Qu es la Biologa?

La palabra como tal, proviene del griego bios (vida) y logos (estudio),
por lo tanto, la biologa es el estudio de la vida. Asimismo, la biologa es

una
ci
encia que se basa en la observacin de la naturaleza y la experimentacin
para explicar los fenmenos relacionados con la vida; es por ello, que tiene
como objeto el estudio de los seres vivos tanto en su origen, evolucin y sus
propiedades.
Por otra parte, se ocupa tanto de la descripcin de las caractersticas y
los comportamientos de los organismos

individuales como de las especies en su conjunto, as como de la

reproduccin de los seres vivos y de las interacciones entre ellos y el medio
ambiente. De este modo, trata de estudiar la estructura y la dinmica
funcional comunes a todos los seres vivos, con el fin de establecer las leyes
generales que rigen la vida orgnica y los principios explicativos
fundamentales de esta.
No obstante, posee fundamentos slidos y verdaderamente cientficos
que son relativamente recientes, los cuales exige la cooperacin de otras
disciplinas, tales como la zoologa, la botnica, la fsica y la qumica y de ella
misma, ya que con su propio desarrollo ha dado lugar al nacimiento de otra
ciencia que forma parte de la propia Biologa la cual es la gentica.

Sin embargo, es importante tener en cuenta que la biologa abarca

diversos campos de estudios que, muchas veces, son considerados como
disciplinas independientes. Se puede mencionar a la biologa molecular, la
gentica molecular, la bioqumica y la biologa celular, entre otras.
Ms all de las diferencias, todas las ramas de la biologa tienen ciertos
postulados y principios comunes que hacen que la ciencia sea una unidad.
Una de las ideas bsicas de la biologa sostiene que todas las formas de
vida comparten un mismo antepasado; por otra parte, las diferencias de la
actualidad se explican a partir de la teora de la evolucin, esta teora
demuestra que los organismos de apariencia muy diferente comparten una
gran cantidad de procesos y caractersticas.
Se puede decir, que todas las variantes de estudio de la biologa,
tienen en comn la evolucin de la vida; ya que todo ser vivo, ha ido
evolucionando hasta lo que es hoy, por lo mismo, es fundamental el estudio
de la biologa, para comprender lo que somos y cmo llegamos hasta ste
nivel evolutivo.
Por otra parte, en la actualidad la biologa tiene como gran aliada a la
tecnologa, puesto que por medio de ella, sus estudios y anlisis son ms
acabados y completos. Ya que una gran cantidad de elementos, no pueden
ser percibidos o captados por medio de las capacidades intrnsecas del ser
humano, por lo que su campo de observacin y experimentacin, se ampla
enormemente, al utilizar la tecnologa.
Sin embargo, a pesar de los avances actuales, esta ciencia sigue
siendo una ciencia en elaboracin; pero su importancia es una ventaja
evidente, ya que est proporcionada por su mismo objetivo central que es la
vida, su conservacin y perfeccionamiento.
Importancia.
La biologa es importante ya que es una de las ciencias naturales que
tiene como objeto de estudio a los seres vivos tanto su origen, su evolucin
y sus propiedades: gnesis, nutricin, morfognesis, reproduccin,
patogenia, entre otros aspectos. Se puede decir, que se ocupa tanto de la
descripcin de las caractersticas y los comportamientos de los organismos
individuales como de las especies en su conjunto, as como de la
reproduccin de los seres vivos y de las interacciones entre ellos y el
entorno. En otras palabras, se preocupa de la estructura y la dinmica
funcional comunes a todos los seres vivos con el fin de establecer las leyes
generales que rigen la vida orgnica y los principios explicativos
fundamentales de sta.
Por otra parte, el conocimiento de la variedad de la vida, su
explotacin y conservacin es de gran importancia en nuestro diario vivir,
es por ello, que el estudio del origen de las enfermedades es tambin
responsabilidad de la Biologa, por ejemplo la etiologa del cncer, las
infecciones, los problemas funcionales, entre muchas otras.
La Biologa estudia tambin los factores de entorno que rodean a los
seres vivientes; y por medio de la rama conservacionista/ambientalista
busca maneras ms efectivas para reducir los inconvenientes del ambiente

preservando as la existencia de todos los seres vivientes que habitan el

planeta.
Adems, la biologa permite conocer el funcionamiento de los
organismos, permite conocer el funcionamiento de las clulas, permite
estudiar
la

biofsica (unin de la biologa con la fsica), ayuda en el estudio de la

transformacin y aprovechamiento de las materias orgnicas e inorgnicas
por parte de los seres vivos. Tambin, es ciencia base de otras ramas como
la Medicina, Farmacologa, Neurobiologa, Gentica, Veterinaria, Anatoma,
botnica, ciencias del medio ambiente, entre otras; y permite desarrollar
tcnicas que mejoran las especies, en vegetales, animales y seres humanos.

