BIOMETALURGIA

PRODUCCION,
PROCESAMIENTO,
MANTENIMIENTO E
INCUBACION DE LAS
BACTERIAS.
BIOLIXIVIACION
QUIMIOLITOTROFA
THIOBACILLUS
OXYDANS

CALDERON MEZA, JOEL

2014

INTRODUCCION
En la lixiviacin bacteriana, determinadas variedades de bacterias se utilizan para liberar oro o
metales base de su roca husped mineralgico. Metabolizan la energa de la oxidacin de los
compuestos de sulfuro o hierro ferroso y liberan oro o metales en el proceso. Puede tener lugar
en una pila, depsito o columna de mineral nativo o bocarteado.
Con el fin de trabajar de forma eficaz, los parmetros como el nutriente de xido ferroso, el
dixido de carbono, la salinidad, el oxgeno disponible, la temperatura y el tipo de bacteria
deben establecerse y controlarse. Las pruebas y ensayos precisos de la mena y el desarrollo
del diagrama de flujo para un fin determinado son esenciales para el xito de su proceso de
lixiviacin bacteriana a escala completa. Trabajamos con usted para desarrollar y probar el
proceso de lixiviacin bacteriana que satisface mejor las necesidades de su emplazamiento y la
composicin de la mena.
Es un proceso de disoluciones ejecutadas por un grupo de bacterias que tienen la habilidad de
oxidar minerales sulfurados, permitiendo liberar los valores metlicos contenidos en ellos. Su
objetivo es explotar menas que por tener baja concentracin de metal no se pueden tratar con
mtodos
tradicionales.
Este
proceso
es
utilizado
para
la
extraccin
de
uranio, cobre, zinc, nquel, cobalto, entre otros. Las bacterias producen una solucin cida que
contiene al metal en su forma soluble.
La extraccin y purificacin de metales a partir de minerales es un proceso qumico que
causa contaminacin ambiental. Una alternativa son las bacterias quimilitotroficas del azufre las
que pueden oxidar este elemento y generar cido sulfrico, que solubiliza metales mezclados
con azufre. Este proceso se conoce como Lixiviacin bacteriana se aplica como una excelente
opcin para evitar contaminacin ambiental, el propsito de esta breve revisin es sealar las
principales caractersticas de la Lixiviacin Bacteriana.

MEDIOS DE CULTIVO PARA EL CRECIMIENTO DE BACTERIAS

Medios de cultivo para el crecimiento de bacterias
Para cada bacteria a ser cultivada para cualquier propsito es necesario proveer el ambiente
bioqumico y biofsico apropiado. El ambiente bioqumico (nutricional) se hace disponible como
medio de cultivo, y dependiendo de las necesidades especiales de cada bacteria particular se
ha desarrollado una gran variedad y tipos de medios de cultivo con diferentes propsitos y
utilizaciones. Los medios de cultivo son empleados para el aislamiento y mantenimiento de
cultivos puros de bacterias y tambin son utilizados para la identificacin de bacterias de
acuerdo a sus propiedades bioqumicas y fisiolgicas.
El modo en que las bacterias son cultivadas, y el propsito de los medios de cultivo, varan
ampliamente. Los medios lquidos son utilizados para el crecimiento de lotes de cultivos puros
mientras que los medios slidos son ampliamente utilizados para el aislamiento de cultivos
puros, para la estimacin de poblaciones de bacterias viables, y una variedad de otros
propsitos. El agar, agente glido ms utilizado para medios slidos o semislidos, es un
hidrocoloide derivado de las algas rojas. El agar es utilizado por sus propiedades fsicas nicas
(se funde a 100 grados y permanece lquido hasta enfriarse a 40 grados, la temperatura a la
que se vuelve gel) y porque no puede ser metabolizado por la mayora de las bacterias. Por lo
tanto, como un componente del medio es relativamente inerte, simplemente mantiene (geliza)
los nutrientes que se encuentran en la solucin acuosa.
Los medios de cultivo pueden ser clasificados en varias categoras dependiendo de su
composicin o uso. Un medio qumicamente definido (sinttico) (Tabla 4 y 4b) es un medio en
el que se conoce la exacta composicin qumica. Un medio complejo (indefinido) (Tabla 5 y 5b)
es un medio en el que no se conoce la composicin qumica exacta. Los medios definidos
estn habitualmente compuestos por bioqumicos puros sacados del stock; los medios
complejos habitualmente contienen materiales complejos de origen biolgico tales como la
sangre, la leche, el extracto de levadura o el extracto de carne, cuya composicin qumica
exacta es obviamente indeterminada. Un medio definido es un medio mnimo (Tabla 4) si
provee slo los nutrientes exactos (incluyendo algunos factores de crecimiento) necesarios
para el crecimiento del organismo. La utilizacin de medios mnimos definidos requiere que el
investigador conozca los requerimientos nutricionales exactos de los organismos en cuestin.
Los medios definidos qumicamente son de valor para el estudio de los requerimientos
nutricionales mnimos de los microorganismos, para cultivos enriquecidos, y para una amplia
variedad de estudios fisiolgicos. Los medios complejos habitualmente proveen la gama
completa de factores de crecimiento que pueden ser requeridos por un organismo por lo que
pueden ser utilizados ms prcticamente para cultivar bacterias desconocidas o bacterias
cuyos requerimientos nutricionales son complejos (por ejemplo, organismos que requieren
muchos factores de crecimiento).
Otros conceptos empleados en la construccin de medios de cultivo son los principios de
seleccin y enriquecimiento. Un medio selectivo es aquel que tiene agregados componentes
que inhibirn o prevendrn el crecimiento de ciertos tipos o especies de bacterias y/o
promovern el crecimiento de las especies deseadas. Uno puede tambin ajustar las
condiciones fsicas del medio de cultivo, como el pH y temperatura, para hacerlo selectivo para
organismos capaces de crecer bajo esas condiciones.
Un medio de cultivo puede tambin ser un medio diferencial si permite al investigador distinguir
entre diferentes tipos de bacterias basado en algn rasgo observable de su pauta de
crecimiento en el medio. As, un medio selectivo, diferencial para el aislamiento de

