disponibilidade estvel de umidade
ao longo do perodo de durao dos experimentos, que em muitos casos so
relativamente longos; alm de permitir um controle eficiente de contaminaes
microbianas (Vzquez-Yanes& Orozco-Segovia, 1996).
A presena de uma concentrao maior ou menor de sais, ou outros
compostos osmoticamente ativos, no meio de germinao, de acordo com a
espcie e com o potencial osmtico de suas sementes, poder ser um fator
responsvel pela adequada hidratao destas. Conseqentemente, poder
viabilizar ou inviabilizar a ocorrncia do processo germinativo a partir de uma
embebio adequada ou no da semente (Dodd & Donovan, 1999).
A adio de meios de cultura com nutrientes orgnicos metabolizados
tambm pode contribuir para o aumento da germinao das sementes.
No captulo 1 foram obtidos altos ndices de germinao in vitro de
sementes de uva cvs. itlia e nigara rosada. Porm, no foi discriminado o
efeito do ambiente de germinao.. Caso os efeitos observados dos
tratamentos se repitam em ambiente ex vitro, a tcnica desenvolvida nos dois
trabalhos para quebra da dormncia de sementes de uva passaria a ter um
impacto maior nos diversos programas de melhoramento gentico da videira,
uma vez que a maior parte dos melhoristas no tem a sua disposio um
laboratrio de cultura de tecidos para a germinao das sementes.
Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do ambiente
(in vitro e ex vitro) e de tratamentos qumicos e fsicos na velocidade e
porcentagem de germinao de sementes de videira, cv. nigara rosada.

31

2. MATERIAL E MTODOS

O presente trabalho foi realizado no Laboratrio de Cultura de Clulas e

Tecidos Vegetais do Departamento de Fitotecnia, da Universidade Federal de
Viosa, e constituiu no estudo de trs fatores para aumentar a geminao de
sementes da videira Vitis x Labruscana L.H. Bailey cv. nigara rosada.
Estes fatores foram: ambiente de germinao (ex vitro e in vitro),
tratamentos fsicos (corte ao meio e corte da regio da micrpila - Figura 1) e
tratamentos qumicos (0 e 4000 mg L-1 de GA3).

Figura 1 Tratamentos fsicos aplicados s sementes de uva, cvs. nigara

rosada e itlia. (a) corte na regio mediana; (b) Corte na regio da
micrpila.
32

Por se verificar em ensaios preliminares que sementes inteiras no

germinaram durante o perodo de avaliao proposto, excluiu-se do
experimento as mesmas.
Os tratamentos qumicos foram aplicados mediante imerso das
sementes inteiras em soluo aquosa de cido giberlico (GA3) nas
concentraes descritas e deixadas em repouso por 24 horas em ambiente
sem luz, antes do tratamento fsico.
Os tratamentos fsicos foram aplicados s sementes, utilizando-se bisturi
e alicate de cutcula, sendo os mesmos realizados nas sementes aps o
perodo de embebio em GA3.
O ambiente in vitro caracterizava-se pela temperatura e fotoperodo da
sala de cultivo controlados em 27 C e 16/8h de luz/escuro, respectivamente.
A irradincia fornecida por tubos fluorescentes estava em torno de
52 Mol m-2 s-1 fornecidas por tubos fluorescentes com 40 W de potncia, luz
do dia. O substrato utilizado foi o meio contendo os sais minerais de MS
(Murashine & Skoog, 1962), vitaminas de White (1951), 2,5 g L-1 carvo
ativado, 30 g L-1 de sacarose, 100 mg L-1 de mio-inositol e gar Isofar 8 g L-1.
O meio utilizado teve o pH ajustado para 5,7 0,1 antes da distribuio nos
tubos de ensaio (24,5 x 150 mm), e ento autoclavado durante 20 minutos
temperatura de 121 C. Foram utilizados 10 mL de meio por tubo e uma
semente/tubo.
O ambiente ex vitro consistiu em um aparelho BOD. O substrato
utilizado foi o Plantmax, distribudo em caixas de Gerbox de dimenses 63 x
98 mm. Foram usados 50 g do substrato / recipiente. Aps a distribuio do
substrato, este foi autoclavado durante 30 minutos sob temperatura de 121 C.
As condies de temperatura, fotoperodo e irradincia do BOD foram
semelhantes s encontradas na sala de cultivo in vitro. Estas condies foram
garantidas atravs de aparelhos automtico do tipo timers, e foram
constantemente monitoradas.
O experimento foi um fatorial do tipo 2 x 2 x 2 no delineamento em
blocos ao acaso com 4 repeties, sendo cada repetio constituda de um
Gerbox , contendo 25 sementes ou uma grade com 25 tubos de ensaio cada.
As

