OBSERVACIN DE PREPARACIONES EN FRESCO

O LIGERAMENTE MODIFICADAS
Objetivos
1. Emplear el microscopio ptico con objetivos secos.
2. Aprender a realizar preparaciones en fresco.
3. Observar las caractersticas morfolgicas de distintos microorganismos.

Para poder observar microorganismos vivos y sus caractersticas (morfologa,

color, tamao real, tipos de movimiento que realiza, etc.) sin que se generen artefactos
que distorsionen la realidad, se realiza un examen en fresco. ste mtodo nos permite
observar al microscopio el microorganismo en las condiciones ms parecidas a su
medio natural, y por tanto, ms cercanas a la realidad.
Se pueden observar:
- Algas:
o Pluricelulares: las ms abundantes son las verdes, son como su
nombre indica, grupos de clulas, pero podemos distinguir estas
clulas por separado.
o Microalgas: van de cuatro en cuatro, girando.
Unicelulares: por ejemplo la Euglena. Esta alga va muy deprisa. Se
pueden ver vacuolas en su interior. Suele ser ms grande que los
paramecios.
- Hongos: levaduras. Son ms grandes que las bacterias pero parecidas
morfolgicamente
- Protozoos: Se ven de muchos tipos. La mayora son mviles. Se mueven
por flagelos, speudpodos o clios.
- Bacterias: son muy pequeas.

Procedimiento general de la preparacin en fresco:

1 Tomar una pequea cantidad de muestra con el asa de nicron, en
condiciones aspticas. Y se deposita sobre un portaobjetos perfectamente
limpio.
2 Disponer un cubreobjetos, aunque no es imprescindible, sobre la gota
procurando que no queden burbujas; el mejor sistema para evitar las burbujas
es tomar el cubre y acercarlo por un borde a la gota, establecer contacto entre
el borde del cubreobjetos y la gota y despus despacio deslizar el cubreobjetos
sobre la gota.

3 Observar al microscopio y con el diafragma un poco cerrado. Situar la

preparacin sobre la platina del microscopio de manera que la muestra se situ sobre
el hueco de luz.

PREPARACIONES QUE SE DEBEN REALIZAR

- Muestra 1: Levadura de pan ( Saccharomyces cerevisiae) : La muestra debe
diluirse con suero salino. Seguir el procedimiento general de preparacin en fresco.
Observar a 40, 100 y 400 aumentos. Deben observarse algunas clulas en proceso
de gemacin.
- Muestra 2: Cultivo mixto de protozoos algas y bacterias:.Seguir el procedimiento
general de preparacin en fresco.
Observar a 40, 100 y 400 aumentos. Deben intentar identificarse los protozoos
observados y las algas (si se detectan) con ayuda de las fotocopias que se adjuntan.
- Muestra 3: Hongos miceliformes.
a) Preparacin hmeda: poner un trozo de micelio no apelmazado sobre una gota de
suero salino depositada sobre un portaobjetos
b) Preparacin con KOH: Poner una pequea cantidad de micelio sobre un
portaobjetos, depositar encima una gota de KOH 10% y esperar 3 minutos. Cubrir con
un cubreobjetos y observar en microscopio a 40, 100 y 400 aumentos. Se deben
intentar identificar los gneros de hongos observados con ayuda de las fotocopias que
se adjuntan.

A tener en cuenta en la confeccin del informe de esta prctica

En el fundamento de la prctica debe exponerse de modo escueto pero claro el
fundamento del microscopio ptico con objetivos secos y el montaje de preparaciones
en fresco
Una vez realizados los montajes indicados y observados al microscopio, describir los
aspectos ms relevantes de la morfologa de los microorganismos observados.
Realizar dibujos simples y claros (En el dibujo cientfico y tcnico lo valioso es la
transmisin de informacin, siendo de escaso valor los aspectos artsticos)

Observacin de mohos al microscopio

Microscopio ptico de campo claro