5 El tejido conectivo incluye un grupo diverso de tejidas con distintas funciones El tejido conectivo se compone de células y de una matriz. extracelular que incluye fibras extracelulares, sustancia fundamental y Iquido tisular. Representa un vasto compartimiento continuo en todo el organismo, li- mitado por las Iminas basales de los distintos epitelios, por las laminas basales 0 externas musculares y nervio- sas y por el endotelio vascular, E| papel que desempefian y la funcién que cumplen los distintos tejidos conectivos dependen de: + Tipo de células presentes + Tipos de fibras + Caracteristicas de la sustancia fundamental Por ejemplo, en lo que se describe como “tejido co- nectivo laxo” hay una cantidad importante de distintos tipos celulares. Uno de ellos, el fibroblasto, es responsa- ble de la produccién de las fibras extracelulares que ‘cumplen un papel estructural en el tejido, y de la pro- duccién y el mantenimiento de la sustancia fundamen- Cuadro §-1, Clasificacién del tejido conective ‘Tefido conectivo propiamente dicho ‘Telido conective laxo ‘Tejido conective denso No modelado Modlelado Tejido conectivo especializado* ‘Tejido adipose (capitulo 6) Tejido sanguineo (eapitalo 9) Tejido dseo (capitulo 8) Tejido cartlaginoso (capttulo 7) Tejido hemopoystico (capitulo 9) TejidoTinfoide (capitulo 13) ‘Tejido conectivo embrionario ‘Mesénguima Tejido eonect Antes se separaan com categorias de ido coneetiveexpecalizadn a eda csc yal edo reticular, Se siete car com ejemplos de tejido lastin cler- {or Higatentorasocados con la columna vertebral y Ia inion media de ls arte ‘has sastiens. La caractesticaditintva deltoid alco os fa presence Js roticulres cele retires, que en conjmtofermiam una re cheno ‘ul El tjdo reicular sve como exroma dels Grganas hemepoyetics (expec Fresno a cdl daca rojs) nds (gangs Tintin y zo, pero 0 9) Tejido conectivo tal. Otros tipos celutares, tales como los plasmocitos, los macréfagos y los eosin6filos, para nombrar unos pocos, estén relacionados con el sistema de defensa del orga- nismo; actiian dentro de la sustancia fundamental del te- jido. En contraste, el hueso, otra variedad de tejido co- nectivo, contiene un tinico tipo celular relacionado con Ia produccién de las fibras que forman la mayor parte del tejido dseo. El hueso tiene 1a caracterfstica exclusiva ‘0 especial de un tejido conectivo de presentar sus fibras, organizadas en un patrén muy especffico, que se caleifi- ca para lograr la dureza propia del tipo de tejido dseo. De modo similar, en los tendones y ligamentos las fi- bras son la caracteristica predominante del tejido. Estas estén distribuidas en paralelo y densamente unidas para proporcionar un maximo de fuerza. Las células que pro- ducen [as fibras son relativamente escasas y hay muy poca sustancia fundamental CLASIFICACION DEL TEJIDO CONECTIVO La clasificacién depende de la composicion y de (a organizacién de los componentes celulares y extracelulares, y de las funciones especiales El término “tejido conectivo” incluye distintos tejidos con propiedades funcionales diversas y con ciertas ca- racteristicas comunes que permiten su agrupacién. Por convenir a su descripcisn se clasifican de manera tal que reflejen esas propiedades. En consecuencia, el cuadro 5-1 provee una clasificacin que incluye subtipos de los principales tejidos conectivos. El tejido conectivo pro- piamente dicho, la primera categorfa del cuadro, se pre- senta en este capitulo, asf como también los tejidos co- nectivos del embrién. Tiene particular importancia co- nocer ei mesénquima para Ia comprensién basica del te- Jido conectivo, incluso de los tejidos conectivos especia- lizados de los préximos capftulos, TEJIDO CONECTIVO PROPIAMENTE DICHO Los tejidos que pertenecen a esta categoria se dividen cen dos subtipos generales:+ Tejido conectivo laxo + Tejido conectivo denso Tejido conectivo laxo Eltejido conectivo laxo, también denominado tefido areolar, se caracteriza por presentar fibras poco ordenadas y abundantes células El tejido conectivo laxo, también llamado tejido areolar, es un tejido conectivo celular, Las fibras son delgadas y bastante escasas y la sustancia fundamental es abundante, ocupa mas volumen que las fibras. Tiene una apariencia gelatinosa y es importante para la difu- sign de oxfgeno y de nutrientes desde los vasos de pe- quefio calibre qué atraviesan este tejido conectivo y para la difusién de metabolitos hacia los vasos (més adelante en este capitulo se describiré la sustancia fundamental con més detalle). La principal localizacién del tejido conectivo laxo es por debajo de los epitelios que recubren la superficie del cuerpo y que revisten las cavidades internas, También esté relacionado con el epitelio de las gldndulas y el que rodea los vasos mas pequefios. En consecuencia, la loca- lizacién de este tejido representa el sitio inicial donde pueden ser atacados y destruidos los antigenos y las sus- tancias extrafias, tales como bacterias, que hayan atrave- sado una superficie epitelial. La mayor parte de los tipos celulares del tejido conectivo laxo son células en trénsi- to que migran desde los vasos sanguineos locales en res- puesta a estimulos especificos. Por lo tanto, aquf ocu- ren las reacciones inflamatorias y alérgicas o inmunes. En estas condiciones, el tejido conectivo laxo sufte con- siderable aumento de tamafio. En muchas zonas del or- ganismo, la presencia constante de*sustancias extrat jinvasoras resulta en una permanente poblacién destaca- da de estas células de defensa. Esto es més notable en la Lamina propia, e\ tejido conectivo laxo de las membra- ras mucosas, como las de los aparatos respiratorio y di- gestivo. Tejido conectivo denso El tejido conectivo denso se puede subclasiticar en: + Tejido conectivo denso no modelado + Tejido conectivo denso modelado Estos dos tipos celulares se diferencian s6lo por la or- ganizacién de sus fibras, En el primero las fibras tienen orientacién variable, mientras que en el segundo las fi- bras estén mas ordenadas. Son ejemplos de tejido conec- tivo denso modelado los ligamentos, Ios tendones y las aponeur Fig. 5. Microfotografia en la que se comparan los tejidos conestivos laxo y denso de la gldndula mamaria en un preparado tenido con ematoxi lna-eosina (HE). A la izquierda, alrededor del epitelio slanclular (Ep) se ve tejido conectivo lane. A Ta derecha y ariba ala izquierda de la figura se puede apreciar tejido conectivo denso no modelado (CT). El tejido conectivo laxo (LCT) consta de fibras cokgenas distribuidas en forma de ordenada y abundantes células. Obsérvese la gran cantidad de nicleos que apateven en esta imagen con escaso aumento, En contrast, en el tejigo conectivo denso se compricha una escasez relative de nfcleos y ¢l colageno, representado por fibras muy gruesas, es considerablemente més abun- ‘ante, 200,El tejido conectivo denso no modelado se caracteriza por tener abundantes fibras y escasas células Las fibras representan la mayor parte del tejido co- nectivo denso (fig, 5-1). La poblacién celular es ese: y se caracteriza por ser de un tinico tipo, los fibroblas tos. Comparativamente, también es escasa la sustancia fundamental. Debido a la elevada proporeién de fibras de colgeno que constituyen el tejido conectivo denso no modelado. éste proporciona notable resistencia. Las fibras se caracterizan por estar distribuidas en haces orientados en distintas direcciones (por lo tanto, es irre- gular) para soportar las tensiones a las cuales puede e lar sujeto un Grgano o estructura, Los érganos huecos, por ejemplo el tubo digestivo, presentan una capa dife- renciada de tejido conectivo denso no modelado, deno- minado submucosa, en la cual los haces de fibras se ubi- can en distintos planos. Esto causa resistencia al estira- miento y a la distensién excesivos de los intestinos. De modo similar, la piel contiene una capa relativamente gruesa de tejido conectivo denso no modelado en ta der- mis, la capa reticular 0 profunda de Ia dermis, que pro- vee resistencia a desgarros como consecuencia de fuer- zas de estiramiento provenientes de distintas direccio- nes. El tejido conectivo denso modelado se caracteriza por presentar distribuciones ordenadas y densamente agrupadas de fibras y cétulas. El tejido conectivo denso modelado es el principal ‘componente funcional de los tendones, los ligamentos y las aponeurosis. + Los tendones son estructuras semejantes a cordones que unen el miisculo al hueso. Se componen de haces paralelos de fibras colégenas, entre los cuales hay hi- Ieras de fibroblastos, también denominados tendinoe tos (fig. 5-2). En los cortes transversales del tendén te- fiidos con hematoxilina-eosina (H-E), los fibroblast aparecen con forma de estrella; en este plano, las pro- Iongaciones citoplasmaticas de la célula se ubican en- tre las fibras y parecen finas liminas de citoplasma. En los cortes longitudinales, los fibroblastos aparecen en hileras y se identifican por la coloracién de los ntt- cleos, que se caracterizan por ser aplanados y aparecer como cuerpos ovales teftidos con menor intensidad. Las kiminas de citoplasma que se extienden desde el cuerpo de los fibroblastos suelen no ser evidentes en los cortes longitudinales debido a su escaso espesor y a que no es posible diferenciarlas de las fibras colége- nas, * La sustancia de los tendones esté rodeada por una fina cApsula de tejido conectivo. el epitendén, en el cual las fibras de colégeno no estén tan bien ordenadas. Por lo general, el tendén es subdividido en fasciculos por el endotendén, una extensidn del tejido conectivo del epitendén que contiene los vasos de pequefo cali- bre y los nervios del tendén. Un ligamento es similar a un tendén por estar forma- do por fibras y fibroblastos en paralelo, Pero las fibras tienen una distribueién menos regular que las del ten- On. Los ligamentos unen los huesos entre sf y, en al- gunos sitios como la columna vertebral, esto requiere ierto grado de elasticidad. Asi, mientras las fibras ex- tracelitlares del coligeno son el principal componente de la mayor parte de los ligamentos, algunos de los r lacionadios con la columna vertebral contienen consi derable cantidad de fibras elsticas y menor nimero de fibras colégenas. Estos ligamentos se denominan ligamentos eldsticos. *+ Las aponeurosis se asemejan a tendones anchos apla- nados. En lugar de presentar todas las fibras en dispo- sici6n paralela, las fibras de una aponeurosis se ubican en muchas capas. Los haces de fibras colégenas de una capa tienden a distribuirse en angulo recto con las capas vecinas. Dentro de cada una de las capas, las fi- bras tienen distribucién regular; en consecuencia, se trata de tejido conectivo denso modelado, FIBRAS DE TEJIDO CONECTIVO: Las fibras de tejido conectivo son de tres tipos principales Las fibras de tejido conectivo se encuentran en canti- dades variables, segiin las necesidades estructurales y Ia funcién del tejido. Cada una de los tipos de tejido es producido por los fibroblastos y se compone de protef- nas integradas por largas cadenas polipeptfdicas. De acuerdo con sus caracteristicas y composiciGn se las de- nomin: + Fibras colégenas + Fibras reticulares * Fibras elasticas Fibras y fibrillas colagenas El coldgeno representa las fibras mas abundantes del tejido conectivo Las fibras colégenas son flexibles y tienen una nota- ble fuerza tensional. Si se examinan con el microscopio Sptico, las fibras de colégeno se caracterizan por apare- cer como estructuras onduladas de espesor variable y Tongitud no determinada. Se tiften con facilidad con e0- sina y otros colorantes dcidos, y captan el azul de anilina que Se emplea en la tincin tricrémica de Mallory y el verde claro del tricrémico de Masson, lo que permite el diagnéstico diferencial del tejido conectivo. Con la microscopia electrnica se aprecia que las fi- bras de coligeno estin compuestas por un haz. 0 por ha- ces de delgadas subunidades filamentosas, las fibrillas coldgenas (fig. 5-3). Las fibrillas colégenas de un haz determinado tienen un diémetro relativamente unifor- me; sin embargo, en distintas localizaciones y en dife- rentes etapas del desarrollo embrionario, los tamafios de las fibrillas no son iguales, En los tejidos inmaduros ‘© embrionarios, el diémetro de las fibrillas puede no ex- ceder de 15-20 nm, mientras que en el tejido conectivoFig. $2. Detalle. Microfotogratia de un tend6n, No‘ese biastos) estan ubicados en hileras entre las fibras de coli iGn ordenada y regular de los haves de fibeas cokigenas. Los rendinocitos (fibro= 200. A. Microfotogratia e Gnniow con eseavo aumenta de un tenddn, donde se ‘os tendinocitos (broblastos) y sus finas prolongaciones (flechas) ubicadas entre los haces de coligeno. x 1.600 B, Con mayor aumento se rmuestra un fibroblasto de un tendén con RER prominente. Se ve que las frbras eolgeenas (C) estan comipustas por coligeno densamente ag fas elecirinicas modificadas de Rhodin J: Mistologia. Nueva York, Oxford University Press. 