sementes

utilizadas

neste

experimento

foram

extradas

selecionadas a partir de frutos maduros, provenientes de vinhedos comerciais e

33

adquiridos no comrcio local. Estas foram removidas, manualmente, das

bagas, lavadas em gua corrente continuao, postas a secar sobre papel
toalha, sob condio ambiente, onde permaneciam por uma noite.
Passado esse tempo, as sementes inteiras foram desinfestadas e
posteriormente, submetidas aos tratamentos com cido giberlico. O protocolo
de desinfestao consistiu na imerso em uma soluo de fungicida mais gua,
na proporo de 2,5% (p/v) por um perodo de 15 minutos, lcool etlico
hidratado 92,8 por um minuto, seguidas de hipoclorito de sdio a 5% por 40
minutos. As imerses em cada uma das solues eram seguidas de trs
enxaguaduras com gua desionizada estril.
Aps o perodo de embebio nas solues de GA3, as sementes
inteiras foram retiradas das solues, seccionadas e inoculadas nos
respectivos substratos.
O perodo de avaliao do experimento foi de 28 dias, durante o qual
foram realizadas 4 leituras do nmero de sementes germinadas. A primeira
leitura ocorreu aos sete dias aps a inoculao, e as demais aos 14, 21 e 28
dias.
Foram realizadas as seguintes avaliaes: percentagens de germinao
e velocidade de germinao (VG), em dias. A velocidade de germinao foi
calculada atravs da frmula descrita por Vieira & Carvalho (1994):

VG =

(N1.G1) + (N2.G2) + ... + (Nn.Gn)

, onde:

G1 + G2 +...+Gn

G1, G2, ..., Gn = nmero de plntulas normais computadas na primeira,

segunda e ltima contagem;
N1, N2, ..., Nn = nmero de dias de semeadura primeira, na segunda e ltima
contagem.
Apenas

as

sementes

que

originaram

plntulas

normais

foram

consideradas na avaliao.
Os dados foram submetidos aos testes de Liliefors e de Cochran para
verificao da normalidade e homogeneidade da varincia. Atendida a essas

34

exigncias, os dados foram submetidos anlise de varincia, utilizando-se o

teste F a nvel de probabilidade de 1 e 5%.
Para melhor anlise dos efeitos dos tratamentos fsicos e das doses de
cido giberlico nas variveis estudadas, convencionou-se avaliar a interao
entre os fatores, independente da sua significncia.
As mdias foram comparadas utilizando o teste de Tukey adotando o
nvel de 5% de probabilidade.

35

3. RESULTADOS

No presente trabalho observou-se a germinao de uva cultivar nigara

rosada, independente dos fatores estudados. Entretanto, a porcentagem e
velocidade de germinao, variaram em funo dos tratamentos aplicados.

3.1. Porcentagem de germinao das sementes

Os efeitos dos tratamentos testados sobre a porcentagem de
germinao das sementes podem ser observados nos Quadros 1 e 2.
A porcentagem de germinao em ambiente in vitro foi superior que a
obtida em ambiente ex vitro. Esta diferena foi mais pronunciada quando
comparadas sementes tratadas com GA3 e submetidas ao corte na regio da
micrpila. Neste caso, a diferena de germinao chega a 27% (Quadro 1).
Ainda com relao ao Quadro 1, pode-se observar que os efeitos dos
tratamentos fsicos diferiram entre si. Entretanto, a maior diferena entre os
tratamentos fsicos foi observada em ambiente in vitro, quando as sementes
no foram tratadas com GA3. Neste caso, as sementes cortadas na regio da
micrpila apresentaram porcentagem de germinao 33,5% superior s
cortadas ao meio.
A aplicao do GA3, tambm aumentou a porcentagem de germinao
de sementes de uva nigara rosada. (Quadro 1).

