UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

ESCUELA DE POST GRADO

MAESTRIA EN TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

TEMA: ESPECTROFOTOMETRA DE BETALAINAS EN BETARRAGA (Beta

Vulgaris)

b
CURSO: ANALISIS DE ALIMENTOS POR INSTRUMENTACIN
DOCENTE: Mg. Sc. Lus Briceo Berr
ALUMNNOS: Ascensin Varela Cecilia
Huanca Mamani Samuel
Jordn Surez Oscar

Lima

- PERU

2008

ESPECTROFOTOMETRA DE BETALAINAS EN BETARRAGA (Beta vulgaris)

Resumen
En esta prctica se realiz un barrido de absorbancia entre 400 y 600nm con
intervalos de 5nm para obtener el espectro de absorcin de una solucin de
betarraga de cuya grfica se determin 2 longitudes de onda de mxima absorcin
correspondientes a picos de 475 y 540 nm; a las longitudes de onda elegidas se
procedi a realizar lecturas de absorbancia de 3 soluciones de betarraga a distintas
concentraciones a partir de cuyas representaciones grficas se verific el
cumplimiento de la ley de Beer.
I. INTRODUCCION
Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las
sustancias qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin
se puede estudiar la absorcin de sustancias, no solamente en la zona del espectro
visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo.
Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante
que absorbe o emite un sistema qumico a nivel molecular o atmico en funcin de
la longitud de onda de la radiacin. En el anlisis de alimentos, la
espectrofotometra se utiliza para medir la concentracin qumica de cada
componente haciendo uso del espectrofotmetro. El espectrofotmetro es un
instrumento para medir la transmitancia o la absorbancia de una muestra en
funcin de una longitud de onda determinada; tambin se pueden realizar las
mediciones de una serie de muestras en una sola longitud de onda.
El anlisis cuantitativo por espectrofotometra considera que la medicin se realice
a la longitud de onda de mxima absorbancia de la sustancia que se esta
cuantificando con el fin de reducir el error y maximizar la sensibilidad; estas
mediciones deben estar dentro del rango donde la relacin absorbancia y
concentracin sea lineal cumpliendo la ley de Lambert - Beer.
Los objetivos de esta prctica fueron determinar el espectro de absorcin y
seleccionar la longitud de onda de mxima absorcin, as como tambin verificar el
cumplimiento de la ley de Lambert - Beer.
II. REVISION DE LITERATURA
2.1 Espectrofotometra
La espectrofotometra se encuentra dentro de los mtodos cuantitativos de anlisis
qumico que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas.
Z<Se conocen como mtodos espectrofotomtricos y segn sea la radiacin
utilizada como espectrofotometra de absorcin visible (colorimetra), ultravioleta,
infrarroja.
Se puede considerar como la extensin de la inspeccin visual en donde un estudio
ms detallado de la absorcin de energa radiante por las especies qumicas permite
una mayor precisin en su caracterizacin y en su cuantificacin (Day y Underwood,
1989). La espectrofotometra o anlisis espectral, esta basada en la medida de la
energa radiante absorbida o emitida por los tomos o molculas; la variacin de la

energa interna de un tomo o molcula ha de producirse de manera discontinua

(Bermejo, 1991).
Los mtodos cuantitativos basados en la absorcin requieren dos medidas de
potencia: una antes de que el haz haya pasado a travs del medio que contiene al
analito (Po), y la otra, despus (P). La Transmitancia y la Absorbancia son los
trminos que se utilizan ampliamente en la espectrofotometra de absorcin y se
relacionan por la razn de Po y P (Skoog, 2001).
Transmitancia (T)
Es la proporcin de la luz transmitida por una cubeta conteniendo la solucin
problema (P) a la de la luz transmitida por la misma cubeta conteniendo el solvente
o solucin en blanco (Po). Como consecuencia de las interacciones entre los fotones
y los tomos o molculas absorbentes, la potencia del haz disminuye de Po a P. A
menudo se expresa la transmitancia como un porcentaje.
%T =