1974, p 165.) Go, »9.500, (Mierororog denso modelado de los tendones y en otros tejidos suje- tos a distensién las fibrillas colégenas miden hasta 200 nm, Las fibrillas coldgenas tienen wna secuencia de bandas de 68 nm Cuando se tiflen con osmio u otro metal pesado, las fibrillas colagenas presentan una secuencia de bandas transversales espaciadas que se repite cada 68 nm en to- da su longitud (fig. 5-3, detalle). Las bandas son un re- figjo de la disposicién estructural de las subunidades. es- pecificamente del tamafio y la forma de las moléculas de ipa colégeno que forman Ia fibrilla (fig. 5-4). La molécula de coldgeno. 0 tropocoldgeno, mide unos 300 nm de longitud por 1,5 nm de espesor. y tiene una cabeza y tina cola, Para formar la fibrilla, tas moléculas de coldgeno se alinean cabeza con cola en hileras que se superponen y.con brechas entre las moléculas de cada hilera. La for- taleza de la fibrilla se debe a los enlaces covalentes que se crean entre las moléculas de coligeno de las filas ad- yyacentes, no por la unién cabeza a cola de las moléculas én hilera. La secuencia en bandas que se observa con el microscopio electrénico se debe al depdsito de osmio en eh espacio entre las cabezas y las colas de las moléculas de cada hileraFig. 53. Microfotografia elecirinica del tejido conectivo denso de la cdpsula testicular de un ni. Las fibrillas colégenas se retinen en algunas ‘reas (X) para formar haces relativamente gruesos, mientras que en otras se encuentran mas dispersas, En el eireulo aparecen con mayor aumento cortes fongitudinales de fibrillas coldgenas paralelas de la misma muestra, Nétense las bandas transversales. Las flechas indican el expaciado de periodicidad de 68 nm. Diferencias del coligeno La molécula de coldgeno (tropocoldgeno) se compone de tres cadenas polipeptidicas enirelazadas Cada uno de los polipéptides que constituyen la mo- lécula de colégeno se designa cadena a. Estas cadenas se entrelazan para formar una triple hélice dextrogira (fig, 5-4D). Cada tercer aminodcido de las cadenas es tuna molécula de glicina, salvo en las terminales de las cadenas ©. A menudo a cada glicina le precede una hi- droxiprolina y le sigue una prolina, Esta estructura de licina con hidroxiprotina y profina es esencial para la conformacién de Ia triple hélice (fig. 5-48). A los resi- duos hidroxilisilo de la hélice se asocian grupos hidro- carbonados, por lo que con propiedad se considera al coldgeno como una glucoproteina. Las cadenas @. que conforman la hélice no son todas iguales y de acuerdo con las diferencias se idemtifican hasta 16 tipos distintos de moléculas de colégeno. Estos tipos de colégeno se clasifican con mimeros romanos sobre la base cronolégica de su descubrimiento, El cold- geno tipo T es el mas comtin y se encuentra en los teji- dos conectivos laxo y denso; dos de las cadenas « (6.1) son idénticas y una es diferente (0.2). Por lo tanto, segtin la nomenclatura de colégeno se designa fot1(I)},ct2(1) (cuadro 5-2). El coldgeno tipo TI se encuentra en los cartflagos hialino y eléstico y aparece como fibrillas muy finas, En este caso, la molécula de colégeno que forma la fi- brilla se compone de tres cadenas idénticas, que di- fieren de las de otros coldgenos. por lo que se designan [oldDIs. No sdlo hay diferencias en los polipéptidos de los dis- tintos coldgenos, también difieren la organizaci6n y la distribucién de las moléculas. Por ejemplo, las molécu- las de los colégenos tipos I, II y III se agregan para for- mar fibrillas de bandas de 68 nm (segiin el diagrama de la fig. 5-4). En contraste, el colégeno tipo IV, uno de los principales componentes de la limina basal, forma una ted no fibrilar que le proporciona cohesiGn estructu- ral. De modo similar, otro colgeno no fibrilar, el tipo IX, se une ¢ interacttia con el colageno tipo Il de los car~ tilagos como estabilizante de las inserciones de las fibri- as. El cuadro 5-2 presenta los colégenos mejor caracte- rizados hasta cl momento y muestra sus variaciones es- tructurales y algunas de sus funciones conocidas. Sintesis de las fibras de coligeno La formacién de las fibras implica procesos que ocurren dentro y fuera del fibroblasto La produccién de coldgeno fibrilar implica distintos procesos dentro del fibroblasto que forman el procoldge- no, el precursor de Ia molécula de coligeno. Todos estos procesos estn relacionados con organelas intracelulares ligadas a la membrana. La produccién de la fibrilla en si ocurre por fuera de Ia eétula e involucra la actividad en- zimética de 1a: membrana plasmética que produce la mo- Igcula de colageno, con el posterior ensamblaje de las moléculas a fibrillas bajo la gufa de la célula (fig. 5-5).Zona de superposicién 0,4 D ona de brecho 0,6 D Sars doles molevios ‘gg 0,87 em pt Fie 4, Diagrama que macs las caractertcas molecules de una blade coligena en orden crciente de ests, La bila de eolégeno {A} presenta bands ansverales con une perdiedal de 68 os (D)- Esa period esol ela del Uisponcon en estalera de Tas molecu Se lsers ,cata una dea ules de unos 300 an Jer por > nm de ite (La nla ewolgero ea il cna suse ser pro- Practice 123, Bis = (D) compuesta por tres caddenas af, Cada tercer aminodcida de Ia cadena alfa es una glicina. La posiein X que sigue a la ‘aay fa poscion ¥ que precede ala ghicnasuele se una hidrosiprlin (). (Basa en Provkop DJ Guzman NA: Hosp 977)Cuadro 5-2. Tipos de coligeno Tipo Composicisn® Lecaltzacién Funciones Coldigenos que formar fibriltas con estriaciomes crucadas uniformes 1 ‘Tejido concetivo de piel, huesos, tendones,ligamentos, _Proporeiona resistencia a fuerzas. tensiones y estine- \entina, eselenstica, aponeuronis y capsuias de Gran mientos ‘nos (totaliza c} 90% del coligene del organismo) MH [alan Cartlago (hiaino y elistico). notocorda y discos inter Provee resistencia « la compnesi¢n verwebrales mM jeaamn), Tejido conective de Geganos (ero, higado, bazo. Fin, Proporciona sostén estructural y easticidad ppulmdn, et). misculo liso, endenevro, vasos sangus eos y pi! ial Coldgenos menos abundantes, no formadares de fibrillas IV [aldV)}0[a2AV)}, Léminas basales de las eelulas epiteliates y endoteliates gloménilos renales y eapsula del cristalino V—[aievy}.c21V)0 _Distribuide uniformemente en el estroma de tejido co [au¥)}.03(V) nectivo; puede estar relacionado con la fed reticular VI [al(VDj,2(V1) _varece tener su erigen en un componente microfibilar dle los tejidos conectivos, similar alos que se encuen ‘van en lt interfase entre fas fibrilas eoldgenas y elas- tieas vi forty) Aislacio de eélulas de piel humana y epiteliales amnist ccs: presente en las fibillas de anclaje Vit foncvmty, Porducio de las eélulas endoicliales aérticus (deseritas 7 un principio como colgeno EC) y distintgslineas selulares normales y fumorales: s¢ etee que tiene am Provee sostén y es barrera de filtracién Proporciona sostén y puede tener otras funciones aun no definidas No determiinado Aseguta la lémina basal al tejido eoncetive No determinado plia distibucion IX @l@Xja2axea1xXy poll del cartflago CObsenido como producto de sintesis de cultivos de eartt- lago en éreanos in vitro; se asocia con el colageno t- Contribuye ala estabitizacién de la red de fbras de ‘cokigeno del cartligo por interaceign en sts inter= = Cala noise ol o se compone de ies cadenas 6 poipepidicasenlelaradas en ona configura hlicodal. Lae nimrosromanos ence paréatess en las ‘znda column ican qu ls eadenas cl ienen una etructura distin que difiere ds cadena Gon mmerosdstinos, En conssevencia el colgeno po I ene dos fxdenas deat La sintesis de coldgeno incluye numerosos procesos intracelulares * Las cadenas polipeptidicas son producidas por los polirribosomas del reticulo endoplasmdtico rugoso (RER), Esta sintesis (tracuuccién) es dirigida por la in- formacién provista por el RNA mensajero (mRNA) y los polipéptidos recién formados son vertidos simultd- neamente en las cisternas del RER + En las cisternas del RER y del aparato de Golgi se producen varias modificaciones postraduccionales en la cadena polipeptidica, que incluyen (a) separacién del péptido sefial (véase p 29): (b} hidroxilacion de re~ iduos de prolina y de lisina, antes de que los polipép- tidos adopten la conformacién helicoidal; (c) agrega- do de glticidos por uniones O- (glucosilacién) a algu- nos residuos de hidroxilisina y por uniones N- a las dos porciones terminales: (d) formacién de una triple ice por tres cadenas polipeptidicas, excepto en las jones terminales gue no sufren enrollamiento y (e) formacién de enlaces de hidrégeno intracatenarios ¢ intereatenarios que influyen sobre Ia forma de Ia molgcula y éstabilizan las interacciones de los po! péptidos. La molécula resultante se denomina proco- légeno, Notese que se requiere vitamina C 0 acido as- corbico para la acci6n de la prolilhidroxilasa y la lis hidroxilasa; sin la hidroxilacién postraduccional de Jos residuos de prolina y de lisina no se pueden formar los enlaces de hidrégeno esenciales para lograr la tructura final de la molécula de cokigeno. Esto explica yuna cadena el codigo tipo Tene tesendense cl idee, porque en la hipovitaminosis C (escorbuto) se encuen- tran alteradas la cicatrizacién de heridas y la forma. cidn de tejido Gseo. * El procolgeno ubandona Ia célula por exocitosis de vesiculas o grdnulos se secrecién. En el traslado de estas yesiculas de seerecisn desde la regidn det Golgi hasta la superficie celular intervienen los microtibu- los; si éstos son destruidos por agentes como la col- chicina 0 la vinblastina, los grénulos de seerecién acumulan en el aparato de Golgi, La sintesis de coldgeno también incluye procesos extracelulares * Luego de ser secretado de la célula, el procoldgeno es convertido a moléculas de coldgeno por la procolage- nopeptidasa, que separa las terminales no enrolladas de la molécula (fig. 5-6). * Las moléculas agregadas de coldgeno se retinen en- tonces para formar las fibrillas finales de colageno. La célula controla la distribucién ordenada de las fi -cién formadas al dirigir las vesfculas de se- crecién hacia un sitio