36

Quadro 1 Valores mdios da porcentagem de germinao das sementes de

uva cv. nigara rosada submetidas ao ambiente e aos tratamentos
fsicos e qumicos

Ambiente
In vitro
Ex vitro

0 mg L-1
Corte na
Corte na
metade
micrpila
19,0 b A
52,5 a A
26,0 a A
36,0 a A

4000 mg L-1
Corte na
Corte na
metade
micrpila
59,0 a A
77,0 a A
43,0 a A
50,0 a B

As mdias seguidas de pelo menos uma mesma letra minscula na linha e maiscula
na coluna para cada dose no difere entre si ao nvel de 5% de probabilidade pelo
teste Tukey.

O maior efeito do cido giberlico (GA3) foi observado em ambiente in

vitro, sendo mais pronunciado entre sementes cortadas ao meio. Neste caso, o
incremento na porcentagem de sementes germinadas de 40 pontos
percentuais (Quadro 2). Entre as sementes cortadas na regio da micrpila,
essa diferena foi 24,5 pontos percentuais (Quadro 2).

Quadro 2 Valores mdios da porcentagem de germinao das sementes de

uva cv. nigara rosada submetidas ao ambiente e aos tratamentos
fsicos e qumicos

Ambiente
In vitro
Ex vitro

Corte na metade
0 mg.L-1 4000 mg.L-1
19,0 b
59,0 a
26,0 a
43,0 a

Corte na micrpila
0 mg.L-1
4000 mg.L-1
52,5 b
77,0 a
36,0 a
50,0 a

As mdias seguidas da mesma letra na linha no difere entre si ao nvel de 5% de

probabilidade pelo teste Tukey.

3.2. Velocidade de germinao das sementes

No houve efeito significativo dos tratamentos fsicos e qumicos na
velocidade de germinao das sementes de uva nigara rosada (Quadro 3).
A velocidade de germinao das sementes da videira nigara rosada foi
superior em ambiente in vitro (Quadro 3).
37

Quadro 3 Valores mdios da velocidade de germinao, em dias, das

sementes de uva cv. nigara rosada submetidas ao ambiente e
aos tratamentos fsicos e qumicos

Ambiente
In vitro
Ex vitro

Corte na metade
0 mg L-1 4000 mg L-1
11,0 a A
12,00 a A
16,25 a A 16,50 a A

Corte na micrpila
0 mg L-1
4000 mg L-1
9,75 a B
8,00 a B
16,25 a A
16,25 a A

As mdias seguidas pela mesma letra minscula na linha e maiscula na coluna para
cada dose no difere entre si ao nvel de 5% de probabilidade pelo teste Tukey.

Esta diferena maior entre as sementes cortadas na regio da

micrpila, chegando 8,25 dias de diferena (Quadro 4).

Quadro 4 Valores mdios da velocidade de germinao, em dias, das

sementes de uva cv. nigara rosada submetidas ao ambiente e
aos tratamentos fsicos e qumicos

Ambiente
In vitro
Ex vitro

0 mg L-1
Corte na
Corte na
metade
micrpila
11,00 a A
9,75 a B
16,25 a A
16,25 a A

4000 mg L-1
Corte na
Corte na
metade
micrpila
12,0 a A
8,00 a B
16,50 a A
16,25 a A

As mdias seguidas de pela mesma letra minscula na linha e maiscula na coluna

para cada dose no difere entre si ao nvel de 5% de probabilidade pelo teste Tukey.

38

4. DISCUSSO

Neste estudo observou-se a porcentagem e velocidade de germinao

de sementes de uva nigara rosada em dois ambientes: in vitro e ex vitro. A
germinao foi observada em um perodo que variou entre 8 e 16,25 dias de
incubao.
Observou-se tambm que o ambiente in vitro no imprescindvel
germinao das sementes, e que apesar de apresentar menores porcentagens,
a germinao ocorreu normalmente em ambiente ex vitro, alcanando ndices
de at 50%, quando as sementes foram tratadas com 4000 mg L-1 de GA3 e
cortadas na regio da micrpila.
Em mtodos atualmente empregados por melhoristas, as sementes de
videira passam por um perodo de estratificao em ambiente frio (3-5 C) por
60 a 90 dias e so levadas a germinarem em ambiente externo. A germinao
ps-estratificao desuniforme, podendo perdurar por alguns meses. Sendo
assim, o tempo necessrio pode ultrapassar 120 dias. Ademais, h que se
somar a isto o fato deste processo proporcionar ndices de germinao,
geralmente inferiores a 50%.
De acordo com os resultados evidente o ganho no tempo e na
uniformidade de germinao das sementes de uva, que so parmetros
desejveis em um programa de melhoramento gentico. Em instituies que
contam com estrutura laboratorial, para a germinao in vitro, o ganho do
processo ainda maior, pois a germinao pode ser incrementada em 27%,
39

