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En vue de l'obtention du

DOCTORAT DE L'UNIVERSIT DE TOULOUSE


Dlivr par :
Institut National Polytechnique de Toulouse (INP Toulouse)
Discipline ou spcialit :
Hydrologie, Hydrochimie, Sols, Environnement

Prsente et soutenue par :


Mme LOUBNA EL FELS
le samedi 20 dcembre 2014

Titre :
SUIVI PHYSICO-CHIMIQUE, MICROBIOLOGIQUE ET
ECOTOXICOLOGIQUE DU COMPOSTAGE DE BOUES DE STEP
MELANGEES A DES DECHETS DE PALMIER: VALIDATION DE
NOUVEAUX INDICES DE MATURITE
Ecole doctorale :
Sciences de l'Univers de l'Environnement et de l'Espace (SDUEE)
Unit de recherche :
Ecologie Fonctionnelle (ECOLAB)
Directeur(s) de Thse :
M. ERIC PINELLI
M. MOHAMED HAFIDI

Rapporteurs :
M. MOHAMMED RIHANI, UNIV. CHOUAB DOUKKALI - EL JADIDA
M. RACHID MRABET, INSTITUT NAT. DE LA RECH. AGRONO. RABAT

Membre(s) du jury :
M. ANDR AMBLES, UNIVERSITE DE POITIERS, Prsident
M. ERIC PINELLI, INP TOULOUSE, Membre
M. MOHAMED HAFIDI, UNIV. DE CADI AYYAD MARRAKECH MAROC, Membre
M. YEDIR OUHDOUCH, UNIV. DE CADI AYYAD MARRAKECH MAROC, Membre

Avant Propos

FICHE PRESENTATIVE DE LA THESE


Cette thse fait lobjet dune cotutelle au sein du Laboratoire Ecologie et Environnement
(L2E) (Unit associe au CNRST, URAC32), Facult des Sciences Semlalia, Universit Cadi
Ayyad de Marrakech sous la direction du Professeur Mohamed HAFIDI, conjointement avec
le Laboratoire Ecolab (UMR 5245, CNRS-INPT-UPS), Institut National Polytechnique Ecole
Nationale Suprieure Agronomique de Toulouse ENSAT, INPT sous la direction du
Professeur Eric PINELLI.

Nom et prnom de lauteur : Loubna EL FELS


Intitul du travail :
Suivi physico-chimique, microbiologique et cotoxicologique du compostage de boues de
STEP mlanges des dchets de palmier: validation de nouveaux indices de maturit.

Directeurs de thse :
- Nom, Prnom: Professeur Mohamed HAFIDI.
Laboratoire Ecologie et Environnement (L2E) (Unit associe au CNRST, URAC32), Facult
des Sciences Semlalia, Universit Cadi Ayyad Marrakech, Maroc.
- Nom, Prnom: Professeur Eric PINELLI
Laboratoire Ecolab (UMR 5245, CNRS-INPT-UPS), Institut National Polytechnique Ecole
Nationale Suprieure Agronomique ENSAT, INP, Toulouse, France.
Laboratoires o les travaux de cette thse ont t raliss :
- Laboratoire Ecologie et Environnement (L2E) (Unit associe au CNRST, URAC32),
Facult des Sciences Semlalia, Universit Cadi Ayyad, Marrakech-Maroc.
- Laboratoire Biologie et Biotechnologie des Microorganismes, Facult des Sciences
Semlalia, Universit Cadi Ayyad, Marrakech- Maroc.

ii

- Laboratoire Physico-Chimique des Matriaux et Environnement (LPCME), Facult des


Sciences Semlalia, Universit Cadi Ayyad, Marrakech- Maroc.
- Laboratoire Ecolab (UMR 5245, CNRS-INPT-UPS), Ecole Nationale Suprieure
Agronomique de Toulouse ENSAT, Institut National Polytechnique de Toulouse, France.
- Laboratoire Synthse et Raction des Substances Naturelles (SRSN) lUniversit de
Poitiers, France.

Cadre de Coopration-soutien financier :


-URAC 32 (Unit associe au CNRST)
- Bourse dExcellence Eiffle du gouvernement Franais N de dossier 783997j

Date du commencement des travaux de recherche: Octobre 2013.

Publications et communications aux quelles ce travail a donn lieu :

Publications :

1. El Fels L., Zamama M., El Asli A., Hafidi M. (2014): Assessment of


biotransformation of organic matter during co-composting of sewage sludgelignocelullosic waste by chemical FTIR analyses and phytotoxicity tests.
International Biodeterioration and Biodegradation, 87, 128-137.
2. El Fels L., Lemee L., Ambles A., Hafidi M. (2014): Identification and
biotransformation of lignin compounds during co-composting of sewage sludgepalm tree waste using pyrolysis-GC/MS. International Biodeterioration and
Biodegradation, 92, 26-35.
3. El Fels L., EL Ouaqoudi F. Z., Lemee L., Winterton P., Merlina G., Ouhdouch Y.,
Pinelli E., Ambles A., Hafidi M. (2014): Identification and assay of the microbial
fatty acids during co-composting of active sewage sludge with palm waste by
TMAH-thermochemolysis coupled with GC-MS. Chemistry and Ecology.
DOI:10.1080/02757540.2014.932782.

iii

4. El Fels L., El Ouaqoudi F.Z., Barje F., Hafidi M., Ouhdouche Y. (2014): Two
cultures approaches used to determine the co-composting stages by assess of the
total microflora change during sewage sludge and date palm waste co-composting.
Journal of Environmental health Science and Engineering 12:132. DOI:
10.1186/s40201-014-0132-4.
5. El Ouaqoudi F.Z., El Fels L., Winterton P, Lemee L, Ambles A, Hafidi M, (2014),
Study of humic acids during composting of ligno-cellulose waste by
spectroscopic (FTIR) and thermal (TGA/TDA) analysis. Compost Science and
Utilization, 22(3), 188-198.
6. El Fels L., El Asli A., Ouhdouch Y., Hafidi M. (2014): Effect of co-composting
on helminth eggs removal. Environmental Engineering and Management
(accepted, in press).
7. El Fels L., Ouhdouch Y., Hafidi M. (2014): Use of the co-composting time extract
agar to evaluate the microbial community changes during the co-composting of
activated sludge and date palm waste. International Journal of
Recycling of Organic Waste in Agriculture (accepted, in press).

8. El Fels L., Hafidi M., Silvestre J., Kallerhoff J., Merlina G., Pinelli E. (2014): The
efficiency of co-composting process to remove genotoxicity from sewage sludge
containing hexavalent chromium. Ecological Engineering (submitted).
9. El Fels L., Lemee L., Geffroy C., Ambles A., Hafidi M. (2014): Transformation
of steroid compounds during co-composting of date palm-sewage sludge as
evidenced by pyrolysis-gas chromatography-mass spectrometry coupling.
Ecological Engineering (submitted).
10. El Fels L., Hafidi M., Ouhdouch Y. (2014): Screening for antimicrobial
microflora from active sludge and date palm waste compost and actinobacteria
sanitization activities. Environmental Technology (submitted).

iv

Communications :

1. El Fels L., Lemee L., Winterton P., Merlina G., Ouhdouch Y., Zamama M., Pinelli
E., Ambles A., Hafidi M. Assessment of microbial community signatures during
co-composting of active sewage sludge and lignocellulosic waste by TMAHthermochemolysis coupled with gas chromatography-mass spectrometry. Eurasia
waste management symposium, 28-30 April, Istanbul, 2014 Turkey.
2. Elouaqoudi F.Z., El Fels L., Agronomic evaluation of the effect of composts
resulting from treatment by composting of a lignocellulosic substrate. Eurasia
waste management symposium., 28-30 April, Istanbul, 2014 Turkey.
3. El Fels L., Ouhdouch Y., Lemee L., Pinelli E., Ambels A., Hafidi M. BioTransformation of Lignin compounds during co-composting of sewage sludge-date
palm waste using pyrolysis-GC/MS technique and assessment of maturity of
compost. 4eme dition du congrs international : Eau, Dchets et Environnement.,
18- 20 Dcembre, Agadir, 2013- Maroc.
4. El Fels L., El Assli A., Ouhdouch Y., Hafidi M. Monitoring of parasitolological
contamination of compost product and efficiency of co-composting process
removal of sludge helminthes eggs. 4eme dition du congrs international: Eau,
Dchets et Environnement., 18- 20 Dcembre, Agadir, 2013- Maroc.
5. El Fels L., Boukeskasse A., Chafii K., Ouhdouch Y., Hafidi M. Indigenous
microflora evolution during co-composting of sewage sludge and date palm waste.
4eme dition du congrs international : Eau, Dchets et Environnement., 18- 20
Dcembre, Agadir, 2013- Maroc.
6. El Fels L., Ouhdouch Y., Lemee L., Ambels A., Hafidi M. Characterization of
organic compounds by pyrolysis and assessment of maturity of compost sludge of
step. The Second Edition of the International Congress :"Microbial Biotechnology
for Development" (MICROBIOD 2) 02-04 October, Marrakech, 2012-Morocco.
7. El Hassan C., El Fels L., Ouhdouch Y., Hafidi M. Traitement de boues issues des
bassins dvaporation des rejets dhuileries dolives par le procd de compostage.
The Second Edition of the International Congress: "Microbial Biotechnology for
Development" (MICROBIOD 2) 02-04 October, Marrakech, 2012-Morocco.

8. El Fels L., Ouhdouche Y., Duponnois R., Hafidi M. Evaluation de la phytotoxicit


au cours de la biotransformation arobie des boues de step (Boues actives). Third
International Symposium of Microbial Biotechnologies Technological
Innovations & Valorization of Biomolecules CIBM, 15 to 17 March, Tangier,
2012- Morocco.
9. El Fels L., Seyni Hasimi M., Ouhdouch Y., Duponnois R., Amblse A., Lemee L.,
Andr, Moukrim A., Hafidi M. Biological breakdown during composting: case of
sludge from Marrakesh waste water purification station. Water and Environment
International conference "WATEIC-2011. 26-29 October, Marrakech, 2011,
Maroc.
10. El Fels L., Meddich A., Duponnois R., Ambles A., Lemee L., Hafidi
M. Traitement de boues de step par la filire de compostage. La 6me Edition des
Journes Internationales des Gosciences de lEnvironnement. 21-23 Juin, Oujda,
2011, Maroc.
11. El Fels L., Hafidi M. Gestion dassainissement liquid et puration des eaux uses
au Maroc. Colloque Scientifique International, 21-25 Avril, 2011, Togo.
12. El Fels L., Meddich A., Duponnois R., Moukrim A., Hafidi M. Traitement et
valorisation de boues de step par la filire de compostage. 1er workshop MarocoTunisien Traitement et valorisation des eaux uses et des dchets organiques
biodgradables. 21-23 Mars, Casablanca, 2011, Maroc.

vi

Rsum
Le traitement de boues de station d'puration (Boues actives de Marrakech) en mlange avec dchets
verts (Palmier dattier) selon deux mlanges dont les proportions : A (1/3 Boues + 2/3 Dchets de
palmier) et B (1/2 Boues + 1/2 Dchets de palmier), a t effectu par la filire du compostage,
pendant six mois. Au cours du co-compostage, lintense activit microbienne sest traduite par une
augmentation de temprature (autour 65 C) au cours des premires semaines (phase thermophile) et
un taux de dcomposition final de lordre de 40%. Aprs six mois de co-compostage, le compost final
est caractris par un rapport C/N voisin de 10, un rapport de NH4+/NO3- < 1, un pH autour de la
neutralit signe de maturit des composts. Lanalyse FTIR a montr une diminution de l'absorbance
des bandes aliphatiques et l'augmentation de la structure de bandes d'absorbance aromatiques refltent
l'tat d'avancement du processus d'humification.
Le taux dabattement des lipides totaux est de lordre de 43%. Les esters mthyliques dacide gras
(FAMEs) des Gram-positif (i,C15 :0) ont augment durant la phase thermophile. Les FAMEs
dorigine non spcifique (C6 :0, C14 :0) ont connu une intense diminution, les FAMEs de bactries
non spcifiques reprsentent une grande teneur durant la phase thermophile. Lindice CPI a augment
la fin du co-compostage indiquant lenrichissement du compost en FAMEs dorigine vgtale. Les
principaux composs ligneux identifis, au cours du co-compostage, par Py-GC-MS, sont classs en
deux groupes. Le premier est constitu de 7 composs dont la teneur diminue au cours du cocompostage, parmi lesquels : Tolune, 2,4-dimthylbenzne, thylbenzne, Styrne, 1-thyl-2mthylbenzne, 4-mthylphnol et 2-mthylnaphthalne. Le deuxime groupe est constitu de 4
composs qui augmentent au cours du co-compostage : phnol, benzofuran, thylmthoxyphnol et
dimthoxyphnol. Les principaux strodes identifis sont les C27-C29 sternes, stanols, 5-cholesta-3one, cholesta-3,5-dine et 2 thiostranes. A lexception des thiosteranes et quelques composs de C27C29 cholestenes la concentration relative des stroides diminue au cours du processus suit leur attaque
microbien. Labattement total de la teneur des strodes est corrl positivement avec les indicateurs
de maturit du compost (C/N et NH4+/NO3-) ce qui ouvre la voie une ventuelle utilisation des
strodes comme indicateur de dpollution et de maturit de compost.
12 isolats dactinomyctes ayant une activit antimicrobienne vis--vis dun large spectre des germes
pathognes ont t isols sur le milieu slectif CTEA. Le degr dhyginisation est confirm par la
diminution de la concentration des coliformes fcaux et totaux, et labattement des ufs dhelminthes
identifis (Ascaris sp., Capillaria sp., et Trichuris sp.) vers la fin du co-compostage.
La phytotoxicit, dtermine par leffet des extraits hydrosolubles diffrents stades de cocompostage sur la germination et la croissance des radicules (Navet, Cresson, Laitue, Luzerne), a
diminu et lindice de germination dpasse 100%, aprs six mois de co-compostage. La gnotoxicit
du chrome hexavalent (Cr(VI)) du substrat de co-compostage est corrle positivement avec la
frquence des micronoyaux (MN). Aprs six mois de co-compostage le taux des MN diminue avec un
taux dabattement de 70,4% et 77,2% avec labattement de la concentration du Cr(VI) avec 58 et
58,6% respectivement pour le mlange A et B. Ceci ouvrira la voie dutilisation de cet indice comme
un indice de maturit des composts.
La diminution de la phytotoxicit et la gnotoxict au cours du co-compostage confirme ltat de
stabilisation et de la maturit des co-composts, ce qui pemettra lpandage de ces composts en tant
quamendement organique des sols sans risque de contamination du systme sol-plante.

Mots cls : Co-compostage, Boues actives, Dchets de palmier, FAMEs, Lignine, Stroides,
Phytotoxicit, Gnotoxicit, Oeufs dhelminthes, Champignons thermotolrants, Actinomyctes,
FTIR, TMAH-Py-GC-MS, Indices de maturit.

vii

Abstract
The co-composting of activated sludge and lignocellulose waste (palm tree waste) was monitored to
study the behaviour of two mixtures, referred to as A (1/3 sludge + 2/3 palm waste) and B (1/2 sludge
+ 1/2 waste palm) for 6 months. The biotransformation was evaluated by physicochemical and
spectroscopic analyses. The thermophilic phase is characterized by a rise in temperature, which peaked
at 65C. This is the result of intense microbial activities. The final composts exhibited a higher degree
of decomposition than the controls as shown by a decomposition rate of about 40%, decrease of C/N
ratio to around 10 and NH4+/NO3- ratio below 1. The decrease of aliphatic absorbance bands and the
increase of aromatic absorbance bands follow the progress of the humification process. Total
extractable lipid was decreased by 43%. The fatty acid methyl esters (FAMEs) from Gram-positive
bacteria (i, C15: 0) increased during the thermophilic phase. FAMEs from non-spcific origin (C6 :0,
C14 :0) exhibited a decrease toward the end of co-compostin, linear FAMEs from non-specific
bacteria underwent a decrease during co-composting. The CPI index thus increased at the end of the
composting process, indicating that the final product was proportionally richer in fatty acids of plant
origin. Two lignin groups were distinguished by Py-GC-MS. Group 1 contained toluene, 2,4dimethylbenzene, ethylbenzene, styrene, 1-ethyl-2-methylbenzene, 4-methylphenol and 2methylnaphthalene; their relative proportions decreased during co-composting. A second group of 4
components showed concentrations that increased with co-composting time: phenol, benzofuran,
ethylmethoxyphenol and dimethoxyphenol. The main steroids identified were C27-C29 sterenes and
stanols, 5-cholesta-3-one, cholesta-3,5-diene and 2 thiosteranes. Except for thiosteranes and some of
the C27-C29 cholestenes, the relative concentrations decreased during co-composting due to microbial
degradation. The changes in steroids during co-composting, was positively correlated with the
physico-chemical parameters of mature compost, especially C/N and NH4+/NO3- ratios, opening the
way for the use of steroids as indicators of pollution and compost maturity.
On the selective CTEA medium, 12 active strains of isolated actinobacteria presented a suppressive
action against various pathogens. This may justify that a biotic factor is also an important factor
contributing to making co-composting substrates hygienic. The degree hygiene reached is confirmed
by the reduction in the faecal and total coliforms, and by the abatement of identified helminth eggs
(Ascaris sp., Capillaria sp., and Trichuris sp.) towards the end of the process. The phytotoxicity
determined by the effect of aqueous extract, at various stages of the co-composting, performed by
monitoring the number of germinated seeds and the rootlets growth of turnip, watercress, alfalfa, and
lettuce was decreased, and the growth of radicals that have a germination index that exceeds 100%
after six months of co-composting. Hexavalent chromium (Cr(VI)) genotoxicity showed a positive
correlation with micronucleus (MN) frequency. After six months of co-composting, the MN rate
decreased significantly by 70.4 and 77.2% with decreasing Cr(VI) concentration with 58 and 58.6%,
for mixtures A and B respectively. That indicates their suitability for use as a maturity index. During
co-composting the abatement rate of phytotoxicity and genotoxicity confirme the maturation and
stabilization degree of co-composting end products which encourages their recycling in agriculture as
a fertilizer for the soil without any contamination of the soil-plant system.

Key words: Co-composting, Activated sludge, Date palm waste, FAMEs, Lignin, Steroids,
Phytotoxicity, Genotoxicity, Helminth eggs, Thermotolerant fungi, Actinobacteria, FTIR, TMAH-PyGC-MS, Maturity Index.

viii

Remerciements

Au nom de ce travail, ralis au Laboratoire Ecologie et Environnement (L2E)


CNRST, URAC32, Facult des Sciences Semlalia, Marrakech sous la direction du Professeur
Mohamed HAFIDI, conjointement avec le Laboratoire Ecolab (UMR 5245, CNRS-INPTUPS), Ecole Nationale Suprieure Agronomique de Toulouse ENSAT, INPT sous la direction
du Professeur Eric PINELLI, je tiens remercier toutes les personnes ayant contribu sa
ralisation.
J'exprime mes remerciements au professeur Mohamed HAFIDI, qui a accept de
m'accueillir au sein de son laboratoire. Je suis trs sensible lhonneur quil ma fait pour
diriger mon travail. Je souhaiterais ici lui tmoigner ma sincre considration pour tous les
conseils et les remarques objectives et ses orientations pour faire avancer ce travail et pour
lautonomie qua dveloppe en moi. Je suis aussi reconnaissante pour sa constante
disponibilit et son profond dvouement.
Je tiens remercier professeur Eric PINELLI davoir accept maccueillir dans son
laboratoire Ecolab Toulouse et dirig mon travail. Quil trouve ici lexpression de mes vifs
remerciements surtout pour sa gentillesse et pour son soutien.
Je tiens galement remercier et exprimer ma sincre gratitude au professeur Yedir
OUHDOUCH professeur de l'enseignement suprieur la Facult des Sciences Semlalia, pour
son encadrement, ses conseils ses encouragements et aussi pour le temps consacr pour
lavancement de mon travail. Quil trouve ici toute ma reconnaissance surtout la source
intarissable quil est.
J'adresse mes remerciements aux professeurs de lenseignement suprieur, Rachid
MRABET et Mohammed RIHANI pour mavoir honor de leur prsence en acceptant dtre
rapporteurs de ce travail et de siger au jury de cette thse. Quils trouvent ici lexpression de
mes vifs remerciements.
Mes remerciements s'adressent galement au professeur Andr AMBLES, professeur
lUniversit de Poitiers (France), pour lintrt quil a toujours manifest envers mes travaux
de recherche ainsi que pour ses qualits humaines dignes destime. Quil trouve ici toute ma
reconnaissance de mavoir accueilli au sein de son laboratoire et avoir accept de prsider le
jury de cette thse.
Je suis aussi reconnaissante aux conseils et laide du professeur Mohamed
ZAMAMA professeur la Facult des Sciences Semlalia, pour son intrt quil a apport
avancer mon travail. Je tiens lui exprimer ma gratitude pour son endurance, sa serviabilit et
surtout son aide.
Je tiens remercier galement Mr Georges MERLINA, Ingnieur de recherche - HDR
lENSAT, Mr Jrme Silvester Ingnieur de recherche lENSAT, et Mr Laurent LEMEE
Ingnieur de recherche lUniversit de Poitiers pour leur contribution et leur disponibilit
pour lavancement de ce travail.
Je tiens galement remercier le gouvernement franais pour le soutien financier :
Bourse dExcellence Eiffle N de dossier 783997j.
J'adresse un remerciement particulier pour toute lquipe pdagogique de ma
formation de Master Environnement et Sant Facult des Sciences Agadir (Universit Ibn
Zohr) ainsi qu mon encadrant en master Pr Moukrim Abdellatif, auxquels je dois mon
initiation la recherche.
Je ne pourrai terminer mes remerciements sans y associer mes parents, mon frre, mes
deux surs, aussi mes collgues du Laboratoire Ecologier et Environnementet mes ami(e)s
dEcolab, merci de mavoir toujours soutenu.

ix

SOMMAIRE
Avant Propos.......................................................................................................................................... ii
Rsum ................................................................................................................................................. vii
Abstract ............................................................................................................................................... viii
Remerciements...................................................................................................................................... ix
Liste des Figures ................................................................................................................................. xvi
Liste des Tableaux .............................................................................................................................. xix
Liste des Abrviations ........................................................................................................................ xxi
Introduction Gnrale........................................................................................................................... 1
Revue Bibliographique.......................................................................................................................... 9
I. Assainissement liquide au Maroc....................................................................................................... 10
I.1. Les filires de traitement des eaux uses ............................................................................ 10
I.1.1. Prtraitement .................................................................................................................... 10
I.1.2. Traitement primaire.......................................................................................................... 10
I.1.3. Traitement secondaire ...................................................................................................... 10
I.1.3.1. Traitement physico-chimique....................................................................................... 10
I.1.3.2. Traitement biologique ................................................................................................... 11
I.1.4. Traitement tertiaire ........................................................................................................... 11
II. Situation des traitements des eaux uses au Maroc .......................................................................... 12
III. Etat des lieux des boues de STEP.................................................................................................... 17
III.1. Composition de boues de STEP ....................................................................................... 19
III.1.1 Elments fertilisants ....................................................................................................... 19
III.1.2. Elmenst traces mtalliques .......................................................................................... 19
III.1.3. Polluants organiques et mergents ................................................................................ 20
III.1. 4. les germes, les parasites et les risques sanitaires ......................................................... 25
III. 1. 4. 1. Mthodes danalyse des parasites et des germes dans la boue ................................ 30
III. 1.4.2. Les outils dhyginisation.......................................................................................... 32
III. 2. Principales filires de traitements de boues de STEP...................................................... 34
IV. Aperu sur la filire de compostage ................................................................................................ 36
IV.1. Lutilit de filire de compostage..................................................................................... 36
IV.2. Principaux paramtres physico-chimiques de fonctionnement de compostage ............... 37
IV.3. La microbiologie du compostage et sa contribution la dtermination des phases de
compostage ................................................................................................................................ 41
IV.4. Critres de maturit des composts .................................................................................... 44
IV. 4.1. Les critres empiriques................................................................................................. 45
x

IV.4.2. Indicateurs physiques et analyses spectroscopiques ..................................................... 45


IV.4.3. Indicateurs chimiques .................................................................................................... 45
IV.4.4. Indicateurs biologiques ................................................................................................. 46
IV.4.4 .1. Test respiromtrique et dauto-chauffement............................................................ 47
IV.4.4 .2. Phytotoxicit ............................................................................................................. 47
IV. 4. 4. 3. Test de Gnotoxicit................................................................................................ 48
IV.4.4 .4. Marquage 32Phosphore des adduits lADN............................................................. 48
IV.4.4.5. Mesure des dommages lADN par lessai comet .................................................... 48
IV.4.4.6. Mesure de la 8-hydroxydoxyguanosine .................................................................... 49
IV.4. 4.7. Modifications des quantits et des squences dADN par cytomtrie en flux et AFLP
................................................................................................................................................... 49
IV.4.4 .8. Micronoyaux ............................................................................................................. 50
IV.5. Identification et volution des composs organiques au cours du compostage ............... 51
IV.5.1. Les polysaccharides....................................................................................................... 52
IV.5.2. Les composs organiques azots ................................................................................... 53
IV.5.3. La lignine ...................................................................................................................... 53
IV.5.4. Les lipides ..................................................................................................................... 56
IV.5.5. Les hydrocarbures aliphatiques et lhydrophobicit...................................................... 58
IV.5.6. Activit enzymatique..................................................................................................... 60
IV.5.7. Evolution de la composition biochimique de la matire organique des composts et
formation des substances humiques .......................................................................................... 61
IV.5.8. Pouvoir de complexation des polluants par les substances humiques ........................... 65
V. Les normes environnementales ........................................................................................................ 66
V.1. Les normes et rglementation d'utilisation des boues de STEP ........................................ 66
V.2. La normalisation et rglementation du compost................................................................ 67
Partie I .................................................................................................................................................. 71
Chapitre 1 : Evaluation de la biotransformation de la fraction organique et minrale lors du
co-compostage de boues d'puration- dchets de palmier ........................................................... 72
1. Introduction ....................................................................................................................................... 72
2. Matriel et Mthodes ........................................................................................................................ 75
2.1. Substrats utiliss pour le co-compostage ............................................................................ 75
2.2. Description de la station de boues actives de Marrakech ................................................. 75
2.3. Production de dchets de palmier de Marrakech ................................................................ 76
2.4. Essais de co-compostage .................................................................................................... 76
2.5. Mthode dchantillonnage et les paramtres physico-chimiqes analyss ......................... 77
xi

2.5.1. Temprature..................................................................................................................... 78
2.5.2. Mesure du pH .................................................................................................................. 78
2.5.3. Taux d'humidit ............................................................................................................... 79
2.5.4. Taux de cendres ............................................................................................................... 79
2.5.5. Taux de dcomposition.................................................................................................... 79
2.5.6. Dosage de lAzote Kjeldahl............................................................................................. 79
2.5.7. Dosage de lazote ammoniacal (N-NH4+)........................................................................ 80
2.5.8. Dosage de lazote nitrique (N-NO3-) ............................................................................... 80
2.5.9. Dosage de carbone organique total.................................................................................. 81
2.5.10. Extraction et fractionnement des substances humiques................................................. 81
2.5.11. Dosage des lments traces mtalliques totaux (ETM) ................................................. 82
2. 5. 12. Analyse par spectroscopie d'absorption infrarouge (FTIR) ........................................ 82
2.5.13. Traitement thermique .................................................................................................... 83
2.5.14. Analyse chimique par Fluorescence X .......................................................................... 83
2.5.15. Analyse par DRX .......................................................................................................... 83
3. Analyses statistiques.......................................................................................................................... 83
4. Rsultats et Discussion ...................................................................................................................... 84
4.1. Evolution des paramtres physico-chimiques .................................................................... 84
4. 2. Processus dhumification au cours du co-compostage ...................................................... 87
4.3. Etude de la composition des lments majeurs par fluorescence X ................................... 88
4. 4. Analyse minralogique par DRX ...................................................................................... 89
4. 5. Les analyses spectroscopie infra-rouge ............................................................................. 92
4. 6. Spectroscopie infrarouge transforme de Fourier (FTIR) des chantillons calcins ...... 95
4.7. Analyse des teneurs des mtaux lourds totaux ................................................................... 99
5. Analyses statistiques........................................................................................................................ 100
6. Conclusion ....................................................................................................................................... 101
Chapitre 2: Evolution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au cours du cocompostage ..................................................................................................................................... 103
1. Introduction ..................................................................................................................................... 103
2. Matriel et Mthodes ....................................................................................................................... 104
2.1. Extraction des lipides totaux ............................................................................................ 104
2.2. Thermochimiolyse analytique (TMAH-Py-GC-MS) ....................................................... 104
2.3. Analyses statistiques......................................................................................................... 105
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 105

xii

3.1. Evolution des lipides totaux ............................................................................................. 105


3. 2. Identification et suivi des FAMEs par TMAH-Py-GC-MS, au cours du co-compostage 106
3.2.1. Evolution de FAMEs ..................................................................................................... 106
3.2.2. Evolution des acides gras (FAMEs) saturs chaine carbone paire (chaines courtes <
C20) ......................................................................................................................................... 110
3.2.3. Evolution des acides gras linaires et branchs en C15 :0 et C17 :0 FAMEs ............... 113
3.2.4. Evolution des acides gras chaines longues ................................................................. 116
4. Analyses statistiques........................................................................................................................ 119
5. Conclusion ....................................................................................................................................... 123
Chapitre 3: Evolution des composs ligneux au cours du co-compostage................................ 125
1. Introduction ..................................................................................................................................... 125
2. Materiel et Mthodes ....................................................................................................................... 127
2.1. Py-GC-MS ........................................................................................................................ 127
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 127
3.1. Analyse des pyrogrammes et identification des composs organiques ............................ 127
3. 2. Evolution des composs ligneux au cours de co-compostage ......................................... 131
4. Conclusion ....................................................................................................................................... 139
Chapitre 4: Evolution des composs strodes au cours du co-compostage ............................. 141
1. Introduction ..................................................................................................................................... 141
2. Matriel et Mthodes ........................................................................................................... 141
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 142
3.1. Evolution des strodes au cours du co-compostage ........................................................ 142
3.2. Labattement des stanols .................................................................................................. 150
3.3. Evolution du stanone, stradine et strnes .................................................................... 151
3.4. Evolution des thiostranes ................................................................................................ 152
4. Conclusion ....................................................................................................................................... 155
Partie II .............................................................................................................................................. 157
Chapitre 5 : Evaluation de la succession de la communaut microbienne au cours du cocompostage des boues actives-dchets de palmier sur un milieu synthtique base de
composts (CTEA) .......................................................................................................................... 158
1. Introduction ..................................................................................................................................... 158
2. Matriel et Mthodes ...................................................................................................................... 159
2.1. La mise en culture et dnombrement de la microflore endogne ..................................... 159
2.2. Dnombrement des actinomyctes ................................................................................... 159
2.3. Dnombrement des bactries ............................................................................................ 160
xiii

2.4. Dnombrement des champignons..................................................................................... 160


3. Analyses statistiques........................................................................................................................ 160
4. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 160
4.1. La concentration de la microflore endogne et son volution au cours du co-compostage
selon lapproche CTEA et GSM.............................................................................................. 160
4.2. Evolution de la microflore totale dans le milieu synthtique CTEA ................................ 162
4.3. Evolution de diffrents groupes de la microflore endogne ............................................. 164
4.3.1. Evolution des actinomyctes au cours du co-compostage ............................................. 164
4.3.2. Evolution de la microflore fongique au cours du co-compostage ................................. 167
4.3.3. Evolution des bactries au cours du co-compostage ..................................................... 167
5. Conclusion ....................................................................................................................................... 168
Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de compostage des bouesdchets de palmier et screening disolats dactinomyctes activit antimicrobienne ........... 169
1. Introduction ..................................................................................................................................... 169
2. Matriel et Mthodes ....................................................................................................................... 170
2.1. Technique des puits dagar ............................................................................................... 170
2. 2. Test de confrontation ....................................................................................................... 171
2.3. Dnombrement des coliformes ......................................................................................... 171
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 171
3.1. Linhibition des germes pathognes ................................................................................. 171
3.1.1. Lactivit inhibitrice de lextrait aqueux ....................................................................... 171
3.1.2. Lactivit inhibitrice des actinomyctes ........................................................................ 174
3. 2. Lvolution des coliformes fcaux et totaux au cours du co-compostage ....................... 177
4. Conclusion ....................................................................................................................................... 178
Chapitre 7 : Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station dpuration et
lefficacit de leur inactivation par procd de compostage ...................................................... 180
1. Introduction ..................................................................................................................................... 180
2. Matriel et Mthodes ....................................................................................................................... 181
2.1. Mthode dextraction et identification des ufs dhelminthes......................................... 181
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 182
3.1. La charge parasitaire du substrat brut ............................................................................... 182
3.2. Labattement des ufs dhelminthes au cours du co-compostage ................................... 184
4. Conclusion ....................................................................................................................................... 188
Partie III : Evaluation de la phytotoxicit et la gnotoxicit au cours du co-compostage de boues
de STEP -dchets de palmier ........................................................................................................... 189

xiv

1. Introduction ..................................................................................................................................... 190


2. Matriel et Mthodes ....................................................................................................................... 191
2.1. Test de germination, et valuation de la phytotoxicit au cours du co-compostage de
boues-dchets de palmier ........................................................................................................ 191
2.2. Dtermination des teneurs du chrome .............................................................................. 192
2.2.1. Dtermination de la concentration du chrome total (Cr) ............................................... 192
2.2.2. Dosage du chrome hexavalent Cr(VI) ........................................................................... 192
2.3. Test des micronoyaux ....................................................................................................... 192
2.3.1. Germination ................................................................................................................... 192
2.3.2. Test de micronoyaux en milieu solide ........................................................................... 192
2.3.3. Test de micronoyaux en milieu liquide ......................................................................... 193
2.3.4. Observation et quantification des micronoyaux ............................................................ 193
2.4. Analyses statistiques......................................................................................................... 194
3. Rsultats et Discussion .................................................................................................................... 194
3.1. Test de germination .......................................................................................................... 194
3. 2. Evolution des formes de chrome au cours du co-compostage ......................................... 196
3. 3. Evolution de la gnotoxicit au cours du co-compostage de boues -dchets de palmier 199
3.3.1. Gnotoxicit de la matrice solide de co-compost .......................................................... 199
3. 3. 2. Gnotoxicit des extraits hydrosolubles de co-compost et de la solution de chrome
hexavalent................................................................................................................................ 200
4. Conclusion ....................................................................................................................................... 204
Synthse Conclusion & Perspectives ............................................................................................... 206
Rfrences Bibliographiques ............................................................................................................ 217

xv

Liste des Figures


Revue Bibliographique.......................................................................................................................... 9
Figure 1 : Evolution des volumes des eaux uses rejetes (Mm3/an). (Ministre de lAgriculture,
Administration du Gnie Rural, 2002) .................................................................................................. 12
Figure 2 : Evolution des boues de STEP au Maroc (Rapport national 2009, stratgie de gestion de
boues de STEP au Maroc) ..................................................................................................................... 18
Figure 3 : Structure des prcursseurs de la lignine. I : Alcool p-coumarylique, II : Alcool
conifrylique, III, Alcool sinapylique, (Kogel-Knaber, 2002) .............................................................. 54
Figure 4: Humification et minralisation de la matire oranique fraiche (selon Gossart, 2001) .......... 62
Partie I .................................................................................................................................................. 71
Chapitre 1 : Evaluation de la biotransformation de la fraction organique et minrale lors du cocompostage de boues d'puration- dchets de palmier .................................................................... 72
Figure 1: Dimensionnement de landain de co-compostage de boues-dchets palmier ....................... 77
Figure 2 : Echantillon global homognis divis en quatre parts quivalentes .................................. 78
Figure 3 : Elimination de deux parts opposes..................................................................................... 78
Figure 4: Homognisation des parts restantes .................................................................................... 78
Figure 5 : Evolution de la temprature en fonction du temps au cours du processus de co-compostage
du mlange A et B ................................................................................................................................. 84
Figure 6: DRX des chantillons de compost sch 105C ................................................................ 90
Figure 7: Comparaison des DRX de compost avant et aprs calcination ............................................. 91
Figure 8: DRX des chantillons de composts calcins 650C ........................................................... 91
Figure 9: Les spectres FTIR diffrentes stades du co-compostage pour les deux mlanges A (a) et B
(b) .......................................................................................................................................................... 94
Figure 10 : Spectres FTIR des chantillons de composts calcins 650C ......................................... 95
Figure 11 : Comparaison des spectres FTIR de compost avant et aprs calcination............................ 96
Figure 12: La teneur totale en mtaux (Pb, Cr, Cd) pendant le processus de co-compostage des
mlanges A(a), et B (b) ....................................................................................................................... 100
Figure 13: Diagramme de composante principale (ACP) des paramtres physico-chimiques des
mlanges A (a), et B (b) ...................................................................................................................... 101
Chapitre 2: Evolution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au cours du co-compostage
............................................................................................................................................................. 103
Figure 1: Pyrogramme TIC et SIM (Single Ion Monitoring) m/z= 74 du stade initial du cocompostage .......................................................................................................................................... 107
Figure 2 : Abondance relative (%) des lipides totaux et des FAMEs au cours du co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 109
Figure 3 : Abondance relative (%) des FAMEs C6:0, C12:0 et C14:0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 111
xvi

Figure 4 : Abondance relative (%) des FAMEs C16 :0, C18 :0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 111
Figure 5: Abondance relative (%) des FAMEs C15 :0, C17 :0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 114
Figure 6: Abondance relative (%) des FAMEs i,a,C15 :0; i,a,C17 :0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 115
Figure 7 : Evolution de lindice (CPI) au cours du co-compostage des mlanges A et B .................. 117
Figure 8: Diagramme de composante ACP (a, b) des FAMEs des mlanges A(a) et B(b) ................ 120
Figure 9: Diagramme des projections factorielles (1 et 2) des FAMEs des mlanges A(a) et B(b) ... 121
Figure 10 : Diagramme des projections factorielles (1 et 2) des mlanges A et B ............................. 122
Figure 11 : Dendrogrammes des variables FAMEs pour les deux mlanges A et B .......................... 123
Chapitre 3: Evolution des composs ligneux au cours du co-compostage.................................... 125
Figure 1: Les pyrolysats identifis des composs organiques au cours du co-compostage des mlanges
A et B ................................................................................................................................................. 129
Figure 2: Evolution de diffrents composs ligneux, ayant diminu par rapport T0, au cours du cocompostage des mlanges A et B ........................................................................................................ 134
Figure 3: Evolution de diffrents composs ligneux, ayant augment par rapport T0, au cours du cocompostage des mlanges A et B ........................................................................................................ 137
Figure 4: Evolution de lindice de Shannon Weaver (Ish) au cours du co-compostage .................... 139
des mlanges A (Ish A) et B (Ish B).................................................................................................... 139
Chapitre 4: Evolution des composs strodes au cours du co-compostage ................................. 141
Figure 1: Pyrogramme (TIC) des composs strodes identifis T0 lors du co-compostage........... 142
Figure 2: Variations de labondance relative des strodes au cours du co-compostage .................... 147
Figure 3: Evolution des cholestnes 3 et 4, thylcholestne 3, thiocholestane et thiocampestane au
cours du co-compostage ...................................................................................................................... 148
Figure 4: Schma de la conversion des strols en stanols propos par (Bull et al., 2002) ................. 149
Figure 5: Dgradation thermique de cholesterylstarate propos par Asperger et al., 1999 .............. 152
Figure 6: Corrlation entre les indicateurs classiques de maturit et le taux dabattement de Cstrodes ............................................................................................................................................... 155
Partie II .............................................................................................................................................. 157
Chapitre 5 : Evaluation de la succession de la communaut microbienne au cours du cocompostage des boues actives-dchets de palmier sur un milieu synthtique base de composts
(CTEA) ............................................................................................................................................... 158
Figure 1: Evolution de la microflore totale (msophile (MM), thermophile(TM)) au cours du cocompostage des mlanges A et B sur GSM (a, b) et CTEA (c, d) ...................................................... 161
Figure 2 : Evolution de la microflore msophile au cours du co-compostage des mlanges A et B.. 164
Figure 3: Evolution de la microflore thermophile au cours du co-compostage des mlanges A et B 165
Figure 4 : Analyse de composante principale (ACP) de la microflore msophile et les paramtres
physico-chimiques au cours du co-compostage des mlanges A et B, M : Msophile ....................... 165
xvii

Figure 5: Analyse de composante principale (ACP) de la microflore thermophile et les paramtres


physico-chimiques au cours du co-compostage des mlanges A et B, T : Thermophile .................... 166
Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de compostage des boues-dchets
de palmier et screening disolats dactinomyctes activit antimicrobienne ............................ 169
Figure 1 : Activit des extraits aqueux des mlanges A et B vis--vis de Micrococcus luteus (ML) par
la technique des puits .......................................................................................................................... 172
Figure 2 : Les souches actives isoles (Msophile (M) et Thermophile (T)) et leurs spectres
dinhibition .......................................................................................................................................... 174
Figure 3: Isolats dactinomyctes actif vis--vis des pathognes Gram-positif (a), Gram-ngatif (b) et
levures, moisissures (c) ....................................................................................................................... 176
Figure 4: Evolution des coliformes fcaux et totaux des stades initiaux et finaux du co-compostage
des mlanges A et B ............................................................................................................................ 178
Chapitre 7 : Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station dpuration et
lefficacit de leur inactivation par procd de compostage .......................................................... 180
Figure 1 : ufs dhelminthes isols de la boue de STEP de Marrakech observation microscopique
grossissement 400 ............................................................................................................................. 182
Figure 2: Total des ufs dhelminthes par g de matire fraiche de boue et des deux stades initiaux de
co-compostage, mlanges A et B ........................................................................................................ 185
Figure 3: Abattement des ufs dhelminthes au cours du co-compostage des mlanges A et B ....... 186
Partie III : Evaluation de la phytotoxicit et gnotoxicit au cours du co-compostage de boues de
STEP -dchets de palmier................................................................................................................. 189
Figure 1 : Evolution de la phytotoxicit au cours du co-compostage des mlanges A et B ............... 195
Figure 2: Evolution de diffrentes formes de chrome, chrome total (a) et Cr(VI) (b) des stades initiaux
(A0, B0) et finaux (A6, B6) du co-compostage des mlanges A et B................................................. 197
Figure 3 : Les micronoyaux et les cellules en division dune racine dans lextrait hydrosoluble de
boues.................................................................................................................................................... 201
Figure 4: Indice de corrlation entre le Cr(VI) et MN aux diffrents stades de co-compostage des
mlanges A et B .................................................................................................................................. 203

xviii

Liste des Tableaux


Revue Bibliographique.......................................................................................................................... 9
Tableau 1 : Tableau comparatif des avantages et inconvnients de diffrents systmes .................... 11
Intensifs (El Fels, 2010) ........................................................................................................................ 11
Tableau 2 : Formes de gestion de lassainissement liquide en milieu urbain (Rapport national 2009,
stratgie de gestion de boues de STEP au Maroc)................................................................................. 13
Tableau 3: Situation et diffrents type de stations dpuration au Maroc ............................................ 13
(Bahij et Soudi, 2003) ........................................................................................................................... 13
Tableau 4: Le nombre des step acheves ou en cours dachvement et les organismes gestionnaires 15
Tableau 5: Le nombre des stations acheves et en cours par les organismes gestionnaires dans le cadre
de PNA .................................................................................................................................................. 15
Tableau 6: Objectifs du programme PNA pour lhorizon 2015 (Rapport national Avril 2009,
Identification et Elimination des Goulets dEtranglement pour lUtilisation des Eaux Uses dans le
Cadre de lIrrigation ou autres Usages) ................................................................................................. 16
Tableau 7 : Projets achevs, en cours et programms selon le PNA .................................................... 16
Tableau 8 : Production de boues en fonction de systmes de traitement des eaux uses ..................... 18
Tableau 9: Classe des polluants mergents (Barcelo, 2003) ................................................................ 23
Tableau 10: Excrtion journalire des hormones stroides en g/L (Ying et al., 2002) ...................... 24
Tableau 11: Les diffrents catgories de microorganismes pathognes isols des boues dpuration
(Dumontet et al., 2001).......................................................................................................................... 26
Tableau 12 : Diffrents types dufs dhelminthes retrouvs dans les boues et les eaux uses (Kowal,
1985)...................................................................................................................................................... 27
Tableau 13: Nombre dufs pondus par jours chez differentes espces dhelminthes et la valeur
moyenne dhelminthes par gramme de matire fcale selon (Feachem et al., 1983; Shuval et al., 1986)
............................................................................................................................................................... 29
Tableau 14: Paramtre physiques des ufs dhelminthes dans leau (Shuval, 1977) .......................... 30
Tableau 15: Niveau de temprature et temps ncessaire pour dtruire certains pathognes prsents
dans les matriaux composter (Golueke, 1991) ................................................................................. 33
Tableau 16: Diffrents microorganismes isols en fonction des phases de compostage (Ryckeboer et
al., 2003; Haruta et al., 2005) ................................................................................................................ 43
Tableau 17: Les sous-units d'acides gras et leurs origines (Amir et al., 2008, modifi par EL Fels et
al., 2014b) .............................................................................................................................................. 56
Tableau 18: Composition lmentaire des differentes fractions des substances humiques.................. 63
Tableau 19: Les normes dutilisation agricole des boues dans les pays europeens ............................. 67
Tableau 20: Valeurs limites de classement des composts, classe A (sans risque lutilisation), classe
B ( utiliser dans les sols forestires) .................................................................................................... 68
Tableau 21: Limites normatives en mtaux lourds (mg/Kg Ms) dans les composts ............................ 68
xix

Partie I .................................................................................................................................................. 71
Chapitre 1 : Evaluation de la biotransformation de la fraction organique et minrale lors du cocompostage de boues d'puration- dchets de palmier .................................................................... 72
Tableau 1: Principales caractristiques des substrats utiliss............................................................... 75
Tableau 2: Evolution des paramtres physico-chimique au cours du co-compostage des mlanges A et
B ............................................................................................................................................................ 85
Tableau 3: Paramtres dhumification durant le co-compostage des mlanges A et B........................ 88
Tableau 4 : Composition chimique par fluorescence X des chantillons calcins de diffrents stades
de co-compostage .................................................................................................................................. 89
Chapitre 2: Evolution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au cours du co-compostage
............................................................................................................................................................. 103
Tableau 1: Evolution des lipides totaux au cours du co-compostage des mlanges A et B ............... 106
Tableau 2a : Abondance relative (%) des acides gras au cours de co-compostage du mlange A
dtermine par TMAH-Py-GC-MS ..................................................................................................... 107
Tableau 2b: Abondance relative (%) des acides gras au cours de co-compostage du mlange B
dtermine par TMAH-Py-GC-MS ..................................................................................................... 108
Tableau 3: Indice Shannone-Weavers des groupes de microorganismes identifis ........................... 118
Chapitre 3: Evolution des composs ligneux au cours du co-compostage.................................... 125
Tableau 1: Variation des taux de dgradation des produits identifis par Py-GC/MS au cours du cocompostage .......................................................................................................................................... 130
Tableau 2: Structures molculaires et temps de rtention des drivs identifis par Py-GC-MS au
cours du compostage de boues de STEP-dchets de palmier ................. Erreur ! Signet non dfini.132
Chapitre 4: Evolution des composs strodes au cours du co-compostage ................................. 141
Tableau 1: Les strodes identifis au cours du co-compostage......................................................... 143
Tableau 2: Abondance relative (%) des strodes identifis au cours du co-compostage .................. 145
Tableau 3: Le rapport de labondance relative des composs strodes ............................................. 154
Partie II .............................................................................................................................................. 157
Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de compostage des boues-dchets
de palmier et screening disolats dactinomyctes activit antimicrobienne ............................ 169
Tableau 1 : Les microorganismes tests utiliss pour lactivit antimicrobienne
dactinomyctes.....171
Tableau 2: Activit antimicrobienne des extraits de composts value par la technique des puits
(technique des puits) (diamtre dinhibition est exprim en mm) ....................................................... 173
Tableau 3: Activit antibactrienne des isolats dactinomyctes issus de diffrents stades de cocompostage .......................................................................................................................................... 175
Chapitre 7 : Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station dpuration et
lefficacit de leur inactivation par procd de compostage .......................................................... 180
Tableau 1: Evolution des ufs dhelminthes en fonction de co-compostage pour les deux mlanges A
et B ...................................................................................................................................................... 183
xx

Tableau 2: Equations dinactivation en fonction du temps (t: heure) (Feachem et al., 1983; Vinneras et
al., 2003) des diffrentes tempratures (TC) ................................................................................... 187
Partie III : Evaluation de la phytotoxicit et la gnotoxicit au cours du co-compostage de boues
de STEP -dchets de palmier ............................................................................................................ 189
Tableau 1: Rsultat de micronoyaux des racines de Vicia faba par approche matrice solide et sol Lufa
2.2 ........................................................................................................................................................ 199
Tableau 2: Effet gnotoxique au cours du co-compostage et de diffrentes concentrations du Cr(VI)
par le test micronoyaux (approche extrait hydrosoluble) .................................................................... 201

Liste des Abrviations


ACP: Analyse de la Composante Principale
ADEME: Agence de lEnvironnement et de la Matrise de lEnergie (France)
AF: Acide Fulvique
AFNOR: Association Franaise de Normalisation
AH: Acide Humique
CL50: Concentration ltale de 50% de la population
CPI: Carbon Preference Index
CTEA: Co-compost Time Extract Agar
DEHP: Di(2-thylhexyl) phtalate
DGCL : Direction Gnrale des Collectivits Locales
DRX : Diffraction des Rayons- X
ETM : lment Trace Mtalique
FAME : Fatty Acide Methyle Ester
GSM: Growth Standard Media
HAP : Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques
HM: Hydrasine Maleique
IG: Indice de Germination
Ish: Indice Shannone Weaver
MF: Matire Fraiche
xxi

MO: Matire Organique


MS: Matire Sche
MS/EHJ : Matire Sec/Equivalent Habitat par Jour
OMS: Organisation Mondiale de la Sant
PCB: PolyChoroBiphnyl
PCI : Pouvoir Calorifique Intrieur
PLFA : Phospholipide Acide Gras
PPM : Partie Par Million (mg/kg)
PVC: Polychlorure de Vinyle
Py-GC-MS: Pyrolyse couple la Chromatographie en Phase Gazeuse-Spectre de Masse
RADEEMA : Rgie Autonome de Distribution dEau et dElctricit Marrakech
RT: Retention Time
SIM: Single Ion Monitoring
STEP: Station de traitement et puration des eaux uses
TIC: Total Ion Curent
TMAH-Py-GC-MS : Ttramthylammonium hydroxide couple la Chromatographie en
Phase Gazeuse et la Spectrometrie de Masse
UFC : Unit Formant Colonie

xxii

Introduction Gnrale

Introduction Gnrale

Au Maroc, les volumes deaux uses rejets ont t estims 600 Millions m en 2005 et
atteindraient 900 Mm3 par an lhorizon 2020 (Ministre de lAgriculture et de la Mise en
Valeur Agricole, Maroc (2002). Ces eaux uses prsentent un risque potentiel de pollution des
eaux, et de pollution des sols, do la ncessit de les traiter avant leur rintroduction dans le
milieu naturel. Cette approche permettra de disposer dune ressource hydrique importante
exploiter, en particulier dans les zones o svissent des pnuries deau et des annes
conscutives de scheresse, face aux changements climatiques.
Afin de palier le dficit en matire dassainissement liquide au Maroc, le gouvernement
Marocain a lanc un programme ambitieux (SDNAL: Schma Directeur National
dAssainissement Liquide) qui est men

conjointement par le Dpartement de

l'Environnement et le Ministre de l'Intrieur et qui a permis dlaborer en 2005 le


Programme National dAssainissement Liquide et dEpuration des Eaux Uses (PNA)
dot dun budget consquent de lordre de 50 milliards de Dirhams lhorizon 2020. Ce
programme sest fix comme objectif la construction de 260 stations dpuration pour la
priode 2006/2020 qui viendront sajouter aux 80 stations dj en service. Il sagit datteindre
un taux de raccordement global au rseau dassainissement de 75% en 2016, 80% en 2020 en
milieu urbain, et dabattre la pollution de 60 80 % au moins et surtout de limiter la
dgradation environnementale et lamlioration de la qualit de leau des systmes
aquatiques, prolonger les traitements jusquau niveau tertiaire et les rutiliser 50% en 2020.
Actuellement, plusieurs types de systmes de traitement des eaux uses existent au Maroc
(lagunage, boues actives, percolation filtrationetc).
Quel que soit le systme dpuration adopt pour le traitement des eaux uses, celui-ci
saccompagne dune production de quantits de boues non ngligeables, qui sont estimes
40 000 T/an en 2010, et les prvisions sont de 300 000 T/an pour 2025 (ONEP, Maroc).
En gnral les boues issues des systmes dpuration des eaux uses sont reconnues par leur
pouvoir fertilisant, en termes de matire organique, dazote, de phosphore et des oligolments (Bousselhaj, 2007). Nanmoins, les boues de step peuvent aussi contenir des
lments traces mtalliques (Cr, Zn, Cd, Hg, Pb) (Amir et al., 2001, 2005, Jouraiphy,
2007); des polluants organiques (phthalates, PCB, HAP) (Amir et al., 2005) susceptibles de
provoquer des effets nocifs sur les milieux rcepteurs, et des polluants mergeants
(antibiotiques) (Khadra et al., 2012) qui sont classs parmi les 30000 substances chimiques
produites des quantits au-dessus des normes (Giger, 2003); ce qui limiterait la valorisation
agricole de ces boues, do la ncessit de sassurer de leur innocuit avant toute utilisation.
Ces diffrentes sources de polluants sont lorigine du pouvoir gnotoxique et cytotoxique
2

Introduction Gnrale

des boues (Shukla et al., 2009; Lopez et al., 2010). A ceci sajoute la richesse de boues de step
en germes pathognes et en parasites savoir les protozoaires, comme les Amibes,
Toxoplasmagondii, Giardia lamblia et Cryptosporidiumsp., ainsi que les helminthes comme
Ascaris sp., Trichuris sp., capillaria sp., schistosoma sp., et Taenia sp., (Feachem et al., 1983,
Tnner-Klank et al., 2007; Marcinkowski, 2010; Utzinger et al., 2011), do la ncessit de
mieux concevoir la filire de traitement et dlimination de boues lors de la conception de la
station dpuration.
Dans de nombreux pays, le choix des filires de traitement des boues est orient le plus
souvent vers des filires de stabilisation (dshydratation, chaulage) et des filires de
traitement par incinration, qui demeure prohibitif pour le contexte marocain. Dans de
nombreux pays y compris le Maroc, en absence de lgislation sur les boues; celles-ci sont
vacues en dcharge publique; dans certains cas aprs un prtraitement. Cette pratique est
lgalement interdite dans de nombreux pays (directive 1999/31/CE).
De point de vue environnemental, lincinration contribue au dgagement des gaz toxiques
(NO, CO, CO2) et le plus grave est la transformation des nombreux composs (PCBs) en
dioxines. Nanmoins, les installations dincinration doivent tre conformes aux normes en
matire de rejets gazeux, comme la stipule la Loi N13-03 relative la lutte contre la
pollution de l'air. Pour le cas du Maroc, lincinration des boues de STEP ne peut pas tre une
solution envisageable en raison des cots levs des installations des incinrateurs,
lincinration dans des cimenteries pourrait remdier, en partie, au problme mais les volumes
de boues importants limitent limpact de cette solution. Une tude rcente a t faite par un
bureau dtude au profit de la RADEEMA qui a montr que les cots de traitement sont
excessifs. Dautres possibilit sont exploites savoir lusage des boues utilises en
cimenterie, nanmoins cette solution semble confronte des contraintes parmi lesquelles,
lloignement de la cimenterie par rapport la station, ainsi que lexigence habituelle des
cimenteries de boues avec une forte siccit (>90%) et un fort PCI (>2000 kW/t). De mme la
prsence de chlore dans les boues, partir de certaines teneurs, semble affecter le four, sans
oublier limpact des boues sur la qualit des ciments.
La mise en dcharge contrle consiste enfouir les boues souvent mlanges avec des
ordures mnagres en prenant en considration les prcautions (site tanche, compactage des
rsidus, rcupration et traitement des lixiviats). De plus, pour rduire la production des
lixiviats et viter une saturation rapide de la dcharge, seules les boues peu humides sont
acceptes. La mise en dcharge contrle ncessite des oprations prliminaires de

Introduction Gnrale

stabilisation et de dshydratation pousses. Cette solution va progressivement perdre de son


intrt pour des raisons financires et juridiques.
Le traitement de boues par bio-mthanisation doit tre justifi aprs des tudes en matire des
besoins nergtiques et les cots dnergie par rapport au march. En effet, le biogaz qui sera
fourni doit tre comptitif pour justifier les investissements ncessaires sans oublier que cette
filire produit un digestat de faible siccit quil faut grer.
Lpandage direct des boues de STEP est sans doute une solution envisageable. Les composs
tels que le carbone, l'azote, le phosphore et le potassium tant ainsi recycls et valoriss par la
vgtation en place. Cette mthode vise se rapprocher des grands cycles naturels et viter
tout gaspillage de la matire organique d l'incinration ou l'enfouissement dans les
dcharge (Lambkin et al., 2004). Les modes dpandage (doses, priode) sont tributaires de la
composition des boues, du milieu rcepteur (sol) et du type de cultures. Nanmoins,
lpandage direct de boues non traites fait lobjet des rticences auprs des agriculteurs, en
raison des risques lis la prsence dagents pathognes, des odeurs nausabondes, ce qui
peut prsenter un risque pour le voisinage.
Au Maroc, en labsence de loi qui rglemente lusage de boues, il serait plus judicieux dtre
prudent et nautoriser que lpandage des boues traites au pralable par compostage, biomthanisation ou schage thermique afin de sassurer de leur stabilisation et de leur
hyginisation.
A titre dexemple, en France de nombreux traitements sont mis en place pour limiter le
volume produit, les odeurs, et la nocivit des boues. Actuellement 3 filires sont utilises pour
vacuer les boues, selon que l'on privilgie un mode de gestion bas sur l'limination ou le
recyclage. Les trois filires de traitement sont donc la mise en dcharge (25%), l'incinration
(15%) et l'pandage agricole (60%). Les boues d'puration ne seront plus pandues terme
sous forme liquide, mais aprs traitement mcanique et thermique, sous forme de compost ou
de granuls. La valorisation biologique (mthanisation, et compostage), a t considre par
plusieurs dcideurs scientifiques comme des technologies vertes permettant de transformer les
dchets en produits haute valeur ajoute. Depuis la publication de la norme NFU 44-095,
(AFNOR, 2002 complte en 2008) des composts de boues contenant des matires dintrt
agronomique issues des traitements des eaux, et la norme NFU 44-051, (AFNOUR, 2006
complte en 2010) relative aux amendements organiques, on peut envisager maintenant la
commercialisation d'un produit homologu au lieu de recourir aux plans d'pandage. On peut
aussi scher les boues par des moyens conomes en nergie et rendre l'pandage plus
intressant que l'incinration.
4

Introduction Gnrale

Actuellement, aucune filire de traitement de boues nest utilise au Maroc, bien que le PNA
recommande de dvelopper des recherches en matire de traitement de ces dchets. En
matire de caractrisation des boues urbaines lchelle nationale, les rsultats sont assez
fragmentaires. Le plus rcent travail de caractrisation a port sur 9 STEP : Agadir (Grand
Agadir), Bouregreg, Drarga, Mrirt, Skhirate, Taoujdate, Tafoghalte, Taourirt et Tiznit. Alors
quen matire de traitement de boues certains travaux ont t raliss lchelle du
laboratoire et semi-industrielle par les quipe de lUniversit Cadi Ayyad de Marrakech et qui
ont abouti la soutenance de plusieurs thses de doctorats (Bousselhaj, 2007 : sur lpandage
agricole), Echab (2002, sur le compostage en mini-racteur), Amir (2005, sur compostage et
devenir des polluants mtalliques et organiques); Jouraiphy (2007, sur le compostage des
boues actives et devenir des polluants organiques et valorisation agronomique grande
chelle), Abouelwafa (2009, compostage de boues agro-industrielle et qualit biochimique du
compost issu des boues de STEP de Khouribga, Drarga, Mzar). En 2005, une quipe de
lUniversit Chouab Doukkali a prsent les travaux de recherche relatifs un projet
europen sur les boues.
Depuis 2009, une nouvelle station dpuration a t construite Marrakech pour traiter les
eaux uses de lensemble de lagglomration urbaine. Elle est considre comme la plus
grande STEP nationale, avec un traitement tertiaire, gnrant actuellement lquivalent 130
t/jour environ de boues avec une siccit moyenne de 22%, soit lquivalent au total de 30,8
tonnes de Matire Sche par jour (tMS/J). Actuellement la RADEEMA vacue les boues
dpuration vers des sites de dchargement lous et situs proximit de la dcharge publique
de Marrakech.
Cette situation engendre des charges importantes en matire de gestion du dchargement des
boues, de location des terrains et de leur amnagement. Ces charges sont values 50 DHHT/tonne des boues vacues soit 2,4 MDH-HT/an. En labsence de filire dvacuation
dfinitive, ces charges ne cessent daugmenter dune anne sur lautre. De plus, sur le plan
environnemental, cette situation prsente une source de nuisance srieuse sur les plans
paysager, sanitaire et olfactif qui seront ressenties de plus en plus avec la fermeture de la
dcharge publique actuelle, do la ncessit de rflchir dautres filire de traitement et/ou
de valorisation adaptes au contexte local.
Daprs de nombreuses tudes, le compostage constitue le traitement par excellence qui
rpond toutes ces conditions dans des limites financires trs accessibles. En effet, les
besoins du march marocain en matire organique sont trs importants. Sur la base dune
perte annuelle de 650 kg de matire organique/hectare de sols bours (Life project, LIFE05
5

Introduction Gnrale

TCY/MA/000141), les besoins en matires organiques stables et compatibles avec une


agriculture durable dans ces zones, qui reprsentent plus de 7 millions dhectares au Maroc,
sont denviron: 4,55 million de tonnes par anne. Les superficies potentielles en terres
irrigables au Maroc sont estimes 1664000 ha dont 1364000 ha de surface irrigues de faon
prenne et 300000 ha de faon saisonnire lors dpandage des eaux de crue. Les besoins en
amendement organique ncessaire pour compenser les pertes annuelles des zones irrigues du
Maroc sont estims 1,7 million de tonnes par anne (life project, LIFE05
TCY/MA/000141). Ainsi le total des besoins annuels des sols au Maroc en matires
organiques stable est denviron 6,25 millions de tonnes (Rapport Nationale 2009, Stratgie de
gestion de boues de STEP au Maroc).
Dans ce contexte, le Laboratoire Ecologie et Environnement (L2E) de lUniversit Cadi
Ayyad de Marrakech (Maroc), en partenariat avec lquipe de recherche ECSECO du
Laboratoire Ecologie Fonctionnel (ECOLAB) de lInstitut National Polytechnique (INP) de
Toulouse (France), a men une tude scientifique sur les potentialits de la valorisation de
boues de station de Marrakech par le procd de co-compostage.
Ce travail, initi en Octobre 2013 sest focalis sur ltude physico-chimique,
microbiologique et cotoxicologique au cours de la biotransformation des boues actives de la
STEP de Marrakech en mlange avec des dchets de palmier par un procd de compostage.
Dans ce travail de nouveaux indices de maturits ont aussi t valids.
Dans cette optique nous nous sommes fixs comme objectifs :
Le recyclage, en vue dune valorisation agronomique, des boues de la station
dpuration des eaux uses (cas de la station de boues actives de Marrakech) en
mlange avec des dchets verts (dchets de palmier) par la filire de compostage.
Lvaluation des paramtres physico-chimiques, indices de la maturit des composts,
et suivi de lvolution de la matire organique et minrale au cours du procd.
Validation des nouveaux paramtres de maturit de composts qui rpondent aux
normes dutilisation de boues de STEP et dchets de palmier sans aucun risque,
savoir lvolution de compos ligneux, strodes, ester mthyliques dacides gras
(indice CPI), et hydrocarbures aliphatiques.
Validation dun nouveau milieu synthtique disolement base de compost, et
valuation des microorganismes qui contribuent lhyginisation des composts

Introduction Gnrale

Mesure des paramtres biologiques dhyginisation en termes dvolution des ufs


dhelminthes, dtermination et devenir de la charge des ufs de nmatodes (Ascaris
sp., Trichuris sp., et Capillaria sp.)
Validation des paramtres cotoxicologique de maturit et valuation du pouvoir
gnotoxique sur Vicia faba comme un nouveau indice de maturit de compost.