P x 100
Po

Absorbancia (A)
La absorbancia A de una solucin viene dada por el logaritmo de la base diez del
recproco de la transmitancia. A diferencia de la transmitancia, la absorbancia de
una solucin aumenta cuando mayor es la atenuacin del haz.
A = - log10 T = log Po
P
La determinacin cuantitativa por espectrofotometra se basa en la ley combinada
de Lambert Beer.
2.2 Ley de Lambert - Beer
La ley de Beer (Tambin conocida como la ley de Bourguer - Beer o de Lambert y
Beer) establece que a una longitud de onda dada, la absorbancia es proporcional a
la concentracin de la especie absorbente en una disolucin (Verde, 1999; Day y
Underwood, 1989).
La ley de Beer exige para su aplicacin cuatro condiciones que son ideales y
solamente es posible aproximarse a ellas: 1) radiacin perfectamente
monocromtica; 2) paso a travs de un medio pticamente homogneo que no
disperse la radiacin; 3) un haz estrictamente paralelo y 4) adems es necesario
que la molculas absorbentes no estn nunca lo suficientemente prximas a una u
otras molculas (impurezas) para que se vea afectada la estructura de la mismas y
por lo tanto su nivel de energa (Bermejo, 1991).
La ley de Bourguer - Lambert - Beer predice para una longitud de onda constante y
paso ptico fijo, una relacin lineal entre Absorbancia y Concentracin con
pendiente que intercepta cero. Sin embargo esta ley slo se cumple estrictamente o
esta limitada para soluciones diluidas, generalmente concentraciones menores o
iguales que 10-2 M (Skoog, 2001).
Log =
Donde:
= Absortividad molar (mol/L)
b = Longitud de celda (cm)

P0
A = bc
P

c = Concentracin (mol/L)
La ley de Lambert - Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de c
altos, vara con la concentracin, debido a fenmenos de dispersin de la luz,
agregacin de molculas, cambios del medio, etc. (Diaz et al., 2004).

2.2.1 Desviaciones de la ley de Bourguer Lambert - Beer

Las desviaciones de la ley de Beer caen en tres categoras: reales, instrumentales y
qumicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas; si la absorbancia medida es
mayor que la real, o negativas; si la absorbancia medida es menor que la real, y
llevan a que no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la
concentracin (Universidad Nacional de Colombia, 2005). Las concentraciones altas
(>0.01M), provocan que la distancia media entre las molculas responsables de la
absorcin disminuya hasta el punto, que cada molcula altere la distribucin de
carga de las molculas vecinas. Esta interaccin a su vez, puede alterar la
capacidad de las molculas para absorber la radiacin de una determinada longitud
de onda. Como la magnitud de la interaccin depende de la concentracin, la
aparicin de este fenmeno da lugar a las desviaciones de la linealidad entre la
absorbancia y la concentracin (Skoog, 2001; Harris, 1992).
Para tener el mnimo de problemas con las desviaciones, se recomienda trabajar en
el intervalo de concentraciones de 10-2 M a 10-6 M. si se utiliza una tcnica poco
reconocida, hay que cuidar el equilibrio qumico poniendo especial atencin en la
fuerza inica y el pH del sistema, ya que hay muchos compuestos cromforos o
quelatos que presentan equilibrios parciales. Un dato muy importante es que las
mediciones espectrofotomtricas slo son confiables con valores intermedios de
absorbancia, aproximadamente entre 0.187 y 0.824; o en % de T, entre 15 a 65; si
se requiere se puede ampliar esta escala hasta 80 % de T, pero se aumenta el error
fotomtrico (Lycos, 1992; Verde, 1999).
2.2.1.1 Desviaciones reales
Las desviaciones reales provienen de los cambios en el ndice de refraccin del
sistema analtico. Kortum y Sller mencionados por Bermejo (1991) sealan que la
ley de Beer se aplica estrictamente a bajas concentraciones. No es la absortividad
la que es constante e independiente de la concentracin sino la expresin:
a = averd