Staphylococcus aureus, el patgeno bacteriano ms comn en los humanos, contiene una

concentracin muy alta de sal (que el estafilococo tolerar) que inhibe a la mayora de las otras
bacterias, mannitol como fuente de azcar fermentativo, y un tinte de indicador de pH. De los
especimenes clnicos, slo el estafilococo crecer. S. aureus es diferenciado de S. epidermidis
(un componente no patgeno de la flora normal) por su capacidad de fermentar el mannitol. Las
colonias fermentadoras de mannitol (S. aureus) producen cidos que reaccionan con el tinte
indicador formando un halo coloreado alrededor de las colonias; las no fermentadoras del
mannitol (S. epidermidis) utilizan otros sustratos no fermentadores en el medio para el
crecimiento y no forman un halo alrededor de sus colonias.
Un medio enriquecido emplea un giro algo diferente. Un medio enriquecido (Tabla 5a y 5b)
contiene algunos componentes que permiten el crecimiento de tipos o especies especficas de
bacterias, habitualmente porque ellas solas pueden utilizar el componente de su ambiente. Sin
embargo, un medio enriquecido puede tener caractersticas selectivas. Un medio enriquecido
para bacterias no simbiticas fijadoras de nitrgeno omite la fuente de nitrgeno agregado al
medio. El medio es inoculado con una fuente potencial de esta bacteria (por ejemplo, una
muestra de suelo) e incubado en la atmsfera en donde la nica fuente de nitrgeno disponible
es es N2. Un medio selectivo enriquecido (Tabla 5b) para el crecimiento de la haloflica extrema
(Halococcus) contiene cerca de un 25% de sal [NaCl], que es requerido por la haloflica
extrema y que inhibe el crecimiento de otros procariotes.

Tabla 4a. Medio mnimo para el crecimiento de Bacillus megaterium.

Un ejemplo de medio qumicamente definido para el crecimiento de bacterias
heterotrficas.

Componente
sucrose
K2HPO4
KH2PO4
(NH4)2HPO4
MgSO4 7H2O
FeSO4 7H2O
MnSO4 H2O
agua
pH 7.0

Cantidad
10.0 g
2.5 g
2.5 g
1.0 g
0.20 g
0.01 g
0.007 g
985 ml

Funcin del componente

C y fuente de energa
buffer pH; fuente de P y K
buffer pH; fuente de P y K
buffer pH; fuente de N y P
fuente de S y Mg++
fuente de Fe++
fuente de Mn++

Tabla 4b. Medio definido (tambin medio enriquecido) para el crecimiento de

Thiobacillus thiooxidans, una bacteria litoautotrfica.

Componente
NH4Cl
KH2PO4
MgSO4 7H2O
CaCl2 2H2O
Azufre elemental
C02
agua

Cantidad
0.52 g
0.28 g
0.25 g
0.07 g
1.56 g
5%*
1000 ml

Funcin del componente

fuente de N
fuente de P y K
fuente de S y Mg++
fuente de Ca++
fuente de energa
fuente de C

pH 3.0
- Aerear el medio en forma intermitente con aire conteniendo 5% de CO 2.

Tabla 5a. Medio complejo para el crecimiento de bacterias fastidiosas.

Componente

Cantida
d

Extracto de carne

1.5 g

Extracto de levadura

3.0 g

Peptona
Glucosa
Agar
agua
pH 6.6

6.0 g
1.0 g
15.0 g
1000 ml

Funcin del componente

Fuente de vitaminas y otros factores
de crecimiento
Fuente de vitaminas y otros factores
de crecimiento
Fuente de aminocidos, N, S, y P
C y fuente de energa
Agente inerte solidificante

Tabla 5b. Medio selectivo enriquecido para el crecimiento de haloflicas extremas.

Componente
Acidos Casamino
Extracto de
levadura
Citrato trisdico
KCl
MgSO4 7 H2O
FeCl2

Cantida
d
7.5 g

Fuente de aminocidos, N, S y P

10.0 g

Fuente de factores de crecimiento

3.0 g
2.0 g
20.0 g
0.023 g

C y fuente de energa
fuente de K+
fuente S y Mg++
fuente Fe++
fuente de Na+ para haloflicas e
inhibidor para no haloflicas