Ce travail de thse est subdivis en deux grands volets :

Le premier volet est consacr ltat de lart bibliographique ou ltat des lieux de
lassainissement liquide au Maroc, la problmatique des boues et les filires de traitement et
leur limination sont traites, ainsi que les aspects relatifs au compostage des boues. De
mme, un tat des lieux de la recherche a t ralis en matire de devenir des polluants
mtalliques, organiques et mergeants au cours du compostage, et les diffrents composs
organiques, ainsi que les aspects dhyginisation et de maturit moyennant les diffrents outils
biologiques (microbiologie, parasitologie, phytotoxicit, et gnotoxicit).

Le deuxime volet consacr aux rsultats et leurs discussions. Il est subdivis en trois parties :

La premire partie intitule Biotransformation des boues-dchets de palmier et volution


des composs organiques au cours du co-compostage est subdivise en 4 chapitres:

Chapitre 1: valuation de la biotransformation de la fraction organique et minrale lors du


co-compostage de boues de station d'puration- dchets de palmier.
Chapitre 2: volution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au cours du cocompostage.
Chapitre 3: volution des composs ligneux au cours du co-compostage.
Chapitre 4: volution des composs strodes au cours du co-compostage.
La deuxime partie intitule volution des microorganismes et valuation du degr
dhyginisation au cours du co-compostage est subdivise en 3 chapitres :
Chapitre 5: valuation de la succession de la communaut microbienne au cours du cocompostage des boues actives-dchets de palmier sur un milieu synthtique base de
composts.

Introduction Gnrale

Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de compostage de bouesdchets de palmier et screening disolats dactinomyctes activit antimicrobienne.
Chapitre 7: Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station dpuration et
lefficacit de leur inactivation par procd de compostage.
La troisime partie Intitule valuation de la phytotoxicit et la gnotoxicit au cours du
co-compostage de boues de STEP -dchets de palmier est compose dun seul chapitre
(chapitre 8).
Une confrontation de lensemble des rsultats a t ralise. Elle vise la mise en place de
procd, des outils analytiques et des supports dexpertise, ce qui a permis de dgager une
synthse gnrale justifiant lefficacit de cette filire et de son intrt. Une conclusion et une
prsentation de diverses perspectives concluront ce travail.

Revue Bibliographique

Revue Bibliographique

I. Assainissement liquide au Maroc


La connaissance de la production des dchets est essentielle dans la planification dun
systme de gestion afin dattnuer leurs impacts environnmentaux et de prvoir au mieux le
dimensionnement des installations de traitement. De nombreuses tudes valuent la quantit
des eaux uses produite, mais les rsultats prsentent des carts importants entre le Maroc et
les autres pays en voie de dveloppement ainsi que les pays dvelopps. La diffrence de
production des eaux uses est tributaire du type de socit. Elle est lie la situation
conomique, les saisons, la culture et les divergences de coutumes entre les villes. Les stations
dpuration restent les seules solutions dlimination de la pollution des effluents domestiques
et/ou industriels produits, conformment aux normes de rejets, avant leur vacuation dans le
milieu naturel.
Aprs la purification des eaux qui consiste liminer les matires minrales et organiques en
suspension, les polluants initiaux se retrouvent par la suite en partie stocke et concentre
dans les boues issues des diverses tapes de traitement de leau. Ces principaux dchets des
eaux uses boues sont donc considres comme un dchet riche en bactries, agents
pathognes, matire organique minralise, lments fertilisants (N, P), micropolluants
minraux et organiques, quil faut liminer tout en profitant de sa partie utile. Une station
dpuration doit alors comporter des installations de traitement des eaux et des dispositifs de
traitement des boues produites. Les eaux uses qui peuvent tre la fois industrielles ou
urbaines sont gnralement soumises dans les stations diffrentes filires.
I.1. Les filires de traitement des eaux uses
I.1.1. Prtraitement
Le prtraitement consiste dbarrasser les eaux uses des polluants solides, des graisses et
autres lments. Ce prtraitement comporte plusieurs tapes parmi lesquelles : Dgrillage,
Dessablage et Dshuilage.
I.1.2. Traitement primaire
Il sagit dune dcantation simple ou renforce par des additifs chimiques.
I.1.3. Traitement secondaire
I.1.3.1. Traitement physico-chimique
Selon plusieurs phases:
10

Revue Bibliographique

Phase de coagulation ou agglomration par addition des adjuvants chimiques pour


liminer la matire en suspension.

Phase de floculation et phase de dcantation pour assurer la sparation entre la phase


solide et liquide suite des injections des agents floculants, sulfate dalumine ou de fer
par exemple.

I.1.3.2. Traitement biologique


Il permet la dgradation de la matire organique par les bactries arobies et anarobies dans
les systmes suivants :
Systme extensif : c'est un systme qui traite les eaux uses d'une manire classique naturelle.
Le systme le plus rpondu est : lagunage naturel, chenal algal haut rendement, infiltrationpercolation.
Systme intensif : s'effectue d'une faon mcanique et en prsence d'oxygne, ce systme est
plus couteux et demande plus d'nergie par apport au systme extensif. Parmi les systmes
existants, on trouve: lits bactriens, disques biologiques, boues actives. Une tude
comparative des avantages et inconvnients de ces diffrents systmes intensifs est rsum au
Tableau 1.
I.1.4. Traitement tertiaire
Il sagit dune filire conue pour la dsinfection et la rduction des odeurs par des oprations
suivantes : dsinfection, dnitrification, dphosphatation.

Tableau 1 : Tableau comparatif des avantages et inconvnients de diffrents systmes


Intensifs (El Fels, 2010)

Systme
Installation culture libre
boues actives

Avantages

Installation cultures fixes


Lits bactriens ou de
prculation

Inconvnients

Pour toute taille de collectivit


(sauf les trs petites)
Bonne limination de la DBO,
DCO et MES
Boues lgrement stabilises
Adapt pour la protection des
milieux sensibles.

Cot dinvestissement lev


Sensibilit aux surcharges
hydrauliques
Consommation nergtique importante

Faible consommation dnergie


Fonctionnement simple
Bonne dcantation de boues

Cout dinvestissement lev


Sensibilit au colmatage et au froid
Ncessite un prtraitement efficace
Boues fermentescible

11

Revue Bibliographique

Disques biologiques
ou biodisques

Adapt pour les petites


collectivits
Bonne dcantabilit des boues
Plus faible sensibilit aux
variations de charge que la
technique des boues actives.

Performance plus faible que la


technique de boues actives
Cout dinvestissement important
Grande sensibilit aux variations de
temprature ce qui exige une
couverture
Boues putrescibles

II. Situation des traitements des eaux uses au Maroc


Les eaux uses au Maroc prsentent non seulement une nouvelle limitation de la ressource
disponible mais surtout une atteinte la sant des populations et la qualit de
l'environnement en gnral. Au Maroc, les volumes deaux uses rejets ont t estims 600
millions de m en 2005 et atteindraient
atteindraie 900 Mm3 par an, lhorizon 2020 (Ministre de
lAgriculture, Administration du Gnie Rural,
ural, 2002) (Figure 1). A linstar des pays en
dverses dans le milieu naturel aprs et/ou
dveloppement, lessentiel des eaux uses sont dverses
sans traitement,, en fonction des villes.
villes. La dgradation de lenvironnement lie la pollution
de leau a des retombes conomiques ngatives importantes.
900
900
800

666

Volume en Mm3

700
600

495

500

370

400

270

300

127

200
100

48

0
1960

1970

1980

1990

2000

2010

2020

Anne

Figure 1 : Evolution des volumes des


d eaux uses rejets (Mm3/an). (Ministre de
lAgriculture, Administration du Gnie Rural, 2002)

Le tableau 2 rsume le mode de gestion de lassainissement liquide en milieu urbain.


12

Revue Bibliographique

Tableau 2 : Formes de gestion de lassainissement liquide en milieu urbain (Rapport national


2009, stratgie de gestion de boues de STEP au Maroc)
Organisme
Municipalit ou Commune
Rgies
ONEP
Socits prives
Total

Nombre de centres
261
16
17
17
311

Malgr que la construction des stations de traitement des eaux uses ait dbut au Maroc
depuis les annes cinquante, le secteur d'assainissement au Maroc connait une dfaillance
structurelle importante. En effet, l'puration des eaux uses, reste la composante qui connat le
plus de retard. Le Tableau 3 prsente la situation et les diffrents types de stations dpuration
au Maroc (Bahij et Soudi, 2003). Bien dautres stations ont t lances aprs 2003 daprs le
plan national dassainissement et dont le nombre nest pas identifi, le nombre de STEP reste
en de des besoins rels.

Tableau 3: Situation et diffrents types de stations dpuration au Maroc


(Bahij et Soudi, 2003)
STEP

Nombre

En
fonction

Hors

Non

Service Raccorde

Pourcentage
en fonction

Boues actives

20

12

60

Lits bactriens

11

45,5

Dcanteurs-Digesteurs

17

13

11,8

Egouttage

Lagunage

13

53,8

Infiltration-percolation

100

Chenal algal

33,3

Total

69

29

33

42,0

Lanalyse de la situation rvle que les problmes rencontrs par les stations dpuration
peuvent tre de deux natures :

13

Revue Bibliographique

- dordre technique, de par l'inadaptation de la filire de traitement aux moyens et aux


besoins locaux ou encore par le dfaut de conception des ouvrages.
- dordre institutionnel du fait que l'institution charge de grer l'assainissement se
trouve confronter , l'absence de budget, un manque d'information des lus locaux et
l'absence de planification court et long terme.
Au dbut des annes 2000, lanalyse de la situation au Maroc, fait apparatre dimportants
retards en matire dassainissement liquide. Bien que 73% de la population marocaine soit
raccorde une forme dassainissement amlior (Kawni, 1999; OIE eau, 2007), seuls 13%
des eaux uses produites au niveau national bnficiaient dun traitement secondaire. Le
linaire total du rseau dassainissement nassurait quune couverture partielle des zones
urbaines, et lpuration des eaux uses comptaient juste un nombre trs modeste de stations.
Ce retard considrable porte un prjudice grave la prservation des ressources en eaux et
lenvironnement de manire gnrale.
Sur le plan juridique, la Loi 10-95 sur lEau a t promulgue pour combler le vide juridique
existant. Cette loi sur leau vise mettre en place une politique nationale de leau, base sur
une vision prospective qui tient compte dune part de lvolution des ressources, et dautre
part des besoins nationaux en eau. Elle prvoit des dispositions lgales visant la
rationalisation de lutilisation de leau, la gnralisation dy acceder, la solidarit interrgionale, la rduction des disparits entre la ville et la campagne dans le cadre de
programmes dont lobjectif est dassurer la scurit hydraulique sur lensemble du territoire
du Royaume. A cet gard, la loi sur leau constitue la base lgale de la politique de leau du
pays. Elle fixe, en consquence, plusieurs objectifs dont la protection et la conservation
quantitative et qualitative du domaine public hydraulique dans son ensemble.
Afin de pallier aux problmes dassainissement liquide, le Ministre de lIntrieur et le
Ministre de lAmnagement du Territoire de lEau et de lEnvironnement, ont constitu une
commission mixte pour laborer le programme PNA (Plan National dassainissement
Liquide pour lhorizon 2020 qui consiste en la rhabilitation et lextension du rseau, le
branchement et le renforcement du rseau pluvial et la ralisation des stations dpuration
(traitement primaire, secondaire, voir tertiaire) pour quiper 330 villes et centres urbains avec
un total de plus de 10 millions dhabitants. Ce programme permettra de rpondre aux
objectifs suivants :
o Rpondre aux objectifs du millnaire du sommet de Johannesburg

14

Revue Bibliographique

o Atteindre un taux de raccordement global au rseau dassainissement de plus


de 75% en 2016, de 80% en 2020 en milieu urbain.
o Rabattre la pollution de 60 80 % au moins.
o Traiter jusquau niveau tertiaire les eaux uses et les rutiliser 50% en 2020.
o Rduction de la dgradation environnementale et lamlioration de la qualit
de leau des systmes aquatiques.
o Maitrise des risques sanitaires lis la qualit de leau.
o Cration des conditions favorables pour la rutilisation des eaux uses pures.
Depuis la mise en uvre du PNA, en plus des projets programms, plusieurs autres projets de
construction des STEP ont t achevs et dautres sont en cours dachvement avec diffrents
procds de traitement. La situation actuelle est rsume aux tableaux 4 et 5:

Tableau 4: Le nombre des step acheves ou en cours et les organismes gestionnaires


Organisme

STEP acheves

STEP en cours

gestionnaire
Nombre

Villes et Centres

Population

Dbit

2010

(m3/j)

43

1630928

130100

306 880

1337950

172700

8320

10000

1154

Population

Dbit

2010

(m3/j)

60

2 313 956

229231

13

3 535 735

89300

Nombre

grs par lONEP


Villes et Centres
grs par les Rgies
Villes et Centres
grs par les
Communes

Tableau 5: Stations acheves et en cours par les organismes gestionnaires dans le cadre de
PNA
Le procd
ONEP

STEPs achves et en cours


Rgies
15

Communes

Revue Bibliographique

Acheve
Lagunage
Boues actives
Infiltration
Lit bacterien
Chenal algale

46
11
2
1
-

En
cours*
27
5
2
6
-

Acheve
10
2
1
-

En
cours**
2
3
-

Acheve

En cours

3
1

2
-

*La dcision nest pas encore dfinitive pour la nature du procd pour deux stations qui sont en tude et une
un raccordement rgie.
** Pour Anza le procd est de prtraitement + Traitement primaire + dsodorisation

Les prvisions pour 2015 ont t rsumes au Tableau 6.


Tableau 6: Objectifs du programme PNA pour lhorizon 2015 (Rapport national Avril 2009,
Identification et Elimination des Goulets dEtranglement pour lUtilisation des Eaux Uses
dans le Cadre de lIrrigation ou autres Usages)

Taux de
raccordement
actuel (%)

Taux de
raccordement
Objectif fix
(Johannesburg)

SDNAL

Objectif vis (%)


Programme

Villes de moins de
20.000 habitants

40

100

2015
60

Villes moyennes
Grandes villes

67
76

83
85

100
100

75
83

Total population
Urbaine (%)

100

80

En ce qui concerne les projets de traitement et mission en mer projets achevs, en cours et
ceux programmes sont prsents respectivement dans le tableau 7.

Tableau 7 : Projets achevs, en cours et programms selon le PNA


Centre

Dbit STEP
(m3/j)

16

Procd de traitement

Revue Bibliographique

Projets achevs

Tanger

82 000

Prtraitement + mission en
mer

Tetouan

43 400

Prtraitement + mission en
mer

Casablance (Al
Hank)

500 000

Prtraitement + mission en
mer

Rabat

110 000

Prtraitement + mission en
mer

El Jadida (Rgie)

95 040

Prtraitement + mission en
mer

Agadir (Rgie)

49 680

Projets en cours

Projets
programms

Emission en mer ANZA 2,5


Km

Sale

Prtraitement + mission en
mer

Casablanca (Nord)

Prtraitement + mission en
mer

34 560

Prtraitement + mission en
mer

Larache (Rgie)

III. Etat des lieux des boues de STEP


A lchelle nationale il nexiste pas de donnes relles sur la production des boues de STEP,
en raison de labsence dtudes globales lchelle de territoire. Les rares tudes existantes se
sont contentes de faire ltat des lieux de certaines stations ayant fait lobjet de diffrentes
tudes. Selon les donnes cit prcidement on peut considrer que les procds
dassainissement liquide dominants au Maroc sont le lagunage et les boues actives avec les
proportions respectives de 72% et 14%. On peut calculer (sur base des valeurs proportions
arrondies de 80% (au lieu de 72%) et de 20% (au lieu de 14%), on obtient une valeur
pondre de 17 920 tonnes de MS/an. On peut ainsi retenir une production actuelle potentielle
de 18 000 tonnes de MS/an. Ce chiffre prend en compte des hypothses lies la population
et au type de traitement. Sur la base dune production de boues de 20g MS/EHJ, pour les
systmes extensifs (snario: 80 % des cas) et 60g MS/EHJ pour les systmes intensifs (20%)
(Tableau 8) la production de boues est estime 40 000 T/an en 2010 et les prvisions sont de
300 000 T/an lhorizon 2025 (Figure 2). Cette intense production de boues est lie au
17

Revue Bibliographique

lancement du programme PNA. En plus des boues de step, les boues de curage constitue un
potentiel non ngligeable.
Tableau 8 : Production de boues en fonction de systmes de traitement des eaux uses
Hypothse

Basse (STEPs dominance


de systmes extensifs comme
le lagunage)
Moyenne
Haute (STEPs dominance
de systmes intensifs comme
les boues actives)

Ratio de production de
boues
(gMS/habt/j)
20

Production de boues
(tonne MS/an)

40
60

25600
38400

12800

20000 T

2006
40 000T

2010
98 000 T

2015
2020

234 000 T
300 000 T

2025

Figure 2 : Evolution des boues de STEP au Maroc (Rapport national 2009, stratgie de
gestion de boues de STEP au Maroc)
En effet, daprs les donnes de la DGC, les eaux uses circulant dans le rseau
dassainissement contiennent en moyenne 10 % de boues dont 50 % sont rellement
valorisables. La quantit des eaux uses qui traverse le rseau des gouts ne constitue que 75
% du total des eaux uses gnres par les activits industrielles et mnagres. Malgr les
prvisions de la production de boues produites au Maroc, ces derniers, demeurent faibles par
rapport aux productions de boues habituellement produites dans des pays dvelopps.
Lampleur de la production de boues qui est de 0,85 millions de tonnes/an en France (avec
15 000 stations dpuration) et 2,7 millions de tonnes/an en Allemagne, reflte le retard
accumul par le Maroc en matire dassainissement liquide.
18

Revue Bibliographique

III.1. Composition de boues de STEP


Selon plusieurs auteurs (Werther et Ogada, 1999; Jard et al., 2003; Singh et al., 2004)
lorigine des eaux uses, la priode de lanne, le type de traitement adopt, et le
conditionnement pratiqu au sein de la station dpurationsont sont les principaux paramtres
qui influencent la composition des boues rsiduaires. Les boues reprsentent un rservoir
important de composs organiques, inorganiques (lments fertilisants, lments en traces
mtalliques) et dagents pathognes (micoorganismes pathognes, parasitesetc). Cependant,
ct de ces composs toxiques en relation avec la nature des activits raccordes au rseau
dassainissement, la matire solide de ces rsidus reprsente une source importante
dlments naturels valorisables.
III.1.1 Elments fertilisants
Dimportantes quantits en composs inorganiques usuels se retrouvent dans les boues
savoir : N, P, K, Ca et Mg. La concentration en azote varie entre 1 et 5 % de la matire sche.
Lapport de ces composs au sol peut couvrir, en partie ou en totalit les besoins des cultures
en azote, en phosphore, en magnsie, calcium et en soufre. Cet apport peut aussi corriger des
carences (Zebarth et al., 2000; Su et al., 2004; Warman and Termeer., 2005). Les lments en
traces tels que le cuivre et le zinc prsents dans les boues sont aussi indispensables au
dveloppement des communauts du sol. Cependant la valorisation de ce rsidu ncessite une
bonne connaissance de sa valeur agronomique afin de le comparer aux engrais minraux
classiquement employs par les agriculteurs.
III.1.2. Elmenst traces mtalliques
Des tudes rcentes (Amir et al., 2005, Jouraiphy et al., 2007), ont montr que la nature et la
concentration des eaux uses en polluants sont trs dpendantes des activits raccordes au
rseau. L'essentiel des contaminations chimiques vient des rejets industriels et dans une
moindre mesure des rejets domestiques (utilisation de solvants, dchets de bricolage,
peinture...). Du fait de la dcantation lors du traitement, ces contaminants chimiques se
retrouvent dans les boues de trs grandes concentrations par rapport aux eaux uses. La
prsence des lements traces mtaliques (Al, As, Cd, Co, Cu, Hg, Mn, Pb et Se) est variable
dans une boue sous differentes formes chimiques. Ces composs sont toxiques fortes doses,
et sont non seulement non biodgradables mais ils ont tendance s'accumuler dans les
maillons. McBride (2003), a confirm que le Cd, le Pb, et le Cr sont des toxiques potentiels.
Hsu et Lo (2001) ont montr que la dtermination de la teneur totale des mtaux lourds ne
19

Revue Bibliographique

fournit pas dinformations utiles sur les risques de la biodisponibilit, ainsi qu la capacit de
leur remobilisation et leur comportement dans lenvironnement. Par contre, les formes
chimiques d'un mtal ou spciation permettent l'estimation de la biodisponibilit des mtaux
lourds, et leur force de liaison, soit sous forme ionique libre ou complexe par des matires
organiques, ou incorpore dans la fraction minrale de l'chantillon.
III.1.3. Polluants organiques et mergents
La matire fcale, les dchets mnagers, ainsi que les effluents industriels constituent la
matire dorigine des boues, telle que les protines, les acides amins, les sucres et les
graisses, doirigine animale ou vgtale et qui restent non toxiques.
La prsence des polluants chimiques et organiques dorigine industrielle et agricole, a t
rglemant et plusieurs tudes ont t ralises pour valuer leurs effets. Avec lessort et le
progrs des mthodes analytiques, la prsence de nouveaux produits inattendus les
contaminants mergents a t dcele.
Une multitude de ces polluants peuvent tre contenus dans les boues; notamment les
hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAPs), pesticides principalement les organochlors, composs aliphatiques halognes, chlorobenznes, composs organiques volatiles
(COV), phnols, dioxinesetc. Les substances dont les concentrations sont suprieures 10
et mme 100 mg/kg dans les boues stabilises sont les phthalates, les surfactants. La forte
concentration en surfactants sexplique par leur utilisation dans les lessives, ce qui peut
justifier leur prsence en concentrations en gnral de lordre de g/kg de MS dans les boues
(Prez et al., 2001; Amir, 2005, Som, 2006). Quant aux phthalates, ils se retrouvent en
concentrations trs leves parce quils sont largement utiliss pour la fabrication dadhsifs,
de colles et de lubrifiants. Ces composs sont constitus dun noyau benznique portant
deux groupements carboxylates dont la taille de la chane alkyle peut varier. Le plus
couramment utilis dentre eux est le di(2-thylhexyl)phtalate (DEHP) appartient la
famille des esters de phthalates, dont les principaux mtabolites sont le 2-thylhexanol, le 2thylhexanal, et l'acide 2-thylhexanoque. Les phthalates sont utiliss comme additifs
assouplissants dans les matires plastiques (en particulier dans le polychlorure de vinyle,
PVC). Ils peuvent galement entrer dans la composition des peintures, colles et encres
(Lashermes, 2010). Leurs origines dans les boues sont les effluents d'industrie du plastique, et
de matriaux constitus de plastiques qui peuvent tre transfrs dans les eaux uses. En
raison de leur faible solubilit dans l'eau (Langford et Lester, 2003), et de leur forte
hydrophobicit, le DEHP s'accumule dans les boues d'puration, et a tendance s'adsorber sur
20

Revue Bibliographique

les sdiments et la matire en suspension (Scrimshaw et Lester, 2003; Abad et al., 2005;
Barnab et al., 2009). Ce phnomne varie considrablement avec le type de matrice solide.
Schulten et al. (2001), ont dmontr que la complexation de di-thylphthalate peut tre
biphasique, si les concentrations en DEP sont faibles, ladsorption se fait lintrieur des
vides des structures humiques, et quand la concentration augmente, ladsorption se fait la
surface externe de ces structures humique. A des doses normales, ces polluants sont
caractriss par une demi-vie trs courte (Drfler et al., 1996). Les micro-organismes
interviennent avec un pourcentage important la dgradation des phthalates (Chang et al.,
2004). Gavala et al. (2004), ont observ que les phtalates sont lentement dgrads au cours du
prtraitement

thermique

par

des

ractions

physicochimiques.

Lhydrolyse,

et

la

photodgradation sont aussi des mcanismes dlimination des phtalates. Les teneurs limites
de ces composs dans les boues selon les donnes de Jard (2002) est de lordre de 100 mg/kg
MS.
La biodgradation et la mtabolisation des HAPs par les microorganismes, bactries et
champignons, constituent la principale voie de dgradation des HAPs. La biodgradation
se fait essentiellement par voie arobie et dans une moindre mesure par voie anarobie. La
biodgradabilit des HAPs est fonction du coefficient de partage/octanol eau. Les HAPs
de faible poids molculaire (2 et 3 noyaux aromatiques) sont davantage soumis la
biodgradation que les HAPs de poids molculaire plus lev (4 et 5-6 noyaux aromatiques).
Des souches bactriennes de type gram-ngatif comme les Pseudomonas, Sphingomonas,
Acinetobacter isoles partir de sols pollus ont montr leur capacit mtaboliser ces
HAPs, par lintervention notamment de dioxygnases (Fritsche et Hofrichter, 2000). Peu de
donnes existent sur les bactries capables de biodgrader les HAPs de poids molculaire
lev (Juhasz et Naidu, 2000). Il sagirait principalement de bactries de type gram-positif
telles que les Actinomyctes appartenant aux genres Mycobacterium, RhodococcusPagnout
et al. (2006, 2007). Les champignons filamenteux ont la capacit de dgrader les HAPs de
poids molculaire lev (> 3 noyaux aromatiques) et plus gnralement les HAPs faiblement
biodisponibles. Ces champignons attaquent la structure des HAPs par la production
denzymes extracellulaires de type lignine peroxydases, laccases (Rama et al., 2001; Mougin,
2002; Mougin et al., 2003; Potin et al., 2004). Diffrents processus physico-chimiques
(volatilisation, photo-oxydation, lixiviation, lessivage, temperature, pH) et la biodisponibilit
des polluants peuvent modifier la structure, le comportement, le devenir et la toxicit des
polluants.

21

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Les polychorobiphnyls (PCB) sont des drivs de substitution du noyau de biphnyle par 1
10 atomes de chlore. Ils sont caractriss par une faible volatilit, une haute stabilit
thermique et une forte rsistance loxydation (Lashermes, 2010). Ils sont lipophiles et ont
tendance se concentrer dans le milieu rcepteur. Il sagit des produits de synthse
exclusivement anthropognique qui ont commenc tre utiliss dans les annes 1930 dans
les encres dimprimerie, dans les peintures, en tant quisolants dans les transformateurs
lectriques (Borja et al., 2005). Bien que leur production industrielle ait t arrte dans les
annes 1980, ils sont toujours dtects dans lenvironnement, et llimination des anciens
rsidus demeure un problme non entirement rsolu (Barriuso et al., 1996). La toxicit des
PCB repose principalement sur leur pouvoir daugmenter la croissance tumorale, sont des
inducteurs enzymatique puissants (Monod, 1983). Dans le sol suite lpandage de boue de
step, la concentration de ces polluants se modifie au cours du temps, et plusieurs mcanismes
peuvent expliquer ce phnomne, savoir leur adsorption (Weast, 1980), volatilisation (Bacci
and Gaggi, 1985), photo-dgadation (Tarradellas, 1984) et/ou dgradation microbienne (Focht
et al., 1987), dans des conditions arobies et anarobies (Rhee et al., 1989, Gan et Berthouex,
1994). Le taux de dgradation diminue gnralement quand le nombre de chlore substitu
augmente (Rhee et al., 1989; Gan et Berthouex, 1994). Selon les donnes bibliographiques
cites par Jard, (2002), les teneurs moyennes en PCBs dans les boues europennes varient
entre 0 et 250 mg/kg MS. Cependant les teneurs limites en composs organiques PCBs dans
les boues pour leur pandage sur sol agricole d'aprs l'European Union Drafton Sewage
Sludge est de 0,8 mg/kg MS.
Les boues sont aussi le lieu de convergence de plusieurs autre types des polluants organiques
tels que les colorants, les pesticides, les solvants, et les rsidus de mdicaments (Moreda et
al., 1998; Harrison et al., 2006). Selon les donnes bibliographiques de Maroga Mboula,
(2012), un grand nombre de ces produits sont utiliss dans la vie courante en grande quantit
mais aussi dans lindustrie, lagriculture ainsi que pour le bien tre animal; on inclut dans ces
produits, les composs chimiques mnagers, les produits industriels, les produits
pharmaceutiques et les produits de soins personnels (antibiotiques, hormones, anticancreux,
analgsiques, les anti-inflamatoires, les antihistaminiquesetc) (Hignite and Azarnoff, 1977,
Snyder et al., 2003; Donn et al., 2008), des strognes naturels ou synthtiques, les
produits dusage corporel (savons, crmes), produits dentretien (dtergents), les sousproduits de dsinfection... (Tableau 9).

22

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Tableau 9: Classe des polluants mergeants (Barcelo, 2003)


Exemples de compos
Produits pharmaceutiques
Antibiotiques

Trimthoprime, Erythromycine, Lincomycine, Sulfamthoxazole

Analgsique, Anti-inflamatoires

Codine, Iburprofne, Actaminophne, Aspirine, Diclofnac

Mdicaments psychotiques

Diazpam

Rgulateurs de lipide

Bzafibrate, acide clorifibrique, acide fnofibrique

-bloquants

Mtoprolol, propanolol, timolol

Stroides et hormones

Oestradiol, Oestron, Oestriol, Dithylstilbestrol


Produits usage mnager

Parfums

Polycyclique, Macrocyclique

Produits solaires

Benzophnone, Mthylbenzylidne

Insecticides

N,N-dithyltoluamide

Antiseptiques

Triclosan, chlorophne

Tensioactifs et leurs mtabolites

Ethoxylates dalkylphnol, 4-nonylphnol, 4-octylphnol,


Carboxylates dalkylphnol

Additifs industriels

Agents chlatant (EDTA), Sulfate aromatique

Additifs dessence

Dialkyl dther, Mthyl-ter-butyl ther (MTBE)

La prsence de ces composs mergents des concentrations de lordre de g/L ou ng/L dans
les milieux aquatiques et les sols est considre comme une menace potentielle pour les
cosystmes environnementaux (Halling-Srensen et al., 1998, Barcelo, 2003; Lapworth et
al., 2012), ils sont introduits continuellement dans le milieu aquatique par les effluents des
stations dpuration, principalement via les rejets (industriel, pharmaceutiques, et domestique)
(Petrovi et al., 2003).
Plus de 80 substances pharmaceutiques ont t dtectes dans les eaux naturelles ou
souterraines et les eaux uses (Heberer, 2002), et galement dans les sols agricoles soumis
l'pandage de boues dpuration municipales (Kinney et al., 2008; Wu et al., 2009). Parmi les
composs pharmaceutiques souvent dtects dans les milieux aquatiques, on trouve les
anti-inflammatoires

non

strodiens

(diclofnac,

ibuprofne),

les

anticonvulsivants

(carbamazpine), les rgulateurs de lipides (gemfibrozil) et les antibiotiques (sulfamides,


ttracyclines, fluoroquinolones). Selon les donnes de Drawano, (2013) douze molcules de
trois classes diffrentes ont t cibles incluant: pesticides, certaines classes de ces polluants,
les mdicaments et rsidus de mdicaments, les hormones naturelles, montrent des effets
23

Revue Bibliographique

dfavorables sur la faune et parfois sur lhomme malgr leurs faibles concentrations. Les
hormones lexemple du 17-stradiol peuvent causer des effets de perturbations
endocriniennes chez les hommes et les animaux. De plus, lexposition prolonge aux
mdicaments en particulier les antibiotiques augmente la rsistance chez les microorganismes
pathognes (Birkett et Lester, 2003).
Ces produits peuvent poser un problme dans le traitement des eaux uses urbaines parce que,
dune part, les procds de traitement actuels ne permettent pas leur limination totale et,
dautre part, certaines molcules toxiques non biodgradables peuvent avoir un impact sur la
biomasse utilise en station dpuration (Pasquini et al., 2001). Le taux dexcrtion est
gnralement en fonction de la pharmacologie du compos et du mode dapplication (orale,
cutane, etc.). On estime en moyenne que 42% est excrt sous forme de mtabolites, alors
que 64% est excrt par l'urine et 35% par les fces (Lienert et al., 2007). Les composs
les plus largement tudis sont les hormones strodiennes qui font partie des composs
biologiquement actifs synthtiss partir du cholestrol. Ces hormones sont scrtes par le
cortex rnal, les testicules, les ovaires, le placenta. Les tres humains aussi bien que les
animaux peuvent excrter les hormones via les urines ou les fces. Pour lstrone (E1) et la
17-stradiol (E2), environ 3 20 et 2 12 g/personne, sont excrtes respectivement par
les femmes Ying et al. (2002) (Tableau 10); et qui ne sont pas compltement limines dans
les filires de traitement des stations dpuration, elles se retrouvent alors rejetes dans
lenvironnement dans les effluents de ces stations (Cargout et al., 2004). Dautres sources de
contamination par des hormones strodes peuvent tre cites telles que les excrments
danimaux (les moutons, les bovins, les porcs, les volailles). Une fois excrtes sur le
sol, ces hormones peuvent se propager par ruissellement et par infiltration atteindre dautres
compartiments comme les eaux souterraines.
Tableau 10: Excrtion journalire des hormones stroides en g/L (Ying et al., 2002)
E2

E1

E3

Hommes

1,6

3,9

1,5

Femmes

3,5

1,5

Femmes mnopauses

2,3

Femmes enceintes

259

600

6000

E2: 17-Oestradiol, E1: Oestrone, E3: Oestriol.

Malheureusement, une grande quantit de mdicaments prescrits ou en vente libre ne sont pas
consomme et beaucoup dentre eux sont encore limins dans les toilettes. Ils finissent par
24

Revue Bibliographique

retrouver leur chemin vers le milieu aquatique via les effluents de traitement des eaux uses
(Steger-Hartmann et al., 1997; Bernhard et al 2006 ; De Wever et al., 2007). Leur devenir
environnemental est principalement contrl par des processus physiques, chimiques et
biologiques (adsorption, photodgradation, dgradation chimique et dgradation microbienne)
(Kaneco et al., 2004, Rodriguez et al., 2010). Ces processus dcrivent la base des procds
dlimination de ces composs dans les stations dpuration. Dans une tude sur le bisphnol
A, il a t montr que leffet des ions prsents dans la matrice aqueuse (nitrates, carbonates
etc.), le pH, lintensit de lirradiation ainsi que la prsence de dioxyde de titane pouvait
intervenir dans llimination des contaminants (Chiang et al., 2004; Fujishima et al., 2008;
Tsai et al., 2009). Nanmoins la plupart de ces composs ont tendance sadsorber sur les
phases

solides (Birkett et Lester, 2003; Von Sperling, 2007).

Le devenir

et

le

comportement de ces composs dpendent donc dans une large mesure de devenir et
du comportement de ces phases solides (particules en suspension, collodes, sdiments,
biosolides).
Les antibiotiques les plus recherch dans les boues sont classs en sept familles :
fluoroquinolone (FQ), sulfonamide (SA), (PE), cephalosporine (CE), nitroimidazole (NI),
tetracycline (TC), et macrolide (MA) (Hartmann et al., 1999, Golet et al., 2003, Hamscher et
al., 2005). Parmi ces familles les plus rencontres dans lenvironnement : les macrolides, les
fluoroquinolones (FQ) et sulfonamides (Ternes, 1999, Sacher et al., 2001). Ces omposs
peuvent gnerer des dommages de l'ADN dans les bactries, les plantes, et suscitent des
inquitudes pour lhomme (Mc Queen et al., 1991; Holden et al., 1989, Hartmann et al., 1999,
Khadra et al., 2012). Les tudes de toxicit les plus rencontres sont les valuations deffet de
toxicit aige. Cette dernire est tudie sur la faune et la flore in vivo, chez lanimal aprs
exposition des doses relativement leves ou in vitro, avec des tests sur des cultures
cellulaires comme exemple les poissons, les algues et les souris ( Farr et al., 2001 ; Staples et
al., 2000 ; Russo et al., 2002 ; Birkett et Lester, 2003 ; Ferreira et al., 2007).
III. 1. 4. Les germes, les parasites et les risques sanitaires
Daprs la littrature, les boues de STEP sont connues par leur pouvoir de concentrer une trs
grande diversit dorganismes pathognes (bactries, virus, parasites) (Dumontet et al.,
2001 ; Bagge, 2005 ; Jouraiphy, 2007) (Tableau 11). Nanmoins un grand nombre de
microorganismes est necessaire au bon droulement des processus. Lensemble de ces
microorganismes se trouve initialement dans les eaux uses. Parmi les problmes lis

25

Revue Bibliographique

lutilisation des boues, les plus proccupants, concernent la prsence des bactries pathognes
et des parasites ayant un potentiel pathogne lev.
Compte tenu de la grande diversit dagents pathognes, il est difficile de dtecter et de
quantifier tous les germes (Bagge, 2005). Il est donc ncessaire dutiliser des organismes
indicateurs afin dvaluer lefficacit dhyginisation du traitement.

Tableau 11: Les diffrents catgories de microorganismes pathognes isols des boues
dpuration (Dumontet et al., 2001)

Les infections se produisent gnralement lors de la consommation d'aliments ou deau


contamine par des microorganismes pathognes, la survie de ces derniers sur les vgtaux est
trs variable selon Kowal et al. (1982) ; les bactries, les virus et les helminthes peuvent
rsister en moyenne 1 mois et seulement 2 jours pour les protozoires. Des diffrences
importantes existent entre les diffrentes espces dhelminthes, certaines prsentent une
rsistance importante (Ascaris sp) ; 0,8 1,2 milliard de personnes ont globalement
ascaridiase et la population la plus touches tant lAfrique subsaharienne, lAmrique latine
lAsie (Lozano, 2012). Cela rend lAscaris la forme la plus courante dhelminthiases
transmise par differentes voies notament le sol-oral-fcal . Les dommages viscraux,
26

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induits par ce parasite sont linflamation chronique des intestins, des risques de pritonite,
llargissement du foie et/ou de la rate et des poumons (Hagel et Giusti 2010). Les enfants
ags entre 5 15 ans reprsentent la population la plus vulnerable (Bundy et al., 2004).
Les eaux uses sont susceptibles de vhiculer un grands nombre dufs dhelminthes avec la
matire fcale dorigine humaine ou animale appartenant aux classes des nmathelminthes
(nmatodes, Acanthocphales) et des Plathelminthes (Trmatodes, Cestodes) (Stien, 1989)
(Tableau 12). Les parasites ayant un intrt sur le plan sant publique sont les protozoaires,
comme les Amibes, Toxoplasma gondii, Giardia lamblia et Cryptosporidium sp., ainsi que les
helminthes appartenants diffrents groupes taxonomiques dont :
- les nmatodes : Ascaris sp., Toxocara sp., Trichuris sp., Capillaria sp., et Ankylostoma
duodenale.
- les cestodes : Taenia saginata, Taenia solium, Hymenolepis sp.
- les trmatodes : Fasciola sp., Schistosoma sp. (Bouhoum, 1987, Asmama, 1996).
La contamination des boues par les helminthes est quasiment systematique; ces parasites
peuvent se retrouver sous forme de kystes ou doeufs dont le nombre peut varier de plusieurs
centaines quelques milliers par kilogramme. Les techniques de rcupration des ufs et
danalyse de la viabilit employs sont toutes diffrentes, et par consquences les rsultats ne
sont donc pas directement comparables, nanmoins une grande diversit dans la hirarchie des
proportions des genres a t observe. Gantzer (2001) a dtermin des concentrations
moyennes en ufs de nmatodes viables comprises entre 2 et 45 ufs/10 g MS pour les
chantillons de boue non traits dans lordre suivant : Ascaris (37,7%) > Trichuris (34,8%) >
Capillaria (13,8%) > Toxocara (13,7%).

Tableau 12 : Diffrents types dufs dhelminthes retrouvs dans les boues et les eaux uses
(Kowal, 1985)
Classe

Sous-classe

Famille

Ascarididae

Genre

Hote dfinitif

Ascaris

Homme, Porc

Toxocara

Chien, chat

Toxascaris
Trichuris
Trichuridae
Nmathelminthes

Homme,
Ruminants, chien,

Nmatodes

Chat, Porc
Capillaria

Mouton, chvre,
Ruminants

27

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Enterobius

Oxyuridae

Homme,
Rongeur, Cheval,
Lapin

Necator

Ancylostomidae

Homme

Ancylostoma
Strongyloidae
Acanthocephales
Plathlminthes

Hymenolepididae

Strongyloides

Homme

Moniliformis

Homme, Rongeur

Hymenolepis

Homme, Rat,
Souris

Cyclophylidae

Taenia

Homme, Chien,

Cestodes

Chat
Pseudophilidae

Diphyllobothrium

Mouton, Vache,
Lapin, Homme,
Chien, Chat

Schistosomidae

Schistosoma

Homme

Douves

Fasciola

Homme, Mouton

Dicrocoelium

Homme, Mouton

Trmathode

Au niveau des boues, les donnes bibliographiques ne sont pas facilement exploitables, la
nature de lchantillon (boue brute, digres, dshydrates) nest pas toujours prcise, de
plus les rsultats sont exprims soit par gramme de boue humide, soit par gramme de boue
sche. Cependant, le nombre dufs retrouv schelonnent de 0 22,63 pour 100g de boue.
Une autre analyse sur les boues active non traite de 20 station en Nord-Ouest de la
France montre une contamination de 72,6% en ufs dhelminthes, plus de 90% appartiennent
principalement la famille des nmatodes et au genre Toxocara (70%) suivi par Capillaria >
Trichuris > Ascaris (Schwartzbrod et Banas 2003). Cette importante dispersion des
concentrations

est

due

aux

divers

facteurs

climatiques,

socio-conomiques

et

dmographiques. Dautres facteurs (Tableau 13) peuvent intervenir savoir :

La nature de leffluent raccord aux stations (urbains, industriel, hopitaux ou


dabatoires)

Le nombre dindividu et/ou danimaux infects

Le nombre dufs pondus quotidiennement par lespce dhelminthe.

Le nombre dufs limins par gramme de matire fcale humaine infeste.

28

Revue Bibliographique

Le systme de traitement des eaux uses (lagunage, boue active) et la forme, la


densit et la vitesse de sdimentation des ufs dhelminthes peuvent influencer la
concentration de ces derniers dans la phase boue (Stien, 1989) (Tableau 14).

Tableau 13: Nombre dufs pondus par jours chez differentes espces dhelminthes et la
valeur moyenne dhelminthes par gramme de matire fcale selon (Feachem et al., 1983;
Shuval et al., 1986)
Parasites

Nombre dufs/Jour

Rfrences

Agents

Quantit
excrt /g de
fcs

Ascaris

200 000

Feachem et al. Ascaris

104 -3 105

(1983)

lumbricoides

en cas
dinfection
grave

Ascaris suum

Trichuris

200 000 -450 000

Schistosoma

4 101

mansoni
10 000 45 000

Watson et al. Trichocephale

103

(1983)

trichura
Taenia

Pike (1983)

800 000 /segment

Kowal (1985)

200 000

Kowal et

Taenia

104

saginata
Ankylostoma

(1985)

duodenale

29

al. Ankylostome

1 102
102

Revue Bibliographique

Tableau 14: Paramtre physiques des ufs dhelminthes dans leau (Shuval, 1977)
Parasites

Taille m

Forme

Densit

Vt cm/sec

Vitesse
sedimentation
m/h

55 40

Sphrique

1,11

0,0181

0,65

60 40

Sphrique

1,055

0,0108

0,39

36

Sphrique

1,1

0,0074

0,26

22 50

Cylindrique

1,15

0,04261

1,53

50 150

Cylindrique

1,18

0,3386

12,55

Ascaris
lumbricoides
Ankylostome
Taenia saginata
Trichuris trichura
Schistosoma

III. 1. 4. 1. Mthodes danalyse des parasites et des germes dans la boue


Le dveloppement de la parasitologie mdicale a conduit un large ventail de techniques
pour le dnombrement des ufs d'helminthes intestinaux et des larves dans les fces. Ces
mthodes ont t adaptes l'numration des ufs d'helminthes dans les eaux uses, les
boues et le compost. De nombreux procds pour le dnombrement des oeufs d'helminthes
sont dcrits dans la littrature. Chaque mthode ses avantages et ses inconvnients, certaines
ont un taux de rcupration inconnue; certaines exigent des produits chimiques d'un cot
prohibitif ou sont autrement impropres une utilisation dans les laboratoires avec un
quipement limit; et d'autres ne rcuprent quun nombre limit d'espces. Il est clair qu'il
n'y a pas de mthode universelle, et aucune mthode ne concentrera toutes les espces avec
la mme efficacit.
Toutes les mthodes disponibles sont bases sur les principes de la mthode de Bailenger,
(1979) dont l'un des deux principes fondamentaux est la flotation des parasites, selon le
principe de l'quilibre hydrophile-lipophile de l'organisme lui-mme et sa densit relative par
rapport celle du ractif de sparation loin des autres dbris dans une solution de densit
relativement leve savoir le sulfate de zinc (ZnSO4, 33 %, d = 1,18), ou les composs gras
et autre matire sont spars dans une solution d'interphase (actate d'thyle ou l'ther
normale), tandis que les parasites se dcontent dans un tampon non-miscible. Les deux
processus s'appuient sur la force centrifuge. Bouhoum et Schwartzbrod (1989) ont compar
une srie de mthodes pour l'analyse des matires fcales en vue de les adapter des
30

Revue Bibliographique

chantillons d'eaux uses. De la vaste gamme de solutions de flotation tests, ils ont trouv
que l'iodomercurate (Janeckso et Urbany, 1931) concentre le plus grand nombre d'espces
dufs d'helminthes, mais ce ractif reste trop corrosif et coteux pour une utilisation de
routine. La mthode de Arthur (dcrit dans Faust et al., 1938), base sur le saccharose satur
en tant que solution de flottation, gnre des dformations rapides des ufs. Cependant, la
solution de sulfate de zinc (Faust et al., 1938) ne permet pas la bonne concentration de
Trichuris sp., ou Capillaria sp,. La mthode danalyse utilise (US, EPA) par Schwartzbord et
Banas (2003) ne permet pas de dtecter les Taenia. Cependant, les autres helminthes sont bien
retrouvs. Bouhoum et Schwartzbrod (1989), ont conclu que la mthode Bailenger (Bailenger,
1979), et quils ont adapt pour les eaux uses, tait la mthode la moins coteuse et la plus
rapide qui peut tre utilise. Nanmoins,

le procd nest pas adapt un nombre de

trmatodes qui peuvent flotter dans la solution de sulfate de zinc, avec un grand risque de se
dformer, ce qui rend difficile l'identification prcise. Il parait donc important de pouvoir
valuer le risque de contamination par les parasites, avec un outil mthodologique bien
adapt afin de mieux valuer lindicateur parasitaire.
A linstar des parasites, la charge en bactries pathognes est trs variable, en fonction de
lespce biologique et surtout du type de boue (primaire, mixte, biologique). Les bactries
les plus reprsentes dans les boues sont celles dorigine entrique (Shigella, Yersinia, Vibrio,
Escherchiaetc). Auxquelles sajoutent notamment les genres, Pseudomonas, Streptococcus,
Clostridium, Mycobactrium et Listeria. La prsence dun pathogne donn, comme le genre
salmonella, est en fonction de la prvalence de porteurs sains ou malades au sein de la
population. Les salmonelles sont frquement isoles dans les boues non traites des densits
atteignent 103 105/g MS (Nancie, 2000), les Pseudomonas sp, se trouvent en quantits assez
importantes dans les boues (6 8 log UFC/g MS).
Les Streptocoques fcaux sont proposs comme indicateurs pour confirmer lefficacit de
rduction des pathognes (Sahlstrm, 2003). Selon Sahlstrm (2003), les Streptocoques
fcaux sont les seuls indicateurs qui aient une corrlation significative avec les Listria
monocytognes. Ces derniers seraient aussi des indicateurs fiables, notamment pour valuer la
rduction des Salmonella (Bagge, 2005). Mais, ils sont moins appropris que les
Streptocoques fcaux en tant quindicateur de contamination fcale (El Abagay, 1984).
Les virus, agent infectieux la limite du monde vivant et du monde molculaire, sont des
microorganismes capsid avec soit un ADN ou ARN. Ils sont capables de pntrer et de se
miltiplier au sein dune cellule hote. Les principales familles de virus pathognes pour
lhomme susceptibles dtre rencontres dans le milieu hydrique sont :
31

Revue Bibliographique

Picornaviridae (Entrovirus)

Reoviridae (Rovirus et Rotavirus)

Caliciviridae (Calicivirus, Astrovirus)

Toroviridae (coronavirus-like)

Adenoviridae (Adnovirus)

Lingestion et linhalation sont les principales voies de transmission des virus. La recherche
des virus entriques dans la boue est gnralement limite aux Enterovirus qui sont des virus
ARN simple brin, le tractus alimentaire est la principale voie de contamination. Le pouvoir
infectieux de ces microorganismes passe inaperu, ils engendrent des manifestations subcliniques et sont gnralemnt lorigine des mningites, daltration des voies respiratoires, des
conjonctivites, de maladies cardiaques et gastro-intestinales. Les Enterovirus varient dune
quantit non dtectable 105 particules par 10g/MS de boue non traite (Cadiergues, 2000).
La biologie molculaire est un moyen danalyse quantitative des virus, la recherche des virus
a t ralise par culture cellulaire (cellules BGM) pour mettre en vidence leur infectiosit.
Lextraction pralable comprend une phase dlution, de concentration et de dcontamination
bactrienne et fongique (Monpoho, 2001). Cadiergues (2000) sest bas sur la dtection des
entrovirus dans la boue, nanmoins cette mthode est trs complexe et le rendemen et de
rcupration des entrovirus est trs faible. Pour les autres types de virus, virus hpatites,
Rotavirus, Astrovirus la biologie molculaire est la seule alternative pour leur dtection,
mme selle ne fournis pas dindication quant linfection des particules virales.
Les champignons (levures et moisissures) participent aussi avec un taux non ngligeable au
pouvoir de contamination; comme Aspergillus fumigatus, Candida albicans et Cryptococcus
neoformans. Comme linfection humaine se fait par contact direct ou inhalation, les risques
pour la sant sont surtout levs chez les travailleurs lors de la manipulation des boues lors de
la mise en dcharge, ou lors du traitement par compostage, ou bien chez les agrigulteurs lors
de lpandage agricole des boues sans prtraitement. Dautres symptmes rapports par des
travailleurs ont t lis aux endotoxines produites par les bactries Gram-ngatif (Deloraine,
2002). Des tudes sur ces composs dans le compost de boue nont jamais t effectues.
III. 1.4.2. Les outils dhyginisation
Lensemble de ces microorganismes pathognes et parasites provenant essentiellement des
matires fcales peuvent tre rencontrs dans les eaux uses brutes, des stations dpuration.
Le temps de sjour et la vitesse de sdimentation de ces microoragismes dfinissent la charge

32

Revue Bibliographique

du rcepteur final boues en microorganismes, do la ncesit dune hyginisation


pralable de boues avant leur utilisation (Garrec et al., 2003).
Meekings et al. (1996) ont montr que lAscaris lumbricodes, un parasite de lhomme et des
animaux, qui se dveloppe dans les intestins et se transmet par les excrments humains
infects contenant des oeufs, est dtruit des haute tempratures. De mme, Pereira-Neto et
al. (1986) ont affirm quune lvation de la temprature du compost 58 65 C pendant 10
15 jours a permis de rduire de manire significative le nombre de micro-organismes
pathognes savoir Escherichia coli et Salmonella (Tableau 15).

Tableau 15: Niveau de temprature et temps ncessaire pour dtruire certains pathognes
prsents dans les matriaux composter (Golueke, 1991)
Bactries pathognes

TC ltale

Parasites

TC ltale

Escherichia coli

15-20 mn 60 C ; 1h

Entamoeba hystolitica

68 C, temps inconnu

Taenia saginata

5 mn 71 C

Necator americanus

50 mn 45 C

55 C
Salmonella spp

15-20 mn 60 C ; 1h
55 C

Shigella spp

1h 55 C

Spillman et al. (1987) et Madeline (2003) ont montr que les coxsackievirus B5 sont
rapidement inactivs par des digestions thermiques arobies 61C. Cependant une digestion
anarobie msophile a montr un faible pouvoir hyginisant en comparaison avec le
traitement par chaulage (Monpoho, 2001). Cardigues (2000) a dmontr que le compostage
abouti la production dun compost exempt dentrovirus et la temperature a t le facteur
dterminant de linactivation virale.
Dautres paramtres peuvent aussi intervenir lhyginisation en matire dhelminthe, de
bactries et de virus. Leur survie dpend du niveau de tempertaure, de la valeur du pH, de
taux dhumidit, des teneurs en nutriments et du degrs de luminosit (UV).
La dshydratation est un moyen qui permet de diminuer jusqu 102 UFC/g MS des
bactries (Smith, 2005) dans une boue. Le pH peut tre un facteur de rduction de certaines
bactries, il a un effet toxique sur les Escherichia coli et sur les Salmonella. Un niveau lev
dAGV et un pH acide entranent une inactivation des Salmonella. Sahlstrm (2003) a montr
qu pH = 4 linactivation est beaucoup plus importante qu pH = 5. Les interactions
ngatives entre les bactries sont des facteurs non ngligeables. La composition par exemple
Salmonella typhimurium, Listeria monocytognes, Yersina enterocolitica utilisent les
33

Revue Bibliographique

nutriments qui sont aussi utiliss par dautres bactries, la concurrence sera donc importante
(Sahlstrm, 2003).
Les donnes bibliographiques indiquent que le compostage (dgradation arobie thermophile)
est un procd considr comme trs efficace en terme dhyginisation en liminant les agents
pathognes de boues notamment par le biais de llvation de la temprature (Deportes et al.,
1998, Vinneras et al., 2003). Les rayons UV comme les rayons gamma se trouvent tre un
outil efficace pour lhyginisation des boues d'puration (Rathod et al., 2009). D'autres types
de rayonnement, y compris alpha, bta et des rayons X ont galement t utiliss (Getoff,
1992).
III. 2. Principales filires de traitements de boues de STEP
Au Maroc, llimination de boues rsiduaires pose des problmes sous-estims ou mal pris en
compte dans les projets dinstallation. De plus, les possibilits dvacuation ne sont pas
nombreuses et sont soumises diverses contraintes. Comme cit auparavant, les oprations
disponibles sont complexes et coteuses pour la collectivit et leurs applications et validation
sur diffrents sites dvacuation choisis, permettent de juger davance leur dfaillance, vue les
consquences et les effets secondaires de certains procds existants pour le dsengorgement
de la station en boues. En termes de cots conomiques, la haute valeur de la redevance
environnementale dont la ncessit de grands espaces dvacuation, le transport/dchargement
et amnagement des sites, rend le cot de filire de traitement prohibitif, qui nest pas la
porte de budget de nombreuses communes au Maroc. De mme, la siccit et la forte charge
en matire organique hautement fermentescible de boues, les nuisances sanitaires en premier
temps olfactif pour la population avoisinante, hadicapent davantage certaines filires de
traitement et dlimination.
Actuellement, aucune filire de traitement de boues nest utilise au Maroc, bien que le Plan
National dAssainissement Liquide (PNA) recommande de dvelopper les recherches en
matire de traitement de ces boues. Plusieurs filires existent pour llimination de ces boues,
mais le choix doit tre tributaire du cot dinstallation, de lorigine des boues, de la valeur
ajoute du produit qui en rsulte et de limpact que pourrait avoir la filire retenue sur
lenvironnement.
La dshydratation (par centrifugation, filtre-presse, filtre bandes presseuses, lectrodshydratation...) librera une grande partie de leau constituant la plupart du volume des
boues. Les boues sont ensuite (selon leur toxicit ou degr d'innocuit pour l'environnement)
valorises comme amendement, stockes ou incinres.
34

Revue Bibliographique

La stabilisation par chaulage qui est un produit ancestral dynamis par un procd innovant.
Cette mthode a connu un dveloppement soutenu en raison de son efficacit vis--vis de la
maitrise des nuisances olfactives et de lintrt calcique des boues chaules pour les sols
acides (ADEME, 1996; Dousset et al., 1999). Le chaulage peut jouer sur deux facteurs selon
la chaux utilise (vive ou teinte). La chaux vive : ou oxyde de calcium provoque une raction
exothermique qui libre de la chaleur et entrane donc une monte en temprature, ce qui
permet de dtruire les pathognes. La chaux teinte: ou hydroxyde de calcium provoque une
augmentation du pH (jusqu 10) et une libration dammoniac, ce qui permet dinhiber
beaucoup de pathogne entriques (Heinonen-Tanski, 2006). Une digestion anarobie de
boues dpuration, suivie dun traitement la chaux (10%) permet une destruction complte
des bactries genre Salmonella.
Lincinration de boues de step permet la destruction de la matire organique des dchets
par combustion haute temprature (+ de 500 C) produisant des fumes et des matires
minrales rsiduelles nommes cendres. Dans lobjectif dune valorisation nergtique des
dchets, la chaleur produite est rcupre sous forme de vapeur ou d'lectricit pour le
fonctionnement du four lui-mme, pour le chauffage urbain ou industriel (Prevot, 2000).
Dans le cas de boues, lincinration est une technique difficilement maitrisable, due la
composition htrogne des boues; et la variation de leur teneur en eau font que ces rsidus
sont difficilement maniables et provoquent des coups de feu dans les incinrateurs (Stasta et
al., 2006; Nadziakiewicz et Koziol, 2003).
Lpandage agricole de boues de step est sans doute une solution envisageable. Les
composs tel que le carbone, l'azote, le phosphore et le potassium tant ainsi recycls et
valoriss par la vgtation en place (Lambkin et al., 2004). Nanmoins, lpandage direct de
boues non traites fait lobjet des rticences auprs des agriculteurs, en raison des risques lies
la prsence des agents pathognes, des odeurs nausabondes, ce qui peut prsenter un risque
pour le voisinage. Au Maroc, en absence de loi qui rglemente lusage de boues, il serait plus
judicieux dtre prudent et nautoriser que lpandage de boues traites au pralable, soit
aprs stabilisation, hyginisation et maturation. En raison des besoins grandissants de
valorisation et dlimination des dchets ; une voie naturelle de valorisation des dchets
organiques, comme la filire de compostage, comportant de nombreux avantages socioconomiques et surtout environnementaux peut tre applique. Il sera judicieux dtudier la
faisabilit de cette possibilit et tudier les possibilits de lintgrer dans le programme
national dassainissement liquide.
Valorisation par des procdes biotechnologiques selon deux filires arobie et anorobie ;
35

Revue Bibliographique

La biomthanisation de boues de step consiste en la transformation de la matire organique


par les bactries en anarobiose. Conduite dans des enceintes confines, appeles digesteurs
l'intrieur des quelles les ractions de fermentation sont optimises et contrles; elle produit
du biogaz mthane , en rduisant la moiti de la matire organique. Le traitement de boues
par biomthanisation doit tre justifi aprs des tudes en matire des besoins nergtiques et
les cots dnergie par rapport au march. En effet, le biogaz qui sera fournit doit tre
comptitif pour justifier les investissements ncessaires.
IV. Aperu sur la filire de compostage
Le processus du compostage est similaire celui de lhumification naturelle des rsidus
organiques en substances humiques dans les sols. Cette technique est considre prometteuse
car elle permet non seulement de restituer la matire organique aux sols ce qui permet de se
rapprocher des grands cycles naturel, mais aussi elle permet de rduire les risques
environnementaux lis laccumumation des dchets par la diminution de leurs volumes.
Lenjeu principal de cette pratique biotechnologique naturelle de dcomposition, est les
communauts microbiennes, qui colonisent les substrats initiaux et qui peuvent transformer
les substances organiques en produits stables et humifis, renfermant des nutriments
ncessaires la croissance des plantes et la stimulation de la microfaune du milieu rcepteur
notamment le sol, tout en produisant la chaleur mtabolique qui permet la destruction des
organismes pathognes.
IV.1. Lutilit de filire de compostage
De par lvolution dmographique, et industrielle, les produits et les dchets qui en rsultent
deviennent de plus en plus nombreux, diversifis et complexes. Il faut alors identifier puis
intgrer une filire de traitement la mieux adapte et la plus prenne possible. Au Maroc la
production des dchets est divrsifie ; majoritairement dchets mnagers, dchets verts, et les
dchets des stations dpurations. Le problme saccentue en absence de filire de sparation
entre dchets industriel et urbain surtout dans les stations dpuration. Nanmoins, plusieurs
travaux ont montr que la filire de compostage est bien adapte pour une large gamme de
substrats: effluent liquide dhuilerie, dchet mnagers (Barje et al., 2012, Abouelwafa, 2009),
les boue de STEP et dchets verts (Amir et al., 2001, 2010, Jouraiphy et al., 2007). Ces
auteurs ont montr que le procd de compostage a diffrents avantages et utilits dont les
principaux sont:

36

Revue Bibliographique

Proced de compostage est une cotechnologie qui permet de rduire les masses et les
volumes de dchets de moiti.
Procd biotechnologique, utilisant les potentialits microbiennes, pour transformer les
substrats organiques, en un produit (appel compost) stable et mature et exempt de
toute phytotoxicit.
Une dsodorisation parfaite de la transformation de lazote ammoniacal, responsable
principale des odeurs, en azote organique par les micro-organismes.
Il sagit dun amendement organique permettant d'amliorer la structure des sols
permettant l'aration, le drainage, la minralisation des composs organiques, et la
concentration des frtilisants qui permettra de rduire les carences nutritionnelles chez
certains vgtaux.
Laugmentation de la temprature permet la destruction des agents pathognes et la
destruction de graines dadventices, ainsi que linhibition de lactivit de certains
champignons lorigine de certaines maladies phytopathologiques.
Il possde un effet long terme dans le sol comparable aux fertilisants chimiques. Le
compost possde dautres proprits comme la diminution de lrosion des sols,
laugmentation de la capacit de rtention en eau ou lamlioration des changes
gazeux.
Enrichir et maintenir la biodiversit des populations microbiennes des sols.