b
(n2 + 2)2

En donde es el coeficiente de refraccin de la solucin. A concentraciones de 10 -3

o menores, el ndice de refraccin es esencialmente constante, pero a
concentraciones elevadas el ndice de refraccin tiene variaciones considerables y
por lo tanto la absortividad las presenta tambin. Esto no excluye los anlisis
cuantitativos a concentraciones elevadas, pues agrupando las incgnitas mediante
disoluciones estndares o con el uso de curvas de calibracin se puede alcanzar
suficiente exactitud. El efecto del ndice de refraccin puede ser encontrado en
espectrofotometra diferencial de alta absorbancia.
2.2.1.2 Desviaciones Instrumentales
Las desviaciones instrumentales provienen, en primer lugar de la utilizacin de luz
no monocromtica, ya que la pureza espectral del haz de radiacin proveniente de
la fuente, depende del ancho de banda espectral del monocromador. La deduccin

de la ley de Beer supone radiacin monocromtica y los monocromadores en

realidad proporcionan una banda de longitudes de onda.
2.2.1.3 Desviaciones Qumicas
Refiere si alguna reaccin qumica que ocurra en el sistema origina un producto que
absorba ms fuertemente que la sustancia ensayada, a la longitud de onda a que se
hace la medida o longitud de onda analtica, se producir una desviacin positiva.
Si, al contrario, se origina un producto que no absorbe a la longitud de onda
analtica, la concentracin de la sustancia se ver disminuida y se originar una
desviacin negativa.
Las desviaciones de la ley de Beer se designan como positivas o negativas, segn si
la curva observada es cncava hacia arriba o hacia abajo. Debe notarse que no es
necesaria la concordancia con la Ley de Beer para que un sistema absorbente sea
til en el anlisis cuantitativo. La forma de una curva de absorcin puede variar a
veces con los cambios en la concentracin de la solucin, y a menos que se tomen
precauciones en la observacin parecer que la Ley de Beer falla (Swing, 1977).

Figura 1. Ley de Beer (1), (2) desviacin positiva, y (3) desviacin negativa
Fuente: Swing (1977)
2.3 Pigmentos en betarraga
Las betalanas son pigmentos de origen vegetal localizados en hojas, races y
frutos. Qumicamente son molculas hidrosolubles, derivados del cido betalmico
que presentan estructura de glicsidos; sin embargo, por ser metabolitos con alta
sensibilidad qumica su aprovechamiento integral se encuentra limitado ya que se
ven afectadas por la oxidacin promovida por el oxgeno y otros agentes; por tanto,
ello amerita controles enzimticos eficientes, procedimientos adecuados de
extraccin y utilizacin de atmsferas controladas (Odoux y Domnguez-Lpez,
1996; Delgado-Vargas et al., 2000; Strack et al., 2003; Chethana et al., 2007;
Cohen y Saguy, 1980; Huang y Von Elbe, 1985; Moreno-Alvarez et al., 2002).
Las betalanas pertenecen a los cinco aditivos colorantes de origen natural ms
ampliamente utilizados en alimentos, principalmente en productos crnicos a base
de soya, embutidos y productos lcteos (Barrera et al., 1998). Estos metabolitos
son beneficiosos para la salud ya que presentan efectos antimicrobianos (actividad
antiviral y antibacterial), antioxidantes, anticancergenos, intervienen en la
disminucin de los triglicridos, control de la glucemia y contribuyen a combatir la
arteroesclerosis (Joubert, 1993; Kanner et al., 2001; Butera et al., 2002). Poseen
adems un valor importante para la industria como pigmentante natural, en
especial porque los colorantes sintticos son cada vez ms cuestionados por su

