Sta-58 - Monitoramento Da Atenuação Natural de Solos Artificialmente Contaminados Com Óleo Diesel B0 e B4

S RIE T ECNOLOGIA A MBIENTAL
Monitoramento da Atenuao Natural de Solos

Artificialmente Contaminados com leo Diesel B0 e
B4
PRESIDNCIA DA REPBLICA
Luiz Incio Lula da Silva

Jos Alencar Gomes da Silva
Vice-Presidente
MINISTRIO DA CINCIA E TECNOLOGIA
Srgio Machado Rezende
Ministro da Cincia e Tecnologia
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Secretrio-Executivo
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Coordenadora de Planejamento, Acompanhamento e Avaliao

ISSN 0103-7374
ISBN 978-85-61121-69-3
STA-58
Monitoramento da Atenuao Natural

de Solos Artificialmente Contaminados
com leo Diesel B0 e B4
Claudia Affonso Barros
Qumica, M.Sc. em Tecnologia de Processos Qumicos e
Bioqumicos, EQ / UFRJ
Engenheira Qumica, D.Sc., Coordenadora de
Planejamento, Acompanhamento e Avaliao,
CETEM/MCT
Claudia Duarte da Cunha
Engenheira Qumica, D.Sc., Pesquisadora do
CETEM/MCT
Eliana Flvia Camporese Srvulo
Engenheira Qumica, D.Sc., Professora Adjunta da
Escola de Qumica da UFRJ
CETEM/MCT
2010

Luis Gonzaga Santos Sobral
Editor
Subeditora
CONSELHO EDITORIAL
Marisa Bezerra de M. Monte (CETEM), Paulo Sergio M. Soares (CETEM),
Saulo Rodrigues P. Filho (CETEM), Silvia Gonalves Egler (CETEM),
Vicente Paulo de Souza (CETEM), Antonio Carlos Augusto da Costa
(UERJ), Ftima Maria Zanon Zotin (UERJ), Jorge Rubio (UFRGS), Jos
Ribeiro Aires (CENPES), Luis Enrique Snches (EPUSP), Virginia
Sampaio Ciminelli (UFMG).
A Srie Tecnologia Ambiental divulga trabalhos relacionados ao setor
minerometalrgico, nas reas de tratamento e recuperao ambiental,
que tenham sido desenvolvidos, ao menos em parte, no CETEM.
O contedo desse trabalho de responsabilidade exclusiva do(s)
autor(es).
Thatyana Pimentel Rodrigo de Freitas
Coordenao Editorial
Vera Lcia Esprito Santo Souza
Programao Visual
Cludia Affonso Barros
Editorao Eletrnica
Andrezza Milheiro da Silva
Reviso
Barros, Cludia Affonso
Monitoramento da atenuao natural de solos artificialmente
contaminados com leo diesel B0 e B4 / Cludia Affonso de
Barros et al. __ Rio de Janeiro: CETEM/MCT, 2010.
68p.:il. (Srie Tecnologia Ambiental, 58)
1. leo diesel. 2. Solo. I. Centro de Tecnologia Mineral.
II. Rizzo, Andrea C. de Lima. III. Cunha, Claudia Duarte. IV.
Srvulo, Eliana F. Camporese. V. Ttulo. VI. Srie.
CDD 661.81
SUMRIO
RESUMO _________________________________________ 7
ABSTRACT _______________________________________ 8
1 | INTRODUO __________________________________ 9
1.1 | Solos ____________________________________ 12
1.2. | O petrleo e seu derivado: diesel _____________ 14
1.3 | Processos biolgicos aplicados na remediao de
solos contaminados com petrleo e derivados ______ 20
2 | OBJETIVO ____________________________________ 23
3 | PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL ________________ 24
3.1 | Solo _____________________________________ 24
3.2 | leo diesel ________________________________ 26
3.3 | Detalhamento dos experimentos preliminares __ 27
3.4 | Anlises quantitativas ______________________ 29
4 | RESULTADOS E DISCUSSES ___________________ 35
4.1 | Caracterizao do solo ______________________ 35
4.2 | Efeito do biodiesel na biodegradao de leo diesel
em solo franco-argiloso _________________________ 38
4.3 | Avaliao da toxicidade dos solos contaminados
aps atenuao natural _________________________ 54
5 | CONCLUSES _________________________________ 57
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ___________________ 58
RESUMO
O presente trabalho teve como objetivo monitorar o processo
de atenuao natural (AN) de um solo franco-argiloso, caracterstico do Estado do Rio de Janeiro, artificialmente contaminado
com 10% (m/m) de leo diesel puro (B0) ou leo diesel comercial (B4). A prvia caracterizao fsico-quimica, qumica e microbiolgica do solo virgem, revelou a presena de 101 NMP/ g
solo de bactrias degradadoras de hidrocarbonetos (hidrocarbonoclsticas (BHC)). O solo no tinha histrico de contaminao por hidrocarbonetos (HC), era cido e apresentava baixa
fertilidade. Os ensaios de AN foram realizados em sistemas
reacionais, confeccionados em PVC, com 20 cm de dimetro e
60 cm de comprimento, contendo 18 kg de solo, visando monitorar a degradao dos HC em diferentes profundidades (20,
40 e 60 cm), por 20, 40 e 60 dias. Os resultados obtidos indicaram que, mesmo as caractersticas do solo no sendo ideais
para a atividade microbiana, a degradao do diesel B0 foi de
14% em 60 dias. Na presena de biodiesel, ou seja, solo contaminado com B4, no foi possvel definir a degradao de HC,
embora a populao de BHC tenha se mantido ativa. A anlise
dos solos oriundos da NA, mediante ensaios ecotoxicolgicos
para sementes de Lycopersicon esculentum (tomate), apontou
a presena de compostos residuais txicos, sendo o solo contaminado com B4 mais txico do que o contaminado com B0.
Palavras-chave
Monitoramento, atenuao natural, solo contaminado, leo
diesel.
ABSTRACT
This study aimed at monitoring the natural attenuation (NA)
process of a sandy-clay, characteristic from Rio de Janeiro,
artificially contaminated with 10% (w/w) of pure diesel oil (B0),
or commercial diesel oil (B4). The previous physical-chemical,
chemical and microbiological analysis of the virgin soil revealed
the presence of 101 MPN / g of hydrocarbon degrading bacteria
(hydrocarbonoclastic (BHC)). There was no contamination
history by hydrocarbons (HC) in the soil. It was acid and there
was low fertility in it. The NA tests were performed on PVC
reaction systems, 20 cm in diameter and 60 cm long, containing
18 kg of soil, for monitoring the HC degradation at different
depths (20, 40, 60 cm) for 20, 40 and 60 days. The results
indicated that even the characteristics of the soil were not ideal
for microbial activity, the diesel B0 degradation was 14% in 60
days. In the presence of biodiesel, which means soil contaminated
with B4, it was not possible to define the degradation of HC,
although the population of BHC has remained active. The analysis
of soil from the NA, via ecotoxicological tests for seeds of
Lycopersicon esculentum (tomato), showed the presence of
residual toxic compounds; the B4-contaminated soil being more
toxic than the B0-contaminated one.
Keywords
Monitoring, natural attenuation, contaminated soil, diesel oil.
Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...
1 | INTRODUO
Os problemas de poluio e degradao ambiental agravaramse com o desenvolvimento dos centros urbanos e, sobretudo, a
partir da Revoluo Industrial, por conta do aumento da gerao de resduos slidos, efluentes lquidos e compostos volteis (LEITE, 1995; DIAS, 2000).
Poluentes ambientais so definidos por Hutzinger e Verkamp
(1981) e Brasil (1981) como compostos qumicos de origem
sinttica ou natural, que so liberados no ambiente, atravs de
atividades antropognicas, causando efeitos indesejveis aos
seres humanos podendo, ainda, comprometer a biota, tornando
invivel a utilizao dos recursos para fins comerciais, industriais e recreativos. Na maior parte das vezes, o efeito indesejvel
um efeito txico, isto , um efeito prejudicial vida (DIAS,
2000). Tm importncia no s nos aspectos ambientais e de
sade pblica, mas tambm, e principalmente, na ocorrncia
de episdios crticos de poluio de mbito mundial, tais como
a questo das reas contaminadas (GNTHER, 2005). Como
consequncia, crescente a preocupao dos especialistas e
das autoridades, o que tem motivado a busca por medidas
preventivas da contaminao do ambiente ou remediar as
reas j afetadas.
A intensa movimentao de leo cru e derivados pode, ocasionalmente, causar a poluio tanto de solos quanto de cursos
ou corpos de gua. Por exemplo, 40 milhes de litros de leo e
derivados, aproximadamente, foram, acidentalmente, lanados
no meio ambiente entre 1975 e 2004, impactando solos, rios,
manguezais e praias, no Brasil (BAPTISTA, 2007).
No caso dos solos, o impacto por hidrocarbonetos, que pode
afetar, inclusive, os recursos hdricos subterrneos, depende
10
Barros, C. A. et al.
no s do tipo de contaminante, como tambm do tipo de solo