IV.2. Principaux paramtres physico-chimiques de fonctionnement de compostage


Lors de la caractrisation et la valorisation dun dchet par la filire de compostage, plusieurs
paramtres sont identifier: les constituants, les caractristiques physico-chimiques, la
concentration en lments carbons et azots, et la prsence de certains polluants. Leurs
applications et leurs validations globale avec un savoir faire permet dans un premier temps de
juger de lefficacit de cette approche, en raison de son intrt pour les exploitants. En effet,
plusieurs usines ainsi que des entreprises ont chou pour dvelopper la filire du
compostage, en absence dune dmarche pralablement tudie selon les conditions relles de
fonctionnement de cette filire. Pour valider la mthodologie sur la filire compostage en
incluant la collecte, le procd, et galement la valorisation du compost, un bilan est ensuite
tabli et la slection des indicateurs et des paramtres les plus pertinents est effectue
(Charnay, 2005).
Au cours du compostage loxydation des composs organiques est le pilier de transformation
des dchets organiques, ce phnomne est troitement li aux conditions physico-chimiques
du milieu susceptibles daffecter la dcomposition de la matire organique, lis la texture, la
37

Revue Bibliographique

structure des substrats composts. Le processus de loxydation, en gnral, est influenc par:
Le taux doxygne : loxygne est utilis par les micro-organismes comme un rcepteur
terminal dlectrons lors de la respiration arobie et de loxydation des substances organiques,
pour un bon droulement de compostage et afin de maintenir les conditions arobies
ncessaires une dcomposition rapide et inodore. Un taux doxygne lacunaire doit tre
ajust pour le fonctionnement des micro-organismes. Selon Tomati et al. (1995), la prsence
doxygne un seuil minimal de lordre de 5% dO2 est indispensable au bon droulement du
compostage. Pour se faire, la porosit des substrats et la taille des andains doivent tre
contrles.
La granulomtrie grossire favorise la circulation d'air permet une bonne oxygnation des
composts en vitant les conditions d'anarobioses. Pour une granulomtrie trop leve, les
apports en oxygne vont dpasser les teneurs optimales, asschant le compost, et la monte en
temprature se ralisera difficilement. Au contraire, une granulomtrie trop fine induit un
espace lacunaire trop rduit et diminue la circulation de lair induisant un touffement du
compost. Nanmoins, la taille des matriaux composter doit tre moyennement petite pour
augmenter la surface de contact avec les microorganismes et les enzymes (Trmier et al.,
2009) et par consquence une vitesse de dgradation importante. Cette taille selon la
littrature doit tre comprise entre 1,3 et 5 cm. Les particules qui dpassent significativement
cette grandeur doivent subir un broyage. Si la teneur en oxygne est trop faible ou la
masse composter trop compacte, les conditions favorables lanarobiose se mettent
en place. Ce type de fermentation aboutit un produit stabilis mais par le biais dun
processus plus lent avec dgagement dodeurs nausabondes. Cependant, au fur et mesure
de la dgradation du substrat, le besoin en oxygne diminue et la pratique exige lapport
supplmentaire doxygne au cours du compostage. Plusieurs systmes daration existent:
retournements mcaniques, aration force ou pilote, avec ou sans recirculation (Bari et
Koenig,

2001).

Toutefois,

le

retournement

mcanique

permet

aussi

damliorer

lhomognisation des substrats (Ruggieri et al., 2008). Lapport doxygne rduit davantage
lhumidit initiale si elle est trop forte, comme le cas de compostage des boues et des effluents
dhuilerie, et amliore lhomognit du substrat et diminue une possible lvation excessive
de temprature.
Lhumidit est un facteur indispensable la dcomposition des substrats, bien que si la
teneur en eau est en dessous de 20%, la dcomposition sera inhibe. En revanche, si elle
dpasse 70%, leau commence remplir les espaces lacunaires des dchets et empche les
changes doxygne, provoquant des conditions favorables lanarobiose. Selon plusieurs
38

Revue Bibliographique

auteurs (Richard et al., 2002) loptimum de teneur en eau se situe entre 40% et 60%. Une
partie d'nergie calorique dgage lors du compostage sert l'vaporation de l'eau qui est en
grande partie vacue l'extrieur du compost, provoquant son asschement. L'intensit de
ces pertes varie selon les caractristiques des matriaux composts, et les conditions de
compostage. Des pertes de l'ordre de 50% du taux d'humidit sont frquemment mesures
(Sadaka et El Taweel, 2003). Pour compenser une perte excessive en eau qui limiterait
l'activit microbienne, un arrosage est souvent ralis.
Le rapport C/N est un facteur indisponsable lactivit biologique. Les bactries utilisent le
carbone comme source dnergie et lazote comme source protique. Le procd de
compostage entrane une dcomposition de la MO, donc une consommation de lazote et du
carbone, correspondant la diminution du rapport C/N. Le C/N dun substrat est trs
variable et dpend de la composition intrinsque du substrat composter Mustin (1987).
Mustin, (1987); et Gootas, (1959), ont montr que le gazon coup un C/N de 12, le tabac de
13, les lgumes

de 12-30, les ordures mnagres de 25, les papiers-cartons de 70, les

branches darbres de 70, la paille de bl de 128, la sciure de bois 200, les dchets verts 30.
De nombreux auteurs (Ait Baddi et al., 2004 ; Barje, 2010, Hachicha et al., 2009 ; Vergnous
et al., 2009) ont ralis des essais du compostage avec des substrats dont le rapport C/N varie
dun substrat un autre en dbut de compostage. Il est donc ncessaire de connatre le rapport
C/N initial des dchets afin de produire un mlange optimal en ajustant ce rapport par lajout
des quantits dlments dficitaires/riches pour avoir un C/N dans les limites, afin dassurer
une dgradation idale et homogne sur lensemble du processus. Le rapport C/N selon les
donnes bibliographiques (Larsen et Mc Cartney, 2000 ; Amir et al., 2001, Mbuligwe et al.,
2002, Sadaka et El Taweel, 2003; Antizar-Ladislao et al., 2005) doit tre compris entre 25 et
40 ltat initial, si le rapport est trs bas (infrieur 12), on assiste une perte dazote donc
une production dammoniac (la dgradation des acides amins).

Par contre, sil est

suprieur 40, le processus de la dgradation devient lent. Cependant, un C/N final autour de
10-15 a t tabli par diffrent auteurs (Ait Baddi et al., 2004 ; Jouraiphy, 2007 ; Barje, 2010,
Hachicha et al., 2009 ; Vergnous et al., 2009) comme un indicateur de la maturit des
substrats. Un autre paramtre chimique important, vient de sajouter pour valuer la maturit
des substrats composts NO3-/NH4+, au cours de compostage, une diminution de lazote
ammoniacal, rgulirement observe par plusieurs auteurs (Haug, 1993; Amir, 2005;
Jourauphy, 2007; Barje et al., 2012; El Fels et al., 2014a). Ceci est d au processus de
nitrification et lincorporation de N-inorganique dans les tissus microbiens durant leur
croissance et aussi la perte dazote sous forme dammoniac, en particulier pendant la phase
39

Revue Bibliographique

thermophile (Bishop et Godfey 1983). En parallle, les teneurs en nitrates voluent


inversement que les teneurs dazote ammoniacal, ce qui explique le phnomne de
nitrification de lammonium. Lenrichissement du compost final en NO3- par apport NH4+
traduit lvolution de substrat vers un compost exempt de phytotoxicit (Mustin, 1987 ;
Benhassou, 1998; Charnay, 2005 ; El Fels et al., 2014a). En effet, les teneurs en ammonium
NH4+ leves peuvent induire une phytotoxicit. Dans ce cas, le rapport NH4+/NO3- infrieur
1, peut tre considr selon plusieurs auteurs comme indicateur de maturit de composts
(Amir, 2005 ; Barje, 2010, Hachicha et al., 2009 ; Vergnous et al., 2009, El Fels et al., 2014a).
Le pH et la temprature sont des paramtres interdpendants et difficilement dissociables
la maturit des composts. Au cours du compostage, le pH peut subir des variations
gnralement comprises entre 6 et 8 (Amir, 2005 ; Abouelwafa et al., 2008). A la premire
phase de compostage le pH diminue lgerement cette diminution du pH est due la
production des acides organiques et la dissolution de CO2 dans le milieu et/ou le produit de
dgradation des molcules simples (glucides et lipides). Ces acides provoquent une
acidification du milieu cause de leurs accumulation (Kochtitzky et al., 1969; Mustin, 1987;
Hafidi, 1996; Peters et al., 2000 ; Ait Baddi et al., 2004). Une lgre augmentation dans la
phase qui suit peut sexpliquer par le processus de lammonification et la production
ammoniacale partir de la dgradation des amines (protines, bases azote..), et peut tre une
libration des bases dj existantes dans les dchets organiques (Ouatmane et al., 2000). Cette
augmentation est gnralement autour des valeurs neutres et les composts matures ont un pH
voisin de la neutralit. Ce phnomne de stabilisation du pH peut sexpliquer par le pouvoir
tampon de lhumus qui est form dans la phase de maturation.
La Temprature est le premier paramtre physico-chimique qui reflte la compostabilit des
substrats. Le suivi de ce paramtre est une mesure de lintensit de dcomposition. Ce
paramtre physico-chimique du substrat au cours du procd va dcouler le rajustement des
conditions du procd: ajout deau, frquences des retournements...etc. La temprature de la
phase thermophile (phase dhygnisation) pour un compostage bien ar peut atteindre (50
65C). Khalil et al. (2001) et Liang et al. (2003) ont montr quune temprature suprieure
80C inhibe lactivit bactrienne et par consquence affecte ngativement le processus du
compostage. La libration de la chaleur au cours de la dcomposition des substrats organiques
se fait selon la raction suivante (Mustin, 1987):
CnH2nOn + xO2

yH2O + zCO2 + nergie (chaleur).

40

Revue Bibliographique

Une temprature au-del de 55C au moins pendant 5 jours de compostage lair libre est
considre comme une temprature dhygnisation selon lU.S.E.P.A (1994) ; Charnay, 2005.
Cependant, selon lADEME (1998), pour obtenir une bonne hyginisation la temprature
devrait dpasser 60C pendant une semaine dans des racteurs. En pratique, un produit est
dit hyginis aprs 15 jours une temprature suprieure 55C ou une semaine 65C
pour des systmes lair libre, ou 7 jours en aration force pour des tempratures suprieures
60C (W.R.A.P, 2004). Nanmoins, avec une monte en temprature suffisante, il existe un
risque pour le compost de rinfection de laction de certains pathognes en tat de
rsistance (Hamer, 2003). Dautre auteurs ont montr quil est difficile dhomogniser la
temprature au cours de compostage, ce qui peut permettre aux germes pathognes
(Salmonella,

E.coli,

Coliformes

fcauxetc)

dchapper

au

processus

thermique

dhygnisation (Tnner-Klank et al., 2007 ; Bhatia et al., 2013 ). Ceci soulve la question sur
le rle insuffisant de la temprature comme seul paramtre de rduction des pathognes. Pour
mieux illucider cette question, une partie de notre travail a trait cette problmatique. A la fin
dun compostage, un compost est considr mature si la temprature est stable et voisine de la
temprature ambiante extrieure sans excder 35C.
IV.3. La microbiologie du compostage et sa contribution la dtermination des phases
de compostage
La biodgradation de la matire organique par les microorganismes est le pilier de la
transformation des dchets organiques au cours du compostage. Lvolution des
microorganismes prsente un profil dfini en fonction des espces, au cours des diffrentes
phases de compostage. Cette volution est lie principalement aux variations des paramtres
physico-chimiques, la nature et la structure des substrats composts (Rosenzweig et al., 1980).
Plusieurs phases thoriques se succdent au cours du compostage. La premire est appele
phase msophile du fait des tempratures atteintes infrieures 45C. Avec lamnagement
des andains et la disponibilit des conditions favorables (matire premire, ajustement des
conditions physico-chimique : Humidit, aration, C/N,) les envahisseurs initiaux des
substrats (microorganismes msophiles) activent leur mtabolisme sur les substrats faciles
mtaboliser (sucres simples et acides amins libres), ce qui engendre une production de la
chaleur et lve la temprature de compostage. La chaleur dgage au cours de cette phase
dpend de la nature des dchets composts et le type disolement du milieu extrieur (Ahn et
al., 2009). Ensuite, un changement de communauts msophiliques par les communauts
thermotolrantes et thermophiles. Les nouvelles conditions prpares par les micro41

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organismes msophiles, facilitent linstallation des espces thermophiles qui reprennent le


travail de dgradation de substrat et poursuivent le processus, il sen suit une augmentation de
la temprature jusqu 65C voire 75C. Durant cette phase trs active, une partie importante
de la matire organique est perdue par minralisation du carbone organique et dgagement de
CO2. Un asschement du compost li lvaporation de leau est souvent observ. Cependant,
la hausse de temprature est cruciale pour la qualit du compost. Cette phase dgradative
(phase thermophile) est suivie par une priode de ralentissement de lactivit, pendant laquelle
la temprature diminue graduellement. De nouveaux microorganismes msophiles colonisent
nouveau le compost, et sen suit une phase de maturation constructive o apparaissent
lentement des lments prcurseurs de l'humus. Le processus dhumification prdomine, le
taux des substances humiques samliore par polymrisation et condensation des substances
libres lors de la dcomposition de la matire organique rsistante cette phase, ce qui
entrane une coloration brune fonce noir du compost et rend celui-ci plus fin et homogne.
Le compost est alors mature et le processus est achev.
Haruta et al. (2005) ont soulign que la microbiologie du compostage doit tre tudie
travers les divers aspects, notamment la composition et la succession des communauts
pendant le processus, les micro-habitats, ainsi que les fonctions des microorganismes au sein
de la communaut. Ces bienfaiteurs du droulement du procd biotechnologique
compostage sont classs comme suit :
Les bactries:
Sont toujours largement dominantes dans les dchets organiques surtout des boues (Jouraiphy,
2007 ; Chroni et al., 2009; Barje, 2010), en qualit et quantit au cours du compostage. Les
bactries se distinguent dautres microorganismes comme les champignons par leur rapport
surface/volume trs lev, qui leur permettent des transferts rapides de substrats solubles
l'intrieur de la cellule (Tuomela et al., 2000).
Les bactries isoles dans les diffrents types de compost constituent une importante diversit
en genres et activits (Tableau 16). Afin de comprendre lvolution microbienne de
nombreuses tudes de dnombrement microbiologiques au cours du processus de compostage,
ont t faites. Ryckeboer et al. (2003) et Haruta et al. (2005) ont compil les diffrentes tudes
pr-existantes et ont tabli une liste des espces isoles pour chacune des phases de
compostage en fonction de la temprature et du pH.

42

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Tableau 16: Diffrents microorganismes isols en fonction des phases de compostage


(Ryckeboer et al., 2003; Haruta et al., 2005)
Phase msophile
Alcaligenaceae,
Alteromonadaceae,
Bacillaceae,
Burkholderiaceae,
Bradyrhizobiaceae,
Caryophanaceae,
Caulobacteraceae,
Cellulomonadaceae,
Clostridiaceae,
Comamonadaceae,
Corynebacteriaceae,
Enterobacteriaceae,
Flavobacteriaceae,
Flexibacteraceae,
Hyphomicrobiaceae

Phase thermophile
Actinomyctes :
Micromonosporaceae,
Streptomycetaceae,
Thermoactinomycetaceae,
Thermomonosporaceae et
Streptosporangiaceae

Phase maturation
Autre Actinomyctes

Aprs la phase de dgradation, la diversit taxonomique microbienne change encore la


phase de maturation (Haruta et al., 2005). Des bactries filamenteuses multicellulaires
agissant plus tardivement que les autres et jouent un rle important au cours de compostage,
cas des actinomyctes (Tableau 16). Tuomela et al. (2000) ont montr leur apparition lors de
la phase thermophile et pendant la phase de maturation du compostage. Deloraine (2002), a
montr une charge en actinomyctes thermophiles (bactrie Gram-positif) de lordre de 103
UFC/g MS dans le produit de dpart, et 3 106 UFC/g MS dans le produit final (compost), le
genre Thermomonospora (75% des souches) et Thermoactinomyces (10% des souches) sont
dnombres au dbut de processus, Saccharomonospora viridis et Faenia rectivirgula tant
les populations prsentent pendant la phase de maturation. Les actinomyctes caractriss par
une croissance lente tolrent des pH lgrement basiques. Ils peuvent cependant dgrader la
cellulose et la lignine comme certains champignons, tout en tolrant des tempratures et un
pH plus levs que les champignons. Deloraine (2002) a isol des champignons thermophiles
dont la concentration est de lordre de 103 105 UFC/g MS avec une lgre difference entre
les deux phases de compostage. Les concentrations de boue en Aspergillus vont de 102 103
UFC/g MS mais peuvent tre plus importantes (jusqu 107 UFC/g MS) lorsque des copeaux
de bois sont rajouts. Les actinomyctes sont des agents essentiels de la lignocellulolyse
pendant la phase thermophile, bien que leur capacit de dgrader la cellulose et la lignine ne
soit pas aussi tendue que celle des champignons (Tuomela et al., 2000).
43

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Pour que le processus soit complet, lactivit combine des diffrents micro-organismes doit
tre implique, afin dassurer lvolution et la biotransformation de la matire organique
(Chroni et al., 2009).
Les champignons
La temprature est le facteur le plus important qui affecte la croissance fongique, la plupart
des champignons prfrent un environnement acide et tolrent un large ventail de pH avec
un niveau modrment lev de l'azote ncessaire leur dveloppement. La majorit des
champignons sont msophile et se dveloppent entre 5 et 37C, avec une temprature
optimale de 25-30C (Dix et Webster, 1995). Nanmoins, le processus de compostage,
engendre des tempratures importantes, do le rle capital de petits groupes de champignons
thermophiles dans la biodgradation de la matire organique. Diffrents auteurs (Mouchacca,
1997 ; Tuomela et al., 2000) ont isol des champignons thermotolrants capables de dgrader
la lignine, la cellulose et/ou les hmicelluloses.
A ct de ces trois grands groupes (bactries, chamapignons et actinomyctes) qui assurent
lessentiel de lactivit du compostage. On retrouve galement dans le compost des algues,
des virus, des protozoaires, et les macro-organismes comme les lombrics, les insectes, les
acariens, les gastropodes, les myriapodes, les cloportes, etc.
Lensemble de ces microorganismes qui peuvent coexister et coloniser les substrats de
compostage refltent lvolution et la performance du processus de compostage. Les
diffrentes voies mtaboliques conduisent des changements importants dans les paramtres
physico-chimiques du substrat, qui son tour conduit des changements de communaut et
influence la densit microbienne et la succession des microorganismes au cours de
compostage.

Les travaux (Chroni et al., 2009, Barje, 2010) indiquent que les bactries

msophiles sont susceptibles davoir une action primordiale lors de la biodgradation de la


matire organique, dautres tudes ont not que les champignons et les actinomyctes agissent
plus tardivement (Tableau 16).
IV.4. Critres de maturit des composts
La qualit du compost dpend du degr de stabilisation de la matire organique. Il est donc
essentiel de dterminer le degr de maturit du produit, cest dire le stade partir duquel le
compost nentrane plus deffet phytotoxique. Diffrents critres et indicateurs allant des plus
rudimentaires aux plus sophistiqus permettent de dfinir les classes de composts et
galement sa maturit. Nanmoins, il nexiste pas de critre de maturit unique et universel, il
44

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est souvent ncessaire dutiliser simultanment plusieurs critres pour sassurer de la maturit
dun compost.
IV. 4.1. Les critres empiriques
Lapproche, base sur lexprience de lexprimentateur, permet de dterminer la maturit
dun compost. Il doit ressembler du terreau tant par sa couleur noire fonce que par
labsence dodeur dsagrable (Iglesias-Jimenez et Perez-Garcia, 1989, Mbuligwe et al.,
2002), et souple au toucher avec une texture friable. Sa temprature en fin de processus doit
tre stable et voisine de la temprature ambiante extrieure (Harada et al., 1981, Barje
et al., 2013).
IV.4.2. Indicateurs physiques et analyses spectroscopiques
Laugmentation de la temprature des andains au-del de la temprature ambiante est le
premier signe dvolution des substrats. La densit optique aprs mise en solution dans leau
(extrait du compost), permet de dtecter la prsence de diffrents composs comme les
substances humiques 280 nm (Morel, 1982), ou le taux dhumification en fonction du
rapports dabsorbances obtenues 465 et 665 nm (E465/E665) (Deiana et al., 1990; Barje,
2010). Linfrarouge transforme de Fourier (FTIR) est une mthode non destructive et
rapide qui permet de caractriser les principaux groupes fonctionnels de matrices complexes
(Hsu et Lo, 1999 ; Ranalli et al., 2001; Castaldi et al., 2005), les mthodes calorimtriques
comparent le comportement thermique (Pietro et Paola, 2004; Ranalli et al., 2001), la
fluorescence (Provenzano, 1998), ou la rsonance magntique nuclaire (RMN) du carbone
13 (Matejka et al., 1994). En gnral, les mthodes spectroscopiques ont tendance mesurer
le degr daliphaticit et le degr daromaticit, dont le rapport C-aromatqiue/C-aliphatiques
augmente avec la maturation du compost.
IV.4.3. Indicateurs chimiques
Les principaux paramtres relatives au degr de maturit des composts se basent sur
lvolution de: pH, le rapport C/N et le rapport NH4+/NO3- (Charnay, 2005). Les pH acides
sont caractristiques des composts immatures. Les composts matures ont un pH voisin
de la neutralit ou suprieur (entre 7 et 9) (Avnimelech et al., 1996). Le rapport C/N est le
paramtre le plus communment mesur pour valuer la maturit dun compost. Un rapport
C/N infrieur 12 est considr comme un indicateur de maturit pour le compost (IglesiasJimenez et al.,, 1993 ; Bernal, 1998), souvent ce rapport est proche de 10. Lajout dun
45

Revue Bibliographique

compost mature (C/N<15) dans le sol naltre pas lquilibre microbiologique du sol (Bernal,
1998). Une tude de Sanchez-Monedero (2001) conclut que la perte dazote dans un compost
dordures mnagres est proche de 40% et quun rapport NH4+/NO3-, infrieur 1 correspond
un indicateur de maturit. Une tude bibliographique de Charnay (2005) ; Achour (2008),
montre que lazote organique des composts stabiliss, se minralise lentement, avec une
vitesse similaire celle des sols (0,26 mg N/kg/j) sans volution avec lge du compost. Pour
les composts moins stables, la vitesse de minralisation est suprieure (0,4 mg N/kg/j) (Houot
et al., 2002). La qualit du compost est galement value par le suivi de lazote. En effet,
les micro-organismes nitrifient le substrat, se traduisant par une diminution de la
concentration en ammonium et une apparition dions nitrate. Zucconi et De Bertoldi (1987)
fixent la limite de stabilit dun compost de matire organique pour une concentration en
ammonium voisine de 0,04% soit 400 mg/kg. (Bernal, 1998) limite le rapport [NH4+]/[NO3-]
une valeur infrieur 0,16 pour un compost mature. Le processus dhumification produit des
groupes fonctionnels et augmente loxydation de la MO, provoquant un accroissement de la
capacit dchange cationique (C.E.C). Le suivi de ce paramtre permet galement
lapprciation de la maturit dun compost (Harada et Inoko, 1981).
IV.4.4. Indicateurs biologiques
Malgr la performance des paramtres physico-chimiques, ils restent insuffisants pour
dterminer avec certitude la maturit dun compost. En effet, ces mthodes ne prennent pas
en considration les sous-produits de biodgradation ou de transformation des composs
phytotoxiques, ce qui conduit une sous-estimation des risques phytotoxiques. Afin de palier
cette difficult, il est ncessaire de combiner les indicateurs physico-chimiques de maturit
avec des paramtres biologiques. Si les diffrents indicateurs physico-chimiques et
spectroscopiques permettent dvaluer, dans certaines limites, la maturit dun compost, ils
demeurent moins efficaces pour lvaluation des risques de phytotoxicit relles et les effets
des interactions des composs de biodgradation. De nombreux auteurs se sont intresss aux
alternatives dvaluation de la maturit des composts, en comparant les diffrentes mthodes
entre elles (A.D.A.S Consulting Limited, 2005; Francou, 2003; Avnimelech et al., 1996;
Morel et al., 1986; Godden, 1986). Il en ressort, quaucune mthode ne semble satisfaisante,
comme mthode de rfrence, do la ncessit dutiliser simulatanment plusieurs
paramtres afin de sassurer de la maturit de compost. Globalement, les mthodes
dapprciation de la maturit sont bases sur ltat de stabilit de la MO, et ses consquences
sur lactivit microbienne des composts et des sols-plante (Houot et al., 2002).
46

Revue Bibliographique

La maturit dun compost est le plus souvent associe la germination et la croissance des
plantes incluant la phyto-toxicit et la gnotoxicit gnrs par les polluants. Lvaluation
des risques lis la pollution ncessite de disposer doutils biologiques permettant dapprcier
limpact des polluants sur les tres vivants. La rponse ces questions implique lvaluation
des effets de lensemble des contaminants biodisponibles, laide dune approche biologique
venant complter les analyses physico-chimiques. La ncessit de dvelopper de tels outils
cotoxicologiques pour les organismes en charge de problmatiques environnementales
apparat clairement dans diffrents domaines.
IV.4.4 .1. Test respiromtrique et dauto-chauffement
Lactivit des micro-organismes de compostage peut tre aussi un indicateur de la stabilit
du compost, la mesure de ce paramtre repose sur la mesure de lactivit respiratoire des
micro-organismes prsents dans le compost, dans des conditions spcifiques dincubation
(humidit, temprature). Un compost non mr a une demande en O2 et un taux de production
de CO2 importants, dus une intense activit microbienne provoque par la biodgradabilit
du substrat (Nicolardot, 1982, Bernal, 1998). Une des consquences majeures de lintense
activit des micro-organismes est la production de chaleur lors de la dgradation de la MO.
Le degr de dcomposition de celle-ci peut donc tre valu par son aptitude remonter en
temprature (auto-chauffement) (Krner et al., 2003).
IV.4.4 .2. Phytotoxicit
La phytotoxicit est souvent value par ltude de la germination ou par des tests de
croissance (Saebo et Ferrini, 2006; Said-Pullicino et al., 2007). Les tests de phytotoxicit sont
utiliss par plusieurs auteurs pour valuer la toxicit de composts lie leur incorporation au
sol. En effet, les composts mrs ne doivent pas prsenter des substances empchant la
germination des graines et la croissance des plantes. Plusieurs graines peuvent tre choisies
pour ce test au vu de leurs sensibilits (Navet, Cresson, Luzerne, Tomate, Laitueetc).
Lacide actique, actaldhyde, thanol, actone, thylnesont selon la littrature, des
composs librs par les composts immatures, et ils contribuent aux effets phytotoxiques
(Jimenez et Garcia, 1989). Dautres auteurs (Levy et al., 2003; Piotrowska et al., 2006) ont
montr que lapplication de composts peut prsenter ventuellement une certaine
phytotoxicit et peut causer des effets nfastes sur la germination des graines et la croissance
des plantes. Un indice de germination (IG) doit tre calcul pour lvaluation des effets de
compost, ainsi Barje (2010), a montr des indices de germination trs faibles (IG < 20,5%)
47

Revue Bibliographique

des stades initiaux du compostage, indiquant une phytotoxicit importante des dchets
dhuileries dolives-dchets mnagers tudis. Cependant un IG suprieur 50% est reconnu
comme tant celui dun compost sans effet phytotoxique (Chikae et al., 2006). Ait Baddi et al.
(2004) et Barje (2010), ont montr des valeurs de IG de 99% des stades finaux de
compostage, ce qui reflte une rduction importante de la phytotoxicit, montrant ainsi un
degr de maturit remarquable des composts obtenus.
IV. 4. 4. 3. Test de Gnotoxicit
Diffrents essais ont t dvelopps pour mettre en vidence la gnotoxicit et la mutagnicit
des polluants. Les tests bactriens (tests dAmes, umu, SOS chromotest, Mutatox), le test
des aberrations chromosomiques sur Allium cepa et le test de micronoyaux sur plantes
suprieures (Tradescantia sp., Vicia faba), sur ligne hpatocytaire humaine en vue
dapprcier la gnotoxicit des dsinfectants chlors prsents dans leau du robinet (Feretti et
al., 2006) et sur larves damphibiens (Pleurodeles waltl, Xenopus laevis) qui ont t les plus
utiliss et se sont rvls pertinents dans lvaluation de la gnotoxicit/mutagnicit des
polluants HAPs (Cotelle et al., 1999 ; Mendona & Picado, 2002 ; Sasek et al., 2003 ; Plaza
et al., 2005 ; Mouchet et al., 2006); et ETM (De Marco et al., 1988 ; Bolan et al., 2003;
Bernhard et al., 2005, Marcato-Romain et al., 2009, Jiang et al., 2013). Selon les donnes
biblioraphiques

de

(Foltte,

2010)

diffrents

essais

estiment

le

caractre

gnotoxique/mutagne de la fraction aqueuse ou organique par plusieurs techniques.


IV.4.4 .4. Marquage 32Phosphore des adduits lADN
Le marquage

32

Phosphore des adduits lADN est utilis pour mettre en vidence la

gnotoxicit des sols contamins, cette technique a t la premire technique employe chez
les vers de terre (Van Schooten et al., 1995, Martin et al., 2005). En raison de son cot lev,
du faible nombre dchantillons pouvant tre analyss et surtout de la radioactivit du
32

Phosphore, cette technique de dtection des dommages lADN chez les vers de terre a t

dlaisse au profit notamment de lessai comet ou single-cell gel electrophoresis assay


(SCGE).
IV.4.4.5. Mesure des dommages lADN par lessai comet
Lessai comet ou single-cell gel electrophoresis assay (SCGE) mesure le degr de dommages
lADN des cellules. Ostling et Johanson (1984), ont dvelopp cet essai en condition de pH
neutre afin de mesurer les dommages de type cassure double brins de lADN. Singh et al.
48

Revue Bibliographique

(1988) ont dvelopp cet essai en conditions alcalines (pH > 13), cette mthode est la plus
applique aujourdhui cause de sa sensibilit. En effet, la version alcaline de lessai comet
permet de mesurer la fois les dommages double-brins, simple brin et lexpression des sites
alcali-labiles de la molcule dADN, ainsi que les sites dexcision rparation incomplte et les
ponts intercatnaires dADN (Gichner, 2006 ; Pourrut et al., 2008). Le test consiste raliser
une lectrophorse en gel dagarose applique aux noyaux cellulaires dun tissu vivant donn.
Llectrophorse permet de sparer les brins dADN en fonction de leur taille. Un logiciel
ddi permet dvaluer le pourcentage de dommages de lADN des noyaux tudis.
Cette technique a t utilise par plusieurs auteurs (Koppen et Verschaeve, 1996, Lin et al.,
2007 ; Pourrut et al., 2008) pour valuer leffet des mtaux lourds en solution tels que le
cadmium, le chrome trivalent (Cr(III)) ou hexavalent (Cr(VI)) et le plomb chez la fve V.
faba. Lin et al. (2005), ont montr des dommages lADN au niveau des racines de la fve V.
faba aprs 2 heures dexposition un sol dop en cadmium des concentrations comprises
entre 0,5 et 2 mg/kg.
IV.4.4.6. Mesure de la 8-hydroxydoxyguanosine
Linduction de la 8-hydroxydoxyguanosine (8-OH-dG), qui traduit des dommages oxydatifs
la molcule dADN, a fait lobjet dune tude rcente chez des vers de terre en condition
contrle. Nakashima et al. (2008), ont ainsi mesur par chromatographie en phase liquide
haute performance (HPLC) linduction de la 8-OH-dG au niveau des vsicules sminales du
ver de terre E. fetida,

aprs 3 mois dexposition un sol dop au cadmium une

concentration de 10 mg/kg de sol.


IV.4. 4.7. Modifications des quantits et des squences dADN par cytomtrie en flux et
AFLP
Deux techniques de biologie molculaire savoir la cytomtrie en flux (FCM) ainsi que
lAFLP (amplified fragment-length polymorphism) ont t utilises pour la mise en vidence
de la gnotoxicit de mtaux lourds (Cd, Cr(VI), Ni). La cytomtrie en flux permet de
quantifier les variations de la quantit dADN, plus prcisment la perte dADN nuclaire.
LAFLP permet de quantifier les changements au niveau de la squence dADN. Citterio et
al. (2002) ont utilis ces techniques chez le trfle blanc T. repens, et ont montr la perte
dADN nuclaire et laugmentation des dbris dADN dans les pousses et les racines de trfle
aprs 15 jours dexposition un sol enrichi en chrome hexavalent des concentrations de 25
et 50 mg/kg, et un sol enrichi en cadmium des concentrations de 17,5 et 52,5 mg/kg.
49

Revue Bibliographique

IV.4.4 .8. Micronoyaux


Ce test a t largement utilis pour valuer laptitude dun polluant provoquer des
aberrations chromosomiques. Il est actuellement normalis ISO sur vicia faba. Il consiste en
une observation microscopique des noyaux des cellules vgtales aprs coloration lactoorcine. La prsence dans le cytoplasme de petits lments nuclaires appels micronoyaux
traduit une dtrioration irrversible de lADN cellulaire form partir de fragements
chromosomiques ou de chromosomes entiers pendant la tlophase lors de la mitose suite
laction dagents mutagnes (clastognes et/ou aneugnes). Le test des micronoyaux permet
de dterminer aussi les cellules binucles qui sont bloques au cytodirse ou la fusion
cellulaire (Rodilla, 1993), ce qui permet de determiner les cellules apoptotiques (Izquierdo et
al., 2003). Vicia faba est un modl idal pour ce test de gnotoxicit (Ferrara et al., 2000) qui
permet par une exposition directe aux polluants chimiques prsents dans lenvironnement et
dvaluer leurs potentiel gnotoxiques. Parmi les composs pouvant induire des micronoyaux,
nous pouvons citer les HAPs qui induisent des adduits lADN, les mtaux lourds qui
induisent de manire gnrale des cassures de brins dADN (Cd, Pb, Cr), ainsi que des
pontages protine-ADN.
Marcato-Romain et al. (2009) ont observ une induction des micronoyaux des cellules du
mristme racinaire chez la fve V. faba aprs 2 jours dexposition des sols industriels
contamins en mtaux lourds (Cd = 6 mg/kg; Cr = 62 mg/kg; Ni = 33 mg/kg; Pb = 1933
mg/kg, Zn = 87 mg/kg) ou en HAP (16 HAP= 610 mg/kg). Les extraits aqueux ont montr
en gnral une plus grande mutagnicit que les sols correspondants. Song et al. (2007) ont
montr une induction des micronoyaux dans les cellules racinaires de la fve V. faba aprs 5
jours dexposition des sols de rizires irrigus par des eaux uses multi-contamines ( 16
HAP= 0,9-2,8 mg/kg ; PCB= 12-20,1 ng/kg, Cd= 1,4-2 mg/kg), El Hajjouji et al. (2007) ont
montr linduction de micronoyaux suite lexposition de racines de V faba des margines
riches en polyphnols, de mme Khadra et al. (2012) ont montr la capacit de certains
antibiotiques induire des micronoyaux sur cette plante. Steinkellner et al. (1998) ont trouv
cette plante plus sensible au plomb (Pb) en milieu liquide. Le chrome VI, le Cuivre et le
Mercure, Nickel et le Zinc sont aussi parmi les mtaux retrouvs dans lenvironnement
comme gnotoxiques (Itoh et Shimada, 1997). La gnotoxicit des polluants des boues a t
observ par plusieurs auteurs (Li et al., 2000 ; Chandra et al., 2004 ; Khadra et al., 2012), et le
compostage a t recommand comme un processus biologique pour rduire leffet toxique de
diffrents polluants (El Hajjouji et al., 2007). Globalement les biotestes sont de bons outils
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pour valuer lefficacit du compostage minimiser le risque potentiel des substrats initiaux
avant leur pandage agricole (Kapanen et al., 2013).
La qualit dun compost se juge galement sur son aptitude amliorer la fertilit du
sol. Le compost permet denrichir le sol en un stock hterogne de composs organiques,
produits de dgradation comme la lignine, les polysaccharides, les tannins, les lipides, les
substances humiques; les constituants dorigine cellulaires, les peptido-glycanes, les
pigments comme les mlanines, une faible mobilit des nutriments notamment de lazote,
et un bon approvisionnement en oligo-lments comme le phosphore, le potassium, le
magnsium, et le calcium (Nkana et al., 1996, Rivero et al., 2004), ce qui peut modifier les
caractristiques physico-chimiques du sol, amliorer lactivit biologique et enzymatique des
micro-organismes et favoriser sensiblement la croissance des plantes. Lenrichissement du sol
en lments minraux, par pandage du compost, permet aussi de minimiser leffet des
polluants par le phnomne de complexation et/ou adsorption conversion des toxine savoirs
les mtaux, les antibiotique, les HAPs etc (Marcato-Romain et al., 2009, Shahide et al.,
2011). De mme, lapport des composts peut aussi inhiber le dveloppement des microorganismes pathognes (Tautorus et al., 1983 ; Cayuela et al., 2009).
IV.5. Identification et volution des composs organiques au cours du compostage
Le sol est un rservoir potentiel majeur de carbone (Swift, 2001), et limportance du sol dans
notre socit est dailleurs lie sa fertilit et son rendement, ce qui incite amliorer sa
capacit en teneur en carbone organique qui est aussi appel matire organique. La matire
organique en gnral provient essentiellement des plantes, de rsidus des microorganismes et
des animaux diffrents stades de dcomposition, de corps microbiens et animaux vivants
dans le sol, et de substances fabriques par les organismes vivants et/ou provenant de la
dcomposition chimique de molcules plus importantes. Le processus et la vitesse de
dgradation ainsi que sa stabilisation dfinit la dynamique de la matire organique. Ce
processus de dgradation et de stabilisation de la matire est tributaire de la structure physicochimique de la matire carbone.
Swift (1996), a montr que la matire organique est un mlange htrogne de composs
organiques dorigines trs varies. Gobat et al. (2003), ont identifi que les polysacharides, les
lignines, les protines et les lipides sont les grandes catgories de matires organiques dans la
plante et dans le sol. Le rle principal de la matire organique est de renforcer la qualit de la
structure du sol et sa stabilit vis--vis des facteurs extrieurs comme le vent, la pluie ou le
passage dengins agricoles. Elle stimule lactivit biologique du sol en fournissant de
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Revue Bibliographique

lnergie et des lments ncessaires au dveloppement des organismes vivants. Elle permet
galement de retenir les micropolluants dans le sol et ainsi de maintenir la qualit de
rtention en eau des sols, limite sa compaction, bien quelle constitue une source dlments
nutritifs pour les plantes (Arrouays et al., 2002).
Dans les dernires dcennies, lutilisation anthropique excessive des sols marocains soumis
des changements climatiques svres, a rendu le sol excessivement dgrad et pauvre. Pour
lutter contre lappauvrissement du sol, son amlioration ncessite des connaissances prcises
sur le matriel organique stock et sur les mcanismes qui contribuent lenrichissement du
sol en carbone. Ceci soulve la question, comment nous les utilisateurs potentiels du sol
pouvons nous contribuer lamlioration de sa qualit et sa prservation ? Les apports
exognes de

produits organiques peuvent tre un remde majeur dans le maintien des

fonctions cls du sol. Parmi ces composs organiques, les polysaccharides, la lignine, les
lipides, les aliphatiques et les composs azots qui se transforment par le biais des
microorganismes lors de processus du compostage par le procd dhumification en humus.
IV.5.1. Les polysaccharides
Les polysaccharides sont des polymres naturels synthtiss par les tres vivants vgtaux,
animaux et micro-organismes. Ce sont des composs de monomres de sucre unis par des

liaisons glucosidiques. Leur formule chimique est Cx(H2O)x-1 avec un squelette carbon
incluant des htro-atomes (N, O, S) qui sont des points de clivage potentiels par hydrolyse
enzymatique ou coupure oxydante (Muller et al., 2009). Leurs structures complexes sont plus
rsistantes aux attaques microbiennes et enzymatiques que les sucres simples. Nanmoins,
certains auteurs (Machinet et al., 2011) ont montr que les lments de structure formant les
parois cellulaires dites les substances pectiques, hmicelluloses et la cellulose sont dgrades.
Selon les donnes de Annabi (2005), la majorit des polysaccharides sont forms
naturellement par recombinaison des sucres issus des microorganismes et des plantes. Ces
composs jouent notamment un rle fondamental dans la stabilisation des sols en formant un
ciment labile entre les microagrgats et permettent ainsi la formation des macroagrgats. Ils
sont gnralement considrs comme le compartiment le plus labile de la matire organique
dans le sol (Krull et al, 2003). Gleixner et al. (2002), ont montr que les microorganismes
peuvent rapidement recycler le carbone des polysaccharides prsent dans le sol comme source
dnergie. Karroum et al. (2004), ont dsign le mannose comme le marqueur des excrtions
polysaccharidiques microbiennes tandis que le xylose est le traceur des polysaccharides
structuraux dorigine vgtale. La dgradation des polysaccharides structuraux (cellulose,
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hmicelluloses), saccompagne dune no-synthse des polysaccharides microbiens qui


subissent des transformations plus ou moins rapides et compltes selon la stabilit des
associations formes avec dautres composs tels que les polyphnols, les oligopeptides et
mme les acides amins (glucoconjugaison).
Plusieurs hypothses, ont t proposes pour montrer que les polysaccharides produits par les
microorganismes sont considrs comme des prcurseurs des substances humiques
(Stevenson, 1994). En effet, les sucres rducteurs et autres acides amins, sous-produits du
mtabolisme microbien, subissent une polymrisation non enzymatique pour former des
polymres de substances humiques.
IV.5.2. Les composs organiques azots
Les composs organiques azots regroupent principalement les acides amins et les protines.
Ils ont comme structure de base un groupement amine et carboxyl (Structure dessous) ceci les
rend facilement identifiables. Les protines de la matire organiques sont rapidement
biodgrades, et peuvent tre aussitt recycles par la biomasse microbienne.

R-CH-COOH

NH2
Structure de base des composes organiques azots

IV.5.3. La lignine
La lignine est forme par la polymrisation oxydative de trois types des units syringyle (S),
guaiacyl (G) et de p-hydroxy-phnyl (H) qui constituent les lements de base de la lignine et
qui sont respectivement les trois prcurseurs lalcool p-coumaryl, lalcool conifryl et lalcool
synapyl (Kogel-Knaber, 2002 ; Albrechet, 2007; Neutelings, 2011) (Figure 3). La lignine, est
la deuxime ressource vgtale aprs la cellulose la plus abondante sur la terre, elle est
difficile dgrader (Huang et al., 2006; Prez et al., 2002). Elle ralentit la biodgradation de
la cellulose et de l'hmicellulose dans des matires vgtales lignocellulosiques car elle agit
comme une barrire physique protectrice.

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Les gymnospermes possdent essentiellement des units guaiacyls comme marqueurs de la


lignine, tandis que les angiospermes (autres quherbaces) possdent autant de guaiacyls que
de syringyls. Les herbaces possdent en proportions variables les trois marqueurs. Le rapport
S/G de la lignine est souvent utilis comme un rapport qualitatif. Des valeurs leves sont
associes avec laugmentation de rendement de production et une simple dlignification
(Neutelings, 2011). Ce compos polyphnolique est essentiel pour la croissance des plantes, il
confre une grande rigidit et impermabilit aux cellules vgtales en fournissant un support
mcanique la plante entire. Il est responsable des proprits hydrophobes des cellules
conductrices d'eau dans le xylme, il permet aussi de lutter contre lrosion du sol.

Figure 3 : Structure des prcursseurs de la lignine. I : Alcool p-coumarylique, II : Alcool


conifrylique, III, Alcool sinapylique, (Kogel-Knaber, 2002)

La lignine ne peut tre dcompose que par des organismes hautement spcialiss, par le
biais de la lignine peroxydase. Raj et al. (2007), ont montr que les champignons et les
bacteries, grace leurs enzymes ligninolytiques, sont capables de librer un nombre de
fragments aromatiques de faible poids molculaire par des modifications oxydatives et
dpolymrisation de la lignine. Derenne et Largeau (2001), ont constat que ce compos est
considr comme une forme de carbone trs stable dans le sol. Cependant, des tudes rcentes
ont montr que les composs drivs de la lignine sont rapidement dgrads dans le sol
(Gleixner et al., 2002; Dignac et al., 2005), alors que leurs fragments servent llaboration
des macromolcules humiques. Plusieurs auteurs ont montr que la biodgradation de la
lignine dans le compostage est relativement moins importante par rapport aux autres fractions.
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Barje et al. (2008), ont remarqu un taux de rduction important (55,8 66,3%) durant la
phase thermophile et des taux de 10,4% 25,2% durant la phase de maturation. Francou
(2003), a observ une diminution de la cellulose au cours du compostage et une concentration
de la fraction assimile aux lignines. Ainsi, pour un compost base dordures mnagres,
Francou (2003), a observ une diminution de la proportion de la matire organique prsente
sous forme cellulosique, passant de 39% de la matire organique 26% en trois mois de
compostage. Comme la cellulose, la part de lhmicellulose a diminu de 11% de la matire
organique 2%. En revanche, les proportions de la fraction soluble et lignine ont augment.
La fraction soluble passant de 33 45% de la matire organique du compost, et la teneur en
lignine de 17% 27% de la matire organique du compost (Annabi, 2005).
Dautres tudes indiquent des taux dabattement plus importants de la lignine durant la phase
thermophile (Tuomela et al., 2000, Paredes et al., 2002 ; Cunha-Queda et al., 2007; Francou et
al., 2008). Au cours du compostage, la rsistance relativement leve de la lignine la
dcomposition microbienne provoque son accumulation dans les substrats (Tuomela et al.,
2000, Kalbitza et al., 2003, Ait Baddi et al., 2004). Toutefois, la biodgradation remarquable
de la lignine durant la phase de stabilisation est dtermine en particulier par les champignons
et les actinomyctes thermophiles. Alors que, durant la phase de refroidissement des
champignons trs spcifiques colonisent les substrats entre autres le groupe des
Basidiomyctes souvent cit comme tant le plus actif. Les Ascomyctes et les
Deutromyctes apparents ceux-ci jouent galement un rle apprciable (Tuomela et al.,
2000). Les champignons scrtent des enzymes de type phnoloxidases (tyrosinase, laccase)
qui sont responsables de la dcomposition partielle de la lignine (Novotny et al., 2004, Smidt
et al., 2008). Les composs rfractaires ou les biopolymres en gnrale comme la lignine
sont slectivement transforms pour produire les prcurseurs de lhumine. Loxydation de ces
prcurseurs augmente leur contenu en oxygne pour former des groupes fonctionnels comme
les acides carboxyliques. La biodgradation de la lignine dtermine par l'ouverture des
structures aromatiques aboutit des structures substitues dacides carboxyliques, ce qui
contribuerait la diminution des structures aromatiques et laugmentation des structures
aliphatiques, htrocycliques contenant loxygne (Leenheer et al., 2003, Barje 2010). Selon
ce processus, les molcules deviennent assez petites, suffisamment hydrophiles et solubles en
milieux alcalins (Vanloon et al., 2000).
Pour ces raisons, la lignine est considre comme un compos prcieux important la survie
du sol, ce qui ncessite de maintenir un rservoir/stock en composs ligneux dans le sol, avec
une application approprie (Huang et al., 2008).
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IV.5.4. Les lipides


Les lipides sont des composs hydrophobes mais solubles dans les solvants de faibles
polarits (ther de ptrole, ther thylique, actate dthyle, dichloromthane). Ils
regroupent de nombreux composs comme les chaines aliphatiques olfiniques, les acides
gras, les cires, et les rsines (Kogel-Knabner et al., 1992) qui sont des composs lipidiques
noforms.
Les acides gras sont des monoacides, linaires, nombre pair ou impair datomes de carbone,
soit saturs, ou insaturs suivant leur origine. Les acides gras saturs sont de formule gnrale
CH3 - (CH2)n- COOH, chaque acide gras est constitu par une chane hydrocarbone, plus ou
moins longue, fortement apolaire et un groupement carboxyle polaire. Cependant les acides
gras insaturs prsentent dans leur structure une ou plusieurs doubles liaisons. Les plantes, les
animaux et les microorganismes sont les principales origines des acides gras (Tableau 17).

Tableau 17: Les sous-units d'acides gras et leurs origines (Amir et al., 2008, modifi par
EL Fels et al., 2014b)
Acides gras

Origine

Acides gras chaines linaires

Eukaryotes

Acides gras cyclopropyls

Gram-ngatif

Bactries (particulirement Gram-

Branchs (iso, anteiso)

positif)

Acides gras Hydroxyls et quelques

Gram-ngatif

acides gras insaturs


Acides gras saturs

Plantes, animaux et bactries

Les chanes aliphatiques des plantes suprieures sont majoritairement composes dun
nombre de carbone pair, les cires cuticulaires dun nombre de carbone impair, alors que celles
qui proviennent des bactries et des champignons possdent des chanes aliphatiques avec
autant de carbone pair que de carbone impair. De plus, 60 80% des acides gras ont des
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chanes avec 16 et 18 atomes de carbone (dites C16 et C18). Ces composs organiques
spcifiques ont t utiliss comme des biomarqueurs au cours du compostage, puisquils
permettent de traduire au sein dun mlange htrogne de matire organique un signal
biochimique spcifique dune origine ou dun processus dvolution physico-chimique ou
biologique. Il existe aussi des mthodes plus complexes et peu utilises en pratique comme
lestimation des lipides extractibles (Dinel et al., 1996) et le suivi de lvolution de la
biodiversit microbienne, et de lactivit enzymatique au cours du compostage (Forster et al.,
1993; Insam et al., 1996). Mais en raison de la spcificit structurale des lipides, les acides
gras gnralement lis aux phospholipides membranaires (PLFA) et les lipopolysaccharides
ont t choisis comme indicateurs dvolution et de changement des communauts de
microorganismes au cours du compostage (Tableau 17). Leur volution en fonction des stades
de compostage permet de distinguer la densit ainsi que le type des microorganismes.
Plusieurs auteurs ont montr que la prdominance des PLFAs branchs et hydroxyls
caractriss par des points de fusion trs levs (73 C 87 C pour les hydroxyls (OH FA)
et de 52,2C 62,4C pour les branchs iso (i) et anteiso (a)) est un indicateur de la
multiplication et la croissance des bactries thermophiles/thermotolerante pendant la phase
thermophile (Rhee et al., 2000, Boulter et al., 2002).
Dautres auteurs ont montr que pendant la phase thermophile la biodgradation des lipides
est plus importante et que les microorganismes utilisent les formes les moins rsistantes
comme les acides gras et les glycrides (Kiikkila et al., 2005, Amir et al., 2008, 2010, El Fels
et al., 2014b), tandis que les autres formes relativement plus rsistantes comme les
trpnodes et les strols saccumulent au cours de la biodgradation (Lhadi et al., 2006).
Cependant, le dbut de la phase de maturation, concide avec une rgression progressive des
acides gras branchs et hydroxyls, en relation probable avec la rgression des
microorganismes thermophiles, reflte par la chute de la temprature du substrat, suite un
puisement du milieu en composs nutritifs mtabolisables, reflt par la chute de la
temprature du substrat. Cette phase de maturation caractrise par un taux de dcomposition
relativement faible par rapport la phase de stabilisation, se manifeste par linstallation des
moisissures qui semblent plus spcialises pour la dcomposition de la fraction lignocellulosique. Gea et al. (2007) ont montr que lhydrolyse des acides gras est dtermine dans
des milieux bien ars, assez humides o les conditions sont favorables aux microorganismes
varis (bacteries, actinomyctes, levures et moisissures).
Des tudes rcentes menes sur plusieurs types de dchets (Boues de station dpuration,
dchets agroalimentaires, ordures mnagres, matire vgtale) indiquent des taux
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dabattement de lipides plus importants au cours du compostage (Amir et al., 2008, 2010 ;
Barje et al., 2008 ; Abouelwafa et al., 2008, El Fels et al., 2014b). Ces auteurs ont tabli des
seuils de maturit sur la base de lvolution des lipides au cours de compostage, ce qui
renseigne indirectement sur lactivit enzymatique des microorganismes. Hachicha et al.
(2009), ont expliqu que lors de la biodgradation, les acides gras librs taient scinds pour
donner des chanes plus courtes, qui peuvent tre incorpores aux autres substances. Ainsi ils
s'accumulent dans l'humus o leur teneur peut dpasser 10%, avec un taux de 1,2% dacides
gras dans la fraction acide humique. Lvolution des lipides totaux au cours de compostage
est un paramtre important de la maturit des composts. Dinel et al. (1996), ont montr que le
rapport entre les lipides extractibles au dithylther qui permet lextraction des lipides
courtes chanes des alcanes, des alcnes et des acides alcanoloiques, et les lipides extractibles
au chloroforme est infrieur 2,5 est une caractristique des composts mrs. Annabi (2005) a
montr que la prsence des lipides dans les composts leur confre une certaine hydrophobicit
vis--vis de leau, nanmoins avec le compostage le taux des lipides diminuent, ce qui
explique en partie la diminution de lhydrophobicit des composts mrs. Cependant les
composts immatures sont plus hydrophobes que les composts mrs et plus riches en lipides.
IV.5.5. Les hydrocarbures aliphatiques et lhydrophobicit
Les hydrocarbures aliphatiques sont des composs constitus de carbone et dhydrogne. Il
sagit en gnrale de molcules chanes ouvertes, linaires ou ramifies, satures ou
insatures, dont la nomenclature est la suivante: paraffines (ou alcanes) hydrocarbures saturs
dont la formule est CnH2n+2 ; olfines (ou alcnes) CnH2n hydrocarbures insaturs ayant une
ou plusieurs doubles liaisons; actylniques (ou alcynes) CnH2n-2 hydrocarbures insaturs
ayant une ou plusieurs triples liaisons. Les hydrocarbures chane courte sont gazeux la
temprature ambiante (de C1 C4). Plus la masse molculaire dun hydrocarbure est leve et
plus sa structure est complexe, plus il a tendance devenir liquide et plus sa viscosit
saccrot (C5 C16); et, enfin, les hydrocarbures suprieurs sont des solides la temprature
ambiante (au-del de C16). Les hydrocarbures aliphatiques dimportance industrielle drivent
principalement du ptrole, qui est lui-mme un mlange complexe dhydrocarbures. Ces
composs peuvent aussi avoir comme origine les plantes (Eglinton et Hamilton (1967).
Meyers et Ishiwatari (1993) ont montr que les chanes longues n-alcanes prsentes
gnralement dans les cires des plantes suprieures sont de la famille des n-alcanes. Les
structures aliphatiques dorigine cires de plante sont reconnues par la simplicit de leur
biodgradabilit, ce qui pourra expliquer en partie la diminution de certaines chaines
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aliphatiques par lactivit microbienne (Zegouagh et al., 1998). Les molcules lipidiques, les
esters, polyesters, et acides gras peuvent tre aussi lorigine des composs aliphatiques
(Chen, 2003).
En plus, ces composs aliphatiques peuvent tre drivs de tissus des vgtaux (Boom et al.,
2005; Lorenz et al., 2007) comme la cuticule ou le lige qui produisent les alcanes et les
alcnes qui sont difficilement biodgradables (Nip et al., 1986; Tegelaar et al., 1989). Otto et
Simpson (2006) ont montr que les produits d'hydrolyse des chantillons de sol et de
vgtation sont constitus principalement de lipides aliphatiques et de phnols issus de la
subrine, de la cutine, des cires vgtales de surface et des composs ligno-cellulosiques.
Toute une srie de composs de la matire organique sont responsables de son
hydrophobicit, dont les hydrocarbures aliphatiques. Par ailleurs laddition de substances
aliphatiques chanes longues au sol augmente la stabilit des agrgats du sol (Dinel et al.,
1992). Des tudes (Piccolo et Mbagwu, 1999; Martens, 2000) montrent des corrlations
positives entre la stabilit structurale des agrgats du sol et leur contenu en substances
humiques ou en lipides qui induisent lhydrophobicit. Ce phnomne nest pas
exclusivement bas sur le statut de leau du sol et il ne varie pas de manire linaire avec la
teneur en eau (Ritsema et al., 1998; Quyum et al., 2002). Cependant lhydrophobicit est
directement proportionnelle la teneur en matire organique et inversment proportionnelle
la teneur en argile (Harper et al., 2000). Dautres tudes ont montr que le taux dabsorption
deau dans le sol pouvait diminuer avec la teneur en matire organique du sol (Doerr et al.,
2000). Selon les tudes menes par Pikul et al. (2009) lhydrophobicit est lie positivement
aux diffrents constituants de la matire organiques tels que les hydrocarbures aliphatiques et
les substances amphiphiles (acides gras chanes longues, n-alcanes et cyclo-alcanes). La
plupart des minraux dans le sol sont hydrophiles (Monnier, 1965), ce qui laisse supposer que
lhydrophobicit est attribue la matire organique. Chenu et al. (2000), ont signal que le
type de carbone a un effet plus significatif que sa quantit. Les paramtres physico-chimiques
tel que le pH et la force ionique de leau sont aussi responsables de lhydrophobicit, en effet,
la protonation des charges ngatives des groupes carboxyles et phnoliques entrane une
augmentation de lhydrophobicit. Steenhuis et al. (2005), ont trouv une relation entre un pH
faible et lhydrophobicit (lajout de chaux serait une solution). Cependant, certains
scientifiques doutent encore quant savoir si un faible pH est la cause ou la consquence de
lhydrophobicit. De fait, la matire organique nest pas inerte, elle volue et sa
dcomposition est influence par plusieurs facteurs (temprature, humidit, pH, etc.), rendant

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difficile lindividualisation de tous ces paramtres qui sont lis entre eux et voluent au cours
du temps.
Som et al. (2009), ont montr par analyse thermique la prsence de deux formes de MO
(aliphatique et aromatique), et lvolution de ces deux formes de MO est en accord avec la
biodgradabilit plus importante des aliphatiques par rapport aux aromatiques au cours du
compostage. L'intensit relative des bandes associes aux fonctions (aliphatiques, amines, et
polysaccharides) diminue au cours du processus de compostage, en indiquant la stabilisation
du substrat. Le calcul du rapport des intensits des bandes lies aux carbones aromatiques sur
celles lies aux carbones aliphatiques met en vidence laromatisation des acides humiques et
du compost tout au long du compostage (Castaldi et al., 2005).
Laugmentation de lhydrophobicit des agrgats du sol par la matire organique a donc pour
consquence la stabilisation des agrgats (Hurrab et Schaumann, 2006). Au Maroc la priode
sche est plus longue que la priode pluviale et l'humidification dun sol sec doit tre
considre comme un facteur influenant lhydrophobicit qui affecte linfiltration et
lrosion (Feng et al., 2001). Un sol correctement hydrophobe peut augmenter la rsistance du
sol lclatement par leau. Cependant un sol trs hydrophobe, ne peut pas absorber toute
leau de pluie et leau non infiltre va ruisseler, ce qui facilite le phnomne drosion
hydrique (Shakesby et al., 2000). Ceci montre bien que lajout dun compost mature avec un
taux daliphatique modr peut renforcer la qualit du sol et le rendre adapt aux changements
hygromtriques (priode pluviale) en fonction des saisons.
Lensemble de ces composs organiques dcrits ci-dessus joue un rle trs important pendant
le processus dhumification des composts, et de transformation de la matire organique et les
composs synthtiss par les microorganismes dterminent les paramtres dvolution des
substances humiques au cours du compostage (Steffen et al., 2000, Gonzalez et al., 2003, Wei
et al., 2007, Smidt et al., 2008).
IV.5.6. Activit enzymatique
Pour pouvoir atteindre une bonne dgradation et mieux comprendre les changements dtats
physiques et biologiques impliqus durant le processus de dgradation. Le compostage est le
sige dune activit qui fait intervenir les diffrentes communauts de microorganismes qui se
succdent, en fonction de leurs potentialits mtaboliques au cours des diffrents stades de
transformation de la matire organique. Ainsi, les proprits physico- chimiques des substrats
ncessitent un systme enzymatique appropri pour attaquer les diffrentes liaisions

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molculaires. Lactivit enzymatique des microorganismes spcifiques est la clef majeure de


compostage (Yangui et al., 2009).
Les enzymes prsentes dans le compost peuvent tre distingues suivant le fait quelles soient
intra ou extracellulaires. Les enzymes intracellulaires peuvent tre retrouves au sein du
compost aprs leur libration par des lyses cellulaires. Les enzymes extracellulaires catalysent
gnralement la dgradation de polymres ne pouvant traverser la membrane cellulaire
(Tiquia et al., 2002). Diffrentes enzymes hydrolytiques libres par des microorganismes
sont impliques dans la dpolymrisation des constituants des dchets organiques. Les
principales enzymes impliques sont les cellulases, les hmicellulases, les phnoloxydases
(peroxydases et laccases), les protases et les phosphatases. Ltude des cellulases et des
phnoloxydases est essentielle par le fait que les dchets verts utiliss contiennent une
importante proportion de cellulose et de lignine. La mesure des activits protases est
galement intressante puisque les boues de stations dpuration reprsentent un considrable
apport de protines (Reveille et al., 2003). De la mme manire, la majorit du phosphore
dans un compost, est retrouve dans les matires organiques.
IV.5.7. Evolution de la composition biochimique de la matire organique des composts et
formation des substances humiques
Dans le sol, la matire organique est le moteur de lactivit biologique puisquelle constitue
la source de carbone et dnergie pour les organismes htrotrophes. Plus rcemment, des
fonctions environnementales sont attribues la matire organique comme la contribution
la lutte contre leffet de serre additionnel, en permettant le stockage de carbone pig dans le
sol sequestration (Arrouays et al., 2002), ceci soulve limportance et lintrt de la
matire organique dun compost.
Le compostage est classiquement associ un processus naturel dhumification observ pour
la matire organique du sol (Figure 4). Ainsi, le fractionnement de la matire organique des
composts en trois classes de solubilit diffrente en milieu acide et basique : acides humiques,
acides fulviques et humines (fraction non soluble quel que soit le pH) (Gossart, 2001, Amir,
2005).