determinado de la superficie pa- ra su climinacién, Al mismo tiempo, la célula crea una “ensenada” o indentacién de su superficie para permi- tir la concentracién de las moléculas secretadas en el Tugar en que ocurrira el ensamblaje (fig. 5-5). E] cold geno se autocnsambla dentro de Ia ensenada a medida que las moléculas se alinean en hileras y se forman los enlaces cruzados.I") hitocondrios [3-5| a eencoctons °) Vela de cuostose 0 eles PROCESOS EN LA SINTESIS DE COLAGENO. FROCESOS INTRACELULARES (0| Coptacién de emineseies (retina, lsna, et.) endocigis (2) Fermacion de ARN (2) Sins de codance eo con pion [pie ON (dl Hidroxtecin de residues de protina y ising y seporecion de a secvencia sel en ef RER | sl ad Rte f (5) Glucosiacion de resid hidrosiilo cexpeciicas en of RER. Galle OH N OF Sol.cla Fig. 55. Representacign esquemitica de los procesos de biosintesis v de las organelas que participan en la siatesis de coligeno, (Modif (cFetpocin dled prosligeo (ies hic SREY psn vest deronerenas EROS 17 Embelaje de precolageno an vesiclas de screisn Np alepoce oC [8] Movimiento elas vesicular hocia la membrane plasmétice on otisencio de micro lamantos y microkulos (9) Execitosis del procolégeno PROCESOS EXTRACELULARES 10) pra elo apron recede rani MO Spoatiniepes boas ecoeeawe ' { Precaldgane Procolégero pephdaea popieasa “ropocalégana pyofermor 11 Peinerzaciin dl ro Oo EE ee Oe ar) ado de Jungueira LC, Cameiro J, Kelley RO: Basic Histology, 7a. ed. Norwalk CT, Appleton & Lange, 1992. p 103.) Fibras reticulares Las fibras reticulares proven un marco de sostén para los componentes celulares de lox distintos tejidos yérganos del cuerpo Las fibras reticulares estin muy relacionadas con las fibras colggenas, dado que ambas se componen de fibri- lias de cokigeno, No obstante, a diferencia de la fibra de coldgeno. la fibra reticular se compone de coligeno de tipo TI] (también puede haber coldgeno tipo IV en tas fi- bras reticulares). Cada una de las fibrillas que constitu- yen las fibras reticulares siempre tienen un didmetro re- ducido (unos 20 nm), y es caracteristico que las fibrillas no se unan para formar fibras gruesas. En los preparados de rutina coloreados con H-E no se identifican con seguridad las fibras reticulares. mientras que con técnicas especiales. aparecen como filamenios en el examen con el microscopio éptico. Dado que con- tienen mayor cantidad relativa de grupos hidrocarbona- dos que las fibras de cokigeno, las fibras reticulares se observan con facilidad mediante la reaccién del acideMelécula de procolageno Ge ty i t ; Vile Dowinoplehalisl Corin ple ——— Malécala de colgeno ——>, (300 nm) $S al ebb Dominio isl haliceidal- 34 | | (10 ne) —> (150m = Dominio triple ro hele Fig. £6, Tlustracién que muestra la molécula de provolfgeno con los extremos N- y C:terminales. Las lechas curvas pequetas en la parte supe rior de la imagen senalan el (imoléeula de tropocoligeno). fr de separacién de los extremes terminales de la molécula de provolageno, para formar Ia moiécula de coldgeno cl extremo C-terminal del diagrama a subunidad bidrocarhonada es GleNac (V-acetilelucosamina) unida a [Man], cmanosa). (Basado en Prockop DJ, etal: Reimpreso con aviorizacion de The New England Journal of Medicine 30:18, 1979.) Fig. $7. Microfotograffa de un preparado con impregnacién axgénti- cca de un ganglio linfatico, donde se apreeia la cépsuia de tejido co hneetivo en la parte superior 3 las trabéculas que se extienden desde lla a la izquierda, Las fibras reticulares (leckas) forman una malta irregular. peryédico-Schiff (PAS). También se distinguen con los procedimientos especiales de impregnacién argéntica, tales como los métodos de Gomori y de Wilder. Des- pués del tratamiento con plata, las fibras aparecen de co- lor negro: en consecuencia, se dice que son argirdfilas (fig. 5-7). En estos preparados, las fibras de colégeno mis gruesas se tifien de color marrén. Las fibras reticulares reciben esta denominacién porque estén ordenadas en un patron de malta o de red En el tejido conectivo laxo las redes de fibras reticu- lares se localizan en los limites entre ¢l tejido conectiva y cl epitelio y alrededor de los adipocitos, los vasos san- ‘guineos de pequefo calibre, fos nervios y las eélulas musculares, También se encuentran fibras reticulares ‘como una estructura de sostén llamada estroma en los, ‘tejidos hemopoyéticos y linfoides (pero no en el timo). En estos tejidos, el coldgeno de la fibra reticular es pro- ducido por un tipo celular especial, la eélula reticular, que mantiene una relacién exclusiva con la fibra y Ta t0- dea con su citoplasma; en consecuencia, la fibra esti aislada del medio. En la mayor parte de las demas localizaciones la fibra reticular es producida por los fibroblastos. Son excep- ciones importantes a esta regla general el endoneuro de os nervios periféricos, en los cuales las eélulas de Sch- wann secretan las fibras reticulares, y las fibras reticula- res y otras fibras coldgenas secretadas por las células musculares lisas de la tinica media de los vasos sangul- tneos y Ia muscular del tubo digestivo.Fibras elasticas Las fibras elsticas proveen tejidos con capacidad de responder al estiramiento y la distensién Las fibras eldsticas se caracterizan por ser més finas que la’ fibras colégenas y por estar distribuidas en un pairén ramificado que forma una red tridimensional. Las fibras estén entretejidas con fibras de colégeno para li- nitar la distensibilidad del tejido y prevenir el desgarro debido al estitamiento excesivo. Las fibras eldsticas se tifien mal con eosina; en conse- cuencia, no siempre se distinguen de las fibras coldge- nas en los preparados de rutina teitidos con H-E. Como las fibras cldsticas adquieren cierta refractariedad con algunos fijadores, en esas condiciones es posible distin- guirlas de las cokigenas en los preparados tefiidos con ILE. Pero las fibras eldsticas se tifien selectivamente con colorantes especiales como la orcefna o la resorci- na-fucsina, segtin se muestra en la figura 5-8. Las fibras eldsticas son producidas por la mayor parte de las células productoras de fibras de colégeno y reticu- lares, en particular los fibroblastos y las células muscu- lares lisas. No obstante, a diferencia de las fibras que . contienen coligeno, las fibras eldsticas consisten de dos componentes estructurales, la elastina y las microfibri- las, Fig, 58. Microfotosrafia de un extendido de mesenterio tendo con fucsina-tesoreina, ET mesenterio es muy delgado y se puede enfocar el imieroscopio en todo el espesor del ted. Las delicadas estructuras fi- Iiformes que se ramiican son las fibras clisticas (B). También son bvidentes las fbras colaenas (C), mucho més gruesas y sin ramifica- cones, aunque se entrecruzan. Molécuios declatine Relojads c Fig. §-9. Esquema que muestra moléculas de clastina y su interacci6n. En A. las moléeulas se presentan con, su conformaci6n individual, con cenrollamiento al azar, La configuracién de cada molécula cambia con- tinuamente, oscilando entre una y otra. En B, se muestran las moléeu- las de elastina unidas por enlaces covalentes (rojo) para formar un ret- cculado con entrecruzamientos. En C se muestra el electo del estiza- ‘mento. Cuando se retira Ia fuerza, la red revierte al estado relajao eo- imo en B, (Redibujado de Alberts B, et al: Molecular Biology of the cel, 2a, ed. Nueva York, Garland Publishing, 1989, p $17.) + La elastina es una proteina que, al igual que el colége- rno, es rica en prolina y glicina, pero se diferencia por set pobre en hidroxiprolina y por carecer por comple- to de hidroxilisina. + Las microfibrillas', son glucoproteinas fibrilares rela- tivamente largas y finas, que miden 12 nm de diéme- tro. La propiedad eldstica de la molécula de elastina se debe a ta singular estructura polipeptidica que produce una molécula enrollada al azar El enrollamiento al azar de la molécula de elastina proporciona a la fibra eldstica su capacidad de estirarse y volver a su estado arrollado original. La elastina es Singular en su contenido de desmosina y de isodesmosi- na, Estos largos aminodcidos son responsables de los enlaces covalentes de las moléculas de elastina entre si. En paneles separados, In figura 5-9 ilustra (a) las molé- culas de elastina enrolladas al azar; (b) las moléculas de elastina unidas por enlaces covalentes para formar la matriz de clastina y (c) el efecto del estiramiento de la matriz con Ios consiguientes enderezamiento y alinea- ci6n de las moléculas desenrolladas. "La microfibillaes una estructura extracelula y no se debe confundir con el microfilamento, estructura intracelular edmpuesta por actina.a de una fibta eléticn. La Fig, &-10, Microfotogratia clects sustaneia de la ibe apurecen microfibilla (lewhars), a foro tambien se Con el microscopio clectrGnico la elastina aparece co- mo una estructura amorfa poco electrondensa. En con- traste, las microfibrillas son electrondensas y factimente identificables, incluso dentro de la matriz. de elastina (fig. 5-10). En los tejidos en desarrollo, en los cuales se Forman Jas fibras ekisticas, las microfibrillas aparecen primero. Se cree que acttian como estiuctura organizi dora para la fibra en crecimiento. El material clistico se deposita mas tarde como componente secundario de la fir fibras maduras, las microfibrillas estan lo- calizadas dentro de la fibra elstica y en la periferia de la fibra, La presencia de microfibrillas dentro de la fibra se relaciona con el proceso de crecimiento: por lo tanto a medida que se forma y aumenta el diémetro de la fi- bra, la microfibrilla queda atrapada dentro de la elastina recién depositada, Un componente conocido de 1a microfibrilla es Ia proteina fibrillina. En el sindrome de Marfan, un tras- forno complejo autosémico dominante del tejido conec- tivo, hay un defecto del gen de la fibrillina. Una de las consecuencias de Ia enfermedad es la presencia de tejido eléstico anormal. > Las fibras elisticas desertas au pertenceen a un “sistema” mis am- plo de fibras con determinadas caracterfstieas relacionadas. Por cjet~ plo, las fibras de axitaldn. que se encuentran en Ta dermis, los dientes tel ligamenta de Zinn cel cristaline, se componen de micrefibrillas on may poco o nacla de material amorfo. Las firas de elaunina. que ‘Se encuentran en fa dermis, contienen microfibrillas y escase cantidad Telativa de elastna, Pstas fibres poseen menos elasticidad que las 6 bras elisticas propiamente dichas. Ciertos estudios han denaostrado «que los tes tipos de fibras contienen microfirillas similares pero Va: Fiala cantidad de material amorfo, En un momento se pensé que estos tipos de fibras representaban distntas elapas en la formacidn de las f= bras clisieas. CE) posce un aspecto relativamente amorfo. En la periferia y dentro de observa cierta cantidad de fibrllas coldgenas (C) El material eldstico es una sustancia exiracelular im- portante en los ligamenios vertebrates, la laringe y las arterias eldsticas En los ligamentos elisticos el material clistico se en: cuentra bajo la forma de gruesas fibras interpuestas con fibras colégenas. Son ejemplos los ligamentos elésticos de la columna vertebral y el ligamento de la nuca: tam: bign se observan fibras mas finas en los ligamentos elis ticos de las cuerdas vorales de Ia laringe. En las arterias elisticas el material eldstico se encuen- tra bajo la forma de laminillas fenestradas, laminas de elastina con aberturas o brechas. Las laminillas estiin or ganizadas en forma concéntrica entre capas de células musculares