envolvido (i.e., argiloso, siltoso ou arenoso) (BAPTISTA, 2007).
A crescente contaminao de solos e guas subterrneas por
hidrocarbonetos derivados de petrleo (leo diesel), tem sido
destaque nas ltimas dcadas, principalmente em funo da
frequncia com que os episdios de contaminao so verificados e da gravidade com que o meio ambiente afetado.
Embora os grandes vazamentos acidentais de petrleo sejam
preocupantes e ocupem grande espao na mdia, estima-se
que a principal fonte de contaminao por leo diesel seja devido a pequenos vazamentos de combustvel ocorridos em
reservatrios, a falhas mecnicas ou humanas nas operaes
de descarga e, tambm, a acidentes durante o transporte
desse produto qumico, visto que o modal rodovirio tem sido o
mais empregado (BAPTISTA, 2007).
Em virtude de grande parte da frota mundial de veculos automotores utilizar o leo diesel como combustvel, existem vrios
postos de servio, terminais de distribuio e refinarias, espalhados por todo o territrio nacional. Nesses casos, alm da
poluio do solo e das guas subterrneas, existe, ainda, a
preocupao da contaminao atmosfrica e do risco de exploses e incndios. Os principais grupos de contaminantes encontrados nas reas contaminadas foram: solventes aromticos, combustveis lquidos, hidrocarbonetos policclicos aromticos (HPAs), metais e solventes halogenados. Entre os combustveis lquidos, destacam-se os derivados de petrleo: leo
diesel e gasolina (CETESB, 2010).
Nas ltimas dcadas, por causa da escassez do petrleo e do
aumento crescente da concentrao de monxido de carbono
no ar atmosfrico nos grandes centros urbanos, alguns pases,
11
entre eles o Brasil, passaram a buscar fontes alternativas de

combustveis, como o etanol e o biodiesel. Segundo a norma
da Agncia Nacional de Petrleo (ANP), desde julho de 2009, o
percentual de biodiesel adicionado ao diesel passou de 3%
para 4%. A adio de biodiesel ao diesel pode diminuir os impactos ambientais negativos decorrentes de vazamentos, considerando que o aditivo por ser de origem vegetal ou animal
pode favorecer a degradao desse combustvel quando da
ao microbiana (MENEGHETTI, 2007).
Os hidrocarbonetos constituintes do leo diesel apresentam
baixa densidade e, em sua grande maioria, no so solveis
em gua ou, pelo menos, quando em seu estado original, no
se verifica a sua solubilizao em aquferos. A forma como os
hidrocarbonetos interagem com o fluxo fretico, com os argilominerais e com a matria orgnica (MO) presente no solo
complexa do ponto de vista fsico e qumico. Alm disso, so
susceptveis de sofrer aes biolgicas que resultam em alterao do comportamento do contaminante ao longo do tempo
(MENEGHETTI, 2007).
Atualmente, uma grande variedade de processos fsico-qumicos tem sido utilizada na remoo de hidrocarbonetos de petrleo e derivados. No entanto, a maioria dos processos utilizados para remediao de reas contaminadas envolve, normalmente, longos perodos de tempo, espao fsico e custos elevados (MENEGHETTI, 2007).
Dentre as tecnologias viveis, tem-se a biorremediao, que
um processo que utiliza agentes biolgicos, tais como microorganismos e plantas, para remover ou neutralizar contaminantes (CHAPELLE, 2000 apud MARTINS et al., 2003).
12
Pelo processo de biorremediao, a degradao do poluente

se d pela ao dos micro-organismos presentes (atenuao
natural) ou inoculados no solo contaminado (bioaumento), podendo ocorrer naturalmente ou sendo estimulada pela adio
de nutrientes, tais como, nitrognio, fsforo entre outros, e oxignio, contribuindo para o desenvolvimento sustentvel do
meio ambiente. O processo de biodegradao baseado na
capacidade de populaes microbianas de modificar ou decompor determinados poluentes, como os hidrocarbonetos de
petrleo ou de seus derivados, utilizando-os como fonte de
carbono e energia para suas funes vitais (DIAS, 2000;
OLIVEIRA, 2008b).
1.1 | Solos
Os solos so corpos naturais com evoluo a centenas de milhares de anos, que compem a cobertura pedolgica que reveste as reas emersas da Terra. Por sua vez, a cobertura
constituda por uma camada de material resultante de inmeras
combinaes de fatores (clima, organismos, tempo, relevo) e
de processos (remoo, adio, transporte e transformao)
que atuam sobre os materiais de origem (rochas, sedimentos,
depsitos orgnicos), o que permite a variedade de solos encontrados (PEDRON et al., 2004).
Segundo a Comisso das Comunidades Europias (2002), o
solo desempenha uma grande variedade de funes vitais de
carter ambiental, ecolgico, social e econmico. So funes
do solo: sustentao da vida e do habitat para pessoas, animais, plantas e outros organismos, manuteno do ciclo da
gua e dos nutrientes, proteo da gua subterrnea, manuteno do patrimnio histrico, natural e cultural, conservao
13
das reservas minerais e de matrias-prima, produo de alimentos e manuteno da atividade scio-econmica.

Portanto, a proteo do solo e a limitao dos processos de
degradao deste recurso so, reconhecidamente, imprescindveis para a sustentabilidade do desenvolvimento, sendo esta
necessidade reconhecida internacionalmente (RODRIGUES e
DUARTE, 2003).
O solo um habitat de natureza heterognea complexa e dinmica, onde organismos com metabolismos dspares convivem lado a lado. Diversos fatores fsicos e qumicos atuam
simultaneamente determinando as condies ambientais, devido interao de diversos fatores de natureza qumica, fsica
e biolgica (MOREIRA e SIQUEIRA, 2006). Por isso, pode-se
estabelecer que o solo formado por diferentes micro-habitats
onde ocorrem relaes de dependncia essenciais para a sobrevivncia das populaes nele presentes, proporcionando,
assim, condies ideais para a ampla biodiversidade presente
em solos.
A poluio do solo ocorre pela introduo de elementos ou
substncias que possam afetar a atividade dos componentes
biticos desse ecossistema, e, por conseguinte, comprometer
sua funcionalidade e sustentabilidade (BRAGA et al., 2002).
Portanto, a poluio do solo est relacionada atividade antropognica e dependente da concentrao de resduos incorporados quer acidentalmente quer intencionalmente.
A introduo de contaminantes no solo pode resultar na perda
de algumas ou de vrias de suas funes e provocar, ainda, a
contaminao da gua subterrnea. A ocorrncia de contaminantes no solo, originados por vrias fontes, acima de certos
nveis, provoca mltiplas consequncias negativas para a ca-
14
deia alimentar, para a sade pblica e para os diversos ecossistemas e recursos naturais (RODRIGUES e DUARTE, 2003).
Um dos poluentes que merece destaque o petrleo e seus
derivados, pelo alto teor de contaminantes com drsticos efeitos no meio ambiente e na sade.
De acordo com a legislao ambiental, certos padres e indicadores de qualidade do solo devem ser respeitados para controle de um determinado ambiente (BRAGA et al., 2002). Para
as inmeras reas j degradadas, ser necessrio adotar formas de tratamento diferenciadas, dependendo do caso. Em
particular, o tratamento depender do tipo de resduo e das
caractersticas da prpria rea.
As tecnologias disponveis para o tratamento de resduos em
solos so diversas e, muitas vezes, precisam ser utilizadas em
conjunto para que se possa enfrentar o problema da multicontaminao por componentes txicos que no podem ser
tratados de uma nica forma. O tratamento desses resduos
pode incluir mtodos qumicos, fsicos e biolgicos (DIAS,
2000).
1.2. | O petrleo e seu derivado: diesel

Petrleo significa leo da pedra, por ser encontrado, normalmente, impregnado em determinadas rochas porosas denominadas de arenito, dispostas em camadas geolgicas sedimentares (FONSECA, 1992 apud OLIVEIRA, 2008b). Nele, o carbono e o hidrognio esto presentes em grandes percentagens, o que comprova ser o petrleo formado principalmente
por hidrocarbonetos. Entretanto, alm de compostos orgnicos,
o petrleo apresenta, tambm, outros elementos, considerados
15
impurezas, que podem aparecer em toda sua faixa de ebulio,

mas tendem a convergir para as fraes mais pesadas. As
impurezas so: enxofre, o elemento mais abundantemente,
encontrado no petrleo na concentrao mdia de 0,65% (m/v);
nitrognio, 0,17% (m/v); oxignio e metais que podem variar de
1 a 1.200 ppm, sendo a composio e as concentraes dependentes do reservatrio de origem.
O petrleo constitudo por uma mistura complexa de centenas de hidrocarbonetos e a separao se d, mormalmente,
em fraes de acordo com a faixa de ebulio dos compostos.
(THOMAS et al., 2001)
O leo diesel a frao do petrleo composta, principalmente,
por hidrocarbonetos alifticos, com PE (ponto de ebulio) na
faixa de 250 a 400C. desse combustvel que depende a frota
de parte dos motores exploso (Ciclo Diesel), tais como nibus, navios, locomotivas, tratores, entre outros, e tambm, tem
uso na gerao de calor (CARDOSO, 2004).
Contudo, a presena de uma mistura complexa de hidrocarbonetos, tais como compostos volteis, alcanos (de baixa massa
molecular) e naftalenos, o torna potencialmente fitotxico.
Crafts e Reiber (1948) apud Adam e Duncan (2002) verificaram
que a fitotoxicidade aumenta na seguinte ordem: gasolina,
querosene, diesel e leos pesados. Isto indica que as fraes
leves do combustvel causam menos danos s plantas do que
as fraes mais pesadas, por serem menos txicas ou por sua
maior volatilidade, o que faz com que a sua perda no solo seja
mais rpida. A frao voltil do diesel comercial corresponde de
5 a 10% (v/v) do total na maioria dos casos.
Existem tipos especficos de leo diesel, cuja caracterstica
principal reside no teor de enxofre em sua composio. Os
16
cinco principais tipos so: leo diesel tipo metropolitano, interior, martimo e padro (CARDOSO, 2004), como mostra a
Tabela 1.2.
Tabela 1.2. Especificaes de diferentes tipos de leo diesel comercializados no Brasil.
Teor de
enxofre (%)
Disponibilidade / Utilizao
Metropolitano
0,05 (ano 2005)
RJ, SP, MG, SE, BA, PR, RS e ES.
Metropolitano
0,005 (ano 2009)
PA, CE, PE, Cidades: Rio de Janeiro,