vinculacin con numerosos efectos negativos a la salud, aparte de los costos. Las
principales fuentes vegetales de betalanas son la races de Beta vulgaris, el tallo de
Amaranthus y los frutos de las especies del gnero Opuntia.
Las races de remolacha (Beta vulgaris L.) contienen pigmentos del grupo de las
betalanas, que han sido consideradas de gran inters alimentario, destacando las
betacianinas y las betaxantinas, los cuales tienen utilidad como sustitutos de
colorantes artificiales en diversos alimentos, siendo aceptados por la Comunidad
Econmica Europea, donde se les clasifica como rojo remolacha, producido por
deshidratacin y pulverizacin de B. vulgaris (Moreno-lvarez et al., 2002;
Chethana et al., 2007). Estos pigmentos poseen diversas caractersticas
tecnolgicas favorables para la industria alimentaria, como son su solubilidad,
dispersabilidad, fcil incorporacin y capacidad de combinacin con otros
compuestos para dar el color deseado a un gran nmero de alimentos procesados,
principalmente salsas, bebidas carbonatadas, sopas, confitera y productos lcteos
y crnicos (Stintzing y Carle, 2004).
Se clasifican en dos grupos: los rojos o betacianinas y los amarillos o betaxantinas.

Figura 2. Estructuras qumicas de betalanas

Fuente: Zrd y Christinet (2003)
El pigmento principal, la betanina, de color rojo, puede reducirse a amarillo u
oxidarse lentamente a un rojo claro si se encuentran a temperatura ambiente.
Adems, los valores de pH fuertemente alcalinos originan la siguiente reaccin:

RH+ + OH-

R- + H2O

Las betaxantinas estn compuestas por la vulgaxantina I y vulgaxantina II (Nilsson,

1970; citado por Saux, 1980). A pesar de que se encuentran pigmentos similares
en otros vegetales, la betarraga es la nica que contiene este grupo de pigmentos.
Peterson y Joslyn (1960) mencionado por Saux (1980) realizaron un estudio
qumico muy profundo de los pigmentos de la betarraga, en el cual demostraron
por evidencia espectral que la absorcin de la betanina pura no se realiza cerca de
a la regin del ultravioleta; lo que prueba una ausencia total de aromaticidad. Por
otro lado, Nilsson (1970), citado por Saux (1980) identific espectrofometricamente
los colorantes de betarraga, demostrando que el espectro de la fraccin roja tena
su mxima absorcin a 535 nm lo que corresponde a un espectro de betanina pura,

en tanto el espectro de la fraccin amarilla alcanz su mximo en la = 470 nm,

que corresponde a la betaxantina pura; asimismo se ha reportado valores de
540nm y 480nm, para betacianinas y betaxantinas respectivamente.
Segn Fennema (2001), se han encontrado que los espectros de las disoluciones de
betanina a valores de pH comprendidos entre 4 y 7 no cambian y muestran un
mximo de absorbancia de la luz. Por debajo de pH 4, el mximo de absorbancia de
la luz a 537 538 nm. Por debajo de pH 4, el mximo de absorcin se desplaza
hacia longitudes de onda ligeramente ms cortas (535nm a pH 2).

III. MATERIALES Y METODOS

3.1 Procedimiento
Se pes cierta cantidad (10, 30 y 50g) de betarraga pelada, luego fue triturada
en un mortero y posteriormente licuada junto con 100 ml de agua a 70 - 80 C
hasta lograr una mezcla homognea. El licuado fue doblemente filtrado y recibido
en una fiola de 500 ml, la cual se enras con agua, incluyendo el agua en donde
fueron lavados los filtros empleados. Una vez obtenida esta solucin (I), se llev
una alcuota de 20 ml a una fiola de 250ml y se enras (Solucin II).
Posteriormente se realiz medidas de absorbancia en el rango de 400 a 600 nm
con intervalos de 5nm; los valores registrados fueron representados
grficamente en funcin a la absorbancia y la longitud de onda con el fin de
seleccionar la longitud de onda de mxima absorcin. Luego del ploteo se
observ 2 longitudes de onda de mxima absorcin, por tal motivo en la
siguiente etapa, correspondiente a la verificacin de la ley de Lambert - Beer se
hara lecturas a ambas longitudes de onda; para esto, se prepararon soluciones
empleando la solucin I a diferentes concentraciones y se realizaron lecturas de
absorbancia en un espectrofotmetro a las longitudes de onda previamente
seleccionadas. La representacin de Lambert-Beer, A = cl, permiti calcular el
valor del coeficiente de extincin molar, que corresponde a la pendiente de la
recta.
IV. RESULTADOS Y DISCUSION
Determinacin del espectro de absorcin y seleccin de la longitud de
onda de mxima absorcin