61

Revue Bibliographique

Figure 4: Humification et minralisation de la matire oranique fraiche (selon Gossart, 2001)


Les substances humiques sont souvent utilises pour valuer lvolution de la matire
organique au cours du compostage. Traditionnellement, les substances humiques taient
considres comme des macromolcules de fort poids molculaire, noyaux aromatiques
entours de chanes aliphatiques, plus le noyau tait plus important plus le compos tait
humifi (Bonneau et Souchier, 1979). Cependant, McCarty (2001) a montr que les
substances humiques ne sont plus considres obligatoirement comme des molcules fort
poids molculaire. En effet, les progrs des mthodes dinvestigation, notamment lutilisation
de la RMN, FTIR, Pyrolyse,etc ont complt cette vision. Les substances humiques sont
aujourdhui dfinies comme des mlanges alatoires et htrognes de molcules organiques
rsultant de la dcomposition des rsidus animaux et vgtaux (lignine, polysaccharides,
protines,...).
La thorie de lhumification au cours du compostage est celle dun processus uniquement
biologique (Stevenson, 1994), ou de processus biologiques suivis des processus purement
chimiques. Trois principales voies de formation des substances humiques ont t cites dans
la littrature (Gossart, 2001, Annabi, 2005 ; Albrecht, 2007, Jouraiphy, 2007 ; Barje, 2010) :
La voie 1 : des amino-sucres, Il sagit de la condensation de sucres et de composs acides
amins,
La voie 2 : Cette voie ligno-protnique thorie dveloppe par Waksman (1932) de formation
des substances humiques partir de la lignine.
La Voie 3 : Accs sur la formation de polyphnols partir de cellulose ou dautres composs
non ligniques.
Lhumus form dpend dune part de la nature de la matire organique initiale, et dautre part
des conditions externes et internes du processus. Pour pouvoir mesurer la nature de substances
62

Revue Bibliographique

humiques formes et suivre lvolution de ces fractions, plusieurs mthodes ont t proposes.
Plusieurs auteurs utilisent lextraction alcaline (NaOH, 0,1N) pour les substances humiques,
et prcipitation en milieu acide des substances humique pour sparer les fractions humiques et
fulvique. Des extractions successives et rptes suivies de phases de purification sont
ncessaires pour une caractrisation fine.
La distribution relative du carbone dans ces diffrentes fractions est souvent utilise pour
valuer le degr de stabilit de la matire organique des composts. La part du carbone
extractible (acides humiques plus acides fulviques) reprsente gnralement moins de 25% du
carbone total. Cela signifie donc que la grande majorit du carbone des composts est sous
forme non extractible (He et al., 1992). Au dbut de processus de compostage la fraction
fulvique prdomine sur la fraction humique et reprsente jusqu 10% de la matire sche
totale. Au cours du compostage, la fraction humique devient progressivement prdominante
par rapport la fraction fluvique. La diminution de la proportion de carbone sous forme
fulvique conjointement laugmentation de la proportion de carbone sous forme humique
correspond lhumification de la matire organique du compost, ou plus exactement
laugmentation de la concentration de composs stables dans le compost.
Une varit de groupements fonctionnels (COOH, OH phnolique, OH nolique, OH
alcools) ont t identifis dans les substances humiques (Albrecht, 2007). Dans le sol
Steeling (1983) a montr que le carbone et loxygne sont deux lments majeurs des acides
humiques et fulviques (Tableau 18) (Gossart, 2001) leurs teneurs ainsi que celle de lazote,
lhydrogne et le soufre peuvent tre utilises pour les identifier.
Tableau 18: Composition lmentaire des differentes fractions des substances humiques
Elments
Carbone
Oxygne
Hydrogne
Azote
Soufre

Acides humiques %
53,8 -58,7
32,8 38,3
3,2 6,2
0,8 4,3
0,1 1,5

Acides fulviques %
40,7 50,6
39,7 49,8
3,8 7,0
0,9 3,3
0,1 -3,6

Dune manire gnrale et daprs plusieurs auteurs (Amir, 2005 ; Jouraiphy, 2007) les
teneurs en carbone des acides humiques sont suprieures aux acides fulviques et linverse a
t not pour les teneurs en oxygne. Les teneurs leves en oxygne pour les acides
fulviques sont expliques par leur richesse en groupements carboxiliques (COOH) ou
dhydrates de carbone (Gonzalez et al., 2003, Chai et al., 2007). Pour mieux diffrencier entre
63

Revue Bibliographique

les acides humiques et fulviques, le rapport O/C peut tre utilis, celui-ci est autour de 0,5
pour les acides humiques et de 0,7 pour les acides fulviques (Barje, 2010). Dans dautre cas,
ce rapport est respectivement de 0,6 1,5 (Amir, 2005) et de 0,7 1 (Jouraiphy, 2007). Cette
diffrence des teneurs en oxygne et carbone est attribue probablement la nature des
substrats de compostage. Le rapport H/C est inversement proportionnel laromatisation et/ou
degr de condensation au cours du compostage (Gossart 2001).
Lvaluation de degr dhumification a t tudi en utilisant le rapport CAH/CAF, qui
renseigne sur le degr de polymrisation, qui augmente au cours du compostage. Ce rapport
est proche de 0 pour des composts trs jeunes et atteint entre 2 et 5 pour des composts trs
stabiliss (Saviozzi et al., 1988; Inbar et al., 1990; Forster et al., 1993; Serra-Wittling , 1995;
Provenzano et al., 1998) et peut mme atteindre 10 pour certains composts base de dchets
verts (Adani et al., 1995). Le rapport AH/AF montre des valeurs trs faibles aux stades
initiaux comme lont montr (Harper et al., 2000), alors quil progresse vers des valeurs
relativement leves durant la phase de maturation. Dautres rapports comme le pourcentage
du carbone extractible/le carbone total, le rapport du carbone sous forme humique par rapport
au carbone total sont galement mentionns dans la littrature (Sugahara et Ionoko, 1981;
Roletto et al., 1985; Saviozzi et al., 1988).
Dautres rapports peuvent tre utiliss comme indicateurs dhumification du compost savoir
les rapports lmentaire H/C, H/O, O/C (Ouatmane, 2000 ; Ait Baddi et al., 2004; Amir,
2005; Jouraiphy, 2007; Barje, 2010). Ces auteurs ont montr que la diminution du rapport
H/C des acides humiques est en relation avec lapparition des doubles liaisons C=C des
structures aromatiques. Nanmoins, Plaza et al. (2007) ont montr que les rapports
lmentaire H/C, H/O, O/C subissent des fluctuations remarquables au cours du compostage.
La diminution du rapport C/N des acides fulviques, a t explique par Jouraiphy (2007) et
Barje (2010), comme une caractristique de synthse des acides fulviques partir des
prcurseurs librs lors de la biodgradation, et par un enrichissement des acides fulviques en
azote (Barje, 2010). Des liaisons avec les composs organiques et/ou inorganiques contenant
lazote sont supposs (Gonzalez-Vila et al., 2001, Berns et al., 2005) voire lintgration de
composs dorigine peptidique dans les hydrates de carbone collodaux des acides fulviques
(Paredes et al., 2002, Gonzalez et al., 2003, Plaza et al., 2007).
Linfluence des substances humiques de composts sur les processus physico-chimiques et
biochimiques des sols, se manifeste par des effets notables sur la croissance des vgtaux et
des microorganismes (Filip et al., 1993 ; Chai et al., 2007, Wei et al., 2007).

64

Revue Bibliographique

IV.5.8. Pouvoir de complexation des polluants par les substances humiques


Certains mtaux rencontrs dans l'environnement sont considrs comme des lments
essentiels la vie (Fe, Cu, Zn...), mais peuvent s'avrer toxiques de trop fortes
concentrations. Les mtaux non essentiels ne possdent aucun rle biologique connu et
peuvent engendrer des problmes environnementaux sous-estims par leur prsence.
Les donnes de la littrature montrent que les agrgats humiques sont retenus entre eux par
des liaisons faibles tels des ponts hydrogne et les interactions hydrophobes. Schnitzer et
Khan (1972) ; Schulten et Leinwebe (1996) proposent lexistence de vides dans la structure
tridimensionnelle des substances humiques, qui peuvent tre des sites dadsorption des
hydrocarbures aromatiques polycliques (HAPs), et des lments traces mtaliques.
Ladsorption est un phnomne important dans linteraction entre les polluants et la phase
solide des boues ou du sol (matires organiques, les argiles, oxydes de fer et daluminium)
(Murphy et al., 1994). Ce phnomne peut limiter la biodisponibilit des polluants vers les
eaux souterraines ou vers les plantes. Ce phnomne est rversible sil nest pas coupl des
transformations chimiques parallles. Engebretson et Wandruska (1997) ont apport
exprimentalement par fluorescence des preuves en faveur dun modle micellaire en utilisant
un pyrne marqu. Hogan (1997) trouve que les HAPs peuvent aussi former avec la matire
organique des complexes qui deviennent non extractibles et non disponibles. Les mtabolites,
aprs la dgradation microbienne des HAPs, peuvent tre incorpors dans les substances
humiques par des ractions oxydatives avec les composs phnoliques de la matire
organique pour former des macromolcules humiques non hydrolysables (Richnow et al.,
2003).
Paralllement, les substances humiques possdent un grand nombre de groupements
fonctionnels hydrophiles : thiols (SH), amines (NH2), carbonyles (C=O), carboxyles (COOH),
et fonctions phnoliques ou alcooliques (OH). Du fait de limportance de ces charges
ngatives, les AFs sont plus ractives envers les mtaux, dont les carboxylates (COO-)
prsentent un rle important de complexation des mtaux. En fonction de laugmentation du
pH du milieu, ces groupements fonctionnels sionisent autorisant lapparition de charges
ngatives qui augmentent la capacit de rtention des cations. Ces charges ngatives trs
ractives envers les mtaux lourds dterminent diffrents types de liaisons en fonction des
mtaux et leur concentration. Entre autres, la raction du carboxylate COO- et les mtaux
forment des complexes phtaliques quand deux entits COOH sont en jeu, de mme un groupe
OH voisin conduit des complexes de type salicylate. Dautres liaisons hydrognes peuvent
65

Revue Bibliographique

se prsenter avec les groupes OH (Vanloon et al., 2000). La slectivit et la force de liaison
par les substances humiques envers les mtaux dpendent de la quantit de mtal libre
disponible et complex. La force de liaison diminue par laugmentation de la concentration en
mtal complex. Cependant, le type de complexes forms et la force des liaisons avec les
groupements fonctionnels dpendent de ltat lectronique des sites de complexation, de la
prsence de chanes aliphatiques et aromatiques, de la gomtrie du site fonctionnel, du pH et
de la force ionique du milieu (Schnitzer et al., 1972 ; Hancock et al., 1995 ; Vanloon et al.,
2000, Elkins et al., 2002). Vanloon et al. (2000) et Elkins et al. (2002), ont montr que les
groupements fonctionnels des substances humiques sont en gnral des groupements
aromatiques oxygens, des fonctions azotes, des groupements aliphatiques oxygns et des
fonctions soufres ou phosphoryles.
V. Les normes environnementales
V.1. Les normes et rglementation d'utilisation des boues de STEP
En ltat actuel des choses, il nexiste aucune loi au Maroc qui encadre directement les boues
de STEP et leur pandage agricole direct et/ou aprs compostage.
Sur la base de la dfinition de dchets par la loi 28-00 :
Dchets

tous

rsidus

rsultant

d'un

processus

d'extraction,

exploitation,

transformation, production, consommation, utilisation, contrle ou filtration, et d'une


manire gnrale, tout objet et matire abandonns ou que le dtenteur doit liminer
pour ne pas porter atteinte la sant, la salubrit publique et l'environnement
(Article 3 de la loi n 28-00 relative la gestion des dchets et leur limination).
Boues rcupres = dchets soumis aux dispositions de la loi n 28-00.
Il ya possibilit de rglementer lutilisation des boues rcupres grce :
A larticle 80 de la loi n 10-95 sur leau : prvention de la dgradation des ressources en eau
ou des sols cultivables.
A larticle 82 de la loi n 10-95 sur leau : prescription de mesures destines lutter contre la
pollution de la nappe par pandage excessif de produits chimiques ou organiques.
A lautorisation de lexploitation de ltablissement class quest le stockage des boues
rcupres : prescription de mesures destines viter la pollution des eaux et des mesures
66

Revue Bibliographique

dhygine et de scurit, tout en prenant compte des utilisations ventuelles de ces boues par
les irrigants.
A lchelle internationale plusieurs normes existent. Celles-ci tiennent compte des teneurs de
diffrents lments traces mtalliques et prcise les limites, en tenant compte de la
concentration de diffrents ETMs, partir des quelles les boues ne peuvent pas tre recycles
en agriculture. Ces limites varient en fonction du pH du milieu rcepteur (sol). Les risques de
mobilit des ETMs dans les sols dont le pH est compris entre 5 et 6 est suprieur celui pour
les sols dont le pH est suprieur 6. Afin de limiter ces risques de pollution, la norme
franaise (NF 97-1133) a fix les quantits des ETMs admises sur 10 ans en tenant compte
des teneurs de diffrents ETMs et du pH du sol, ceci permet de pallier leffet
daccumulation des mtaux et leurs effets dans le systme sol-eau-plante.
Le tableau 19 indique les normes dutilisation agricole des boues dans plusieurs pays
europens, en particulier pour les princiapux mtaux lourds Cd, Cu, Hg et Pb.
Tableau 19: Les normes dutilisation agricole des boues dans les pays europeens
Cd

Cu

Hg

Pb

CEE

20 40

1000 1750

15 25

750 1200

France

40

2000

20

1600

Allemagne

5-10 (1)

800

900

Denmark

0,8 (2)- 200 (3)

1000 (2)

0,8 (2) 200 (3)

60 (2,6)-120(2,6)

Espagne

20 (4)- 40 (5)

1000 (4)- 1750 (5)

16 (4) 25 (5)

750 (4)-1200 (5)

Grce

20 40

1000 1750

16 25

750 1200

Irlande

20

1000

16

750

Italie

20

1000

10

750

Pays-Bas

1,25

75

0,75

100

Portugal

Royaume-Uni

1200 (7)

Suisse

600

500

(1) Valeur abaisse 5mg/kg si pandage sur sol sableux et 5 < pH < 6, sinon 10 mg/kg ; (2) valeur exprime par rapport la
MS ; (3) valeur exprime par rapport la teneur en phosphore ; (4) pH du sol < 7 ; (5) pH du sol > 7 ; (6) valeur abaisse si
usage en jardinage domestique ; (7) La rglementation anglaise na pas prvu de valeur limites ni de guide de bonnes
pratiques pour les boues, sauf pour le plomb et le fluor quand les boues sont pandues sur les herbages.

V.2. La normalisation et rglementation du compost


Au Maroc, dans ltat actuel des choses aucune norme nexiste sur le compostage. Les normes
sur le compost sont devenues ncessaires par la progression de lindustrie du compostage. En
effet, on retrouve de plus en plus de produits composts sur le march qui sont imports et
67

Revue Bibliographique

homologus, ce qui amne des questions sur le choix et lutilisation correcte de ces produits.
Une norme sur les composts permet de rpondre beaucoup de ces interrogations. En France,
la norme existant actuellement et sappliquant au compost, est la norme relative aux
amendements organiques NF U 44-051. Le Bureau de Normalisation du Qubec a mis, le 27
Janvier 1997, une norme CAN/BNQ 0413-200/1997 dapplication volontaire, classant les
composts en trois types de qualit, par ordre dcroissant : AA, A et B. Les composts AA et A
sont de trs bons composts. Les composts B, en raison de leur teneur en lments traces,
doivent tre accompagns dinstructions appropries lors de la vente ou de la distribution.
Cette norme dfinit des caractristiques physiques (teneur en eau, en matires organiques
totales, en corps trangers), des caractristiques chimiques (rapport C/N, taux dassimilation
doxygne, teneur en lments traces) et des caractristiques biologiques (teneur en
coliformes fcaux et en salmonelles).
Le tablau 20 et le tableau 21 montrent les valeurs limites des mtaux dans le compost selon
B.N.Q et le classement des composts selon les normes canadiennes (CCME, 1995).

Tableau 20: Valeurs limites de classement des composts, classe A (sans risque lutilisation),
classe B ( utiliser dans les sols forestires)
Mtal

Valeurs limites classe Valeurs limites classe


A mg/Kg poid sec

B mg/Kg poid sec

Zn

500

1850

Cu

100

757

Pb

150

500

Ni

62

180

Cd

20

Tableau 21: Limites normatives en mtaux lourds (mg/Kg Ms) dans les composts
Pays

Lgislatif

Allemangne

Biowaste

Classe

As

Cd

Crtot

Cu

Hg

Ni

Pb

Zn

70

70

0,7

35

100

300

ordinance I
Australie

ARMCANZ*

Biowaste

20

400

200

60

200

250

Autriche

Compost

Class A*

0,7

70

70

0,4

25

45

200

ordinance

Classe A

70

150

0,7

60

120

500

Classe B

250

500

100

200

1800

210

100

0,8

62

150

500

Canada

BNQ**

AA, A

13

68

Revue Bibliographique

France

NFU 44-051

Pays-Bas

Compot urbain

50

600

100

150

1500

Compost trs

0,7

50

25

0,2

10

65

75

15

50

60

0,3

20

100

200

10

100

100

50

100

300

propre
Compost
propre
Ecolabel

2001/688/EC

*A.R.M.C.A.N.Z : Agriculture and Resource Management Council of Australia and New Zealand.
** B.N.Q: Bureau de Normalisation du Quebec

A la lumire de cette synthse bibliographique, il ressort que le secteur dassainissement


liquide au Maroc va subir un sursaut dans les 10 annes venir suite la stratgie du plan
national dassainissement liquide, et aux fondements de la charte nationale sur
lenvironnement. Le choix du systme de traitement doit tre tributaire des spcificits
gographiques des communes et de leurs moyens financiers.
En parallle, le traitement des eaux uses gnre une production de boues trs importante. Les
prvisions de cette production de boues lhorizon 2025 sont estimes 300 000 tonnes/an.
Cette production de boues na pas t prise en considration lors de la construction des
stations dpurations, ce qui pose actuellement un problme pour leur limination. Dans ltat
actuel et en absence de filires de traitement de boues, celles-ci se retrouvent en dcharge
publique non contrles ou dcharges controles, ou stockes sur les lieux de leur production
ou encore dverses sauvagement, ce qui prsente des risques de pollution environnementale
rels.
Ces boues de STEP de nature organo-minrale en fonction de leurs origines peuvent contenir
des teneurs importantes en lments fertilisants (Azote et phosphore) susceptibles dtres
valorises en agriculture. Nanmoins, ces boues peuvent aussi contenir des polluants
mtalliques et organiques, ce qui ncessite un traitement avant leur utilisation.
En raison de cette composition de boues, la filire de compostage semble la mieux adapte
la ralit marocaine (conomie dnergie et recyclage agricole), par rapport aux dautres
filires qui sont rvles trs coteuses (incinration, mise en dcharge...). Actuellement,
aucune filire de traitement de boues nest normalise au Maroc, bien que le PNA
recommande de dvelopper les recherches en matire de traitement de ces boues. Les rares
recherches ralises au Maroc sur les boues sont relatives, soit

leur caractrisation,

pandage et compostage lchelle rduite (Bousselhaj, 1996; Amir, 2005, Jouraiphy, 2007 ;
Abouelwafa, 2009).

69

Revue Bibliographique

Notre tude prconise la valorisation des boues de station dpuration et des dchets verts par
le procd du compostage, en essayant de montrer que cette filire permet de produire un
nouveau produit rentable, en mesure de rpondre aux besoins socio-conomiques et
environmentaux.
Notre chapitre bibliographique sest focalis sur la description de diffrents critres physicochimiques classiques dvaluation de degrs de dgradation du substrat. Nanmoins notre
principal objectif est de valider des nouveaux paramtres de maturit de composts qui
rpondent aux normes dutilisation de boue de STEP et dchet de palmier sans aucun risque;
par lapplication des tests physicochimiques dvolution des composs ligneux, de mise en
place dindicateurs comme les esters mthylique dacides gras (FAMEs) et les stroides,
ou encore de tests biologiques, par la validation de nouveaux milieux synthtiques, base de
substrat de compostage, avec un dnombrement des souches fonctionnelles. Un suivi des
facteurs dhygiensation dvolution des ufs dhelminthes, et lidentification des souches
actives dactinomyctes contribuent lhygnisation des composts a t envisag. Ainsi
via ce travail nous avons tent de cerner le pouvoir gnotoxique sur le modle biologique
vgtal des racines de Vicia faba. ce travail ouvrira la voie lextrapolation de ces
paramtres comme indicateurs de maturit ncessaires en absence de normes au Maroc pour
une pratique ddie la validation du procd de compostage, ainsi que promouvoir la
problmatique en face des stations dpurations produisant dnorme quantit de dchet au
Maroc, a fin de le prenniser et lintgrer dans les programme de la scurit environmental en
absence des moyens de gestion et de traitement judcieux.

70

Partie I

Partie I
Biotransformation de boues de STEP-dchets de palmier et volution des
composs organiques au cours du co-compostage

Chapitre 1 : Evaluation de la biotransformation de la fraction organique et minrale lors du


co-compostage de boues de station d'puration- dchets de palmier
Chapitre 2 : Evolution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au cours du cocompostage
Chapitre 3 : Evolution des composs ligneux au cours du co-compostage
Chapitre 4 : Evolution des composs stroides au cours du co-compostage

71

Partie I

Chapitre 1 : Evaluation de la biotransformation de la fraction organique et


minrale lors du co-compostage de boues d'puration- dchets de palmier

1. Introduction
La croissance dmographique, lvolution conomique sont lorigine de diffrentes
pollutions chimiques, biologiques et physiques qui ont un impact direct et/ou indirect sur les
ressources hydriques, le milieu physique (sol) et latmosphre. En absence de traitement des
eaux uses, celles-ci sont pandues, en partie, sur les sols, dverses en mer; le reste se
retrouve dans les oueds et les cours deau. Les eaux uses non traites constituent ainsi lune
des sources majeures de pollution hydrique (les eaux ctires, de surface et souterraines) et
gnrent de nombreuses maladies et une propagation des pidmies (OMS, 1989). Ces
dernires annes, laccroissement de la demande en eau pour la consommation humaine,
industrielle, agricole et les scheresses rptes qui svissent au Maroc ont sensibilis les
dcideurs considrer les eaux uses comme une ressource hydrique exploitable aprs
puration. Quelques que soit le systme dpuration adopt, celui-ci gnre une production de
quantits de sous produits boues importantes. Ces boues renferment des matires
organiques et des lments minraux qui sont susceptibles de constituer un apport en
fertilisants ncessaires pour amender les sols agricoles (Amir, 2005 ; Jouraiphy, 2007) dont
lutilisation directe prsente de nombreux risques, do la ncessit de son traitement avant
usage. La filire de compostage est la technique la plus pertinente pour traiter et transformer
la matire organique des boues. La qualit des composts est dfinie par son degr de maturit
et de stabilit. Plusieurs tests et paramtres peuvent tre proposs pour valuer ces deux
lments. Les principaux paramtres physico-chimiques analyss sont le rapport C/N, NH4+ /
NO3 (Jouraiphy et al., 2005; Huang et al., 2006); le taux de carbone (Zmora-Nahum et al.,
2005). Lindex dhumification est souvent utilis pour dterminer le degr de maturit des
composts (Stevenson et al., 1990; Ouatmane et al., 2000; Higashikawa et al., 2014). Le
processus d'humification est assez bien dcrit et plusieurs voies ont t proposes pour
expliquer son droulement. Une voie consiste en une biodgradation suivie dune
accumulation de matriaux rcalcitrants (Chefetz, 2000). Un deuxime mcanisme propose
une oxydation puis une condensation de polyphnols (Flaig, 1964; Veeken et al., 2000). Une
autre voie plus rcente implique une prservation slective de biopolymres d'hydrocarbures
aliphatiques rsistants qui sont forms lors de la biosynthse microbienne (Lichtfouse et al.,
1998). Quelle que soit la voie suivie, lhumification conduit la formation des substances
72

Partie I

humiques (SH) dont la composition dpend des matires premires de dpart et des conditions
dhumification (Gonzlez-Prez et al., 2004). Diverses mthodes spectroscopiques (UV /
VIS,

13

C NMR, et FTIR) sont utilises pour caractriser et tudier les proprits des

substances formes par humification. La spectroscopie IR est lune des techniques qui
permettent dtudier les chantillons sans aucun traitement chimique susceptible de gnrer
des ractions latrales. Cette mthode est largement utilise pour caractriser lvolution des
composs organiques, notament des SH prsentes dans les composts, les sols, les boues
dpuration (Polak et al., 2009). Hormis lidentification des groupes fonctionnels par leurs
frquences caractristiques, cette technique permet de suivre la composition des SH par
comparaison des intensits relatives de certaines bandes dabsorption (Chefetz et al., 2006;
Amir et al., 2006a,b; Fakharedine et al., 2006). La disparition et lapparition de nouvelles
bandes sur le spectre FTIR renseignent aussi bien sur lvolution de la matire que de son
interaction avec les mtaux lorsquils sont prsents surtout dans les boues dpuration
(Pajczkowska et al., 2003; Jerzykiewicz, 2004; Polak et al., 2005; Sawalha et al., 2007).
Nanmoins, lindexation des spectres FTIR diffrents stades dvolution dun co-compost,
de boue-dchet vert, reste complique vu le chevauchement des bandes relatives la phase
minrale avec celles des SH (Ellerbrock et al., 2005). Il est difficile dans ce cas dattribuer
avec prcision toutes les bandes dabsorption du spectre FTIR dans les rgions 3500-3280 cm1

et 1200-1000 cm-1 (Haberhauer et al., 1998; Ellerbrock et al., 2005; Kaiser et Ellerbrock,

2005). Dans le cas des acides humiques (AH) extraits des composts, mme aprs leur
purification, il subsiste souvent une partie relativement importante de la fraction minrale qui
donne, en particulier dans la rgion 1200-1000 cm-1 du spectre FTIR, des bandes
caractristiques, qui senchevauchent avec celles des AH (Haberhauer et al., 1998; Kaiser et
Ellerbrock, 2005). Le profil et la position des bandes observes dans ces rgions du spectre
FTIR varient dune rfrence bibliographique lautre et diverses attributions des bandes ont
t avances :
- Des bandes dissymtriques larges et intenses apparaissant vers 3450-3280 cm-1, ont
t attribues aux vibrations dlongation des groupements OH lis par liaison hydrogne et
des groupes NH dAH extrait du sol ou des boues dpuration (Senesi et al., 2003; GonzlezPrez et al., 2004; Polak et al., 2009)
- Sur le spectre FTIR dAH extraits des composts des boues dpuration, les bandes
apparaissant dans la rgion 1200-1000 cm-1 ont fait lobjet de diverses attributions. Soit aux
vibrations dlongation dthers aromatiques ou des Si-O (Polak et al., 2009), aux vibration
dlongation COC des carbohydrates; ou aux thers aromatiques et polysaccharides
73

Partie I

(Niemeyer et al., 1992; Laguirati et al., 2005; Madari et al., 2006; Sawalha et al., 2007); et
mme aux vibrations dlongations OH (Laurent et al., 2009). Ivan Smikovic et al. (2008)
attribuent la bande situe 1035 cm-1 sur le spectre FTIR la matire minrale dans la mesure
o sa frquence et son intensit restent inchanges lorsque le sol est chauff 225 C.
Ces donnes bibliographiques montrent que les bandes apparaissant dans les rgions 35003280 cm-1 et 1200-1000 cm-1 du spectre FTIR caractrisent aussi bien la phase minrale que la
phase organique. Le chauffage 225 C ne permet pas daffirmer, de faon catgorique,
llimination totale de la matire organique dun compost pour pouvoir attribuer les bandes
rsiduelles du spectre FTIR spcifiquement la phase minrale. En fait, les changements
thermiques des boues dpuration (riche en matire organique) sont complexes et un certain
nombre de ractions conscutives et parallles sont impliques. En fonction des constituants
de la boue, des conditions thermiques tels que le taux de chauffage, sa dure, la temprature,
la disponibilit en oxygne auxquels sajoute la rhydratation de lchantillon lors du
refroidissement. Les travaux les plus rcents concernant les traitements thermiques sont
orients pour : i) amliorer la compatibilit des proprits physico-chimique des boues avec le
ciment de portland (El Ouazzani et al., 2012), ii) dtruire, par le chauffage intense de courte
dure, les agents pathognes dun compost et liminer les produits chimiques volatiles afin
dobtenir un compost final dsinfect (Fernandez et al., 2009), iii) tudier la variation des
groupes fonctionnels et la distribution des produits schs par pyrolyse tubulaire (Gao et al.,
2014). Les tudes sur la calcination des co-composts dans le but de mettre en vidence la
contribution de la matrice minrale au spectre FTIR lors de lhumification dun co-compost
ont t peu ralises.
En matire de traitement de boues, lincinration nest pas adapte la ralit Marocaine
(cot lev). Actuellement, aucune filire de traitement de boues nest utilise au Maroc, bien
que le PNA recommande de dvelopper les recherches en matire de traitement de ces boues.
Dans ce prsent chapitre, nous proposons de raliser des essais de compostage semiindustriels du mlange boues de STEP-dchets de palmier pour valuer leur degr de
compostabilit. Afin de mesurer le degr de maturit de produits finaux, diffrentes analyses
physico-chimiques ont t effetues. Nous nous sommes intresss en premier temps, suivre
lvolution des indices classiques de maturit (C/N, NH4+/NO3-). Par la suite, nous avons
utilis loutil spectroscopie infrarouge (FTIR) pour valuer la maturit des composts. De
mme, il sagit de mettre en vidence la contribution, au spectre IR, de la matrice minrale
contenue dans un co-compost aprs limination de la phase organique par pyrolyse lente.

74

Partie I

2. Matriel et Mthodes
2.1. Substrats utiliss pour le co-compostage
Les boues et les dchets du palmier dattier sont les deux substrats utiliss lors du compostage.
Les boues d'puration que nous avons utilises proviennent du systme de traitement des eaux
uses par la filire boues actives de Marrakech, les dchets de palmier proviennent des
dchets verts de la ville. Leurs principales caractristiques sont prsentes ci-dessous (Tableau
1):

Tableau 1: Principales caractristiques des substrats utiliss


Paramtres
pH
Humidit (%)/MF
Taux de cendres (%)/MS
COT(%)/MS
NTK(%)/MS
C/N

Dchets palmier
6,31 0,08
25,10,21
90,1
50,50,61
1,360,24
37,13

Boues
6,450,09
46,460,26
43,800,02
31,200,11
1,500,2
20,8

Ms: Matire sche, MF: Matire fraiche


2.2. Description de la station de boues actives de Marrakech

Taux de raccordement : 85%


Mode dassainissement :

Unitaire : 85%
Gravitare
Sparatif : 15%

Longueur du rseau : 1 627 km


Nombre de branchements : 112 754
Dbit nominal: 90 720 m3/jour (temps sec) et 117 936 m3/jour (dbit moyen
estival)
Charge polluante: DBO5 : 50 t/jour

Les filires de traitements dans la station sont successivement : un prtraitement physique


(dgrillage, dessablage dshuilage), la station possde sept dcanteurs circulaires dont trois
rservs pour la dcantation primaire suivi par quatre bassins daration flux piston pour
lactivation bactrienne et quatre autres pour la dcantation secondaire; la boue dcante dans
ces derniers dcanteurs est recycle vers les bassins daration pour subir un traitement
75

Partie I

biologique. En bout, la station est dote dun filtre rapide et leau filtre subit une dsinfection
par UV.
La station a reu en moyenne une charge journalire de lordre de 110 000 m3 en 2012 et les
prvisions pour 2015 sont de 118 000 m3/j et 150 000 m3/j pour 2030. Une production de
boues de 3800 m3/j passe par trois processus pour sortir de 80m3/j laide dun
paississement de boues primaire suivi dune digestion anarobie et dune dessiccation
mcanique par filire bande. Lpaississement des boues secondaires (4200 m3/j) est suivi
dune digestion anarobie et dune dessiccation mcanique aussi par filire bande pour un
rsultat de 130 tonne/j en 2012 avec une siccit moyenne de 22%, soit lquivalent au total de
30,8 tonnes de matire sche par jour (tMS/j). Les prvisions sont de lordre 136t/j en 2015 et
187 t/j en 2030 soit une production annuelle de 47 5000 t/an en 2012 et 50 000t/j en 2015 et
68 500 t/j en 2030. Il est prciser que le nominal de la STEP se situe 40 tonne MS/j.
2.3. Production de dchets de palmier de Marrakech
Les dchets de palmier sont constitus de rsidus issus de l'entretien de la palmeraie de
Marrakech. Ils reprsentent une source importante de dchets organiques collects par les
municipalits. Selon les services environnementaux de la commune urbaine de Marrakech, les
espaces verts de la ville gnrent l'quivalent de 3500 5250 tonnes de dchets verts/an,
ceci sy rajoute le nombre de palmiers morts qui est de lordre de 2 4 palmiers/Ha /an, pour
une palmeraie de 7700 ha. Cependant, la quantit totale des dchets verts de la palmeraie de
Marrakech s'lve 8000t/an. Lafluence de lensemble de ces dchets saccentue avec une
dfaillance du recyclage dans lenvironnement.
L'utilisation de dchets de palmier, substrat ligno-cellulosique, permettra de :

Favoriser laration du mlange composter, comme agent structurant.


Favoriser un rapport C/N optimal pour lactivit des microorganismes, tant donn
que le rapport C/N des boues est faible.
Enrichir le milieu en molcules ligno-cellulosiques considres comme des
prcurseurs de substances humiques.

2.4. Essais de co-compostage


Les essais de co-compostage ont t raliss sous forme dandains sur une plateforme la
ppinire communale de Marrakech selon les proportions suivante :
-Mlange A :
1/3 de boues + 2/3 de dchets de palmier, volume total est de 4m3 (4 1 1)
-Mlange B :
76

Partie I

1/2 de boues + 1/2 de dchets de palmier, volume total est de 4m3 (4 1 1)

h= 1m
l= 1m
L= 4m

Figure 1: Dimensionnement de landain de co-compostage de boues-dchets palmier

Aprs homognisation des substrats et une humidification voisine de 60% (valeur optimale
du compostage), le mlange est mis en andain (Figure 1) prpar sur un plastique, pour viter
toute contamination du milieu en contact avec le sol et pour permettre de rcuprer les
lixiviats lors des arrosages des andains. Au cours du compostage, des brassages manuels sont
effectus chaque semaine pour favoriser laration du mlange. Aprs chaque brassage
lhumidit est contrle et en cas de desschement des mlanges un arrosage des mlanges est
effectu. Des chantillons homognes de chaque mlange (A et B), sont prlevs T0 (A0 et
B0), (aprs le mlange T01 mois (A1, B1), T02 mois (A2, B2), T03 mois (A3, B3) et
T 06 mois (A6, B6).
2.5. Mthode dchantillonnage et les paramtres physico-chimiqes analyss
Afin de sassurer de lhomognisation de lchantillon, les prlvements sont prlevs selon
la mthode de quartage (Figure 2, 3, 4). Chaque chantillon composite est ralis partir de
diffrents prlvements effectus sur les diffrents endroits et profondeurs des andains qui
sont ensuite mlangs, et un chantillon reprsentatif de 1 kg est prlev. Les chantillons
reprsentatifs sont mis en sacs en plastique numrots et conservs -20C jusqu' leur
analyse.

77

Partie I

Principe de quartage:

Figure 2: Echantillon global

Figure 3: Elimination

Homognis divis en quatre

de deux parts opposes.

parts quivalentes

Figure 4: Homognisation des parts restantes

Les paramtres physico-chimiques analyss :


2.5.1. Temprature
La temprature est mesure quotidiennement sur landain diffrents niveaux laide de
puces spciales (PH0700115 version 1.20 Ector Traabilit), qui sont introduites directement
dans landain et qui permettent laide dun logiciel, de rcuprer lensemble des donnes sur
lordinateur.
2.5.2. Mesure du pH
Le pH est mesur partir une solution du compost (1g / 10ml), aprs agitation durant 30 min,
et laide dun pH-mtre pralablement talonn par des solutions tampons (pH= 7 puis pH=
4).
78

Partie I

2.5.3. Taux d'humidit


Le taux dhumidit est dtermin sur un chantillon de 100 g, aprs schage dans une tuve
105C pendant 48 heures (AFNOR, 2000), selon la relation suivante :
Taux d'humidit (%) = 100 x (Pf Ps)/ Pf
Sachant que: Pf = poids frais et Ps = poids sec

Leau, fortement retenue par la matire, peut tre sous-estime, alors quun traitement par
excs peut engendrer la perte dune partie des substances organiques. Lvaporation deau
jusqu' poids constant est influence par les conditions de schage, qui dpendent du systme
dvacuation dair de ltuve, lhumidit de lair et la qualit de conservation au dessiccateur
avant les mesures (balance sensible 0,1 mg).
2.5.4. Taux de cendres
Le taux de cendres est obtenu aprs destruction de la matire organique par calcination au
four moufle 600C (par palier thermique) pendant 6 heures, pour viter la destruction
brutale de la matire organique. Le calcul du taux de cendres est effectu selon la relation
suivante:
Taux de cendres (%) (Ash) = 100 [100 x (Ps Pc)/ Ps]
Sachant que : Ps= poids sec et Pc: poids calcin

2.5.5. Taux de dcomposition


Ce paramtre renseigne sur le degr de la biodgradabilit du substrat, en tenant compte du
taux de cendre initial et final. Le taux de dcomposition est dtermin diffrents stades de
compostage selon la formule suivante (Paredes et al., 2002; Barje, 2010):
Dcomposition(%) = 100-100 [Ashi(100-Ashf)]/[Ashf(100-Ashi]
Ashi: cendres initiales et Ashf: cendres finales.

2.5.6. Dosage de lAzote Kjeldahl


Dans un compost, lazote se trouve sous forme minrale et organique (protines, phosphoamino-lipides...). Pour doser la totalit de lazote, lchantillon doit tre minralis en totalit
afin de permettre la transformation de lazote organique en azote minral.

79

Partie I

Minralisation
Dans un matras on mlange 0,5g d'chantillon pralablement sch et broy, en prsence de
0,5g du catalyseur Kjeldahl (K2SO4 : 50g, CuSO4 : 5g et Slnium Se: 0,5 g) qui permet de
convertir les diffrentes formes dazote en sulfate dammonium, et 10 ml de H2SO4 concentr
(36N). Puis on place les matras dans un minralisateur haute temprature jusqu' l'obtention
d'un minralist blanchtre (au moins 03 heures).
Distillation et dosage
Aprs refroidissement le minralist est distill en milieu alcalin (excs de soude) (NaOH
50ml, 10N) en prsence dun indicateur color la phnol-phtaline. Lammoniac est rcupr
par lacide borique (H3BO3) (10 ml, 1 N). Pour le dosage on neutralise lammoniac par une
solution H2SO4 (0,02N) en prsence d'un indicateur color : l'indicateur de Tashiro (Rouge de
mthyle 0,1 g, Vert de bromo-crsol 0,5 g, Ethanol 95 % : 500 ml).
La teneur en azote minrale, est dtermine selon lexpression suivante:
N (%) = N (Ve - Vt) x 1,4 /P
N : Azote NTK.
Ve : volume de titre de lchantillon (ml).
Vt : volume de titre de tmoin (ml).
N : normalit de lacide sulfurique du dosage.
P : poids en gramme de la prise dessai (mg).

2.5.7. Dosage de lazote ammoniacal (N-NH4+)


Lammonium est dos directement partir dun chantillon frais (2g) par distillation en milieu
alcalin, 10 ml de soude (10 N). Lammonium se transforme en ammoniaque puis il est
rcupr dans 10 ml de lacide borique (1N) et sera dos par lacide sulfurique (0,02N) en
prsence dindicateur dazote Tashiro.
N (%) = N (Ve - Vt) x 1,8/P

2.5.8. Dosage de lazote nitrique (N-NO3-)

80

Partie I

2g dchantillon frais, additionns de 10 ml de soude (NaOH 10 N), de 10 ml deau distille et


quelque mg dalliage de DEVARDA. Aprs distillation, le mlange est titr avec lacide
sulfurique (0,02 N).
N.B. : L'ammoniac au contact dans l'acide borique, alcalinise le milieu qui vire au vert, on
verse alors la solution talonne dacide fort pour ramener l'indicateur sa teinte sensible.
2.5.9. Dosage de carbone organique total
Le taux de matire organique est dtermin aprs calcination de lchantillon au four pendant
6 heures 600 C, laugmentation de temprature se fait par paliers thermiques, pour viter la
perte de lchantillon par projection suite sa brusque combustion.
Le carbone organique total est calcul par la mthode suivante:
Aprs la calcination la combustion de matire organique est totale, ce qui facilite la
dtermination de sa teneur par simples diffrence entre le poids avant et aprs calcination,
selon la formule suivante :
MO(%) = 100 (Ps Pc)/Ps
Ps : Poids de lchantillon sec et Pc : Poids de lchantillon aprs calcination

A partir des % de MO nous pouvons dterminer les pourcentages de COT (carbone organique
total), ainsi en appliquant la relation suivante:
MO(%) = COT(%) 1,8
Le calcule est bas sur le fait que la MO est constitue de presque 55,5% de carbone.
2.5.10. Extraction et fractionnement des substances humiques
Extraction
Lextraction des substances humiques a t ralise aprs avoir limin les composs
hydrosolubles susceptibles dinterfrer avec les substances humiques. Pour ceci, pour 5 g
dchantillon, on a ajout de 50 ml d'eau distille. Aprs agitation pendant 10 minutes, le
mlange est centrifug pendant 15 min 4000 g et le culot est rcupr. L'exprience est
rpte trois fois. Ensuite, le culot est additionn de 50 ml de soude (NaOH 0,1 N). Aprs
agitation, centrifugation et filtration dans les mmes conditions, le surnagent est rcupr pour
le dosage des substances humiques. L'exprience est rpte plusieurs fois, jusqu' l'obtention
d'extrait clair. Les deux fractions des substances humiques (acides humiques et acides
81

Partie I

fulviques) ont t spares par prcipitation des acides humiques dans lacide sulfurique
H2SO4 un pH autour de 1.
Dosage
Les deux fractions humiques ont t doses, aprs oxydation par le permanganate de
potassium (KMnO4) en milieu alcalin (Chaminade, 1944). Loxydation de 5 ml de la solution
humique a t ralise bullition (10 min) par 20 ml de KMnO4 (0,1 N) en milieu alcalin (10
ml de NaOH 0,1 N). Aprs refroidissement et addition de 20 ml d'acide oxalique et 10 ml
d'acide sulfurique (6 N) lexcs de lacide oxalique est titr avec le permanganate de
potassium (0,1N) jusqu'au virage rose. La teneur des substances humiques est dtermine
sachant que 1 ml de KMnO4 (0,1N) oxyde 1 mg de substances humiques (Chaminade, 1944).
Cette technique permet de calculer les trois paramtres d'humification qui renseignent sur le
degr de maturit du compost et dont les formules sont les suivantes :
IH = CAH/CAF avec CAH = AH/2 et CAF = AV/2 (Ezelin, 1998).
DH = [(CAH +CAF) / CET] x 100 (Ciavatta et al., 1988).
TH = [(CAH + CAF) / COT] x 100 (Ciavatta et al., 1988).
IH : Indices d'humification, DH : degr d'humification, TH : Taux d'humification, CAH : carbone total
des acides humiques, CAF : carbone total des acides fulviques, AH : acides humiques, AV : acides
fulviques, CET : carbone total extractible, COT : carbone organique total.

2.5.11. Dosage des lments traces mtalliques totaux (ETM)


1 g de compost calcin 600C pendant 6 heures, est dissous dans 5 ml de acide fluoridrique.
Le digestt est en suite vapor puis dissous dans une solution de HNO3/HCl (1:1) (AFNOR,
1993). La dtermination des mtaux tudis a t ralise par spectro photomtrie
d'absorption atomique.
2. 5. 12. Analyse par spectroscopie d'absorption infrarouge (FTIR)
Cette mthode base sur des radiations de nature lectromagntique, qui permettent d'assigner
les bandes d'absorption infrarouge des groupements. Malgr la structure complexe des
substrats composts, la technique de spectroscopie infra-rouge est utilise sur des chantillons
de chaque stade de co-compostage pralablement schs 105C en mlange avec le bromure
de potassium (KBr) avec un ratio de (2: 200, chantillon/KBr). Le mlange est ensuite press
sous forme de pastilles. Les analyses ont t ralises laide dun spectromtre FTIR Bruker
Vertex 70, quip dun dtecteur DTGS et logiciel OPUS 6,5 (128 balayages une rsolution
82

Partie I

de 2 cm-1 ont t effectus). Les donnes spectrales sont obtenues en tant que valeurs
d'absorbance sur une gamme de frquence de 4000-400 cm-1. Cette technique permet de
caractriser les groupements fonctioneles des molcules par dtermination des nergies
absorbes par les diffrentes vibrations inter-atomiques. Des informations importantes
peuvent tre obtenues sur la nature, la ractivit et les changements structuraux des
groupements fonctionnels des substances organiques.
2.5.13. Traitement thermique
Les chantillons de diffrent stade de co-compostage pralablement schs ont t traits
thermiquement par pyrolyse en lit fixe dans des bacs en cramique dans un four lectrique
type FERRO. La monte en temprature est linaire et seffectue une vitesse de 5C/min
jusqu 650C. A cette temprature, la calcination des chantillons est maintenue pendant une
dure de 5 heures. Le refroidissement seffectue la vitesse propre du four ferm.
2.5.14. Analyse chimique par Fluorescence X
Les analyses de la composition chimique ont t ralises laide dun spectromtre de
fluorescence X de marque Pioneer XRF-S4 pilot par le logiciel Spectraplus utilisant le
programme dvaluation interactif Eval. Des prises de lordre de 10 g dchantillons ont t
analyses sous forme de poudre.
2.5.15. Analyse par DRX
Les chantillons solides pralablement schs 105C et les chantillons calcins 650C ont
t broys et analyss par la technique de diffraction sur poudre dsoriente laide dun
diffractomtre Philips XPERT, utilisant une anticathode de cuivre de longueur donde =
1.540560 oprant 40 kV et 40 mA. Lacquisition des donnes est effectue par une unit
de contrle pour des angles de 2 thta (2) compris entre 5 et 70. Le traitement des
diffractogrammes seffectue laide du logiciel XPetrt High Score. Lindexation des phases
est base sur la comparaison des DRX de la base de donnes des fiches ASTM (American
Society for Testing and Materials) faisant la comparaison des distances inter-rticulaires dus
aux angles 2.
3. Analyses statistiques
La corrlation entre lvolution des paramtres durant le co-compostage de boue et dchet de
palmier a t tudie par analyse en composante principale (ACP), applique sur la matrice de
83

Partie I

corrlation entre les variables. Les traitements statistiques ont t raliss en utilisant le
logiciel SPSS Win version 10.
4. Rsultats et Discussion
Lvolution du processus de compostage des mlanges boues-dchets verts a t dtermine
par le suivi de certains paramtres physico-chimiques pendant six mois. Lensemble de ces
paramtres permettent de se renseigner sur les transformations qui se sont produites au cours
du co-compostage de boues-dchets du palmier. De mme, ils permettent de mieux valuer le
degr de compostabilit des substrats initiaux et de dterminer la maturit des produits
finaux.
4.1. Evolution des paramtres physico-chimiques

Phase
Thermophile

Phase
Maturation

70

70

60

60
TC

Phase
Thermophile

Phase
Maturation

50

50

TC

40

40

30

30

20

20
Andain A

10

Andain B

10

T Ambiante

T Ambiante

0
0

50
100
150
Temps de co-compostage (Jours)

50
100
150
Temps de co-compostage ( Jours)

Figure 5 : Evolution de la temprature en fonction du temps au cours du processus de cocompostage du mlange A et B


L'volution de la temprature au cours du compostage est un premier indice qui reflte le
degr de dgradabilit du compostage. Dans notre cas (Figure 5), la courbe de temprature
une allure classique du compostage, caractrise par deux phases importantes (phase de
stabilisation et phase de maturation). La phase thermophile est caractrise par une lvation
de la temprature jusqu' une temprature de 65C, cette augmentation de la temprature est
le rsultat dune intense activit microbienne qui rsulte de la dgradation des molcules
simples prsentes dans le substrat (Khalil et al., 2001 ; Paredes et al., 2002 ; Knicker, 2004;
84

Partie I

Lhadi et al., 2006 ; Barje et al., 2012 ; El Fels et al., 2014a). Par la suite, la temprature des
andains baisse rgulirement pour atteindre des tempratures ambiantes. Cette baisse de
temprature est due lpuisement du milieu en composs organiques facilement
mtabolisables; et seuls les composes rsistants la dgradation (lignine, cellulose)
persistent (Ait Baddi et al., 2004 ; Amir, 2005). Cette seconde phase appele phase de
maturation est domine par les ractions dhumification qui consiste la polymrisation des
composs organiques vers des composs plus stables appels Humus (Mustin, 1987).
Tableau 2: Evolution des paramtres physico-chimiques au cours du co-compostage des
mlanges A et B

Mlanges

Temps du
cocompostag
e
(mois)
0

Humidit

NO3-

1,31,2

58,83

0,0160,001

0,220,03

26,2

2,31,3

69,5

0,050,01

0,120,04

12,8

2,81,5

66,8

0,0750,02

0,050,02

2,21,4

66,94

0,0650,01

2,21,1

66

1,31,1

2,21,2

2
3
6

%NTK*

NH4+

C/N

DEC
(%)*
-

pH

%TOC*

6,340,03

34,41,2

20,030,9

6,30,3

29,40,12

9,92

281,2

6,510,2

27,70,1

0,020,01

11,2

33,41,17

6,590,37

0,0750,01

0,010,01

10,09

40,071,1

6,790,06

24,641,1
1
220,2

60,97

0,0280,01

0,210,01

27,4

6,040,28

35,11,1

68,8

0,060,02

0,150,01

18,220,2

6,40,56

31,10,1

2,71,5

66,2

0,10,05

0,050,01

14,3
9
10,8

23,40,12

6,650,27

2,21,1

66,56

0,060,01

0,020 ,01

11,5

33,391,75

6,990,28

2,31,2

66

0,070,02

0,0090,01

10,08

401,49

7,030,08

300,12
25,410,2
1
230,13

(*): Rsultats exprims en poids sec, NTK : Azote total kjeldhal, DEC ; Taux de dcomposition

Au cours du processus de co-compostage, on assiste une lgre diminution du pH ; 6,34 et


6,04 suivie dune augmentation, puis une tendance la stabilisation autour de la neutralit de
6,79 et 7,03 respectivement pour le mlange A et B (Tableau 2). Cette diminution du pH est
due la production dacides organiques et la dissolution de CO2 dans le milieu et/ou les
produits de dgradation des molcules simples (glucides et lipides). Ces acides provoquent
une acidification du milieu cause de leur accumulation (Moustin, 1987; Peters et al., 2000,
Barje et al., 2013). La lgre augmentation peut sexpliquer par un processus
dammonification et la production ammoniacale partir de la dgradation des amines
(protines, bases azots) (Ouatmane et al., 2000), et peut tre une libration des bases
existantes dans les dchets organiques (Beck-Friis et al., 2001 ; Vergnoux et al., 2009). La
85

Partie I

stabilisation de la valeur du pH durant le co-compostage est due au pouvoir tampon de


lhumus au cours de la phase de maturation. En gnral, pour cette phase, le pH reste stable,
avec une valeur optimale de 6 8 (Amir et al., 2005; Zenjari et al., 2006).
Le taux de dcomposition a augment pour atteindre une valeur autour 40 %, aprs six mois
de compostage. Ces rsultats indiquent le bon degr de compostabilit du mlange bouedchet de palmier, qui semble bien adapt aux conditions du compostage.
Les teneurs en carbone organique (COT) au dbut du co-compostage sont de lordre de 34 et
35% respectivement pour les mlanges A et B (Tableau 2), ces valeurs montrent la richesse de
la matire premire en carbone. Au cours du compostage, on constate une diminution de la
teneur en carbone, qui sexplique par la minralisation continue des composs organiques qui
se traduit par lappauvrissement du milieu en composs facilement dgradables (phase de
stabilisation), ainsi que la dominance des prcurseurs des substances humiques (phase de
maturation) (Mustin, 1987). Pendant la phase de maturation, la teneur en carbone se stabilise
relativement. En effet, dans cette phase les pertes de carbone sont ralenties et on assiste une
redistribution de carbone par les mcanismes de lhumification. Les voies de repolymrisation et condensation qui conduisent la formation des substances complexes
caractrises par un poids molculaire trs grand et une faible solubilit (Said-Pullicino et al.,
2007).
Au dbut du co-compostage on remarque une lgre augmentation du lazote (NTK) de 1,31
et 1,28% jusqu' 2,18 et 2,28 % respectivement pour les mlanges A et B (Tableau 2). Aprs
la premire semaine du co-compostage, la teneur de lazote a diminu de 1,31 et 1,28% 1,25
et 1,19%. Cette diminution est surtout lie des pertes dazote sous forme dammoniac
volatile pendant les phases thermophiles (Eghball et al., 1997); et/ou son lessivage lors de
larrosage des andains. Laugmentation de la teneur en azote aprs la deuxime semaine est
due sa concentration, engendre par la forte dgradation des composs carbons. La teneur
de NTK lors du compostage dpend dune part, de la nature des molcules azots et de leurs
aptitudes tre minralises, et dautre part de la nature du composs carbons prsents dans
le substrat composter (Bernal et al., 1998).
Au dbut du co-compostage la teneur de lazote ammoniacal est de 0,22 et 0,21%
respectivement pour les mlanges A et B. A la fin du co-compostage, cette teneur a diminu
pour atteindre 0,009%. Cette diminution de lazote ammoniacal, rgulirement observe, est
due au processus de la nitrification et lincorporation de N-inorganique dans les tissus
microbiens durant leurs croissances et aussi la perte dazote sous forme dammoniac par

86

Partie I

vaporation et lessivage, en particulier pendant la phase thermophile (Bishop et Godfey,


1983).
Au dbut du compostage, la teneur en nitrates est de lordre de 0,016 et 0,028%. Au cours du
co-compostage, cette teneur en nitrate augmente pour atteindre 0,075 et 0,07%,
respectivement pour les mlanges A et B (Tableau 2). Les teneurs en nitrates voluent
inversement que les teneurs dazote ammoniacal, ce qui explique le phnomne de
nitrification de lammonium. Lenrichissement du compost final en NO3- par apport NH4+
traduit lvolution du substrat vers un compost exempt de phytotoxicit (Mustin, 1987 ;
Benhassou, 1998; Amir, 2000 ; Barje et al., 2012). Dans notre cas de co-compostage, le
rapport de NH4+ /NO3- passe de 13,75 et 15,6 0,12 et 0,14 ; respectivement pour les
mlanges A et B. Cette valeur (NH4+/NO3-<1) tmoigne la maturit des composts finaux.
Le rapport C/N passe de 26,2 et 27,4 10,09 et 10,08 respectivement pour les mlanges A et
B la fin du co-compostage (Tableau 2). La diminution de ce rapport est troitement lie la
perte de carbone organique par biodgradation de la matire organique et le dgagement du
CO2, et dautre part laugmentation du taux de lazote total du milieu. La baisse de ce
rapport est attnue par les pertes de lazote sous forme ammoniacale au cours de la phase
thermophile (Amir, 2005 ; Barje, 2010). Les valeurs finales atteintes de C/N voisines de 10,
aprs six mois de co-compostage, tmoignent dune bonne maturit du compost final. En effet
selon de nombreux auteurs (Pfirter et al., 1982; Dorfman et Batch, 1985 ; Amir et Hafidi,
2001; Jouraiphy, 2007; Barje et al., 2012) un compost est considr mature sil prsente un
rapport C/N entre 10 et 15.
4. 2. Processus dhumification au cours du co-compostage
Au cours du compostage, les ractions d'humification sont lies des processus de
dgradation des glucides, des protines, des acides amins, des lipides, des lignines, des tanins
et des pigments en composs plus simples. Diffrents auteurs (Tomati et al., 1995; Amir et al.,
2006a,b) montrent que l'activit microbienne et les ractions

enzymatiques de

polymrisation/repolymrisation conduisent la formation des composs aromatiques, tels


que les substances humiques. Une augmentation significative des substances humiques de
plus de 60% a t observe la fin de ce processus de co-compostage (Tableau 3). Nous
avons not une augmentation significative du degr de polymrisation (DP) autour de 62% et
99%, respectivement, pour les mlanges A et B. Ce rapport est l'indice le plus sensible pour
suivre le processus d'humidification (Jimenez et Garcia, 1991; Sanchez-Monnedero et al.,
1999, Vergnoux et al., 2009). L'augmentation de ce rapport peut tre explique par la
87

Partie I

formation des molcules complexes (acides humiques), par la polymrisation de molcules


simples (acides fulviques). L'augmentation de l'indice d'humification (IH) et le degr de
polycondensation de la matire organique avec la formation des macromolcules, ont t
confirms par le rapport dhumification (RH). La fraction relative, calcule en tant que AF/
SH diminue au cours de processus. Cette diminution de la fraction fulvique (AF) est
concomitante avec l'augmentation de (RH), indiquant la nature intermdiaire des AF (acides
fulviques) la formation des grosses molcules dAH (acides humiques).

Tableau 3: Paramtres dhumification durant le co-compostage des mlanges A et B


Mlange
s
A
B

Stade

SH g/Kg*

AH g/Kg*

AF g/Kg*

RH%

IH%

DP%

17,28
30,24
15,12
25,92

8,44
18,36
5,4
13,6

8,84
11,88
9,72
12,32

50,23
104,81
43,07
91,97

24,53
63,63
15,38
48,14

95,47
154,54
55,55
110,38

(Mois)

0
6
0
6

F
AF/SH
0,51
0,39
0,64
0,47

*: resultants exprim par matire fraiche, , RH (rapport dhumification) =SH/C.O.T x 100; IH (Indice dhumification) =
AH/C.O.T x100; DP (degr de polymrisation) = AH/AF x 100; SH: Substances humiques; F: Fraction; AH: Acide
Humique, AF : Acide fulvique.

4.3. Etude de la composition des lments majeurs par fluorescence X


Le tableau 4 rcapitule les rsultats danalyses obtenus par fluorescence X. Les lments
majeurs prsents diffrents stades de co-compostage sont exprims sous forme doxydes. Il
en ressort que la composition est homogne et les diffrents chantillons tudis sont pauvres
en aluminium et trs riches en silice et en carbonates. Les pourcentages des mtaux comme le
cuivre, le zinc, le plomb et le chrome sont faibles. Ces rsultats confirment bien la texture
sableuse de la boue et son faible caractre argileux. Une proportion relativement importante
de phosphate et de potasse est prsente. La perte au feu est leve et varie de 55,82 56,08 %,
signe dune prsence importante de la matire organique.

88

Partie I

Tableau 4 : Composition chimique par fluorescence X des chantillons calcins de diffrents


stades de co-compostage
Echantillons calcins
Elments

0 mois 1mois 2 mois 6 mois

SiO2

17,84

19,30

20,30

19,32

Al2O3

5,60

4,72

4,04

4,37

Fe203

1,05

0,88

0,76

0,80

MgO

2.98

3,36

3,76

3,44

CaO

7,63

6,77

6,17

6,43

Na2O

0,67

0,74

0,77

0,77

K2O

1,33

1,76

1,95

1,92

TiO2

0,17

0,13

0,10

0,13

P2O5

3,03

2,70

2,36

2,45

SO3

2,86

2,61

2,59

2,96

Cl

0,51

0,94

1,22

1,27

Cr2O7

0,02

0,02

0,02

0,02

MnO

0,02

0,02

0,02

0,02

ZnO

0,04

0,03

0,03

0,03

CuO

0,01

0,01

0,01

0,01

PbO

0,01

0,01

0,00

0,01

Total minraux 43,76

43,99

44,10

44,94

Perte au feu

56,13

55,82

54,92

56,08

Total

99,89

99,81

99,02

100,02

4. 4. Analyse minralogique par DRX


Les analyses DRX de lchantillon sch 105C (Figure 6) montrent la prsence de phases
amorphes ou mal cristallises. Nanmoins, nous avons not des pics dans la zone (2 = 15-25)
89

Partie I

qui caractrisent les fibres de cellulose (cel). Ce polymre linaire de chaines de glucose qui,
en sassociant par des liaisons hydrogne donnent une forme de cellulose cristallise. La
structure cristalline est caractrise par une bande large et diffuse dans la zone (2 = 21,322,6) correspondant la diffraction du plane 002 dans cette zone (Liu et al., 2006).

Figure 6: DRX des chantillons de compost sch 105C

Les DRX des chantillons traits thermiquement 105C et 650C (Figure 7) prsentent la
mme allure. Nanmoins, on constate la disparition totale du pic caractrisant la cellulose
aprs traitement thermique 650C. Ces rsultats sont en accord avec les tudes sur la
dcomposition thermique de la cellulose qui commence vers 390C. Bien que cette
dcomposition varie en fonction du pourcentage de la matire minrale associe, et elle ne
dpasse pas 600C (Mndez et al., 2009).

90

Partie I

Figure 7: Comparaison des DRX de compost avant et aprs calcination


Par ailleurs, comparativement au pic du quartz (rgion 2 = 25-30), les DRX des chantillons
calcins montrent une nette diminution des carbonates qui ne sont pas compltement limins
cette temprature (Figure 7 et 8). Dautre part, les DRX ne montrent pas la formation de
nouvelle phase par calcination 650C. Les pics rsiduels, indexs par rapport la
composition donne par fluorescence X, montrent que les phases prsentes sont la silice, le
calcium qui se prsente sous forme de carbonate dhydrophilite (CaCl2), de sulfate (CaSO4) et
le phosphore qui est probablement sous forme de berlinite (AlPO4). Nous considrons que la
calcination 650 C provoque la dgradation de la matire organique contenue dans les
chantillons de co-compostage et seule la matire minrale persiste cette temprature.