NaCl

250 g

agua
pH 7.4

1000 ml

Funcin del componente

BIOLIXIVIACION
Antecedentes:
A finales del siglo XIX S. Winogradsky describi un grupo de bacterias de diversos
ambientes: suelo, agua y mina, que crecen por oxidacin de minerales con
azufre, hierro, cobre, cobalto, nquel y otros metales, lo que adems asimilan el CO2 y/o
carbonatos como fuente de carbono. Por este tipo de metabolismo bioqumico les defini como
"bacterias quimiolitotroficas y postul que la energa derivada de la oxidacin del in ferroso a
frrico sirve para su crecimiento y asimilacin de CO2" (Snchez-Yez et al., 2000; Harvey y
Crundwell, 1997). A finales de 1979 se les conocan como bacterias autotrficas del hierro,
entonces slo se describan dos gneros: Ferrobacillus y las especies F. ferrooxidans y F.
sulfooxidans y Thiobacillus thiooxidans, est ltima se aisl de un suelo pobre
en materia orgnica y en agua de mina; (Lindstrom et al., 1992; Olson, 1991). La lixiviacin
bacteriana (LB) es una estrategia biolgica que se emplea para la concentracin y extraccin
de metales de minerales sulfurados refractarios de baja ley SMBL (lvarez y Jerez, 1990;
Janssrn et al., 1996).
En hidrometalurgia la Lixiviacin Bacteriana es sencilla, barata y ecolgica, sus productos no
contaminan el ambiente. Una de sus principales ventajas es la econmica, al aprovechar
menas de minerales sulfurados metlicos de baja ley (SMBL), considerados as porque la
concentracin del metal de inters es mnima (10mg/ton del mineral) y porque la extraccin
por mtodos qumicos tradicionales no es rentable, por ello no se explotan a pesar de que
contienen oro, plata, cobre y metales radiactivos: uranio, radio, etc. (Ballesteros et al., 2001;
Fowler y Crundwell, 1998).
El primer informe sobre la LB de SMBL, se public en 1922 con una bacteria quimiolitotrofica
desconocida, est investigacin describi una forma biolgica de extraccin de metales como
alternativa barata para la explotacin de SMBL, durante 30 aos este informe se ignor hasta el
redescubrimiento T. ferrooxidans tolerante a alta concentracin de metales pesados (g L-1): 10
de zinc, 72 de nquel, 30 de cobalto, 55 de cobre y hasta 160 de hierro fundamental en el
incremento del costo de fundicin de minerales, la que obliga a que concentrados de oro y plata
se exploten por LB (Lindstrom et al., 1992).
En general se describen tres mtodos para la extraccin de metales a partir de minerales:
lixiviacin qumica en autoclave, tostacin de sulfuros y LB. En base al mineral que se trata se
sabe que el reto es extraer el metal unido al azufre, ya que ste es la causa de la refraccin
o resistencia del mineral a la separacin de estos metales.
La lixiviacin de sulfuros en autoclave (proceso Sherrit-Gordn), se realiza a
elevada temperatura y presin del oxgeno para la oxidacin y solubilizacin del azufre y su
eliminacin, como la variante de Homestake en Nevada, E.U.A. Por est tcnica el producto de
autoclave, es una solucin cida en la que los metales del mineral son solubles. En tanto un
lodo atrapa las especies inertes como arcillas y slice, en la siguiente etapa; la cianuracin se
aplica para separar: plomo, cobre y zinc, la tcnica se usa en yacimientos de minas de oro con
o sin concentracin de sulfuros, la desventaja de este tratamiento es el alto consumo de
oxgeno proporcional a la concentracin de azufre en el mineral adems los metales de los
minerales deben ser resistentes a la corrosin (Sand et al., 1993; Sugio et al., 1990).

La tostacin es un proceso industrial para la conversin de sulfuros en sulfatos solubles en

solucin cida acuosa, que permite cianuracin normal, despus del lavado de residuos. No
obstante la tostacin genera dixido de azufre (SO2), no recuperable en pequea o
mediana escala, que contamina el ambiente por ello normas de proteccin ambiental restringen
su utilizacin.
La LB es una actividad biolgica conocida desde la antigedad por fenicios, romanos, rabes y
espaoles, que la reportaron en la extraccin de cobre en agua de minas. En 1947 cuando T.
ferrooxidans se aisl por primera vez del drenaje de una mina de carbn bituminoso (Kashefi et
al., 2001; Olson, 1991).
En Espaa en 1950 se report la LB de minerales de cobre en una mina del Ro Tinto, hasta
1970 se confirm que esto fue derivado de la actividad de Thiobacillus sobre el SMBL
(Lindstrom et al., 1993; 1992; Suzuki et al., 1990). Cuando la microbiologa avanz, se reporto
que Thiobacillus como es clave en la recuperacin de metales de valor comercial a partir de
SMBL. Por ello existen patentes de este proceso, incluso para minerales con metales
radioactivos (Ahonen y Touvinen, 1992).
BACTERIAS LIXIVIANTES DE MINERALES
T. thiooxidans es una bacteria Gram negativa quimiolitotrofica obligada, cosmopolita.
Existe informacin sobre tcnicas de aislamiento e identificacin (Brigmon et al., 1995).
Adems su potencial en biohidrometalurga para la extraccin de minerales de: cobre, oro,
plata, uranio y radio, se limita por inhibicin por metales que lixivia (Goebel y Stckebrandt,
1994; Bronwyn et al., 2000). Otras especies de Thiobacillus son sensibles a la acidez como T.
thioparus y T. novellus no oxidan azufre elemental, pero si sus sales adems de compuestos
orgnicos como la glucosa.
T. denitrificans crece en anaerobiosis con nitrato como aceptor final de electrones. T.
ferrooxidans oxida sales de azufre con hierro, T. novellus es quimiolitotrofic facultativo con
un pH ptimo de crecimiento de 7.0. el que permite separar cada especie: T. thiooxidans y T.
ferrooxidans crecen a pH de entre 2.0 y 3.5, T. denitrificans, T. thioparus y T.novellus de entre
7.0 y 7.3 (Groudev y Groudeva, 1993).
THIOBACILLUS SPP Y BACTERIAS LIXIVIANTES DE MINERALES
Las tcnicas de aislamiento para Thiobacillus y las herramientas moleculares revelan
su distribucin en ambientes de mina y suelo. Existen otros procariotes que lixivian SMBL,
investigacin "in situ" en minas para extraccin de oro generan resultados similares
Thiobacillus (Kanishi y Sataru, 1992), estas bacterias nativas de minas, toleran concentraciones
subletales del metal que lixivian, de esa forma aumentan el rendimiento del metal que se extrae
sin elevar el costo del proceso, es ambientalmente seguro, investigacin sobre la ecologa de
stas bacterias las clasifica en base a su temperatura de lixiviacin de SMBL. Se reporta que
bacterias termfilas y mesfilas lixivian minerales "in situ" en minas para la extraccin oro en
Sudfrica (Lovley, 2000; Olson, 1991). De la naturaleza es posible aislar archeabacteria
hipertermofilas y adaptadas a elevada temperatura para la LB de SMBL con cobre, plata y oro,
y aquellas bacterias empleadas donde la temperatura es un factor limitante para la extraccin
de metales (Golovacheva et al, 1992).
El cuadro 1 muestra las principales caractersticas fisiolgicas y bioqumicas de Thiobacillus
requeridas para su explotacin (Lpezarchilla y Amils, 19943), T. ferrooxidans crece por
oxidacin de in ferroso y azufre inorgnico forma sulfato como producto derivado del cido
sulfrico y asimila CO2 como fuente de carbono, su morfologa es semejante a T. thiooxidans,
no oxida el in ferroso, ni lixivia SMBL insolubles. Las variables fisiolgicas del cuadro 1 se
adaptan para optimizar la actividad lixiviante de T. ferrooxidans en funcin del mineral (Lloyd y
Macaskie, 2000).
Cuadro 1. Condiciones de crecimiento para el cultivo de Thiobacillus ferrooxidans y
Archeabacterias* adaptables al mineral sulfurado concentrado refractario.
Valor recomendado

