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Resumo
A cafena uma das substncias mais consumidas no mundo, sendo encontrada em produtos
naturais como o caf e o cacau, ou associadas a outras substncias em produtos
industrializados. Pertencente classe dos alcaloides, tem a ao de estimular atividades
fisiolgicas naturais corpreas, podendo em longo prazo causar dependncia. Dessa maneira,
optou-se por meio de mtodo de separao a cromatografia, para extrair e qualificar a cafena,
como um dos produtos encontrados no dia a dia, como refrigerante e p de guaran. Sendo
posteriormente comparados, os efeitos causados na prtica de esportes, durante a gestao e
em testes com animais.
Palavras chaves: cafena / cromatografia de camada delgada / toxicologia /refrigerantes / p
de guaran.
Abstract
Caffeine is one of the most consumed substance in the world, being found in natural products
such as coffee and cocoa, or combined with other substances in manufactured products.
Belonging to the class of alkaloids, it has the action to stimulate bodily natural physiological
activities, and it may cause long-term dependency. In this way the chromatography separation
method was choose to extract and qualify caffeine as one of the products found in everyday
life, such as soft drinks and guarana powder. It is later compared the effects in sports, during
pregnancy and in animal tests.
Key words: caffeine / thin layer chromatography / toxicology / soft drinks / guarana powder.
Introduo
At a metade do sculo XX, as separaes de substncias eram feitas por meio de
mtodos simples e clssicos como: a precipitao e a destilao. Entretanto, com os avanos
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tecnolgicos, hoje as separaes podem ser feitas, atravs de mtodos mais precisos e
abrangentes de cromatografia, capazes de separar com maior preciso substncias formadas
por vrios compostos (SKOOG, 2002).
Nesse contexto optou-se por qualificar a cafena presente em um refrigerante (Coca
Cola) e tambm em p de guaran, comumente vendidos. A cafena um estimulante
encontrado naturalmente no caf, no cacau e no chocolate. Ela estimula diretamente o sistema
nervoso central e aumenta a excitao, ao mesmo tempo eleva a epinefrina - circulante,
tambm possui efeitos analgsicos (COLBERG, 2003). Para a qualificao das substncias,
foram feitas tanto separaes por HCl e NH4OH, como tambm a cromatografia de camada
delgada.
A cromatografia uma tcnica de fcil execuo, costumeiramente utilizada em
laboratrio de qumica orgnica, baseia-se em um mtodo de separao que encontra
aplicao em todos os ramos da cincia. Foi inventada e denominada pelo botnico russo
Mikhail Tswett no incio do sculo XX. Ele empregou a tcnica para separar vrios pigmentos
de plantas como clorofila e xantofila, passando solues desses componentes atravs de uma
coluna de vidro empacotada com carbonato de clcio finamente dividido. As espcies
separadas apareciam como bandas coloridas na coluna, o que colaborou para a escolha do
nome do mtodo (em grego chroma cor e graphien significa escrever) (SKOOG, 2002).
Mesmo aps a experincia de Tswett, que pode ser considerado como precursor, a
cromatografia foi praticamente ignorada at o ano de 1930. A partir dessa dcada a tcnica
passou a ser aperfeioada e subdivida em outras formas de acordo com a necessidade dos
pesquisadores: cromatografia lquida em camada delgada (determinao qualitativa de
aminocidos presentes no sangue e na urina, e fosfolipdios no lquido amnitico),
cromatografia lquida de alta resoluo (determinao quantitativa de aminocidos,
hemoglobinas, vitaminas, etc.) e cromatografia gasosa (separao de compostos volteis)
(ALBUQUERQUE; BARROS; XAVIER, 2005; DEGANI et al, 1998).
A tcnica de cromatografia como um todo, pode ser aplicada para a identificao de
compostos (comparao de compostos ou por comparao com padres previamente
existentes), para purificao de compostos (separao de substncias indesejveis) e para a
separao dos componentes de uma mistura. Sua aplicabilidade pode ser observada tambm
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nos trabalhos ganhadores de Prmio Nobel, onde o primeiro a ser destacar com o uso da
cromatografia foi o dos pesquisadores A. J. P Martin e R. L. M Synnge. (SKOOG, 2002).