Por ltimo, la biologa ha tenido un gran impacto a nivel tecnolgico y

social, ya que tiene una relacin entre la interaccin del ser humano y la
naturaleza; asimismo, la relacin que mantiene el ser humano por esto dos
sentido, son que la biologa se da a la busca de la informacin, y en la
tecnologa, estos datos obtenidos se apoya entre s para crear artefactos
que ayuden al anlisis de esta y recabar aun mas, por ende estas dos partes
son establecida por el hombre, dando as un impacto social al dar a conocer
los numerosos estudios y anlisis de las ciencias biolgicas.
Historia.
La Biologa es una ciencia antigua desde el punto de vista de sus
comienzos pero joven desde el punto de vista de los continuos
descubrimientos su complejidad de la materia viva quedo puesta de
manifiesto con el descubrimiento del microscopio electrnico y el estudio de
los diferentes tejidos del ser vivo.
Es por ello, que como ciencia la Biologa aparece en Grecia, siendo
Galeno el primer fisilogo experimental su estudio se fundamento
bsicamente en nervios y vasos en animales, de igual manera que la
anatoma humana con cadveres de monos y cerdos, hizo esto pensando en
un paralelismo entre estos animales y el hombre, provocando que
aparecieran errores importantes en sus conclusiones.
Para el siglo XVI comienzan a realizarse estudios detallados de todos
los seres vivos, ya que Vesalio estudi la estructura y funcin de los rganos
de los animales especialmente en el hombre, adems mencionaba que la
confianza en trabajos anteriores deba ser limitada, centrndose en las
experiencias personales.
Luego, en el siglo XVII se descubre el microscopio y la biologa sufre un
avance importante, puesto que Malpighi y Leewemhoek estudian la
estructura de los tejidos, se observan las bacterias, protozoos y
espermatozoides.
Despus, en el siglo XIX, el avance de otras ramas provoca tambin
otro fuerte impulso para la Biologa, sobre todo a nivel de la biologa
molecular.
Cabe destacar, que desde el punto de vista etimolgico, la biologa
significa estudio de la vida, estudiando las formas que pueden adoptar los
seres vivos, su estructura, funcin, reproduccin, crecimiento, organizacin
y relaciones con el medio que los rodea.
Sin embargo, las disciplinas que se han dando a lo largo de la historia
de la Biologa son: la botnica, estudio de las plantas; Taxonoma, la
clasificacin de los seres vivos; Zoologa, estudio de los animales; Anatoma,
estudio de la estructura de los seres vivos; Fisiologa, estudio del
funcionamiento del ser vivo; Embriologa, estudio del desarrollo del embrin;
Gentica, Ecologa, Evolucin, entre otras.
Autores y Desarrollo de la Biologa.

Leer ms: http://biopsicosalud4.webnode.com.ve/biologia/

Una combinacin de mtodos ayuda al estudio de la clula

El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela
a la invencin de instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que
extienden los sentidos a nuevos lmites y acrecientan el conocimiento de la
estructura y funcionamiento de la clula. El acceso a este tipo de
conocimiento resulta dificultoso pues las clulas son pequeas y
transparentes. El ojo humano slo puede discriminar dos puntos separados
por ms de 0,1 mm 100 micrmetros (mm). La mayora de las clulas son
mucho ms pequeas y se necesita del microscopio ptico cuyo lmite de
resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras ms pequeas, que midan entre
0,4 y 200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio electrnico. Para
mayores detalles, consulte la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean
corrientemente en microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente
tabla se expresan aquellas unidades y sus equivalencias:
Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia
Unidad

Smbolo

Equivalencia en
metro (m)

Utilizacin principal en citologa

Centmetro

cm

0,01 metro

Objetos macroscpicos a simple

vista. Huevos grandes.

Milmetro

mm

0,001m

Objetos macroscpicos a simple

vista. Clulas muy grandes.

Micrmetro

mm

10-6 m

Microscopia de luz (ptica)Casi

todas las clulas y organelos
grandes.

nm

-9

Microscopia electrnica.Organelas
pequeas, macromolculas
grandes.

-10

Microscopia electrnica. Mtodos

de difraccin de rayos X. Molculas
y tomos.

Nanmetro

Angstrom

10 m

10

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109

Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son

transparentes debido a su alto contenido de agua. Al disecarla no presenta
un significativo contraste. Entonces la tincin selectiva de ciertos
componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin embargo la
mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de la clula y an ms, a
cambios qumicos y morfolgicos que no se encuentran en las clulas
activas y en la matriz extracelular.
Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides
vegetales pueden absorber determinadas longitudes de onda (l) [1] y no
necesitan de previo tratamiento para su observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales
como, por ejemplo, la microscopia de contraste de fase o la de interferencia.
Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de
organizacin a nivel microscpico.
En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica
ms adecuada para estudiar la configuracin molecular de protenas, de
cidos nucleicos y de algunos entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados,
descriptos y localizados dentro y fuera de la clula mediante mtodos
adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y
macromolculas y el preparado de cultivos celulares para el estudio
detallado son herramientas invalorables para el avance de la biologa celular
y molecular.
Los microscopios proveen ventanas para el mundo de la clula

