1.

Introduccin
El sistema inmunitario es el encargado de producir las clulas responsables de la
defensa de nuestro organismo ante la invasin de agentes patgenos que pueden
ocasionar enfermedades y alteraciones en nuestra salud
En la sangre se encuentran los leucocitos o glbulos blancos que son las clulas
mviles del sistema inmunitario. Todos ellos difieren en cuanto a su funcin y
morfologa. Los leucocitos no desempean sus funciones cuando se encuentran en
sangre, sino cuando abandonan sta y entran a los tejidos linfoides o a las zonas
donde hay inflamacin intensa. En este sentido, la sangre es un medio de transporte,
que le permite a las clulas sanguneas recircular entre los diferentes tejidos del
cuerpo. Normalmente en sangre se encuentran cinco tipos de leucocitos: monocitos,
linfocitos, neutrfilos, eosinfilos y basfilos. Adems de estas clulas, se encuentran
presentes las plaquetas, que son fragmentos citoplasmticos de los megacariocitos
que se asientan en la mdula sea.
Los leucocitos se estudian en preparaciones coloreadas por dos razones: a fin de
determinar la apariencia normal o anormal de las clulas y sus porcentajes relativos en
el diagnstico de ciertas enfermedades. El recuento de eritocitos y eucocitos es uno de
los mtodos de rutina

2. Objetivos:
1. Adiestrarse en la preparacin y tincin de frotis sanguneo.
2. Describir la morfologa de los diferentes tipos de clulas sanguneas observadas en
el microscopio ptico
3. Identificar los tipos de clulas que conforman nuestro sistema inmunitario.
4. Interpretar los resultados y su relacin con el diagnostico clnico.
3. Materiales
3.1.
Material biolgico:
- Muestra de sangre (1 gota)
3.2.
Equipos e instrumentos
- Portaobjetos limpios.
- Lanceta estril
- Gasa
3.3.
Colorantes y reactivos
- etanol (para limpiar las lminas)
- metanol (para fijar la muestra de sangre)
- Colorante Giensa

Buffer Sorensen

Para colorear 2 lminas con frotis sanguneo, mezcle en un recipiente de vidrio, 9 ml

de Buffer Sorensen pH 7.2 y 1ml de colorante Giensa. Tiempo de coloracin 20
minutos.
PROCEDIMIENTO
1. Lavar 2 portaobjetos. Si es necesario lmpielos con etanol/ter utilizando un trozo de
gasa.

2. Ubique el sitio de toma de la muestra en la parte lateral del dedo medio o anular de
la mano izquierda donde es menos sensible que en la punta. Limpie el sitio donde se
tomar la muestra de sangre, utilizando una gasa empapada con etanol y luego
squelo con gasa. Con una lanceta con un movimiento firme y rpido realizar una
puncin en la zona seleccionada del dedo.

3. Limpie la primera gota de sangre con gasa.Con la mano derecha tome un

portaobjeto y sostngalo por los bordes. Con la manoizquierda presione el dedo y deje
fluir una gota pequea de sangre (2mm de dimetro). Coloque una gota de sangre
sobre el portaobjeto en el centro de uno de los extremos de la lmina.

4. Coloque un segundo portaobjeto apoyado sobre el otro por delante de la gota de

sangre en ngulo de 45, y se hace retroceder hasta que el borde coincida con la
gota, que se extender por capilaridad por todo el borde. Antes de que la sangre se
extienda por los extremos del porta, se hace deslizar por el porta hacia delante con
movimiento firme y rpido, elevando la mano derecha antes de que el porta que se
desliza llegue al final.
Mientras mayor sea el ngulo que forman las dos lminas, mayor ser el espesor de la
capa de clulas.
5. Deje secar la muestra durante 5 minutos. Fije con metanol (1 minuto). Deje secar
nuevamente (10 minutos). Coloree con colorante Giensa (20 minutos).
6. colocar una gato de aceite de inmersin por el centro de la lamina y observar en el
microscopio.

Conclusiones:
1.- para obtener una buena muestra de sangre (una gota) se debe realizar
correctamente la puncin en la parte lateral del dedo medio tal como se indica en el

procedimiento, adems la realizacin del frotis requiere de una prctica sucesiva para
obtener una extensin de la muestra apropiada para la tincin.
2.- las clulas sanguneas tienen diferentes formas, que van desde discoidales como
los globulos rojos y ameboides como los globulos blancos que varian en su tipologa
de acuerdo a la afinidad a los colorantes acidos y bsicos, la presencia o no de
granulos y la forma de su nucleo.
3.- para poder identificar y diferenciar a los diferentes tipos de globulos blancos que
conforman nuestro sistema inmunitario es necesario conocer las siguientes
caracteristicas:
Neutrfilos: Ncleo azul oscuro. Citoplasma rosado con granulaciones rojo violeta.
Eosinfilos: Ncleo azul. Citoplasma azul, con grnulos rojo anaranjado.
Basfilos: Ncleo azul oscuro. Grnulos prpura casi negros.
Linfocitos: Ncleo violeta. Citoplasma azul celeste.
Monocitos: Ncleo laxo violeta. Citoplasma azul celeste.
4.- los resultados del conteo leucocitario de acuerdo a la formula son importantes al
momento de emitir un diagnstico clnico por tal razn habr que conocer los valores
normales y las alteraciones de determinado tipo de glbulo blanco.