De modo geral, essa tcnica consiste na realizao da separao de substncias, onde
necessria a presena de uma fase mvel (participao de um gs, um lquido ou um fluido) e
de uma fase estacionria, caracterizada pelo uso de uma coluna ou superfcie slida. Assim os
fluidos retidos na fase estacionria, movem-se lentamente no fluido de fase mvel, facilitando
assim a separao em bandas, que podem ser classificadas qualitativamente e posteriormente
quantitativamente (SIQUEIRA, 2003; DEGANI et al 1998).
A cromatografia em camada delgada foi desenvolvida cerca de 50 anos atrs por
Izmailov e Shraiber e aperfeioada, mais tarde por Meimhard, Hale, Kisechener, Miller e
Keller. Gordon e Martin, em 1944, foram os primeiros autores que separaram substncias por
cromatografia em papel. (SIQUEIRA, 2003).
Dessa maneira, pode-se descrever a cromatografia em camada delgada (CDD) como
uma tcnica de adsoro lquido-slido, onde a separao ocorre pela diferena de afinidade
presente entre os compostos de uma mistura atravs da fase estacionria. Como vantagens a
cromatografia de camada delgada apresenta: simplicidade, rapidez, economia e fcil
identificao visual. Sendo assim preferida para acompanhar reaes orgnicas, purificao
de compostos e identificao de substncias previamente obtidas atravs de cromatografia
lquida clssica (SKOOG, 2002; DEGANI et al, 1998).
O fator de reteno (Rf) uma dos aspectos mais importantes na cromatografia de
camada delgada, sendo constitudo pela razo entra a distncia percorrida pela substncia e
distncia percorrida pela fase mvel. A cromatografia de camada delgada pode utilizar escalas
analticas ou preparativas, as quais ambas utilizam placas de vidro com espessura de 3 a 4
mm. Entretanto as placas se diferenciam em tamanho, sendo as analticas com 10 cm x 2,5 cm
e as preparativas 20 cm x 20 cm (DEGANI et al, 1998).
Objetivos
O objetivo desse trabalho foi a aplicao do mtodo de cromatografia de camada
delgada para determinao da concentrao de cafena em amostras de refrigerante (CocaCola) e p de guaran. Mostrando tambm a importncia do mtodo cromatogrfico para
aplicaes em diferentes tipos de estudos, onde podem ser determinados os compostos de
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diferentes amostras. Optou-se tambm por determinar o quanto de cafena est presente nos
alimentos consumidos diariamente, e como seu consumo exagerado pode trazer vrias
consequncias ao organismo, como a dependncia, entre outros fatores que afetam
diretamente nossa qualidade de vida.
Cafena
A cafena, tambm conhecida como: 1,3,7 trimetilxantina (C8H10N4O2) um
alcaloide presente em mais de 60 espcies de plantas. Sua estrutura molecular pertence a um
grupo de xantinas trimetiladas que incluem seus compostos intimamente relacionados:
teobromina (presente no cacau) e teofilina (presente no ch). Quimicamente, esses alcaloides
so semelhantes a purinas, xantinas e cido rico, que so compostos metabolicamente
importantes. (TAVARES; SAKATA; RIOKO, 2012). Alguns exemplos so: a morfina,
herona, cido lisrgico (LSD), cocana, quinino, e nicotina.
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secagem, e colocada em uma cuba de revelao com iodo (fig. 2). Sendo retirada
aproximadamente de 2 a 3 minutos para ter seus resultados observados (SKOOG, 1996).
Mtodos para a extrao de cafena de refrigerante (Coca Cola)
Em uma proveta mediu - se 30ml de refrigerante, depois esse contedo foi transferido
para um funil de decantao (fig. 3), onde foi acrescentado 10ml de diclorometano, agitou - se
essa mistura levemente, prendeu-se o funil em um suporte, aguardando a separao das fases,
recolhendo a fase orgnica, e descartando a fase restante. A fase orgnica foi colocada em
uma placa de petri (fig. 4), levada capela, a fim de que se obtivesse evaporao da
substncia (DOMINGUEZ, 1975).