lisas. Al igual que las fibras coldgenas de lt tdnica media de las paredes vasculares, en este caso el material elstico es producido por las eétulas musculares lisas, no por los fibroblastos. A diferencia de las fibras elsticas no se encuentran microfibrillas en las lamin: Ilas. En las microfotografias clectrénicas sélo se observa el componente amorfo de Ia elastina. Las microfibrillas stén relacionadas con la funcidn de organizar la elasti- na en fibras: su ausencia se asocia a fa formacién de lie minas 0 laminillas de elastina. La elastina es sintetizada por las mismas vias que el coldgeno Como vimos antes, las fibras eldsticas son producidas por los fibroblastos. El proceso de sintesis es paralelo al del coldgeno: en realidad ambos procesos pueden ocu- rir al mismo tiempo en la célula. La modificacion y el ensamblaje ordenados del procoldgeno y Ia proclastina yla sintesis simultdnea de otras proteinas y glucoproteinas, componentes del tejido conectivo son controkudos por los péptidos seftal incluidos al comenzar las cadenas po- lipeptdicas de cada una de las moléculas. De modo similar a las etiquetas de via aérea coloca- das en ef equipaje para asegurar que éste es trasladado correctamente de un avidn a otro en los aeropuertos, las regiones sefial de los polipéptidos aseguran que tos componentes de procoligeno y de proelastina se man- tengan separados e identificados como corresponde & medida que se cruzan durante el transito a través de las organelas de la célula. Durante este traslado ocurren di Limlos procesos sintéticos y modificaciones postradu cionales antes de que los polipéptidos Heguen finalmen- ie a su destino correcto, SUSTANCIA FUNDAMENTAL La sustancia fundamental es el componente que ocupa elespacio entre las células y las fibras In vivo, la sustancia fundamental es amorfa, clara, viscosa y resbaladiza al tacto. Tiene gran contenido de agua y carece de estructuras, al menos a nivel macromo- lecular. por fo que es diffcil de caracterizar desde el pun- to de vista morfolégico. Con el microscopio éptico, la sustancia fundamental presenta aspecto amorfo en los cortes de tejido conservados en frfo 0 teitidos con colo- rantes basicos o el método del écido peryddico-Schift (PAS). En los preparados de rutina tenidos con H-E la sustancia fundamental siempre se pierde por ser extraida durante la fijaciGn y la deshidratacién del tejido. Se ob- tiene entonces un fondo vacio, donde sélo son evidentes Jas células y las fibras. Por lo tanto, en la mayorfa de los preparados histol6gicos el aspecto de la sustancia funda- mental se contradice con su importancia funcional, La sustancia fundamental se compone, en su mayor parte, de proteoglucanos y deido hialurénico Las propiedades fisicas de la sustancia fundamental se deben a los proteoglucanos que contiene, ya sea la naturaleza viscosa del tejido conectivo laxo 0 sts carac- (eristicas més turgentes en el cartflago y su capacidad para permitir la difusi6n de oxigeno y nutriemtes entre la Cuadro 5-3, Glucosaminoglucanos microvasculatura y los tejidos adyacentes. Los proteo- glucanos son macromoléculas muy grandes compuestas por una protena central a la cual se unen muchas mole. culas de glucosaminoglucanos mediante enlaces co" lentes. Los glucosaminoglucanos (GAG). antes deno- minados mucopolisacéridos, son polisacdridos de cade- na larga formados por unidades repetidas de disacéridos El nombre deriva de que uno de los ghicidos de cada di- sacdrido es una hexosamina (glucosamina). Los GAG tienen elevada carga negativa debido a los grupos sulfa- to y carboxilo localizados sobre muchos de los ghicidos: esta propiedad explica la facilidad con que se tifien con los colorantes basicos. La elevada densidad de cargas negativas atrae agua y forma un gel hidratado. Esta pro- piedad permite la répida dif lubles en 1a sustancia fundamental, pero inhibe los mo- vimientos de las moléculas grandes y de las bacterias. Debido a las diferencias entre los glicidos especificos. la naturaleza de sus uniones y el grado de sulfatacién, se reconoce una familia de aproximadamente siete GAG distintos, que se presentan a continuacién y se caracteri- zan en parte en el cuadro 5-3, Acido hialurénico. + Condroitin-4-sulfato y condroitin-6-sulfato. + Dermatansulfato. + Heparansulfato. + Heparina. + Queratansulfato. Varios de estos proteoglucanos se modifican en las células del tejido conectivo 0 en el tejido conectivo des- pués de su sintesis; 1a heparina se forma por separacién enzimatica del heparansulfato; el dermatansulfato es modificado de manera similar a partir del condroitinsul- fato. Uno de los GAG: el dcido hialurénico (AH). requiere un comentario especial por diferir de los demas en va- rios aspectos. Se trata de una molécula muy larga y rigi- da, compuesta por una cadena hidrocarbonada de miles de azticares, comparada con varios cientos 0 menos en otros GAG. Ademds, el AH no se une a fa protefna para formar un proteoghucano, sino que mediante proteinas de enlace especiales, los proteoglucanos se unen indi- rectamente al AH, para formar macromoléculas gigan- tes, como ocurre en la sustancia fundamental del cartila~ Peso molecular aproximado Nombre ‘endatons) Composiciondisacdrda Ao batrsnico 1.000.000 ‘Acido mglueurénico + Nasetiislvcosaninn Condon -salfto 25.000 Acido oghicurénice + Neacetiigalactosamina--sulfato Condrortivé-sal feo 2500) ‘Acido m-sliearénico + Naestigalatesamins-6-silar0 Dennatonelfato 33.000 ‘Aci iduranico + Neacetiplactosamine-6-ulfato Queratansularo vo.an0 Galactonao alactoss-6-sulato-+ Necetigiuconsmina-6sfato eparansultato 15.000 Xvid slicurinisoo eidot-kdrnico:2-sulfato + esliagtucosamina 0 N-acetigiueo- Beparin 40,000 Acido slucurbnico o deido t-idursnico-2-sulfaro + ¥-sulfaielocosaminao N-acetighuco- samina-G-salfatoProlene: cena “Mondmere de protsoglucano Regiénfiodora Acide hioluonice de AH Fig. S11. Representacidn esquemitica que muestra, a la izquierda, un monémero de indamental dei cartflago. El mon ‘la cual se unen aproximadamente 100 unidades de glucosaminoghucanos (GAG) medi "nico (AZ) como esté representada en 1a sustancia Acido hilurénico Monémeres de proteaglucane rts Z calagenas teoglucano y su selacién con la molécula de écido hialv- ‘de protcoglucano se compone de una protefna central te enlaces covalentes, El extremo de la protefaa centr posee una tegién fijadora de AH: la interaccién con el AE es reforzada por una proteina de enlace. A la derecha, una moléeula de AH que forma ‘un conglomerado lineal con méltiples monémeros de proteoglucano (clipses rosadas) fancollas GH y col. (eds): Biological Mineralization and Demineratization. Nueva York, Springer. 1982,» dg en Hascall VC, Lowther DA 181) RELACION ENTRE FIBROBLASTOS Y MATRIZ EXTRACELULAR Con os datos aportados por 1a microscopia no queda claro si los fibroblastos descansan en forma ppasiva en espacios de la matriz. (es decir, sustancia fundamental y fibras) 0 si se encuentran mecénica- mente adheridos 0 integrados a ella. Segtin nuestros conocimientos acerca del papel de los fibroblastos en la formacién, el mantenimiento y el recambio de la matriz, extracelular, no es necesaria una adhesion fisica. Sin embargo, 10s estudios con cultivos de teji- do demuestran que los fibroblastos estén anclados a elementos de la matriz y que estas uniones son im- portantes para la eélula cuando extiende profonga- Giones citoplasméticas y se mueve. La adhesin de los fibroblastos est dada por varios mecanismos que se pueden agrupar en dos clases (algunos de es- tos mecanismos son mejor conocidos que otros). La primera clase requiere la presencia de receptores pa- ra proteinas de las fibrillas colégenas y para gluco- protefnas como la fibronectina, que estin adheridas a las fibrillas. Una segunda clase de mecanismos pa- rece incluir la asociacién covalente de GAG con protefnas integrales especificas de la membrana plasmatica. Las protefnas que intervienen en las tuniones entre los fibroblasts y Ia matriz. son distin- tas de las que median los contactos intercelulares. En términos de Ia funcién, estas proteinas son simi- ares a las de las uniones entre las células epiteliales y la limina basal. Las pequefias variaciones en la es- tructura de las proteinas que forman estos contactos confieren individualidad a tos diferentes tipos de cé- lulas y matrices con los cuales sé asocian. Es posible que estas diferencias establezcan especificidad mo- lecular y se presume que contribuyen a la especiali- zacién funcional de distintas areas dentro del tejido. arece entretejida con una malla de fibras coldgenas. (Basi- go (fig. 5-11). A la presién por volumen o turgencia que se produce con estas gigantescas macromoléculas hidr6- filas se debe 1a capacidad del cartflago de resistir la compresién sin inhibir la flexibilidad. MATRIZ EXTRACELULAR La matriz extracelular es una compleja red estructural gue incluye las proteinas fibrosas, los proteoglucanos y varias glucoproteinas La concepcién actual de los componentes extracelula- res del tejido conectivo y sus funciones revela un siste- ma dindmico en el cual las fibras, los proteoglucanos, algunos pertenecientes 2 la sustancia fundamental y ‘otfos relacionados con las superficies, y las glucoprote nas especificas como Ia fibronectina y Ia laminina inte- zacttian con los demés componentes. En conjunto com- prenden la matric extracelular. CELULAS DEL TEJIDO CONECTIVO Los tipos de eélutas que se encuentran en el tejido co- nectivo laxo y su mimero relativo reflejan la actividad funcional def tejido. Ademés del papel estructural que desempefia por su contenido de fibras y otros compo- nentes de la matriz, el tejido conectivo laxo es un impor- tante sitio de mecanismos de defensa del organisio, ta- les como las reacciones inflamatorias e inmunes y de control de sustancias antigénicas que han penetrado al cuerpo. En consecuencia, los tipos de eélulas presentes pueden exhibir diferencias significativas segin la res- puesta funcionala= » ee aye ~ ° Fig. £12. Microfotografia de una muestra de tejido coneetivo fijado con glutaraldchido, ineluido en resinas plasticas ytefido con H-E, Ene tne las fibras coldgenas apenas se reconocen delgados Segmentos del citoplasma de los fibroblastos (lechas) que pertenecen a las pocas e&- lulas con a orientacisn apropiada. En los cortes de rutina de muestras incluidas en parafina y tefidas con H-E suele ser imposible ciferen- ‘iar las fibras colgengs del citoplasma tenue y mal conservado de 10s fibroblasts. Sélo fos nuicléolos de estas eélulas son evidentes Las eélulas del tefido conectivo se clasifican en fijas o libres Las oélulas que componen la poblacién de eélulas fi- as son relativamente estables; en condiciones normales tienen escaso movimiento y se pueden considerar resi- dentes permanentes del tejido. Son: * Los fibroblastos y un tipo celular muy relacionado, el miofibroblasto. + Los macréfagos. + Los adipocitos. + Los mastocitas. * Las eéhulas mesenquimdticas indiferenciadas. Las células que componen la poblacién de células li- bres, no fijas 0 en trénsito son, en su mayor parte, las provenientes de la sangre que migraron al tejido en res- puesta de un estimulo espectfico, Son: + Los linfocitos. * Los plasmocitos. + Los neutréfilos. + Los eosindfilos. + Los haséfilos, * Los monocitos. Fibroblastos y miofibroblastos El fibroblasto es la célula principal del tejido conectivo Los fibroblastos son las células que sintetizan las fi- bras colégenas, elisticas y reticulares y los ghicidos complejos de la sustancia fundamental. Se considera que un fibroblasto es capaz. de producir todos los com: ponentes de la matriz extracelular, tanto en secuencia como en forma simultinea, Los fibroblastos residen en las cercanias de las fibras, de coldgeno. Sin embargo, en los preparados de rutina tefiidos con H-E s6lo se ve el nticleo, que aparece como una estructura elongada o discoide; en la cual a veces se puede ver el nucléolo. Por lo general no se visualizan las finas protongaciones aplanadas, débilmente tefiidas, que forman la mayor parte del citoplasma, debido a que se confunden con las fibras coldgenas. En determinadas Fig, $-13, Microfotografiaclectrénice de las prolongaciones de varios fibroblastos, El ndcleo de uno de ellos se ve en el extremo superior izquier do de Io foto. En el etoplasma apareeen cistemas del reticulo endeplasmatico rugoso o granular (GER), que estin distendidas por la actividad de sintesis, Junto a esta organele se encuentra el aparato de Golgi (G). Alrededor de las clus hay fibrils coldgenas (C7, casi tadas han sida sec. cionadas transversalmente y, por lo fanto, eon este aumento parecen pequenos puntosFig. 