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico

El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de
los microscopios en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son an
herramientas indispensables para el estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los
que son utilizados en los laboratorios hoy, son microscopios pticos. La
luz visible pasa a travs de la muestra y de las lentes de vidrio por donde la
luz es refractada (doblada) de tal manera, que la imagen del espcimen
es amplificada cuando se proyecta en el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de
resolucin . Entendemos por aumento a las dimensiones aparentes de los
objetos comparados con su tamao real. El poder de resolucin es la medida
de la nitidez de la imagen; es la capacidad del instrumento para brindar
imgenes distintas de dos puntos cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la
medida de una pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la longitud
de onda de la luz visible usada para iluminar la muestra. Los microscopios
pticos o de luz pueden aumentar efectivamente alrededor de 1000 a 1500
veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el aumento la

imagen proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia

de luz del comienzo de este siglo ha involucrado nuevos mtodos para
aumentar el contraste. Sin estas tcnicas sera imposible para el ojo
humano el conocimiento del mundo celular.
La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas
por la microscopia de luz. La Biologa Celular avanz rpidamente hace un
poco ms de cincuenta aos con la introduccin del microscopio electrnico.
En lugar de luz visible, el microscopio electrnico utiliz un haz de
electrones [2] a travs de la muestra. El poder de resolucin est
inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un
microscopio usa y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho
ms cortas que la luz visible. Para mayores precisiones al respecto, consulte
el cuadro 1.4
Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio
En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de
onda (l) y de la apertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz).
As, el lmite de resolucin, que es la distancia mnima que debe existir entre dos
puntos para que puedan ser discriminados como tales, y responde a la siguiente
ecuacin:Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de
apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del
instrumento, de modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de
resolucin conseguido.

Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico

La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una

resolucin de 0,2 nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el
microscopio ptico.
Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la
anatoma celular cuando se resuelve por un microscopio electrnico.
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de
transmisin (MET) y el microscopio electrnico de barrido (MEB):

El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz

extracelular. El haz de electrones es desviado por un campo
electromagntico (que actuara como lente). En este tipo de microscopia se
requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.

El MEB es especialmente til para estudios de superficie del

espcimen. El haz de electrones explora la superficie de la muestra la que
usualmente se recubre con una pelcula de oro. El haz excita a los
electrones sobre la superficie de la misma muestra y estos electrones
secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una
imagen de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es
su gran profundidad de campo, la cual resulta en una imagen
tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero
el MO ofrece muchas ventajas especialmente para el estudio de la clula
viva. Una desventaja de ME es que los mtodos qumicos y fsicos usados
para preparar la muestra, no slo matan a las clulas sino que puedan
introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en micrografas que no
existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si
se trabaja con las clulas muertas.
En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de
microscopia para la preparacin de la muestra:
Tabla 1.12 Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y
Electrnica
Paso

Microscopia ptica

Microscopia Electrnica

Pueden usarse fijadores

qumicos (formol, etanol,
metanol o mezclas
fijadoras). Tambin se
utilizan mtodos fsicos
como la desecacin, el
calor seco, el fro o la

Se realiza con
paraformaldehido, con
tetrxido de osmio o,
ltimamente, con
glutaraldehido, en
soluciones acuosas de pH
neutro y concentracin

Obtencin: Se hace
cuidadosamente con
instrumental adecuado.
Fijacin: se destina a
impedir la
autodegradacin
enzimtica (autlisis)de
las clulas tratando de
evitar, en lo posible, la
alteracin de las

estructuras originales y su
congelacin.
autodigestin.

salina semejante al medio.

Luego se lava la pieza y se
post-fija con tetrxido de
osmio durante una hora; el
osmio se une a estructuras
lipoproteicas (membranas
celulares) ofreciendo mayor
contraste en la imagen.
Esto se conoce
comocoloracin o
contrastado.

Deshidratacin: retira el
agua de las piezas fijadas,
para que luego puedan
Pasajes sucesivos por
ser incluidas en un
alcoholes de
elemento que es
concentracin creciente.
insolubles en solventes
acuosos.

Baos con alcohol o

acetona.

Aclaracin

Se realiza para eliminar de

la muestra restos de
alcohol y toda sustancia
hidrosoluble. Se impregna
la muestra con un
No requiere
solvente no acuoso,
orgnico y soluble en
parafina, como xileno,
tolueno o benceno.

Inclusin

Se incluye el material en
parafina o celoidina
previamente calentada, la
que al solidificarse sirve
de sostn de la muestra y
posibilita su corte. Se
forma el taco.

Se utilizan resinas sintticas

tipo epoxi que luego de
secarse se transforman en
un material muy duro, apto
para que se le efecten
cortes extremadamente
delgados.

Corte

Es lo suficientemente
delgado como para ser
atravesado por la luz. Esto
se logra utilizando
el micrtomo con el que
se realiza cortes
uniformes del tejido a un
dado espesor.

Debe obtenerse un corte de

la muestra tal que el haz de
electrones logre
atravesarla.
El ultramicrtomorealiza
cortes de 20 a 100 nm de
espesor con cuchillas de
vidrio o diamante.