35o C, 100 C*
2.3
-500 mV
10 g-1
10-25
5-7 % (v/v)
(NH4)2SO4 3.0 g-1 (p/v), inclusive N2 (molecular)
CO2 0.2% (v/v), inclusive carbonatos.
O2 intensivo.
Azufre mineral, con tamao menor que 32 micras
FUENTE DE CARBONO, ENERGA Y NITRGENO PARA THIOBACILLUS
Esta especie utiliza como fuente de energa para crecer la oxidacin de compuestos reducidos
de azufre, que incluye el in ferroso soluble y cobre (Mossman et al., 1999).
COMPOSICIN QUMICA DEL MEDIO DE CULTIVO PARA THIOBACILLUS
T. ferrooxidans fija de dixido de carbono o carbonatos, para suplir su demanda de carbono,
comn en quimiolitotroficos por inyeccin de aire para proveer de CO2 y O2. La demanda de
nitrgeno se satisface con N o con formas reducidas de N como amonio y/o nitratos incluye N2
(Harvey y Crundwell, 1997; Suzuki et al., 1990).
OXIDACIN DE IN FERROSO
La oxidacin del in ferroso a frrico no es conocida, se sugiere que Thiobacillus posee dos
sitios de transferencia de electrones en la clula, uno para el sistema de oxidacin del azufre y
otro para hierro localizados en sitios distintos de la membrana celular (Boon y Heijnen, 1998).
El mecanismo de oxidacin del in ferroso en Thiobacillus se inhibe con bloqueadores de
electrones, en la parte externa de su membrana celular. La rusticianina en la bacteria se
controla por la composicin qumica del medio de cultivo, cuando el in ferroso est en elevada
concentracin, si T. ferrooxidans crece slo con azufre elemental como fuente de energa
(Lloyd y Macaskie, 2000), la rusticianina acta en la primera etapa de la cadena transportadora
de electrones, involucra tres citocromos dos tipos C, uno de clase Al y una coenzima Q est
protena depende de que la bacteria reduzca el sulfato asimilatoriamente, l cual despolariza su
membrana para permitir al in ferroso enlazar a sitios de transporte de la protena, funciona
como ligando para la sntesis de complejos susceptibles de oxidacin a pH menor de 3.5. La
sntesis disminuye con rapidez a un pH superior de 2.2, est reaccin biolgica es 500 veces
ms rpida que la oxidacin qumica (Sukla et al., 1992) el proceso requiere pH menor de 3.5
para mantener un gradiente de protones en la membrana celular en el acoplamiento del in
ferroso con la fosforilacin oxidativa (Sand et al., 1993).
LIXIVIACIN DE PIRITA (FES3) POR THIOBACILLUS FERROOXIDANS
T.
ferrooxidans
se
cultiva
en
pirita
como
fuente
de
energa,
el anlisis de microscopio electrnico de transmisin indica cambios en la superficie de la pirita,
asociado con modificacin de su morfologa. T. ferrooxidans sintetiza un mucopolisacrido,
cuando est ntimamente adherido al mineral, ello favorece la oxidacin de azufre para
solubilizar el metal del mineral, este sufre corrosin en el sitio especfico de mayor
concentracin de azufre, esto se detecta en la topografa de la pirita en el sitio del ataque
bacteriano zona de concentracin del sulfuro. La investigacin con tcnicas de
espectroscopia electrnica y fluorescencia de rayos X demuestran la existencia de una capa de
MPS que cubre la superficie del sulfuro como se ilustra en la Figura 1 (Zagury et al., 1994).