5-14. Microfotozrafiaelectrénica que muestra una porei6 fibroblast, tales como las ‘reas con eantidad moderad det embargo, hi I citoplasima de un miofibroblasto, La eglula exhibe eiertas earactersticas de un fo endoplasinstico rugoso o granular (GER). (Compérese con la fig. 5-13.) Sin otras Zonas guie eonticnen conglomerados de finos filamentos y densidades citoplasmiticas (echas). que son propiedades caracters- sieas de las eélulas musculares lisas, Las puntas de flecha indican fbrillas de coldgeno longitudinales, En Ia Kimina 8 de la pag. 121 se muestra una muestras preparadas con técnicas especiales es posible distinguir el citoplasma de la célula de los componentes fibrosos (fig. 5-12). Con el microscopio electrdnico se observan el RER y un aparato de Golgi prominente en el citoplasma del fibroblasto (fig. 5-13). Cuando hay aetiva produccién de material de la matriz, extracelular, durante el crecimiento activo 0 en la reparacién de heridas, el ci- toplasma del fibroblasto es de mayor tamafio y muestra ligera basofilia como consecuencia de mayor cantidad de RER ocupada en la sintesis de proteinas, En algunas localizaciones, por ejemplo inmediatamen- te por debajo del epitelio del intestino, por debajo de la epidermis y alrededor de los epitelios tubulares y glan- dulares, el fibroblasto constituye una poblacién de célu- las en replicacién, en estrecha relaci6n fisica con el epi- ulfa de esta eélula, con bajo aumento, relacionada eon otras eétulas de tejido conectivo, xi 1,000, tclio suprayacente, Se cree que interactiian con el epite- Tio en la renovacién y la diferenciacién normales del or- ganismo adulto (interacci6n epitelial-mesenquimatica). El miofibroblasto presenta propiedades del fibroblasto yde la célula del misculo liso El miofibroblasto es una célula clongada y ahusada del tejido conective que no se identifica con facilidad en los preparados de rutina tefiidos con H-E. Con el mi croscopio electrSnico se aprecian las caracteristicas cito- légicas del fibroblasto. Ademds del RER y el Golgi, el miofibroblasto contiene haces de filamentos de actina dispuestos longitudinalmente y cuerpos densos similares a los observados en las células musculares lisas (fig. SISTEMA FAGOCITICO MONONUCLEAR EI sistema fagocitico mononuclear comprende un sistema de células que se caracterizan por su avida ca- pacidad de fagocitosis y por derivar todas de los mo- nocito Las células incluidas en el sistema fagocitico mono- nuclear (SFM) tienen la capacidad de fagocitar con avidez los colorantes vitales, como el azul tripiin y Ta tinta china, Estas células fagocitan y acumulan 16s co- lorantes vitales en su citoplasma, de manera que son visibles con la microscopia éptica. Algunas de estas células fueron incluidas en un grupo conocido como sistema reticuloendotelial, concepto exrOneo basado en Ja incapacidad pata distinguir, a nivel del microscopio Sptico, entre las células endoieliales y los macréfagos perisinusoidales del higado y entre las células reticula- res y los macr6fagos fijos de los ganglios linfaticos y el bazo. Ciertas células no pertenecientes a este grupo, por ejemplo los fibroblastos, también pueden presentar actividad fagocitica, pero no tan avida y no aumenta con la estimulacion inmunol6gica. En ta actualidad se sabe que casi todas las células capaces de fagocitar con avidez los colorantes vitales inyectados derivan de los monocitos. Este origen comtin es Ia caracterfstica dis- tintiva principal del sistema segtin se lo comprende hoy en dia, por fo cual se lo denomina sistema fagocttico ‘mononuclear (SFM). No obstante, algunas células fa- gocfticas con importante actividad fagocftica no deri- van de los monocitos. Las distintas células que compo- ‘nen este sistema se enumeran en el cuadro 5-5. ‘Tienen funci6n de fagocitosis la microglia, las célu- Jas con forma de estrella localizadas en su mayor parte alo largo de los capilares del sistema nervioso central. En general se cree que se originan en el mesectodermo de Ta cresta neural y no de los monocitos; no obstante,, se incluyen en el SFM. De modo similar, se ha demos- trado que los fibroblastos de la vaina subepitelial de la Vimina propia del intestino (p 465) y los fibroblastos del endometrio uterino se diferencian a células con ca- racteristicas morfoldgicas. enziméticas y funcionales de Ios macréfagos del tejido conectivo.14), Al igual que la célula muscular lisa, a menudo el niieleo presenta un perfil ondulado de la superficie, fe- némeno relacionado con Ta contraccién celular. El mio- fibrablasto se diferencia de la célula de mtisculo liso porque no lo rodea ninguna Kimina basal (las células del misculo liso estén rodeadas por una lamina basal 0 ex- tema). Ademés, por lo general se ve como una ¢élula aislada, aunque sus prolongaciones pueden entrar en contacto con las prolongaciones de otros miofibroblas- tos, Estos puntos de contacto tienen nexos, lo cual indi: ca que hay comunicacién intercelular. El miofibroblasto actiia en la contraccién de las h dis, proceso natural que tiende a cerrar una herida en la cual ha habido pérdida real de tejido. Los exiimenes con inieroscopio electrénico han demostrado que los miofi broblastos son abundantes en estos sitios lesionados, en particular en el tejido de granulacién. Es muy probable que estas células representen fibroblastos modificados que respondieron a estimulos relacionados con la lesién ya reparacién de la herida. Macréfagos Los macrofagos son cétulas fagoctticas derivadas de los monocitos Los macréfagos del tejido conectivo, también conoci- dos como histiocitos derivan de los monocitos sanguf- neos. Al migrar hacia el tejido conectivo, el monocito sufte un proceso madurativo, tras el cual se lo conoce como macréfago. Con el microscopio dptico y tinciones convencionales es dificil identificar los macréfagos tisulares a meno’ que muestren evidencias obvias de actividad fagocitica, es decir, la inclusién visible de material ingerido dentro del citoplasma. Otra caracteristica que ayuda a identifi- car al macréfago es la presencia de un nicleo indentado © con forma arriionada, En el citoplasma son abundan- tes los lisosomas, que se pueden demostrar por tincién para la actividad de fosfatasa écida (para el microscopio Sptico y para el microscopio electrénico de transmi- si6n); la reacci6n positiva contribuye a identificar al ma- cr6fago. Con el microscopio electrénico de transmisién la su- perficie del macrofago presenta numerosos pliegues y prolongaciones digitiformes (fig. 5-15). Los pliegues de la superficie tienen actividad fagocitica al rodear las sustancias a ser fagocitadas. En el caso de objetos de gran tamaiio, como por ejemplo otras células, los plie- gues se estiran y rodean el objeto a ser fagocitado, Los macréfagos comtienen un aparato de Golgi de gran tamano, reticulos endoplasmaticos rugoso yliso, mitocondrias, vesiculas secretoras y lisosomas Los lisosomas de los macréfagos, con las prolonga- ciones citoplasmiticas, son las estructuras mAs indicado- ras de la capacidad fagocitica especializada de la eélula (ig. 5-15B). Ademés, puede haber vacuolas endociticas, lisosomas secundarios y otras evidencias de fagocitosis EIRER y el complejo de Golgi intervienen en la sintesis de las proteinas de los sistemas fagociticos y lisosémi cos, ademés del sistema secretor de la célula, Los pro- ductos de seerecién abandonan la célula por las vias constitutiva y exocitética regulada (véase p 25). La se crecién regulada es activada por fagocitosis, inmuno complejos, complemento y sefiales provenientes de los linfocitos (incluso la liberacién de Hinfoeinas, moléculas con actividad biolégica que influyen sobre Ia actividad de otras células), Los productos de seorecién liberados por los macréfagos incluyen una amplia variedad de sustancias relacionadas con Ia respuesta inmune, la filaxia y la inflamacién. La liberacién de proteasas neu- tras y GAGasas (enzimas capaces de degradar los GAG) facilitan la migracién de los macr6fagos a través del te- jido conectivo. Si bien la funcién principal del macréfago es la fago- citosis, ya sea como actividad de defensa (lagocitosis de bacterias) 0 como operacidn de limpieza (fagocitosis de detritos celulares), el macréfago también desempena un papel en las reacciones inmunes al presentar los linfo tox a antigenos concentrados derivados de eélulas o pro- teinas extrafias fagocitadas, Cabe destacar que cuando los mactéfagos se enfren- tan a cuerpos extraiios de gran tamaiio se fusionan para formar células gigantes con hasta 100 niicleos que fago- citan el cuerpo extrafio. Estas células multinucleadas se denominan células gigantes de ewerpo extraio (células de Langhans). Mastocitos EI mastocito es una célula ovoide grande del tejido conectivo, con nlicleo esférico y citoplasma lleno de grinulos de gran tamaio (fig. 5-16). Esta relacionado, pero no es idéntico, con los baséfilos de la sangre que conticnen grénulos semejantes. La superficie celular muestra numerosos microvellosidades y pliegues. El toplasma contiene solo escasa cantidad de RER, mito- condrias y una zona de Golgi En los cortes de tejido humano resulta diffcil identifi- car estas células, salvo que se hayan empleado fijadores especiales para preservar los grénulos. Después de usar sustancias fijadoras como el glutaraldehido se pueden {effir los grénulos con colorantes bésicos tales como el azul de toluidina, que tifie con intensidad y metacromé- ticamente los grénulos debido al contenido de heparina, un proteoghucano sulfatado (fig. 5-17). Los granulos de los mastocitos contienen varias sustancias vasoactivas e inmunorreactivas Los grdnulos de los mastocitos son liberados de la eé. lula ante la estimulacién adecuada, como por ejemplo la exposicién a un antigeno contra el cual el individuo ya esté sensibilizado, La sensibilizacién se desarrolla cuan- do se expone a un individuo a una sustancia extraiia 0 antigeno, que cl organismo reconoce como no propio. ¥ contra la cual forma anticuerpos. Después de la exposi- cidn inicial a un antigeno las células del sistema inmu- nolégico, que expresan en su superficie moléculas de anticuerpo que reconocen al antigeno y son especificasFig. £18. A. Microfotosrafiaelectiniea de un macréfago, La earacteristica mas distintiva es la poblacién de grinulos, Los que tienen tuna maiz homiogénea son lisosomas primarios. Los que tienen aspecto heicrogénco s Tongaciones digitiformes, algunas de las cudles pueden ser cortes de pliegue somas primarios: 5, lisoxsomas secundarios. 