So Paulo, Curitiba, Belo Horizonte,
Salvador, Porto Alegre.
Interior
0,18
Distribudo nas demais cidades do

pas, possuindo corante vermelho.
Martimo
1,0
Utilizao em motores de embarcaes

martimas
Padro
Utilizado para testes em motores a

diesel.
Tipo
Fonte: ANP e Site Petrobras (2010).
A preocupao quanto liberao do enxofre para a atmosfera

devida, principalmente, chuva cida, que provoca danos
sade dos seres vivos, agricultura, e s construes (prdios,
dutos de superfcie, e outras estruturas metlicas etc.). Por
isso, a importncia de ser feita a reduo de enxofre no leo
diesel, principalmente no Brasil, onde h consumo de grandes
volumes desse combustvel, em funo de grande parte destinada ao transporte estar concentrado em rodovias.
17
Nos dias atuais, a Petrobras j disponibiliza o diesel S50

(0,005% de enxofre) para as frotas de nibus urbanos de algumas cidades brasileiras (Tabela 1.2), o que representa uma
reduo de dez vezes na emisso de material particulado para
o meio ambiente, em relao ao diesel S500 (0,05% de enxofre). A distribuio atende ao cronograma estabelecido pela
Petrobras, Associao Nacional dos Fabricantes de Veculos
Automotores (ANFAVEA), Companhia Ambiental do Estado de
So Paulo (CETESB), Instituto Brasileiro de meio Ambiente
(IBAMA), Ministrio do Meio Ambiente (MMA), Agncia Nacional
do petrleo (ANP), e Instituto do Meio Ambiente (IMA) junto ao
Ministrio Pblico Federal, definido sob orientao do Ministrio
do Meio Ambiente (site: Dirio do Comrcio, 2010).
1.2.1 | Combustvel diesel com adio de biodiesel

O biodiesel um combustvel produzido por transesterificao
de leos vegetais (leo de soja, caroo de algodo, palma,
amendoim, colza/canola, girassol, aafro, coco etc.), gorduras
animais (usualmente sebo), ou leos de descarte (leos usados
em frituras) com um lcool. A escolha da matria-prima para a
produo de biodiesel depende, sobretudo, dos fatores geogrficos e climticos onde ser feita a sua produo.
O biodiesel totalmente compatvel com o diesel de

petrleo em praticamente todas as suas propriedades, principalmente no nmero de cetano (indicativo
adimensional da qualidade de ignio de um combustvel diesel), o que permite a substituio, total
ou parcial, do diesel originado do petrleo em diferentes equipamentos (NEWMAN, 1993). Comparativamente ao combustvel fssil, o biodiesel ainda
18
apresenta vrias vantagens adicionais, como: derivado de matrias-primas renovveis de ocorrncia

como soja, girassol, canola, mamona, milho etc., reduzindo, assim, a dependncia sobre os derivados
de petrleo e preservando as suas ltimas reservas;
biodegradvel, ou seja, o biodiesel, ou metil steres de cidos graxos, so compostos de baixa complexidade estrutural, compostos, predominantemente, de 8 diferentes cidos graxos (C16-18), incluindo oleato, palmitato, estearato, linoleato, mirstico,
laureato e linolenato;
Gera reduo nas principais emisses dos gases de

exausto (com exceo de xidos de nitrognio,
NOx);
Possui um alto ponto de fulgor, o que lhe confere

manuseio e armazenamento mais seguros.
Alm disso, o biodiesel apresenta excelente lubricidade, fato

que vem ganhando importncia se comparado ao petrodiesel
de baixo teor de enxofre, cuja lubricidade parcialmente perdida durante o processo de produo. A lubricidade ideal do
petrocombustvel pode ser restaurada com a adio de baixos
teores de biodiesel (1-2%) (KNOTHE et al., 2006), j que este
miscvel com diesel de petrleo em qualquer proporo. Em
muitos pases, esta propriedade levou ao uso de misturas binrias diesel/biodiesel, ao invs do diesel puro. Essas caracterizadas misturas so designadas por acrnimos, como B20 que
representa misturas de 20% de biodiesel no diesel de petrleo.
Em outros pases, existem combustveis diesel contendo
altos teores de biodiesel, chegando substituio total, como
o caso da Alemanha
www.biodiesel.gov.br).
(OWSIANIAK
19
2009;
site
Inicialmente, segundo Brasil (2005), foi fixado em 5% (v/v) o

percentual mnimo obrigatrio de adio de biodiesel ao leo
diesel comercializado ao consumidor final, em qualquer parte
do territrio nacional, com prazo mximo de aplicao em
2013. Porm, a partir de julho de 2009, foi estabelecido pela
ANP a adio de 4% de biodiesel ao diesel, e a partir de janeiro
de 2010 j foi adotado o percentual de 5%. A adio de biodiesel (5%) ao diesel gerou uma economia de mais de 900 milhes de reais em importao de diesel por ano. Adicionalmente, cada litro da nova mistura representa um decrscimo de
3% na emisso de CO2 para a atmosfera, correspondendo a
uma diminuio anual de mais de 1,2 milhes de toneladas
dessas emisses, alm de reduzir, tambm, a emisso de material particulado.
1.2.2 | Biodegradao dos combustveis

O leo diesel, puramente originado do petrleo, constitudo
de vrios compostos recalcitrantes ao ataque microbiano. A
velocidade de biodegradao de cada composto est estreitamente relacionada sua estrutura qumica na seguinte ordem
de decrscimo de susceptibilidade: n-alcanos > alcanos ramificados > aromticos de baixa massa molecular > ciclo alcanos
>>> aromticos de alta massa molecular (LEAHY e COLWELl,
1990). Alm disso, um maior contedo de hidrocarbonetos
poliaromticos (HPAs) encontrados no diesel, dentre os leos
combustveis de destilao mdia, por conta da sua persistncia no ambiente, pode tornar muito mais difcil sua remediao
(ADAM e DUNCAN, 1999).
20
Estudos tm mostrado que em comparao com o diesel, o

biodiesel mais facilmente degradvel por micro-organismos
(MAKAREVICINE e JUNULIS, 2003; DEMELLO et al., 2007).
Certos micro-organismos, tais como Pseudomonas oleovorans,
P. mendocina, P. aeruginosa, Marinomonas vaga, Escherichia
coli, Burkholderia gladioli, B.cepacia, Bacillus subtilis, apresentam potencial para a degradao de biodiesel (FOLLIS, 1994;
VIEIRA et al., 2006).
Alguns pesquisadores relataram a facilidade de degradao de
hidrocarbonetos de petrleo e seus derivados quando metil
steres de cidos graxos (biodiesel) esto presentes. No entanto, tambm existem trabalhos publicados que demonstram
que a presena do biodiesel no interfere na degradao do
diesel.
1.3 | Processos biolgicos aplicados na remediao

de solos contaminados com petrleo e derivados
1.3.1 | Tratamentos Biolgicos
A aplicao de processos biotecnolgicos envolvendo, individualmente ou conjuntamente, micro-organismos e/ou enzimas,
e surfatantes, com o objetivo de solucionar ou minorar problemas de poluio ambiental, tem se tornado crescente. Logo, a
degradao microbiana de hidrocarbonetos constitui um campo
de pesquisa em pleno desenvolvimento (BONAVENTURA e
JOHNSON, 1997). Destaca-se a biorremediao, que h muitas dcadas, vem sendo usada com sucesso no tratamento de
efluentes industriais, esgotos domsticos, aterros de resduos
perigosos e aterros de resduos urbanos em geral (DIAS,
2000).
21
A biorremediao uma prtica atrativa de remoo de hidrocarbonetos de petrleo e seus derivados, por causa da simplicidade da manuteno, aplicao em grandes reas, baixo
custo, alm da possibilidade de ocasionar a destruio completa do contaminante (BENTO et al., 2005).
A atenuao natural monitorada uma forma passiva de remediao que envolve a atividade microbiana sem qualquer forma
de interveno humana (NYER, 1998 apud ROSADO, 2005).
uma tcnica simples, normalmente lenta, que depende dos
processos naturais para reduzir a toxicidade da massa e/ou a
mobilidade de um contaminante no solo (SCOW e HICKS,
2005). No entanto, as condies ambientais devem ser adequadas para se empregar tal tcnica. Alm disso, necessria
a presena de micro-organismos nativos capazes de biodegradar o contaminante presente no solo (BAPTISTA, 2007).
Em geral, os micro-organismos esto presentes na rea impactada, e quanto maior o seu tempo de exposio aos compostos xenobiontes, maior a probabilidade de alguns adquirirem a capacidade gentica de decodificar enzimas que atuem
na degradao desses compostos (DIAS, 2000).
Segundo a Agncia Ambiental Norte-Americana USEPA o
termo Atenuao Natural Monitorada (ANM) refere-se ao uso
dos processos de atenuao natural que ocorrem, naturalmente, no solo, dentro de um contexto de remediao monitorada e controlada de um stio, em um perodo de tempo razovel, com objetivo de reduzir a concentrao e toxicidade de
contaminantes at nveis adequados proteo da sade
humana e ao meio ambiente (USEPA, 1999).
Em geral, a ANM tem custo reduzido quando comparado a
outros mtodos de remediao. Alm disso, um mtodo que
22
pode ser usado antes ou aps outras tecnologias de remediao (MULLINGAN e YONG, 2004), podendo ser aplicado mesmo
quando o contaminante encontra-se amplamente difundido no
solo (IWAMOTO e NASU, 2001).
O sucesso da biorremediao dependente das espcies microbianas presentes, mais especificamente da presena ou
ausncia de bactrias hidrocarbonoclsticas. A taxa de biodegradao depende da presena e do nmero de micro-organismos no solo capazes de degradar os compostos orgnicos.
Existe uma relao direta entre a velocidade de degradao e
o tamanho da populao, j que quanto maior o nmero de
micro-organismos capazes de degradar o composto, mais rpida ser a sua degradao (DRAGUN, 1998). O tamanho da
populao microbiana maior na superfcie do solo, visto que
nesta regio a temperatura, a umidade, a aerao e a energia
so relativamente mais favorveis para o desenvolvimento dos
micro-organismos (DRAGUN, 1998).
Inmeros so os registros dos acidentes ambientais ocasionados pelo derramamento de combustveis. Por isso, a necessidade de obteno de um maior nmero de dados tcnicos sobre tal problema, para que se possa promover a recuperao
do solo contaminado, para cada caso, sem comprometer a
biodiversidade local. Pesquisar e entender a dinmica dos processos de biorremediao torna-se fundamental para desenvolver atividades de descontaminao do ambiente contaminado, bem como para desenvolver uma tcnica econmica e
ambientalmente vivel. Por exemplo, poucos estudos tratam da
ao dos micro-organismos degradadores de hidrocarbonetos
derivados de petrleo em solos franco-argilosos, caractersiticos de vrios estados brasileiros, como o caso do Rio de
Janeiro.
23
2 | OBJETIVO
O objetivo desse trabalho, portanto, foi monitorar o processo de
atenuao natural de um solo franco-argiloso, artificialmente
contaminado com leo diesel puro (B0) ou leo diesel comercial (B4) em colunas de PVC de 60 cm de altura com 22 cm de
dimetro.
Para atender o objetivo geral do trabalho, os seguintes objetivos especficos foram estabelecidos:
Avaliar o comportamento microbiano, por meio da