Mecanismo de interaccin bacteriasulfuro.

A) Formacin de una "cpsula" en la
regin de lixiviacin por que
contiene
un
transportador/del
sulfuro.
B) Corrosin del sulfuro en la capa
orgnica de absorcin que disuelve
el sulfuro, este es un complejo
soluble de azufre que ingresa en
la clula (Sugio et al., 1990).

EXTRACCIN DE METALES POR LIXIVIACIN BACTERIANA

Los metales se liberan del mineral por solubilizacin con el cido sulfrico derivado de la
oxidacin del azufre en la membrana Thiobacillus, al igual que la del hierro, al igual que en los
minerales de uranio que existen como xidos insolubles aunque no se sabe a detalle el
mecanismo de la LB; el uranio se asocia a pirita y se disuelve por actividad indirecta de
Thiobacillus al formar sulfato frrico, como se expresa en la siguiente ecuacin. El sulfato de
uranio se recupera de la solucin lixiviante por intercambio inico o con solventes orgnicos
(Tuovinen et al., 1991).
Bacteria
UO2 + Fe2(SO4)3 UO2SO4 + 2FeSO4

MECANISMO DIRECTO DE LIXIVIACIN BACTERIANA POR THIOBACILLUS

Existen bacterias quimiolitotroficas oxidan directamente minerales sulfurados concentrados.
Investigacin por microscopio electrnica de transmisin y barrido revela que estas bacterias se
adhieren a la zona de concentracin del azufre para usarlo como fuente de energa y generan
el MPS con el que se asegura la unin fsica cpsula-mineral para la oxidacin del azufre
inorgnico que produce el cido sulfrico, en consecuencia se causa la solubilizacin del metal
del mineral y la desintegracin de su estructura cristalina. (Mossman et al., 1999). Estas
observaciones al microscopio electrnico probaron que Thiobacillus disuelve la superficie del
cristal del mineral en la zona de concentracin del azufre. Se sabe que la naturaleza qumica
de cpsula de Thiobacillus es clave cuando atacan SMBL pues durante est accin se sucede
simultneamente la oxidacin del hierro y el azufre. Se sabe que Thiobacillus oxida hidrxidos
metlicos mediante dos mecanismos para solubilizar el mineral sulfurado de baja ley. Una
implica el ciclo frrico-ferroso o mecanismo indirecto. La otra depende del contacto fsico
bacteria-cristal del mineral independiente del ciclo frrico-ferroso. Los SMBL se solubilizan por
la oxidacin de Thiobacillus en ausencia de in frrico aerobiosis estricta (Arredondo et al.,
1994; Blake et al., 1994; Goebel y Stckebrandt, 1994).
Investigacin reciente sugiere que Thiobacillus oxida paralelamente el azufre y el hierro
reducido ello facilita la lixiviacin del metal de inters. Se reporta que Thiobacillus detecta el
lugar exacto de oxidacin y por quimiotaxis se dirige a ese sitio donde se concentra el azufre
del mineral. Por la oxidacin del sulfuro causa perforaciones en la superficie del cristal del
SMBL cuya profundidad depende del mineral y varia de acuerdo con su composicin qumica.
El proceso se resume como sigue:
a) Oxidacin de Fe2+ a Fe3+ (ferroso a frrico) para la sntesis de energa.
b) Solubilizacin del azufre de la superficie del mineral por el cido sulfrico derivado de su
oxidacin para mantener su crecimiento.
c) Unin directa de la bacteria con la superficie del mineral sulfurado.

La actividad de Thiobacillus sobre la superficie de la pirita se explica en las siguientes

reacciones:
FeS2 + 3 02 + H20 FeS04 + H2SO4
Bacteria
2FesO4 + 02 + H2SO4 Fe(SO4)3 + H20
FeS2 + 302 +2H2O 2H2SO4 + 2S
Bacteria
2S + 3O2 + 2H2O 2H2SO4 (Reaccin 1)
Mientras que la actividad quimiolitotrofica de Thiobacillus sobre la calcopirita se expresa:
Bacteria
2CuFeS2 +8 O2 + H2SO4 2CuSO4 + Fe(S04) + H2O
CuFeS2 + 2Fe2(SO4)3 CuSO4 + 5FeSO4 + 2S= (Reaccin 2)

El sulfuro (S=) producido por Thiobacillus durante la lixiviacin de la pirita (reaccin 2), se oxida
por la bacteria y libera cido sulfrico (reaccin 1). Se conoce el papel cataltico de Thiobacillus
en est transformacin del SMBL. La actividad de los metabolitos derivados de la oxidacin del
azufre requiere un nmero suficiente de Thiobacillus en la superficie del SMBL (Zagury et al.,
1994).
Mecanismo indirecto de minerales por Thiobacillus
El sulfato frrico en solucin y la concentracin de oxgeno son bsicos en la SMBL por
Thiobacillus como: galena (PbS), calcopirita (CuFeS2), bodrnita (Cu5FeS4) y esfalerita (ZnS),
pirita, marcasita (Fe2S), covelita (CuS), calcocita (Cu2S) y molibdenita (MoS2) como lo
reportan Tuovinen et al., (1991). En general se reporta que el in frrico slo en mezcla es la
especie qumica de la lixiviacin de SMBL por Thiobacillus. El in frrico influye indirectamente
acta sobre SMBL. Las reacciones siguientes representan el mecanismo en fases
aerbica/anaerbica por Thiobacillus en minas (Ahonen y Tuovinen, 1992).
(Aerbica) MeS + 2Fe3+ + H2 + 202 Me2+ + 2Fe2+ + S04= + 2H+
(Anaerbica) Fe(S04)3 + FeS2 3FeS04 + 2S=