Figure 8: DRX des chantillons de composts calcins 650C


91

Partie I

4. 5. Les analyses spectroscopie infra-rouge


La spectroscopie FTIR est largement utilise comme mthode de base pour la caractrisation
des substances organiques issues de lhumification des boues dpuration (Polak et al., 2007),
des traitements des boues d'puration (Simkovic et al., 2008), et des eaux uses traites par
bioracteur membrane (Avella et al., 2010). Lattribution des bandes dabsorption dans la
rgion (4000-2000 cm-1) du spectre FTIR reste assez prcise dans le cas de ltude des
substances humiques extraites des sols, des boues, des composts, des sdiments de rservoirs
dpurations et des eaux uses (Polak et al., 2009). En revanche, lindexation des autres
rgions du spectre FTIR reste dlicate.
Les spectres FTIR prsents sur la figure 9a, 9b (chantillons A0, A1, A2, A6, et les
chantillons B0, B1, B2, B6) montrent lvolution des bandes dabsorption des chantillons
de compost. A hautes frquences, la bande situe 3402 cm-1 peut tre attribue des
vibrations dlongation des groupements hydroxyles O-H. Son profil large et la valeur des
nombres donde infrieurs celui des OH libres laissent penser que les hydroxyles sont en
interaction par liaisons hydrogne. Dans les boues de grignons dolives et des sols riches en
matire organique, cette bande a t attribue respectivement des phnols et des
hydroxyles dacides carboxyliques (Ait Baddi et al., 2004); des hydroxyles de phnols et des
longations N-H (Madari et al., 2006). Nos spectres sont en accord avec ces hypothses, la
dissymtrie de la bande permet de pointer deux composantes situes 3402 cm-1 et 3280
cm-1 que nous attribuons respectivement des groupements OH et N-H. Dans la rgion 30002800 cm-1, la diminution des absorbances relatives des bandes situes 2964, 2922 et 2850
cm-1 (C-H aliphatiques des groupe mthyle et mthylne) et laugmentation des intensits
relatives des bandes situes 1514 et 1426 cm-1 (C=C insaturs et C=C aromatiques) refltent
l'tat d'avancement de lhumification. La diminution des intensits des bandes des chaines
aliphatiques (C-H et CH2/CH3 1450 cm-1) et laugmentation des intensits des fonctions C=C
sont en faveur dune dynamique du processus de compostage conduisant la formation
ddifices insaturs et aromatiques.
Lattribution des bandes dabsorption du spectre FTIR dans la rgion (1800-1600 cm-1)
devient complique suite aux chevauchements des bandes de vibration, rattaches la boue et
aux dchets verts des vgtaux. Dans le cas des chantillons de compost, les bandes
apparaissant vers 1750-1600 cm-1 renseignent sur la nature et aussi sur la quantit des
fonctions C=O contenue dans la matire organique (Kaiser et Ellerbrock, 2005). Dans leur
tude de caractrisation dacides humiques, Gonzalez-Prez et al. (2004) ont attribu la bande
92

Partie I

situe 1716 cm-1 aux vibrations dlongation C=C des groupes carboxyles des acides et des
ctones. La bande situe 1650 cm-1 a t associe par ces auteurs aux vibrations C=C des
structures aromatiques et de la vibration antisymtrique a des COO-. Dans la mme rgion
plusieurs auteurs (Van der Marel et Beutelspacher, 1976; Gnzler et Bock, 1990; Kaiser et
Ellerbrock, 2005) ont observ des bandes entre 1698 et 1740 cm-1 et les attribuent C=O
dacides carboxyliques, des ctones et des aldhydes contenus dans la matire organique
extraite des sols. Les bandes attribues COO- sont situes entre 16801630 cm-1 dans le cas
des acides humiques extraits des boues diffrents stades de traitement (Pajaczkowska et al.,
2003). Une bande qui apparat aussi vers 1600-1640 cm-1 a t attribue la fonction C=O de
la forme ionise du groupement COO- des acides carboxyliques (Celi et al., 1997). Une autre
composante observes des nombres dondes plus bas (1600-1613 cm-1) a t attribue la
double liaison C=C conjugue avec C=O des ctones insatures, acides carboxyliques ou
amides (Gnzler et Bck, 1990) elle a t attribue un groupement N-H selon (Kaiser et
Ellerbrock, 2005). Lanalyse profonde des rfrences bibliographiques bien quabondantes
rvle que, dans la rgion 1750-1600 cm-1 le nombre donde, et par consquent la position de
la bande de vibration, attribue au groupe C=O, varie de plusieurs dizaines de cm-1 dune
rfrence bibliographique lautre. Son attribution un groupe fonctionnel spcifique
(aldhyde, ctone, ester, acide) devrait se faire avec prcaution. En fait, lhumification conduit
la formation dAH qui sont composs de plusieurs centaines de constituants organiques
(Gonzlez-Prez et al., 2004) dont la composition dpend des matires premires de dpart,
de leurs comportement -avant, durant et la fin du processus- et des conditions
dhumification. La diffrence des frquences observes montre que le mouvement de
vibration de loscillateur C=O, dpend de faon trs sensible de lenvironnement du carbone
porteur dautres groupements, en particulier, llectrongativit des autres atomes qui assurent
sa ttravalence ainsi que leffet msomre des autres liaisons adjacentes. Afin de caractriser
avec prcision cette fonction, il est alors indispensable danalyser dautres rgions du spectre
FTIR et chercher dautres bandes caractristiques qui renseignent sur lenvironnement du
carbone porteur de la fonction carbonyle. Il serait plus prudent, dattribuer les bandes qui
apparaissent dans la rgion 1750-1700 cm-1 des longations C=O de la fonction carboxyle
sous sa forme non ionise et celles qui apparaissent vers 1650 cm-1 C=O de la fonction
carboxyle ionise (COO-). Il sen suit quil est plus probable que les bandes situes plus
basse frquences (rgion 1630-1600 cm-1) soient caractristiques des liaisons C=C conjugues

93

Partie I

avec un groupe carbonyle (cas des ctones insatures, et composs aromatiques) plutt qu
un groupement carboxyle C=O mme ltat ionis.
Nous attribuons la bande situe 1737 cm-1 C=O de la fonction carboxyle sous sa forme non
ionise quon retrouve dans les acides carboxyliques, les aldhydes, les esters. La faible
intensit relative de cette bande sur les spectres de la boue et celui des chantillons A0 et B0
du dbut de compostage est en accord avec une diminution de la forme non ionise. Au cours
du compostage, bien que lintensit de la bande (C=O de la fonction COO- ionise 1647 cm1

) augmente, un paulement large vers 1740 cm-1 persiste. Cet paulement volue mme

sensiblement en intensit au cours du compostage et montre bien la prsence dune forme de


carboxyle non ionise. Nos spectres indiquent, quen parallle, il se produit une augmentation
de lintensit de la bande situe vers 1155 cm-1 que nous attribuons aux vibrations C-O.
Lvolution en intensit des bandes observes respectivement vers 1740 et 1155 cm-1
tmoignent dune part de la prsence dune fonction carboxyle et dautre part, que celle-ci est
probablement caractristique dune forme dester.
Dans la rgion 1386-1375 cm-1, nous avons relev lapparition dune bande qui volue
sensiblement en intensit et en structure (passage dune bande large une bande fine en fin du
co-compostage). Lvolution du profil de cette bande peut tre explique par la formation
continue dune forme bien structure. Nous lattribuons une vibration de dformation OH
comme dans les alcools aromatiques (Senesi et al., 2003).

Figure 9: Les spectres FTIR diffrentes stades du co-compostage pour les deux mlanges A
(a) et B (b)

94

Partie I

4. 6. Spectroscopie infrarouge transforme de Fourier (FTIR) des chantillons calcins


Les spectres FTIR des chantillons calcins (Figure 10), ne montrent pas de bandes dans la
rgion 3600-3700 cm-1 caractrisant des phases phylloscilicates comme les kaolins, lillite et
les micas. Ces rsultats sont en accord avec les analyses de DRX qui ne montrent pas de pic
aux faibles valeurs de , et les donnes de fluorescence X qui rvlent un rapport de
silice/alumine en faveur dune composition riche en phases silicates.

Figure 10 : Spectres FTIR des chantillons de composts calcins 650C

Le traitement thermique provoque des changements significatifs la fois des intensits et des
positions des bandes dabsorption. Comparativement au spectre de lchantillon sch
105C (Figure 11), les spectres FTIR des chantillons calcins 650C prsentent :
- Une diminution de lintensit des bandes caractristiques des vibrations O-H situes
vers 3406 cm-1 et 3280 cm-1.
- La disparition totale de lpaulement situ 1236 cm-1 et les bandes caractristiques
des C-H aliphatiques releves entre 3000 et 2800 cm-1. Cette disparition est en accord avec
llimination/dgradation de la matire organique par pyrolyse.
- Une diminution des intensits des bandes situes 2535, 1795, 1435 et 875 cm-1. Ces
frquences sont typiquement caractristiques de la calcite (Fernndez et al., 2010). La

95

Partie I

persistance de certains paulements, 650C, montre qu cette temprature, les carbonates


ne sont pas totalement dgrads.
- la persistance des trois bandes intenses, situes dans la rgion 1155-1035 cm-1,
caractristiques de la silice.

Figure 11 : Comparaison des spectres FTIR de compost avant et aprs calcination

Les rsultats de nos spectres IR montrent que la calcination des chantillons provoque dune
part la disparition totale de certaines bandes. Dans ce cas, on suppose que le traitement
thermique limine les phases rattaches ces bandes. Dautre part, le traitement provoque la
diminution de lintensit de certaines bandes mais qui restent centres sur les mmes nombres
dondes, alors que dautres bandes diminuent nettement dintensit et subissent en plus un
glissement. Les bandes 3406, 3280 et 1650 cm-1 glissent respectivement vers 3445, 3236 et
1636 cm-1 ; et la bande 1085 cm-1 glisse vers 1120 cm-1.
Ces modifications releves sur le spectre FTIR montrent que les changements thermiques
induits dans une matrice qui contient la matire organique sont complexes. Ils sont
commandes par les constituants de la matrice, de ses proprits thermiques, de la priode et
le taux de chauffage, de la temprature, des conditions tels que le taux de chauffage, sa dure,
la disponibilit en oxygne aux quels sajoute le taux dhydratation de lchantillon lors du
refroidissement. Des tudes menes pour dterminer les conditions qui conduisent la
96

Partie I

dgradation spcifique des constituants organiques sont apparus rcemment mais les
phnomnes qui se droulent au cours de la calcination sont encore controverss. Fernandez
et al. (2001), ont montr que le chauffage de la fraction humique extraite de deux sols
diffrents 220C pendant 30 minutes, conduit une perte de 75% d'holocellulose et la
fraction lipidique prsente une rsistance thermique qui dpend de la nature du deux sols,
avec une perte de 73% dans le premier cas, et seulement de 11% dans lautre cas. Cependant
350C, lholocellulose disparait pratiquement et la perte de la lignine est significative. Selon
une autre tude, le chauffage 225C pendant 5 heures conduit un abaissement de 13% des
substances organiques (Simkovic et al., 2008). La pyrolyse lente utilise dans la gazification
du bois et qui consiste un traitement thermique pendant deux heures montre qu partir de
450C, il se produit la dgradation des celluloses et de la lignine. Le rsidu restant est
compos essentiellement de coke et de matire minrale (Nowakowski et Jones, 2008).Une
tude thermogravimtrique rcente (Gao et al., 2014) montrent quentre 276 et 454 C, il se
produit non seulement la dcomposition des protines et des groupes carboxyle, mais aussi le
craquage du carbone rfractaire comme celui des noyaux aromatiques, et les structures Nalkyle longue chane et des chanes aliphatiques satures (Haberhauer et al., 1998; Gao et
al., 2014). Dans la plage de temprature de 492 720C, la perte en masse constate a t
attribue la dcomposition des matires inorganiques telles que le carbonate de calcium
(Casajus et al., 2009). Cependant, les tudes ralises par Fras et al. (2008) montrent que la
calcination 650 C pendant 2 h conduit la destruction totale de fibres organiques et une
faible dcarbonatation de la calcite. Ceci montre que le chauffage 650C pendant 5 heures,
constitue des conditions idales pour dgrader toute la matire organique. Lanalyse de nos
spectres FTIR est base sur lhypothse que les bandes rsiduelles sur le spectre caractrisent
uniquement la matrice minrale.
Sur les spectres FTIR de lchantillon sch 105C, la dissymtrie de la bande (dans la
rgion 3500-3280), nous permet de pointer deux composantes centres sur 3406 cm-1 et
3280 cm-1 qui par pyrolyse leurs intensits diminuent et glissent respectivement vers 3445 et
3236 cm-1; et une bande de faible intensit persiste 1636 cm-1 aprs calcination. Des bandes
semblables ont t releves 3443 et 1632 cm-1 sur le spectre FTIR lors de la pyrolyse des
boues de papier, et ont t attribues respectivement aux vibrations dlongation dhydroxyles
de l'eau (O-H) et sa dformation ( (H-O-H)) (Fernndez et al., 2010). Par ailleurs, les
molcules d'eau rencontres dans d'autres environnements restreints affichent galement des
bandes dans des positions similaires; smectites hydrats 3450, et 3350 cm-1 (Bishop et al.,
1994); leau dans H2O/AOT/i-octane micelles : 3455, et 3290 (Jain et al., 1989); l'eau dans
97

Partie I

les polymres tels que le chlorure de polyvinyle et le polythylne ttraphtalate : 3510, et


3380 cm-1 (Sammon et al., 1998).
Sur nos spectres FTIR le glissement, de la bande situe 3406 vers 3445 cm-1 aprs pyrolyse
650C, trouve son explication selon les travaux de Clegg et al., 2012 qui ont montr un
phnomne de rhydratation lair ou en atmosphre contrle lors du refroidissement des
chantillons des argiles pralablement calcins 500C. Ces auteurs constatent que le
matriau issu de la pyrolyse se rhydrate. Les bandes situes 3430 cm-1 et 3260 cm-1 releves
sur le spectre de lchantillon de dpart disparaissent quasi-totalement vers 400C. Le
phnomne de rhydratation survient ensuite lors du refroidissement de lchantillon donnant
lieu lapparition dune bande centre sur 3450 cm-1 avec un nombre donde plus lev que
celui de la bande de dpart (3430 cm-1). Lautre bande apparat au mme nombre donde que
lchantillon de dpart 3260 cm-1, est affecte des molcules d'eau qui sassocient aux
phases issues du traitement thermique.
Il se dgage que le comportement des hydroxyles avant et aprs calcination de nos
chantillons est analogue aux hydroxyles rencontrs dans les principaux minraux impliqus
dans la transformation chimique et minralogique des phases hydrates lors de leurs
calcinations. Dans lhypothse o la fonction potentielle dcrivant ces molcules deau est
similaire, nous attribuons la bande releve 3406 cm-1 sur le spectre FTIR des chantillons
schs 105C aux vibrations dlongations O-H dhydroxyles de leau. Une composante
masque par les bandes de la matire organique contenue dans lchantillon sch et qui est
mise en vidence 1636 sur le spectre de lchantillon calcin pourrait tre attribue au mode
de dformation (

(H-O-H)).

Quant la composante situe 3280 cm-1 sur le spectre de

lchantillon sch, et qui glisse aprs calcination vers 3236 cm-1, elle est probablement due
un mode de combinaison de la dformation ( (H-O-H)) situe vers 1636 cm-1.
Dans la rgion 1200-1000 cm-1, nous avons relev un massif mal rsolu constitu de deux
bandes situes 1155 et 1080 et 1035 cm -1 quon retrouve 1150 et 1120 et 1037 cm -1 aprs
calcination. Des bandes similaires ont t observes 1150 et 1080 cm-1 dans le cas de la
silice amorphe (Fernndez et al., 2010). Il est vraisemblable que le traitement thermique,
favorise la cristallisation de la silice amorphe qui se traduit par lapparition des bandes bien
rsolues centres sur des frquences sensiblement identiques que celles rencontres sur le
spectre FTIR du quartz (Fernandez et al., 2001). Ces donnes sont en accord avec les rsultats
de la composition obtenue par fluorescence XRF qui montrent lexistence dune phase
minrale relativement importante qui a un caractre silicat. Les spectres FTIR sont, en outre,
en accord avec les diagrammes de DRX qui montrent une meilleure cristallisation aprs
98

Partie I

pyrolyse. La bande situe 1035 cm-1 (localise 1037 cm-1 aprs calcination) insensible la
pyrolyse peut tre attribue aux vibrations Si-O de la silice contenue dans lchantillon. La
prsence des bandes semblables dans cette rgion du spectre IR est trs courante dans le
spectre IR du sol entier qui na pas fait lobjet d'un procd d'extraction spcifique
(Haberhauer et al., 1998; Ellerbrock et al., 2005). Mme purifis, aprs extraction des AH, il
subsiste toujours une fraction minrale (6,35% Ash) (Olk et al., 1999; Gonzlez-Prez et al.,
2004). Le glissement de la bande situe 1080 cm-1 sur le spectre IR de lchantillon sch
vers 1120 cm-1 aprs pyrolyse est du probablement une interaction de la silice avec la
matire organique dgrade donnant une sorte de complexe stable dans ces condition
thermique.
4.7. Analyse des teneurs des mtaux lourds totaux
Les ETM totaux suivants, Pb, Cd, Cr ont t analyss diffrents stades du co-compostage de
boue-dchets de palmier. Au cours du co-compostage, la teneur totale en lments traces
mtalliques (ETM) change. Le Pb diminue vers la fin de co-compostage et passe de 123,9
80,1 mg/kg et de 136 127,5 mg/kg et Cd diminue de 1,4 0,84 mg / kg et de 1,25 1mg/kg,
respectivement, pour le mlange A et B (Figure 12a, 12b). Cette diminution est
essentiellement constat durant de la phase thermophile peut tre le rsultat de la lixiviation
de ces mtaux par l'eau produite lors de la dgradation de la matire organique et par
lessivage lors de larrosage

des andains. D'autre part, les changements dans les

caractristiques physico-chimiques tels que le pH, CEC, NH4+, NO3- influence la


solubilisation du ETM (Hooda et Alloway, 1993; Amir, 2005). Par et al. (1999), ont montr
que la baisse du taux total des ETM et le taux de certaines de ses formes est ncessairement
lie une dcomposition de matires organiques au cours de la phase thermophile. Comme
cette diminution peut tre lie l'effet de la fraction minrale du compost, les analyses de
diffraction RX a montr que le compost est riche en carbonate ce qui peut contribuer la
prcipitation du ETM. Singh et al. (2004), ont montr que les ETM prcipitent et deviennent
immobiles en prsence des carbonates. Businelli et al. (1996) ont montr que la concentration
de plomb dans le sol diminue lorsque les SO42- et PO43- augmentent. En gnral, les ETM sont
immobiliss par la matire organique (Businelli et al., 1996). Le phnomne d'adsorption de
la matrice organique peut intervenir pour diminuer la concentration des ETM. Lhumus form
au cours de la phase de maturation, peut jouer un rle important en tant qu'agent chlateur des
ETM, ce qui peut diluer le contenu de ces ETM, le mme phnomne a t dmontr pour les
HAP par (Hafidi et al., 2008.); une partie de ces ETM peut tre incorpor dans les tissus
99

Partie I

microbiens. La teneur en Chrome (Cr) a augment vers la fin du processus de co-compostage.


Nanmoins cette valeur de Cr ne dpasse pas les normes d'utilisation de boues. A la lumire
de ces donnes, les teneurs totales en mtaux lourds (Pb, Cd et Cr) dans le compost final est
infrieure celle de la boue active toute seule, en raison de leffet de dilution de dchets du
palmier. Aprs 6 mois de co-compostage de dchets de boues actives-dchets de palmier, les
teneurs en ETM rpondent aux normes dutilisation (AFNOR, 1993) et nos composts sont
classs dans la catgorie A. Par consquent, ils peuvent tre utiliss dans l'agriculture comme
amendement pour les sols sans risque de contamination du systme sol-plante.

300

300

250

250
0 mois

0 mois

200
1 mois

150

6 mois

mg/kg

mg/kg

200

1 mois

150
6 mois

100

100

50

50

0
Pb

Cr

Cd

Pb

Cr

Cd

Figure 12: La teneur totale en mtaux (Pb, Cr, Cd) pendant le processus de co-compostage
des mlanges A(a), et B (b)

5. Analyses statistiques
Les rsultats de l'ACP appliqu entre les paramtres physico-chimiques lors du cocompostage pour la quasi-totalit des informations ou de la variabilit (la perte de
l'information suite la simplification par la rduction du nombre de facteurs ou de
composants qui est trs faible). La premire composante, (PC 1) explique 73,95%; 76,54% et
le second composant (PC 2) explique 23,96%; 21,45% de la variabilit entre les profils des
paramtres physico-chimiques, respectivement pour le mlange A et B. La projection sur le
plan de ces variables pour les deux mlanges, en termes, de deux composants principaux (I et
II) (Figure 13a, 13b), montre l'affinit de variables selon chaque axe dACP. Les tracs des
composantes principales sont diviss en deux domaines inversement corrls. Le premier
100

Partie I

reprsente les paramtres (C/N, COT, NH4+/NO3-) qui sont positivement corrls. Le
deuxime domaine regroupe les paramtres (taux dcomposition (DEC), teneur en cendres
(Ash), le pH et NTK), qui ont tendance augmenter vers la fin de co-compostage.
Ces rsultats expliquent clairement la relation entre ces diffrents paramtres physicochimiques lors du co-compostage.

Figure 13: Diagramme de composante principale (ACP) des paramtres physico-chimiques


des mlanges A (a), et B (b)
6. Conclusion
La biotransformation de substrats organiques de boues actives de la station dpuration des
eaux uses (Marrakech) mlanges avec les dchets ligno-cellulosiques (palmier dattier), par
le biais de la filire de co-compostage selon deux proportions: mlange A: (1/3 boues + 2/3
dchets de palmier) et le mlange B: (1/2 boues + 1/2 dchets de palmier) a t value par
diffrentes analyses physico-chimiques et spectroscopiques. Aprs six mois de cocompostage, les composts finaux prsentent un rapport C/N autour de 10, un rapport NH4+ /
NO3- <1 et un pH voisin de la neutralit. Le taux de dcomposition de substrat de compostage
est de l'ordre de 40,7% et 40 %, respectivement pour le mlange A et B. Cette
biotransformation est le rsultat d'une activit microbienne intense qui a abouti une
lvation de temprature d'environ 65C pendant la phase thermophile, ce qui permet
d'hyginiser le compost en liminant les micro-organismes pathognes.
Les analyses spectroscopie FTIR rvlent une rduction relativement importante des
structures aliphatiques, caractrises par les bandes 2964, 2922, et 2850 cm-1 par rapport des
structures aromatiques 1514, 1426, et 1386 cm-1 qui ont enrichi le compost. La diminution des

101

Partie I

composs aliphatiques est en fonction de l'augmentation du degr de polymrisation


(CAH/CAF) qui explique laromatisation des acides humiques, et refltent lvolution du
processus dhumification avec une augmentation de lordre de 60% des substace humiques, et
une augmentation de degr de polymrisation de 62% et 99% respectivement pour le mlange
A et B. Les DRX obtenus prsentent une srie de pics de diffraction bien dfinis qui
correspondent des phases solides majoritairement bien cristallises, et un bruit de fond dont
la forme indique la prsence de phases mal cristallises. La matrice minrale contenue dans
les chantillons est majoritairement composes de silice, et de calcite, avec prsence
galement de quartz et de muscovite. Ce rsultat montre aussi que les chantillons prlevs
diffrents stades de co-compostage semblent prsenter une composition minrale trs proche.
Lanalyse par spectromtrie FTIR montre que la rgion 3500-3280 cm-1 est essentiellement
caractristique des molcules deau. La contribution de la matrice minrale au spectre IR du
co-compost, par les bandes, intenses, larges et mal rsolues, apparaissant dans cette rgion
masque lempreinte de la matire organique. Nanmoins, cette rgion est indicatrice de la
matire organique susceptible dinteragir avec les molcules deau provoquant ainsi les
dplacements des OH caractristiques de ces molcules. Elle indique aussi le caractre
hydrophile de la matire organique. Cette rgion 3500-3280 cm-1 peut renseigner sur les
interactions entre la matire organique et les molcules deau mais ne peut fournir que des
informations trs limites sur la composition de la matire organique contenue dans le
compost. Quant la rgion 1200-1000 cm-1, elle caractrise en particulier la silice apporte
par la boue. La bande fine et intense situe 1035 cm-1 attribue au mode Si-O. Avec
uncoefficient dextinction molaire important, cette bande fine relativement intense (1035 cm1

) est souvent releve sur les spectres FTIR. Son profil et sa position insensible au traitement

thermique sont en faveur de son utilisation comme rfrence interne pour des tudes semiquantitatives lors de lvolution de la matire organique lors du co-compostage.
Lensemble des analyses confirment la stabilit, la maturit et lhyginisation des composts
finaux, ainsi que leur innocuit en termes dETM totaux, ce qui ouvre la voie leur pandage
agricole.
En raison, de lintrt de la composition des substrats initiaux (dchets du palmier et boues) et
/ou des composs organiques qui rsultent de lactivit microbienne et leurs impacts sur
lvolution du processus du co-compostage et sur la qualit des composts finaux, il nous
parait indispensable, dindentifier et suivre le devenir de ces composs au cours du cocompostage, en particulier, la fraction lipidique, les composs ligneux et les stroides.

102

Partie I

Chapitre 2: Evolution des esters mthyliques dacides gras (FAMEs) au


cours du co-compostage

1. Introduction
La biodgradation de la matire organique par les microorganismes est le pilier de la
transformation des dchets organiques au cours du compostage. La biomasse microbienne
peut tre value par les mthodes de dnombrement, de dosage dATP, de mesure dactivit
enzymatique, et de mthode physiologique (Mathur et al., 1993). Lutilisation des biomarqueurs pour suivre lvolution des microorganismes au cours du compostage est une
approche qui permet de traduire un signal biochimique spcifique dune origine ou dun
processus dvolution physico-chimique ou biologique (Vivas et al., 2009). Lanalyse des
lipides (acides gras) reste une mthode fiable pour dterminer indirectement, sans la mise en
cultures des microorganismes, des communauts microbiennes durant les diffrentes phases
de compostage (Dinel, 1996, Steger, 2003). Deux approches peuvent tre utilises pour
valuer les lipides microbiens: les analyses des phospholipides acides gras (PLFAs) et des
esters mthyliques dacides gras (FAMEs) (Steger, 2003). La majorit des tudes se sont
bases sur les analyses des phospholipides (PLFAs) (Forstegard et Baath, 1996; Steger, 2003;
Barje et al., 2008; Hachicha et al., 2009, Amir et al., 2010). Lapproche de dtermination des
acides gras par la pyrolyse en prsence dhydroxyde de ttramthylammonium couple la
chromatographie en phase gazeuse et la spectromtrie de masse (TMAH-Py-GC-MS) est
utilise pour donner plus de dtails structuraux partir de faibles quantits dchantillons. De
nombreux auteurs (Poerschmann, 2007; Fukushima, 2009; 2011 ; Fujisawa, 2012), ont utilis
cette mthode pour la dtermination des structures des substances humiques des composts. De
mme, Grasset et al. (2002), ont utilis la mme technique pour la dtection des composs
polaires chaines longues comme les acides gras. Lanalyse des FAMEs totaux semble
apporter davantage de prcision sur la spciation des lipides. Les FAMEs indiquent la
composition des drivs la fois des cellules vivantes et les cellules mortes, et de toutes les
catgories de formes de vie. Par consquent, cette mthode ne donne pas de discrimination
entre les acides gras provenant de lipides membranaires (PLFAs) et les lipides de stockage,
les lipides neutres (NLFA). Le contenu et la composition de la membrane des cellules
bactriennes (PLFA) vivantes est relativement constant sur une large gamme en fonction des
conditions; et les NLFAs sont rapidement dgrads aprs la mort de la cellule (White, 1979;
Vestal, 1989; Amir et al., 2008). Lapproche danalyses des FAMEs peut apporter davantage
103

Partie I

dindications que les PLFAs. Dailleurs, il a t dmontr par Klamer et Baath (2004), que les
lipides de rserve semblent plus sensibles aux variations du milieu (conditions de croissances
et le rapport C/N) par rapport les PLFAs. Baath (2003), a montr que lajout dun substrat
riche en carbone dans le sol peut augmenter 10 fois les lipides de rserve fongiques, aprs
quelques jours dincubation, sans changer la teneur en phospholipides.
Lobjectif de ce chapitre est de suivre lvolution des acides gras sous forme desters
mthyliques par TMAH-Py-GC-MS, afin de dterminer chaque groupe des communauts
microbiennes (bactries, champignonsetc) et leur volution au cours du co-compostage de
boues de STEP-dchets du palmier.
2. Matriel et Mthodes
2.1. Extraction des lipides totaux
Les lipides sont extraits par un mlange de solvants dichloromthane/mthanol
(CH2Cl2/MeOH) (2:1 v/v) avec un extracteur automatique (speed extractor, Buchi). 5g
dchantillon lyophilis sont placs dans une cellule chauffe 80C, pendant 5 min,
lextraction seffectue en contact avec le solvant sous une pression dazote de 50 bars. Trois
cycles dextraction ont t raliss. A lissu des 3 cycles dextraction, les phases organiques
sont recombines et le solvant est vapor sous vide (20 mmHg) laide dun rotavapor
Buchi. La quantit de lipides extraite est exprime en ppm (mg de lipides par kg de compost
lyophilis).
2.2. Thermochimiolyse analytique (TMAH-Py-GC-MS)
L'chantillon lyophilis et broy (0,5 mg) est plac dans une cupule en inox en prsence
dhydroxyde de ttramthylammonium (TMAH, 4l) en solution dans le mthanol (50/50
v/v), la pyrolyse est ralise 600C pendant une minute (source : 220C, linterface : 280C,
rapport de division 100/1). Un courant d'Hlium (dbit constant : 1ml/min, pression en
fonction de temprature) entrane les produits de pyrolyse vers le chromatographe en phase
gazeuse coupl un spectromtre de masse.
La pyrolyse des composts en prsence dhydroxyde de ttramthylammonium (TMAH)
permet dobserver les acides gras sous forme mthyle. Ils sont ainsi beaucoup mieux dtects
que sous leurs formes initiales. En effet, cette drivation in situ permet daugmenter la
volatilit des produits de pyrolyse en diminuant leur polarit. De plus, lacclration du
transfert des produits la colonne du chromatographe limite la possibilit de dgradation
thermique (Ribechini et al., 2011). Les esters mthyliques ont un coefficient de rponse
104

Partie I

suprieur celui des acides gras du fait de la grande stabilit des fragments forms en
spectromtrie de masse. La pyrolyse est effectue l'aide d'un pyrolyseur Frontier Lab (EGA
PY 3030D), quip dun passeur dchantillons. Le pyrolyseur est coupl un
chromatographe en phase gazeuse et un spectromtre de masse quadrupolaire (ionisation par
impact lectronique 70 eV) Shimadzu (GCMS QP2010 Ultra). Le pyrolyseur est constitu
dun micro-four en cramique directement reli linjecteur du GC/MS. La sparation des
composs en GC est ralise sur une BPX (SGE) colonne capillaire (30 m de long, 0,25 mm
de diamtre, 0,25 microns d'paisseur de phase). La temprature de la colonne est
programme de 60 300 C 5 C. min-1 et maintenu 300 C pendant 30 min. Les
pyrogrammes sont exploits l'aide du logiciel GC-MS solution Shimadzu. Les composs ont
t identifis sur la base de leur temps de rtention en GC et par comparaison de leurs spectres
de masse avec les normes et les donnes de la littrature.
Labondance relative Pi de chaque produit de thermochimolyse a t calcule partir du
rapport entre lair de pic de chaque produit par rapport la somme de tous les pic identifis
dans le pyrogramme (Ayuso, 1996 ; Amir et al., 2010):
Pi =

2.3. Analyses statistiques


Lvolution de FAMEs au cours de co-compostage a t tudie en appliquant lanalyse en
composantes principales (ACP) et la mthode de classification (hirarchique) cluster. LACP
a t applique sur la matrice de corrlation entre les variables FAMEs. Les traitements
statistiques ont t raliss grce au logiciel SPSS win version 10.
3. Rsultats et Discussion
3.1. Evolution des lipides totaux
Le niveau des lipides extraits au cours du co-compostage montre une diminution significative
avec un taux dabattement de lordre de 43% pour les deux mlanges A et B, aprs six mois
de co-compostage (Tableau 1). Cette diminution est en accord avec plusieurs travaux sur le
compostage (Ait Baddi et al., 2004; Cunha-Queda et al., 2007; Abouelwafa et al., 2008; Barje
et al., 2008). Cette dgradation est le rsultat de loxidation microbienne des composs
lipidiques. Laction des microorganismes sexerce sur des formes variables de lipides et
diverses substances voisines caractristiques des tissus de protection des vgtaux suprieurs
105

Partie I

(cires, cutine et subrine). Lhydrolyse des acides gras est dtermine dans des milieux bien
ars, assez humides o les conditions sont favorables aux microorganismes varis (bactries,
actinomyctes, et champignons) spcifiquement pendant la phase thermophile (Gea et al.,
2007). Diffrents travaux (Saviozzi et al., 1987; Dinel et al., 1996 ; Ait Baddi et al., 2004 ;
Cunha-Queda et al., 2007) ont montr que la stabilit et la maturit des substrats sont lies la
concentration des lipides dans le milieu. Golod (1968), a montr que les lipides affectent les
proprits physiques du substrat. Ait Baddi et al. (2004), ont montr une corrlation entre
laugmentation de lindice de germination et labattement des phnols et des lipides.
Tableau 1: Evolution des lipides totaux au cours du co-compostage des mlanges A et B
Mlanges
A
B

Stade initial (mg/kg)


87713

Stade final (mg/kg)


50573

74960

42146

Taux dabattement

43%

3. 2. Identification et suivi des FAMEs par TMAH-Py-GC-MS, au cours du cocompostage


3.2.1. Evolution de FAMEs
Les pyrogrammes (Figure 1) montrent une diversit importante des chantillons de compost
de boues-dchets de palmier diffrents stades, en termes de teneurs relatives des FAMEs.
Daprs lanalyse par le logiciel GC-MS Solution Shimadzu des chromatogrammes Total
Ionic Curent (TIC) et Single Ion Monitoring (SIM M/Z = 74 ion), nous avons pu identifier les
diffrents types des FAMEs suivant (C6:0; C12:0; C14:0; C15:0; i(iso) C15:0; a(anteiso);
C15:0; C16:0; aC16:0; C17:0; iC17:0; aC17:0; C18:0; C18:19c; C18:17c; C20:0; C22:0;
C23:0, C24:0 et C26:0) avec leur temps de rtention et leurs abondances relatives (Tableau
2a, 2b). Il en ressort une identification de diffrentes familles de FAMEs parmi lesquelles les
acides gras saturs, insaturs, branchs iso et anteiso et dont le comportement est tributaire
des phases de co-compostage (phase de stabilisation et phase de maturation) et les conditions
du milieu (tempratures et lactivit des microorganismes, principalement des bactries et des
champignons). Daprs la littrature en matire du compostage (Hellman et al., 1997, Baath,
2003) les acides gras saturs peuvent provenir dorigine vgtale, animal et/ou bactrienne ;
dans notre cas de co-compostage les FAMEs C6:0; C12:0, C14:0; C16:0; C18:0; C20:0;
C22:0; C23:0; C24:0; C26:0; sont dorigine non spcifique peuvent tre dorigine vgtale,
animale, comme dorigine bactrienne. Les FAMEs C15 :0 et C17 :0 sont dorigine
106

Partie I

bactrienne non spcifique ; et les FAMEs branchs iso, antieso i,C15:0 ; a,C15:0 ; a,C16:0;
i,C17:0 ; a,C17:0 ; sont dorigine bactrienne principalement Gram-positif (Steger et al.,
2003, Amir et al., 2010), tandis que les FAMEs C15:0, C17:0 sont des indicateurs des
bactries non spcifiques, et les insaturs en C18:1 sont dorigine des bactries
spcifiquement des Gram-ngatif (Bastida et al., 2008; Venkata-Ramana et al., 2010).

Figure 1: Pyrogramme TIC et SIM (Single Ion Monitoring) m/z= 74 du stade initial du cocompostage
Tableau 2a : Abondance relative (%) des acides gras au cours de co-compostage du mlange
A dtermine par TMAH-Py-GC-MS
Type de FAME

FAME

RT
(min)

Temps de co-compostage (mois)


0

Phase thermophile

Phase maturation

Saturs (carbone

C6:0

3,17

16,68

12,05

13,22

10,38

7,29

pair)

C12:0

14,3

3,47

3,73

4,41

4,43

2,49

C14:0

16,8

23,17

17,24

20,18

11,9

7,91

C16:0

19,06

15,9

22,23

23,33

27,75

40,51

C18:0

21,09

12,06

8,55

14,5

13,03

C20:0

22,98

2,41

2,26

1,57

2,69

2,87

C22:0

24,67

2,21

2,85

2,5

3,11

2,34

107

Partie I

C23:0

25,49

0,5

0,74

0,63

0,67

0,4

C24:0

26,36

3,41

3,58

3,36

3,71

3,47

C26:0

28,4

2,05

1,8

1,75

2,16

1,39

iC15:0

17,53

2,93

3,11

3,25

2,45

1,59

aC15:0

17,63

4,88

1,74

0,97

0,44

aC16:0

19,05

5,53

3,55

3,66

4,02

6,15

iC17:0

19,71

1,26

1,18

1,01

0,75

0,3

aC17:0

19,81

0,95

0,83

0,72

0,57

0,27

Saturs (carbone

C15:0

17,95

1,09

1,07

0,99

0,97

0,79

impair)

C17:0

20,1

0,92

1,07

0,87

0,9

0,69

insaturs

C18:19c

20,86

4,36

5,42

5,38

4,83

3,61

C18:17c

20,92

2,2

3,13

2,78

3,14

4,37

Branchs

RT: temps de retention a: anteiso; i: iso, c: cis

Tableau 2b: Abondance relative (%) des acides gras au cours de co-compostage du mlange
B dtermine par TMAH-Py-GC-MS
Type de FAME

FAME

RT

Temps de co-compostage (mois)

(min)

Phase thermophile
Saturs (carbone pair)

Branchs

Phase maturation

C6:0

3,17

21,68

23,08

23,25

13,54

8,63

C12:0

14,3

2,7

3,57

3,57

2,75

2,94

C14:0

16,8

24,63

21,98

18,51

11,35

8,94

C16:0

19,06

15,47

17,4

23,53

37,53

46,63

C18:0

21,09

4,99

6,13

8,42

12,17

13,44

C20:0

22,98

0,98

0,93

1,11

1,4

1,52

C22:0

24,67

2,12

2,11

1,85

1,85

1,83

C23:0

25,49

0,79

0,56

0,62

0,45

0,37

C24:0

26,36

3,17

2,67

2,39

2,24

1,95

C26:0

28,4

1,9

1,11

0,83

0,83

0,91

iC15:0

17,53

2,67

3,08

2,71

1,95

1,66

aC15:0

17,63

2,41

2,26

2,08

1,97

1,86

aC16:0

19,05

4,49

5,68

4,19

1,87

0,98

iC17:0

19,71

1,21

1,16

0,52

0,24

aC17:0

19,81

0,83

0,7

0,08

0,13

0,07

108

Partie I

Saturs (carbone

C15: 0

17,95

0,87

1,07

1,36

1,74

1,23

impair)

C17:0

20,1

1,06

0,35

0,25

0,12

0,06

insaturs

C18:19c

20,86

6,01

0,54

1,92

3,75

3,37

C18:17c

20,92

1,88

5,52

1,93

3,74

3,27

Lvolution des lipides totaux et des FAMEs au cours du co-compostage de boues-dchets


palmier, pour les deux mlanges A et B, montre que les lipides totaux ont subi une rduction
trs significative, avec un abattement de 43% pour les deux mlanges, aprs 06 mois du cocompostage. Cette rduction des lipides totaux est confirme par de nombreux auteurs lors du
compostage de dchets (Ait Baddi et al., 2004; Barje et al., 2008; Amir et al., 2008, 2010).
Cette rduction des lipides totaux est attribue leur mtabilisation par lintense activit des
microorganismes. Ambls et al. (1989) ont montr que les lipides qui ne sont pas directement
extractibles sont moins biodgradables cause de leur adsorption la matire organique. Il
sen suit une augmentations significative des FAMEs au cours du co-compostage, pour les
mlanges A et B. En effet, les FAMEs ont augment de 8,44% 33,3% et de 10,76 43,4%,
respectivement pour le mlange A et B (Figure 2). Cette augmentation des FAMEs est le
rsultat de lactivit microbienne intense enregistre au cours du co-compostage, en
particulier pendant la phase thermophile. Ceci a t confirm par dautres auteurs Barje et al.
(2008), lors du compostage de dchets dhuileries dolive-dchets mnagers et Hachicha et al.
(2009), lors du co-compostage des dchets dindustrie dolive en mlange avec dchets de

50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

50
Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

volaille.

FAME %

40
30
20
FAME%

10

lipids extractibles (%)

lipids extractibles (%)

0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Figure 2 : Abondance relative (%) des lipides totaux et des FAMEs au cours du cocompostage des mlanges A et B

109

Partie I

3.2.2. Evolution des acides gras (FAMEs) saturs chaine carbone paire (chaines
courtes < C20)
Le suivi des acides gras saturs (C6 :0, C12 :0, C14 :0) (Figure 3) par pyrolyse a montr une
diminution trs significative pour les deux mlanges A et B, en particulier pour les acides
C6 :0 et C14 :0. Ceci traduit la dcomposition des acides gras au cours du co-compostage, lie
lintense activit des microorganismes observe au cours du co-compostage. Nanmoins, on
constate une augmentation de lindicateur chimiotaxonomique C12 :0 (acide laurique)
seulement pendant la phase thermophile. Ceci peut tre expliqu par le processus de la
dgradation -oxidation qui rsulte de laction des microorganismes des mlanges.
Lpuisement du milieu en substrat mtabolisable induit une diminution de lactivit des
microorganismes qui saccompagne de faibles teneurs dacides gras saturs, en phase de
maturation.
La diminution de lensemble de ces marqueurs au dbut de la phase de maturation pourrait
tre le rsultat combin de deux phnomnes, lutilisation de ces composs par dautres
groupes microbiens et/ou lincorporation de ces marqueurs dans la structure dacides
humiques. En effet, Fujisawa et al. (2012), ont montr que les acides gras saturs et insaturs
ont t trouvs dans lacide humique extrait partir d'un chantillon de compost. En outre, la
diminution du niveau des acides gras indique la mort de la biomasse aprs la phase active de
co-compostage o les conditions deviennent slectives. Plusieurs auteurs (Herrmann et Shann,
1997; Klamer et Baath, 1998; Eiland et al., 2001) ont observ la dominance des chaines
satures et insatures des acides gras dans la premire phase du compostage (phase de
stabilisation) et leur diminution la fin du compostage (phase de maturation). Selon ces
mmes auteurs, cette diminution dacides gras saturs, sera suivie par une augmentation
dacides gras branchs, ce qui pourrait correspondre au remplacement, lors du processus du
co-compostage, des groupes fongiques et bactriens Gram-ngatif par les groupes Grampositif et les Actinomyctes.

110

30

30

25

25

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

Partie I

20
15

C6:0

10

C12:0

C14:0

20
15

C6:0

10

C12:0

C14:0

0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Figure 3 : Abondance relative (%) des FAMEs C6:0, C12:0 et C14:0 au cours du cocompostage des mlanges A et B

Dans nos conditions exprimentales, la distribution des acides gras initialement domine par
le C14 :0, (Tableau 2a, 2b) a t rapidement remplace, aprs un mois de co-compostage pour
le mlange A et deux mois pour B, par lacide palmitique (C16 :0) qui est la fraction lipidique
la plus dominante par rapport aux autres acides gras identifis. Celui-ci volue de 15,9 % et
15 % 40,5 % et 45 % aprs 6 mois de co-compostage, respectivement pour le mlange A et
B (Figure 4). Alors que laugmentation de C18 :0 est moyenne, de 6% et 5% 12% et 13%

50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

C16:0
C18:0

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

aprs 06 mois de co-compostage, respectivement pour le mlange A et B.

50
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

C16:0
C18:0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Figure 4 : Abondance relative (%) des FAMEs C16 :0, C18 :0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B
111

Partie I

Le profil observ pour les deux acides C16 :0 et C18 :0 en phase maturation, laisse envisager
lhypothse que C18 :0, est mieux incorpor lors de la synthse de substances humiques que
C16 :0. L'augmentation de C16:0, surtout au cours de la phase thermophile, pourrait tre
explique par la dgradation des lipides extractible, et par l'oxydation des autres acides gras
longues chanes tels que C18:0. Klamer et Baath (1998), ont montr que labondance des
longues chaines dacides gras saturs est un indicateur de dveloppement des
microorganismes des tempratures leves. Hellman et al. (1997), ont not que la forte
augmentation de C16 :0 pourrait tre attribue la dcomposition intense de la matire
vgtale et non une augmentation de champignons, alors que Allen et al. (2012), a attribu
laugmentation de C16 :0 la distribution des cyanobactries dans le milieu.
De mme, la spcificit des espces microbiennes et les conditions physico-chimiques du
milieu peuvent influencer la composition lipidique et lexpression de diffrents indicateurs
dacides gars identifis. Il a bien t identifi (Steger, 2003) quau dbut de compostage, les
champignons et quelques Gram-ngatif sont moins abondants. Rhee (2000), quant lui, a
montr que les Gram-ngatif sont thermotolrants et les Gram-positif sont strictement des
thermophiles. La lgre fluctuation que connait C18 :0 durant ce processus du co-compostage
(mlange A) peut tre attribu la disparition et lapparition des communauts bactriennes
responsables de synthse de ce compos et/ou sa dcomposition pendant les stades
intermdiaires. En effet, Steger et al. (2003), ont montr la prfrence de dgradation de leurs
homologues monoinsaturs, lors du compostage de dchets municipaux. Selon les mmes
auteurs, ceci constituerait une preuve dadaptation des microorganismes laugmentation de
la temprature.
Les acides gras saturs (C16:0 et C18:0), sont souvent identifis dans la matire vgtale
(Klamer et Baath, 1998), dans notre cas, ils peuvent parvenir, en partie, du palmier dattier,
substrat structurant utilis lors du co-compostage. C16:0 et C18:0 sont les FAMEs les plus
rpandue dans notre cas, sont utiliss pour constituer les rserves d'nergie. En effet, ils
constituent les acides gras de stockage dans les triglycrides, qui sont les principaux
constituants de la fraction lipidique neutre (Amir et al., 2008). Certains auteurs (Harwood et
Russell, 1984), ont montr que les acides gras chane courte sature, la plus abondante
contenant 16 et 18 atomes de carbone sont non spcifiques et se produisent dans les
membranes cellulaires des micro-organismes et dans les cuticules des vgtaux ou bien dans
les cires. Dautre part Farrington et Quinn, (1973) et Pierson, (1978), ont montr que les eaux
uses domestiques peuvent tre reconnues par l'association de quatre acides gras, le 16:0, 18: l
112

Partie I

(n-9), 18:0 et 18:2 (n-6), qui sont prsents en grandes quantits, ce qui pourra expliquer la
prsence de ces acides gras dans les boues utilises dans notre compostage.
Le rapport starique sur palmitique (C18 :0/C16 :0) augmente pendant la phase thermophile,
ce qui suggre une augmentation des groupes thermotolrants et thermophiles comme a t
mentionn par Barje et al. (2008). Ces rsultats peuvent tre un indicateur de stabilit et de
maturit de composts.
Les FAMEs C18 :1 et les acides gras hydroxyls ont t utiliss pour reprsenter les acides
gras des bactries gram-ngatif. Venkata-Ramana et al. (2010), ont montr que les acides gras
des bactries Gram-ngatif isols dans leur cas dtude sont du type C18:17c. Hoppe et al.
(2011), ont isol des bactries Gram-ngatif caractrises par des acides gras C18:17c et
C18:19c. Dans notre cas dtude, les acide gras C18:19c (mlange A), et C18:17c
augmentent spcifiquement pendant la phase thermophile (Tableau 2a, 2b), ceci explique la
corrlation entre ces indicateurs chimiotaxonomiques des espces thermotolrantes et
laugmentation de la temprature. Albuquerque et al. (2012), ont montr que les acides gras
des bactries Gram-ngatif isols sont domins par C18:17c et C18:17c11-methyl aprs
incubation des tempratures de lordre de 50C. Aprs une incubation des tempratures de
30C, le C18:17c11-mthyl montre une chute. Ceci explique que les acides gras
monoinsaturs sont des indicateurs taxonomiques des microorganismes de la phase
thermophile de co-compostage. Cependant les indicateurs hydroxyls sont convertis en
mthoxyls comme il a t montr par Poerschmann et al. (2005). Del Rio et Hatcher (1998),
ont montr que les sites hydroxyls sont transforms en mthyl thers par TMAH.
3.2.3. Evolution des acides gras linaires et branchs en C15 :0 et C17 :0 FAMEs
Les acides gras bactriens (C17:0) subissent une diminution au cours du co-compostage pour
les mlanges A et B (Figure 5). Les plus grandes teneurs en C17 :0 sont observes pendant la
premire phase du co-compostage (phase thermophile). Steger et al. (2003), ont observ une
allure similaire pendant la phase thermophile.

113

1,5

1,5

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

Partie I

0,5

1
C15:0
C17:0

0,5

C15:0
C17:0

0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Figure 5: Abondance relative (%) des FAMEs C15 :0, C17 :0 au cours du co-compostage des
mlanges A et B

C15:0 qui peut tre dorigine microbienne a aussi diminu au cours du co-compostage, ce qui
a t confirm par (Kogel-Knabner, 2002). Les C15 :0 peuvent tre pigs dans la structure de
substances humiques ou rticuls par les liaisons ester. Le fait que les substances humiques
augmentent, au cours du co-compostage, pourra induire une augmentation de la capacit de
rtention des acides gras. De mme, ces acides gras peuvent tre rutiliss par les
microorganismes du milieu, comme source de carbone. Les valeurs leves de C15 :0 au
dbut de co-compostage (Figure 5) peuvent tre expliques par lorigine microbienne, en
phase de tempratures leves, savoir les microorganismes thermotolrants et thermophile
(Adiguzel et al., 2009). Selon Oleary (1988), la prsence de C15 :0 et C17 :0 est considre
comme indicateur de prsence des Bacillus thermophiles. La variation de la teneur de C15 :0
persiste jusquau 3me mois de co-compostage du mlange B, ce qui explique la prsence
constante et en abondance du groupe responsable de synthse de ce compos au niveau du
mlange B, et le prolongement de sa phase de stabilisation.
La diminution des acides gras branchs (i, a) en C17, (indicateurs bactriens) surtout durant la
phase thermophile (Figure 6), indique que ces acides gras naient pas le temps dtre
accumuls dans le milieu et ils pourraient tre rapidement transforms par des mcanismes de
redistribution des molcules et/ou incorpors dans dautres structures tissulaires des bactries,
ou dautres groupes de microorganismes du compostage. Amir et al. (2008), ont montr une

114

Partie I

diminution intense de ces composs durant le compostage, par lanalyse de la fraction des
lipides neutre (NLFAs).

6
i-C15:0

a-C15:0

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

i-C15:0

i-C17:0

a-C17:0

2
1

a-C15:0

i-C17:0

a-C17:0

2
1
0

0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Figure 6: Abondance relative (%) des FAMEs i,a,C15 :0; i,a,C17 :0 au cours du cocompostage des mlanges A et B

Les acides branchs iso- et antiso- (i, a) en C15, C16 et C17, indiquent une origine
bactrienne spcifiquement des bactries Gram-positif (Parkes, 1987; Amir, 2008; 2010).
Daprs dautres travaux (Cahyani et al., 2002 ; Lei, 2000; Steger, 2003; Amir et al., 2008), le
i,C15 :0 est considr comme un indicateur de la croissance des bactries Gram-positif au
cours de la phase de stabilisation de compostage. Dans notre cas, i,C15 :0 a augment durant
la phase thermophile o la temprature enregistre est de 65C (Figure 6), ceci indique la
prsence des bactries thermophiles type Gram-positif dans notre substrat de compostage. La
synthse de ces composs par les bactries gram-positif sest tale sur les deux mois de cocompostage pour le mlange A, cependant pour le mlange B, cette synthse ne dpasse
pas la phase thermophile (un mois).
Les variations du pH (Anderson et Domsch, 1993; Anderson et Joergensen, 1997) et
lpuisement du milieu en composs facilement mtabolisables peuvent en phase de
maturation expliquer la faible activit des bactries Gram-positif.
Selon Baath et Anderson (2003), ces variations peuvent induire des changements de
comportement de ces acides gras (i,C15:0, et i,a,C17:0). En effet, ces auteurs ont mis en
vidence leffet principal du pH sur les acides gras i,C15 :0 et i,a ,C17 :0 (PLFAs), dans les
sols pH acides. Nanmoins dans notre cas de co-compostage aprs la premire semaine, le
pH est rest autour de la neutralit, ce qui explique que dans notre cas le pH est un facteur non
115

Partie I

significatif. Pendant la phase de maturation, les lipides peuvent tre pigs lors du processus
dhumification, ou les fragments d'acides gras peuvent tre lis de manire covalente aux
substances humiques et/ou tre incorpors intgralement dans la structure de substances
humiques. Schulten et

Leinweber (2000), ont propos un modle de structure dacides

humiques avec des vides susceptibles de piger ou lier dautres composs organiques tels
que des glucides, des protines, des lipides ou des lments inorganiques.
Oshima et Miyagawa (1974), ont montr que laugmentation des acides gras branchs,
reprsents par laugmentation de leurs rapports comme aC17:0/aC15:0 et iC17:0/iC15:0 est
en parallle avec laugmentation de la temprature. Dans notre cas, laugmentation du
aC17:0/aC15:0 a t note dans le mlange A; et le rapport aC16:0/C16:0 ainsi le total des
FAMEs branch/saturs (FAMEs branchs sur leurs homologues saturs) augmentent pendant
la phase thermophile du mlange B puis diminuent pendant la phase de maturation. Ces ratios
indiquent une augmentation des espces microbiennes, spcifiquement des Gram-positif
tolrants les hauts degrs de temprature pendant la phase thermophile et peuvent donc tre
utiliss comme des indicateurs de stabilisation et de maturation.
3.2.4. Evolution des acides gras chaines longues
Le mode long (C20 au C26) majoritairement pair est dorigine vgtale. Ces indicateurs
proviennent de loxydation des acides gras vgtaux par les microorganismes (Cranwell,
1984). Leurs teneurs, dans notre cas, sont variables au cours du co-compostage, en raison de
leur libration progressive suite la biodgradation des mlanges boues-dchet de palmier.
Les fluctuations observes sont le rsultat combin de diffrents phnomnes qui se
produisent dans le milieu, minralisation, mtabolisation et polymrisation, en fonction de
diffrents stades du co-compostage. Laugmentation de lindicateur taxonomique C20 :0
(acide arachidique) pendant la phase de maturation pour les deux mlanges A et B (Tableau
2a, 2b) peut tre explique par laccumulation de ce compos. Dinel et al. (1996), ont montr
que cet indicateur est un compos rcalcitrant. Ceci explique que les acides gras dorigine
vgtale peuvent apparaitre durant la phase de maturation caractrise par une baisse de
temprature et par une augmentation des actinomyctes et des champignons.
Le substrat initial de co-compostage peut tre influenc par la concentration des
microorganismes, leur prsence et leur viabilit, et aussi par le cycle de vie des
microorganismes (spore, stade vgtatif), leur ge et la phase de latence.
La prdominance pair / impair ou l'indice (CPI : carbon preference index) pour C20-C30 a t
calcul selon la formule suivante : CPI = somme (C20-C30) Pair /somme (C21-C31) impair.
116

Partie I

Cet indice est aussi largement utilis pour diagnostiquer la distribution des lipides dans les
tissus vgtaux (Wiesenberg, 2012) et pour identifier la distribution de la matire organique
rcente biognique et la matires de source anthropique (Zheng et al., 2000; Alves et al.,
2001; Guo et al., 2003).
Dans notre cas, lindice CPI a augment au cours du co-compostage (Figure 7) pour atteindre
des valeurs comprises entre 15 et 25, aprs 06 mois du compostage. Dans notre cas,
laugmentation de (CPI) indique que le caractre vgtal des acides gras est plus marqu ainsi
que le degr avanc de la biodgradation des dchets de palmier base de composs ligneux
et cellulosiques, ce qui peut aussi renseigner sur le degr de maturit des composts finaux.

30

30

25

25

20

20

15

15

10

10
CPI

CPI

0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Figure 7 : Evolution de lindice (CPI) au cours du co-compostage des mlanges A et B

La diversit des microorganismes a t calcule par lindice de diversit de Shannone Ish


selon la relation suivante:
Ish = Pi log2 Pi,

0,5 <

< 4, 5

La diversit totale des microorganismes (Ish tot), a relativement augment la phase de


stabilisation du mlange A, puis diminue vers la fin avec une valeur de lordre de 12,5% pour
le mlange A et 16,7% pour le mlange B. Ish tot diminue pour les deux mlanges, mais il
reste prdominant tout au long du co-compostage dans le mlange A par apport au mlange B
(Tableau 3). Tang et al. (2004, 2007) ont montr que la biomasse et la diversit microbienne
augmente pendant la phase thermophile du compostage et reste leve pendant plusieurs mois
avant de diminuer significativement la fin. Lindice (Ish) de diversit des bactries non

117

Partie I

spcifiques (BNS) a des valeurs constantes tout au long du processus de co-compostage du


mlange A, mais il diminue intensivement dans le mlange B avec un pourcentage de lordre
de 72%. La diversit des microorganismes indicateurs des FAMEs dorigine non spcifique
(ONS) pour les deux mlanges A et B est la diversit la plus abondante dans les deux
mlanges, Ish est maintenu lev durant les trois premiers mois de co-compostage avec une
lgre fluctuation la phase de stabilisation, puis il diminue vers la fin avec une valeur de
lordre de 11,27% et 13,88% respectivement pour le mlange A et B. Pour ces groupes, la
variation de leur indice spcifique peut sexpliquer par la spcificit de ces groupes vis--vis
de la temprature et sous linfluence des paramtres physico-chimiques du substrat comme
lont montr Blanc et al. (1999), ainsi que par lpuisement du milieu en substrats facilement
mtabolisables suite au compostage (Amir, 2005); et peut tre due leffet de la suppression
des agents pathognes, ce qui a t confirm par Hachicha et al. (2009), ou bien la
disponibilit du substrat suite la stabilisation des dchets qui influence le dveloppement des
bactries, comme lont suggr Barje et al. (2008).

Tableau 3 : Indice Shannone-Weaver des groupes de microorganismes identifis


Mlanges

Ish

Ish tot
Ish ONS
Ish BNS
Ish Grampositif
Ish Gramngatif
Ish tot
Ish ONS
Ish BNS
Ish Grampositif
Ish Gramngatif

3,51
2,66
0,99
1,72

Temps de co-compostage (mois)


1
2
3
Phase maturation
Phase
thermophile
3,53
3,43
3,43
2,74
2,66
2,72
0,99
0,99
0,99
1,82
1,76
1,75

3,07
2,36
0,99
1,57

0,92

0,94

0,92

0,96

0,99

3,34
2,52
0,99
1,85

3,27
2,51
0,8
1,8

3,18
2,5
0,86
1,57

3,05
2,36
0,35
1,55

2,78
2,17
0,28
1,39

0,79

0,43

0,99

0,99

La diversit des bactries Gram-positif du mlange B diminue vers la fin du co-compostage


avec un pourcentage de 24,8% par rapport au stade initial, ce groupe de microorganismes est
maintenu constant durant les trois mois du co-compostage du mlange A, avec un pic relatif

118

Partie I

pendant la phase thermophile suivi par une diminution la fin du co-compostage avec 8,7%,
ceci sexplique par une grande diversit bactrienne (Gram-positif) dans le substrat initial des
boues. Plusieurs auteurs (Kato et Miura, 2008 ; Amir et al., 2008; 2010), ont montr une
augmentation de lindice de diversit des acides gras phospholipidiques des Gram-positif
pendant la phase thermophile du compostage, et ils ont attribu la croissance de ce groupe des
bactries la concentration des lments dgradables. Ceci peut expliquer que laugmentation
des Gram-positif pendant la phase thermophile, est favoris par la richesse de nos substrat
(boue-dchet vert) en composs facilement mtabolisables.
4. Analyses statistiques
Les rsultats de (ACP) entre les esters mthyliques dacides gras FAMEs au cours du cocompostage pour les deux mlanges sont illustrs dans la Figure 8.
Pour les deux mlanges: le pourcentage de la variance dpasse 86% (1er) et 89% (2me) donc
lACP dans les deux cas rsume la presque la totalit de linformation ou de la variabilit avec
deux composantes seulement (la perte de linformation suite la simplification par la
rduction du nombre de facteurs ou composantes est trs faible).
La composante principale ACP, est dtermine selon deux composantes (1 et 2), ces deux
composantes dterminent 86,24% de l'ensemble des informations pour le mlange A et
89,42% pour le mlange B avec un taux de variabilit entre les FAMEs de lordre de 60,19%
et 70,59% pour la composante 1, et de 26,05% et 18,83% pour la composante 2,
respectivement pour le mlange A et B (Figure 8). Le domaine III du mlange A est
inversement corrl par rapport aux domaines I et II (Figure 8), qui reprsentent une
corrlation proche entre eux. Le domaine I regroupe les FAMEs dorigine bactrienne (Grampositif) (i,C15 :0 ; a,C15 :0 i,C17 :0 ; a,C17 :0), les FAMEs des bactries non spcifiques
(C15 :0 ; C17 :0) et les FAMEs dune origine non spcifique (ONS) (C6 :0 ; C14 :0) ;
lanalyse de ACP selon la composante 1 (60,19%) montre que ces groupes sont positivement
corrls (des valeurs plus proches de 1), les variables du domaine II regroupent les FAMEs
dorigine bactrienne Gram-ngatif C18 :1, des FAMEs ONS (C12 :0, C23 :0, C26 :0) qui
sont aussi positivement corrls entre eux.

119

Partie I

Figure 8: Diagramme de composante ACP (a, b) des FAMEs des mlanges A(a) et B(b)

Les composs du domaines III (C16 :0, a,C16 :0, C18 :0, C18 :1, C20 :0) sont inversement
corrls aux variables de domaine I et II par rapport la composante 1. Ceci explique bien la
relation entre ces diffrents groupes.
Le domaine II du mlange B est inversement corrl par rapport au domaine I. Le domaine I
du mlange B inclus les FAMEs dorigine bactrienne (Gram-positif) (a,C15 :0, i,C15 :0
i,C17 :0 ; a,C17 :0, a,C16 :0), les FAMEs dorigine non spcifique (C6 :0, C14 :0, C22 :0,
C23 :0, et C24 :0) et une seule variable des bactries non spcifiques (C17 :0); lensemble de
ces groupes sont hautement corrls entre eux selon la composante 1 (70,59%). Les variables
du domaine II qui inclus les FAMEs dorigine non spcifique (C16 :0, C18 :0, C20 :0) et une
seule variable C15 :0 dorigine des bactries non spcifiques se trouve loppos de celles de
domaine I. Ceci explique une relation entre les groupes de chaque domaine et qui diffre de
celles des groupes du mlange A.
La projection factorielle (diagrammes des observations) de ces variables sur le plan en termes
des deux composantes principales (1 et 2), prsente sur le graphique (Figure 9) montre
laffinit des variables selon chaque axe (1 et 2).

120

Partie I

Figure 9: Diagramme des projections factorielles (1 et 2) des FAMEs des mlanges A(a) et
B(b)

Le stade 0 du mlange A est inversement corrl avec le stade 6 mois selon Axe 1, ce qui
explique la diminution vers la fin des FAMEs notamment pour (a,C15 :0, i,C15 :0 i,C17 :0 ;
a,C17 :0, C6 :0 et C14 :0 ) qui ont prsent des valeur leves au stade initial. Ce dernier est
aussi inversement corrl avec le stade 3 mois (selon laxe 2) ce qui est expliqu par le FAME
i,C15 :0 qui reprsente une valeur faible au stade initial puis il augmente durant le stade 3. Le
stade 1 et 2 mois ont mme projection par rapport laxe 1 et sont inversement corrl par
rapport au stade 6 selon laxe 1; ce rapprochement est confirm par le FAME C16 :0 qui est
hautement corrl avec le stade final (six mois). La corrlation entre les diagrammes ACP et
diagrammes des observations du mlange B (Figure 9), montre que le stade initial se trouve
loppos (selon laxe 1) des deux stades finaux ; il reprsente une corrlation inverse par
rapport aux derniers stades 3 et 6 mois; ces derniers ont des valeurs plus proches entre eux
selon axe 1. Ces rapprochement sont confirms selon les analyses ACP par la diminution des
FAMEs du domaine I (C6 :0 et C14 :0, a,C15 :0, i,C15 :0 i, a,C16 :0, C17 :0 ; a,C17 :0,
i,C17 :0, C22 :0, C23 :0 et C24 :0) et laugmentation du FAMEs du domaine II (C15 :0,
C16 :0, C18 :0, et C20 :0) vers la fin. Le stade 0 et le stade un mois ont mme variabilit
selon laxe 1.