contagem das populaes de bactrias heterotrficas totais (BHT) e das bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC) nativas durante a atenuao natural do
solo contaminado ao longo de 60 cm de profundidade;
Monitorar a degradao dos contaminantes no solo

por espectrometria de infravermelho, de modo a definir o potencial de descontaminao por atenuao
natural do solo virgem artificialmente contaminado
com diesel puro (B0) e diesel comercial (B4);
Avaliar o impacto toxicolgico dos solos contaminados antes e aps atenuao natural, mediante ensaios de fitotoxicidade.
24
3 | PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
3.1 | Solo
Neste trabalho foi utilizado solo do tipo argissolo de colorao
avermelhada, antigo podzlico vermelho-amarelo, bastante comum no Brasil e, sobretudo, representativo do Estado do Rio
de Janeiro (RIBEIRO, 2009). O solo foi coletado no municpio
de Belford Roxo, Rio de Janeiro, em local sem histrico de
contaminao por hidrocarbonetos de petrleo ou de seus derivados. Essa rea tem sido usada para emprstimo de solo para
aterro em reas de refinarias. Entretanto, existem poucas publicaes que abordam tratamentos de biorremediao desse
tipo de solo quando contaminado por derivados de petrleo.
A coleta do solo se deu em 2006, quando este foi distribudo
em barricas fechadas que foram mantidas em local coberto
temperatura ambiente. Para esse estudo, em maro de 2009, o
solo, em quantidade suficiente para o desenvolvimento de todo
o trabalho experimental, foi inicialmente seco, por espalhamento no ptio do Centro de Tecnologia Mineral (CETEM/
MCT), onde permaneceu temperatura ambiente durante 3
dias. O solo, j livre de folhas, razes e gravetos, foi desagregado, peneirado e quarteado em 16 cortes de 25 kg cada. As
subamostras foram devidamente ensacadas e etiquetadas,
sendo armazenadas em cmara fria a 4C at posterior utilizao.
3.1.1 | Caracterizao do solo

A anlise da composio granulomtrica (proporo das diferentes classes de partculas) foi realizada segundo EMBRAPA
25
(1997). Esta anlise se baseia na velocidade de sedimentao

das partculas que compem o solo.
A determinao da Densidade de Partcula, Densidade Aparente (Bulk), Porosidade do Solo, Capacidade de Reteno de
gua e pH foram realizadas segundo a Instruo de Trabalho
(IT) elaborada pelo CETEM/MCT, conforme abaixo detalhado:
a) Densidade aparente do solo (Da) (CETEM - IT 2008007-00), ou densidade bulk definida como a razo entre a massa de partculas e o volume que elas ocupam
em um recipiente.
b) Densidade das partculas do solo (Dp) (CETEM - IT
2008-008-00), tambm conhecida como densidade real,
pode ser definida como a massa de slidos presentes no
solo por unidade de volume.
c) Porosidade do solo (CETEM IT 2008-006-00) definida como o volume dos poros do solo dividido pelo volume total de uma amostra de solo. Este parmetro, expresso em percentagem, calculado a partir dos valores
de Densidade Aparente e Densidade de Partcula.
d) Capacidade de reteno de gua (CRA) (CETEM IT
2008-006-00) do solo foi determinada conforme adaptao do procedimento descrito em Watwood et al. (1991).
e) A determinao do pH foi realizada segundo o mtodo
de Instruo de Trabalho (IT 2008-011-00) elaborado
pelo CETEM/MCT. O pH do solo foi medido utilizando o
mtodo potenciomtrico, empregando-se o potencimetro da marca Analion, modelo NA 2000, previamente calibrado com solues tampo (pH 7 e 4).
26
Para a determinao do potencial de oxi-reduo (Eh) foi

usado um eletrodo de platina combinado com um eletrodo de
referncia Ago/AgCl, e as leituras expressas em mV.
As determinaes de carbono orgnico e fsforo (JARAMILLO,
1996) foram realizadas no Laboratrio de Tecnologia Ambiental
(Escola de Qumica/UFRJ) e a capacidade de troca catinica
(CTC) foi realizada no laboratrio de Geotecnia da COPPE/
UFRJ. O equipamento utilizado para a quantificao dos
ctions foi um espectrmetro de absoro atmica, marca
Perkin Elmer, modelo A Analyst 300. Os teores de nitrognio
total e amoniacal foram determinados pelo Laboratrio de Anlises Minerais COAM/CETEM, pelo mtodo Kjeldahl, utilizando um cromatgrafo de ons Metrohm, com um amostrador
automtico acoplado a um sistema de dilise modelo 788 IC,
um degasificador modelo 837 IC e um detector condutimtrico
modelo 819 IC.
3.2 | leo diesel

Utilizou-se leo diesel puro (B0), isto , isento de aditivos, e
diesel metropolitano comercial (B4), que contm 4% (m/m) de
biodiesel. A fim de garantir a qualidade das amostras, ambas
foram fornecidas pela Petrobras.
Nos ensaios foram usadas as mesmas amostras de combustveis de modo a garantir a reprodutibilidade e a confiabilidade
dos resultados. Por isso, quantidades suficientes de cada um
dos combustveis foram devidamente acondicionadas em recipientes plsticos, etiquetadas e armazenadas sob refrigerao
em cmara fria (41C), at o momento do uso.
27
3.3 | Detalhamento dos experimentos preliminares

3.3.1 | Ensaios de biodegradao
Sistema experimental
Os ensaios de biodegradao de diesel (B0) e diesel/biodiesel
(B4) foram realizados em sistemas estticos, confeccionados
especialmente para o presente trabalho, de modo a permitir a
anlise do processo de biorremediao de uma seo de solo
contaminado ao longo de 60 cm. O sistema consistiu de coluna
de PVC, de 60 cm de altura e 22 cm de dimetro, composta de
3 sees sobrepostas de 20 cm de altura cada, com a finalidade de possibilitar a coleta das amostras de solo em diferentes profundidades (Figura 3.1). Cada reator possui uma vlvula
de escoamento do percolado, a fim de permitir a checagem da
percolao. Cada reator foi carregado com 18 kg de solo.
Figura 3.1 Sistemas estticos usados nos ensaios de biorremediao

dos solos contaminados com diesel (B0) e diesel/biodiesel (B4).
28
Monitoramento da biodegradao de diesel B0 e B4