Figura 3. Espectro de absorcin de la solucin II de betarraga

Del barrido efectuado en el rango de 400 a 600 nm se puede observar que
existen 2 picos, correspondientes a 475 y 540 nm respectivamente; estos
valores encontrados se encuentran dentro de los rangos reportados por Zrd y
Christinet
(2003)
correspondientes
a
betaxantinas
y
betacianinas
respectivamente, de los cuales las betaxantinas son responsables del amarillo
intenso o amarillos anaranjados con un mximo de absorbancia entre 470 y 486
nm y las betacianinas se encuentran en un rango de 534 a 554 nm.
La finalidad de seleccionar una longitud de mxima absorcin fue de reducir el
margen de error debido a que la absorbancia a esa longitud de onda es
mxima.
Aplicacin de la ley de Lambert-Beer
Experimento 1 (0.02 g/ml)

Figura 4. Concentracin vs. Absorbancia

Para la solucin elaborada a partir de 10 g de betarraga (0.02 g/ml), se observa
(Figura 4) que a 475 nm las absorbancias de las diluciones realizadas mantienen la
linealidad caracterstica de la ley de Beer; en otras palabras, la absorbancia de la
solucin es directamente proporcional a la concentracin; por lo tanto se realizaron
dos experimentos extra con soluciones mas concentradas en funcin a la cantidad

de materia prima empleada para su preparacin con el fin de encontrar la

desviacin de la ley.
Experimento 2 (0.06 g/ml)

Figura 5. Concentracin vs. Absorbancia

En este segundo experimento, empleando una solucin elaborada a partir de 30 g
de betarraga, con el fin de elevar la concentracin a 0.06g/ml; los datos
representados en forma grfica para ambas longitudes de onda corresponden a los
valores ledos por el espectrofotmetro, que no corresponden a todas las diluciones
realizadas, ya que para las dos y tres ultimas diluciones correspondientes a 475 y
540 nm respectivamente, el equipo no fue capaz de leerlas, e informaba que se
encontraban fuera de rango, por tanto ello corresponde a una limitacin
instrumental. Por otro lado, los datos graficados mantienen la linealidad de la ley de
Beer, y presentan pendientes particulares para cada una de las longitudes de onda.
Experimento 3 (0.1 g/ml)

Figura 6. Concentracin vs. Absorbancia

Al igual que en el experimento anterior, aqu (Figura 6) no son representables las
lecturas correspondientes a las tres y cuatro ltimas diluciones realizadas a 475 y
540 nm respectivamente, debido a la misma razn expuesta anteriormente.
Asimismo, al ser representados los datos en forma grfica, se aprecia el
cumplimiento de la ley de Beer.
En forma general se observa que los datos representados grficamente para las 3
soluciones (0.02, 0.06, 0.1 g/ml) cumplen la linealidad caracterstica de la ley de
Beer; adems, las limitaciones del equipo no permiten tener un panorama general
de lo que sucede con la absorbancia a las otras diluciones. Para la representacin

grfica de estas absorbancias es necesario hacer diluciones, y multiplicar estas

lecturas registradas a manera de extrapolarlas y representarlas grficamente hasta
encontrar una desviacin en la recta.
El valor de la pendiente de las grficas que se rigen por la ley de Beer depende de
las unidades en que la concentracin es medida y sus unidades son la reciproca de
la unidad de concentracin. En todo caso, a pesar que las grficas no estn en
funcin de la concentracin, sino en funcin de los mililitros de solucin, en forma
prctica los valores de las pendientes equivaldran al coeficiente de extincin molar;
se observa que en forma independiente (por experimento) las pendientes de la
rectas respectivas, varan en funcin a la longitud de onda, as como en funcin a la
concentracin; asimismo, a las mismas longitudes de onda las pendientes en cada
experimento son diferentes.