Rehidratacin

Se retira la parafina con

xilol y se lava con
alcoholes de

concentracin creciente.
Al ser los colorantes
solubles en agua resulta
indispensable rehidratar

Coloracin

Las clulas y los tejidos

son coloreados para lograr
mayores contrastes
facilitando la observacin.
La coloracin de
hematoxilina-eosina es
una de las ms
comnmente utilizadas.
Tie el ncleo de azul y el
citoplasma de rosa.

MontajeEl corte se coloca

sobre ciertas clases de
estructuras.

El corte se monta sobre

un portaobjetos. El
cubreobjetos puede
Estas muestras se montan
colocarse por encima para
en pequeas grillas de
proteger el preparado.
cobre
Este puede conservarse
durante dcadas si el
cubreobjetos se sella.
La pieza se impregna en
acetato de uranilo, citrato
de plomo u otras
sustancias.

Contrastado

Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del

ME y sus caractersticas singulares se especifican en la siguiente tabla.
Tabla 1.13 Diferencias entre el MO y ME
Microscopio ptico

CARACTERSTICA

Microscopio Electrnico

De interferencia de
rayos luminosos

1) IMAGEN DADA POR

MECANISMO:

De dispersin de electrones

Simple con aire

2) TUBO

Al vaco con gran diferencia de

potencial

Luz (fotones)

3) FUENTE

Filamento de tungsteno
(electrones)

Lentes: Ocular, objetivo

4) ELEMENTOS
y condensador

Bobinas electromagnticas

Clulas vivas o muertas 5) ESTUDIAN

Clulas muertas

Coloreadas o no

Distintas tonalidades de gris. En

6) OBSERVACIN DE LA
la actualidad se ven imgenes
IMAGEN
sombreadas electrnicamente.

0,25m

7) LIMITE DE
RESOLUCIN

3 a 5 (terico)10 (en la
prctica)

5.500 (trmino
medio)

8) LONGITUD DE ONDA

0,056

500 X a 1500 X

9) AUMENTO (el signo X

30.000 X a 1.000.000 X
significa aumento)

Carnoy u otros fijadores 10) FIJACIN

Bicromato de potasio, tetrxido

de osmio, formaldehdo.

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Acrlicos o resinas de epoxi.

Con el micrtomo.
(cuchilla de acero).
Cortes de 10m

12) CORTES

Con ultramicrtomo. (cuchilla de

diamante o vidrio) Cortes de 100
a 500 .

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Placas de Colodion, aluminio o

berilio.

Nivel
14) NIVEL DE
microscpico:Estructura OBSERVACIN

Nivel
submicroscpico:ULTRAESTRUCT
URA

Las clulas vivas pueden ser observadas a travs del microscopio

Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz
aumentando el contraste de las estructuras transparentes. As surgieron
varias clases de microscopios pticos convirtindose en herramientas
destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si se considera la posibilidad
de que algunos componentes de la clula puedan perderse o distorsionarse
durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la
clula viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.
Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos
especiales que logran intensificar la escasa interferencia [3] y proporcionan
mayor contraste que el obtenido con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta
oblicuamente y los sistemas de lentes detectan la luz reflejada por la
muestra que se ve como un objeto brillante contra un fondo oscuro,
logrndose un gran relieve de rasgos de la clula que son invisibles en el
MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a
nivel molecular de las clulas y los tejidos no slo en las clulas vivas sino
en preparados post-mortem. Ciertos componentes celulares y tisulares se

comportan peculiarmente cuando la luz polarizada (luz que gira nicamente

en un plano) los atraviesa.
Las organelas pueden aislarse para estudiarlas ms profundamente
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco
acerca de su funcin. La Biologa Celular actual desarrolla la integracin de
la Citologa con la Bioqumica, es decir el estudio de la estructura celular
junto con el anlisis de los procesos qumicos de la vida (metabolismo). El
fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en esta ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las
organelas principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser
estudiadas. El instrumento usado para fraccionar las clulas es la centrfuga
capaz de girar a diversas velocidades. La ms poderosa, llamada
ultracentrfuga puede dar vueltas tan rpidamente como 80000
revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de
500000 veces mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la
ruptura de la clula. El objetivo es romper las clulas sin daar severamente
sus organelas. El homogenato se centrifuga logrndose la separacin de las
partes de la clula en dos fracciones: el pellet que consiste en las
estructuras ms grandes depositadas en el fondo del tubo y
elsobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el

lquido por encima del pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y

centrifugado otra vez. El proceso es repetido incrementando la velocidad en
cada paso. De esta manera se consigue recolectar componentes ms
pequeos de los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de
la clula tanto cualitativa como cuantitativamente.
Las poblaciones celulares pueden ser separadas por el citmetro de flujo
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a
las clulas una tras otra. Un determinado tipo celular emitir fluorescencia,
previo tratamiento con fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la
discriminacin y, por lo tanto, la separacin de las clulas as tratadas de
acuerdo a la fluorescencia que emitan.
Las clulas vivas pueden ser estudiadas mediante el cultivo celular
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos
los tipos celulares, se han desarrollado tcnicas de disociacin de las
clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un
pequeo trozo de tejido en un medio compuesto por suero sanguneo,
extracto de embriones y solucin salina. Hoy se conocen los requerimientos
nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y hacen crecer en un
medio sinttico enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de cultivos:

Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido

se separa en condiciones aspticas y se corta en pequeos trozos y se los
trata con tripsina (enzima proteoltica) que disocia los agregados celulares y
genera una suspensin de clulas libres que se cultivan en un medio
apropiado.

Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con

tripsina de un cultivo primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de
Petri.

Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga

debido a las condiciones cancerosas de las clulas. Entre las ms usadas se
encuentran las clulas HeLa. A pesar de tales anomalas son muy tiles para
el estudio del cncer.
Las molculas orgnicas son estudiadas dentro y fuera de la clula
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos
tipos de compuestos. El agua constituye alrededor del 70% de la mayora de
los seres vivos. De los dems compuestos, los principales son los glcidos,
loslpidos, las protenas y los nucletidos, muchos de ellos combinados para
formar los cidos nucleicos, cido ribonucleicos (ARN) y cido
desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros compuestos presentes,
estas cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas
orgnicas de los seres vivos y son los actores de los procesos metablicos.

Por lo tanto, su localizacin y funcin dentro de la clula como un estudio

ms detallado fuera de ella se hace necesario.
Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la
cuantificacin de molculas orgnicas se mencionan a continuacin:
Reconstruccin de imgenes a partir de electromicrografas
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o
estructuras supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de
rayos lser para obtener un diagrama de difraccin ptica. Este diagrama es
procesado por un programa de computacin consiguiendo la reconstruccin
de las molculas individuales en las fases y amplitudes correspondientes a
un rea de la microfotografa.
Difraccin de rayos X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz
de rayos X y provoca la dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los
electrones de los tomos de la muestra. Este haz disperso debe alcanzar
una placa fotogrfica. La estructura molecular tridimensional se deduce de
las posiciones y las intensidades de las manchas registradas en la placa
fotogrfica.
Los mtodos citoqumicos
Los compuestos qumicos se identifican in situ por medio de mtodos
citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el
estudio de los cambios dinmicos producidos en el contenido qumico
celular en las distintas etapas del metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un
grupo qumico caracterstico que posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en
Qumica Analtica pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este
tipo de identificacin.
Las diversas molculas de la clula pueden localizarse por las
tcnicas inmunohistoqumicas
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son
expuestos a la actividad de los microorganismos o a molculas ajenas a sus
ultraestructuras, ya sea naturalmente o por inyeccin, aquellos
sintetizananticuerpos. Estos son protenas que pueden fijarse
selectivamente a los materiales extraos que desencadenaron su sntesis.
Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partculas
extraas (antgenos) son reconocidas. As, se puede obtener una gran
variedad de anticuerpos.

Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para

reconocer y manipular clulas y molculas. Si un animal de una especie
determinada es inyectado con un componente celular o molecular de otra
especie, el primero logra fabricar anticuerpos capaces de reconocer y fijar
fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A estos anticuerpos
se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo similar,
con el M.E. se pueden detectar molculas trazadoras acopladas en
anticuerpos. De esta manera, los componentes celulares y moleculares
quedan teidos en forma diferencial por los anticuerpos que se fijan a
ellos.
Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las
molculas orgnicas, otros mtodos fisicoqumicos de ms fina
determinacin, purificacin y cuantificacin de las biomolculas se
mencionarn en las prximas unidades. Como se ver, dichas tcnicas son
de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.
TOMADO DE http://www.genomasur.com/lecturas/Guia01.htm

Una combinacin de mtodos ayuda al estudio de la clula

El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela
a la invencin de instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que
extienden los sentidos a nuevos lmites y acrecientan el conocimiento de la
estructura y funcionamiento de la clula. El acceso a este tipo de
conocimiento resulta dificultoso pues las clulas son pequeas y
transparentes. El ojo humano slo puede discriminar dos puntos separados
por ms de 0,1 mm 100 micrmetros (mm). La mayora de las clulas son
mucho ms pequeas y se necesita del microscopio ptico cuyo lmite de
resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras ms pequeas, que midan entre
0,4 y 200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio electrnico. Para
mayores detalles, consulte la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean
corrientemente en microscopia no son las de uso cotidiano. En la siguiente
tabla se expresan aquellas unidades y sus equivalencias:
Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia
Unidad

Smbolo

Equivalencia en
metro (m)

Utilizacin principal en citologa

Centmetro

cm

0,01 metro

Objetos macroscpicos a simple

vista. Huevos grandes.

Milmetro

mm

0,001m

Objetos macroscpicos a simple

vista. Clulas muy grandes.

Micrmetro

mm

10 m

Microscopia de luz (ptica)Casi

todas las clulas y organelos
grandes.

Nanmetro

nm

10-9 m

Microscopia electrnica.Organelas
pequeas, macromolculas
grandes.

Angstrom

10-10 m

Microscopia electrnica. Mtodos

de difraccin de rayos X. Molculas
y tomos.