Realizaram-se duas baterias de ensaios com durao de 60
dias cada. Na primeira etapa, o solo sofreu uma adio de
gua (40% da CRA) e, a seguir, foi contaminado com 10%
(m/m) de diesel puro (B0). Na etapa seguinte, a contaminao
do solo foi feita com 10% (m/m) de diesel comercial (B4).
Foram empregados 3 reatores de sacrifcio em cada bateria de
ensaios, com a finalidade de coletar amostras representativas
de cada seo do reator, para cada um dos tempos monitorados (20, 40 e 60 dias). Assim, a cada 20 dias, um reator era
sacrificado para a realizao das anlises microbiolgicas,
qumicas e fsico-qumicas.
Para cada solo contaminado, foi realizado, tambm, um controle abitico, cujo sistema foi sacrificado apenas ao 60 dia de
monitoramento. Nos controles abiticos foram utilizados solo,
gua e diesel estreis.
O solo foi esterilizado em autoclave a 1 atm por 20 min, sendo
que o ciclo de esterilizao foi repetido 5 vezes seguidas.
Posteriormente, este solo foi seco temperatura ambiente por
2 dias. No reator, o solo estril foi lavado com soluo do biocida azida de sdio (NaN3) a 4%(m/v) para garantir a sua esterilidade. A gua tambm foi esterilizada em autoclave a 1 atm
por 20 min, e o leo diesel, B0 ou B4 foi esterilizado por meio
do processo de filtrao em membrana Milipore de 0,22 m de
porosidade.
Assim, para cada condio estudada, foram operados 4 reatores, totalizando 8 experimentos realizados. A descrio de cada
sistema conduzido encontra-se na Tabela 3.1.
29
Tabela 3.1. Descrio dos ensaios de biorremediao realizados em

coluna de solo.
Experimento
Condio
1
2
20
Solo + Diesel B0
3
4
60
20
Solo + Diesel B4
7
8
40
60
Controle Abitico
(Solo + Diesel B0 + Biocida)
5
6
Tempo (dias)
40
60
Controle Abitico
(Solo + Diesel B4 + Biocida)
60
Para cada tempo foram coletadas amostras nas profundidades

de 20, 40 e 60 cm. Os ensaios foram mantidos temperatura
ambiente, em local refrigerado, (252C), com ajustes peridicos de umidade apenas na parte superficial da coluna.
No solo, para cada condio experimental, tempo e profundidade foram feitas anlises de: TPH, caracterizao orgnica
das amostras, contagem de bactrias (heterotrficas totais e
hidricarbonoclsticas) e Fitotoxicidade.
3.4 | Anlises quantitativas

3.4.1 | Teor de HidrocarbonetosTotais de Petrleo (HTP)
A caracterizao orgnica das amostras de solo artificialmente
contaminadas foi feita pela anlise de Hidrocarbonetos Totais
de Petrleo (HTP). Essa anlise foi realizada pela tcnica de
30
Espectrometria na regio do Infravermelho, utilizando o analisador Infracal TOG/TPH, da marca Wilks Enterprise, modelo
HART-T (Figura 3.2) (CETEM - IT 2008-005-00), sendo possvel quantificar os hidrocarbonetos, aps extrao do leo do
solo com solvente orgnico (n-hexano PA padro HPLC).
A determinao de HTP por infravermelho baseia-se na medida
da absorbncia da ligao C-H dos hidrocarbonetos presentes
na amostra. As ligaes C-H dos hidrocarbonetos alifticos
absorvem energia num comprimento de onda especfico, CH
(3,38 m), CH2 (3,42 m) e CH3 (3,50 m) (EPA, 2001) e a
intensidade de absoro proporcional quantidade de molculas de hidrocarbonetos numa amostra (NASCIMENTO et al.,
2008). Logo, possvel converter a quantidade total de leo na
amostra original se a razo do solvente com o leo for cuidadosamente controlada, atravs de uma calibrao.
Figura 3.2 Equipamento Infracal, modelo HART-T da Wilks Enterprise.
31
3.4.2 | Concentrao de bactrias heterotrficas totais

(BHT)
A quantificao de BHT foi feita pelo mtodo do espalhamento
em superfcie (spread plate method). Para tanto, uma amostra
de 5 g de solo foi suspensa em 50 mL de soluo salina (8,5
g/L) que, uma vez homogeneizada, foi diluda em srie na
mesma soluo de 10-1 a 10-7. A partir de cada diluio, alquotas de 0,1 mL foram transferidas para placas de Petri contendo meio agar simples (Tabela 3.2) para a quantificao de
bactrias heterotrficas totais. Aps incubao das placas a
301C, por 2 dias, foram feitas as contagens das colnias
formadas e os resultados expressos em unidades formadoras
de colnia (UFC) por grama de solo (UFC/g solo).
Tabela 3.2. Composio do Meio Agar Simples.
Componentes
Quantidade (g/L)
Agar
20
Peptona de carne
Extrato de Lvedo
NaCl
Glicose
10
3.4.3 | Concentrao de bactrias hidrocarbonoclsticas

(BHC)
A quantificao de BHC foi realizada atravs da tcnica do
Nmero Mais Provvel (NMP) (BROWN e BRADDOCK, 1990)
Para esse procedimento foram preparadas diluies de 10-1 at
10-7, em soluo salina (8,5 g/L), das quais foram tomadas
alquotas de 0,1 mL que foram semeadas em cada um de 5
32
poos de placas multipoos, contendo 1,8 mL de meio mineral

(Tabela 3.3) e 0,1 mL de leo cru. As placas foram incubadas a
301C, durante 7 dias, e o crescimento foi avaliado visualmente, sendo considerado positivo quando havia alterao do
aspecto da gota de leo em relao ao do teste em branco. O
teste em branco consistiu da adio de meio mineral estril 5
poos da placa e tambm 5 poos com a adio de meio
mineral estril acrescido de leo cru. Dessa forma, pode-se
descontar qualquer efeito que no seja causado pela presena
dos micro-organismos a serem quantificados.
Atravs dos resultados positivos e negativos foram feitos os
clculos, levando em conta a diluio, sendo a concentrao
celular expressa em NMP/g de solo seco.
Tabela 3.3. Composio do Meio Mineral
Componentes
Quantidade (g/L)
NaCl
5,0
K2HPO4
1,0
KNO3
3,0
NH4H2PO4
1,0
(NH4)SO4
1,0
MgSO4.7H2O
0,2
Fonte: VECCHIOLI et al., 1990.
3.4.4 | Teste de Fitotoxicidade

Os testes de ecotoxicidade consistiram na anlise da germinao de sementes e crescimento da espcie vegetal Lycopersicon
esculentum (tomate). Trata-se de um teste simples e de baixo
33
custo que pode indicar a ao fitotxica de diferentes

compostos qumicos. Estes testes foram realizados tanto para
monitorar a toxicidade do solo contaminado, aps tratamento,
bem como a fertilidade do solo virgem. Utilizou-se como teste
positivo um solo comercial frtil.
O propsito do teste foi verificar o efeito dos compostos residuais no solo no crescimento do tomate, no sendo baseado em
outros experimentos de toxicidade citados na literatura.
Os testes foram realizados em pequenos vasos de planta contendo cerca de 200 g de solo onde foram semeadas, uniformemente, 18 sementes de tomate, distribudas em 6 orifcios (3
sementes para cada orifcio). A espcie empregada foi
Lycopersicon esculentum, conforme recomendado pela OECD
(1984), da marca Isla, isenta de defensivos agrcolas.
No perodo do ensaio, os vasos ficaram em local arejado, com
boa luminosidade natural e, a cada 24 h, foram regados para
favorecer a germinao e o crescimento das sementes. Aps
20 dias, as plantas foram cortadas na altura do solo com auxlio
de uma tesoura de jardineiro, e o comprimento do caule foi
medido (Figura 3.3). Cada ensaio foi feito em triplicata.
34
(A)
(B)
(C1)
(C2)
Figura 3.3.Testes de germinao e crescimento do tomateiro em solo

frtil (A), solo em estudo sem contaminao (B) e detalhe da medio
dos comprimentos dos caules da muda oriunda do solo frtil (C1) e do
solo em estudo (C2).
35
4 | RESULTADOS E DISCUSSES
4.1 | Caracterizao do solo
Preliminarmente, o solo virgem foi caracterizado granulomtrica
(textural), qumica, fsico-qumica, e microbiologicamente. Na
tabela 4.1 constam os parmetros analisados e considerados
mais relevantes para o processo de biorremediao.
Segundo a classificao textural de solos de Lemos e Santos
(1984), o solo empregado neste estudo da classe franco-argilosa, e de textura mdia, de acordo com Prado (2005).
O valor de densidade aparente determinado para o solo representativo de superfcies argilosas (FOTH, 1990) e est no
limite considerado apropriado para o desenvolvimento microbiano (ARCHER e SMITH, 1972). Solos com maiores valores de
Dp apresentam-se imprprios para o metabolismo das bactrias aerbicas autctones por conta da baixa permeabilidade e
aerao. A permeabilidade afetada, principalmente, pelo tamanho da partcula e porosidade do meio. Normalmente os
solos argilosos so menos permeveis (partculas menores) do
que os arenosos (partculas maiores), impedindo o fluxo de
gua de maneira efetiva e, por isso, muitas vezes so considerados impermeveis (SEABRA, 1997). De uma maneira geral, quanto mais elevada for a densidade aparente do solo,
tanto maior ser sua compactao e menor a sua porosidade
(KIEHL et al., 1979).
Com base nos dados de densidade aparente e densidade de
partcula, calculou-se a porosidade do solo como sendo de
45,8%. Este valor tido como adequado para a atividade mi-
36
crobiana, j que permite uma melhor permeao da gua e do

ar atravs do solo (SILVA, 1996).
Tabela 4.1 Caracterizao Granulomtrica (Textural), Qumica, FsicaQumica e Microbiolgica do Solo Virgem.
Parmetros
Relao Areia:Silte:Argila (%)
Valores
38:30:32
Densidade aparente (Da) (g/mL)
1,3
Densidade de partcula (Dp) (g/mL)
2,41
Capacidade de reteno de gua (CRA) (%)
31
pH
4,7
Concentrao de matria orgnica* (g/kg)
3,0
Concentrao de nitrognio (g/kg)
0,17
Carbono Orgnico* (Corg) (g/kg)
0,17
Fsforo* (mg/kg)
Hidrocarbonetos Totais de Petrleo (HTP) (g/kg)
Umidade (%)
5
0 (Zero)
3
Capacidade de Troca catinica (CTC)* (cmolc/dm3)
3,72
Bactrias Heterotrficas Totais (BHT) (UFC/g solo)
105
Bactrias Hicrocarbonoclsticas (BHC) (NMP/g solo)
101
* Anlises realizadas pelo Laboratrio de Geotecnia da COPPE/ UFRJ.
Em relao anlise de pH, o solo caracteriza-se como fortemente cido (ALVAREZ et al., 1999) e, portanto, imprprio para
a atividade da maioria das bactrias. Adicionalmente, a acidez
causa a perda de nutrientes pelo solo (OLIVEIRA et al., 2000),
o que implica em menor disponibilidade dos elementos essenciais para o metabolismo microbiano na degradao dos contaminantes.
O pH da maioria dos solos se situa na faixa entre 4,5 e 8,0. De
acordo com Moreira e Siqueira (2006), os horizontes superfici-
37
ais dos solos em climas mais midos so geralmente cidos