Cuando Thiobacillus oxida el in ferroso a frrico es cclico por: 1) la interaccin del in frrico
con SMBL y 2) Por regeneracin del in frrico a ferroso por el cido sulfrico liberado,
disminuye el pH el in frrico se reduce a in ferroso para mantener el ciclo en acidez extrema
(Fowler y Crundwell, 1998).
LIXIVIACIN BACTERIANA DE CuFeS2
Thiobacillus lixivia directa e indirectamente minerales por reduccin de in frrico. Normalmente
ambos fenmenos son simultneos en la naturaleza. De los minerales los de cobre la
calcopirita se lixivia biolgicamente. Se reporta que T. ferrooxidans oxida cobre monovalente el
hierro y el azufre. La bacteria oxida directamente estos elementos que son parte de la
calcopirita con valencia reducida con hierro ferroso o sulfato ferroso. Thiobacillus oxida hierro
ferroso y azufre elemental, durante la fase inicial de la oxidacin consume sulfato y el pH
aumenta lo que provoca la precipitacin del sulfato frrico y las sales de cobre como la anterita.

El sulfato frrico se disocia en una reaccin lenta secundaria el hierro forma compuestos como
la jarosita con la regeneracin del sulfato de acuerdo con la siguiente reaccin:
2Fe2 (SO4) + 12H2O 4Fe (OH)3 + 6H2SO4

La lixiviacin de calcopirita por T. ferrooxidans para lixiviar cobre en columna es pobre en

condicin esttica con una recuperacin del 25% en 60 das, un 40% en 70 das, del 60% en
470 das. Razell y Trussell recobraron un 45% de cobre de calcolpirita en condicin esttica, en
agitacin se recuper 35% en 33 das, del 72% al 100% en 12 das, el 59% en 5 das, el 60%
en 4 das, el 79% en 6 das, el 50 al 60% de cobre de calcopirita en 4 a 6 das en un tanque
con oxigenacin continua lo, que muestra que una elevada tensin de oxigeno en el bioreactor
es necesaria para mxima extraccin de metales (Amaro et al., 1994).
FACTORES QUE AFECTAN LA LIXIVIACIN BACTERIANA
La LB por T. ferrooxidans de SMBL depende de la concentracin del in ferroso y del hierro
soluble que afecta el sistema de transporte de electrones en la membrana, cuando oxida
azufre. El pH es un factor critico T. ferrooxidans requiere acidez para que el metal del mineral
facilite la oxidacin del azufre y sntesis de energa con calcopirita. Depende del sulfuro de zinc
de calcocita y covelita que necesitan hierro soluble. El carcter acidoflico de T. ferrooxidans lo
comparte con T. thooxidans con hongos del suelo, levaduras y protozoarios en esa condicin
fisicoqumica el hierro es disponible para la vida (Kusano et al., 1992).
TEMPERATURA OPTIMA DE LIXIVIACIN BACTERIANA
Dos factores crticos afectan la LB de Thiobacillus, el primero el aumento de temperatura por la
bacteria al oxidar el azufre, lo que genera calor durante su crecimiento. El intervalo de
temperatura ptimo para Thiobacillus est entre 25 y 35oC, para mxima oxidacin de in
ferroso a temperatura no mayor de 35 oC y disminuye a 45 oC Thiobacillus luego muere, se
propone usar. Archaeabacteria hipertermofilica acidofilica usan como fuente de energa, SMBL
a temperatura mayor de 80oC, estas bacterias viven en la naturaleza en ambientes extremos.
Por ello se le asocia con la oxidacin de compuestos inorgnicos de S en zonas volcnicas
terrestres y marinas (Snchez-Yez y Farias-Rodrguez, 2002). Estas bacterias representan
una nueva posibilidad para la explotacin de SMBL (Kashefi y Lovley, 2000).
TAMAO DE LA PARTCULA Y EL REA SUPERFICIAL DEL MINERAL EN LA
LIXIVIACIN BACTERIANA.
En soluciones acuosas las partculas slidas del mineral son una fuente de iones. El tamao es
clave pues se rea de contacto facilita la oxidacin lenta o rpida, los que tienen dimensin
cercanas bacterias son ideales para su lixiviacin. Investigacin al respecto sugiere que el MPS
que la bacteria es necesario para su adhesin al mineral, con relacin inversamente
proporcional entre la actividad lixiviante de Thiobacillus sobre SMBL y el tamao de la partcula
a medida de que est es menor la velocidad de oxidacin del azufre es mayor en consecuencia
la extraccin del metal es rpida lo anterior se reporta para mineral de sulfurado de plata
(Gutirrez et al., 2002)
QUIMIOLITOTROFA
En los quimiolitotrofos, el donador de electrones es una molcula inorgnica reducida.
Esta capacidad slo ha evolucionado en ciertos grupos de procariotas
Quimiolitotrofos tpicos: son por lo general respiradores aerobios
Fijan CO2 por el ciclo de Calvin, disponen de reservas de RuBisCo.

FUENTE DE ENERGIA Y NUTRICIN

Las Bacterias del azufre toman compuestos de este como el sulfuro de hidrgeno,
azufre elemental y el tiosulfato, como fuente de energa.

Las Bacterias del hierro son un grupo especializado de Littrofos que son capaces de
usar el hierro reducido como nica fuente de energa.