V. CONCLUSIONES

Se encontraron dos longitudes de onda de mxima absorcin entre 400 y

600 nm para la solucin II de betarraga equivalentes a 475 y 540nm.
El cumplimiento de la ley de Lambert-Beer se verific en los tres
experimentos realizados con los valores que el espectrofotmetro fue capaz
de leer, encontrando que se mantuvo una linealidad; sin embargo se
desconoce si se da una desviacin a la concentracin de las diluciones que el
equipo fue incapaz de leer.
Las pendientes de las rectas generadas a cada una de las longitudes de onda
en estudio en los tres experimentos realizados, varan tanto en funcin de la
concentracin como de la longitud de onda.

VI. BIBLIOGRAFIA
[1]

Barrera, F.; Reynoso, C.; Mejia, E. 1998. Estabilidad de betalainas

extraidas del garambullo (Myrtillocactus geometrizans). Food Sci. Techn.
Int. 4: 115-120.

[2]

Bermejo, M. (1991). Qumica analtica general, cuantitativa e instrumental.

Volumen 2. Editorial paraninfo S.A. Espaa.

[3]

Butera, D.; Tesoeire, L.; Di Gaudio, F.; Bongiorno, A.; Allegra, M.; Pintaudi,
A.; Kohen, R.; Livera, M. 2002. Antioxidant activities of sicilian pear
(Opuntia ficus indica) fruit extracts and reducing properties of betalains:
betanin and indicaxanthin. J. Agric. Food Chem. 50:6895-6901.

[4]

Chethana, S.; Nayak, C.; Raghavarao, K. 2007. Aqueous two phase

extraction for purification and concentration of betalains. Journal of Food
Engineering 81: 679687.

[5]

Cohen, E. y Y. Saguy. 1980. Effect of water activity and moisture content

on the stability of Beet powder pigments. J. Food Sci. 48:703-707. 1983.

[6]

Day, R.; Underwood, A. (1989). Qumica Analtica Cuantitativa. 5ta

edicin. Prentice Hill Hispanoamrica S.A. Mxico.

[7]

Delgado-Vargas, F., Jimnez, A.; Paredes-Lpez, O. 2000. Natural

Pigments: Carotenoids, Anthocyanins and Betalains-Characteristics,
Biosynthesis, Processing, and Stability. Crit. Rev. Food Sci. Nutr.
40(3):173-289.

[8]

Daz, N.; Brcena, J.; Fernndez, E.; Galvn, A.; Jorrn, J.; Peinado, J.;
Melndez-Valds, F.; Tnez, I. 2004. Espectrofometra: Espectros de
absorcin y cuantificacin colorimtrica de biomolculas. Departamento de
Bioqumica y Biologa Molecular. Universidad de Cordoba. Cordoba,
Espaa.

[9]

Fennema, O. 1993. Qumica de los alimentos. Editorial Acribia Zaragoza

Espaa.

[10] Harris, D. 1992. Anlisis

Iberoamericana, Mxico.

quimico

cuantitativo.

