OBTENCION DE LA LECITINA Y COLESTEROL A PARTIR DE LA YEMA DEL

HUEVO
Lpidos son aquellas sustancias orgnicas extrables de tejidos animales o
vegetales, por medio de solventes orgnicos como ter, cloroformo, tetracloruro de
carbono, benceno, etc.
Los lpidos, como grupo, son muy insolubles en agua, bioqumicamente hablando,
son sustancias de suma importancia, en primer lugar porque constituyen formas
de almacenamiento de energa, y en el segundo lugar, porque forman partes de
estructuras celulares, principalmente de todo tipo de membrana biolgica.
Los lpidos extrados de material biolgico representan una gran variedad de
molculas, estructuralmente diferentes, pero que comparten la propiedad de ser
solubles en solventes orgnicos, llamados por eso, solventes de las grasas. Entre
los lpidos existen molculas no polares, como los triacilglicroles, o triglicridos, y
molculas polares como los Fosfoglicridos, o fosfolpidos, y los esfingolpidos, y
molculas de tipo Terpenoides los esteroides, los terpenos y algunas vitaminas.
No existe clasificacin de lpidos, aceptada universalmente, pero una de las ms
comunes es la que los divide en: cidos grasos, triacilglicroles, Fosfoglicridos y
lpidos no fosforilados, siendo esta ltima una categora heterognea que incluye:
Ganglisidos, Cerebrsidos, sulfolpidos, proteolpidos, esteroides, terpenos y
eicosanoides o prostaglandinas.
Es muy difcil, si no imposible, el separar cuantitativamente, por extraccin con
solventes orgnicos, a todos los lpidos de un tejido, por ejemplo, con etanol
ter, o con etanol - ter cloroformo. Algunos lpidos son ms solubles en un
solvente y otros, en otro.
Entre los Fosfoglicridos ms comunes, tenemos a los tres derivados del cido
fosfatdico, a saber: fosfatidil colina se les conoce con el nombre genrico de
lecitinas. Existen varias lecitinas dependiendo de los cidos grasos que contengan
esterificados en los carbonos alfa y beta del glicerol.
Las lecitinas son molculas polares que existen en forma de sales internas o
zwiteriones, ya que contienen la carga negativa del cido fosfrico, y la carga
positiva del grupo trimetilamino de la colina. El pH isoelctrico de una lecitina pura
es generalmente de 6.7 o un poco mayor, lo cual concuerda con su estructura
anftera.
Las lecitinas puras son sustancias blancas de aspecto grasoso, que cuando se
exponen a la luz y al aire toman una coloracin caf, debido a la autoxidacin y
descomposicin. Son solubles en los solventes ordinarios de las grasas, excepto
en acetona. Esta propiedad se emplea para su aislamiento. Son higroscpicas y
se mezclan bien con el agua formando soluciones coloidales nebulosas.

Preparacin de lecitina purificada son suficientemente efectivas en bajar la tensin

superficial de soluciones acuosas, propiedad que se aumenta cuando la lecitina
esta combinada o absorbida a protenas y carbohidratos, en cuyo caso las
lecitinas son muy activas y constituyen agentes emulsificantes excelentes.
La identificacin de la lecitina puede hacerse por saponificacin, para separar los
cidos grasos, hidrolisis para separar la colina y despus probar para presencia de
colina.
En el reino animal, el esteroide ms abundante es el colesterol.
El colesterol no se precipita del ter por la acetona, y como es insaponificable,
puede extraerse con ter, despus del tratamiento con hidrxido de potasio.
El colesterol generalmente, cristaliza como placas rmbicas blancas. No tiene ni
olor ni sabor. Si se expone a la luz y al aire, se oxida lentamente, formando una
mezcla de productos que bajan su punto de fusin y cambian sus reacciones de
solubilidad. Es insoluble en agua, cidos y lcalis. Es un poco soluble en
soluciones jabonosas y todava ms solubles en soluciones de cidos biliares. Es
muy soluble en ter, benceno, cloroformo, ter de petrleo, disulfuro de carbono y
acetona. Sus principales propiedades qumicas se relacionan con su grupo
hidroxilo secundario y su doble ligadura.
Despus de la saponificacin de un triacilglicerol, los productos son solubles en
agua e insolubles en ter. Una sustancia insaponificable, como el colesterol, es
aquella que mantiene su insolubilidad en agua y su solubilidad en ter despus del
tratamiento alcalino. El conjunto de sustancias que se comportan as, se llaman
genricamente: fraccin insaponificable de las grasas.
A su vez se llamar fraccin saponificable, al conjunto de sustancias que despus
del tratamiento de saponificacin se vuelven solubles en agua e insolubles en ter.
Esta ltima fraccin contiene principalmente jabones y esteres de cidos grasos,
mientras que la fraccin insaponificable la componen principalmente alcoholes de
alto peso molecular, esteroides y terpenos.