121

Partie I

La corrlation entre les deux diagrammes ACP et diagrammes des observations des deux
mlanges (Figure 10) rvle une diffrence entre le mlange A et le mlange B.

Figure 10 : Diagramme des projections factorielles (1 et 2) des mlanges A et B

Les stades initiaux des deux mlanges A et B se trouvent sur mme point, ils ont une mme
corrlation sur laxe 1 aussi bien sur laxe 2 (Figure 10), ces deux stades sont inversement
corrls avec les stades finaux de 6 mois qui se trouvent loppos selon laxe 1. Les deux
derniers stades (6 mois) reprsentent une mme variation mais avec une diffrence entre les
deux mlanges A et B. Le stade un mois (phase thermophile) prsente mme variation selon
laxe 1 sauf que le stade 1 du mlange A des valeurs leves par rapport au stade du
mlange B. Les stades deux et trois mois sont inversement corrls selon laxe 1 ce qui rvle
une diffrence entre les deux mlange A et B.
Ces approches pour les deux mlanges A et B sont aussi confirms par la mthode
classification (hirarchique) cluster des observations et des variables (Figure 11) qui montre
une corrlation entre les groupes FAMEs (Gram positif, ONS) avec une lgre diffrence
entre les deux mlanges A et B. Le FAME C16 :0 selon analyse cluster confirme la haute
corrlation avec les stades finaux (six mois).

122

Partie I

Figure 11 : Dendrogrammes des variables FAMEs pour les deux mlanges A et B


L'analyse typologique par cluster confirme les analyses avec ACP en ce qui concerne les
relations entre les FAMEs en fonction de leurs profils au cours du co-compostage. Analyse
cluster montre une corrlation entre les FAMEs branchs qui sont regroups avec les
composs du premier dendogramme (a,C15 :0, i,C15 :0 i,C17 :0 ; a,C17 :0) et les FAMEs
(C6 :0, C14 :0) qui sont regroups dans un deuxime dendogramme. Cette analyse montre
aussi que C16 :0 connait une forte variation au cours du co-compostage.
5. Conclusion
Lanalyse des composs organiques au cours de la biotransformation des boues-dchet de
palmier pendant six mois par la thermochimiolyse analytique (TMAH-Py-GC-MS) permet de
suivre lactivit microbiologique du milieu diffrentes stades de co-compostage. Les
rsultats ont mis en vidence que les lipides totaux diminuent avec un taux dabattement de
43% pour les mlanges A et B. Les diffrentes familles de biomarqueurs taxonomiques
(FAMEs) identifies sont les acides gras saturs, insaturs, branchs iso et anteiso et dont le
comportement est tributaire des phases de co-compostage (phase de stabilisation et phase de
maturation). Les FAMEs indicateurs des bactries Gram-positif (caractrisant les phases
123

Partie I

thermophiles) ont diminu vers la fin de co-compostage, les indicateurs taxonomiques des
bactries non spcifiques, et les indicateurs des groupe dorigine non spcifique (ONS)
lexception de FAMEs C16 :0 et C18 :0 qui ont connu une augmentation vers la fin du cocompostage pour les deux mlanges A et B. laugmentation des rapports C18 :0/C16 :0 ;
a,C17 :0/aC15 :0 et aC16 :0/C16 :0 pendant la phase thermophile est un indicateur de
stabilisation et maturation des substrats de co-compostage. La maturit du compost final
saccompagne aussi dune augmentation de lindice CPI, ce qui met en vidence
lenrichissement du milieu en FAMEs dorigine vgtale et qui rsultent de lattaque des
composs rcalcitrants ligno-cellulosiques. Le profil de FAMEs a permis de caractriser les
spcificits de chaque phase de compostage et a permis didentifier les structures spcifiques
de la communaut qui caractrise les composts matures.

124

Partie I

Chapitre 3: Evolution des composs ligneux au cours du co-compostage

1. Introduction
Les effets des composts sur le systme sol-plante sont gnralement attribus aux lments
fertilisants (N, P, K.) mais aussi aux diffrents composs organiques humiques et non
humiques dont les teneurs varient en fonction des conditions du compostage et de lorigine
des matires compostes (Mustin, 1987). La fraction non humique des caractristiques
chimiques complexes dont la majorit des composs provient des rsidus de constituants
organiques des vgtaux, animaux et microbiens. Ces composs sont retrouvs souvent dans
les boues et les dchets verts.
La lignine est lun des principaux composs organiques de dchets verts et le plus abondant
biopolymre dans la nature aprs les polysaccharides (Kgel-Knabner, 2002; Marche et al.,
2003). Cette macromolcule est un polymre complexe compos dunits de type
phnylpropane tels que lalcool conifrylique (unit guaiacyle), lalcool p-coumarylique et
lalcool sinapylique (unit syringyle), lies entre elles par une grande varit de liaisons
chimiques, ce qui rend la lignine rsistante la dgradation (Marche et al., 2003). Ce
polymre aromatique intervient dans la rigidit de la paroi cellulaire et rend les plantes plus
rsistantes lattaque des organismes pathognes. Ainsi il est un constituant principal de la
biomasse lignocellulosique, ce complexe form de polymres de lignine, de cellulose et
dhmicelluloses, contient 40-60 % de cellulose, 20-40 % d'hmicelluloses et 10-25 % de
lignine. Les fibres de cellulose peuvent tre troitement lies aux hmicelluloses et la
lignine par des liaisons hydrogne ou des liaisons covalentes, ester ou ther (Kgel- Knabner,
2002). Cependant la structure chimique de la lignine nest pas encore bien rsolue.
Jusqu prsent, la lignine est classe comme une macromolcule tridimensionnelle, dont la
structure est tributaire la polymrisation de sous-units lies entre elles par trois principales
liaisons: les liaisons arylglycrol--arylther qui peuvent reprsenter jusqu 50% des
liaisons, et en moindre proportions les liaisons carbone-carbone et les liaisons
phnylcoumaranes. Ces composs ligneux sont des prcurseurs des substances humiques
(Stevenson, 1982), ils constituent lobjet de la premire hypothse de formation de la
deuxime fraction du compost, la fraction humiques, par le processus dhumification qui
rpond au phnomne de condensation entre acides amins et les composs issus de la
dgradation de la lignine; comme lont montr Waksman (1936) et Piccolo (2002). Cette
fraction humique, issue de la dgradation des composs rcalcitrants du compost dont la
125

Partie I

lignine , est un compos organique stable impliqu dans nombreuses fonctions du sol.
Bresson et al.

(2001), ont montr que lajout du compost, en raison de ces composs

organique apports, joue un rle efficace pour lutter contre la dgradation de la surface du
sol. Les composs organiques contenus dans le compost renforcent aussi la qualit physicochimique et biologique du sol (Pagliai et al., 2004). Tejada et al. (2006), ont aussi montr
que laddition damendements organiques stables permet une remdiation de sols pollus, en
luttant notamment contre la toxicit saline. Guittonny-Larchevque (2004), a montr que
lapplication de compost mature dans le sol pollu est capable de diminuer, court terme, le
stress toxique potentiel quexercent le nickel (Ni) et le zinc (Zn) sur les vgtaux ;

et

amliore long terme la fertilit du sol et favorise le processus de reforestation par


amlioration de la qualit des plantes, et rduire le nombre de maladies occasionnes par les
pathognes issus du sol (Erhart et al., 1999; Cotxarrera et al., 2002). Lhumus form par la
lignine, durant la phase de maturation, peut jouer un rle important comme agent chlateur en
lments traces mtalliques (ETM), cet humus peut dun cot diluer la teneur en ces (ETM) et
dune autre cot peut constituer un apport exogne contrl en lments nutritifs pour les
plantes. Lapport de ces composs organiques de compostage permet de remdier les sols
contamins par les polluants organiques en augmentant la photo-dgradation de pesticides
comme lIrgarol (Breitung et al., 1996, Bruns-Nagel etal., 1998 ; Guittonny-Larchevque,
2004; Amine-Khodja et al., 2006). De plus, ces composs organiques de compost ont un effet
important sur les microorganismes des sols qui jouent un rle important dans le maintien de la
structure et la qualit du sol. En gnral, les qualits dun compost sont tributaires, en partie,
de la matrice humique dont le prcurseur principal est la lignine. Selon Bahri (2008), les
drivs ligneux pourraient tre rapidement adsorbs sur les particules du sol. En raison de leur
proprit chimique rcalcitrante, les drivs ligneux constituent une rserve dans le sol
(Dagley, 1975; Flaig et al., 1975). Le temps de sjour de ces composs rcalcitrants varie
entre 20 38 ans (Rasse et al., 2006; Heim et Schmidt, 2007) avec un temps de sjour
moyen de lordre de 7 ans, ce qui peut constituer un rservoir potentiel de prcurseurs de
substances humiques.
Lobjectif du prsent chapitre est didentifier les molcules et la transformation des composs
ligneux et leurs drivs au cours du co-compostage de boue de STEP et dchet de palmier par
pyrolyse couple la chromatographie phase gazeuse-spectroscopie de masse (Py-GC/MS).
Cette technique est rapide, et sensible la caractrisation des structures des macromolcules
(Leinweber et Schulten, 1999; Kgel-Knabner, 2000; Gonzalez-Perez et al., 2007) savoir

126

Partie I

les composs ligneux et les acides humiques (Fu et Qing, 1995; Chefetz et al., 2002; Fahmi et
al., 2007; Pallo et al., 2011).
2. Materiel et Mthodes
2.1. Py-GC-MS
Les chantillons du compost lyophiliss ont t broys (0,5 mg) puis pyrolyss laide dun
pyrolyseur Frontier Lab (EGA PY 3030 D), quip dun passeur dchantillons. La pyrolyse a
t ralise 600C pendant une minute (source : 220C, linterface : 280C, rapport de
division 100/1). Un courant d'Hlium (dbit constant : 1ml/min, pression en fonction de
temprature) entrane les produits de pyrolyse vers le chromatographe en phase gazeuse
coupl un spectromtre de masse. Le pyrolyseur est coupl un chromatographe en phase
gazeuse et un spectromtre de masse quadrupolaire (ionisation par impact lectronique 70
eV) Shimadzu (GCMS QP2010 Ultra). Le pyrolyseur est constitu dun micro-four en
cramique directement reli linjecteur du GC/MS. La sparation des composs en GC est
ralise sur une BPX (SGE) colonne capillaire (30 m de long, 0,25 mm de diamtre, 0,25
microns d'paisseur de phase). La temprature de la colonne est programme de 60 300 C
5 C. min-1 et maintenue 300 C pendant 30 min. Les pyrogrammes sont exploits l'aide
du logiciel GC-MS solution Shimadzu. Les composs ont t identifis sur la base de leurs
temps de rtention en GC et par comparaison de leurs spectres de masse avec les normes et les
donnes de la littrature.
La pyrolyse des composts permet dobserver les composs organiques tels que les composs
ligneux, azots, polysaccharides, hydrocarbure aliphatiques et strodes. Labondance relative
Pi de chaque produit de pyrolyse t calcul partir le rapport entre lair de pic de chaque
produit par rapport la somme de tous les pic identifi dans le pyrogramme (Ayuso, 1996,
Amir et al., 2010) :
Pi =

3. Rsultats et Discussion
3.1. Analyse des pyrogrammes et identification des composs organiques
Les pyrogrammes (Figure 1) montrent une diversit importante des composs organiques
obtenus partir des

chantillons boues /dchets palmier, diffrents stades du co-

compostage par Py-GC-MS, en termes de teneurs relatives.


127

Les principaux composs

Partie I

identifis dans les pyrolysats ont t regroups en cinq grandes catgories (Tableau 1):
composs provenant de la pyrolyse des polysaccharides (PS), composs azots (N), produits
provenant de la lignine (LIG), des composs hydrocarbures aliphatiques (HYD) et les
composs strodes (STR).
La teneur des polysaccharides est globalement infrieure 6 % et le taux de leur
dcomposition est de 50 et 28 %, aprs 6 mois du co-compostage respectivement pour le
mlange A et B. Lanalyse de nos chantillons par pyrolyse a permis didentifier des motifs
furaniques (furanone et furfural). Ces drives sont considrs comme pyrolysat des
polysaccharides (Helleur et al., 1985 ; Pouwels, et al., 1987; Dignac et al., 2005). (Hayes et
al., 1989), ont montr que ces composs de biodgradation sont issue de la fraction
polysaccharidique des vgtaux. Zhao et al., (2012), ont montr la prsence des drives
furaniques (furane et benzofuran) dans la fraction des acides humiques par lanalyse Py-GCMS.
Les teneurs des composs azots est gnralement infrieure 8% avec un taux de
dgradation moyen qui est de 24 et 33 %, respectivement pour le mlange A et B. Parmi les
composs azots identifis, mthylpyrole, benzylnitrile, indole et le mthylindole. Aprs 6
mois du co-compostage, on constate une augmentation de 31% pour le mthyle pyrole et de
13% pour benzylnitrile. Par contre, lindole a diminu de 10%, alors que le mthylindole est
presque constant avec une lgre augmentation durant la phase thermophile. Le mthylpyrole
est connu comme un produit driv des protines (Tsuge, 1985), bien que ce compos
mthylpyrol peut aussi tre driv de la pyrolyse des pigments des chlorophylle (SinningheDamst, et al., 1992). Lindol et le mthylindol, proviennent des protines et des peptides
contenant le tryptophane (Tsuge, et al., 1985), ceci montre la prsence des protines dans
notre compost et qui proviendraient des boues actives utilises. Le benzonitrile est un
produit de pyrolyse (Nierop et al., 2001), qui peut contribuer la formation des acides
humiques (Zhao et al., 2012).
La teneur des strodes est de 30 et 32% avec un taux de dgradations de 68 et 54,5 %,
respectivement pour le mlange A et B. La teneur des hydrocarbures est de 17 et 15%, avec
un taux de dcomposition trs importants de 83 et 75%, aprs 6 mois du co-compostage,
respectivement pour A et B. Les teneurs en composs ligneux sont de 41 % aux stades
initiaux et voisines de 50% aux stades finaux. En tenant compte de la biodgradation dans le
milieu, le taux de dcomposition des composs ligneux est de 27 et 25%, respectivement pour
le mlange A et B, aprs 6 mois du co-compostage.

128

Partie I

Figure 1: Les pyrolysats identifis des composs organiques au cours du co-compostage des
mlanges A et B

Lvolution de la teneur de composs ligneux dpend de lactivit des micro-organismes et du


processus dhumification. Nanmoins, le milieu est complexe travers la diversit des
composs de la biodgradation, ceci il faut rajouter les produits organiques secondaires

129

Partie I

(transforms partir dun produit primaire pyrolys), qui peuvent ragir avec la lignine qui
demeure le prcurseur principal de substances humiques.

Tableau 1: Variation des taux de dgradation des produits identifis par Py-GC/MS au cours

Hydrocarbures

Strodes

polysaccharides

polysaccharides

Composs
Azots

(% valeur initial*)

Composs
ligneux

(% relatif, poid sec)

Hydrocarbures

Taux de dgradation

strodes

Quantit

Composs azots

Composs
ligneux

Temps (mois)

Phase du co-compostage

du co-compostage

Mlange A
0
1
6

Phase
1**
Phase
2***

41,75

6,1

4,36

30,33

17,43

46,38

6,16

4,61

28,91

13,91

17

12,6

22,9

43,5

50,81

7,73

4,17

24,64

12,63

27

24

50

68

83

Mlange B
0

Phase
1**

1
6

Phase
2***

41,65

3,82

32,5

15,01

40,24

5,36

5,7

35,24

13,44

21,5

48,5

15

8,4

26,5

49,12

7,54

3,81

28,39

11,13

25

33

28,2

54,5

75

*Dgradation exprim par rapport la valeur initial (T0) de chaque composs organiques, ** phase 1 : Phase de
stabilisation, *** phase 2 : Phase de maturation.

La dgradation de la lignine dans des conditions arobies est trs variable en fonction des
conditions exprimentales. Lynch et Wood (1985) affirment que la lignine se dgrade
rarement au cours du compostage. Toutefois, Hammouda et Adams (1989) ont mesur des
taux de dgradation de la lignine allant de 17% 53% de lherbe initiale pendant 100 jours de
compostage. Tomati et al. (1995) ont mesur une rduction de 70% de la teneur en lignine
dans du compost de dchets d'olive aprs 23 jours (la phase thermophile), une humidit
entre 65-83%. En revanche, dans une tude d'incubation en laboratoire, Horwath et al. (1995),
ont mesur une dgradation de la lignine de 39% pendant la phase thermophile et 25% au
130

Partie I

cours de la phase msophile lors du compostage de lherbe. Selon Yang et al. (1980),
lincubation en prsence de Phanerochaete chrysosporium, pendant deux semaines 39-40
C, a permis daugmenter le taux de dgradation de lignine de 5,2% 29,8%. Les diffrents
taux de dgradation de lignine ne sont pas seulement attribus aux conditions du compostage
(temprature, humidit et teneur dazote...), mais peuvent sexpliquer, en partie, par lorigine
de la matire vgtale composter. Ladisch et al. (1983), ont montr que la lignine de
gymnospermes est compose d'alcool conifrylique, et celui des angiospermes comme le
palmier dattier que nous avons utilis, est compos d'alcools la fois conifrylique et
sinapylique, et l'herbe est compose de la lignine conifrylique, sinapylique, et p-coumaryl
alcools.
Dans notre cas, le taux de dgradation de la lignine (Tableau 1) est de 8 et 21,5 % pendant la
phase thermophile et de 27 et 25% la fin de phase de maturation respectivement pour les
mlanges A et B. Cette diffrence de dgradation entre les deux phases du co-compostage est
lie aux conditions du milieu, en particulier la prsence dazote, des actinomyctes et des
champignons dcomposeurs. La phase de maturation semble mieux adapte la dgradation
de la lignine. Diffrents auteurs (Mustin, 1987 ; Ait Baddi et al., 2004) ont montr quaprs la
phase de stabilisation, qui est caractrise par lintense activit microbiologique et une
biodgradation des molcules facilement mtabolisables, lpuisement du milieu ralentit
lactivit des bactries et dclenche lactivit fongique ayant la capacit enzymatique
susceptible dattaquer la lignine. Une spcificit dattaque est surtout enzymatique de ces
composs malgr leurs structures complexes, principalement par des champignons arobies
filamenteux et les actinomyctes (Kirk et Farrell, 1987 ; Tuomela et al., 2000). Cependant,
Tuomela et al. (2000), ont rapport que la lignine subit de fortes modifications et dgradations
pendant le compostage. De mme, Kogel-Knabner (2002), a expliqu que la lignine subit une
oxydation graduelle ainsi quune incorporation de groupements carboxyles durant sa
biodgradation. Il en rsulte une dgradation partielle de la lignine, et une libration de
molcules qui constituent, avec dautres molcules issues de la dgradation des composs non
ligneux, des prcurseurs de substances humiques, par des mcanismes de polymrisation qui
demeurent complexes (Piccolo et al., 2000). Le suivi des composs issus de la dgradation de
lignine par Py-GC-MS, permettra certainement didentifier ces composs et dapporter des
informations quant leurs biodgradation, et/ou leurs incorporation lors de la formation des
substances humiques et /ou leurs adsorption par la matrice organique du compost.
3. 2. Evolution des composs ligneux au cours de co-compostage
131

Partie I

Lanalyse des pyrogrammes type (TIC) a montr la prsence de 11 principaux drivs ligneux
(Figure 1, Tableau 2). Ces drivs identifis peuvent tre regroups en deux groupes en
fonction de leurs comportements durant le processus du co-compostage. Le groupe 1 est
compos de 7 drivs (tolune; 2,4-dimthylbenzne; thylbenzne; styrne; 1-thyl-2mthylbenzne; 4-mthylphnol et 2-mthylnaphthalne) dont les teneurs diminuent au cours
du co-compostage. Le groupe 2 est compos de 4 drivs (phnol; benzofuran;
thylmthoxyphnol et dimthoxyphnol), dont les teneurs augmentent au cours du cocompostage.

Tableau 2: Structures molculaires et temps de rtention des drivs identifis par Py-GCMS au cours du compostage de boues de STEP-dchets de palmier
Composs ligneux du
mlange A and B

RT
(mn)

N du
pic

Composs

Tolune

3,97

Alkylbenzne

2,4-dimthylbenzne

5,30

Alkylbenzne

thylbenzne

5,84

Alkylbenzne

Styrne

6,57

Alkylbenzne

Phnol

9,05

phnol

1-thyl-2-mthylbnzne

10,43

Alkylbenzne

4-mthylphnol

11,92

Alkylphnol

Benzofuran

16,41

furane

132

Structures molculaires

Partie I

Ethylmthoxyphnol

19,06

Guaiacyl

2-Methylnaphthalene

19,19

10

Alkylnaphthalene

Dimthoxyphnol

25,76

11

Syringyl

Ces molcules sont des drivs benzniques plus ou moins substitus (mthyl ou thyl), des
drivs hydroxyls (phnols) ainsi que des drivs polyaromatiques (benzofuran, 2mthylnaphthalne) issus de structures vgtales comme la lignine ou les tanins prsentes
dans les dchets de palmier (Macheix et al., 2005). Selon Zhao et al. (2012), les composs
aromatiques drivs de la lignine sont galement des composantes majeures de pyrolysats.
Les drivs phnols peuvent provenir de la lignine dcompose du tronc (Saiz-Jimenez et De
Leeuw, 1987), des drivs d'autres structures, comme les protines, les acides
polycarboxyliques (Bracewell et al., 1980), et des polysaccharides (Wilson et al., 1983).
Selon les mmes auteurs, une grande partie des phnols et mthoxy-phnol proviennent de
biodgradation de la lignine. Le tolune peut provenir de la lignine (Klap et al., 1998), comme
aussi bien que des protines ou dacides amins (Nierop et al., 2001). Fabbri (2001), a montr
que le tolune et le styrne sont librs lors de la pyrolyse, la fois dorigine naturelle et des
polymres synthtiques. Le styrne peut provenir de la lignine mais plus surement des
protines/peptides et des tannins non hydrolysables dgrads (Dignac et al., 2006). Dautres
tudes ont considr le styrne comme le marqueur de dgradation de la lignine (Nierop et al.,
2005). D'autres auteurs (Fabbri, 2001; Junga and Park, 2005; Garca-Pea et al., 2008, Chen
et al., 2013), ont aussi identifi certaines molcules, dans lenvironnement et dans certains
dchets organiques, comme des contaminants, benzne, tolune, thybenzne, et styrne, ceci
peut expliquer que dans notre cas, une partie de ces composs peuvent aussi provenir des
boues de STEP.
Dans nos conditions exprimentales, la diminution des drivs ligneux, aprs 6 mois du cocompostage est de 82,59 et 42,55 % pour 2,4-dimthylbenzne; de 78,59 et 75,93 % pour le 2mthylnaphthalne; de 72,35 et 63,85 % pour le 1-thyl-2-mthylbenzne; de 66,31 et 64,81
133

Partie I

% pour thylbenzne, 24,71 et 20,96 % pour le styrne ; de 17,28 et 26,8 % pour tolune, et
de 3,65 et 12,96 % pour le 4-mthylphnol, respectivement pour les mlanges A et B (Figure
2).

40

Toluen

2,4-dimethylbenzene

30

Ethylbenzene

25
Styrene

20
1-ethyl-2-methylbenzene

15
4-methylphenol

10

2-methylnaphtalene

5
0
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Abondance relative (%)

35

35
Abondance relative (%)

40

Toluene

30

2,4-dimethylbenzene

25

Ethylbenzene

20

Styrene

15
1-ethyl-2-methylbenzene

10
5

4-methylphenol

2-methylnaphtalene

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Figure 2: Evolution de diffrents composs ligneux, ayant diminu par rapport T0, au cours
du co-compostage des mlanges A et B

Cette diminution de taux des drivs ligneux est en partie le rsultat de leur mtabolisation et
biodgradation favorise par les conditions du co-compostage (humidit, temprature et la
prsence des micro-organismes dcomposeurs), pendant les deux principales phases de
compostage (phase de stabilisation et phase de maturation). Bien que la lignine rsiste
lattaque de la plupart des microorganismes, dautres types spcifiques des microorganismes,
sont connus pour avoir un pool enzymatique pour attaquer la lignine et ces drivs dans le
milieu. En particulier certaines souches bactriennes et les champignons qui ont t identifies
pour dgrader la lignine. Des tudes rcentes ont montr que les composs drivs de la
lignine sont rapidement dgrads dans le sol (Gleixner et al., 2002; Dignac et al., 2005).
Dautres auteurs ont montr que quelques espces bactriennes pourraient mtaboliser la
lignine et les composs lis la lignine en composs de faible poids molculaire (Jokela et al.,
1987; Kumar et al., 2001). Ceci peut justifier les taux de diminution des drivs ligneux
observs lors du co-compostage des mlanges A et B. Dans notre cas, le mlange B (constitu
de 50% de boues) a prsent un taux de dgradation de drivs ligneux de 21,5 % en phase de
stabilisation, alors que le mlange A (1/3 de boues) ne prsent que 8%; ceci peut sexpliquer
par lenrichissement du milieu en inoculum bactrien par les boues actives utilises et qui a
134

Partie I

favoris la dgradation des composs ligneux pour le mlange B pendant la phase


thermophile. Raj (2007), a identifi trois souches bactriennes : Paenibacillus, Aneurinilyticus
et Bacille espces d'Aneurinibacillus qui agissent sur la dcoloration de la lignine et la
libration des composs aromatiques de faibles poids molculaires, aprs 06 jours
d'incubation. Au cours de la minralisation de lignine, une partie du carbone peut tre dissoute
dans l'eau (Hofrichter et al., 1999; Steffen et al., 2000; Tuomela et al., 2002), et une autre
partie du carbone, extrmement faible, drivs de la lignine travers son processus de
transformation est incorpore dans la biomasse microbienne (Martin et al., 1980; Stott et al.,
1983).
Les Basidiomyctes et Ascomyctes, sont les principaux dcomposeurs de la lignine dans la
nature (Tuomela et al., 2000). Selon Kirk et Farell (1987). Les champignons grce leurs
activits enzymatiques (ligninolytique) peuvent librer un certain nombre de fragments
aromatiques de faible poids molculaire par des changements oxydatifs et la dpolymrisation
progressive de la lignine. Phanerochaete chrysosporium est un champignon de pourriture
blanche, ayant fait lobjet de nombreuses tudes pour ses capacits de production denzymes
actives dans la dgradation de la cellulose et de la lignine, des tempratures optimales de 36
40C avec un maximum de 46 49C (Mouchacca, 1997). Nakasaki et al. (2009), ont
montr que les actinomyctes thermophiles (Thermobifida fusca) produisent des enzymes
pour la dgradation des composs lignocellulosiques. Les actinomyctes agissent plus
tardivement, ils apparaissent aussi bien lors de la phase thermophile que pendant la phase de
maturation du compostage (Tuomela et al., 2000; Xiao et al., 2011). Garca-Pea et al.
(2008), ont montr la biodgradation du benzne, thylbenzne et tolune dans des biofiltres
base dun champignon filamenteux Paecilomyces variotii CBS115145. Gunsch et al. (2005),
ont montr quExophiala lecanii-corni est capable de dgrader plusieurs composs organiques
y compris l'thylbenzne. Dautres auteurs ont mis en exergue la biodgradation du styrne
par les Pseudomonas sp (O'Leary et al., 2002) et par la souche Rhodococcus pyridinovorans,
utilise pour le traitement des eaux uses (Jung et Park, 2005). Il est trs connu, en matire du
compostage, que la phase de maturation est domine essentiellement par lactivit des
champignons et des actinomyctes, ce qui expliquerait, en partie, les taux de diminution,
observs pendant notre cas en phase de maturation et qui sont de lordre de 27 et 25 %,
respectivement pour les mlanges A et B.
Le groupe des 7 drivs ligneux qui diminuent au cours du co-compostage peuvent tre
classs en deux catgories. La premire catgorie regroupe le 2,4-dimthylbenzne, 2mthylnaphthalne, 1-thyl-2-mthylbenzne et thylbenzne dont le taux de diminution est
135

Partie I

lev (entre 40 et 82%). Cet abattement trs lev laisse avancer lhypothse que ces 4 drivs
sont facilement biodgradables, lors du compostage de boues-dchets de palmier, ou bien sont
facilement transforms en dautres drivs ligneux ayant augment au cours du cocompostage. La deuxime catgorie regroupe le styrne, tolune et 4-mthylphnol dont
labattement est faible moyen et qui est compris de 3 27%. Ceci laisse prdire que ces
drivs sont adsorbs par la matrice organique du compost y compris les substances
humiques, et/ou transforms en dautres drivs qui augmentent au cours du compostage,
et/ou bien ils sont incorpors directement dan la structure des substances humiques. De plus,
la lgre augmentation observe pendant la phase de stabilisation qui est de lordre de 3,4 %
pour le driv 4-mthyphnol (mlange A) et de 4,13% pour le styrne (mlange B) est
attribu aux phnomnes dadsorption-dsorption sur la matrice organique. Des phnomnes
identiques ont t mis en vidence pour les HAPs, lors du compostage de boues de lagunagepaille (Amir et al., 2005) et boues actives-gazon (Hafidi et al., 2008). Chen et al. (2013), ont
tudi les phnomnes dadsorption-dsorption du tolune sur les dchets organiques solides.
Ils ont montr que la matire humique peut former une liaison covalente avec du tolune et/ou
des intermdiaires de la biodgradation du tolune, avec une affinit plus importante pour les
acides humiques par rapport aux acides fulviques. Haas et Kaplan (1985), ont mis en vidence
la liaison acide humique-tolune. Zhao et al. (2012), ont identifi lensemble de ces drivs
lors de ltude des acides humiques par Py-GC-MS.
Pour lensemble de ces 7 drivs (2,4-dimthylbenzne, 2-mthylnaphthalne, 1-thyl-2mthylbenzne, thylbenzne, styrne, tolune, 4-mthylphnol) les teneurs relative (en %)
sont infrieures 11% pour A et B, lexception du tolune qui reste 28,4 et 27,2%, aprs 6
mois du co-compostage, respectivement pour le mlange A et B. Ces quantits de drivs
peuvent correspondre aux drivs incorpors dans les substances humiques, dont les teneurs
sont de 30 et 26 g/kg respectivement pour le mlange A et B, en plus des dbris vgtaux non
composs dans lesquels les drivs ligneux restent intacts. Nanmoins pour le tolune, la
valeur enregistre peut tre explique, par son adsorption par les acides humiques dont les
teneurs sont de 18 g/kg (mlange A) et 13 g/kg (mlange B) en raison de leurs affinits,
comme lont montr Chen et al. (2013). Les enzymes ligninolytiques peuvent galement
polymriser la lignine, en augmentant sa liaison avec les substances humiques (Dec et Bollag,
1994; Hatakka, 2001). Selon plusieurs tudes, la lignine et ses drivs constituent les
prcurseurs ncessaires pour la formation des substances humiques (Tate, 1987; Shevchenko
et Bailey, 1996 ; Amir et al., 2006). La liaison des drivs ligneux avec les substances

136

Partie I

humiques (liaisons covalentes), induit une rsistance la dgradation par les champignons
(Haider et al., 1977 ; Tate, 1987).
Le groupe des 4 drivs ligneux qui augmente au cours du co-compostage est prsent sur la
Figure 3. Ces augmentations sont de lordre de, 257 et 227% pour le phnol, 208 et 287%
pour le benzofurane, 113 et 146% pour thylmethoxyphnol et de 266 et 456% pour le

35

30

30

25

25

Phenol

20

Benzofurane

Dimethoxyphenol

10

Phenol

20

Ethylmethoxyphenol

15

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

dimthoxyphnol, aprs 6 mois du co-compostage, respectivement pour le mlange A et B.

5
0

Benzofurane

15

Ethylmethoxyphenol

10

Dimethoxyphenol

5
0

Temps de co-compostage (mois)


Mlange A

Temps de co-compostage (mois)


Mlange B

Figure 3: Evolution de diffrents composs ligneux, ayant augment par rapport T0, au
cours du co-compostage des mlanges A et B
Ceci peut sexpliquer par une accumulation de ces drivs au fur et mesure de leur libration
suite lattaque partielle de la lignine. Il sen suit lincorporation de ces drivs dans la
structure des substances humiques et/ou adsorbs par celles-ci. Dans notre cas, les teneurs des
substances humiques sont de 17 et 15 g/kg au stade initial, et de 30 et 26 g/kg au stade final,
respectivement pour les mlanges A et B. Lors de lanalyse par pyrolyse diffrents stades, le
pyrolysat senrichi par lensemble des drivs y compris ceux qui sont incorpors ou adsorbs
sur les substances humiques. Zhao et al. (2012), ont identifi lensemble de ces drivs lors de
ltude des acides humiques par Py-GC-MS. Dautres ractions peuvent se produire dans le
milieu et qui permettent la transformation des drivs qui diminuent (groupe de 7) au cours du
co-compostage pour donner naissance aux nouveaux drivs (groupe de 4), ce qui
expliquerait, en partie, leurs augmentations. Les drivs benzniques sont facilement
transforms en phnols par diffrentes oxydases par le biais dune peroxydation partielle du
cycle, leur conversion par des enzymes de type laccase en drivs alkyls ncessitent un
milieu rducteur (Macheix et al., 2005). La production de benzofurane peut tre associe soit
137

Partie I

la diminution du styrne initialement prsent soit une conversion lie la pyrolyse en


phase gazeuse de lchantillon. La prsence prpondrante de composs aromatiques
benzofuran suggre un caractre fortement humifi du matriel organique (Righi et al., 1995).
Dautres auteurs (Guthrie et Pfaender, 1998), ont confirm que certains composs
benzniques sont incorpors en grande partie (43-80 %) la structure de substances
humiques, ce qui en faveur de limplication de diffrents drivs ligneux qui augmentent, au
cours du co-compostage dans le processus dhumification.
Afin dvaluer ces changements structurels produits au cours de la biotransformation de la
lignine et la formation des substances humiques, lindice de la diversit de Shannone Weaver
(Ish) a t calcul selon la relation suivante :
Ish = Pi log2 Pi,

0,5 <

< 4, 5

Avec Pi : abondance relative de chaque driv

Lindice de Shannon Weaver (Ish) reflte le degr de diversit lintrieur du polymre


(lignine) et par consquence des substances humiques. Un indice (Ish) faible dsigne une
diversit et un systme complexe. Plusieurs auteurs (Alcaniz et al., 1983 ; Ayuso et al., 1996)
ont utilis (Ish) pour tudier lorganisation des composs organiques du sol et des acides
humiques. Amir et al. (2006b) lont utilis pour tudier des acides humiques par PyrolyseGC-MS et Amir et al. (2006a) pour les acides fulviques. Ayuso et al. (1996) ont montr que la
faible valeur de (Ish), dtermine partir des donnes de pyrogramme, doit tre le rsultat
dun processus slectif tel que lhumification.
Dans notre cas (Figure 4), lindice Ish (mlange A) est relativement lev au dbut du cocompostage puis il diminue vers la fin de la phase de maturation. Pour le mlange B, Ish reste
faible au dbut du co-compostage, augmente pendant les stades intermdiaires et diminue la
fin du co-compostage. Laugmentation sexplique par l'augmentation relative de la diversit
structurelle de la lignine , ce qui enrichi la qualit des substances humiques par la formation
de drivs de lignine avec dautre structure, les composs azots, les polysaccharides, les
lipides et dautres composs non dtermins dans la prsente tude savoir les quinones et
hydroquinone. La diminution de lindice de Ish la fin du co-compostage peut sexpliquer par
l'importance des processus slectifs et/ou d'oxydation des chanes latrales et des sous units
des polymres de la lignine. Ceci correspond une faible diversit des drivs de la lignine
la fin du co-compostage, en raison de leur incorporation et/ou adsorption de ces derniers aux

138

Partie I

structures des substances humiques. Amir et al. (2006a) et Ayuso et al. (1996), ont publi des
rsultats comparables et ont attribu la faible valeur de lindice Ish aux processus slectifs.

2,9

2,9

2,85

2,85

2,8

T0

T0

2,8

1 mois

1 mois

2,75

2 mois

2 mois

2,75

3 mois

3 mois

2,7

6 mois

2,65

6 mois

2,7
2,65

2,6

2,6

2,55

2,55
Ish A

Ish B

Figure 4: Evolution de lindice de Shannon Weaver (Ish) au cours du co-compostage


des mlanges A (Ish A) et B (Ish B)

4. Conclusion
Lidentification et le suivi des composs ligneux lors du co-compostage montrent un taux de
dgradation de la lignine de 8 et 21% pour la phase de stabilisation et de 27 et 25% la fin de
phase de maturation respectivement pour les mlanges A et B. Ceci est le rsultat de leur
mtabolisation et biodgradation favorise par les conditions du compostage : humidit,
temprature et la prsence des micro-organismes dcomposeurs. Les principaux composs
ligneux identifis sont classs en deux groupes. Le premier groupe est constitu de 7
composs qui diminuent avec diffrents pourcentage au cours du co-compostage (82,59 et
42,55 % pour 2,4-dimthylbenzne; de 78,59 et 75,93 % pour le 2-mthylnaphthalne; de
72,35 et 63.85 % pour le 1-thyl-2-mthylbenzne; de 66,31 et 64,81 % pour thylbenzne
24,71 et 20,96 % pour le styrne; de 17,28 et 26,8 % pour le tolune, et de 3,65 et 12,96 %

139

Partie I

pour le 4-mthylphnol, pour les mlanges A et B respectivement). Ceci est le rsultat


combin de leur mtabolisation et leur transformation en dautres composs.
Le deuxime groupe est constitu de 4 composs qui augmentent au cours du co-compostage.
Il sagit de, 257 et 227 % pour le phnol, 208 et 287 % pour le benzofuran, 113 et 146 %
pour lthylmthoxyphnol et de 266 et 456 % pour le dimthoxyphnol, respectivement pour
les mlanges A et B. Cette augmentation peut sexpliquer par une accumulation de ces drivs
au fur et mesure de libration suite lattaque partielle de la lignine. Il sen suit,
lincorporation de ces drivs dans la structure des substances humiques et/ou adsorbs par
celles-ci.

140

Partie I

Chapitre 4: Evolution des composs strodes au cours du co-compostage

1. Introduction
Laccumulation de certains composs organiques est rpercute nfaste pour lenvironnement
Lai et al. (2002). Gomes et al. (2004), ont montr que les strodes sont susceptibles de subir
une biotransformation, bien qu'ils aient le potentiel de bio-concentration, ce qui peut gnrer
de srieux problmes environnementaux (Carballo et al., 2005). Un tel comportement
complexe, qui n'est pas entirement compris, conduit lincertitude dans la dtermination de
l'importance de leur prsence dans l'environnement (Lai et al., 2002). Les facteurs intervenant
dans leur dgradation ncessitent dtre lucids.
Quelques drivs strodes ont t considrs comme des biomarqueurs de pollution. Ces
drivs peuvent tre utiliss dans les deux milieux liquides savoir les eaux uses, et les
sdiments (Nichols et al., 1993; O'Leary et al., 1999). De mme, Tyagi (2007), Nash et al.
(2005), ont identifis des biomarqueurs chimiques les strols fcaux et ils les ont utiliss
comme des biomarqueurs de la pollution dans les eaux uses urbaines. Dautres auteurs (Jen
et Han 1994; Gomez et al., 1998 ; Nash et al., 2005; Tyagi, 2007), ont montr daprs leurs
tudes, que le 5-stigmastanol et le 5-cholestanol sont des biomarqeurs chimiques des strols
fcaux et ils les ont utiliss comme des biomarqueurs fiables de la pollution des eaux uses
urbaines.
Lobjectif de ce chapitre vise identifier et suivre lvolution des strodes au cours du cocompostage des bouesdchets palmier, par Py-GC-MS. Ceci se justifie par lintrt que
pourra prsenter les stroides et les multiples renseignements quils peuvent apporter sur la
qualit des composts en termes denrichissement du milieu en prcurseur dhumification et
dvaluation de degr de pollution. De mme, il sagira dapporter, certaines prcisions sur les
strodes et le compostage, en raison de la raret des donnes de ce sujet.
2. Matriel et Mthodes
La pyrolyse est effectue aux mmes conditions physiques de la pyrolyse des composs
ligneux (voir chapitre 3 section matriel et mthode). Les standards utiliss sont le 5cholestan-3-ol (Chiron), 5-cholestan-3-ol (coprostanol) (Sigma), 24-ethyl-5-cholestan3-ol (Chiron), 5-cholestan-3-one (Sigma), 5-cholestan-3-one (Chiron) et cholest-5-ene
(Sigma). Le 3-thio-5-cholestane a t fourni par Dr P. Adam (Universit de Strasbourg). Le
pourcentage relatif de chaque compos strode est calcul selon la formule :
141

Partie I

Pi =

3. Rsultat et Discussion
3.1. Evolution des strodes au cours du co-compostage
Les pyrogrammes (Figure 1) montrent une diversit de composs organiques obtenus partir
des chantillons boues-dchets palmier, diffrents stades de co-compostage, par Py-GC-MS,
en termes de teneurs relatives.
Les principales familles identifies sont des terpnes tetracycliques : 3 strnes, 1 stradine,
4 stanols, 1 stanone, et 2 thiostranes (Tableau 1). Les 4 isomres de cholestnes et de 24thyl-cholstnes sont nomms (1 4), et les deux isomres des 24-mthylcholestnes sont
dsigns (1 et 2). Le dine identifi est le cholesta-3,5-dine (3,5cholestadine). Pour les 4
stanols, cholestanone, thiocholestane et thiocampestane, leur groupe fonctionnel est localis
sur le carbone 3.

Figure 1: Pyrogramme (TIC) des composs strodes identifis T0 lors du co-compostage

142

Partie I

Tableau 1:: Les strodes identifis au cours du co-compostage


co compostage
Familles

Composs

Groupe alkyl

Structures

C24
Strnes

cholest
cholestne

R= H

24-mthylcholest
thylcholestne

R=Me

(campestne)
(campest
R =Et

24-thylcholest
thylcholestne
(stigmastne)
(stigmast
Stradine

cholesta
cholesta-3,5-dine

R=H

3,5-cholestadi
cholestadine)

Stanols

5-cholestan
cholestan-3-ol

R= H

(coprostanol)

R=H

5-cholestan
cholestan-3-ol
(cholestanol)

24-mthyl--5-cholestan-3-ol

R = Me

(campestanol )
24-thyl-5
5-cholestan-3-ol

R = Et

(stigmastanol)

Stanone

5-cholestan
cholestan-3-one

R=H

Thiostranes

3-thio--5-cholstane

R= H

(thiocholestane)
3-thio-24-mthyl
mthyl-5-cholstane

R = Me

(thiocampestane)

Les stanones sont identifiess sous forme 5-cholestan-3-one


5
one (diffrent de 55-isomer) sur la
basee des temps de rtention GC et des
des spectres de masse. Les stanols ont t identifis (par
143

Partie I

rapport aux standards) comme le 5- et 5-cholestan-3-ols, 24-mthyl- et 24-thyl-5cholestan-3-ols, et les thiocholestane comme 3-thio-5-cholestane (Tableau 1).
En fonction de leur pourcentage relatif au cours du co-compostage, les strodes peuvent tre
classs en trois groupes (Tableau 2). Le premier groupe dont les concentrations diminuent
(Figure 2) est constitu des cholestnes (1, 2), 3,5-cholestadine, 24-thylcholestnes (1, 2),
5-cholestan-3-ol (coprostanol), 5-cholestan-3-ol, 5-cholestan-3-one et 24-thyl-5cholestan-3-ol (stigmastanol). Le deuxime groupe contient les isomres cholestne (3 et 4),
lisomre 3 de 24-thylcholestne, thiocholestane et thiocampestane dont le pourcentage
augmente au cours du co-compostage (Figure 3). Les variations de ces deux groupes sont
progressives, cependant le troisime groupe compos seulement de trois strodes avec des
fluctuations sans aucune tendance au cours du stade du co-compostage, il sagit de deux
isomres (1 et 2) de 24-mthylcholestnes et lisomre 4 de 24-thylcholestne (Tableau 2).
La teneur initiale des strodes est de 30% du total des composs organiques identifis. En
tenant compte de la biodgradation dans le milieu, le taux de dcomposition de ces composs
est de lordre de 23% et 8 % en phase de stabilisation (1er mois) et la dgradation continue
pour atteindre un taux dabattement de lordre de 68% et 55% la fin de la phase de
maturation (aprs 6 mois) respectivement pour le mlange A et B. Les composs strodes
semblent moins rsistants que les composs ligneux. Plus important, une disparition totale des
stanols a t observe, il sagit du coprostanol et cholestanol (5- et 5-cholestanols,
respectivement), 24-mthylcholestanol (campestanol), et 24-thylcholestanol (stigmastanol)
(Tableau 2, Figure 2).

144

Cholestnes

M = 388

M = 384

5-Cholestan-3-one

13

12

11

5-Cholestan-3-ol (coprostanol)

10

(stigmastnes)

24-thylcholestnes

M = 398

(campestnes)

M = 384

24-mthylcholestnes

M = 368

Cholesta-3,5-dine

145

Rtention

pic

54,5

53,8

53,2

53,1

52,6

52,2

51,9

51,7

50,9

50,3

50,2

49,8

49,4

(min)

Temps de

Numro de

M= 370

MW

Isomrs

Composs
1

2,11

9,56

8,81

1,48

0,49

0,98

7,18

5,28

1,25

2,80

4,25

1,29

1,68

7,16

7,87

1,62

0,48

0,98

4,99

5,24

1,00

2,74

4,35

1,23

2,41

0,85

3,46

8,98

1,87

0,36

0,73

5,47

5,56

0,87

3,03

4,96

0,91

1,71

0,62

1,45

7,90

1,88

0,23

0,49

5,43

5,60

0,74

3,32

5,10

0,57

0,62

Abondance relative (% strodes)


2,55

Temps de co-compostage (mois)

Tableau 2: Abondance relative (%) des strodes identifis au cours du co-compostage

Partie I

0,08

0,23

8,10

2,43

0,13

0,34

6,43

4,12

0,69

4,42

7,06

0,35

0,31

ance

Tend

(3-thio-5-cholestane)

Thiocholestane

(24-mthyl-3-thio-5-cholestane)

Thiocampestane

(stigmastanol)

24-thyl-5-cholestan-3-ol

ol(campestanol)

M = 404

M = 418

M = 416

16

18

17

15

146

56,5

59,0

57,7

55,8

4,81

23,28

15,74

2,37

4,89

M =402

54,6

24-mthyl-5-cholestan-3-

14

0,66

M = 388

Ratio (5):( 5+5) cholestanols

5-Cholestan-3-ol

Partie I

30,78

16,15

1,94

4,14

0,61

4,45

34,26

19,81

1,06

0,04

0,39

5,32

39,35

20,39

0,47

0,02

0,22

4,98

42,91

21,66

0,06

0,02

0,79

0,06

Partie I

12

2
1,5
1

Stigmastanol

0,5

Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

2,5

10
8
Coprostanol

5-cholestanol

4
2
0

Temps de co-compostage (mois)


b

Temps de co-compostage (mois)


a

1,4

1,2
1
0,8
0,6

cholestadiene

0,4
0,2

abondance relative (%)

abondance relative (%)

2,5
2
cholestene 1

1,5

cholestene 2

1
0,5
0

2
4
6
Temps de co-compostage (mois)
c

2
4
6
Temps de co-compostage (mois)
d

Abondance relative (%)

1,2
1
0,8

ethylcholestene 1

0,6

ethylcholestene 2

0,4
0,2
0
0

Temps de co-compostage (mois)


e

Figure 2: Variations de labondance relative des strodes au cours du co-compostage

147

Partie I

50

45
Abondance relative (%)

Abondance relative (%)

7
6
5
4
3
2

cholestene 3
cholestene 4

35
30
25
20
15

thiocholestane

10

thiocampestane

ethylcholestene 3

40

0
0

Temps de co-compostage (mois)


a

Temps de co-compostage (mois)


b

Figure 3: Evolution des cholestnes 3 et 4, thylcholestne 3, thiocholestane et


thiocampestane au cours du co-compostage

Tous les strodes identifis dans les pyrolysats proviennent des C27-C29 strols,
principalement le cholestrol (cholest-5-en-3-ol) qui est un compos ubiquiste (animal,
zooplancton, algue) (Takada et Eganhouse, 1998) et les phytostrols comme sitostrol sitostrol

(24-thylcholest-5-en-3-ol),

stigmastrol

(24-thylcholest-5,22-dien-3-ol),

campestrol (24-mthylcholest-5-en-3-ol). Aucun compos strol na t dtect dans les


pyrolysats, mme pour l'chantillon au stade initial (T0), malgr la prsence de dchets de
plantes rputes comme origine essentielle. Malgr la prsence de cholesta-3,5-dine, la
dshydratation des strols libres est probablement produite durant la pyrolyse. De plus aucun
produit de dshydratation des strols vgtaux comme le 24-mthyl-ou 24-thyl-cholesta-3,5dine na pu tre identifi.
La diminution de plusieurs strodes au cours du co-compostage peut tre explique par
laction des diffrents types de microorganismes sous les conditions physico-chimiques du
milieu de co-compostage. Lactivit enzymatique microbienne a un large ventail dans la
dgradation des composs organiques, et dans diffrents milieu. Wilson et Hrutfiord (1975),
ont montr que la prsence doxygne active la biodgradation de ces molcules par diffrents
types des microorganismes. Toutefois la majeure partie de la biotransformation des strodes a
t attribue aux bactries, champignons et levures.
La cholestrol oxydase a t isole et caractrise partir de Rhodococcus sp. (Turffit, 1944,
Lashkarina et al., 2010). Plus tard, elle a t identifie chez des bactries de diffrents
milieux la fois gram-positif (Rhee et al., 2002) comme Bacillus sp et Streptomyces
148

Partie I

sp. (Fukuyama et Miyake 1979; Ghoshroy et al., 1997) et gram-ngatif comme Burkholderia
et Chromobacterium sp (Doukyu et al., 2008). Schatz et al., (1949); Varma et Nene (2003)
ont isol le Pseudomonas sp., Mycobacterium sp., Streptomyces sp., Brevibacterium sp
capable de synthtis la cholestrol oxydase, et ils ont montr que les actinomyctes restent le
groupe le plus prolifique de lenzyme cholestrol oxydase. Ceci laisse prdire le rle capital
que jouent les actinomyctes dans la biodgradation des composs strodes spcifiquement
pendant la phase de maturation du co-compostage.
Kanchana et al. (2011), ont mis en vidence une intense activit enzymatique chez
Micrococcus sp. durant la phase de stabilisation de compostage pH = 7 et une temprature
de lordre de 50 C. Cependant, Bacillus sp. peut avoir une activit enzymatique des
tempratures jusquau 75C (Liu et al., 1988). Quelques autres espces de champignons et
levures Fusarium culmorum et lAspergillus Niger ont t signals comme capables de
produire la cholestrol oxidase et dgradent les strodes des composs faible poids
molculaire (Kolek, 1999; Varma et Nene, 2003; Xiangjiu et al., 2006).

Figure 4: Schma de la conversion des strols en stanols propos par (Bull et al., 2002)
La cholestrol oxydase est capable de modifier la structure physique de la membrane lipidique
par transformation de cholestrol en cholest-4-en-3-one par isomrisation de cholest-5-en-3one (Kumari et Kanwar, 2012). Dans les milieux naturels, la 4-stnone est rduite en 5stanone puis en 5-stanols (Eyssen et al., 1973). La mme voie affecte les composs haut
poids molculaire d'origine vgtale (Bull et al., 2002) (Figure 4). Dans des conditions
anoxiques, lhydrognation directe de strols en 5-stanols peut se produire, comme ont
montr Mermoud et al. (1984) dans un cas dtude des sdiments de lac. Clerier et al. (2006),
149

Partie I

ont montr l'hydrognation de cholestrol et le stigmastrol en 5-stanols aprs addition de


compost de dchets verts au sol. Les 4-stenones taient prsents, probablement tant que
composants intermdiaires.
3.2. Labattement des stanols
Dans le prsent travail, 5-campestanol (24-mthyl-5-cholestan-3-ol) et 5-stigmastanol
(24-ethyl-5-cholestan-3-ol) provient des C28 et C29 phytostrols comme le campestrol
brassicastrol, stigmastrol et -sitostrol qui sont prsents dans le palmier dattier. La
conversion de strols au stanols peut se produire naturellement dans les plantes catalyses par
la 3-hydroxystroid oxydase et par la stroid 5-rductase et le 3-kto rductase (Noguchi et
al., 1999, Venkatramesh et al., 2003), en suivant le mme mcanisme mentionns par Bull et
al., (2002) (Figure 4). La diminution des strols peut galement se produire par l'intermdiaire
d'une biohydrognation dans l'environnement naturel, ou l'hydrognation abiotique favorise
par la temprature relativement leve et la prsence de mtaux tels que le nickel. En effet, les
fibres de palmier sont en mesure de retenir et piger les mtaux, ce qui explique que ce
substrat peut tre utilis pour surveiller les sites de pollution (Al-Shayeb et Seaward, 2000).
Ces deux voies ont eu lieu probablement durant le stockage de trois mois de dchets de
palmier pendant l't. Le stigmastanol (avec stigmastrol) ont t trouvs comme des produits
majeurs dans des plantes (Benveniste, 1986). Garcia et al. (1981) ont montr la prsence du
stigmastrol et du stigmastanol dans les feuilles de palmier phoenix canariensis. Ifzal et al.
(2010), ont mis en vidence la prsence des strodes et des terpnoides dans les feuilles de
palmier Phoenix dactylifera L. Le 5-phytostanol identifi dans notre tude indique une
contribution de dchets de palmier dattier.
Les deux autres composs de stanol identifis sont 5- et 5-cholestanols correspondent aux
formes rduites de cholestrol. Le 5-stanols (coprostanol) et 5-stigmastanol (24-thyl-5cholestanol) sont considrs comme des biomarqueurs caractristiques de la matire fcale
(Baeten et al., 2012). Les 5-Stigmastanols nont pas t dtects aprs six mois de cocompostage. Le coprostanol est un compos caractristique la fois de la matire fcale
humaine et animale (Leeming et al., 1996). Les -stanols sont connus pour tre des produits
d'hydrognation de 5-strols (Bull et al., 2002) (Figure 4) par l'intermdiaire de bactries
anarobies (Leming et al., 1996). Cependant les 5-stanols ne sont pas considrs comme des
biomarqueurs fcaux, ils rsultent de la rduction de 5-strol dans des conditions arobies
(Taylor et al., 1981). Nanmoins, Sherblom et al. (1997), proposent l'utilisation du
150

Partie I

coprostanol et de lpicoprostanol comme des marqueurs des ordures mnagres. Bull et al.
(2002), ont rapport que les 5-stanols peuvent galement driver de la rduction de strols
dans certains environnements comme les sdiments.
Dans notre cas de co-compostage, les coprostanols ont leur origine dans la boue de STEP,
tandis que le 5-cholestanol, le 24-mthyl- et le 24-thyl-5-cholestanols proviennent des
strols vgtaux. Les stanols identifis ont diminu au cours du co-compostage avec des
valeurs trs faibles (Tableau 2, Figure 2a, 2b,). Labattement tait rgulier en fonction du
temps, sauf pour le 5-cholestanol; la variation de son abondance relative, pourrait indiquer
une production parallle avec la dgradation jusqu' 3 mois. En consquence, le coprostanol
produit peut tre biodgrad plus rapidement que son isomre 5 (Tableau 2). Les valeurs du
coprostanol et le ratio (coprostanol + 5-cholestanol) tendent vers une diminution avec le
temps, sauf pour le stade final 6 mois dont la valeur n'est probablement pas significative due
la faible concentration observe (Bull et al., 2002). La disparition de ces marqueurs de
pollution aprs six mois de co-compostage est un indicateur du degr d'hyginisation des
composts finaux.
3.3. Evolution du stanone, stradine et strnes
Une seule ctone a t identifie, il sagit de la 5-cholestan-3-one. Comme indiqu
prcdemment, ce compos est un produit intermdiaire de la formation du 5-cholestan-3ol (Figure 4) partir du cholestrol (Bull et al., 2002). Ce compos considr comme un
biomarqueur fcal provient de la boue d'puration et diminue au cours du co-compostage. Les
composs

5-campestanone

(24-mthylcholestan-3-one)

et

5-stigmastanone

(24-

thylcholestan-3-one) dorigine vgtale nont pas t dtects. Le cholesta-3,5-dine prsent


en faible quantit dans les produits de pyrolyse, diminue avec le temps avec un abattement de
45% aprs 6 mois (Tableau 2, Figure 2c). Le 3,5cholestadine est le produit de la
dshydratation classique de cholestrol. La dshydratation des strols favorise par la
temprature dans des conditions oxiques (Alves et al., 2010) a pu se produire pendant le
stockage des dchets ce qui explique l'absence de strols T0. Une autre source probable du
cholestadine dans les pyrolysats est la scission d'esters (strides) lors de la pyrolyse comme
lont

montr Asperger et al. (1999) dans l'analyse de cires naturelles (Figure 5): la

dgradation thermique de cholesterylstarate donne en plus de lacide starique deux


composs, le cholesta-2,5-dine comme un produit mineur et le cholesta-3,5-dine favoris
par sa double liaison conjugue. La dgradation thermique des formes estrifies de strols

151

Partie I

(comme strides ou des formes plus complexes) peuvent galement survenir au cours du
compostage.

Figure 5: Dgradation thermique de cholesterylstarate propos par Asperger et al., 1999

Les strnes sont les cholestnes (4 isomres), 24-thylcholestnes (stigmastnes) (4


isomres) et 24-mthylcholestrnes (campestnes) (2 isomres). Les cholestnes (isomres 3
et 4) et lisomre 3 du 24-thylcholestnes (stigmastnes) augmentent au cours du cocompostage, cependant les deux isomres du 24-mthylcholestrnes restent relativement
stables au cours du co-compostage (Tableau 2, Figure 3a). Ce rsultat est expliqu par le
manque de structure chimique complte. Certains isomres pourraient correspondre 2 et 3
strnes rsultant de l'limination du groupe chimique la position C-3.
Une partie de strnes peut tre formes pendant la pyrolyse comme un produit de
dgradation thermique des stanides ou des formes estrifies de stanols. L'augmentation des
strnes (cholestnes 3, 4, et thylcholestne 3) dans les pyrolysats est, en partie, le rsultat de
l'augmentation relative des formes estrifies de cholestanol et thylcholestanol au cours du
co-compostage. Les autres strnes identifis diminuent en fonction du temps (Figures 2d,
2e). La double liaison des strnes prsents dans le substrat du compost est un site ractif pour
l'oxydation en particulier pendant la phase de maturation.
3.4. Evolution des thiostranes
Les principaux thiostranes identifis sont 3-thio-5-cholestane (talons de Adam et al.,
1992) et 24-mthyl-3-thiocholestane (3-thiocampestane) pour lesquels la strochimie du
152

Partie I

carbone 5 (5(H) ou 5(H)) ne peut tre tablie sur la base des spectres de masse. Les
concentrations relatives de thiostranes augmentent avec le temps, ceci explique que la
raction de strodes avec des espces inorganiques du soufre est favorise par le cocompostage (Tableau 2, Figure 3b). notre connaissance, la prsence de S-lipides na jamais
t reporte dans les composts, contrairement aux sdiments. Kok et al. (2000), ont expliqu
la formation de thiosteroides de strols par les ctones dans les sdiments du lac Ace
(Antarctique). Les strodes S-lis ont des liens de soufre la position C-3. Les strodes ont
t rapports pour tre sulfurs de manire prfrentielle par rapport d'autres lipides, et le
C27 strodes tant favoris par rapport aux autres C28 et C29. Adam et al. (2000), ont tudi
les processus de sulfuration dans les sdiments rcents et ils ont propos un mcanisme de
lipides di-ou polysulfure lis. Le phnomne de sulfuration de strodes est produit via les
ctones. Adam et al. (1992), ont tabli dans les fractions ptrolires lourdes des fragments de
strodes, qui sont lis la matrice molculaire par des liaisons mono-, di-ou polysulfure.
Tenant compte de ces rsultats et la littrature cite, nous postulons que le 3-thiocampestane
est form partir de 24-mthyl-3-ol-5-cholestane et, en consquence, la configuration du
carbone 5 est propos pour tre 5(H). De mme, 3-thiocholestane peut tre form partir
de 5-cholestan-3-ol. Le mcanisme de sulfuration des strodes pendant le compostage est
une question ouverte. L'absence de 2-SH-5-thiocholestane (Adam et al, 1992, 2002) tend
indiquer que l'incorporation de soufre sur les cholest-2-nes na pas t produite. D'autre part
le mcanisme de sulfuration via les fonctions ctones rapport dans les sdiments (Kok et al,
2000; Adam et al., 2002) peut expliquer ce rsultat.
Les ctones correspondant aux thiostranes nont pas t retrouves (trs ractives). C'est
aussi, a priori, de supposer que seulement 5(H)-strodes (d'origine vgtale) ont t sulfurs
et pas les 5-isomres. Une explication est peut tre possible, le groupe 3-SH des 5(H)
strodes est axial ce qui correspond une configuration thermodynamique moins stable qui
est le 3-SH des 5(H)-strodes. Cela explique pourquoi la sulfuration de 3-OH-5(H) des
strodes dans les sdiments donne un mlange de 3-SH- et 3-SH-5-stranes,
lpimrisation au niveau du carbone 3 est produite via les ctones correspondantes (ou des
aldhydes) (Kok et al., 2000; Adam et al., 2002).
Nous pouvons galement nous interroger sur la forme de ces molcules soufres dans le
compost: sont ils prsentent comme des thiols ou sont des thiols produites par pyrolyse des
liaisons C-S de strodes S-lis (mono- polysulfure li). Selon lhypothse des strodes S-

153

Partie I

lis, la pyrolyse de -S-[strode] peut gnrer un thiol, un strne dpendant sur la liaison S-CC, par la scission homolytique (2 possibilits).
Dans le cas des strodes C3-lis, le cholestne form doit tre un cholest-2-ne et cholest-3ne. On peut observer que l'augmentation de cholestnes 3 et 4 au cours du co-compostage
(Tableau 2) est en parallle celle de thiocholestane, comme illustr par les valeurs des
rapports donns dans le Tableau 3. Nanmoins, il faut tre prudent car les strnes prsents
dans les pyrolysats peuvent avoir plusieurs origines. Plus gnralement, il a t tabli que les
processus de sulfuration dans les sdiments rcents ont eu lieu durant la diagense prcoce par
des ractions entre les lipides fonctionnaliss des espces de soufre inorganiques (Adam et al.,
2000, Kok et al., 2000).

Tableau 3: Le rapport de labondance relative des composs strodes

Temps du co-compostage (mois)


0

Thiocholestane/Cholestne 3 5,5

7,0

6,9

7,7

6,1

Thiocholestane/Cholestne 4 8,3

11,2

11,3

11,8

9,7

Nos rsultats suggrent quil existe une certaine analogie entre la diagense dans les
sdiments conduisant la formation de krogne et le processus de compostage conduisant
la formation des substances humiques. Dans l'ensemble, la quantit de strodes qui tait
initialement leve (30% en poids sec) diminue fortement au cours de la phase de maturation
de 68%. Le taux est positivement corrl la diminution du rapport NH4+ / NO3- qui reflte le
degr de phytotoxicit du compost, ainsi que le rapport C/N qui reflte la maturit du compost
(Figure 6).