Grupo

Editorial

[11] Huang, A.; Von Elbe, J. 1985. Kinetics of the degradation and regeneration
of Betanine. J. Food Sci. 50:1115-1120.
[12] Joubert, E. 1993. Processing of the fruit of five pirickly pear cultivars
Brown in South Africa. Int. Food Sci. Techn. 28(4): 337 387.
[13] Kanner, J.; Harel, S.; Granit, R. 2001. Betalains: A new class of dietary
cationized antioxidants. J. Agric. Food Chem. 49: 5178-5185.
[14] Lycos, P. (1992). The Beer Lambert Law Revisited a Development
Without Calculus. J. Chem. Educ. 69: 730-732.
[15] Moreno-Alvarez, M.; Viloria-Matos, A.; Beln, D. 2002. Degradacin de
betalanas en remolacha (Beta vulgarisL): Estudio cintico. Revista
Cientfica FCV-LUZ XII (2): 133-136.
[16] Odoux, E.; Dominguez-Lopez, A. 1996. Le figuier de barbarie: une source
industrielle de betalasines. 56(1): 61-78.
[17] Saux, L. 1980. Extraccin de colorantes a partir de Betarraga (Beta
vulgaris). Tesis para optar el ttulo de Ingeniero en Industrias Alimentarias
UNALM. Lima, Per.
[18] Skoog, D. (2001). Principios de Anlisis Instrumental. Quinta edicin.
Editorial Mc Graw Hill. Madrid, Espaa.
[19] Stintzing, F.; Carle, R. 2004. Functional properties of anthocyanins and
betalains in plants, food, and in human nutrition. Trends in Food Science &
Technology 15 (2004) 1938.
[20] Strack, D.; Vogt. T.; Schliemann, W. 2003. Recent advances in betalain
research. Phytochemistry 62: 247-269.
[21] Swing, H. 1977. Mtodos instrumentales de anlisis qumicos. Editorial Mc
Graw Hill B.Y.
[22] Universidad Nacional de Colombia. 2005. Curso virtual de Qumica
Analtica,
Captulos
2
y
3.
Disponible
en:
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap09/
05_02_01.htm (Consultado el 26 de Setiembre de 2008).
[23] Verde, C.; Escamilla, H; Reyes, D. (1999). Manual de qumica analtica.
Primera Impresin. Universidad Autnoma Metropolitana, Mxico. 125 p.
[24] Zrd, J.; Christinet, L. 2003. BETALAIN PIGMENTS. Laboratory of Plant Cell
Genetics, Department of Plant Molecular Biology. Universit de Lausanne,
Switzerland.

ANEXOS

Anexo 1. Datos experimentales para graficar el espectro de absorcin entre 400 y

600 nm

400
405
410
415
420
425
430
435
440
445
450
455
460
465
470
475
480
485
490
495
500
505
510
515
520
525
530

Absorbancia
0,044
0,045
0,048
0,066
0,071
0,086
0,099
0,110
0,120
0,126
0,132
0,136
0,140
0,143
0,146
0,149
0,142
0,138
0,126
0,118
0,112
0,112
0,115
0,121
0,128
0,134
0,136

535
540
545
550
555
560
565
570
575
580
585
590
595
600

0,137
0,137
0,133
0,123
0,112
0,100
0,086
0,069
0,052
0,037
0,022
0,010
0,001
0,000

Anexo 2. Datos experimentales para verificacin de la ley de Beer

Gramos de
betarraga

10

30

50

N
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
7
1
2
3
4
5
6
7
8

SOLUCIONES
Relacin
Colorante(ml)
Agua (ml)
0
10
2
8
4
6
6
4
8
2
10
0
0
10
1
9
2
8
3
7
4
6
7
3
10
0
0
10
1
9
2
8
3
7
4
6
5
5
8
2
10
0

F.R.: FUERA DE RANGO

ABSORBANCIAS
475
0.000
0.415
0.833
1.254
1.668
2.103
0
0.507
1.000
1.503
2.000
F.R.
F.R.
0
0.635
1.301
1.935
2.549
F.R.
F.R.
F.R.

540

0
0.776
1.503
2.231
F.R.
F.R.
F.R.
0
0.967
1.963
2.855
F.R.
F.R.
F.R.
F.R.