-6

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109

Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son
transparentes debido a su alto contenido de agua. Al disecarla no presenta
un significativo contraste. Entonces la tincin selectiva de ciertos
componentes celulares resuelve el problema del contraste. Sin embargo la
mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de la clula y an ms, a
cambios qumicos y morfolgicos que no se encuentran en las clulas
activas y en la matriz extracelular.
Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides
vegetales pueden absorber determinadas longitudes de onda (l) [1] y no
necesitan de previo tratamiento para su observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales
como, por ejemplo, la microscopia de contraste de fase o la de interferencia.
Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de
organizacin a nivel microscpico.
En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica
ms adecuada para estudiar la configuracin molecular de protenas, de
cidos nucleicos y de algunos entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados,
descriptos y localizados dentro y fuera de la clula mediante mtodos
adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y
macromolculas y el preparado de cultivos celulares para el estudio
detallado son herramientas invalorables para el avance de la biologa celular
y molecular.
Los microscopios proveen ventanas para el mundo de la clula

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico

El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de
los microscopios en el siglo XVII. Los microscopios de varios tipos son an
herramientas indispensables para el estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los
que son utilizados en los laboratorios hoy, son microscopios pticos. La
luz visible pasa a travs de la muestra y de las lentes de vidrio por donde la
luz es refractada (doblada) de tal manera, que la imagen del espcimen
es amplificada cuando se proyecta en el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de
resolucin . Entendemos por aumento a las dimensiones aparentes de los
objetos comparados con su tamao real. El poder de resolucin es la medida
de la nitidez de la imagen; es la capacidad del instrumento para brindar
imgenes distintas de dos puntos cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la
medida de una pequea bacteria. Esta resolucin es limitada por la longitud
de onda de la luz visible usada para iluminar la muestra. Los microscopios
pticos o de luz pueden aumentar efectivamente alrededor de 1000 a 1500
veces el tamao de la muestra real; si se incrementase el aumento la

imagen proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia

de luz del comienzo de este siglo ha involucrado nuevos mtodos para
aumentar el contraste. Sin estas tcnicas sera imposible para el ojo
humano el conocimiento del mundo celular.
La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas
por la microscopia de luz. La Biologa Celular avanz rpidamente hace un
poco ms de cincuenta aos con la introduccin del microscopio electrnico.
En lugar de luz visible, el microscopio electrnico utiliz un haz de
electrones [2] a travs de la muestra. El poder de resolucin est
inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un
microscopio usa y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho
ms cortas que la luz visible. Para mayores precisiones al respecto, consulte
el cuadro 1.4
Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio
En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de
onda (l) y de la apertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz).
As, el lmite de resolucin, que es la distancia mnima que debe existir entre dos
puntos para que puedan ser discriminados como tales, y responde a la siguiente
ecuacin:Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de
apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del
instrumento, de modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de
resolucin conseguido.

Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico

La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una

resolucin de 0,2 nm, unas 1000 veces mejor que la obtenida con el
microscopio ptico.
Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la
anatoma celular cuando se resuelve por un microscopio electrnico.
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de
transmisin (MET) y el microscopio electrnico de barrido (MEB):

El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz

extracelular. El haz de electrones es desviado por un campo
electromagntico (que actuara como lente). En este tipo de microscopia se
requiere que las muestras tengan un grosor de 100 nm.

El MEB es especialmente til para estudios de superficie del

espcimen. El haz de electrones explora la superficie de la muestra la que
usualmente se recubre con una pelcula de oro. El haz excita a los
electrones sobre la superficie de la misma muestra y estos electrones
secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto forma una
imagen de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es
su gran profundidad de campo, la cual resulta en una imagen
tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero
el MO ofrece muchas ventajas especialmente para el estudio de la clula
viva. Una desventaja de ME es que los mtodos qumicos y fsicos usados
para preparar la muestra, no slo matan a las clulas sino que puedan
introducir artefactos, estructuras peculiares vistas en micrografas que no
existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si
se trabaja con las clulas muertas.
En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de
microscopia para la preparacin de la muestra:
Tabla 1.12 Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y
Electrnica
Paso

Microscopia ptica

Microscopia Electrnica

Pueden usarse fijadores

qumicos (formol, etanol,
metanol o mezclas
fijadoras). Tambin se
utilizan mtodos fsicos
como la desecacin, el
calor seco, el fro o la

Se realiza con
paraformaldehido, con
tetrxido de osmio o,
ltimamente, con
glutaraldehido, en
soluciones acuosas de pH
neutro y concentracin

Obtencin: Se hace
cuidadosamente con
instrumental adecuado.
Fijacin: se destina a
impedir la
autodegradacin
enzimtica (autlisis)de
las clulas tratando de
evitar, en lo posible, la
alteracin de las

estructuras originales y su
congelacin.
autodigestin.

salina semejante al medio.

Luego se lava la pieza y se
post-fija con tetrxido de
osmio durante una hora; el
osmio se une a estructuras
lipoproteicas (membranas
celulares) ofreciendo mayor
contraste en la imagen.
Esto se conoce
comocoloracin o
contrastado.