154

Partie I

30
25

y = -8.055x + 32.473
R = 0.872

NH4+/NO3-

C/N

20
15
10
5
0

0
1
2
3
4
Taux d'abattement (%) des strodes

16
14
12
10
8
6
4
2
0
-2 0
-4

y = -6.815x + 19.12
R = 0.8812

Taux d'abattement (%) des strodes

Figure 6: Corrlation entre les indicateurs classiques de maturit et le taux dabattement de


C-strodes

La corrlation linaire positive de ces rapports avec le taux de rduction de strodes est
respectivement de (R = 0,88 ; R = 0,87) (Figure 6) indique que la quantit de strodes
pourrait galement tre utilise comme un indicateur de la maturit du compost.
Malgr que la majorit des strodes identifis subissent un abattement trs significatif au
cours du co-compostage, certains demeurent rcalcitrants et inaccessibles lactivit
microbienne. Ceci est illustr par laugmentation du cholestnes (3 , 4), lisomre 3
dthylcholestne, du thiocholestane et du thiocampestane, respectivement, avec un taux de
lordre de 66%, 58%, 64%, 84%; et 38% (Figure 3a, 3b). Le caractre rcalcitrant des
strodes a t tudi dans les sdiments. Nishimura (1977) a mis en vidence que la
rsistance des strodes tait due des ractions chimiques ou biochimiques au cours de la
diagense. De plus la production et l'augmentation relative de thiostranes est une preuve des
ractions de sulfuration au cours de co-compostage. Ces composs qui sont peu dgradables,
saccumulent relativement au cours de co-compostage ce qui explique leur augmentation. Ces
strodes peuvent tre adsorbs et mme tre incorpors dans la structure type humus des
composts.
4. Conclusion
Le taux des strodes totaux a t rduit de 68% aprs six mois de co-compostage, le groupe
stanols, avec 5(H) configuration provenant des plantes et le 5-cholestanol (matire fcale),
ont diminu avec un taux dabattement > 90%. Certains strnes peuvent tre forms par
pyrolyse de stanols lis aux groupes ester, ther, soufre...etc. Laugmentation des strnes au
155

Partie I

cours du co-compostage peut reflter l'incorporation des strodes dans la structure humique.
Le 3,5cholestadine form par la pyrolyse du cholestrol a diminu au cours du processus. Le
compostage de boue de STEP-dchet de palmier est caractris par le phnomne de
sulfuration. La pyrolyse couplet la chromatographie phase gazeuse et spectroscopie de
masse est un outil rapide et reproductible permet de mieux identifier la qualit des composs
organiques prsent dans le compost. Le type de ces composs dpend de la nature de la
matire premire utilise lors du co-compostage et les conditions du compostage, ce qui
affecte directement la matrice de base dun compost qui est lhumus.

156

Partie II

Partie II
Microbiologie et valuation du degr
dhyginisation au cours du co-compostage
Chapitre 5: Evaluation de la succession de la communaut microbienne au cours du cocompostage des boues actives-dchets de palmier sur un milieu synthtique base de
composts (CTEA).

Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de compostage des bouesdchets de palmier et screening disolats dactinomyctes activits antimicrobienne.

Chapitre 7: Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station dpuration et


lefficacit de leur inactivation par procd de compostage.

157

Partie II

Chapitre 5 : Evaluation de la succession de la communaut microbienne au


cours du co-compostage des boues actives-dchets de palmier sur un milieu
synthtique base de composts (CTEA)

1. Introduction
Le compostage est un processus arobie de dgradation des composs organiques par laction
successive des micro-organismes (bactries, levures, et champignons), dont la concentration
peut atteindre des millions, voir des milliards par gramme de compost (Barje et al., 2008,
Jouraiphy, 2007, Amir, 2005 ; Amir et al., 2010) ; leur volution est en fonction des stades de
compostage avec un profil dfini en fonction des espces. Leur volution est lie
principalement aux variations des paramtres physico-chimiques et la nature et la structure
des substrats (Rosenzweig et al., 1980). La phase msophile est caractrise par une
temprature

gnralement infrieure 45C, rsultat de la chaleur dgage lors de la

biodgradation des composs facilement assimilables par les micro-organismes msophiles


(Ahn et al., 2009). Avec le compostage lintense activit des micro-organismes gnre une
lvation de la temprature qui permet linstallation des microorganismes thermophiles et
thermotolrants. Cependant, durant la phase de maturation qui succde la phase
thermophile, les pertes de chaleur par change avec le milieu extrieur et la diminution des
lments nutritifs, engendrent une chute de temprature. Durant cette dernire phase, les
microorganismes msophiles retrouvent les conditions thermiques optimales pour leur
dveloppement (Mustin, 1987). La biodgradation lente des composs rcalcitrants comme la
lignine, au cours de cette phase, par les champignons et les actinomyctes contribuent au
refroidissement de la phase de maturation. Pendant cette phase, le processus dhumification
prdomine, et la polymrisation et la condensation des

substances libres lors de la

dcomposition de la matire organique samliore (Mustin, 1987, Chroni et al., 2009 ; Barje,
2010). Plusieurs travaux de recherche ont t focaliss sur la microbiologie de compost mais
jusqu prsent les analyses systmatiques microbiologiques des produits de compostage
restent insuffisantes (Hassen et al., 2001). Lvolution des microorganismes au cours du
compostage peut tre value par plusieurs mthodes. Lutilisation des biomarqueurs comme
PLFA, est une technique largement utilise dans le domaine de compostage (Abouelwafa,
2009 ; Amir et al., 2010). Le dosage d'ATP ou la mesure des activits enzymatiques, et les
mthodes physiologiques par la mesure de la respiration (Mathur et al., 1993) sont aussi
158

Partie II

grandement utilises. La technique de dnombrement sur des milieux de cultures est une
valuation directe, rapide, reproductible et moins coteuse.
Dans ce chapitre, nous envisageons dtudier lvolution et la succession de la microflore
endogne, et sa contribution aux changements des paramtres physico-chimiques de substrat.
De mme, il sagira de dterminer des phases relles au cours de co-compostage, par
utilisation de deux approches de culture. Lapproche classique sur milieu standard (GSM), et
sur milieu synthtique base de substrat de chaque stade de co-compostage (Co-composting
Time Extract Agar (CTEA) comme milieu slectif de la microflore fonctionnelle.
2. Matriel et Mthodes
2.1. La mise en culture et dnombrement de la microflore endogne
Diffrents stades de co-compostage ont t analyss (0, 15, 22, 30, 60, 90 et 180 Jours),
lextrait aqueux (10 g / 100 ml deau physiologique (NaCl: 9), homognis laide dun
vortex puis mise en sonication selon la mthode dvelopp par Ouhdouch et al. (2001). Tous
les chantillons prpars ont t dilus de 10-1 10-6. Seules les dilutions 10-4, 10-5, 10-6 sont
ensemences sur les milieux synthtiques disolement raison de 0,1 ml par boite de Ptri,
chaque stade est ensemenc dans le milieu usuel standard (Glose Nutritive), et dans son
milieu correspondant synthtis CTEA (Co-composting Time Extract Agar), base de
substrat de chaque stade prpar comme suit: 35g de chaque stade de compostage dans un
litre deau, macr pendant une nuit, par la suite le filtrat est additionn de 15g dagar. Le pH
est ajust au pH de chaque stade de co-compostage puis le mlange est strilis 120C/2bar
pendant 30 min, ce milieu a pour but de slectionner seulement la microflore fonctionnelle sur
notre substrat de compostage. Chaque boite de Ptri reprsentant un stade de co-compostage,
est incube deux degrs diffrents de temprature (msophilique 28C et thermophilique
45C) pendant 48h deux semaines afin dvaluer la microflore fonctionnelle de chaque
stade.
2.2. Dnombrement des actinomyctes
Les milieux de dnombrement des Actinomyctes sont additionns de 40 g/ml dactidione
afin dinhiber les champignons (Olson, 1968) et 10 g/ml dacide nalidixique, un inhibiteur
des bactries Gram-ngatif (Bulina et al., 1997; Barakate et al., 2002). Les diffrentes
colonies dactinomyctes obtenues sur notre milieu disolement (CTEA) sont reconnues par
leur aspect morphologique caractristique lil nu, et confirm au microscope optique
(1010) selon les normes ISP (International Streptomyces Project) (Shirling et Gottlieb,
159

Partie II

1966). Les colonies dactinomyctes sont souvent pigmentes daspect compact sec, lisse ou
rugueux, leur contour est arrondi ou chancr. La surface poudreuse est due la prsence dun
myclium arien.
2.3. Dnombrement des bactries
Les colonies des bactries en gnral ont t caractrises laide de la morphologie et
confirmation par un microscope binoculaire, les souches isoles se diffrencient par leur
forme et leur couleur; la majorit des souches isoles sont sous forme ronde, ovode, avec des
couleurs diffrentes; blanche, grise, rouge-orange, jaune, rose et noir.
2.4. Dnombrement des champignons
Le dnombrement des champignons est effectu sur des milieux de culture en prsence de
5g/ml of chloramphnicol afin dinhiber le dveloppement des bactries. Lanalyse
microbiologique a t ralise avec 3 rptitions.
3. Analyses statistiques
La comparaison des moyennes est effectue par ANOVA, et la diffrence est considre
significative pour p < 5%. LACP a t applique sur la matrice de corrlation entre la
microflore endogne identifie et les paramtres physico-chimiques. Les traitements
statistiques ont t raliss grce au logiciel SPSS Win version 10.
4. Rsultats et Discussion
4.1. La concentration de la microflore endogne et son volution au cours du cocompostage selon lapproche CTEA et GSM
La variation de la microflore msophile et thermophile pour les deux mlanges A et B en
fonction de co-compostage montre la mme allure dvolution en fonction du temps (Figure
1). Une diffrence a t note entre la microflore ensemence sur le milieu synthtique
(CTEA) et le milieu standard (GSM). La microflore totale identifie est 10 fois plus leve
dans le GSM (Figure 1a, 1b) que dans le CTEA (Figure 1c, 1d). Ceci est d au dveloppement
de la microflore endogne cultivable, fonctionnelle et non fonctionnelle dans le GSM.
Cependant le CTEA a agi comme un milieu slectif seulement de la microflore fonctionnelle,
qui est capable de dgrader le substrat de co-compostage.

160

Partie II

120

Mlange B (MM)

Mlange B (TM)

Mlange A (MM)

Mlange A (TM)

100
5

1010 UFC/g

1010 UFC/g

80
60

4
3

40

20

-30

-30

0
30 60 90 120 150 180
Temps de co-compostage (Jours)
a
400

350

350

300

300

250

200

Mlange B (MM)

150

Mlange A (MM)

100

108 UFC/g

250
108 UFC/g

0
30 60 90 120 150 180
Temps de co-compostage (Jours)
b

150
Mlange B (TM)

100

Mlange A (TM)

50

50

0
-50 0

200

0
30

60

90 120 150 180

-50 0

30

60

90 120 150 180

Temps de co-compostage (Jours)


d

Temps de co-compostage(Jours)
c

Figure 1: Evolution de la microflore totale (msophile (MM), thermophile(TM)) au cours du


co-compostage des mlanges A et B sur GSM (a, b) et CTEA (c, d)

Dans les deux milieux, la microflore msophile est prsente des concentrations leves par
rapport la microflore thermophile. Ces rsultats sont en accord avec les travaux de Chroni
et al. (2009). Ceci sexplique par la prsence abondantee de la microflore msophile dans le
milieu. On constate aussi quil y a une diffrence entre la concentration de ces deux types de
microflores. La microflore du mlange B reste toujours leve par rapport au mlange A, ceci
est troitement lie la proportion de la boue qui reprsente 50% pour le mlange B.
Lvolution de la microflore totale msophile et thermophile est caractrise par un pic
pendant la phase thermophile pour les deux mlanges A et B dans les deux milieux de culture.
161

Partie II

Dans le GSM la microflore msophile augmente de 421010 CFU/g 631010 CFU/g au 30me
jour (phase thermophile), et de 431010 UFC/g 911010 UFC /g au 60me jour du cocompostage, respectivement pour le mlange A et B (Figure 1a). La microflore thermophile
varie de 0,5 1010 UFC/g 3,8 1010 UFC/g et de 1,9 1010 UFC/g 5,6 1010 UFC/g,
respectivement au 30me jour pour le mlange A et B (Figure 1b). Cependant dans le CTEA la
microflore msophile augmente de 43 108 UFC/g 137108 UFC/g au 22me jours (phase
thermophile) et de 63108 UFC/g 294 108 UFC/g au 30me jour, respectivement pour le
mlange A et B (Figure 1c). La microflore thermophile a vari de lordre de 5,4 108 40
108 et de 7,7108 114108 UFC/g, au 30me jour, respectivement pour le mlange A et B
(Figure 1d).
Ces rsultats montrent que la phase thermophile, dtermine par lvolution de la microflore
msophile dans le milieu GSM, nest pas corrle avec lvolution de la temprature du cocompostage. Ceci confirme que le milieu CTEA est un milieu slectif des microorganismes
fonctionnels, ce qui peut donner des informations correctes sur la dtermination des phases de
co-compostage. Lvolution de la microflore thermophile endogne jusquau 30me jour (cas
du mlange B) dans les deux milieux de culture (GSM et CTEA) est strictement lie
lvolution de la temprature au cours de la phase thermophile (jusquau 30me jour). Par la
suite la biomasse thermophile diminue aprs le 30me jour. Une exception, le dveloppement
de la biomasse thermophile du mlange A dans le CTEA, est limit au 22me jour (Figure 1d).
Ceci peut expliquer que le milieu de culture GSM donne des informations supplmentaires sur
la microflore non fonctionnelle, ce qui nest pas appropri la dtermination des phases de
co-compostage.
4.2. Evolution de la microflore totale dans le milieu synthtique CTEA
Le pic dvolution pour les deux types de microflores (msophile et thermophile) dans le
CTEA durant la phase thermophile, renseigne en plus des conditions favorables de la
croissance microbienne (nutriments, humidit, temprature) sur labondance et la densit de
la microflore thermotolrante dans notre substrat de compostage. Sneath, (1986), a isol des
espces thermotolrantes capables de se dvelopper tout au long de compostage. Le mme
auteur a montr que des tempratures entre 26-48C reprsentent des conditions favorables
pour le dveloppement des microorganismes tolrants. Dautres auteurs (Hassen et al., 2001;
Marshall et al., 2004; Bhatia et al., 2013) ont montr que la premire phase msophile du
processus est caractrise par une intense activit et un dveloppement de la microflore
msophile, avec une concentration deux quatre fois plus leve que la microflore
162

Partie II

thermophile. Chroni et al. (2009), ont montr que les tempratures autour de 50C semblent
favorables au dveloppement des bactries msophiles.
Au dbut du processus de co-compostage la microflore msophile dgrade les molcules
faciles mtaboliser, ceci conduit une augmentation de la temprature dans le milieu ce qui
favorise le dveloppement de la microflore thermotolrante suivi par la microflore
thermophile. Ce dernier groupe devient responsable de processus de dgradation des substrats
pendant la phase thermophile.
Lensemble des densits de la microflore identifies a connu un dclin juste aprs le premier
mois de co-compostage. Ce rsultat est d aux conditions restreintes traduites par
lpuisement de substrat facile dgrader, et par consquence la diminution de la temprature,
ce qui affecte surtout la microflore thermophile, et favorise le milieu pour la rinstallation de
la nouvelle microflore msophilique. Ces rsultats sont en accord avec dautre auteurs
(Tnner-Klank et al., 2007). Chroni et al., (2009), ont montr une diminution intense de la
microflore la fin de la phase thermophile. Plusieurs autres facteurs, savoir le taux
doxygne, lhumidit, le pH, et la temprature peuvent affecter la succession de la
communaut microbienne au cours du co-compostage. Paul et Clark (1996), ont montr que le
changement rapide en conditions physico-chimiques au cours du co-compostage est un facteur
slectif de la succession microbienne. Sidhu et al. (2000), ont montr aussi que la population
bactrienne a connu une diminution progressive avec la maturit de compostage, quand les
nutriments et le taux dhumidit diminuent.
Une diffrence a t observe pour les deux mlanges A et B, la phase thermophile
dtermine par la microflore endogne est courte pour le mlange A, elle est limit 22 jour,
pourtant on constate que cette phase stale sur tous le premier mois de co-compostage pour le
mlange B. Ceci peut tre li au remplacement rapide de la microflore thermophile du
mlange A. Comme il a t dj mentionn dans la littrature la phase thermophile peut varier
de quelque jours quelque mois (Tuomela et al., 2000). Ceci peut tre d la concentration
de la microflore thermophile ainsi thermotolante qui est leve dans le mlange B en
fonction de la proportion de boue ajoute. Dans ce sens, on loigne lhypothse de la
diffrence dans la nature de la microflore thermophile installe, puisquil sagit du mme
substrat de compostage ce qui fait, il sagit de mmes groupes fonctionnels. Filippi et al.
(2002), ont identifi quelques conditions qui peuvent engendrer un dcalage temporaire dans
la dcomposition de la fraction organique au cours du compostage. Adani et al. (2001), ont
montr que le taux doxygne, le taux dhumidit et la stabilisation de la matire organique
gnrent un dcalage dans le temps de lactivit des microorganismes.
163

Partie II

Ce rsultat dvolution de la microflore endogne au cours du co-compostage permet de


dterminer et distinguer entre les deux phases caractristiques de compostage, la phase de
stabilisation et de maturation ncessaires pour la maturit des substrats composts.
4.3. Evolution de diffrents groupes de la microflore endogne
4.3.1. Evolution des actinomyctes au cours du co-compostage
Trois principaux groupes des micro-organismes arobies ont t dnombrs au cours de
l'analyse microbiologique des stades de compostage: actinomyctes, champignons, et
bactries, ce qui renseigne sur la richesse de la boue en microflore active. Diffrents auteurs
(Finstein et Morris, 1975; De Bertoldi et al., 1983; Marshall et al., 2004) ont montr que
lactivit microbienne durant le processus de compostage est attribue aux diffrents groupes
de micro-organismes, savoir la flore totale arobie msophile (TAM), les actinomyctes et
la microflore fongique.
Dans cette tude, partir de deuxime mois de co-compostage, le groupe fonctionnel
dactinomyctes reprsente un pic de lordre de 80% et 70% et de 90% et 80%,
respectivement pour la microflore msophile et thermophile des mlanges A et B (Figure 2,
3).

120

120

Champignons
Actinobactries

100

Actinobactries

100

Bactries

Bactries

80
%

80
%

Champignons

60

60

40

40

20

20

0
0

15

22

30

60

90

180

Temps de co-compostage (Jous)


Mlange A

15

22

30

60

90 180

temps de co-compostage(Jours)
Mlange B

Figure 2 : Evolution de la microflore msophile au cours du co-compostage des mlanges A


et B

164

Partie II

120

100

Bactries

Bactries

80

80

60

60
%

Actinobactries

Actinobactries

100

champignons

120

Champignons

40

40

20

20

0
0

15

22

30

60

90 180

Temps de co-compostage (Jours)


Mlange A

15

22

30

60

90

180

Temps de co-compostage (Jours)


Mlange B

Figure 3: Evolution de la microflore thermophile au cours du co-compostage des mlanges A


et B
Les rsultats de lanalyse ACP entre la microflore msophile et thermophile et les paramtres
physico-chimiques au cours du co-compostage (Figure 4, 5), montrent que les actinomyctes
(domaine I) sont inversement corrls avec la temprature, et fortement corrls avec le pH
(cas du mlange B). Cette observation confirme la corrlation significative entre les
Actinomyctes et la phase de maturation. Nanmoins, dans notre cas de co-compostage
quelques souches isoles dactinomyctes sont thermotolrantes.

Figure 4 : Analyse de composante principale (ACP) de la microflore msophile et les


paramtres physico-chimiques au cours du co-compostage des mlanges A et B
M: Msophile

165

Partie II

Figure 5: Analyse de composante principale (ACP) de la microflore thermophile et les


paramtres physico-chimiques au cours du co-compostage des mlanges A et B
T: Thermophile

Diffrents auteurs (Partanen et al., 2010; Sundberg et al., 2011) ont montr une corrlation
entre le pH et laugmentation des actinomyctes et ils ont considr ce phnomne comme un
indicateur de maturit de compost. Goodfellow et Williams (1983), ont report que les
actinomyctes ont la capacit de se dvelopper tout au long du compostage sous une large
gamme de variation de temprature, avec un optimum entre 25-30C pour les souches
msophiles, et 45-55C pour les thermophiles. La capacit enzymatique des actinomyctes
attaquer les molcules rcalcitrantes, explique leurs activits et leur prolifration dans la phase
de maturation (Tuomela et al., 2000). Cette intense activit des actinomyctes, peut expliquer
laugmentation de ce groupe pendant le processus de compostage base de dchet de palmier,
spcifiquement durant la phase de maturation. Vers la fin du processus, ce groupe connait une
chute dans le mlange B, et une lgre diminution avec un plateau dans le mlange A. Cette
diffrence peut tre attribue la forte concentration du substrat ligno-cellulosique dans le
mlange A, favorable au dveloppement des actinomyctes. Dautres auteurs (Perez et al.,
2002; Nakasaki et al., 2009), ont montr que les actinomyctes thermophiles (Thermobifida
fusca) produit une enzyme active pour dgrader les composs ligno-cellulosiques. Ces

166

Partie II

actinomyctes sont activs ultrieurement la phase de maturation (Tuomela et al., 2000;


Xiao et al., 2011), ce qui contribue la formation des substance humiques.
4.3.2. Evolution de la microflore fongique au cours du co-compostage
La microflore fongique augmente spcifiquement pendant la phase thermophile de cocompostage, avec un pourcentage de lordre de 40% et 50% respectivement pour la
microflore msophilique et thermophilique du mlange A et B (Figure 2,3). Lanalyse ACP et
les projections factorielle sur le plan entre les variables microorganismes et temps, montre que
la microflore msophile et thermophile fongique, et la temprature sont fortement corrls au
15me jour (65C) (Figure 4, 5). Ceci peut expliquer la nature thermotolrante des
champignons identifis dans notre cas de co-compostage. Les rsultats de notre exprience
ont montr que 80 % des champignons isols et r-incubs 45C ont bien pouss. Au cours
des stades intermdiaires, la densit de la microflore fongique diminue, ceci est d la
diminution de la temprature. Nanmoins, on constate une rinstallation des champignons la
fin du co-compostage. Chroni et al. (2009), ont identifi des champignons thermophiles qui
augmentent avec laugmentation de la temprature pendant le premier mois du compostage.
Steger et al. (2007), ont montr un dveloppement des actinomyctes et des champignons
des tempratures infrieures 45C. Plusieurs auteurs (Finstein et Morris, 1975; Ishii et al.,
2000), ont expliqu que la phase de maturation est caractrise par le dveloppement dune
nouvelle microflore fongique msophile. Ait Baddi et al. (2004), ont montr que pendant la
phase de maturation, la biodgradation est limite des molcules complexes comme les
ligno-celluloses de haut poids molculaire. Mouchacca (1997), a identifi un champignon qui
a t largement tudi en raison de sa capacit produire de la cellulose et des enzymes
dgradant la lignine 30-40C avec des tempratures maximales de 36-40 C. Les
champignons avec leur capacit de produire des enzymes ligninolytiques peuvent librer les
sous-units aromatiques de bas poids molculaire par dpolymrisation et des modifications
oxydatives progressives comme il a t dmontr par Kirk et Farrell (1987). Ceci renforce
lhypothse de leur rinstallation sur un substrat ligno-cellulosique vers la fin du cocompostage.
4.3.3. Evolution des bactries au cours du co-compostage
La variation des bactries msophiles au cours du co-compostage montre une tendance
gnrale vers une augmentation-diminution-augmentation (Figure 2, 3). Ce profil dvolution
est d aux conditions physico-chimiques du milieu. Tuomela et al. (2000), ont montr que les
167

Partie II

microorganismes peuvent sadapter la diminution graduelle des nutriments, de loxygne, et


de lhumidit avec la maturit du compostage. Lanalyse en composante principale (ACP) ne
montre aucune corrlation entre les bactries et lvolution de la temprature (Figure 4, 5).
Bhatia et al. (2013), ont montr que la microflore msophile est ncessaire loxydation des
substrats organiques, ceci par consquence conduit une augmentation de la temprature du
milieu, ce qui inhibe les bactries msophiles. Par la suite, lpuisement du milieu en substrat
et les nouvelles conditions de la phase de maturation, favorisent la rapparition de la
microflore msophile savoir les bactries. Chroni et al. (2009), ont montr quun nombre
lev de bactries protolytiques peuvent apparaitre durant la phase de maturation, suite
lenrichissement du milieu en protine des microorganismes en fin de vie.
5. Conclusion
Lvolution de la succession de la microflore endogne au cours du co-compostage, a t
effectue sur deux milieux de culture. Le CTEA ajust au pH du milieu de co-compostage et
le milieu standard (GSM). La microflore thermophile varie de 5,4 108 40 108 UFC/g aux
22 jours dans le milieu CTEA, et de 7,7108 114108 UFC/g aux 30 jours respectivement
pour les mlanges A et B. Cependant, dans le milieu GSM, labondance varie de 0,5 1010
UFC /g 3,8 1010 UFC /g et de, 1,9 1010 UFC /g 5,6 1010 UFC/g aux 30 jours
respectivement pour le mlange A et B. Le milieu GSM indique seulement la prsence de la
microflore endogne cultivable, ce qui est insuffisant pour valuer la microflore responsable
de la dcomposition des substrats de co-compostage. Ceci est lun des inconvnients
dutilisation des milieux usuels de culture. Cependant le CTEA indique lvolution qualitative
des microorganismes au cours du co-compostage. Sur ce milieu, la microflore msophile et
thermophile endogne augmente principalement au cours de la phase thermophile qui est
limite 22 jours pour le mlange A et stale jusqu 30 jours pour le mlange B. Trois
diffrentes catgories de micro-organismes (actinomyctes, champignons et bactries) ont t
values. La microflore fonctionnelle compos dactinobactries prsente un pic au cours de
la phase de maturation, signe du dveloppement sur le substrat rcalcitrant ligno-cellulosique.
La communaut bactrienne subit un changement li la disponibilit du substrat nutritif, et
aux variations physico-chimiques du milieu. Le substrat de co-compostage est caractris par
des champignons thermotolrants. Ces rsultats indiquent que le dveloppement et la
succession des microorganismes, est strictement lie aux substrats et aux stades de cocompostage.

168

Partie II

Chapitre 6: Abondance de la microflore endogne des produits de


compostage des boues-dchets de palmier et screening disolats
dactinomyctes activit antimicrobienne

1. Introduction
Le compostage est un processus arobie de dgradation des composs organiques par laction
des micro-organismes, ce processus permet aussi dhyginiser le milieu et permet davoir un
produit final qui rpond aux normes dutilisation en agriculture. Hao et al. (2009), ont dfini
le compostage comme une option dauto-strilisation en termes de dsinfection et
dinactivation des germes pathognes. Plusieurs facteurs physico-chimiques influencent le
degr de compostabilit et dhyginisation des substrats (nature du substrat, pH, O2, humidit,
temprature), ces facteurs sont strictement lis aux micro-organismes endognes. Sous
linfluence de lensemble de ces paramtres biotiques et abiotiques le processus de
compostage est caractris par un scnario dactivit et de dveloppement de la microflore
endogne, selon trois catgories microbiennes: microflore msophile, microflore thermophile
et la rapparition de la nouvelle microflore msophile pendant la phase de maturation
(refroidissement). Cette succession est ncessaire pour augmenter la qualit de compost.
Beaucoup de travaux de recherche ont t focaliss sur la microbiologie du compost mais
jusqu prsent ces investigations restent incompltes et peu dtudes existent au sujet
dinteraction intra-communaut, ainsi que celle de chaque groupe avec le substrat au cours
des phases de compostage. Hassen et al. (2001) ont suppos que les analyses systmatiques
microbiologiques des produits de compostage demeurent insuffisantes pour valuer le
processus du compostage.
En plus des catgories pr-cits des micro-organismes habituels du compostage, on trouve en
abondance, les diffrents groupes d'agents pathognes, qui peuvent provenir des substrats
composter, dont les concentrations peuvent dpasser les normes recommandes pour une
utilisation en agriculture. Tous les dchets organiques sont potentiellement recyclables en
amendement, par le biais du compostage. En effet, ce traitement biologique permet dliminer
les risques de contamination de lhomme et/ou des plantes par les germes pathognes et/ou
substances phytotoxiques, ainsi que llimination des mauvaises graines (Mustin, 1987).
La qualit microbiologique des boues varie selon le degr dhygine de la population et de la
proportion de la population raccorde au rseau. Les boues sont connues pour contenir de
169

Partie II

nombreuses espces de parasites (protozoaires, nmatodes et les cestodes), des virus, des
bactries (Salmonelle, Shiguella, Enterobacter, Bacillus, Pseudomonase, Coliformes fcaux et
totaux), insectes, des champignons et prions (Shuval, 1977 ; Cardiergues, 2000 ; Dumontet
et al., 2001 ; Bagge, 2005, Bhatia et al., 2013). Ces agents pathognes excrts dans les selles
des personnes infectes et qui se retrouvent dans les eaux uses dont 60 90 % de la
contamination microbiologique en suspension, se dcantent et enrichissent les boues. Le reste
se retrouve en milieu naturel avec les eaux uses pures la sortie de la station dpuration.
La qualit hyginique ou bien sanitaire des composts des dchets organiques est souvent
qualifie par le suivi des indicateurs biotiques. Selon plusieurs tudes (Pereira-Neto et al.
1986; Golueke, 1991 ; Madeline, 2003 ; Hachicha et al., 2009 ; Barje, 2010) les hautes
tempratures enregistres pendant le processus de compostage (50 -70 C) sont capables
dliminer les agents pathognes entriques; spcialement pendant la phase de stabilisation.
Plusieurs auteurs (Palmisano et al., 1996 ; Vinneras et al, 2003) considrent cette tape, dans
le processus de compostage, comme la seule phase dhyginisation du substrat de
compostage. La temprature est considre comme un facteur ltal des germes pathognes,
des parasites, etc. Nanmoins, ce phnomne daugmentation de la temprature nest pas
homogne dans tous le substrat de compostage et elle est rserve juste pour une seule phase
de compostage, ce qui peut favoriser la re-croissance des germes pathognes (Tnner-Klank
et al., 2007). Lide dattribuer lhyinisation, au cours du compostage, au seul facteur de
temprature est discutable et le rle potentiel des intractions ngatives entre les
microorganismes dans lhyginisation des composts mrite aussi dtre vrifi.
Lobjectif de cette partie de notre travail est de suivre la charge en germes pathognes
essentiels au cours du co-compostage et sassurer de linnocuit des composts finaux en
germes pathognes afin dvaluer leurs degrs dhyginisation. De mme, il sagira de
slectionner les micro-organismes de chaque stade de co-compostage aprs culture sur le
nouveau milieu synthtique base de notre substrat de compost (CTEA). Ceci permettra
disoler les groupes actifs sur notre substrat de co-compostage et de mesurer leur
reproductibilit et valuer leur contribution lhyginisation et la stabilit de compost.
2. Matriel et Mthodes
2.1. Technique des puits dagar
La technique des puits est utilise afin dvaluer lactivit inhibitrice de lextrait aqueux des
stades de co-compostage. Cette technique consiste prparer des boites de glose nutritive
strile avec des puits de volume identique synthtis laide des billes en verre striles. Aprs
170

Partie II

solidification du milieu, 100 l de surnageant de lextrait hydrosoluble (10g/100 ml de NaCl :


9 ) de chaque stade de co-compostage a t test sur plusieurs souches test. Les boites de
ptri sont innocules par les souches tests (Tableau 1), les puits sont remplis avec le
surnageant et aprs 4h de diffusion +4C pour permettre une pr-diffusion des substances
actives, les boites ont t incubes 28C durant 24h. Les zones dinhibition apparaissent
plus claires autour des puits.
Tableau 1: Les microorganismes tests utiliss pour lactivit antimicrobienne
dactinomyctes
Bactries gram- positif
Staphylococcus aureus
CCMM B3

Bactries gram- ngatif


Enterobacter cloacae

Levure et moisissures
Rhodotorula rubra

Micrococcus luteus
ATCC381
Bacillus cereus ATCC

Pseudomonas fluorescens DSM Saccharomyces cerevisiae


50090 ATCC13525
CCMM34
Escherichia coli K12 (W1130) Botrytis cinerea
Pythium ultimum

2. 2. Test de confrontation
Pour slectionner les isolats actifs, la confrontation entre les diffrents actinomyctes isols,
de chaque stade de co-compostage, est utilise sur des souches test. Chaque isolat
dactinomyctes (spores) est inocul par une strie centrale la surface des boites de ptri
contenant la glose nutritive. Les boites sont incubes durant 72h soit 28C, soit 45C,
selon la nature des souches de chaque stade de co-compostage tester. Les souches test ont
t ensemences en strie verticale la strie centrale de la souche analyser, puis incubes
des tempratures favorables de la souche test (28C). Lapparition dune zone dinhibition
entre la souche active dactinomycte et les souches tests se visualise par une zone claire
traduisant une inhibition de croissance.
2.3. Dnombrement des coliformes
Les coliformes totaux et fcaux ont t dtermins sur le desoxycholate (0,1%) lactose agar
respectivement aprs incubation 37C et 44C pendant 24h.
3. Rsultats et Discussion
3.1. Linhibition des germes pathognes
3.1.1. Lactivit inhibitrice de lextrait aqueux
171

Partie II

Parmi les cinq stades analyss trois quatre extraits aqueux reprsentent une activit
inhibitrice importante, limite le dveloppement des souches autour des puits, en crant une
zone claire appele zone dinhibition vis--vis de la majorit des germes pathogne tests
(Figure 1). Le stade initiale (T0), stade 3eme semaine (T3) et le stade 8eme semaine (T8) sont
les stades les plus actifs (Tableau 2a, 2b), vis--vis de la majorit des souches testes (Bacillus
cereus, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Enterobacter cloacae, Escherichia coli,
Pseudomonas fluorescens, Rhodotorula rubra, Saccharomyces cerevisiae, Botrytis cinerea, et
Pythium ultimum) qui sont incapables de se dvelopper auteur des puits. En alternance nous
avons not une activit limite, seulement quelques souches pathognes, des autres stades
4eme semaine (T4), 10eme semaine (T10), et 13eme semaine (T13).

Figure 1 : Activit des extraits aqueux des mlanges A et B vis--vis de Micrococcus luteus
(ML) par la technique des puits

172

Partie II

Tableau 2: Activit antimicrobienne des extraits de composts value par la technique des
puits (technique des puits) (diamtre dinhibition est exprim en mm)
Souches test

Micrococcus
luteus

Mlange A
Temps de co-compostage
(semaines)
0
3
4
8
10
22
0
20

Mlange B
Temps de co-compostage
(semaines)
0
3
4
8
10
22
20
20

Escherichia coli

12

15

20

12

15

25

Staphylococcus
aureus

12

15

26,5

12

22

20

26,5

Enterobacter
cloacae

13

22

13

15

17

22

Pseudomonas
fluorescens

20

20

Bacillus cereus

15

23

31

15

23

27

22

Rhodotorula
rubra

12

12

16

14

12

12

16

14

Saccharomyces
cerevisiae

10

10

15

10

15

Botrytis cinerea

13

19

17

15

13

19

17

15

Cette exprience montre que la quasi-totalit des stades de co-compostage ont une capacit de
produire des substances inhibitrices pour lutter contre une large gamme des pathognes. Ces
rsultats montrent que notre produit de compost surtout sous forme extrait hydrosoluble peut
tre utilis comme un amendement organique pour lutter contre toute contamination cause
par les diffrents germes tests. Les composts ont longtemps t destins tre utiliss en
agriculture comme amendements organiques des sols, pour la gestion de la matire organique
et l'amlioration des proprits physiques et la fertilit du sol (Brady et Weil, 2009). Plusieurs
tudes scientifiques ont mis en vidence laptitude des composts lutter contre les
microorganismes phytopathognes, en particuliers ceux transmis par le sol (Stone et al.,
2004). Dautres auteurs (Scheuerell et Mahaffee, 2004), ont montr que lextrait des composts

173

Partie II

peut lutter efficacement contre certaines maladies foliaires, comme la pourriture grise des
fraises, le mildiou de la pomme de terre et de raisinetc.
Cet effet suppressif des extraits hydrosolubles du composts peut tre attribu aux divers
mcanismes, tel que la prsence de molcules actives particulirement solubles dans leau et
qui proviennent des micro-organismes actifs capables de synthtiser des substances
inhibitrices comme les antibiotiques et/ou autres substances effets antagonistes (Hoitink et
al., 2006). Nanmoins, la prsence des effets inhibiteurs de lextrait hydrosoluble des stades
initiaux peuvent tre expliqu par la composition initiale des substrats composter. En effet,
selon plusieurs auteurs (Ait Baddi et al., 2004 ; Hachicha et al., 2009), la prsence de divers
composs organiques (acides organiques, phnols, alcalodes, aldhydes, ctones,
aminoacides et certains composs flavonques), peut induire des effets inhibiteurs, en raison
de leur teneurs leves dans certains dchets organiques. Selon ces mmes auteurs, ces
composs organiques subissent des abattements trs importants par biodgradation, en
particulier dans la phase de stabilisation, et leurs effets sont gnralement rduits ave le
compostage.
3.1.2. Lactivit inhibitrice des actinomyctes
La confrontation entre diffrents isolats (Figure 2) est effectue pour assurer de la diversit
chimique des molcules produites par les souches actinomyctales; et lutilisation des Grampositif et Gram-ngatif, levures et moisissures est adopte pour mieux valuer la capacit de
production des souches isoles partir des composts.

Figure 2 : Les souches actives isoles (Msophile (M) et Thermophile (T)) et leurs spectres
dinhibition

174

Partie II

Parmi les multitudes souches testes, 12 souches actives ont t isoles (Figure 2). Ces
souches font partie du groupe des actinomyctes et ont un large spectre dinhibition (Tableau
3). Lactivit a t value par la prsence ou labsence dactivit antibactrienne, qui se
traduit par la prsence dune zone dinhibition et qui renseigne sur leur capacit produire des
antibiotiques. Certains microorganismes sont dots des capacits produire des mtabolites
secondaires importants, parmi lesquels les antibiotiques (Raaijmakers et al., 2002).
Tableau 3: Activit antibactrienne des isolats dactinomyctes issus de diffrents stades de
co-compostage
Temps de co-compostage
(semaines)
Nombre dActinomycte
Microflore (T/M)*
Total des isolats actifs
Pourcentage des isolats actifs
Microorganismes test**
Micrococcus luteus
ATCC 10240
Escherichia coli K12
Staphylococcus
aureus CCMM B3
Enterobacter cloacae
Pseudomonas
aeroginosa
Bacillus cereus
ATCC
Rhodorotularubra
Saccharomyces cerevisiae
CCMM34
Botrytis cinerea

T0

T3

T4

T8

T10

T13

5
-

7
-

9
T
1
11,11

11
T M
5 3
72,72

16
T
1
6,25

9
T M
1 1
22,22

Nombre des isolats actifs***


1
2 2 0

0
1

2
2

1
3

0
1

0
0

0
0

0
0

1
1

1
1

0
0

0
0

0
0

1
0

2
3

3
1

0
0

0
1

1
1

*T: Microflore Thermophile, M: Microflore Msophile


**Antagonisme estim par zone de confrontation entre lactinomycte et la souche test.
*** nombre disolats actifs en fonction du stade de co-compostage.

Le rsultat montre que le pourcentage de souches actives vis--vis des bactries Gram-positif
(Figure 3a) est largement suprieur au pourcentage de souches actives vis--vis des bactries
Gram-ngatif (Figure 3b), des levures et des moisissures (Figure 3c), ceci suggre que ces
souches ont une capacit produire des antibiotiques diffrents. Minotti et al. (2004), ont
montr que les actinomyctes ont des activits biologiques diverses.
Les souches actives isoles sont des souches de la phase thermophile et msophile, ces
rsultats laissent suggrer que le pouvoir dauto-hyginisation du compost est non seulement
175

Partie II

li aux facteurs physico-chimiques


chimiques et spcifiquement la temprature, et que la phase
age comme il a t
thermophile nest pas la seul phase dhyginisation durant le compostage
propos par plusieurs auteurs (Redlinger et al., 2001; Vinneras et al
al, 2003). Le mode
dhyginisation, pendant la phase thermophile, semble donc autant li au facteur thermique
quau facteur biotique, celui-ci
ci semble clairement en relation avec les molcules actives

9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

Nombre des isolats actifs

Nombre des isolats actifs

produites par la microflore end


ndognes thermophile au cours du procd.

a
b
Nombre des isolats actifs

7
6
5
4

Rhodorotularubra

Saccharomyces cerevisiae

Botrytis cinerea

1
0
c

Figure 3: Isolats dactinomyctes actifs vis--vis des pathognes Gram-positif


positif (a), Gramngatif (b) et levures, moisissures (c)
176

Partie II

Tnner-Klank et al. (2007), ont confirm quil est impossible dassurer une temprature
homogne dans le compostage de dchet surtout de la matire fcale, et ils ont mis en
vidence la rapparition des entrocoques et de micro-organismes pathognes viables 2236C. Plusieurs tudes ont montr une re-croissance des agents pathognes dans les
composts durant la phase de maturation (Sidhu et al., 2000; Pietronave et al., 2004). Les effets
suppressif des agents pathognes par les composts ont t confirms par diffrents auteurs
(Hoitink, 1990; Pietronave et al., 2004). Toutefois une majorit dauteurs saccordent (Xu et
al., 2011) sur le rle important de la microflore endognes dans le contrle de la croissance
des agents pathognes et dautres risques infectieux (Salmonellasp., Escherichia coli,etc).
Hoitink et Fay (1986), ont montr que les produits de compostage peuvent aussi constituer
une solution contre les attaques phytopathologiques.
A la lumire de nos rsultas, il est clairement tablit que nos composts renferment une large
gamme de micro-organismes endognes susceptibles de contribuer lhyginisation des
composts surtout pendant la phase de maturation. Hoitink et al. (2006), ont expliqu que
leffet suppressif des maladies spcifiques ne peut tre garanti que si le compost est colonis
par des antagonistes spcifiques. Selon certains auteurs (Block et al., 2002; Veeken et al.,
2005), llimination des pathognes est lie l'activit microbienne de la microflore de
compost, qui est son tour en relation avec le niveau du dcomposition de la matire
organique.
La forte abondance et la forte diversit de la microflore active ont t isoles partir du
deuxime stade de compostage T8 (Tableau 3). En fonction du temps de compostage, cette
diversit devient spcifique et se limite presque en un seul groupe actif. Cette rduction de la
diversit du milieu est due aux changements des conditions physico-chimiques du milieu et
la nature des nutriments (Levanon et Pluda, 2002). La prsence des souches isoles de notre
substrat (boues-dchet ligno-cellulosique) sont en majorit des actinomyctes avec des
proprits suppressives contre les pathognes. Il en rsulte que dans nos conditions
exprimentales les produits ultimes du processus de co-compostage, vont renforcer la qualit
sanitaire de notre produit.
3. 2. Lvolution des coliformes fcaux et totaux au cours du co-compostage
Plusieurs tudes ont t bases sur les coliformes fcaux et totaux comme indicateur de la
contamination fcale (Redlinger et al., 2001). Leur prsence est un indicateur de la mauvaise
hyginisation. Au cours du co-compostage de boue-dchet de palmier, nous avons not une
177

Partie II

rduction de lordre de 90% de cette microflore vers la fin du co-compostage


compostage (Figure 4).
Selon Vuorinen et Saharinen (1997); Bhatia et al., (2013), pour un compost hyginis, la
densit en coliformes
formes et streptocoques fcaux doivent tre respectivement de 5102 bactrie/g

12

500

10

400

Coliformes totaux A

Coliformes totaux B

104 UFC/g

104 UFC/g

et 5 103 bactrie/g.

Coliforme fcaux A

300

coliformes fcaux B

200
100

2
0

0
0

Figure 4:: Evolution des coliformes fcaux et totaux des stades initiaux et finaux du co
cocompostage des mlanges A et B

Labattement des coliformes est principalement li aux paramtres physico


physico-chimiques et
biotiques du co-compostage,
entation de la temprature pendant la
compostage, spcifiquement laugm
laugmentation
phase thermophile et la prsence des souches actives inhibitrices. Plusieurs auteur ((Palmisano
et Barlaz, 1996; Lung et al., 2001; Tnner
Hassen et al., 2001; Gaspard et Schwartzbrod,
Tnner-Hassen
2003, Cofie et al., 2006; Tnner-Klank
Tnner
et al., 2007; Kon et al., 2007), ont montr que
laugmentation de la temprature (50
(50-70C)
70C) au cours de compostage conduit une diminution
graduelle des germes pathognes entriques (Salmonella,
(
Shigella,etc) et par consquence
une hyginisation des substrats. Dautres auteurs ((Redlinger
Redlinger et al., 2001; Pietronave et al.,
2004; Bhatia et al., 2013) ont montr une diminution significative des coliformes fcaux et
totaux au cours du compostage. Paniel et al. (2010), nont observ aucune augmentation des
entrocoques fcaux au cours de la phase de stabilisation.
4. Conclusion
Lextrait aqueux des stades de co-compostage
co compostage de la phase de stabilisation (T0), et (T3), et le
stade (T8) de la phase de maturation sont les stades les plus actifs, vis--vis
vis vis dun large spectre
178

Partie II

des souches pathognes (Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Enterobacter cloacae,


Rhodotorula rubra, Saccharomyces cerevisia, Botrytis cinerea, Bacillus cereus et
Pythiumultimum). Le milieu slectif CTEA a permis disoler 12 souches msophiles et
thermophiles (spcifiquement de la phase de maturation) actives type actinomycte au cours
de diffrents stages du co-compostage, capables de produire des mtabolites secondaires.
72,7% des souches actives ont t isoles du stade T8. Les souches isoles ont un pourcentage
lev dinhibition des pathognes Gram-positif. Ces rsultats montrent que le facteur biotique
de la microflore endogne contribue avec un pourcentage important lhyginisation des
composts, ce qui laisse supposer que le pouvoir de contrle de compostage rserv la phase
de stabilisation est sous leffet combin de deux facteurs, thermique et biotique, cependant le
facteur biotique est le facteur le plus important durant la phase de maturation.

179

Partie II

Chapitre 7 : Caractrisation des ufs dhelminthes de la boue de station


dpuration et lefficacit de leur inactivation par procd de compostage

1. Introduction
La contamination fcale est constitu essentiellement de groupe des pathognes entriques
compos des bactries, des virus, et des parasites (protozoaires et helminthes) (Deportes et al.,
1998). Daprs lOMS (2006), la matire fcale contient des agents pathognes responsables
de plusieurs maladies surtout chez les enfants. Les infections parasitaires les plus rpandues
dans le monde entier sont les nmatodes vivant dans l'intestin, transmis d'une personne une
autre. Ces parasites sont rpartis dans l'environnement naturel peuvent y persister
(Gunawardena et al., 2004; Jinabhai et al., 2001). La voie orale est considre comme la
principale voie dinfection parasitaire des tres humains, en contact direct ou indirect par le
sol et/ou leau (Lane et Lloyd, 2002). L'utilisation croissante des eaux uses pour l'irrigation
des cultures a conduit la contamination des lgumes et des salades avec des ufs
d'helminthes (Esteban et al., 2002). Selon Amoah et al. (2006), les lgumes irrigus avec des
eaux uses urbaines, contiennent des concentrations plus leves d'ufs d'Ascaris (55-60%)
que de Trichuris ou schistosoma (2-3%). Maikai et al. (2012), ont montr une contamination
qui dpasse 50% des lgumes consomms habituellement par des ufs d'helminthes. Gupta et
al. (2009), ont identifi sur des plantes irrigues par des eaux uses la prsence dufs
dhelminthes. De nombreuses tudes ont montr que les eaux uses brutes prsentent des
teneurs apprciables de parasites constitues de plusieurs taxons (Amahmid et al., 2002;
Bouhoum et al., 2002; Sylla et Belghyti, 2008). Parmi les parasites identifis on trouve en
abondance lAscaris. Selon Bouhoum et al. (1997), et Ciss et al. (2011), cette abondance est
lie leur rsistance ainsi qu leur mode de transmission (cycle direct). Feachem et al.
(1983), quant eux ont li la prdominance des Ascaris dans l'environnement leur capacit
de production intense dufs et leur capacit survivre dans des conditions difficiles. En
effet, la femelle dAscaris produit 200000 ufs par jour, comparativement la femelle de
Trichuris qui ne produit que 2000-10000 ufs par jour.
Plusieurs auteurs ont montr une forte limination dAscaris lors des traitements des eaux
uses (Lakshminarayana et Abdulappa, 1969; Feachem et al., 1983), avec des taux
dlimination de lordre de 100% des oeufs dAscaris. Amahmid et al. (2002), ont attribu
labattement des ufs de parasites lors du traitement des eaux uses par leur accumulation
180

Partie II

dans la phase solide (les boues). Cette concentration dans les boues se produit soit par
dcantation directe ou bien par adsorption sur la matire en suspension des effluents, dont le
temps varie en fonction despces de parasites. Cette vitesse de sdimentation est estime
selon Shuval et al. (1986), 65cm/h pour les ufs dAscaris. Plusieurs auteurs ont isol des
concentrations diffrentes dufs dhelminthes de 0,12 41,5 ufs/g dans des boues de STEP
(Ayres et al., 1993 ; Schwartzbrod et al., 1987 ; Kone et al., 2007).
Des techniques de dshydratation et chaulage de boues sont souvent utilises comme des
solutions pour rduire et/ou liminer leur charge en parasites. En effet, des nombreuses tudes
ont montr que le pH basique influence la dsintgration des ufs dhelminthes dans les
biosolides (Cappizzi-Banas et al., 2004; Gaspard et Schwartzbrod, 2003). Dautres travaux
montrent la ncessit d'un pH stable entre 12 et 12,6 pendant 20 60 jours pour l'limination
des ufs de nmatodes viables (Reimers et al., 1998; Gaspard et al., 1997). Schuh et al.
(1985), ont observ l'inactivation des ufs d'Ascaris suum aprs 2-4 mois de stockage pH
12,5. Gantzer et al. (2001), ont montr l'influence significative de la temprature et le pH sur
linactivation des ufs de parasites. Lors de lutilisation agricole des boues de step aprs
compostage, de nombreux travaux se sont intresss la vrification de leur innocuit en
termes de polluants organiques (phatalates, HAP, PCB) et mtalliques (Amir et al, 2005,
Lguirati et al., 2005). Nanmoins les donnes relatives au devenir des parasites au cours du
compostage de boues de STEP restent rares.
Dans cette perspective, ce travail se fixe comme objectif didentifier les principaux parasites
existants dans le cas des boues de la station boues actives de Marrakech, et suivre leur
devenir au cours du compostage semi-industriel de boues-dchets ligno-cellulosiques. De
mme, il sagit de dterminer les paramtres qui interviennent dans lefficacit dinactivation
des ufs de parasites par ce procd de co-compostage.
2. Matriel et Mthodes
2.1. Mthode dextraction et identification des ufs dhelminthes
Lanalyse des ufs dhelminthes est effectue sur 5g dchantillon frais, la concentration des
ufs de nmatodes est base sur le principe de la mthode de flottation en prsence de sulfate
de zinc (ZnSO4 : 56,81%) aprs dispersion des particules par le bicarbonate dammonium
(11,9%) (Bowman et al., 2003; US EPA Protocol (1999) modifi par Schwartzbrod (2003),
Kon et al. (2007)). L'identification des ufs de nmatodes a t effectue au grossissement
400 laide dune lame de Mac Master de capacit 0,3 ml. Des microphotographies ont t
ralises laide d'un microscope binoculaire dot dun appareil photographique numrique
181

Partie II

(Moticam 1000, 1,3 M Pixel USB 2,0, lens 16MM, 28). Le nombre total de parasites a t
calcul par gramme dchantillon frais.
3. Rsultats et Discussion
3.1. La charge parasitaire du substrat brut
Lexamen microscopique des chantillons de boues et des stades initiaux de co
co-compostage a
permis de mettre en vidence la prsence des parasites appartenant, en prdominance, aux
sp) (Figure 1)
groupes de nmatodes (oeufs
ufs dAscaris sp., Trichuris sp., et Capillaria., sp
(Tableau 1). Cette
ette prdominance des ufs de nmatodes par rapport aux autres groupes, a t
signale par plusieurs auteurs qui ont rapport que les ufs des nmatodes intestinaux sont
plus rsistants que ceux des cestodes dans les eaux uses (Bouhoum et al., 1996;
Schwartzbrod
rtzbrod et Banas, 2003) et par consquence dans les boues. Les agents pathognes des
eaux uses se concentrent dans la boue lors d
du procd de traitement des effluents, cette
concentration se produit soit par dcantation directe ou bien par adsorption sur la matire en
suspension de leffluent. Les parasites prsents dans les boues sont trs nombreux, mais seuls
les ufs dhelminthes (vers plats et ronds) transmissibles lhomme ou au btail, prsentent
un rel risque sanitaire la manipulation des boues. La contamination des boues par les ufs
dhelminthes est quasi systmatique (Schwartzbrod et al., 1999) et leur provenance est
essentiellement animale.

Ascaris sp.

Capillaria sp.

Trichuris sp
sp.

Figure 1 : ufs dhelminthes isols de la boue de STEP de Marrakech observation


microscopique grossissement 400

On dnombre dans cette tude de 4 27 ufs de nmatodes/g de boue fraiche ((Ascaris sp.,
Capillaria sp., Trichuris sp.)) (Tableau 1). Schwartzbrod et al. (1987), ont mis en vidence
des concentrations de lordre de 0,12 ufs/g de boues et Ayres et al. (1993), ont identifi des
teneurs de 9 41,5 ufs/g de boues. Kone et al. (2
(2007),
007), ont isol jusqu 22
22-38 ufs
182

Partie II

dhelminthes (Ascaris et Trichuris)/g de boues, dont 25 50% viables aprs dshydratation de


la boue. Ces chiffres dpassent les normes, soit moins de 1ufs/g de la directive OMS (2006)
dutilisation des boues sans traitement.
Contrairement aux rfrences bibliographiques (Tonner-Klanket al., 2007, Maurer et al.,
2009), dans notre prsente tude nous avons enregistr une dominance des uf de Capillaria
sp., suivi par ceux de Trichuris sp., et dAscaris sp. La prsence de ces deux espces est trs
frquente en Afrique sub-Saharienne (Silva et al., 2003). Luf d'Ascaris est dcrit comme le
plus rsistant de tous les pathognes. Feachem et al. (1983), ont expliqu la dominance
dAscaris dans lenvironnement leur capacit de production et leur pouvoir de rsistance. La
directive de l'OMS pour l'irrigation des champs avec les eaux uses, demande une moyenne
de moins de 1 ufs dAscaris, Trichuris ou hookworm par litre pendant la priode d'irrigation
(Bouhoum et al., 2002 ; OMS, 2006).

Tableau 1: Evolution des ufs dhelminthes en fonction de co-compostage pour les deux
mlanges A et B
Les ufs
dhelminthes

Total des ufs de

Boues/g
(MF)

Mlange A
T0

T1

MS

TH

Mlange B

T2

T3

MT

T0

T1

MS

TH

T2

T3

MT

4-27

0,3

12

2,3

0,3

Ascaris sp

0-3

0,3

0,5

Capillaria sp

3,5-16,3

0,3

0,3

0,6

0,3

Trichuris sp

0,5-7,6

0,3

0,3

nmatodes

MF: Matire fraiche, MS: premire phase msophile, TH: Phase thermophile, MT : phase de maturation

Labondance en Capillaria sp. (Tableau 1), par rapport aux autres ufs dhelminthes dans
notre cas; peut tre expliqu par la forte charge initiale dans les eaux uses par cette espce
dhelminthe. Elle peut aussi sexpliquer par de possibles variations saisonnires, leur capacit
rsister, ou bien par la charge des aliments (leau et/ou plante irrigue par les eaux uses non
traits). Maikai et al. (2012), ont montr une contamination qui dpasse 50%, des lgumes
consomm habituellement avec des ufs d'helminthes savoir Toxocara sp., Strongyloides
183

Partie II

sp., Taenia sp., Echinococcus sp., Ancylostoma sp., Trichuris sp., et Enterobius sp. Gupta et
al. (2009), ont identifi une contamination de Laitue, Epinards, Cleries, Coriandres avec des
ufs dAscaris lumbricoides (36%), Trichuris trichiura (1,7%) et hookworms (6,4%).
Capillaria, une des espce qui contamine le plus les boues de Marrakech est un parasite plus
dominant chez les animaux (Wobeser, 2002 ; Delahay et al., 2007, McDonald et al., 2008).
Certains auteurs (Rudolphi, 1819 ; Horak, 1992) ont attribu la prsence des hymenolepis sp.,
aux rats vivants dans les rseaux deaux uses. Vosta (1958), quant lui, a montr que
lHymenolepis sp. est reconnu par sa destruction rapide et sa difficult survivre dans les
eaux uses, ainsi que dans les boues.
Le dveloppement dmographique, la qualit de la sant de la population, ainsi que la nature
des rseaux dassainissement (urbain, industriel, abattoiretc) peuvent tre des paramtres
susceptibles dexpliquer la charge initiale de boues en helminthes. Dans notre cas, la station
dpuration de Marrakech reoit la fois des eaux uses de nature urbaines, industrielles, et
dabattoirs. Les paramtres physico-chimiques (dcantation des particules et la vitesse de
sdimentation des ufs, agrgats matire-parasite, dshydratation de boueetc) influence
aussi la charge des boues en parasites (Shuval et al., 1986, Gaspard et Schwartzbrod, 2003;
Cappizzi-banas et al., 2004).
La boue teste est une boue solide (ayant subi un paississement), cependant le processus de
schage na pas beaucoup dinfluence sur la charge parasitaire. Kone et al. (2007), ont montr
que le processus de dshydratation de boue de vidange (boue de la matire fcale) sur lits de
schage n'tait pas assez efficace pour inactiver tous les ufs dhelminthes, 25 50% des
ufs dAscaris et de Trichuris restent viables.
3.2. Labattement des ufs dhelminthes au cours du co-compostage
En comparaison avec la boue seule, les stades initiaux de co-compostage ce sont rvls
moins chargs en ufs dhelminthes avec une diffrence de plus de 25% entre le mlange A
et B (Figure 2). Ceci est d leffet de dilution par le dchet de palmier qui est exempt dufs
dhelminthes. La proportion de la matrice ligno-cellulosique mlange avec la boue influence
ladsorption des ufs dhelminthes, et par consquence leur charge initiale dans chaque
mlange. La nature et la taille des particules sur lesquelles les parasites sont adsorbs a un
effet sur la concentration initiale des ufs dans les chantillons. Kone et al. (2007), ont
montr que lorsque les matriaux dgrads et les particules sont devenus plus fines, la
variabilit diminue en raison de lhomognit de lchantillon, ce qui peut influencer, la
concentration initiale des chantillons de compostage en ufs dhelminthes.
184

Partie II

Total des oeufs d'helminthes /g MF

30
25
20
15
10
5
0
Boue

Mlange B

Mlange A

Figure 2: Total des ufs dhelminthes par g de matire fraiche de boue et des deux stades
initiaux de co-compostage, mlanges A et B

Lanalyse des chantillons de compostage de boue-dchet de palmier montre une diminution


de la concentration en ufs dhelminthe vers la fin de processus de co-compostage (Figure 3).
Un abattement de lordre de 88% et 81% durant la phase thermophile a pu rte not,
respectivement pour les mlanges A et B. A la phase thermophile le taux dabattement des
ufs dAscaris sp., est de lordre de 70 et 50%, de 85 et 92% pour Les ufs de Trichuri sp., et
de 94 et 91% pour les ufs de Capillaria sp., respectivement pour les mlanges A et B. Cette
diminution atteinte jusqu 100% la phase de maturation du co-compostage (Figure 3). Les
ufs dAscaris sp., reprsentent le plus faible taux dabattement en comparaison avec les
autres ufs dhelminthes. Ces rsultats renforcent les donnes bibliographiques en termes de
rsistance des ufs dAscaris par rapport aux autres ufs dhelminthes. Lintense rduction
des ufs dhelminthes pendant la phase thermophile est explique par laugmentation de la
temprature (65C).
L'tendue de l'inactivation thermique des pathognes dpend des tempratures ltales, la dure
d'exposition et les proportions '' mix ratio'' de biosolides (Hay, 1996). Kone et al. (2007), ont
montr une rduction intense de nombre total des ufs dhelminthes en fonction du
compostage, ils ont montr quune temprature suprieure 45C est ltale pour les ufs
dAsaris. Cependant, la concentration relle des ufs d'helminthes dans le compost doit tre
185

Partie II

toujours surveille pour vrifier les hypothses thoriques. Cette tape dans le processus de
compostage est dfinie comme une tape de dsinfection et dhyginisation du compost
(Palmisano et Barlaz, 1996).

Phase
Thermophile
8

8
Oeufs d'helminthes /g MF

7
Oeufs d'helminthes /g MF

Phase
Thermophile

Phase Maturation

6
5
Ascaris sp.

4
Capillaria sp.

Trichuris sp.

7
6
5
Ascaris sp.

4
Capillaria sp.

0
0

Trichurissp.