CARACTERSTICAS

Las bacterias oxidantes del azufre y de sulfuros suelen ser litotrficas y producen
sulfato.

Con excepcin de sulfolobus los littrofos sulfurosos restantes son:

Fologenticamente pertenecen a las bacterias prpuras.

Pueden distinguirse dos amplias clases ecolgicas :

Las que viven en pH neutro

Las que viven en pH cido

Eubacterias y

Las bacterias oxidantes del azufre tambin son capaces de catalizar la oxidacin del
sulfuro.

La mayor parte de las bacterias oxidantes del hierro tambin oxidan el azufre y son
acidoflicas obligadas

Las ferruginosas transforman compuestos solubles de hierro en compuestos insolubles

PRINCIPALES GNEROS
Del azufre:

Thiobacillus
Thiosphera
Thiomicrospira
Thermotrix
Beggiatoa
Sulfolobus

 Del hierro:

A pH neutro:

Gallionella ferruginea
Sphaeritillus natans
Leptothrix ochracea

A pH cido

Thiobacillus ferroxidans

HABITATS DE ALGUNAS BACTERIAS

El Thiobacillus ferroxidans vive en un ambiente en que el cido sulfrico es el cido dominante
y estn presentes grandes cantidades de sulfato.
Bacterias oxidantes del azufre como las Beggiatoa se encuentran en la naturaleza en hbitats
ricos en H2S.
Organismos termfilos extremos como el sulfolobus se desarrolla en hbitats volcnicos a
temperaturas sobre 90C y a valores de pH de 1-5 a condiciones anaerobias.

THIOBACILLUS OXYDANS
Las bacterias ms utilizadas son las especies Thiobacillus oxidans, T. thiooxidans, T.
ferrooxidans y T. dentrificans. Son seres quimiolitoauttrofos obligados, es decir, obtienen su
energa por la oxidacin de elementos presentes en las rocas, como hierro y azufre. En general
estas bacterias requieren, para vivir y reproducirse, de un medio cido (son acidoflicas) con un
pH entre 1 y 5, temperaturas de entre 25C a 30C (hasta 45C para algunas especies) y altas
concentraciones de metales. Algunas son aerbicas y otras anaerbicas.
La bacteria ms estudiada en cuanto a la oxidacin biolgica de los minerales sulfurados es
la Thiobacillus ferroxidans.
Es una bacteria gran negativa anaerbica. Obtiene su energa mediante la oxidacin de
sulfuros (pirita, marcasita, galena,calcopirita, bornita, blenda, covelina), y requiere de CO2 como
fuente de carbono, nitrgeno y fsforo para sintetizar su alimento, adems de una temperatura
entre 28C y 35C.
Las especies Hydrogenophilus son termfilas, creciendo a alrededor de 50 C y obteniendo su
energa de la oxidacin de hidrgeno. Otro gnero,Thiobacillus, fue redefinido para incluir solo
aquellas especies beta proteobacteria. Otros miembros de Thiobacillus fueron transferidos a
Acidithiobacillus, Halothiobacillus y a Thermithiobacillus, ahora colocados en otras familias.
Thiobacillus es usado como control de plagas, donde no tolera condiciones cidas. Si una zona
afectada es tratada consulfuros y Thiobacillus, las bacterias oxidarn al sulfuro hacia cido
sulfrico, destruyendo la peste.

THIOBACILLUS FERROOXIDANS.- Es la bacteria que ms se ha investigado en relacin a la

oxidacin biolgica de los sulfuros metlicos. Actualmente tambin se ha empezado a conocer
el papel de otros microorganismos, en especial de Thiobacillus thiooxidans y Leptospirillum
ferrooxidans. La investigacin microbiolgica tiene mucho que decir, ya que aun existen
muchas preguntas sin contestar sobre las bacterias que realmente estn participando en los
procesos
de
biolixiviacin
que
operan
a
nivel
comercial.
En climas muy ridos (Desierto de Atacama, Chile; Outback de Australia), esta serie de
reacciones puede quedar interrumpida dando origen a sulfatos frricos tales como jarosita,
copiapita
o
coquimbita.
A pesar de que estas reacciones pueden dar a entender que suceden en condiciones
puramente inorgnicas, el entorno biolgico juega un papel decisivo. Por ejemplo, la bacteria
Thiobacillus ferrooxidans es la mayor responsable de la contaminacin relacionada con el
drenaje cido procedente de explotaciones mineras y mineralizaciones en general. Esta es una
bacteria acidfila (propia de ambiente cido), con una fisiologa basada en la fijacin de
carbono a partir del CO2 atmosfrico, obteniendo su energa a partir de oxidacin del hierro (1)
o azufre (2)
Los microorganismos que son responsables de la disolucin de los metales a partir de
minerales son, principalmente, organismos quimiosintticos y autotrficos pertenecientes al
gnero Thiobacillus, aunque como sealamos en un prrafo y tabla anterior, no es la nica. De
las especies de Thiobacillus que se conocen la que ms atencin ha recibido es Thiobacillus
ferrooxidans, cuya presencia fue demostrada por Colmer y Hinkle, a comienzos de los aos 50,
en el drenaje unas minas de carbn, que reportaban altos contenidos de cido y fierro.
T. ferrooxidans presenta forma bacilar, gram negativas, de 0.5 a 1.7 , algunas cepas tienen
flagelos, es quimioautotrfico, capaz de oxidar compuestos inorgnicos como iones ferroso
(Fe(II)) y azufre, los que le sirven de fuente primaria de energa. El carbono necesario para su
arquitectura celular lo obtiene por fijacin de CO2, de manera similar a las plantas verdes (Ciclo
de Calvin-Benson). Es aerobio (requiere de O2 como aceptor final de electrones), acidfilo
(desarrolla en rangos de pH que varan entre 1.5 y 3.0), y a temperaturas que oscilan entre 2535C. Es considerada como el mayor contribuyente en la produccin de aguas cidas que
drenan de depsitos de metales sulfurados, gracias a la capacidad que tienen de oxidar
minerales de disulfuro de fierro, generando soluciones cidas de sulfato frrico.
Thiobacillus ferrooxidans es la bacteria que ms se ha investigado en relacin a la oxidacin
biolgica de los sulfuros metlicos. Actualmente tambin se ha empezado a conocer el papel
de otros microorganismos, en especial de Thiobacillus thiooxidans y Leptospirillum
ferrooxidans. La investigacin microbiolgica tiene mucho que decir, ya que aun existen
muchas preguntas sin contestar sobre las bacterias que realmente estn participando en los
procesos
de
biolixiviacin
que
operan
a
nivel
comercial.
La Universidad de Chile ha sido pionera en ste campo. Los primeros trabajos de
caracterizacin de las bacterias lixiviantes se realizaron a partir de 1973 en el Laboratorio de
Microbiologa de la Facultad de Ciencias Qumicas y Farmacuticas (Prof. Claudio Gonzlez y
colaboradores). En la dcada del 80, numerosos investigadores de la universidad, junto con
investigadores de otras universidades y centros de investigacin, realizaron un ambicioso
proyecto multidisciplinario, que incluyo el estudio de los aspectos moleculares, microbiolgicos
e ingenieriles de la biolixiviacin, realizando contribuciones cientficas y tecnolgicas
reconocidas
a
nivel
mundial.
La empresa nacional no se ha quedado atrs y ha hecho aportes significativos en este tema.
Diferentes divisiones de CODELCO han aplicado la biolixiviacin en la extraccin de cobre