PRACTICA # 1:EXTRACCIN DE LECITINA Y COLESTEROL

OBJETIVOS

Extraer la lecitina (Fosfaditilcolina) de la yema de huevo. Aplicar las diferentes

tcnicas de extraccin (compresin).

Extraer y caracterizar los fosfolpidos, colesterol y triglicridos presentes en la
yema de huevo.
Marco terico
En la yema del huevo se encuentran las lecitinas en gran abundancia y adems, el
colesterol, en suficiente cantidad sirve para hacer su aislamiento y deteccin fcil.
Separada la yema, se extraen los lpidos con solventes orgnicos.
Tal vez, la mejor mezcla de solventes es etanol ter al 2:1. Las lecitinas, una vez
extradas por los solventes orgnicos, se precipitan fcilmente agregando acetona.
Una vez precipitadas las lecitinas en solucin queda el colesterol junto con otras
sustancias de menor concentracin. Si entonces se hace una saponificacin se
separa la fraccin saponificable y queda la fraccin insaponificable, donde viene el
colesterol. El colesterol entonces se precipita en forma cristalina, agregando agua.
Reaccin de Liebermann-Burchard
La demostracin de la presencia de colesterol se hace por medio de la reaccin de
Lierbermann-Burchard, que es especfica para esteroles con instauracin en los
anillos A, B o C.
Materiales

Matraz Erlen Meyer con tapa de 250mL.

Probetas de 50 y 100mL.
Embudo.
Vaso de precipitado Beacker de 250mL
Pipetas de 2mL, 5mL y 10mL
Baguetas
Esptula
Papel filtro
Pinzas grandes

Material biolgico

Huevo de gallina

Reactivos

Acetona
Etanol
ter

Equipos:

Bao mara
Cocina elctrica

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Paso 1.- Tener el rea de trabajo despejado y limpio para evitar contaminacin de
los reactivos.
Paso 2.- Limpiamos el huevo y separamos la yema de la clara, y la llevamos a un
Matraz Erlenmeyer de 250mL
Paso 3.- En una probeta colocamos 50 mL de alcohol etlico y 25 mL de ter, lo
vaciamos en el matraz Erlenmeyer con tapa y lo llevamos a agitacin hasta
romper la yema. Luego lo dejamos reposar por 10 min.
Paso 4.- Luego de esperar que repose y se forme una masa media cuajada
empezamos a filtrar. Humedecemos el papel filtro con un poco de etanol y para
acelerar el filtrado procedemos a realizar comprensiones para obtener con menos
tiempo el producto; ya que las partculas formadas son grandes para que permita
el paso fluido de la solucin formada por ter y alcohol etlico.
Paso 5.- El material obtenido en el papel filtro, lo pasamos a otro matraz
Erlenmeyer para aadir una mezcla de 10mL de etanol y 5mL de ter. Agitamos,
filtramos a comprensin y dejamos reposar por 5min.
Paso 6.- Combinamos los dos filtrados y volvemos a filtrar y descartamos el
residuo.
Paso 7.- Secamos el producto obtenido a bao maria a 37C y lo retiramos hasta
obtener una masa seca, donde ya no se encuentre la presencia de los solventes
usados en la practicas, nos percatamos por la ausencia de su aroma.
Paso 8.- En el Erlenmeyer donde tenemos el producto, le adicionamos 10mL de
ter; en nuestro caso solo adicionamos 5mL por obtener menor cantidad. Luego lo
pasamos a un beacker que contenga en nuestro caso 15mL de acetona hasta
obtener la lecitina formada en pequeas partculas pequeas de forma circular.

Paso 9.- Filtramos y separamos la lecitina para ser envasados en un recipiente

que se someter a refrigeracin.