45,000. contra éste (anticwerpos de reconocimiento) son induci- das a proliferar para producit mas anticuerpos especifi- cos contra el antigeno original. Se producen varias cla- ses principales de anticuerpos, designadas inmunoglo- bulinas (p 333). Los mastocitos no producen anticuer- pos, sino que dependen de los plasmocitos para la sinte- sis de los anticuerpos unidos a su superficie. Cuando son estimulados por la presencia de un antigeno “extra~ fio”, los plasmocitos producen anticuerpos que pasan al tejido conectivo. Las inmunoglobulinas de la clase IgE, especificas contra cada antigeno, se fijan a los recepto- res ubicados sobre la membrana plasmiitica del mastoci- to. Con la siguiente exposicién al mismo antfgeno se ‘ot lisosornas secundarios. La superficie ce la eélula revela varias pro < superficiales. X10,000. B. Los lisosomes con mayor aumento. P. liso: produce una reaccién antigeno-anticuerpo que causa le liberacién de los granulos de los mastocitos. Las secreciones de los grdnulos de los mastocitos pueden producir reacciones de hipersensibilidad inmediata, alergia y anafilaxia Se conocen 4 sustancias liberadas por los mastocitos: + Histamina. * Sustancia de reaccién lenta de la anafilaxia (SRS-A, del ing. slow-reacting substance of anaphylaxis) 0 leucotrieno C+ Factor quimiotactico para eosindfilos (ECF-A, del ing. eosinophil chemotactic factor of anaphilaxis). + Heparina En la respuesta inmune la histamina y la SRS-A au- mentan la permeabilidad de los pequefios vasos y ast causan edema de los tejidos circundantes. La heparina es un anticoagulante, El ECF-A estimula a los eosin6fi- los para que migren a los sitios donde los mastocitos han liberado sus agentes; los eosindfilos contrarrestan los efectos de la histamina y la SRS-A. Los mastocitos son especialmente numerosos. en os tejidos conectivos de la piel y las membranas mucosas, pero no se encuentran en el encéfalo y la médula espinal Los mastocitos se distribuyen sobre todo en las cerca nfas de los pequefios vasos sanguineos. que son blancos de la histamina y la SRS-A. También se encuentran en las eapsulas de los érganos y, en menor grado, dentro de Jos érganos, es decir, en el tejido conectivo que rodea Jos vasos nutricios. Una excepcién notable es el sistema nervioso central. Mientras que las meninges (Idminas de tejido conectivo que rodean el encéfalo y la médula es- pinal) contienen mastocitos, el tejido conectivo que ro- dea los vasos sanguineos de pequefio calibre dentro de las sustancias encefélica y medular carece de ellos, lo que protege al sistema nervioso central de los efectos nocivos en potencia del edema caracteristico de las reac- ciones alérgicas. Los mastocitos también son numerosos ene! timo y, en menor grado, en otros érganos linfoides salvo el bazo, Adipocitos Eladipocito es una célula del tejido conectivo especializada en el almacenamiento de lipidos Los adipocitos se diferencian a partir de los fibroblas- tos y de las células mesenquimdticas indiferenciadas y acumulan gradualmente grasa en sus citoplasmas, Se en, cuentran en el tejido conectivo laxo como célullas sepa- radas o grupos celulares. Cuando se acumulan en gran- des cantidades se denominan tejido adiposo. Este tejido conectivo especializado se trataré en el capitulo 6. Cuadro 5-4. Sistema fagocitico mononuclear Ceuta Lncaltzacion Meersfago (histiocito) Tefido conective MoerSiago perisinusoidal (eélu- Higado lade Kuptfery Macriiago alveolar Pulmones Mars Bazo, ganglios linfiticos, médula sea y timo Macrofugo pleuial y peritoneal Cavidades serosa Osteoelasto Hucso Microglia Sistema nervioso central Célula de Langerhans Bpidermis Macrétugo desivado de fibro- mina propia del intestino, endo- blasto ‘meitio del ttero Fig. 5-16. Microfotograffa electrsnica de ua mastocito. El citoplasma se encuentra casi fotimente ocupado por grinulos. Obsérvese un pe- ueto linfocito en el extrem superior izquierdo de ta foto. 6.000. ferenciadas Células mesenquimiiticas y pericitos Muchos histélogos han postulado Ia existencia de cé- lulas que retienen la multipotencialidad de las cétulas mesenguimédticas embrionarias en el tejido conectivo la- Fig. 17. Microfotografia de un mastocito tefido con azul de toluidi- na. Los giinulos se tien con intensidad y, debido a su cantidad,tien- den a aparecer como un macizo en alguns &rvas, La zona palida co: sresponde al nicleo de la edlulaFig, 5:18 Microfotograia de un vaso san de! vaso. A la derecha aparece otra eelula, un pericito. en intima n Tas endboteliles se divide (Vlechas) para tambien rodear al pericito, xo del adulto. Se creia que estas células, denominadas células mesenquimiticas indiferenciadas. daban ori Jas células diferenciadas que participan en la reparacién y formacién de tejido nucvo, como en la cicatrizacién de heridas, y en el desarrotlo de nuevos vasos sangui- tneos (neovascularizaci6n), Algunos histélogos pensaban que las células que dan origen a los nuevos fibroblastos ¥ vasos sangurineos en la cicatrizacién de heridas prove- infan de la sangre, al pasar desde la circulacién hasta el tejido conectivo El pericito es una célula que acta como célula mesenquimdtica indiferenciada Los pericitos, también Ilamados eéludas adventic células perivasculares. se encuentran alrededor de capi- lares y vénulas (fig. 5-18), Estan rodeadas de material de la lamina basal que se continta directamente con la lamina basal del endotelio capilar; en consecuencia, en inco de pequeio cabbre. El nvcleo de In izquienda pestenc laciSn con el endotelio, Obséevere que la Himina basal (BL) que eecubee his 6 a endotelial que forma la pared realidad no se encuentran en el compartimiento del teji- do conectivo. El pericito se caracteriza por envolver al capilar, al menos en parte. y su nticleo adopta la forma correspondiente al de 1a célula endotelial, aplanado pera curvo, para adaptarse al contomo tubular del vaso. Con el microscopio electrénico se ha demostrado que los peticitos que rodean a las vénulas mas pequefias tie- nen caracterfsticas eitoplasmadticas casi idénticas a las de las eélulas endoteliales del mismo vaso. Cuando se exe minan pericitos relacionados con vénulas mas grandes, se encuentra que tienen caracteristicas de las células del misculo liso de la tinica media de las venas pequefas. En cortes obtenidos al azar, paralclos al eje longitudinal de las vénulas, se demuestra que las porciones distales y proximales del mismo pericito tienen caracteristicas de células endoteliales y de células musculares lisas, re pectivamente. Esto sugiere que en el desarrollo de nuc- vos vasos se diferencian células con las caracteristicas de los pericitos a miisculo liso de la pared vascular.Gl we YS aS S ae 4 CR Fig. 5-19. Sticnoforoprafia elsettonica de un plasmocito, F] eitoplasma eintiene un RER my abundante y un aparato de Golei (G) retanvamente ine. rete de la activa secrevori de lace) it 15.000, Los fibroblastos y los vasos sanguineos de las heridas en proceso de curacién se desarrollan a partir de células mesenquimdticus indiferenciadas asoviadas ala tinica adventicia de las vénulas En la actualidad, estudios autorradiogriticos de heri- en proceso de curaciGn que emplean pares parabisti- cos (con circulacién cruzada) de animales han estableci- do que las células mesenquimdticas indiferenciadas lo- calizadas en la tinica adventicia de las vénulas y de fas venas pequefias son la principal fuente de células nuevas para fa cicatrizacién de heridas. dems, los fibroblas- tos, los pericitos y las ¢élulas endoteliales de las porcio- nes de tejido coneetivo adyacentes a 1a herida se dividen y originan células adicionales que forman el nuevo te; 0 conectivo y los vasos sanguineos. Ninguna de las lulas derivadas de la sangre circulante dan origen a los fibroblastos. pericitos 0 células endoteliales de la herida enproceso de curacién. Linfocitos Los linfocitos se ocupan fidamentalmente de las respuestas inmunes Los Finfocitos del tejido conectivo son las mis peque- jas de las células fibres de este (ejido, con un didmeiro de 6-8 Um (véuse fig. 5-16). Presentan un fino reborde de citoplasma que rodea un niicleo heterocromitico muy coloreado. En muchos casos, puede no observarse el ci- toplasma de los linfocitos del tejido conectivo. En condiciones normales. se encuentran pequenas cantidades de Tinfocitos en el tejido conectivo de todo el organism, Sin embargo. el nimero aumenta en forma dramdtica en los sitios de inflamacién tisular causada por agentes infecciosos ¥ cuerpos extraiios. Los linfoci- {os son mas numerosos én la Limina propia del érbol tra- queobronguial y del tubo digestivo, donde intervienen en Ia vigilancia inmunitaria contra agentes patégenos y sustancias extrafias que penetran en el organismo por es- las vias, Los Tinfocitos son una poblaci tipos funcionales celulares: n heterogénea de dos + Linfocitos T. que poscen larga vida media ¢ intervie- nen en la inmunidad mediada por células. + Linfocitos B. que poscen vida media variable e inter- vienen en la produccién de anticuerpos. En respuesta a la presencia de antigenos, los linfoci- tos B se dividen varias veces para producit més linfoci- tos B, ademds de grandes clones de células que maduran a células plasmdticas 0 plasmocitos. Plasmocitos Les plasmocitos son células productoras de anticu derivadas de tos linfocitos B pos Las célutas plasmiticas son componentes importantes del tejido conectivo laxo en los sitios con mayor proba- bilidad de que penetren antfgenos al organismo, por ejemplo el tubo digestivo y el arbol traqueobronquial. También son un componente habitual de las glindulas salivales, los ganglios linféticos y el tejido hemopoyéti- co. Una ver que la célula plasmética deriva de su pre-cursor, el linfocito B, sélo tiene limitada capacidad mi- gratoria y una vida relativamente corta, de 10-30 dfas. El plasmocito es una célula ovoide bastante grande (20 jum) con considerable cantidad de citoplasma. Este ¢s muy basGfilo debido a la presencia de un RER impor- tante (fig. 5-19). Por lo general, el aparato de Golgi es notable debido a su gran tamafio y falta de coloracién. Aparece como tna zona clara que contrasta con el cito- plasma bas6filo. EI nécleo es esférico y suele ser excéntrico, es peque- fio. casi del tamaiio del micleo de un linfocito. Presenta grandes grumos de heterocromatina periférica que alter- na con zonas claras de eucromatina, Esta distribueién caracteristica se describe tradicionalmente como similar a una rueda de carro, © la cara del reloj, con la hetero- cromatina dando la imagen de los rayos de la rueda 0 los nimeros del reloj. A pesar de que el plasmocito sintetiza grandes canti- dades de proteina, tiene un micleo heterocromitico en su mayor parte. Esto se explica porque sintetiza gran canti dad de una tinica proteina, el anticuerpo especifico; en consecuencia, slo un segmento del genoma esté ex- puesto a la transcripeién. Eosin6filos, monocitos y neutréfilos También se pueden encontrar eosindfilos, monocitos y neutrofilos en el tejido conectivo Como consecuencia de las respuestas inmunes y la le- si6n tisular, ciertas eélulas migran con rapidez desde Ia Fig. $-20. Microforogratia de tejido mesenguimétieo de un feto en ddesarollo, Desde el punto de vista estructural, Ins eéluas mesengui imaticas eonforman tuna poblacién homogénea, aunque algunas de cllas estin predestinadas a dar erigen a células que se diferenciarin en tipos celulares especificos. Poscen prolongaciones