devido, em parte, decomposio de serrapilheira. Tambm, a
chuva cida e a fixao biolgica de nitrognio podem contribuir para abaixar o pH do solo. No caso das argilas, em virtude
das cargas negativas, ocorre a atrao de ons positivamente
carregados (ctions), inclusive H+, cujo aumento na superfcie
da partcula acarrater em reduo do pH a valores muito
menores do que o da soluo do solo.
Para o solo em estudo, foi determinada uma concentrao de
carbono muito baixa, comprovando o seu histrico de no
contaminao, o que corroborado pela anlise de HTP.
Alm da fonte de carbono, os elementos nitrognio e fsforo
so essenciais para as funes vitais das clulas microbianas,
principalmente aquelas referentes gerao de energia e
sntese de constituintes celulares, sejam eles estruturais ou
genticos (BRUNKEN e SZARFARE, 1999; GOMES, 2005;
MOREIRA e SIQUEIRA, 2006). Segundo JARAMILLO (1996), o
solo considerado rico em matria orgnica, nitrognio e
fsforo, quando seus respectivos teores so maiores que 42
g/kg, 2,22 g/kg e 0,03 g/kg. Portanto, pode-se aferir que o solo
analisado nutricionalmente limitado.
Apesar disso, e das outras caractersticas fsico-qumicas e
nutricionais serem tambm limitantes para a atividade de bactrias, no solo foi detectada a presena de bactrias heterotrficas totais (BHT), em concentrao relativamente elevada e,
inclusive, de bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC), embora
em nmero bastante reduzido.
38
4.2 | Efeito do biodiesel na biodegradao de leo

diesel em solo franco-argiloso
A seguir sero apresentados os resultados de monitoramento
da biorremediao de leo diesel puro (B0) e leo diesel comercial (B4), ao longo de uma coluna de solo de 60 cm por 60
dias.
4.2.1| Ensaios de atenuao natural de solo contaminado

com diesel puro (B0)
A Figura 4.1 mostra a variao da concentrao de HTP residual no solo contaminado com leo diesel puro (B0), nos diferentes pontos monitorados, ao longo do tempo. Nota-se que a
eficincia de degradao de HTP variou em funo da profundidade do solo.
Figura 4.1. Perfil de distribuio de HTP residual em solo contaminado com leo diesel (B0) em funo da profundidade e tempo.
39
Decorridos 20 dias da contaminao, no solo oriundo da camada mais prxima superfcie (20 cm), evidenciou-se a menor concentrao de HTP, enquanto que, para o mesmo intervalo de tempo, os solos das camadas mais profundas (entre 40
cm e 60 cm) apresentaram valores prximos de concentrao.
Tal fato pode estar relacionado atividade degradadora ser
mais intensa nas zonas onde a disponibilidade de oxignio
maior. Outra possibilidade, que no exclui a anterior, a migrao dos hidrocarbonetos para as camadas mais profundas do
solo.
No decorrer do tempo, verifica-se que a degradao mais
eficiente na zona de 40 cm. Isto indicativo da participao
efetiva dos micro-organismos, mesmo em condies limitantes
de oxignio.
Por outro lado, na maior profundidade, no se percebeu qualquer reduo do contedo de HTP, possivelmente em consequncia da lenta percolao do leo diesel pelas camadas do
solo ou, ainda, da migrao mais facilitada dos produtos resultantes da degradao microbiana do leo diesel, acarretando a
estagnao dos hidrocarbonetos mais recalcitrantes nas camadas mais profunda do solo.
As Figuras 4.2 (A e B) apresentam as densidades das populaes de bactrias heterotrficas totais (BHT) e bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC) no solo contaminado com leo diesel
B0 em funo da profundidade e do tempo, respectivamente.
Ainda que as condies naturais do solo no fossem adequadas para o metabolismo de bactrias (Tabela 4.1), houve aumento de ambas as populaes a partir do leo diesel como
nica fonte de carbono introduzida aos sistemas. No entanto,
40
as populaes microbianas apresentaram comportamentos

diferentes entre si.
(A)
(B)
Figura 4.2. Variao dos nmeros de bactrias heterotrficas totais

(BHT) e de bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC) em solo aps
contaminao com leo diesel (B0) em funo da profundidade e do
tempo (A= BHT; B= BHC; SV= solo virgem, sem contaminao).
41
Aps 20 dias da contaminao do solo com o combustvel, foi

observado um ligeiro acrscimo de BHT em relao ao solo
virgem, em 40 cm de profundidade. Porm, no 40 dia, houve
uma leve reduo das concentraes celulares nas profundidades de 20 e 40 cm. O decaimento da concentrao das BHT
pode estar relacionado diminuio da concentrao de compostos mais facilmente degradveis e, por conseguinte, ao
acumulo e toxicidade dos recalcitrantes para algumas das espcies microbianas.
Na camada mais profunda do solo (60 cm), a concentrao de
BHT permaneceu similar do solo virgem durante todo o perodo monitorado. Provavelmente, a menor atividade microbiana
nesta rea deve-se menor disponibilidade de oxignio e,
inclusive, toxicidade dos hidrocarbonetos em virtude da sua
maior concentrao (Figura 4.1).
Em relao s bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC), no 20
dia, houve um aumento na profundidade de 20 cm, onde a
concentrao celular atingiu o maior valor. A anlise comparativa desses resultados com os do perfil de distribuio de HTP
(Figura 4.1) mostra a importncia da presena das bactrias
degradadoras ou hidrocarbonoclsticas para se ter a remediao de um solo contaminado.
Na estimativa seguinte, ou seja, aos 40 dias, observou-se uma
ligeira queda, na profundidade de 20 cm, embora depois a concentrao tenha se mantido constante e ainda superior profundidade de 40 e 60 cm, em 60 dias. Isso nos mostra que a
presena de oxignio propicia um aumento de bactrias aerbias degradadoras. A leve queda da concentrao microbiana
pode ser devido toxicidade, em face do acmulo de compostos mais recalcitrantes no ambiente, j que houve um aumento
42
da concentrao de HTP (Figura 4.1), fazendo com que esses

micro-organismos no sejam mais capazes de degrad-los.
Por outro lado, a densidade de BHC na camada de 40 cm praticamente no se alterou ao longo do tempo. No perodo de 60
dias, as concentraes de BHC foram praticamente as mesmas
nas camadas de 20 e 60 cm de solo analisadas. Isso pode ser
explicado pela possvel adaptao e seleo de espcies capazes de degradar os compostos mais recalcitrantes.
Considerando que durante o perodo monitorado, o nmero de
BHC variou para as trs profundidades analisadas (Figura
4.2B), sugere-se que a populao microbiana se altera, qualitativamente, com aumento das potencialmente degradadoras,
embora no haja variao expressiva do quantitativo. O mesmo
perfil comportamental das BHC foi evidenciado por Ferreira
(2001).
possvel considerar a interdependncia entre os micro-organismos no solo, onde a gerao de substncias mais simples, a
partir da degradao dos compostos recalcitrantes pelas espcies potencialmente mais degradadoras, possibilita o desenvolvimento de outras espcies microbianas que, por sua vez, podem estabelecer as condies necessrias para as primeiras
ou mesmo de outras diferentes espcies, formando-se um ciclo
de atividade microbiana.
O pH do solo no sofreu qualquer alterao em funo da
contaminao com diesel nem durante o monitoramento,
variando entre 4,5 e 5,0.
A acidez do solo pode ter influenciado, negativamente, a atividade bacteriana. Porm, importante ressaltar que, apesar do
solo no ter tido histrico prvio de contaminao por hidrocar-
43
bonetos, e do pH no ser o mais adequado para o metabolismo

das bactrias, foi constatada a degradao do diesel e aumento do nmero de clulas. Em contrapartida, no controle
abitico houve elevao do pH do solo, principalmente na sua
superfcie, onde atingiu o valor de 8,5. A alcalinizao pode
estar relacionada decomposio do biocida empregado
(azida de sdio).
O potencial de oxidao-reduo (Eh), parmetro influenciado
pela especiao qumica e pela concentrao de oxignio
(FISH, 1993 apud TEIXEIRA et al., 1999), ou seja, diretamente
relacionada com a profundidade de cada seo do solo ao
longo do tempo, mostrado na Figura 4.3. Valores de Eh positivos definem sistemas oxidados enquanto os negativos denotam sistemas reduzidos (PONNAMPERUMA, 1972).
Evidenciou-se um pequeno aumento do Eh com o tempo nas
camadas mais profundas, como tambm para cada ponto. Essa
variao pode ser creditada gerao de substncias oxidantes pelos micro-organismos autctones, j que a difuso de
oxignio atravs das camadas de solos franco-argilosos, com
teores de umidade superiores a 10% relativamente baixa.
Analisando a Figura 4.3, verifica-se, tambm, que os valores de
Eh, em todas as condies apresentadas, foram superiores a
250 mV, o que favorvel atuao dos micro-organismos
aerbicos (BITTON & GERBA, 1984). Segundo Bento (2005),
este fator tem grande influncia na velocidade de degradao
do leo diesel, pois quanto mais oxidante for o solo, mais rpida ser a degradao de seus hidrocarbonetos constituintes.
44
Figura 4.3. Variao do potencial de oxidao-reduo (Eh) para

