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Quantitative determination of the protein concentration is one of the most common tests in
biochemistry laboratories. Originally measurement was evaluated by estimating the total amount
of protein nitrogen and considering that this element represents about 16% of the protein weight.
These methods were very extensive so that today it has calorimetric and colorimetric methods
which enabled overcome these drawbacks. UV-visible spectrophotometry is an analytical
technique for determining the concentration of a compound in solution. It is based on the
molecules absorb electromagnetic radiation and in turn the amount of light absorbed depends
linearly on the concentration. In this laboratory determining the concentration of proteins present
in a solution by the method of Lawry using the spectrophotometer is performed.
Keywords:
absorbance,
transmittance,
colorimetry,
Lawry,
Folin.
OBJETIVOS
Determinar la concentracin de albumina presente en una solucin por el mtodo de Lawry
Objetivos especficos
Conocer la incidencia del reactivo Folin en la reaccin qumica.
Familiarizar los conceptos de absorbancia y transmitancia.
Representar la relacin Absorbancia- concentracin en una curva de calibracin
MARCO TEORICO
MATERIALES
Espectrofotmetro.
Planca calefactora
Baln Aforado.
Pipeta graduada de 10ml.
Beacker de 50 ml.
Agitador de vidrio.
Baln aforado
Albumina
Reactivo de Folin
Reactivo de cobre
Pasta
Albmina
Es una protena que se encuentra en gran
abundancia en el plasma sanguneo, siendo
la principal protena de la sangre. Es
sintetizada en el Muest Absorba Mas Volum %P/ RESULTADOS
hgado. Son
el ra
ncia
a
en
V
En el presente laboratorio
75%
de
las
(ml)
se ha utilizado el mtodo
protenas
del Blanco
0
25
0 de Lowry usando reactivo
suero y el 11% de
M1
0,229
30
25 120 de
Folin-Ciocalteau
las
protenas
M2
0,345
60
25 240 usando un blanco de
totales, solubles
0,624 120
25 480
en presencia de M3
Tabla 1: Concentracin y absorbancia de los patrones.
SO4Na2 al 20%. Hay 3 tipos: lactoglobulina,
lactoalbmina y seroalbminas.
Funciones de la albmina
-Mantenimiento de la presin onctica.
-Transporte de hormonas tiroideas.
-Transporte de hormonas liposolubles.
-Transporte de cidos grasos libres. (Esto
es, no esterificados)
-Transporte de bilirrubina no conjugada.
-Transporte de muchos frmacos y drogas.
-Unin competitiva con iones de calcio.
-Control del pH.
-Funciona como un transportador de la
sangre y lo contiene el plasma
Curva de calibracin
0.8
0.6
Absorbancia
f(x) = 0x + 0.04
R = 0.98
0.4
0.2
0
100
200
300
400
500
600
Concentracion (P/V)
Absorbancia
ANLISIS DE RESULTADOS
Linear (Absorbancia)