citoplasmaticas que 1 menudo le imparten un aspecto fusiforme o estrellado. El compo- rente extracelular del tejido contiene una red laxa de fibras reticulaes. y abundante sustaneia fundamental sangre para ingresar al tejido conectivo, en particular los neutréfilos y Ios monocitos, Por lo general su presencia refleja una reaccién inflamatoria aguda. En estos casos, los neutrofilos migran al tejido conectivo en cantidades importantes, seguidos de gran cantidad de monocitos. Como se vio antes, 1os monocitos de diferencian enton- ces a macréfagos. En el capitulo sobre sangre se deseri- ben estas eélulas y sus funciones, al igual que los eosi- néfilos que actdan en las reacciones alérgicas y las in- festaciones parasitarias, Mientras tanto, se debe destacar que se observan eosinéfilos en el tejido conectivo nor- mal, en particular en la limina propia del intestino, co- mo consecuencia de las respuestas inmunol6gicas créni- cas de bajo nivel que curren alli. Baséfilos En ciertas respuestas inmunes, los baséfilos abandonan la circulacion y actian en el tejido conectivo La liberacién de histamina (y, en algunas especies, de serotonina) de los grémulos de secrecién de los bas6filos aumenta la respuesta vascular en las reacciones de hi- persensibilidad, como por ejemplo las picaduras de sectos. Las inmunoglobulinas (IgE) se unen en forma pasiva con 1a superficie del bas6filo. Cuando un antigeno se une a estos receptores, los griinulos baséfilos liberan su contenido. En algunos individuos muy sensibles, 1a res- puesta a las picaduras de abejas o de avispas, por ejem- plo, pueden ser tan violentas y extensas como para po- ner en peligro la vida. HISTOGENESIS DEL TEJIDO CONE El tejido conectivo se origina en su mayor parte del mesoderma; parte proviene del endodermo El mesodermo da origen a casi todos los tejidos co- nectivos del organismo. Constituye una excepcién la re- gidn cefilica, donde ciertas células progenitoras derivan Gel ectodermo a partir de las células de la cresta neural. Por proliferacién y migracién de las células del meso- dermo y especificas de la cresta neural, en las primeras etapas del desarrollo embrionario se establece un tejido conectivo primitivo denominado mesénguima (en cl ca- so de la regién ceféilica en ocasiones se llama ectome- sénguima). La maduracién de este tejido conective pri- mitivo o mesénquima da origen no s6lo a los distintos tejidos conectivos del adulto, sino también al miisculo, los sistemas vascular y urogenital y las membranas sero- sas de las cavidades del cuerpo. El mesénquima contiene células pequefias ahusadas, de aspecto relativamente uniforme (fig. 5-20), Las pro- longaciones de estas células se extienden y entran en contacto con prolongaciones similares de células veci- nas, para formar un reticulado celular tridimensional. Hay nexos en los sitios en que hay contacto entre las prolongaciones. El espacio extracelular est ocupado por sustancia fundamental viscosa, casi gelatinosa. Seencuentran fibras colégenas (reticulares), pero son muy finas y bastante escasas. La escasez de fibras de colge- no concuerda con las limitadas tensiones fisicas que so- porta el feto en crecimiento, La forma de proliferacién y organizacién de las célu- las mesenguimaticas fija el patron para el tipo de tejido conectivo que se formard en cada sitio espeeifivo. Cuan- dose inicia la diferenciacién de las células mesenqui- s aumenta fa cantidad de citoplasma y aparece la basofilia, reflejos de la sintesis de coligeno. A medida que avanza el desarrollo, el patrén de ubicacién del co- ligeno y la orientaci6n de las eélulas reflejan el tipo de ido conectivo en formacién, En consecuencia, en la ‘zona en que se generard un tendén se agregan las células y se alinean para formar haces paralelos de fibras de co- iigeno.Los tejidos que rodean los elementos epiteliales de los lobulillos de la glindula mamaria inactiva (figs. | y 2) son excetentes ejemplos de tejidos conectivos laxo ¥ denso, en particular porque se los puede comparar deri- tro de un mismo campo. Con el microscopic dptico, el aspecto de! tejido conectivo laxo incluye varios tipos ce- lulares: las células no estén organizadas de acuerdo a ninguna distribuciGn especial: las fibras de coldgeno son finas y onduladas, y por lo general el tejido se tifie lige- ramente con eosina debido a la escasez.telativa de fibras de coligeno y a la pérdida de sustancia fundamental du- rante la fijacién, En contraste, el tejido conectivo denso se compone de gruesos haces de coligeno que se colo- rean con intensidad con eosina y tiene relativamente po- cas células, la mayor parte de Tas cuales son fibroblas- tos. Ambos tejidos conectivos también contienen fibras. elisticas, pero éstas no «> distinguen a menos que se empleen métodos especiales de coloracién (véase limi- na 10). FIGURA 1, glindula mamaria, humano, H-E 160. Esta microfotografia muestra, con poco aumento, el tejido conectivo laxo (LCT) que rodea inmediatamen- te el epitelio glandular (Ep). Se tifie menos con la eosi- na, comparado con el tejide conectivo denso (DCT) que ocupa Ia mayor parte del campo. El tejido conectivo denso, con sus abundantes fibras gruesas, contrasta con el tejido conectivo laxo, con su relativa escasez de eélu- las. La tipica naturaleza ondulada de las fibras de cold- geno que se encuentran en el tejido conectivo laxo se aprecia con mayor claridad en la figura 2, que muestra uuno de los lobulillos con mayor aumento. Los componentes mas conspicuos del tejido conecti vo laxo son las abundantes células aisladas 0 en grupos pequeitos dispersas entre las delicadas fibras de coldge- no y los pequefios vasos sanguineos (BV) que irrigan el tejido conectivo y el epitelio adyacente. FIGURA 2, glindula mamaria, humano, H-E 250. Aunque el aumento de esta figura no es suficiente como para explorar detalles citolégicos, se reconocen dos tipos celulares generales segtin la forma de los né- cleos. Una poblacién celular tiene nticieos alargados (Mlechas): es probable que éstos pertenezean a fibroblas- tos. La otra poblacién celular tiene nicleos redondea- dos: la mayor parte de estos nticleos pertenece a linfoci tos (L), si bien algunos son de eélulas plasmaticas o plasmocitos. No obstante, la caracterfstica significativa es que el tejido conectivo laxo es muy celular, conside- rablemente mas que el tejido conectivo denso que lo ro- dea. Es tipico que las eéiulas del tejido conectivo denso sean fibroblastos. Su cantidad no suele ser apreciable y bajo condiciones normales son escasos los demas tipos celulares, si acaso los hay. 114 FIGURA 3, vagina, humano, H-E x250. Esta figura es otro ejemplo de tejido conectivo laxo, en este caso de la pared vaginal, justo por debajo de la superficie epite- lial, De nuevo, nétese la gran cantidad de miicleos. El rea que se encuentra inmediatamente a la derecha del vaso sanguine (BV) mareado en la parte superior, se muestra con mayor aumento en la figura 4. FIGURA 4, vagina, humano, H-E x480. Aut se destaca la naturaleza ondulada de las finas fibras colge- nas y es aun mds aparente la variacion de los contornos nucleares. Es imposible identificar el tipo celular al que corresponde cada nticleo: sin embargo ciertos nicleos de la poblaci6n total se pueden identificar con seguri- dad. Asi, los pequefios micleos redondeados ¢ hipercro- miticos, sin citoplasma visible que los rodee pertenecen a linfocitos (L). Algunos de los micleos redondeados po- seen una masa de citoplasma exeéntrica que los rodea; pertenecen a plasmocitos (PC). En ocasiones. el cito- plasma de un plasmocito puede quedar oculto en parte por el nticleo, lo cual hace menos segura su identifica ae Es el caso de la célula indicada por el signo de in- terrogacién (?). Dado que el tamaiio, Ia densidad y el patrén cromatinico de su nticleo son similares a los de las células plasmiticas que se pueden identificar mejor, es probable que también se trate de un plasmocito. Con respecto a los fibroblastos. los mécleos se caracterizan por ser alargados. En la microfotografia se senalan 3 mi- cleos de fibroblastos (F); ambos son alargados, pero uno se aprecia bastante angosto. Se lo visualiza de perfil mientras que el niicleo més amplio pertenece a un fibro- blasto visto de frente. Este nticleo también presenta un nucléolo_prominente, caracterfstico de los fibroblastos activos. Por lo general no se distinguen las finas prolon- gaciones citopiasmaticas de los fibroblastos porque se Confunden con el coligeno. Es posible que algunos de los miicleos de esta figura pertenezcan a macréfagos 0 ‘mastocitos, pero sin inclusiones citoplasméticas visibles no se puede identificar a estas células.LAMINA 6LAMINA 7. Tejido conectivo, microscopia electrénica Trompa uterina, humano, microfotografia electrd- nica x4,100, Los elementos no amorfos que constituyen un tejido conectivo, o sea las fibras y las células, se ca~ racterizan bien a nivel ultraestructural. La muestra pre- sentada aqui proviene de un corte transversal de la pared de una trompa uterina, Este tejido no s6lo es bastante celular, sino que ademds contiene una cantidad conside- rable de material fibroso, En términos de sus elementos constitutivos es comparable al tejido conectivo que se muestra en la figura 3 de la limina 6, Con el microsco- pio electrénico, se hace aparente de inmediato la morfo- logia de los componentes del tejido, Los fibroblastos (F) que constituyen Ia gran masa de la poblacién celular del tejido conectivo, suelen tener largas prolongaciones ci- toplasmdticas que pasan entre los haces de coldgeno. Las prolongaciones se extienden por distancias no deter- minadas y se pueden afinar de modo tal, (puntas de fle- cha) que’ su delgadez impide que se visualicen con el microscopio Gptico, ‘dems de la poblacién de fibroblastos, en esta mues- ira hay al menos otros 2 tipos de cétulas del tejido conec- tivo (véanse los recténgulos). Una es una célula con ca- racterfsticas tanto mioides como fibroblisticas y, en con- secuencia, se la conoce como miofibroblasto (My). La otra es una célula con ciertas caracterfsticas que sugieren que ¢s un monocito (M) o un tipo celular muy relaciona- do. Estos dos tipos celulares, junto con el fibroblasto, se ‘muestran con mayor aumento’en la lmina 8. Las fibras de colégeno (CF) entre las cuales pasan las prolongaciones de 10s fibroblastos tienen una apariencia punteada a este aumento relativamente escaso. Esto se debe a los cortes de las fibrillas coldgenas individuales. Son estas unidades fibrilares (las fibrillas) las que se agregan en haces para formar la fibra que se visnaliza con el microscopio dptico, 116 En la muestra que se presenta aquf, casi todas las fi- bras colégenas se han cortado en sentido transversal y, en consecuencia, es posible distinguir su tamafio y su forma variable, En la técnica histolégica de rutina para Ja microscopia Optica se puede producir una retraccién considerable de! tejido durante las etapas de fijacion y de deshidratacin. Una consecuencia de ello es la sepa- racién artificial de las fibras colégenas, que con el mi- croscopio Sptico se ven como elementos fibrilares ondo- lados y aislados, y no con Ia distribucién ms regular que adoptan en las microfotograffas electr6nicas. Es caracteristico encontrar pequefios vasos sangui- neos que pasan a través de la sustancia del tejido conec- tivo y que en este campo son: un capilar (Cap) y una vé- nula cortada en sentido longitudinal (V). Esta titima contiene varios eritrocitos (RBC).LAMINA 7LAMINA 8. Células del tejido