amostras de solo contaminado com leo diesel (B0) em funo da
profundidade e do tempo ( SV= solo virgem, sem contaminao).
Em sistemas redox naturais, os parmetros Eh e pH esto

diretamente relacionados e, a partir de seus valores, pode-se
determinar o valor de pe (logaritmo da atividade de eltrons),
que representa o inverso do log da atividade eltrica (CAMARGO,
SANTOS & ZONTA, 1999). Para solos, o valor de pe em
funo do Eh (-200 a 700 mV) e do pH (4,5 a 8,5) varia de -5 a
12, indicando: solos oxidados (pe>7); solos suboxidados (pe de
2 a 7) e solos anxicos (pe<2). De acordo com o diagrama pe,
Eh e pH, representado por Tian-Yen (CAMARGO, SANTOS &
ZONTA, 1999), o valor de pe para as amostras de solo nas
condies estudadas se situa entre 12 e 20 para pH de 4,5 a
5,0 e Eh variando entre 200 e 600 mV.
Os solos suboxidados diferem dos oxidados por apresentarem
valores de pe baixos o suficiente para que ocorra depleo de
O2, porm no to baixos para haver depleo dos ons SO42(estado anxico). Logo, o maior valor de pe (de 12 a 24)
45
representa uma condio oxidada, onde a atividade eltrica

baixa e o potencial de oxi-reduo elevado. Quando h
valores baixos ou negativos de pe, o ambiente se encontra no
estado reduzido.
No solo, a gua desloca o ar dos espaos porosos, criando
regies de anaerobiose devido depleo do oxignio e ao
aumento de CO2, o qual produzido pela respirao microbiana. No solo, o oxignio livre presente rapidamente consumido pelos micro-organismos aerbios, no processo de degradao da matria orgnica. O consumo de O2 influencia a atividade de eltrons na soluo do solo, enquanto que a liberao
de CO2 regula a atividade de prtons na soluo.
Como o consumo de oxignio pelos micro-organismos mais
rpido do que o que suprido por difuso atravs da fase
lquida nos solos, ocorre a formao de um gradiente de
concentrao de oxignio, que d origem a duas camadas distintas, uma de oxidao e outra de reduo, pois um solo
submerso ou saturado, no uniformemente desprovido de
oxignio. Desta forma, a concentrao do oxignio pode ser
alta na camada superficial, onde a difuso de oxignio
suficiente para o consumo dos micro-organismos aerbios. Em
ambientes reduzidos, a matria orgnica a principal doadora
de eltrons usados pelos micro-organismos anaerbios facultativos no solo, sendo NO3-, Fe3+, SO4= etc., produtos da desassimilao da matria orgnica (CO2, N2) e at ons H+ usados
como aceptores de eltrons (CAMARGO et al., 1993; BARTLETT
& JAMES, 1993).
As Figuras 4.4 (A e B) mostram que ao longo do perodo monitorado existe uma pequena disponibilidade de nitrognio. Notase que nos primeiros 20 dias de tratamento e principalmente
46
nas profundidades de 20 e 40 cm h um pequeno aumento na

concentrao de nitrognio total, comparado ao solo no contaminado (Figura 4.4A). Essa variao de nitrognio total pode
estar relacionada adio de diesel, que o contm em baixas
concentraes ou, ainda, ser resultante da lise celular e/ou
hidrlise de protenas por enzimas extracelulares. Pode-se
perceber, tambm, um aumento significativo da concentrao
de nitrognio no controle (CA), provavelmente devido ao tratamento do solo com o biocida azida de sdio.
Por outro lado, a variao de nitrognio amoniacal foi diferenciada (Figura 4.4B). Os maiores valores foram evidenciados na
faixa de solo mais prxima superfcie (20 cm) nos primeiros
40 dias de tratamento.
Em estudos visando ao estabelecimento de relaes nutricionais adequadas para a biorremediao de solos contaminados
por leo cru, verificou-se que dosagens excessivas de nitrognio (SORIANO, 2001 apud Rizzo, 2008) e de fsforo (BAPTISTA,
2007) podem interferir, negativamente, no processo de biodegradao. O mesmo efeito inibitrio foi comprovado por Trindade et al. (2004) tendo como base estudos realizados por
Walworth et al. (2005).
47
(A)
(B)
Figura 4.4. Nitrognio total (A) e nitrognio amoniacal (B) para

amostras de solo contaminado com leo diesel (B0) em distintas
profundidades (SV= solo virgem, sem contaminao; CA= controle
abitico).
48
Em geral, os estudos de biorremediao de solos contaminados com leo cru estimam, para efeito de clculo da relao
C:N:P, que 85% do valor de HTP correspondem concentrao de carbono. Se considerada vlida esta razo para diesel,
a relao C:N:P para o solo aps adio de 10% m/m de diesel
ser de 100:0,2:0,005, isto , muito aqum do indicado para o
processo de biorremediao, que de 100:10:1 (JARAMILLO,
1996).
4.2.2 | Ensaios de atenuao natural de solo contaminado

com diesel comercial (B4)
O perfil de distribuio de HTP residual do solo contaminado
com leo diesel comercial (B4), ao longo da coluna de solo e
do tempo monitorado, apresentado na Figura 4.5. Comparativamente ao perfil de HTP estabelecido para solo contaminado
apenas com diesel (Figura 4.1), evidencia-se um comportamento diferenciado.
Nos dois primeiros perodos, 20 e 40 dias, verifica-se um aumento gradativo de HTP ao longo do reator, sendo esse comportamento diferente no 60 dia, concentrando menos HTP na
seo intermediria do reator.
Para a metodologia aplicada na quantificao de HTP, foi utilizado o aparelho, Infracal, cuja eficincia foi comprovada no
trabalho realizado por Telhado, 2008, para esta anlise em
leo cru. A partir disso empregou-se essa tcnica para a quantificao de HTP em diesel puro (B0) e em diesel com 4% de
biodiesel (B4), j que estes caracterizam-se por conter hidrocarbonetos derivados de petrleo. Para a anlise de diesel
puro, obtivemos resultados condizentes em todo o trabalho,
mas para o combustvel B4, observam-se resultados inconsis-
49
tentes, possivelmente pelo fato da presena do biodiesel no

diesel sendo, portanto, descartada essa anlise.
Figura 4.5. Perfil de distribuio de HTP residual em solo contaminado com leo diesel (B4) em funo da profundidade e do tempo.
A anlise da Figura 4.6 permite evidenciar que a populao de

BHT se manteve inalterada em relao ao solo virgem, durante
todo o perodo monitorado. No entanto, a presena de biodiesel
estimulou o crescimento das BHC na maioria das condies
testadas.
50
(A)
(B)
Figura 4.6. Concentrao das bactrias heterotrficas totais (BHT) e

bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC) em solo aps contaminao
com diesel (B4) em diferentes profundidades e para diferentes tempos
de monitoramento (A= BHT; B= BHC; SV= solo virgem, sem contaminao).
51
A presena de matria orgnica mais facilmente degradvel

(biodiesel) no alterou o pH do solo, que se manteve cido, em
torno de 5, nas trs profundidades, por 60 dias.
A adio de biodiesel ao diesel tambm no teve efeito no
potencial de oxi-reduo do solo (Figura 4.7). Analogamente ao
evidenciado para diesel B0 (Figura 4.3), o Eh se manteve
positivo.
Figura 4.7. Variao do potencial de oxidao-reduo (Eh) para

amostras de solo contaminado com diesel/biodiesel em funo da
profundidade e do tempo (SV= solo virgem, sem contaminao).
Comparativamente, as concentraes de nitrognio total

(Figura 4.8 A) e amoniacal (Figura 4.8 B) apresentaram diferentes perfis em relao ao ensaio de AN com solo contaminado com diesel (B0) (Figuras 4.4 A e B).
Observa-se um teor mximo de nitrognio total no 60 dia de
monitoramento.
52
(A)
(B)
Figura 4.8. Nitrognio total (A) e nitrognio amoniacal (B) para

amostras de solo contaminado com leo diesel (B4) em distintas
profundidades ( SV= solo virgem, sem contaminao; CA= controle
abitico).
53
4.2.3 | Anlise comparativa da degradao de

hidrocarbonetos de leo diesel B0 e de contagem de BHT
e BHC em coluna de solo
Para fins comparativos, na Figura 4.9 foram plotados os valores
dos percentuais de degradao de HTP, bem como os dados
referentes s concentraes de BHT e BHC para o solo contaminado com diesel puro (B0).
Para o solo contaminado apenas com leo diesel puro (B0), a
degradao de HTP foi lenta, tendo incio aps 20 dias da sua
contaminao. A remoo de HTP no controle abitico foi de
24%, atingindo, portanto, uma degradao de 14% ao final do
monitoramento (Figura 4.9). Porm, de acordo com o perfil
apresentado, a biorremediao tende a continuar. Os valores
mximos, tanto de BHT quanto de BHC, ocorreram no mesmo
perodo (20 dias). Porm, com a continuidade do monitoramento, evidencia-se uma leve tendncia ao declneo da viabilidade das bactrias heterotrficas totais. Isso pode ser devido
seleo natural, despontando a atividade preferencial de
algumas espcies, em funo do acmulo de fraes orgnicas
de maior complexidade e, portanto, mais recalcitrantes, uma
vez que a atividade na etapa inicial se atribui ao consumo das
fraes mais leves, ou seja, de menor complexidade. A
reduo do nmero de clulas tambm pode ser atribuda a
depleo de nutrientes, como, por exemplo, a fonte de nitrognio, o que um impeditivo para a manuteno das funes
vitais das clulas. Portanto, acredita-se que a degradao dos
hidrocarbonetos foi favorecida pela atividade microbiana,
mesmo sem ter havido a ingerncia para estabelecer condies
que favorecessem o metabolismo bacteriano.
54
Figura 4.9.
Monitoramento de HTP e concentrao de bactrias
heterotrficas totais (BHT) e de bactrias hidrocarbonoclsticas (BHC)