alcanando ndices de 77% (Quadro 2), e o tempo de germinao reduzido a

oito dias (Quadros 3 e 4) neste ambiente.
O ambiente in vitro proporciona condies de estabilidade em relao
disponibilidade de luz, umidade e nutrientes, alm de permitir o controle de
contaminaes e do potencial osmtico (Vzquez-Yanes & Orozco-Segovia,
1996). Estes aspectos contriburam para a melhor germinao das sementes
de uva.
O tratamento fsico foi imprescindvel para o xito da germinao de
sementes de uva, uma vez que sementes que no receberam este tratamento
no germinaram dentro do perodo de avaliao estabelecido. Dentre os
tratamentos fsicos testados, o corte na regio da micrpila das sementes
apresentou os melhores resultados. Este tratamento em combinao com a
aplicao de GA3 , proporcionou taxas de germinao que alcanaram 50% e
77%, respectivamente, nos ambientes in vitro e ex vitro (Quadro 1). Com base
nestes resultados, pode-se inferir que o corte na regio da micrpila da
semente de uva, pode substituir com vantagem a estratificao, praticada
atualmente para induzir a quebra da dormncia de sementes, uma vez que
estas sementes germinaram sem o uso deste tratamento.
A ruptura do tegumento das sementes, mesmo sendo um processo
muitas vezes trabalhoso, produz aumentos substanciais na velocidade e na
porcentagem de germinao de sementes de espcies, como o amendoim do
campo (Pterogyne nitens Tul.), por exemplo (Nassif e Perez,1997). O exemplo
apresentado por estes autores pode tambm ser aplicado s sementes de uva,
uma vez que as sementes inteiras utilizadas nos experimentos preliminares
no germinaram, diferentemente das que foram submetidas aos cortes.
Egley (1989) citado por Perez (2004) relaciona a presena de ceras e
compostos graxos sobre a superfcie ou de uma camada de clulas abaixo da
cutcula formao de uma barreira contra a entrada de gua nas sementes,
inviabilizando a germinao destas. Dessa forma, a escarificao fsica
realizada na forma dos cortes nas regies mediana e micropilar das sementes
das videiras atua na desestruturao desses compostos e estruturas, expondo
o embrio gua e ao oxignio presentes no ambiente.
O melhor desempenho do processo de germinao observado com o
corte da regio da micrpila pode ser devido localizao do embrio da
40

videira que est localizado prximo a esta regio, o que pode ter contribudo
para a expulso do embrio do interior da semente e justificar os resultados
obtidos aqui.
A aplicao de GA3 aumentou a porcentagem de germinao de
sementes de uva (Quadro 2). Entretanto, no foi significativo na velocidade de
germinao.
As giberelinas esto relacionadas com a regulao de vrios processos
fisiolgicos, entre os quais a germinao das sementes e a mobilizao das
reservas do endosperma (Taiz & Zeiger, 1998).
De acordo com Celik (2001), o cido giberlico indispensvel para a
quebra da dormncia e promover a germinao de sementes de videira. Na
literatura, a funo do cido giberlico na quebra de dormncia das sementes
est associada promoo de estmulos que induzem a sntese ou a ativao
das enzimas hidrolticas no endosperma, disponibilizando acares solveis
para o embrio (Mayer & Mayber, 1975; Amem, 1987).

41

5. CONCLUSES

O ambiente in vitro no imprescindvel ao processo de germinao

proposto no 1o Captulo, podendo este ser realizado em ambiente ex vitro.
O tratamento fsico fundamental para a superao da dormncia das
sementes de uva e pode substituir com vantagens a estratificao, utilizada
atualmente para este fim. Contudo, o corte na regio da micrpila das
sementes o tratamento mais recomendado para este processo, por
apresentar os melhores resultados.
O cido giberlico na concentrao de 4000 mg L-1 influenciou de
maneira significativa na porcentagem de germinao, aumentando a taxa de
sementes germinadas.