desde ripios y otros. La Sociedad Minera Pudahuel realiz una importante innovacin en este
campo, desarrollando un proceso para la lixiviacin bacteriana de sulfuros secundarios. Esta
tecnologa ha demostrado ser rentable y se aplica actualmente en la mina Lo Aguirre, la
compaa minera Quebrada Blanca y la compaa minera Cerro Colorado.
MECANISMOS BIOLOGICOS
Los siguientes son los diferentes factores biolgicos ms importantes que afectan al proceso de
lixiviacin bacteriana:
* Capacidad de oxidacin directa e indirecta.
* Adherencia a la superficie del mineral.
* Biodiversidad de los microorganismos presentes.
* Estado fisiolgico y presencia de agentes txicos para las bacterias lixiviantes.
Entre todos estos factores, la viabilidad de la poblacin bacteriana y su actividad metablica
parece ser un factor determinante en el xito de un proceso de extraccin por biolixiviacin. Por
esta razn, en la presentacin se discutir especialmente el rol del estado fisiolgico y el efecto
agentes txicos en la viabilidad de las bacterias lixiviantes. En particular, se dar ejemplos de
adaptacin de cultivos a metales txicos (Cu, Zn, Hg) y los mecanismos moleculares de su
resistencia a metales (Hg). Por otra parte se revisar los distintos mtodos analticos
disponibles para la determinacin de la viabilidad de la poblacin bacteriana y su actividad
metablica.
Participacin de la lixiviacin bacteriana en la generacin de los drenajes cidos de mina:
Sin embargo, estas bacterias tambin tienen su lado oscuro, que se manifiesta en la
generacin de cido y la posterior lixiviacin de metales txicos desde desechos y desmontes
de procesos mineros. Esto produce el llamado Drenaje cido de Mina. Ocurre frecuentemente
a partir de desechos de minas abandonadas de carbn o de diferentes sulfuros metlicos y en
el interior de los relaves. Se trata de una contaminacin mltiple, ya que se producen drenajes
fuertemente cidos, con altas concentraciones de sulfato y de iones metlicos en solucin y
con precipitados de diferentes hidrxidos frricos. En la Tabla 1 se presenta un resumen de los
distintos componentes de esta contaminacin. El Drenaje cido de Mina es una
contaminacin inorgnica.

CONCLUSIONES
La extraccin de metales de valor comercial con bacterias quimiolitotroficas de SMBL, es de
inters en biohidrometalurgia para la explotacin de menas que por la baja concentracin del
metal no se tratan con mtodos tradicionales. Aunque se emplean con cualquier mineral con un
alto contenido en azufre resistentes a los mtodos qumicos establecidos, que requieren un
elevado gasto de energa sin que necesariamente el rendimiento sea proporcional a
la inversin. El potencial Thiobacillus y archeabacteria para lixiviar minerales incluso radiactivos
"in situ" o de reactor, abre prometedoras posibilidades para la optimizacin del recurso minero
en
la industria de metalurgia extractiva
en
especial si
se
realizan
verdaderas acciones conjuntas entre la academia y la industria.

BIBLIOGRAFA

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experiments at suboptimal temperatures. Appl Environ. Microbiol. 58 :600-606
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Thiobacillus ferrooxidans affects its adhesion to solids. Appl. Environ. Microbiol. 60: 2846-2851.

https://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20090828172019AAIWDAr

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http://www.monografias.com/trabajos15/biolixiviacion/biolixiviacion.shtml

http://www.monografias.com/trabajos7/liva/liva.shtml