Deshidratacin: retira el
agua de las piezas fijadas,
para que luego puedan
Pasajes sucesivos por
ser incluidas en un
alcoholes de
elemento que es
concentracin creciente.
insolubles en solventes
acuosos.

Baos con alcohol o

acetona.

Aclaracin

Se realiza para eliminar de

la muestra restos de
alcohol y toda sustancia
hidrosoluble. Se impregna
la muestra con un
No requiere
solvente no acuoso,
orgnico y soluble en
parafina, como xileno,
tolueno o benceno.

Inclusin

Se incluye el material en
parafina o celoidina
previamente calentada, la
que al solidificarse sirve
de sostn de la muestra y
posibilita su corte. Se
forma el taco.

Se utilizan resinas sintticas

tipo epoxi que luego de
secarse se transforman en
un material muy duro, apto
para que se le efecten
cortes extremadamente
delgados.

Corte

Es lo suficientemente
delgado como para ser
atravesado por la luz. Esto
se logra utilizando
el micrtomo con el que
se realiza cortes
uniformes del tejido a un
dado espesor.

Debe obtenerse un corte de

la muestra tal que el haz de
electrones logre
atravesarla.
El ultramicrtomorealiza
cortes de 20 a 100 nm de
espesor con cuchillas de
vidrio o diamante.

Rehidratacin

Se retira la parafina con

xilol y se lava con
alcoholes de

concentracin creciente.
Al ser los colorantes
solubles en agua resulta
indispensable rehidratar

Coloracin

Las clulas y los tejidos

son coloreados para lograr
mayores contrastes
facilitando la observacin.
La coloracin de
hematoxilina-eosina es
una de las ms
comnmente utilizadas.
Tie el ncleo de azul y el
citoplasma de rosa.

MontajeEl corte se coloca

sobre ciertas clases de
estructuras.

El corte se monta sobre

un portaobjetos. El
cubreobjetos puede
Estas muestras se montan
colocarse por encima para
en pequeas grillas de
proteger el preparado.
cobre
Este puede conservarse
durante dcadas si el
cubreobjetos se sella.
La pieza se impregna en
acetato de uranilo, citrato
de plomo u otras
sustancias.

Contrastado

Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del

ME y sus caractersticas singulares se especifican en la siguiente tabla.
Tabla 1.13 Diferencias entre el MO y ME
Microscopio ptico

CARACTERSTICA

Microscopio Electrnico

De interferencia de
rayos luminosos

1) IMAGEN DADA POR

MECANISMO:

De dispersin de electrones

Simple con aire

2) TUBO

Al vaco con gran diferencia de

potencial

Luz (fotones)

3) FUENTE

Filamento de tungsteno
(electrones)

Lentes: Ocular, objetivo

4) ELEMENTOS
y condensador

Bobinas electromagnticas

Clulas vivas o muertas 5) ESTUDIAN

Clulas muertas

Coloreadas o no

Distintas tonalidades de gris. En

6) OBSERVACIN DE LA
la actualidad se ven imgenes
IMAGEN
sombreadas electrnicamente.

0,25m

7) LIMITE DE
RESOLUCIN

3 a 5 (terico)10 (en la
prctica)

5.500 (trmino
medio)

8) LONGITUD DE ONDA

0,056

500 X a 1500 X

9) AUMENTO (el signo X

30.000 X a 1.000.000 X
significa aumento)

Carnoy u otros fijadores 10) FIJACIN

Bicromato de potasio, tetrxido

de osmio, formaldehdo.

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Acrlicos o resinas de epoxi.

Con el micrtomo.
(cuchilla de acero).
Cortes de 10m

12) CORTES

Con ultramicrtomo. (cuchilla de

diamante o vidrio) Cortes de 100
a 500 .

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Placas de Colodion, aluminio o

berilio.

Nivel
14) NIVEL DE
microscpico:Estructura OBSERVACIN

Nivel
submicroscpico:ULTRAESTRUCT
URA

Las clulas vivas pueden ser observadas a travs del microscopio

Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz
aumentando el contraste de las estructuras transparentes. As surgieron
varias clases de microscopios pticos convirtindose en herramientas
destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si se considera la posibilidad
de que algunos componentes de la clula puedan perderse o distorsionarse
durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la
clula viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.
Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos
especiales que logran intensificar la escasa interferencia [3] y proporcionan
mayor contraste que el obtenido con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta
oblicuamente y los sistemas de lentes detectan la luz reflejada por la
muestra que se ve como un objeto brillante contra un fondo oscuro,
logrndose un gran relieve de rasgos de la clula que son invisibles en el
MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a
nivel molecular de las clulas y los tejidos no slo en las clulas vivas sino
en preparados post-mortem. Ciertos componentes celulares y tisulares se