42

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46

APNDICES

47

Tabela 1 Constituio qumica do meio MS (Murashine & Skoog, 1962)

mg L-1

Macro elementos
NH4NO3
CaCl2.2H2O
MgSO4.7H2O
KNO3
KH2PO4

1650
440
370
1900
170
mg L-1
6,2
0,025
0,025
22,3
0,83
0,25
8,6
37,3
27,8

Micro elementos
H3BO3
CoCl2.6H2O
CuSO4.5H2O
MnSO4.4H2O
KI
Na2MoO4.2H2O
ZnSO4.4H2O
Na2.EDTA
FeSO4.7H2O
Adit. orgnicos

g L-1
30

Aminocidos

mg L-1
2,0
1000
100

Fitorreguladores

mg L-1

Vitaminas

mg L-1
0,5
0,5
0,1

Sacarose

Glicina
Edamina
Myo-inositol

ANA
AIA
IBA
2,4-D
BAP
Niacina
Piridoxina
Tiamina
Adit. Complexos
gua de coco
g L-1
10

Solidificante
gar

48

CAPTULO 1

Quadro 1 Resumo da anlise de varincia referente germinao das

sementes do cultivar itlia (Vitis vinifera L.)

Fonte de Variao
Bloco
Tratamentos Fsicos
Doses
Tratamentos fsicos x Doses
Resduo
Mdia geral
Coeficiente de variao (%)

G.L.
3
1
4
4
27

Quadrado Mdio
54,40
4000,00**
412,60**
267,00*
85,51
79,200
11,676

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; * Significativo a 5% de probabilidade

pelo teste F.

Quadro 2 Resumo da anlise de varincia referente germinao das

sementes do cultivar nigara rosada (Vitis x Labruscana L.H.
Bailey)

Fonte de Variao
Bloco
Tratamentos Fsicos
Doses
Tratamentos fsicos x Doses
Resduo
Mdia geral
Coeficiente de variao (%)

G.L.
3
1
4
4
27

Quadrado Mdio
240,36
2044,90**
1404,10**
298,90NS
252,66
56,95
27,91

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; NS F no significativo a nvel 5%

de probabilidade.

49

Quadro 3 Resumo da anlise de varincia relativo velocidade de

germinao das sementes do cultivar itlia (Vitis vinifera L.)

Fonte de Variao
Bloco
Tratamentos Fsicos
Doses
Tratamentos fsicos x Doses
Resduo
Mdia geral
Coeficiente de variao (%)

G.L.
3
1
4
4
27

Quadrado Mdio
3,43
49,33 **
4,77NS
0,64 NS
2,14
9,190
15,932

* * Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; NS F no significativo a nvel 5%

de probabilidade.

Quadro 4 Resumo da anlise de varincia relativo velocidade de

germinao das sementes do cultivar nigara rosada (Vitis x
Labruscana L.H. Bailey)

Fonte de Variao
Bloco
Tratamentos Fsicos
Doses
Tratamentos fsicos x Doses
Resduo
Mdia geral
Coeficiente de variao (%)

G.L.
3
1
4
4
27

Quadrado Mdio
6,85
78,45 **
2,66 NS
3,48 NS
5,52
10,73
21,89

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; NS F no significativo a nvel 5%

de probabilidade

50

CAPTULO 2
Quadro 1 Resumo da anlise de varincia relativo porcentagem de
germinao das sementes do cultivar nigara rosada (Vitis x
Labruscana L.H. Bailey)

Fonte de Variao
Bloco
Ambiente
Dose
Dose x ambiente
Tratamento fsico
Tratamento fsico x ambiente
Tratamento fsico x dose
Tratamento fsico x dose x ambiente
Resduo
Mdia Geral
Coeficiente de variao (%)

GL
3
1
1
1
1
1
1
1
21

Quadrado Mdio
201,79
1378,12**
4560,12**
561,12**
2346,12**
595,12**
171,12 NS
171,12 NS
78,12 NS
45,31
16,83

** Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; NS F no significativo a nvel 5%

de probabilidade.

Quadro 2 Resumo da anlise de varincia relativo porcentagem de

germinao das sementes do cultivar nigara rosada (Vitis x
Labruscana L.H. Bailey)

Fonte de Variao
Bloco
Ambiente
Dose
Dose x ambiente
Tratamento fsico
Tratamento fsico x ambiente
Tratamento fsico x dose
Tratamento fsico x dose x ambiente
Resduo
Mdia Geral
Coeficiente de variao (%)

GL
3
1
1
1
1
1
1
1
21

Quadrado Mdio
0,25
300,12**
0,125 NS
0,50NS
15,12NS
12,50NS
4,50NS
3,12NS
4,53NS
13,25
16,07

**Significativo a 1% de probabilidade pelo teste F; NS F no significativo a nvel 5%

de probabilidade.

51