-1

Phase Maturation

-1 0

Temps de co-compostage (mois)

1
2
3
Temps de co-compostage (mois)
Mlange B

Mlange A

Figure 3: Abattement des ufs dhelminthes au cours du co-compostage des mlanges A et B

La concentration de lammoniac enregistr la phase thermophile contribue labattement


des ufs dhelminthes. L'ammoniac est prsent naturellement dans les eaux uses partir de
lhydrolyse de l'ure et de la dgradation des protines et d'autres composs contenant de
l'azote. Pecson et Nelson (2005), ont montr que la prsence d'ammoniac des concentrations
rencontres dans les boues et les matires fcales (jusqu' 8000 ppm en N) permet datteindre
99% d'inactivation des ufs des tempratures allant jusqu' 14 C. Le traitement alcalin
augmente le pH des boues et contribue l'ammonification. Le NH+3, qui domine des pH
lev (pKa) 9,3 25C, est plus lipophile que NH4+ et peut tre plus facilement diffus
travers des membranes biologiques. Il a t dmontr que NH+3 peut provoquer des
changements de pH qui vont nuire une grande varit d'organismes, y compris un certain
nombre d'agents pathognes des eaux uses (Jenkins et al., 1998). Reimers et al. (1985), ont
montr que l'ajout d'ammoniac dans les boues alcalinises augmente l'inactivation des ufs
d'Ascaris. La permabilit de la coquille des ufs est principalement contrle par la
membrane lipidique qui est lie aux variations de la temprature (Fairbairn et Passey, 1955 ;
Berrett, 1976).
186

Partie II

Dautre composs que l'ammoniac peuvent galement jouer un rle dans l'inactivation des
pathognes, les acides organiques, des aldhydes et des alcools (Reimers et al., 2001).
Nanmoins la temprature est toujours le facteur dominant (Carrington et al., 1991; PlymForshell et al., 1995). Le temps ncessaire pour atteindre des niveaux levs d'inactivation
dhelminthes (> 95%) est trs variable dans la littrature, allant de 2 heures 180 jours
(Brewster et al., 2003; Gantzer et al., 2001; Schuh et al., 1985; Ghiglietti et al., 1997).
Reimers et al. (1998), ont dtermin le temps ncessaire pour inactiver compltement les ufs
d'Ascaris par digestion arobie. Ils ont montr qu 25C linactivation complte ncessite
130 jours, et seulement 2 jours 57C. Feachem et al. (1983), ont dcrit une thorie entre
temps-temprature pour linactivation des pathognes. Vinneras et al. (2003), ont driv une
quation (Eq.1) pour Ascaris sp, afin de dterminer le temps (en heure) ncessaire,
nimporte quelle temprature, pour atteindre une inactivation totale de ces pathognes
(Tableau2)
t = 177* 10-0.1922 (T-45) (1)

T: Temprature; t: temps

Tableau 2: Equations dinactivation en fonction du temps (t: heure) (Feachem et al., 1983;
Vinneras et al., 2003) des diffrentes tempratures (TC)

Helminthes
Ancylostoma
Ascaris
Schistosoma
Taenia

Equation
t= 9,31*10-0,1340(T-45)
t= 177*10-0,1944(T-45)
t= 10*10-0,1844(T-45)
t= 6,6*10-0,1306(T-45)

L'inactivation des ufs d'helminthes dans le compost peut tre efficace si la temprature
l'intrieur des andains est suffisante. Comme le montre lquation et le tableau thorique
dinactivation de Vinneras et al. (2003), on peut conclure que l'inactivation thorique de tous
les ufs d'Ascaris aura lieu si la temprature des andains de compostage est suprieure
45C pendant au moins 5 jours. Le mme rsultat pourrait tre obtenu avec 8 jours 44C, 12
jours 43C, 19 jours 42C, un mois 41C ou 1,5 mois 40C. Cela signifie que la
temprature thoriquement ncessaire pour assurer la mortalit massive des ufs

187

Partie II

dhelminthes dans notre cas de co-compostage et d'autres agents pathognes est largement
atteinte.
Dautres paramtres physico-chimiques peuvent intervenir dans labattement des ufs
dhelminthes, la diminution de taux dhumidit et la stabilisation du pH durant la phase de
maturation. Diffrents auteurs (Sanguinetti et al., 2005) ont montr que les ufs d'Ascaris
peuvent survivre avec un tel taux d'humidit dans les biosolides stocks dans l'environnement.
Nanmoins, la diminution de la concentration deau dans un environnement donn peut
favoriser linactivation des ufs dhelminthes. Un pH basique influence galement la
dsintgration des ufs dhelminthes dans les bio-dchets (Cappizzi-Banas et al, 2004;
Gaspard et Schwartzbrod, 2003). Diverses tudes ont montr la ncessit d'un pH stable entre
12 et 12,6 durant 20 60 jours pour l'limination des ufs de nmatodes (Reimers et al.,
1998; Gaspard et al., 1997). Schuh et al. (1985), ont observ l'inactivation des ufs d'Ascaris
suum aprs 2-4 mois de stockage pH 12,5. Lensemble de ces paramtres justifient le taux
dabattement atteint (100%) des ufs dhelminthes identifis dans notre substrat, et
lefficacit du procd de co-compostage en llimination des pathognes.
4. Conclusion
Lanalyse de boues, montre que les chantillons bruts sont charges en germes parasites
notamment les ufs dAscaris sp., (0-3/g), Capillaria sp., ( 3,516,3/g) et Trichuris sp., (0,5
7,6/g). Cette densit des ufs est suprieure aux normes recommandes pour la rutilisation
des boues en agricultures. Le traitement de ces boues par compostage pendant 6 mois a
permis dobtenir des abattements dufs dhelminthes trs significatifs, rendant ces composts
utilisables en agriculture.
Linactivation des ufs dhelminthes est lie aux diffrents paramtres du co-compostage, en
particulier la temprature, la teneur en ammonium, le pH et le taux dhumidit du milieu.
Laction combine de ces paramtres a permis dobtenir des composts exempt de parasites et
sans risque de contamination.

188

Partie III

Partie III

Chapitre 8 : Evaluation de la phytotoxicit et


la gnotoxicit au cours du co-compostage de
boues de STEP-dchets de palmier

189

Partie III

1. Introduction
Lutilisation des composts comme amendement et/ou fertilisant est une pratique agricole
courante. En fonction de la nature et lorigine de ces amendements, ces pratiques agricoles,
long-terme, peuvent induire une accumulation de composs toxiques comme des lments
traces mtalliques, des contaminants organiques ou dautres types de substances toxiques qui
par voie de consquence prsentent un risque environnemental (Chen et al., 2005; Tulve et al.,
2006). Les mtaux lourds sont connus par leur pouvoir phytotoxique et gnotoxique (Barje et
al., 2012; Shahid et al., 2011). Le chrome (Cr) est lun des contaminants gnralement prsent
dans les effluents de diffrentes activits, principalement ceux des tanneries qui contribuent
la contamination des eaux rejetes dans les stations dpurations et qui se retrouvent dans les
boues actives de Marrakech. Le chrome existe dans les effluents liquides sous deux formes :
le (Cr III et Cr VI). Le chrome trivalent (Cr(III)) est un micro-lment ncessaire aux
mtabolismes des plantes et des animaux (Anderson, 1981), est considr comme
relativement peu toxique (Jiang et al., 2013). Le chrome hexavalent (Cr(VI)) class parmi les
substances les plus toxiques. Ces effets cancrogne et mutagne sont due dune part sa
forte solubilit et sa mobilit, et dautre part sa capacit dinteragir avec lADN des cellules
(Dixit et al., 2002; Wani et al., 2007).
Lvaluation de leffet des polluants est gnralement abord par diffrentes approches:
physico-chimiques et toxicologiques (Fernandez et al., 2005). Les analyses physicochimiques seules ne peuvent en aucun cas suffire pour valuer le degr de toxicit dun
polluant. Les tests biologiques sont donc une alternative de mesure pour valuer la
biodisponibilit des polluants et leurs capacits dinteraction avec les organismes vivants.
Selon diffrents auteurs (Juvonen et al., 2000; Eom et al., 2007; Ansari et Malik, 2009)
lapproche biologique est considre comme un paramtre incontournable de la fiche
signaltique dun polluant. Comme modle biologique, les plantes sont souvent utiliss
comme indicateurs de la toxicit de composs chimiques purs, de mlanges ou pour
lvaluation deffluents liquide et de bio-solides. On peut citer: le test cresson, navet, luzerne,
et laitue, pour lvaluation deffet sur la croissance et le dveloppement des oragnismes. Vicia
faba ou Alium cepa pour le test des micronoyaux, utilis pour valuer des effets gnotoxiques.
Le test des micronoyaux sur racines de Vicia faba est considr parmi les tests les plus
sensibles pour valuer la phytotoxicit et la gnotoxicit dans diffrents milieux solides et
liquides (Cotelle et al., 1999; Monarca et al., 2003 ; Ait Baddi et al., 2004; Jouraiphy et al.,
2007; Barje et al., 2012; Marcato-Romain et al., 2009 ; Kapanen et al., 2013). Les boues de
190

Partie III

station dpuration de la STEP de Marrakech sont connu par leur teneur leve en Cr (El Fels
et al., 2014a). Il est donc ncessaire de sassurer de leur innocuit en tenant spcifiquement
compte de la prsence de Cr sous diffrentes valences dans les boues et les composts.
Lobjectif de cette troisime partie est de sassurer de linnocuit des composts finaux, en
termes de polluants toxiques, susceptibles de provoquer un impact sur le systme sol-plante
lors de lpandage agricole de ces produits, mais aussi dinteragir avec les milieux aquatiques,
rceptacles dun grands nombre de composs. Pour ceci, nous avons combin plusieurs
modles biologiques simultanment pour mieux cerner les effets phytotoxiques et
gnotoxiques des composts.
2. Matriel et Mthodes
2.1. Test de germination et valuation de la phytotoxicit au cours du co-compostage de
boues-dchets de palmier
Les essais de germination ont t effectus sur 20 graines de diffrentes espces vgtales:
Laitue, Luzerne, Navet et Cresson dans les extraits hydrosolubles de composts (100 g/1000
ml), sur des boites de ptri avec papier filtre imbib dextrait du compost. Les essais sont
conduits lobscurit et temprature ambiante (25C), durant 72h (Mayer et al., 1989 ;
Garcia et al., 1991; Cunha-Queda et al., 2007). Trois rptitions ont t effectues pour
chaque stade de co-compostage. Le test de phytotoxicit est effectu par le suivi de
lmergence des graines (test 24h), et la croissance des radicules (test de 72h), Lindice de
germination (IG) est dtermin par rapport lmergence et la croissance radiculaire dans
lextrait hydrosoluble de chaque stade du co-compostage et dans leau distille selon la
relation suivante :

IG% =

NG hydr LR hydr
100
NG eau LR eau

Avec :
NG hydro, NG eau : Nombre de graines germes dans les extraits hydrosolubles et l'eau
distille.
LR hydro, LR eau : Longueur des radicules dans les extraits hydrosolubles et l'eau distille.

191

Partie III

2.2. Dtermination des teneurs du chrome


2.2.1. Dtermination de la concentration du chrome total (Cr)
Aprs une minralisation humide des chantillons de co-compostage des mlanges A et B au
DigiPrep Jr (SCP Sciences), la concentration du chrome total est dtermine par ICP OES
(ICP OES Thermo IRIS Intrepid II XDL Duo). Des chantillons frais de co-compostage ont
t broys dans de lazote liquide, puis une attaque acide (HNO3 70%) a t effectue toute
une nuit temprature ambiante, suivi par une incubation dune heure 80C au DigiPrep,
Aprs ce temps, 5 ml deau oxygne (H2O2 30%) sont rajoute, et laiss 25 min 55C.
Aprs refroidissement, les digestats ont t dilus jusqu' atteindre une concentration de
HNO3 de moins de 10%. Les chantillons digrs sont centrifugs avant lanalyse.
2.2.2. Dosage du chrome hexavalent Cr(VI)
Le chrome hexavalent Cr(VI) a t analys par une mthode colorimtrique (MA. 200-CrHex
1.0; Ahluwalia et Goyal, 2013). Les extraits hydrosolubles de boue et des diffrents stades de
co-compostage des mlanges A et B (100g/L) ont t analyss aprs complexation du Cr(VI)
avec le 1,5-diphenylcarbazide en milieu acide (H2SO4, 2N). Le complexe form est mesur
une longueur donde de 540 nm laide dune spectroscopie ultra-violet visible (secomam
S750). Une gamme talon de 0,1 1 mg/L du Cr(VI) est prpare en utilisant le bichromate
de potassium (K2Cr2O7).
2.3. Test des micronoyaux
2.3.1. Germination
Les graines de vicia faba ont t prpares selon la norme AFNOR (NF T90-327) suite aux
travaux raliss par Ma et al. (1995), et Marcato-Romain et al. (2009). Des graines de Vicia
faba sont mises tremper dans de leau dminralise pendant 12h, puis dbarrasses des
tguments, dsinfectes par lhypochlorite de calcium Ca(ClO)2 1% pendant 10 mn; et mises
germer durant 4 jours entre deux couches de coton hydrophile humide dans une tuve de
germination 242C pour viter la dgradation de certaines molcules photosensibles.
Lorsque les racines primaires atteignent 3 cm, les plantules sont prleves et lextrmit des
racines est coupe sur les 5 premiers millimtres. Ceci permet de favoriser lapparition des
racines secondaires qui nous intressent plus particuliairement.
2.3.2. Test de micronoyaux en milieu solide

192

Partie III

Pour ce test un sol standard Lufa 2.2 a t utilis comme un contrle ngatif et comme
support en mlange avec les stades de co-compostage. Diffrentes dilutions des stades initiaux
et finaux des mlange A et B en prsence de sol Lufa 2.2 ont t prpares (25%, 50%, 75%,
et 100%). Comme lont dcrit Song et al. (2007), le contrle positif est prpar en mlangeant
au sol Lufa 2.2 et 10-5 M dune solution dhydrazide malique (HM).
Les jeunes pousses de Vicia faba obtenues selon le protocole dcrit prcdemment sont
exposes par les racines chaque dilution de co-compost mlang au sol Lufa 2,2.
Lexprience sest droule au phytotron une temprature 24/22C (jour/nuit), avec une
alternance journe/nuit (14h/10h). Lhumidit relative est de 70%, avec une lumire Osram
Nav-T super (600W), lampe de sodium avec trs haute pression fournissant une densit
minimale de flux de photons de 250 mol / l / m. Le taux dhumidit de chaque mlange est
maintenu par ajout deau au 2/3 de la capacit au champ. Aprs 3 jours dexposition les
racines secondaires des trois rptions ont t collectes sparment.
2.3.3. Test de micronoyaux en milieu liquide
Lextrait liquide de chaque stade de co-compostage a t prpar avec un mlange de 100 g
de co-compost frais dans 1000 mL deau, agit pendant 24h. Aprs 30 min de centrifugation
5000 tr/min, les surnageant sont rcuprs.
Les racines primaires des graines de fves (Vicia faba) ont t exposes aux extraits liquides
des stades initiaux et finaux de co-compostage des mlanges A et B, et aux cinq
concentrations de chrome hexavalent (Cr(VI)) (34 10-3, 17 10-3, 34 10-4, 17 10-4, 34 10-6 mM)
prpares avec une solution de K2Cr2O7. Le contrle ngatif et le contrle positif ont t
prpars respectivement avec de leau et une solution dhydrazide malique (HM) (10-5 M).
Aprs 24h dexposition, les plantes ont t dplaces dans des bacs contenants seulement de
leau durant encore 24h. Les racines secondaires des trois rptions ont t collectes
sparment.
2.3.4. Observation et quantification des micronoyaux
Aprs chaque traitement, trois racines secondaires par rptition ont t analyses comme
suit :

Etape de fixation : Les racines secondaires ont t fixes dans un eppendorf par une
solution de carnoy (Acide actique glacial /Ethanol 95%, 1:3; v:v) durant 12h 4C

Etape conservation: Les racines fixes ont t rcupres rinces pendant 10 mn dans
de leau dionise puis conserves dans de lthanol 70% 4C.
193

Partie III

Etape dhydrolyse acide: les racines secondaires sont hydrolyses par de lacide
chloridrique (1N) dans un bain marie 58C pendant 7 mn. Les racines sont alors
rinces leau. Cette tape a pour effet de ramollir les tissus afin de permettre
ltalement de lextrmit racinaire sur la lame de microscope et leur coloration.

Coloration: la coloration des chromosomes a t effectue par de lorcine 1%.

Observation:

une

observation

au

microscope

binoculaire

ralise

augrossissement 400.

Comptage: Pour chaque traitement, 6000 cellules (en mitose, en phase Go et avec
micronoyaux) sont comptes par traitement. Les rsultats sont exprims en % pour
lindice mitotique, en pour les micronoyaux. Le test est considre valable si
lindice mitotique est suprieur 2% (Ma et al., 1995, AFNOR, 2004).

2.4. Analyses statistiques


Les traitements statistiques sont prsents sous forme des moyennes +/- lcart type. Les
donnes ont t analyses par un test dANOVA (Sigmastat, SPSS, Cary, NC). La
comparaison des variances est effectue par un test de Tukey. Les valeurs prsentant une
mme lettre ne sont pas statistiquement diffrentes. Les valeurs prsentants des lettres
diffrentes sont values comme significativement diffrentes avec p <0,05.
3. Rsultats et Discussion
3.1. Test de germination
Les tests de germination montrent que les extraits hydrosolubles des stades initiaux de cocompostage des deux mlanges A et B, induisent des indices de germination (IG) faibles entre
16% et 33% pour le cas du navet, du cresson, et de la luzerne (Figure 1). Pour la laitue aucune
germination nest observe pour les deux stades du compost (T0 et 1 mois), ceci pour les deux
mlanges A et B. Ces rsultats montrent la grande sensibilit de la laitue en comparaison des
autres graines testes. Les faibles taux de germination sont dus aux substances hydrosolubles
phytotoxiques contenues dans les chantillons de boues-dchets de palmier, durant les
premiers stades du co-compostage. La libration des produits de dgradation au cours de la
phase de stabilisation peut aussi contribuer linhibition de la germination (Chapman et al.,
1983). Plusieurs auteurs (Piotrowska et al., 2006; Hachicha et al., 2009) ont montr quau
cours du compostage, des substances trs varies ont un pouvoir inhibiteur important sur la
germination des graines, comme par exemple les acides organiques courte chane, les
phnols, des alcalodes, des aldhydes, des ctones, et certains composs flavonoques.
194

Partie III

L'ammoniac et les mtaux lourds sont aussi des substances phytotoxiques (Mayer et al., 1989;
Keeling et al., 1994 ;Tiquia et al., 1996 ; 2002 ; Novoa-Munoz et al., 2008).

400

250

350
200

300

%IG

Navet
Laitue

100

250
200

Cresson

100

Luzerne

Luzerne

50

0
-50

Laitue

150

Cresson

50

Navet

%IG

150

0
0

-50 0

Temps de co-compostage
Mlange A

Temps de co-compostage
Mlange B

Figure 1 : Evolution de la phytotoxicit au cours du co-compostage des mlanges A et B

Aprs un mois de co-compostage, on remarque une augmentation importante de (IG) surtout


pour la priode deux mois-trois mois (Figure 1). Aprs trois mois de co-compostage, lindice
de germination (IG) a connu une baisse relativement importante pour le cas du cresson,
luzerne et laitue pour le mlange A, et le navet et laitue pour le mlange B. Leffet inhibiteur
des composs toxiques au cours du co-compostage sur la germination des graines, se montre
diffremment en fonction du degr de sensibilit des espces vgtales. Laction simultane
des deux effets (les substances toxiques et la sensibilit) dtermine une rponse globale, qui se
manifeste en consquence pour la majorit des espces par lamlioration de lindice de
germination au cours du compostage (Keeling et al., 1994 ; Aggelis et al., 2003).
Lamlioration de lIG dans notre cas de co-compostage qui dpasse parfois 100% (Figure 1),
confirme un comportement et une sensibilit variable en fonction des espces envers les
lments phytotoxiques et les substances stimulatrices de la germination (Levy et al., 2003 ;
Ribeiro et al., 2007). Diffrents auteurs (Richnow et al., 2003 ; Boopath et al., 2004) ont
attribu laugmentation de lIG la forte rduction des substances phytotoxiques, et des
lipides qui sont susceptibles davoir des effets phytotoxiques. Dautres travaux (Levy et al.,
2003 ; Yangui et al., 2009) ont montr que leffet stimulateur de la germination et la
croissance des radicules dont lIG dpasse 100% est d la teneur en matire organique
stable, la richesse en substances humiques et les lments minraux durant la phase de
195

Partie III

maturation. Diffrents travaux (Barje, 2010; Ouatmane et al., 2002 ; Ait Baddi et al., 2004)
ont montr les mmes volutions de lindice de germination en fonction des stades de
compostage.
Pour les deux essais de compostages, les valeurs dIG pour la majorit des espces tudies
ont connu une diminution vers la fin du processus. Ceci peut sexpliquer, en dehors de
laction des substances phytotoxiques, par la forte charge ionique des extraits hydrosolubles et
la conductivit lectrique. Celle ci peut provoquer un ventuel effet osmotique. Des effets
similaires peuvent tres induits par des concentrations trop importantes de certains lments
minraux tels que le cuivre, le zinc, le manganse ou le bore, qui peuvent gnrer un effet
inhibiteur sur la germination et la croissance des plantes (Mayer et al., 1989 ; MarcatoRomain et al., 2009).
Toutefois, la comparaison par rapport la germination dans l'eau seule, et dans lextrait
hydrosoluble de la boue seule, montre un IG presque nul pour toutes les espces tudies dans
lextrait de la boue. La germination est relativement importante dans l'eau; cela parat tout
fait normal, puisque la composition des graines en substances nutritives, oligolments et
rserves organiques reprsentent une source nutritive qui assure la germination des jeunes
plantules dans leau.
A la lumire de ces rsultats, les taux de germination des composts obtenus aprs 06 mois,
sont suprieurs 50 % et confirment leur maturit comme dcrit par Zucconi et al. (1981).
3. 2. Evolution des formes de chrome au cours du co-compostage
Le suivi de la teneur totale en chrome au cours du co-compostage, montre une augmentation
atteingnant des valeurs de lordre de 106 mg/Kg et 150 mg/Kg (Figure 2a), respectivement
pour les deux mlanges A et B. Ces teneurs totales en chrome restent infrieures aux normes
des composts de boues autoriss pour un pandage agricole. Le chrome hexavalent (Cr(VI))
diminue dans la fraction soluble aprs six mois du co-compostage (Figure 2b). Des rsultats
similaires, sur lvolution de chrome et ses formes, ont t reports par travaux sur les
tanneries (Rai et al., 2006; Shukla et al., 2009).

196

Partie III

Cr total mg/Kg
a

200

Cr(VI) mg/L
b

150
2
100
1
50

0
Boue

B0

A0

B6

Boue

A6

B0

A0

B6

A6

Figure 2: Evolution de diffrentes formes de chrome, chrome total (a) et Cr(VI) (b) des stades
initiaux (A0, B0) et finaux (A6, B6) du co-compostage des mlanges A et B

Plusieurs tudes ont montr que Cr(VI) est fortement toxique (Viti et Giovannetti, 2001;
Zayed et Terry, 2003), et le degr de toxicit est lie au stade doxydation du chrome (Dhal et
al., 2013). Zheng et al. (2007); Shukla et al. (2009), ont indiqu que lextraction squentielle
peut donner plus dinformations sur la spciation chimique des lments traces mtalliques.
Dhal et al. (2013), ont montr que le Cr(VI) est la forme chimique la plus hydrosoluble une
large gamme de pH, bien que la forme du chrome trivalent Cr(III) tend a tre adsorbe sur la
matrice solide (sol) ou prcipite sous forme dhydroxyde de chrome dans un milieu
lgrement acide et/ou alcalin.
La concentration du Cr(VI) dans lextrait hydrosoluble de la boue est de 1,98 mg/L.
Cependant, la concentration des stades initiaux dans les mlanges A et B en Cr(VI), est cinq
fois plus faible que celle dans la boue non traite (Figure 2b). Ceci est d leffet de dilution
de la boue par les dchets de palmier. Nos rsultats montrent que la quantit de chrome total
dans le dchet de palmier est de 0,65 mg/Kg.
Ainsi la concentration de Cr(VI) au cours de co-compostage a diminu significativement avec
la maturit des composts (Figure 2b). Un abattement de 58 et 58,6%, aprs six mois de cocompostage respectivement pour le mlange A et B a pu tre observ. Shukla et al. (2009),
ont montr que la forme toxique Cr(VI) est susceptible de se transformer en Cr(III) au cours
du compostage des effluents de tannerie. Arnfalk et al. (1996), ont enregistr un taux lev
dabattement de Cr(VI) attribu la matire organique. Ceci peut sexpliquer selon
197

Partie III

Stollenwerk et Grove (1985), par la conversion de la forme Cr(VI) en Cr(III) par un donneur
dlectrons savoir la matire organique ou inorganique, qui favorise sa rduction. Dans un
sol ar, ce phnomne est possible des pHs lgrement alcalins. Des rducteurs forts
comme le H2S (Kim et al., 2001), Fe(II) (Lin et al., 2009) et le glycrol (Yurkow et al., 2002)
ont t utiliss afin de rduire le Cr(VI) en Cr(III). Lacide ascorbique joue aussi un rle
important pour la rduction du Cr(VI) en Cr(III) (Xu et al., 2004).
Dans nos conditions exprimentales, le taux dabattement du Cr(VI) est trs important au
cours de la phase thermophile, o la temprature est de 65C, ce dernier est de lordre de
44,5% et 40%, respectivement pour les mlanges A et B. Cependant au cours de la phase de
maturation le taux dabattement du Cr(VI) est de 24% et 30,5%, respectivement pour les deux
mlanges A et B. Ceci peut expliquer que laugmentation de la temprature au cours de la
phase thermophile contribue la diminution du Cr(VI) principalement par volatilisation. Xu
et al. (2004), ont montr que laugmentation de la temprature augmente la rduction du
Cr(VI). Bien que Liu et al. (2013), ont montr que labattement de Cr(VI) augmente, en raison
des changes ioniques qui augmentent avec la temprature, acclrant ainsi la solubilit du
chromate des tempratures leves.
Dautres auteurs ont mis laccent sur les interactions mtal-microorganisme et leur
contribution la diminution et la stabilisation des mtaux lourds dans le sol et dans les
effluents. Bader et al. (2000); Shukla et al. (2007), ont suppos que le milieu de compostage
peut favoriser les conditions de dveloppement de microorganismes tolrants des
concentrations leves en Cr et qui peuvent jouer un rle important la transformation de
mtal en diffrentes formes.
Dautres travaux (Ahluwalia et Goyal, 2013; Dhal et al., 2013), ont cit les diffrents
mcanismes susceptibles dintervenir la transformation de Cr(VI) par les microorganismes
des dchets. Dans les conditions arobies, la rduction des chromates ncessite la prsence du
NADH ou NADPH comme cofacteur. Sous les conditions anarobies, quelques bactries
peuvent utiliser le Cr(VI) comme accepteur dlectrons, et la rduction de Cr(VI) peut se faire
par des ractions chimiques associes avec les composs intra et extracellulaires, savoir les
acides amins, les nuclotides, les sucres, les vitamines et les acides organiques.
Conventionnellement, dans les milieux aqueux le Cr(VI) peut tre transform en Cr(III) via
des changes ioniques ou par rduction chimique et par prcipitation (Vieira et Volesky,
2000; Wang et Chen, 2009).

198

Partie III

3. 3. Evolution de la gnotoxicit au cours du co-compostage de boues-dchets de


palmier
3.3.1. Gnotoxicit de la matrice solide de co-compost
Les chantillons de co-compostage des deux mlanges A et B en mlange avec le sol Lufa
2.2 ne rvle aucun effet gnotoxique (Tableau 1). La frquence des micronoyaux de toutes
les concentrations testes nest pas significativement diffrente de la frquence des
micronoyaux du contrle ngatif, contrairement au contrle positif (HM) (Tableau 1).

Tableau 1: Rsultat de micronoyaux des racines de Vicia faba par approche matrice solide et
sol Lufa 2.2
Indice mitotique
(%)

Echantillons

Micronoyaux
()

Contrle ngatif (Lufa 2.2)

9,160,7

0,340,4

Contrle positif (HM)

5,60,3

17,22,0

Boue

6,270,6

0,790,6

B0

6,891,0

0,690,70

A0

8,42 1,1

0,410,6

B6

9,151,3

0,400,3

A6

9,211,2

0,360,5

Song et al. (2007), ont montr que seuls les rsultats observs aprs deux jours de contact,
aussi bien dans le sol que dans lextrait hydrosoluble, permettent de diagnostiquer et valuer
le degr de toxicit dune substance. Ceci est li au phnomne dinterfrence entre les
polluants et la matire organique de produit de compostage, ce qui affecte la biodisponibilit
des polluants et principalement les mtaux.
Il est reconnu que la matire organique joue un rle significatif pour rduire la disponibilit
des mtaux. Shahid et al. (2012), ont montr que la matrice solide peut agir comme un
chlateur des mtaux. Tejada et al. (2006), ont rapport que la remdiation des sols pollus est
efficace aprs lajout de la matire organique stable. Bolan et al. (2003); Bernhard et al.
(2005), ont montr que le Cu et le Zn de faibles concentrations sont des nutriments
essentiels pour la plante, et leur accumulation dans le sol peuvent avoir des effets toxiques
pour la plante et les microorganismes. Warne et al. (2008), ont expliqu la faible
biodisponibilit des ions de Cu dans le sol par leur chlation par les constituants organiques.
199

Partie III

La concentration des cations Pb2+ libre sont fortement corrls avec la toxicit du Pb (Kim et
al., 2010, Shahid et al., 2011). Plusieurs autres tudes montrent que les substances humiques
peuvent tre utilises en matire de remdiation des sols pollus au Pb (Ehsan et al., 2007;
Saifullah et al., 2010). Lock et Janssen (2001), ont montr que le Cd2+ peut tre adsorb sur
les argiles et sur la matrice humique charge ngativement. Bien que Sarwar et al. (2010), ont
expliqu que les ions Cd2+ sont moins toxiques dans les sols riches en nutriments (N, P, S,
Ca, Mn, Mg). Ceci a t expliqu par le phnomne de comptition avec dautres cations
divalents. Ces rfrences soulignent la forte affinit entre la matire organique et les mtaux,
ce qui peut contribuer la diminution de leur toxicit vis--vis des plantes. De plus, les
paramtres physiques de la matrice de co-compost savoir la porosit peut aussi limiter la
biodisponibilit des polluants aux racines.
3. 3. 2. Gnotoxicit des extraits hydrosolubles de co-compost et de la solution de chrome
hexavalent
Le test micronoyaux de boue et de substrat de co-compostage base de boue en milieu
liquide, montre que lextrait hydrosoluble de la boue non traite provoque une induction
significative du nombre de micronoyaux (8,7 1,04) contre 0,33 0,58 pour le contrle
ngatif (Tableau 2, Figure 3). Le taux de micronoyaux baisse respectivement de 69% et
34,5% aux stades initiaux A0 et B0 des mlanges A et B.
Ces rsultats sont lis leffet de dilution de la boue par le dchet de palmier mais aussi par le
possible pigeage de certains composs dans la matrice poreuse. Le taux de micronoyaux
dans le mlange B est plus lev que dans le mlange A, et il est 10 20 fois plus lev que le
contrle ngatif respectivement pour A0 et B0. Ceci est d aux proportions de dchet de
palmier mlanges avec la boue.

200

Partie III

Micronoyaux

Cellule en division

Figure 3 : Les micronoyaux et les cellules en division dune racine dans llextrait
hydrosoluble de boues

Tableau 2:: Effet gnotoxique au cours du co-compostage


compostage et de diffrentes concentrations du
Cr(VI) par le test micronoyaux (approche extrait hydrosoluble)
Echantillons

Indice mitotique
(%)
6,081,01ab
4,100,59a

Micronoyaux ()

Boue
B0
A0
B6
A6

4,170,73a
4,830,97ab
60,51ab
6,50,45b
7,150,61c

8,71,04b
5,60,7b
2,70,7b
1,330,2a
0,830,4 a

Gamme K2Cr2O7 (mM)


34 10-3
17 10-3
34 10-4
17 10-4
34 10-6

3,101,25ab
5,020,86c
5,950,96b
6,40,58a
5,830,58a

2,950,75ab
8,921,01b
5,21,15b
2,50,48b
1,151,03b

Contrle ngatif
Contrle positif (HM)
Stades de co-compostage
compostage

0,330,58a
212,65c

Aprs six mois de co-compostage


compostage des mlanges
mlange A et B (A6, B6), nous pouvons noter une
diminution drastique de la gnotoxicit de lordre de 70,4 et 77,2%, respectivement pour les
extraits hydrosolubles des mlanges A et B. De mme, nous avons constat une augmentation
19,16% et 34,57%, respectivement pour les mlanges A et
de lindice mitotique de lordre de 19,16
201

Partie III

B (Tableau 2). Ces rsultats indiquent leffet suppressif de la toxicit de la boue aprs coompostage. Il est intressant de signaler leffet des matires organiques stables extraites, et
leur contribution la division cellulaire et par consquence au dveloppement racinaire.
Lopez et al. (2010), ont montr quaprs le compostage de la boue dpuration, aucune
toxicit na t dtecte dans les extraits hydrosolubles.
La diffrence note en termes de frquence des micronoyaux entre les deux approches
(matrice solide et les extraits hydrosolubles de diffrents stades de compostage) peut tre
associe diffrentes origines: la nature et le comportement physiologique des racines dans le
milieu solide et liquide. Tewari et al. (2005); Marcato-Romain et al. (2009), ont montr que la
permabilit des racines est leve dans une solution aqueuse, et la surface dchange est
aussi plus importante dans lextrait hydrosoluble que dans le sol. La spciation et la
concentration des mtaux, comme dj discut, le Cr(VI) est la forme la plus soluble dans
leau et 100 fois plus toxique que la forme trivalente (Cr(III)) (Kapoor et Viraraghavan,
1995 ;Yu et Gu, 2008). Chandra et al. (2004), ont montr que la gnotoxicit est 2 fois plus
leve dans lextrait hydrosoluble de dchets de tannerie que dans le milieu solide.
Les donnes de la littrature, montrent que la boue est un milieu complexe constitue de
divers composs toxiques savoir des HAPs, des PCB et des lment traces mtalliques
(Amir et al., 2005; Kapanen et al., 2013 ; El Fels et al., 2014a). Le Cr(VI) est lun des
composs les plus toxiques de la boue, et il est reconnu inhiber non seulement la division
cellulaire mais aussi llongation cellulaire en induisant des aberrations chromosomiques
(Scoccianti et al., 2006 ; Hou et al., 2014). La capacit de Cr(VI) pntrer les cellules et
interragir avec des constituants cellulaires va renforcer ses effets toxiques. Costa (1991) et
Corradi et al. (1993), ont montr que le Cr (VI) altre les fonctions de la membrane plasmique
conduisant une plasmolyse et l'inhibition de la biosynthse des pigments 48h de
l'exposition au Cr(VI). Un effet inhibiteur du Cr sur l'activit d'amylases et le transport de
sucres a t signal par Hou et al. (2014). En outre, l'activit de certaines protases
augmentent avec les traitements au Cr (Lpez-Luna et al., 2009). Pour les cellules humaines
Vaglenov et al. (1999), ont montr que le Cr(VI) est facilement assimilable par les cellules
via des transporteurs protiques (anion carrier proteins). Les mcanismes molculaires par
lesquels le Cr(VI) cause des dommages dADN impliquent la formation de ponds intra et/ou
inter-catnaires (cross-links) aboutissant des abbrations chromosomiques mais aussi
entrelADN et les protines. Les mcanismes cits ci-dessus peuvent expliquer que le Cr(VI)
gnre des effets gnotoxiques traduit par une augmentation de la frquence des micronoyaux
dans les cellules racinaires de Vicia faba. Cet effet diminue significativement avec
202

Partie III

labattement de Cr(VI) aprs six mois de traitement arobie (Tableau 2, Figure 2). Ceci peut
expliquer leffet de co-compostage sur la diminution de la toxicit de Cr. De plus Shukla et al.
(2009), ont montr que le Cr devient non bio-disponible avec la maturit de compost.
Lvolution de Cr(VI) dans nos conditions exprimentales est positivement corrl (R2 =
0,77) avec leffet gnotoxique au cours du co-compostage (Figure 4). Zheng et al. (2007), ont
montr une corrlation positive entre la fraction de mtal disponible la plante, et la fraction
changeable, ce qui explique le potentiel effet phytotoxique de Cr(VI) par rapport au Cr
adsorb sur la matire organique.

12
10

MN

Boue

8
6

B0

Composts

4
2

A0

gamme Cr(VI)

B6
A6

0
0

3
Cr(VI) mg/L

Figure 4: Indice de corrlation entre le Cr(VI) et MN aux diffrents stades de co-compostage


des mlanges A et B

La figure 4 montre une corrlation entre les doses de Cr(IV) dans la fraction hydrosoluble des
diffrents extraits de boues et de co-composts, ainsi que les doses de Cr(VI) prsent dans les
solutions de bichromate tests. Les rsultats de la figure 4 montrent qu la concentration la
plus leves en Cr (VI) (34 10-3 mM), on note conjointement une diminution de la frquence
des micronoyaux et des divisions cellulaires aux limites de validation du test (3%). Les
micronoyaux ne peuvent tre visible que sur des cellules ayant subits une mitose. La zone
apicale dtude dans les racines, est une zone de croissance active pour llongation des
racines qui est le sige de nombreuses mitoses. Le taux minimum estim par Ma et al. (1995)
pour visualiser de faon optimale les micronoyaux est de 2%. En dessous il est impossible de
compter de faon fiable les micronoyaux forms. La baisse significative du taux de mitose
induit par la dose de Cr test traduit une toxicit aigue qui va engendrer une inhibition des
203

Partie III

mitoses et de ce fait entrainer une diminution du nombre de micronoyaux quantifiable. Ceci


est li la forte cytoxicit du Cr(VI). A des concentrations plus faibles de la solution de
Cr(VI) et aux stades A0 (stade initial mlange A), A6 (stade 6 mois mlange A), et B6 (stade
6 mois mlange B), la frquence des micronoyaux tait trs proche et proportionnelle la
concentration de Cr(VI) (Figure 4). Cependant, pour le mlange B au stade initial (B0) et plus
particulirement pour la boue non traite, les rsultats mettent en vidence une diffrence
significative entre la concentration de Cr(VI) et leffet gnotoxique. Pour le mme nombre de
micronoyaux, la concentration de Cr(VI) dans la boue non traite tait de 1,98 mg/L,
nanmoins il est de 5 mg/L pour la solution de Cr(VI) applique toute seule (Figure 4). Les
rsultats suggrent la prsence dautres composs gnotoxiques dans la boue brute susceptible
damplifier leffet toxique. Il a t dmontr que la boue brute contient diffrents composs
la fois toxiques et gnotoxiques pour les plantes. Parmi eux on cite les acides organiques, les
composs phnolique et pharmaceutique savoir les antibiotiques (El Hajjouji et al., 2007;
Khadra et al., 2012; El Fels et al., 2014a). Ce qui peut provoquer un effet additif et par
consquence une toxicit accrue. Finalement, nos rsultats suggrent que le procd de cocompostage est une alternative efficace pour minimiser et stabiliser ces composs toxiques et
plus spcifiquement le chrome hexavalent.
4. Conclusion
Lanalyse concrtise par le suivi des paramtres biologiques traduit les interactions qui
interviennent entre les polluants des substrats de co-compostage avec notamment les mtaux
et les composs organiques. Aucun effet toxique na t observ en utilisant la matrice solide
de co-compostage. Ceci justifie le pouvoir de la matire organique de co-compostage
complexer les polluants et diminuer leur effet. Les extraits hydrosolubles des stades de cocompostages montrent la faisabilit de cette approche pour valuer le potentiel toxique
(phytotoxique, gnotoxique et cytotoxique) au cours du co-compostage. La concentration et la
dynamique des lments toxiques de la phase hydrosoluble des stades initiaux de cocompostage se rpercutent par une inhibition de germination (IG < 33%) avec une sensibilit
diffrente entre les espces vgtales testes et une frquence significative des micronoyaux.
Aprs six mois de co-compostage les extraits hydrosolubles des co-composts des mlanges A
et B prsentent un taux de phytotoxicit trs faible traduit par un indice de germination qui
dpasse 100%, un taux dabattement de micronoyaux de lordre de 70,4 et 77,2% corrl
positivement avec le taux dabattement de chrome hexavalent (Cr(VI)) avec 58 et 58,6%,
respectivement pour les mlanges A et B. Ces indicateurs biologiques confirment lefficacit
204

Partie III

du processus de co-compostage transformer et stabiliser les polluants notamment le Cr(VI)


de la boue des stations dpuration boues actives.

205

Synthse Conclusion & Perspectives

206

Synthse Conclusion & Perspectives

Dans le cadre du Plan National dAssainissement Liquide au Maroc, la ville de Marrakech


sest dote dune station dpuration boues actives en 2009. Cette station dimensionne
pour un dbit nominal de 90 720 m3/jour (temps sec) et 117 936 m3/jour (dbit moyen
estival), gnre actuellement lquivalent de 130 t/jour environ de boues avec une siccit
moyenne de 22% soit lquivalent au total de 30,8 tonnes de Matire Sche par jour (tMS/J).
Actuellement, les boues dpuration sont vacues vers des sites de dchargement lous et
situs proximit de la dcharge publique de Marrakech. Cette situation engendre des charges
importantes en matire de gestion du dchargement des boues, de location des terrains et de
leur amnagement. Ces charges sont values 50 DH-HT/tonne des boues vacues soit 2,4
MDH-HT/an. En absence de filire dvacuation dfinitive, ces charges ne cessent
daugmenter dune anne lautre. De plus, sur le plan environnemental, cette situation
prsente une source de nuisance srieuse sur les plans paysager, sanitaire et olfactif qui sera
ressentie de plus en plus avec la fermeture de la dcharge publique actuelle, do la ncessit
de rflchir urgement dautres filire de traitement et/ou de valorisation adaptes au
contexte local.
Dans cette perspective nous avons propos de raliser une exprience pilote par la filire du
compostage, en vue daboutir la conception et la ralisation dun guide mthodologique
dexpertise pour apprhender les conditions optimales de russite de cette filire et sa
prennit dans une optique de dveloppement durable. En effet, le compostage est une
alternative intressante au recyclage des dchets organique qui pourrait en grande partie
subvenir aux besoins de sols agricoles, en termes dapport des amendements et/ou fertilisants
contenus dans les boues, en particulier lazote et le phosphore, amliorer la capacit de
rtention deau dans le soletc. En plus de la valorisation agronomique, le traitement de
boues par compostage permettra de rduire leur inocuit, en terme de polluants organiques,
germes pathognes, parasites etc.
La dmarche qui a prvalu pour mettre au point cette mthodologie de compostage
sappuyait sur loptimisation la plus exhaustive possible des conditions de droulement de la
filire en se rfrant aux travaux de la littrature y compris les travaux de notre laboratoire
Ecologie et Environnement ayant ralis une multitudes de travaux sur le compostage de
boues de STEP (Amir, 2005 ; Jouraiphy, 2007 ; Aboulawafa, 2009). Pour ce faire, avant la
mise en pratique, une compilation des informations indispensable et une valuation des
conditions rigoureuses de russite de la filire en termes de la taille des particules, les
conditions daration manuelle et la rectification de lhumidit convenable la croissance des
microorganismes ont t respectes.
207

Synthse Conclusion & Perspectives

Cette exprience a t ralise sur les boues de STEP en mlange avec les dchets verts de
palmier comme un agent structurant, favorisant une aration et un rapport C/N optimal. Deux
essais de co-compostage ont t raliss la ppinire communale de Marrakech, sous forme
dandains (Andain A: 2/3 de dchets de palmier et 1/3 de boues et Andain B: 1/2 de boues et
1/2 de dchets de palmier), pendant 6 mois. Bien quil soit universellement utilis, le
concept de maturit de compost ne fait pas lobjet dune dfinition unique et
gnralement accepte. En effet, la validation de russite de la prsente alternative est base
sur la validation de plusieurs paramtres ainsi quindicateurs qui doivent tre mesurs de
lamont laval du processus, afin de dterminer le degr de stabilit et de maturit des
produits finaux.
Au cours du compostage, les biotransformations des mlanges ont t suivies par les analyses
physico-chimiques notamment (temprature, pH, conductivit, humidit, carbone organique,
azote total Kjeldahl, NH4+, NO3-, taux de cendreetc). Aprs six mois de co-compostage, les
deux mlanges A et B acquirent des rapports caractristiques de composts matures. Etant
donn que les diffrents paramtres tudis montrent une volution convenable de la
temprature, qui a permis de diffrencier deux phases principales : (i) la phase de stabilisation
lorsque la temprature a atteint 65C, est un indicateur de bon fonctionnement du processus et
de degr dhyginisation des substrats, justifi par la diminution de la concentration des
coliformes fcaux et totaux, et par labattement significatif des ufs dhelminthes (Ascaris
sp., Trichuris sp., et Capillaria sp.) des substrat de co-compostage ; (ii) la phase de
maturation caractrise par une baisse de temprature des andains jusqu la temprature
ambiante due au ralentissement de lactivit microbienne qui est lie la stabilisation de la
matire organique du compost, peut tre dfinie comme laugmentation de sa rsistance la
biodgradation, un pH autour de la neutralit d au pouvoir tampon de lhumus. La
minralisation de la matire organique donne des formes dazote minrales dtermines par
le rapport NH4+/NO3- < 1. Cette faible valeur dindice de degr doxydation des substrats par
les microorganismes, indique une raction de nitrification du substrat rsultante du
dveloppement de lactivit des bactries nitrifiantes. Une diminution remarquable du rapport
C/N voisin de 10, explique la diminution du carbone organique au cours du compostage qui
en parallle avec la dcomposition de la matire organique autour de 40%. Cette diminution
de la concentration a lieu essentiellement pendant la phase de stabilisation. La principale
raison de cette diminution est lutilisation par les micro-organismes des substances organiques
indispensables leur mtabolisme. La mesure de cette biodgradabilit fait rfrence
lvolution de la composition biochimique de la matire organique des substrats de
208

Synthse Conclusion & Perspectives

compostage des mlanges A et B. Nous avons not un taux de dcomposition de lordre de


50 et 28 % des polysaccharides, de 24 et 33% pour les composs azots, un taux de
dcomposition trs important dhydrocarbures aliphatiques de 83 et 75%, un taux de
dgradations de 68 et 54,5 % des strodes et un taux de dcomposition des composs ligneux
de 27 et 25%, respectivement pour A et B, aprs 6 mois du co-compostage. La diminution de
ces composs notamment les 7 drivs ligneux identifis dans notre cas de co-compostage
avec diffrents pourcentage (82,59 et 42,55 % pour 2,4-dimthylbenzne; de 78,59 et 75,93 %
pour le 2-mthylnaphthalne; de 72,35 et 63.85 % pour le 1-thyl-2-mthylbenzne; de 66,31
et 64,81 % pour thylbenzne 24,71 et 20,96 % pour le styrne ; de 17,28 et 26,8 % pour
tolune, et de 3,65 et 12,96 % pour le 4-mthylphnol) est le rsultat combin de leur
mtabolisation et leur biotransformation en dautres drivs qui par la suite sincorporent dans
la structure des substances humiques et/ou adsorbs par celles-ci. Ce phnomne est fortement
associ au droulement naturel et classique du processus dhumification de la matire
organique. La diffrence dans le taux de dgradation des composs organiques, ne sont pas
seulement attribus aux conditions physico-chimiques du co-compostage, mais sont
forcment lie lorigine de la matire organique (boue et palmier) composter et leur
proportion mlanges, ce qui peut influencer le degr de stimulation de lactivit enzymatique
des microorganismes endognes (bactries, actinomyctes, et champignons) de chaque
mlange et par consquence la dtermination de degr daromatisation de la matire
organique. La fraction dite substances humiques a augment au cours du co-compostage de
17,3 et 15 g/kg jusqu 30,2 et 26 g/kgMF vers la fin du processus, respectivement pour les
mlanges A et B. Le degr lev daromatisation du mlange A par rapport au mlange B, est
d sa concentration et son enrichissement en prcurseurs des substances humiques de nature
ligno-cellulosique qui proviennent des dchets de palmier. Cette tendance corrobore la
caractrisation spectroscopique FTIR de la matire organique, qui nous a permis de montrer
une nette rduction des structures aliphatiques et carboxyliques par rapport aux structures
aromatiques, signe de la stabilisation de la matire organique et laugmentation de la teneur en
composs rsistants, ce qui reflte le processus dhumification. Lindice de Shannon Weaver
(Ish) reflte le degr de diversit et limportance du processus slectif d'oxydation des chanes
latrales et des sous units des polymres de la lignine tel que lhumification spcifiquement
dans le mlange A. Les stanols 5-stanols (coprostanol) et 5-stigmastanol (24-thyl-5cholestanol) marqueurs fiables de la contamination fcale, leur abattement rgulier en
fonction du temps est un indicateur du degr d'hyginisation des composts finaux. Les
concentrations relatives de thiostranes augmentent avec le temps, ce qui explique que la
209

Synthse Conclusion & Perspectives

raction de strodes avec des espces inorganiques du soufre est favorise par le cocompostage. Nous avons pu conclure que le phnomne de sulfuration de strodes au cours
du co-compostage est produit via les ctones, nous avons alors suggr que le 3thiocampestane est form partir de 24-mthyl-3-ol-5-cholestane et, en consquence, la
configuration du carbone 5 est propose pour tre 5(H). De mme, 3-thiocholestane peut
tre form partir de 5-cholestan-3-ol.
Labattement total des strodes est corrl positivement avec les indicateurs de maturit du
compost, en particulier C/N et NH4+/NO3-, ce qui ouvre la voie dune ventuelle utilisation
des strodes comme indicateur de maturit de compost, voire de dpollution. Dautres
indicateurs comme lestimation des lipides extractibles totaux et les esters mthyliques
dacides gras (FAMEs) indicateurs chimio-taxonomique, peuvent renseigner sur le degr
dvolution des substrats. Le suivi des lipides au cours des deux traitements A et B montre des
variations quantitatives et qualitatives significatives. Aprs six mois de co-compostage, la
teneur en lipides totaux diminue au cours du co-compostage avec un taux dabattement de
43%. Cependant, les FAMEs ont augment de 8,44% 33,3% et de 10,76 43,41%,
respectivement pour les mlanges A et B. Ce rsultat est du la dgradation des lipides par
les microorganismes suite aux volutions des conditions physico-chimiques du milieu. La
diffrence de concentration des lipides entre les deux mlanges est due au pourcentage de la
boue, rservoir des lipides et des microorganismes, qui est lev dans le mlange B.
Nanmoins, la proportion de la boue de chaque mlange ninfluence pas les FAMEs dorigine
non spcifique (C6 :0, C12 :0, C14 :0) qui ont connu une diminution importante. Cependant,
les indicateurs des bactries non spcifiques reprsentent une grande teneur durant la phase
thermophile, le cas du C17 :0 pour le mlange A et C15 :0 pour le mlange B, les indicateurs
Gram-ngatif C18:17c et le C18:19c (cas du mlange A) augmentent spcifiquement
pendant la phase thermophile. Ceci indique la nature des microorganismes thermotolrants
dont les indicateurs voluent diffrement dune phase une autre de chaque mlange en
fonction de lvolution des conditions de compostage. Les FAMEs, indicateurs des bactries
Gram-positif (caractrisant les phases thermophiles) ont diminu vers la fin de cocompostage. Ceci indique une adaptation des micro-organismes aux conditions de maturation
(la diminution de la temprature et lenrichissement du milieu par composs rcalcitrants la
phase de maturation). Les indicateurs taxonomiques des groupes dorigine non spcifique
(ONS) C16 :0 et C18 :0 ont connu une augmentation vers la fin du co-compostage pour les
deux mlanges A et B, indique une intense dcomposition de la matire vgtale.
Laugmentation des rapports C18 :0/C16 :0 ; aC17 :0/aC15 :0 et aC16 :0/C16 :0 pendant la
210

Synthse Conclusion & Perspectives

phase thermophile est un indicateur de stabilisation et maturation des substrats de cocompostage. La maturit du compost final saccompagne aussi dune augmentation de
lindice CPI, ce qui met en vidence lenrichissement du milieu en FAMEs dorigines
vgtales et qui rsultent de lattaque des composs rcalcitrants ligno-cellulosiques. La
diversit totale des indicateurs des microorganismes (Ish tot) a diminu pour les deux
mlanges A et B. Cette tendance indique une adaptation microbienne lors de la succession des
microorganismes au cours du co-compostage, ce qui permet daborder et de dfinir les tapes
de biodgradation de la matire organique au cours du co-compostage. La phase thermophile
est caractrise par le dveloppement des microorganismes thermotolrants et thermophiles
principalement les champignons avec un pourcentage de 40% et 50%, respectivement pour la
microflore msophile et thermophile des mlanges A et B identifis sur le milieu synthtique
base de notre substrat de co-compostage (CTEA). Cependant, la phase de maturation est
caractrise par un pic dvolution dactinomyctes, autour de 90% et 80% respectivement
pour le mlange A et B, ce qui renseigne sur lintense dgradation du substrat rsistant lignocellulosique de notre substrat de co-compostage, et la contribution lhumification et la
maturit des composts. Le suivi de lvolution de lensemble de la biodiversit endogne,
sur le milieu (CTEA) au cours du co-compostage nous a permis de dterminer rellement la
phase thermophile qui est limit 22 jour pour le mlange A et 30 jour pour le mlange B, ce
dcalage en temps est li la concentration des microorganismes de la boue et la nature de
substrat compost. En effet, le fonctionnement de ces microorganismes en fonction de la
concentration de substrat pour chaque phase de co-compostage, permet dattribuer la longue
phase de maturation du mlange A qui reflte le changement de linstallation du groupe
fonctionnel, et linduction de lactivit enzymatique rapide des actinomyctes par la forte
concentration des substrats ligno-cellulosique. Cependant, aucune corrlation entre le
dveloppement de la microflore endogne et lvolution de la temprature des andains na t
trouve sur le milieu GSM. Lapproche slective (CTEA) nous a permis disoler 12 souches
actives dactinomyctes msophiles et thermophile (principalement de la phase de maturation)
doues du pouvoir suppressif vis--vis dun large spectre des germes pathognes (Grampositif, Gram-ngatif et moisissures), ce qui peut montrer quen parallle lvolution de la
temprature le facteur biotique contribue avec un pourcentage lhyginisation des substrats
de co-compostage.
Lvolution prometteuse des composts issus de la boue et dchet de palmier grce lactivit
enzymatiques de la microflore endogne peut fournir un produit de qualit, nanmoins la
fiche signaltique de lassurance dutilisation de composts ne peut tre rassurante quaprs
211

Synthse Conclusion & Perspectives

avoir effectu une analyse fine lchelle molculaire. La boue est constitue dune rserve
en lments minraux qui ragissent fortement avec la fraction organique. Lvaluation de
leffet des lments changeables hydrosolubles lors de la biodgradation de la matire
organique et leffet complexant quexercent les substances humiques est effectue sur
diffrents modles biologiques. Le test de phytotoxicit des graines (Laitue, Navet, Luzerne et
Cresson) dans lextrait hydrosoluble de chaque stade de co-compostage, montre un indice de
germination trs lev aux stades finaux de co-compostage avec une sensibilit diffrente de
chaque espce, ce qui est troitement li la diminution et la dgradation des composs
toxiques susceptibles de provoquer un effet toxique en inhibant la germination des graines.
Lefficacit de processus de co-compostage de stabiliser les polluants est lucid par le test
des micronoyaux sur le model vgtal des racines de Vicia faba, qui sest rvl important
pour toute incidence de gnotoxicit induite par les composs toxiques de la boue,
principalement le chrome hexavalent issu de lactivit industrielle des tanneries de
Marrakech. Nous avons constat que la concentration du chrome total de la boue se concentre
avec la dgradation de la matire au cours du co-compostage, pour atteindre des valeurs de
lordre de 106 mg/Kg et 150 mg/Kg, respectivement pour les deux mlanges A et B. Ces
teneurs totales en chrome restent infrieures aux normes des composts de boues autorises
pour un pandage agricole. Nous avons montr quaprs 3 jours dexposition en milieu solide,
avec diffrentes concentrations de chaque stade de co-compostage des mlanges A et B, que
le nombre de micronoyaux ne dpasse pas celui du contrle ngatif, bien que le pourcentage
de lindice mitotique reste significatif. La forte affinit entre la matire organique et les
contaminants, notamment les mtaux, peut contribuer la diminution de leur toxicit, ceci
soit par leur adsorption par la matire organique soit par leur interfrence avec celle-ci, ce qui
agit sur leur biodisponibilit. Cependant, notre rsultat montre que la gnotoxicit est induite
spcifiquement par le Cr(VI) biodisponible et soluble. Lextrait hydrosoluble de la boue non
trait a montr une frquence importante des micronoyaux, qui correspond une baisse de
lordre de 69 et 34,5%, respectivement aux stades initiaux A0 et B0 des mlanges A et B.
Nanmoins, la frquence de gnotoxicit des stades initiaux reste significative, 10 20 fois
plus leve que le contrle ngatif, respectivement pour le mlange A et B. Ce rsultat
explique dun ct la forte toxicit de la boue toute seule, et de lautre ct leffet du mlange
avec un substrat inerte (en termes de gnotoxicit) la diminution de leffet toxique de la
boue. Bien que la gnotoxicit est significative pour les stades initiaux, en fonction des
teneurs de la boue des deux mlanges A et B, celle-ci subit un abattement significatif de
lordre de 70,4 et 77,2%, aprs six mois de co-compostage, respectivement des mlange A et
212

Synthse Conclusion & Perspectives

B. Nous avons aussi constat une augmentation de lindice mitotique de lordre de 19,16 et
34,57%, respectivement pour les mlanges A et B. On peut conclure que le compostage
permet la diminution et suppression de leffet toxique et gnotoxique des produits composts,
ce qui stipule que cet indice peut tre utilis comme un indice biologique dvaluation de
toxicit des composts.
Nous avons pu montrer quun compost mature est un compost caractris par une diminution
de la gnotoxicit et une contribution positive la croissance des racines. De mme nous
avons pu montrer que les tests faisant appel lextrait hydrosoluble reprsentaient la
technique la plus fiable pour dtecter un effet toxique du compost. Labattement de leffet
gnotoxique au cours du co-compostage est positivement corrl (R =0,77) avec labattement
de Cr(VI) soluble avec 58 et 58,6%, respectivement pour le mlange A et B aprs six mois de
co-compostage. Cependant aucune relation dose-rponse entre la concentration en Cr (VI) et
la frquence des micronoyaux na t observe. Ce rsultat indique dun ct le potentiel effet
phytotoxique de Cr(VI) biodisponible par rapport au Cr adsorb sur la matire organique, et
de lautre ct leffet du co-compostage sur la diminution drastique de Cr(VI) de la boue. Cet
abattement du Cr(VI) durant la phase de stabilisation peut tre amplifi par le phnomne de
volatilisation d la hausse de temprature et/ou le lessivage au moment de larrosage.
Leffet additif et combin des polluants observ au cours de notre exprience tait la seule
explication que nous ayons pu trouver. Ceci rside dans le fait que pour un mme nombre de
micronoyaux, la concentration de Cr(VI) dans la boue non trait tait 4 fois plus faible que
celle de la solution de Cr(VI) applique toute seule. Ceci nous a permis de suggrer la
prsence dautres composs gnotoxiques dans la boue brute susceptible damplifier et de
renforcer leffet toxique. Les rsultats dabattement global de la toxicit, permettent de
conclure que le procd de co-compostage est une alternative efficace pour minimiser et
stabiliser une large gamme de composs toxiques spcifiquement le chrome hexavalent; et
plusieurs mcanismes biotiques et abiotiques peuvent intervenir savoir la biodgradation
des composs toxiques, leur conversion en composs moins toxiques.
Lensemble de nos rsultats conditionnent la ralisation de nos objectifs fixs en matire de
compostage des dchets de station dpuration boue active de Marrakech et dchets de
palmier. Un guide gnral a pu tre tir qui inclut galement une mthodologie dapproche de
validation de notre procd propos, en matire de recyclage et de traitement des boues. A la
lumire de nos expriences ralises sur site, lapplication de cette mthodologie, a mis en
avant les conditions oprationnelles inhrentes la russite de la filire de compostage des
dchets de STEP boue active, et dchets vert.
213

Synthse Conclusion & Perspectives

Notre travail montre de faon trs intressante que la pertinence des diffrents paramtres et
indices physico-chimiques et microbiologiques de maturit et dhyginisation, et les
biomarqueurs de toxicit que nous avons tudi (C/N, NH4+/NO3-, composs ligneux,
strodes, lipides et FAMEs, les substances humiques, lvolution de la microflore endogne,
des ufs dhelminthes, les coliformes fcaux et totaux, test de germination, de micronoyaux
des racines de Vicia faba) confirment la stabilit et la maturit des substrats de cocompostage. Ceci se traduit par lenrichissement des composts par un substrat humifi signe
dvolution de la fraction organique de boue et de dchet de palmier sous laction de
lvolution des paramtres physico-chimiques et de lagglomration spatiale des
communauts des microorganismes endognes principalement les champignons et les
actinomyctes. Par consquence, lvolution du processus a un effet remarquable sur
lhyginisation des substrats qui se reflte par labattement des ufs dhelminthes, des
coliformes et diffrents germes pathognes sous laction combine des facteurs biotiques et
abiotiques, tels que lvolution de la temprature des andains et les souches actives, doues du
pouvoir suppressif. Leffet de la filire de compostage sur labattement des polluants,
principalement le Cr(VI) a t conclu par les rsultats de test de phytotoxicit et gnotoxicit,
qui sont daprs notre exprience indispensables, en plus les paramtres physico-chimiques,
pour mettre en vidence le risque ventuel des substrats de compostage. Nous avons constat,
travers les rsultats de nos expriences, que les tests dans lextrait hydrosoluble sont trs
vivement recommands. Les constatations nous ont permis aussi de conclure que la boue
seule est un substrat toxique, cependant cette toxicit subit un abattement en mlange avec un
substrat organique aprs maturation, dans le cas prsent il sagit de dchet de palmier.
Nanmoins la proportion de la boue utilise influence le degr et le pourcentage de la toxicit
qui se sont toujours rvles significatifs aux stades initiaux des mlanges A et B. Notre
proposition rajuste aux conditions de compostage des deux mlanges A et B, nous a permis
datteindre aprs six mois de traitement un taux significatif et considrable dabattement de
lessentiel de pollutions biologiques et chimiques de la boue, et davoir deux composts
matures qui rpondent aux normes dutilisation. Bien que la synchronisation de lactivit
microbienne en fonction des substrats et la cintique dvolution des deux mlanges A et B
nest pas identique, le degr dvolution, de maturit et dhyginisation des substrats est
similaire. A la lumire de ces rsultats, le choix du mlange B est plus judicieux pour mieux
faire face aux quantits considrables de boues gnres par la STEP de Marrakech, et
lextrapolation de notre exprience grande chelle en ralisant des essais industriels. Dans
ce sens un projet propos par notre Labortaoire Ecologie et Environnement (L2E) (Facult des
214

Synthse Conclusion & Perspectives

Sciences Semlalia, Universit Cadi Ayyad Marrakech) suite lappel doffres du Ministre de
lEnvironnement au Maroc vient dtre retenu pour financement pour 2015. A travers ce
projet, les diffrenst apsects techniques (dimenssionnement) et conomiques (Busines
Plan) seront tudis.
Nous pouvons donc proposer notre scnario complet et pertinent, moins couteux, et plus
propice au sursaut du programme dassainissement liquide de ces dernire annes et qui est
tributaire des moyens financiers actuels. Cette approche, contribuera dsengorger les
dcharges, et limiter la propagation des dpts sauvages. De mme, la mise en place et
lintgration de cette technologie verte Marrakech permettra de recycler les dchets verts
des espaces verts de la ville, et produira des composts dont les sols marocains ont largement
besoin. Cette exprience locale pourra servir dexprience pilote pour dautres STEP
lchelle nationale.

215

Synthse Conclusion & Perspectives

En perspective de ce travail, en plus des aspects techniques et conomiques qui


seront tudis dans le cadre du projet financ par le Ministre de
lEnvironnement, nous suggrons :

Didentifier les souches isoles dactinomyctes actives (analyse biologie molculaire)

De suivre la gnotoxicit dautres molcules toxiques HAPs et dautres lments


traces mtalliques

De faire un essai agronomique au champ qui devrait tre ralis en utilisant les
diffrentes doses de composts des deux mlanges A et B sur les diffrentes culturess
pour dterminer la valeur agronomique des composts.

Raliser ltude conomique de la filire propose.

Un projet de valorisation de boue de STEP lchelle industrielle vient dtre retenu


pour financement pour 2015 par le ministre de lenvironnement au Maroc.

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