comportan peculiarmente cuando la luz polarizada (luz que gira nicamente

en un plano) los atraviesa.
Las organelas pueden aislarse para estudiarlas ms profundamente
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco
acerca de su funcin. La Biologa Celular actual desarrolla la integracin de
la Citologa con la Bioqumica, es decir el estudio de la estructura celular
junto con el anlisis de los procesos qumicos de la vida (metabolismo). El
fraccionamiento celular ha sido particularmente importante en esta ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las
organelas principales de modo que, sus funciones individuales puedan ser
estudiadas. El instrumento usado para fraccionar las clulas es la centrfuga
capaz de girar a diversas velocidades. La ms poderosa, llamada
ultracentrfuga puede dar vueltas tan rpidamente como 80000
revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de
500000 veces mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la
ruptura de la clula. El objetivo es romper las clulas sin daar severamente
sus organelas. El homogenato se centrifuga logrndose la separacin de las
partes de la clula en dos fracciones: el pellet que consiste en las
estructuras ms grandes depositadas en el fondo del tubo y
elsobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el

lquido por encima del pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y

centrifugado otra vez. El proceso es repetido incrementando la velocidad en
cada paso. De esta manera se consigue recolectar componentes ms
pequeos de los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de
la clula tanto cualitativa como cuantitativamente.
Las poblaciones celulares pueden ser separadas por el citmetro de flujo
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a
las clulas una tras otra. Un determinado tipo celular emitir fluorescencia,
previo tratamiento con fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la
discriminacin y, por lo tanto, la separacin de las clulas as tratadas de
acuerdo a la fluorescencia que emitan.
Las clulas vivas pueden ser estudiadas mediante el cultivo celular
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos
los tipos celulares, se han desarrollado tcnicas de disociacin de las
clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un
pequeo trozo de tejido en un medio compuesto por suero sanguneo,
extracto de embriones y solucin salina. Hoy se conocen los requerimientos
nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y hacen crecer en un
medio sinttico enriquecido de suero. Se distinguen tres tipos de cultivos:

Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido

se separa en condiciones aspticas y se corta en pequeos trozos y se los
trata con tripsina (enzima proteoltica) que disocia los agregados celulares y
genera una suspensin de clulas libres que se cultivan en un medio
apropiado.

Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con

tripsina de un cultivo primario, seguido de un nuevo cultivo en una caja de
Petri.

Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga

debido a las condiciones cancerosas de las clulas. Entre las ms usadas se
encuentran las clulas HeLa. A pesar de tales anomalas son muy tiles para
el estudio del cncer.
Las molculas orgnicas son estudiadas dentro y fuera de la clula
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos
tipos de compuestos. El agua constituye alrededor del 70% de la mayora de
los seres vivos. De los dems compuestos, los principales son los glcidos,
loslpidos, las protenas y los nucletidos, muchos de ellos combinados para
formar los cidos nucleicos, cido ribonucleicos (ARN) y cido
desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros compuestos presentes,
estas cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas
orgnicas de los seres vivos y son los actores de los procesos metablicos.

Por lo tanto, su localizacin y funcin dentro de la clula como un estudio

ms detallado fuera de ella se hace necesario.
Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la
cuantificacin de molculas orgnicas se mencionan a continuacin:
Reconstruccin de imgenes a partir de electromicrografas
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o
estructuras supramoleculares se colocan en la trayectoria de un haz de
rayos lser para obtener un diagrama de difraccin ptica. Este diagrama es
procesado por un programa de computacin consiguiendo la reconstruccin
de las molculas individuales en las fases y amplitudes correspondientes a
un rea de la microfotografa.
Difraccin de rayos X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz
de rayos X y provoca la dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los
electrones de los tomos de la muestra. Este haz disperso debe alcanzar
una placa fotogrfica. La estructura molecular tridimensional se deduce de
las posiciones y las intensidades de las manchas registradas en la placa
fotogrfica.
Los mtodos citoqumicos
Los compuestos qumicos se identifican in situ por medio de mtodos
citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el
estudio de los cambios dinmicos producidos en el contenido qumico
celular en las distintas etapas del metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un
grupo qumico caracterstico que posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en
Qumica Analtica pero adaptadas a tejidos se usan para llevar a cabo este
tipo de identificacin.
Las diversas molculas de la clula pueden localizarse por las
tcnicas inmunohistoqumicas
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son
expuestos a la actividad de los microorganismos o a molculas ajenas a sus
ultraestructuras, ya sea naturalmente o por inyeccin, aquellos
sintetizananticuerpos. Estos son protenas que pueden fijarse
selectivamente a los materiales extraos que desencadenaron su sntesis.
Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partculas
extraas (antgenos) son reconocidas. As, se puede obtener una gran
variedad de anticuerpos.

Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para

reconocer y manipular clulas y molculas. Si un animal de una especie
determinada es inyectado con un componente celular o molecular de otra
especie, el primero logra fabricar anticuerpos capaces de reconocer y fijar
fuertemente aquel componente (el del segundo animal). A estos anticuerpos
se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo similar,
con el M.E. se pueden detectar molculas trazadoras acopladas en
anticuerpos. De esta manera, los componentes celulares y moleculares
quedan teidos en forma diferencial por los anticuerpos que se fijan a
ellos.
Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las
molculas orgnicas, otros mtodos fisicoqumicos de ms fina
determinacin, purificacin y cuantificacin de las biomolculas se
mencionarn en las prximas unidades. Como se ver, dichas tcnicas son
de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.
TOMADO DE http://www.genomasur.com/lecturas/Guia01.htm