conectivo, microscopia electronica Como se mencioné antes, las caracteristicas citolégi- cas exhibidas por los distintos tipos celulares del tejido conectivo a nivel estructural sirven como una “huella di- gital” precisa que permite, con pocas excepeiones. iden- tificar sin dificultad la célula en cuestién. FIGURA 1, fibroblastos, microfotografia electré- nica x11.000, Esta figura muestra porciones de dos fi- broblastos adyacentes. A pesar de que sélo se ve una pe- ‘quefia parte de cada uno, se pueden identificar con rapi- dez como fibroblastos por la presencia de una cantidad moderada de reticulo endoplasmético rugoso (GER) y por las prolongaciones alargadas que poseen ambas cé- lulas. Las cisternas del reticulo endoplasmético estén muy dilatadas, como se aprecia en la célula inferior, y contie- nen una sustancia homogénea de densidad moderada, Esta sustancia es un producto de la actividad sintética de gs ribosomas de la superficie del retfculo endoplasmati- €0, que es liberada a las cistemnas y representa, en st. ‘mayor parte, un precursor del colageno que se encuentra en cl espacio extracelular. En esta misma eélula, el corte muestra una parte del aparato de Golgi (G), formado por mailtiples vesiculas pequeiias y sacos aplanados. FIGURA 2, miofibroblasto, microfotogratia elec- trénica 11.000, La porcidn de la célula que se muestra aqui es semejante en muchos aspectos a los fibroblastos recién descritos y, en la microscopia dptica, es probable que no se podria distinguir de ellos. Obsérvese que en un tea son evidentes las cisternas del retfculo endoplas- matico rugoso (GER) y su. contenido exhibe la misma textura y densidad que el del fibroblasto. Sin embargo, Ja célula difiere del fibroblasto en que el citoplasma po- see un componente filamentoso extenso. apenas visible 2 este aumento, En asociacién con estos filamentos hay “densidades citoplasmaticas” (flechas); la combinacién de estas dreas densas y una alta concentracién de fil mentos citoplasmsticos son una caracteristica de las ¢ lulas musculares lisas. Es evidente que este tipo celular, designado como miofibroblasto, funciona a la vez, co- mo fibroblasto y como eélula contract. Otros ejemplos de este tipo de célula se pueden encontrar en los testicu- los, los ovarios. el bazo y los nervios (perineuro), y son omnes en las herias cutineas en proceso de cicatriza- cidn 118 FIGURA 3, célula mononuclear, microfotografia electrénica x11.000. Es probable que el ditimo tipo ce- ular en esta lémina también se confunda con un fibro- blasto si se observa con el microscopio dptico. Como se muestra agut, la cétula exhibe un niicleo aplanado y po- co citoplasma alrededor de é1. El citoplasma resulta po- co descriptivo y la caracteristica més notable son las pe- quefias vesiculas del retfculo endoplasmiético liso (SER). Se supone que esta célula es un monocito que puede es- tar en proceso de transicién a macrdfago tisular. Otra vez, el tema esencial es que se observa un tipo de célula ‘con morfologia diferente de un fibroblasto, aunque no es posible distinguir ambas células con el microscopio 6p- tico en un corte de rutina teftido con H-E. En las tres figuras se pueden identificar con claridad las fibrillas colégenas como subunidades de las fibras de coligeno (CF). En la mayoria de las localizaciones, las fibrillas se han seccionado en forma transversal y apare- cen como elementos cireulares agrupados de’ manera muy densa; en los sitios donde Las fibrillas se han cor. do en forma més longitudinal (puntas de flecha), es evi- dente el tipico patrén de bandas cruzadas. Nuevamente cabe destacar que las fibrillas individuales no se pueden identificar con el microscopio dptico: en ese caso, se aprecia un haz de fibrillas que se conoce como fibra co- Kigena. Por medio de esias ilustraciones también se puc- de afirmar que el didmetro de la fibra coliigena depend: de la cantidad de fibriflas comprendidas en el haz.LAMINA 8LAMINA 9. Tejido conectivo denso modelado, tendones y ligamentos El tejido conectivo denso modelado, como el de los tendones y ligamentos, se caracteriza por tener fibras densamenie agrupadas, organizadas en disposiciones pa- ralelas denominadas faseiculos, Las fibrillas de coldge- no gue forman las fibras también se disponen en parale- Io, Los tendones, que fijan el miisculo al hueso, y los fi- gamentos, que unen dos huesos entre sf, son ejemplos de este tipo de tejido. Los ligamentos son similares a los tendones en la mayoria de los aspectos, pero sus fibras y Ia organizacién de los fascfculos tienden a estar menos ordenados. Ambos se componen de fibrillas de colégeno en disposiciones muy ordenadas. En los tendones y'en los ligamentos, los fascfculos es- {in separados entre sf por tejido conectivo denso no mo- delado, el endotendén, por el cual circulan vasos y ner- vios. Ademés, un fascfculo puede estar dividido en parte por tabiques de tejido conectivo provenientes del endo- tendén, que contiene los vasos y nervios més pequefios. Algunos de los fasefculos pueden estar agrupados en ades funcionales mayores mediante un tejido conec- tivo mas grueso que los rodea, el peritendén. Por titimo, los Fascfculos y grupos de fasefculos estén rodeados por él tejido conectivo denso no modelado del epitendén. Los fibroblastos, denominados células tendinosas en el tendén, son célutas elongadas que poseen prolonga- ciones citoplasméticas muy delgadas, en forma de lami- na y que residen entre fibras adyacentes, a las cuales 0- dean. Los margenes de kas prolongaciones citoplasméti- cas hacen contacto con las células tendinosas adyacen- tes, por lo que se forma un reticulado citoplasmatico si: milar a un sineicio. FIGURA 1, tendén, corte longitudinal, humano, HLE x100, La muestra incluye el tejido conectivo denso no modelado que rodea al tend6n, el epitendén (Ept). Los fasciculos tendinosos (TF) que forman el tenddn es- tn rodeados por tejido conectivo menos denso que el asociado al epitend6n. En cortes longitudinales como Este no se distingue el tejido conectivo que rodea cada fasciculo, el endotendén (Ent), en determinados puntos, por lo cual un fascfeulo parece fusionarse con el fascicu- lo veeino. Esto se debe al plano oblicuo de corte, no a una verdadera unién entre fasciculos. El colégeno que forma la mayor parte de los fasefculos tendinosos tiene aspecto homogéneo debido a la forma ordenada de agru- pamiento de las fibrillas de colégeno. Los nticleos de las células tendinosas se ven como estructuras clongadas 120 distribuidas en hileras. No se puede distinguir el cito- plasma de estas células del coldgeno, por lo que s6lo quedan los micleos como caracteristicas representatives de las células. FIGURA 2, tendén, corte longitudinal, humano, H- E x400, Esta microfotografia a mayor aumento muestra la distribuciGn ordenada en hileras tinicas de los miicleos de las células tendinosas (7C) a lo largo del coligeno in- terpuesto, de aspecto homogéneo. No se puede distinguit el citoplasma celular del coligeno, como es caracteristi- €o de las muestras incluidas en parafina y teftidas con H- E. La variabilidad del aspecto nuclear se debe al plano de corte y a la posicién de los nticleos dentro del espesor de Ja muestra, También se observa un pequeiio vaso sangui- neo (BY) que cursa dentro del endotendén. FIGURA 3, tendén, corte transversal, humano, H- E_x400. Esta muestra esta bien conservada y las densas fibras coligenas aparecen como un campo homogéneo. incluso cuando se observan los extremos cortados. Los niicleos estin dispersos en forma irregular. a diferencia del patron mds uniforme en el plano longitudinal. Esto se explica al observar la linea interrumpida en la figura 2, que simula representar un corte transversal arbitrario del tendén. Nétese el espaciado irregular de los nticleos que se encuentran en el plano de corte, Por tiltimo, hay varios pequefios vasos (BV) en el endotendén (En!) dentro del fasciculo.LAMINA 9LAMINA 10. Fibras eldsticas y laminas (membranas) eldsticas Las fibras eldsticas estén presentes en los tejidos co- nectivos laxo y denso de todo el organismo, pero en me- nor cantidad que las fibras colégenas. Las fibras elésti- ‘cas no son conspicuas en los cortes de rutina teftidos con HE, pero se pueden apreciar bien con métodos de tin cién especiales. (Los siguientes tifien selectivamente el material elistico: la técnica de Weigert para fibras elds- ticas tite de color violeta pirpura; la aldehfdo fucsina de Gomori colorea de azul negro; Ia hematoxilina de Ver- hoeff para tejido eldstico tie de negro y la orcefna mo- dificada de Taenzer-Unna le imparte un color pardo ro- jizo.) Con una combinacién de las técnicas especiales y las coloraciones de contraste como H-E, no s6lo apare- cen las fibras eldsticas, sino también los demas compo- nentes del tejido. FIGURA 1, dermis, simio, Weigert x160. Aqui se muestra el tejido conectivo de 1a piel, conocido como dermis, tefiido de manera tal que se puedan apreciar la naturaleza y la distribucién de las fibras eldsticas (E), que se ven de color ptirpura. Las fibras de colégeno (C) se han teftido con Ia eosina y los dos tipos de fibras se diferencian con facilidad. E1 tejido conectivo en la parte superior de la figura, cercano al epitelio (la capa papilar de la dermis), contiene las fibras eldsticas (véase el in- gulo superior izquierdo de la figura) y fibras colgenas menos gruesas. En la parte inferior dé la foto se ven fi- bras eldsticas y colégenas bastante més gruesas. Notese ademas que muchas de las fibras eldsticas aparecen co- ‘mo pequeitos rectingulos. Estas imagenes slo tepresen- tan fibras que discurren a través del espesor del corte, en Angulo oblicuo con respecto al trayecto de la cuchilla. Un examen cuidadoso permitird descubrir unas pocas fi- bras seccionadas transversalmente, que aparecen como, puntos oscuros. En general, las fibras eldsticas de la der- mis tienen una disposicién tridimensional entrelazada, de alli Ia variedad de formas. FIGURA 2, mesenterio, rata, Weigert x160. En es- te caso se observa un mesenterio montado sin cortar, se ‘mejante a la figura 2 de la Iémina 1, pero preparado para mostrar los elementos de tejido conectivo y tefiido por una técnica diferencial para revelar las fibras elésticas 122 hebras entrecru- (E). Estas aparecen como finas y lar; zadas y ramificadas sin comienzo ni fin distinguibles, y con un trayecto bastante irregular. También aqui se ti fien las fibras coldgenas (C) con la eosina de la colora- cidn de contraste, que las presenta como fibras largas, rectas y bastante mas gruesas que las fibras eldsticas. FIGURA 3, arteria, simio, Weigert x80. El material elistico también se presenta en la forma de léminas 0 membianas, no sdlo como fibras individuales. Esta figu- ra muestra la pared de una arteria eléstica (la arteria pul- monar) que se tift6 para demostrar el material eléstico presente. Cada una de las lineas onduladas es una capa de material elstico organizado en la forma de una lémi- na o membrana fenestrada. El plano de corte permite que las membranas eldsticas se vean de perfil. Esta muestra no fue teflida luego con H-E, por lo que carece de coloraci6n de contraste. Los espacios vacfos en apa- riencia que se encuentran entre las capas eldsticas con- tienen colégeno y elementos celulares (células musculs- res lisas), que permanecen sin tei. Los tejidos del organismo que contienen gran canti- dad de material elistico se limitan casi con exclusividad aa las paredes de las arterias elésticas y a algunos liga- ‘mentos asociados con la columna vertebral.LAMINA 10