para solo contaminado com leo diesel (B0).
4.3 | Avaliao da toxicidade dos solos contaminados

aps atenuao natural
Amostras dos solos artificialmente contaminados com leo
diesel B0 e B4, e naturalmente atenuadas, foram ensaiadas
para definir o potencial txico dos compostos residuais gerados
pela ao microbiana e qumica sobre os hidrocarbonetos. Os
ensaios de ecotoxicidade foram realizados com sementes de
tomate, sendo feita a observao de percentual de germinao
e crescimento do vegetal (Tabela 4.2).
Notou-se que no solo virgem, tanto o percentual de germinao
das sementes quanto o crescimento do vegetal foram bem
inferiores ao determinado para o controle positivo. Isto comprova o baixo valor nutricional do solo empregado.
55
Tabela 4.2. Dados de ensaios de fitotoxicidade realizados com tomate

para solos contaminados aps atenuao natural.
Tempo de
tratamento
(dias)
Amostras
20
Solo contaminado
com leo diesel
(B0) naturalmente
atenuado
40
60
20
Solo contaminado
com leo diesel
(B4) naturalmente
atenuado
40
60
Ponto de
coleta
Sementes de tomate
Altura
Germinao
mdia do
(%)
caule (cm)
Superfcie
Mistura
*1
Superfcie
14
Mistura
14
Superfcie
Mistura
14
Superfcie
Mistura
Superfcie
18
Mistura
Superfcie
Mistura
Solo virgem
62
Controle positivo *2
Mistura
100
10
Controle abitico
(diesel)
Mistura
Mistura
*3
Controle abitico *4
(diesel/biodiesel)
1
*2
* Mistura dos solos nas camadas de 40 e 60 cm de profundidade; Controle

*3
positivo= solo comercial prprio para cultivo de plantas; Controles abiticos=
solo contaminado adicionado do biocida azida de sdio.
Comparativamente, o solo contaminado apenas com leo diesel (B0) apresentou maior germinao de sementes e maior
crescimento das plantas de tomate para as amostras retiradas
tanto da superfcie quanto na mistura das camadas de maior
56
profundidade (40 e 60 cm). No caso do solo contaminado com

leo diesel B4, somente as amostras superficiais do solo (20
cm) propiciaram germinao e crescimento. Logo, na possvel
remoo de hidrocarbonetos para o solo contaminado com
diesel/biodiesel, os compostos resultantes do processo de biodegradao no atingiram o mesmo grau de decomposio da
ocorrida no solo contaminado com diesel; da, a maior toxicidade. A causa disto pode ser a baixa disponibilidade de nutrientes no solo.
57
5 | CONCLUSES
A atenuao natural (AN) do solo, artificialmente contaminado
com leo diesel puro (B0), resultou em crescente degradao
de hidrocarbonetos totais de petrleo (HTP) ao longo de 60
dias, quando foi determinada uma remoo de cerca de 30%;
embora as condies nutricionais e ambientais fossem desfavorveis atividade microbiana;
Comparativamente, o crescimento de bactrias heterotrficas
totais (BHT) foi maior no solo contaminado com B0, enquanto
que no solo contaminado com leo diesel comercial B4 houve
um aumento de BHC, o que sugere que a presena do biodiesel favorece a atividade microbiana;
A avaliao da toxicidade dos solos contaminados com B0 e
B4, aps atenuao natural, por meio de ensaios de fitotoxicidade com sementes de tomate, revelou a presena de compostos txicos, sendo o solo contaminado com B4 o mais txico.
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XAVIER, J.A.D., MACHADO, J.C.V., SOUZA FILHO, J.E.,
PAULA, J.L., DE ROSSI, N.C.M., PITOMBO, N.E.S.,
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www.camara.sp.gov.br, acessado em Maio de 2010.
SITES acessados:
www.diariodocomercio.com.br, acessado em fevereiro de 2010.
www.biodiesel.gov.br, acessado em maro de 2010.
SRIES CETEM
As Sries Monogrficas do CETEM so o principal material de
divulgao da produo cientfica realizada no Centro. At o
final do ano de 2010, j foram publicados, eletronicamente e/ou
impressos em papel, cerca de 200 ttulos, distribudos entre as
seis sries atualmente em circulao: Rochas e Minerais
Industriais (SRMI), Tecnologia Mineral (STM), Tecnologia Ambiental
(STA), Estudos e Documentos (SED), Gesto e Planejamento
Ambiental (SGPA) e Inovao e Qualidade (SIQ). A Srie
Iniciao Cientfica consiste numa publicao eletrnica anual.
A lista das publicaes poder ser consultada em nossa
homepage. As obras esto disponveis em texto completo para
download. Visite-nos em http://www.cetem.gov.br/series.
ltimos nmeros da Srie Tecnologia Ambiental
STA-57 - Resduos de origem eletrnica. Fbio Henrique Silva
dos Santos e Carlos Eduardo Gomes de Souza, 2010.
STA-56 - Avaliao da biodisponibilidade de contaminantes
orgnicos em solo contaminado. Maria Clara S. C. L.
Telhado, Selma Gomes Ferreira Leite, Andra Camardella
de Lima Rizzo, Danielle Reichwald e Claudia D. da Cunha,
2010.
STA-55 - Utilizao de resduos oriundos do corte de rochas
ornamentais na correo da acidez e adubao de solos
tropicais. Ramires Ventura Machado, Roberto Carlos da C.
Ribeiro, Felipe Vaz Andrade, Renato Ribeiro Passos e Luiz
Felipe Mesquita, 2009.
STA-54 - Aplicao de resduos de mrmores na produo
de cosmticos. Carolina Nascimento de Oliveira, Roberto
Carlos da Conceio Ribeiro e Joedy Patrcia Cruz Queiroz,
2010.
INFORMAES GERAIS
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Geral: (21) 3867-7222
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N OVAS P UBLICAES
Se voc se interessar por um nmero maior de exemplares
ou outro ttulo de uma das nossas publicaes, entre em
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S RIE T ECNOLOGIA A MBIENTAL

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos

Luiz Incio Lula da Silva

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Monitoramento da Atenuao Natural

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Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

no s do tipo de contaminante, como tambm do tipo de solo

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

entre eles o Brasil, passaram a buscar fontes alternativas de

Pelo processo de biorremediao, a degradao do poluente

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

das reservas minerais e de matrias-prima, produo de alimentos e manuteno da atividade scio-econmica.

1.2. | O petrleo e seu derivado: diesel

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

impurezas, que podem aparecer em toda sua faixa de ebulio,

0,05 (ano 2005)

RJ, SP, MG, SE, BA, PR, RS e ES.

0,005 (ano 2009)

PA, CE, PE, Cidades: Rio de Janeiro,

Distribudo nas demais cidades do

Utilizao em motores de embarcaes

Utilizado para testes em motores a

Fonte: ANP e Site Petrobras (2010).

A preocupao quanto liberao do enxofre para a atmosfera

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

Nos dias atuais, a Petrobras j disponibiliza o diesel S50

1.2.1 | Combustvel diesel com adio de biodiesel

O biodiesel totalmente compatvel com o diesel de

apresenta vrias vantagens adicionais, como: derivado de matrias-primas renovveis de ocorrncia

Gera reduo nas principais emisses dos gases de

Possui um alto ponto de fulgor, o que lhe confere

Alm disso, o biodiesel apresenta excelente lubricidade, fato

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

Inicialmente, segundo Brasil (2005), foi fixado em 5% (v/v) o

1.2.2 | Biodegradao dos combustveis

Estudos tm mostrado que em comparao com o diesel, o

1.3 | Processos biolgicos aplicados na remediao

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

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Avaliar o comportamento microbiano, por meio da

Monitorar a degradao dos contaminantes no solo

3.1.1 | Caracterizao do solo

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

(1997). Esta anlise se baseia na velocidade de sedimentao

Para a determinao do potencial de oxi-reduo (Eh) foi

3.2 | leo diesel

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

3.3 | Detalhamento dos experimentos preliminares

Figura 3.1 Sistemas estticos usados nos ensaios de biorremediao

Monitoramento da biodegradao de diesel B0 e B4

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

Tabela 3.1. Descrio dos ensaios de biorremediao realizados em

Para cada tempo foram coletadas amostras nas profundidades

3.4 | Anlises quantitativas

Figura 3.2 Equipamento Infracal, modelo HART-T da Wilks Enterprise.

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...

3.4.2 | Concentrao de bactrias heterotrficas totais

3.4.3 | Concentrao de bactrias hidrocarbonoclsticas

poos de placas multipoos, contendo 1,8 mL de meio mineral

Fonte: VECCHIOLI et al., 1990.

3.4.4 | Teste de Fitotoxicidade

Monitoramento da Atenuao Natural de Solos...