Resultados
Aps a adio dos reagentes adequados e respeitado o tempo no agitador magntico, a
soluo de p de guaran, HCl e NH4OH foi separada em duas fases. A fase lquida,
depositada juntamente com a cafena slida sobre uma placa de slica foi posteriormente
revelada com o iodo.
Quando as condies experimentais so completamente especificadas possvel
identificar uma substncia pelo seu valor de Rf. Define-se Rf, como a razo entre a distncia
percorrida na placa pela substncia e a distncia percorrida pelo solvente. Contudo, para fins
de identificao de uma substncia o solvente escolhido para eluio deve carrear o composto
a um Rf entre 0,3 e 0,6 e uma amostra autntica deve ser aplicada lado a lado na mesma placa,
para assegurar igualdade de condies experimentais. Alm disso, como muitas substncias
podem ter o mesmo valor de Rf, assim com podem ter o mesmo ponto de fuso, mtodos
adicionais devem ser utilizados para identificao inequvoca do composto (STILL; KAHN;
MITRA, 1978).
Houve o aparecimento de uma forte marca marrom, indicando onde foi adicionada a
cafena pura. Houve tambm o aparecimento faixas amareladas na slica assim indicando a
presena da cafena no p de guaran.
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Discusso
A aplicao do mtodo de cromatografia de camada delgada foi comprovadamente
importante e eficaz na separao de cafena nas amostras de coca cola e p de guaran, com a
utilizao do mtodo, aps a separao da soluo de p de guaran, HCl e NH4OH, que foi
depositada em fase lquida com cafena slida sobre uma placa slica, onde aps a revelao
com iodo observou-se se o aparecimento de faixas amarelas na slica indicando presena de
cafena no p de guaran. J com o refrigerante (Coca- cola), pode-se evidenciar a presena
de cristais de cafena depositados na placa de petri e observados microscpio tpico, logo
aps passar pelo processo de separao da fase orgnica com evaporao, atravs da adio de
diclorometano.
Foi comprovado que a cafena um estimulante que atua diretamente no sistema
nervoso central e aumenta a excitao, e tambm possui efeitos analgsicos, desse modo seu
uso contnuo atravs da ingesto de substncias que sejam compostas de cafena como o
refrigerante, caf, p de guaran, chocolate, por exemplo, pode causar dependncia nos
indivduos o que, possivelmente leva a comprometimentos na qualidade de vida e sade
dessas pessoas, portanto seu uso tem que ser moderado ou at mesmo evitado.
A tabela abaixo ilustra como produtos extremamente simples, que possuem a cafena
em sua composio podem fazer parte da nossa rotina diria.
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Estima-se que a quantidade de cafena presente em uma xcara de caf varie entre 47 e
134 mg. Aps administrao por via oral, a concentrao plasmtica mxima ocorre de 30
minutos a 2 horas. absorvida pelo trato intestinal de forma rpida e completa, apresentando
biodisponibilidade de 100%. Sua ligao a protenas plasmticas, principalmente albumina,
de 10% a 35% e o volume de distribuio de 0,6-0,7 L.kg-11 (TAVARES; SAKATA;
RIOKO, 2012).
Aps a ingesto, h a metabolizao no fgado por desmetilao pela CYP1A26. As
grandes diferenas observadas na concentrao plasmtica da cafena em cada indivduo, aps
administrao da mesma dose, esto relacionadas principalmente s variaes do
metabolismo, tais como: polimorfismos genticos, induo e inibio metablica do
citocromo P450, alteraes individuais, e a existncia de hepatopatia (OSLON, 2012;
TAVARES; SAKATA; RIOKO, 2012).
Descobriu-se que a dependncia da cafena pode estar relacionada ao fator gentico,
onde h um polimorfismo para o gene CYP1A2 de metabolizadores lentos de cafena
(TAVARES; SAKATA; RIOKO, 2012).
A cafena atravessa rapidamente as membranas celulares, assim como a barreira
hematoenceflica e placentria, atingindo grandes concentraes em todo o corpo, inclusive
no encfalo. O efeito biolgico da cafena resultado da ao em diversos alvos moleculares,
tais como: receptores de adenosina, fosfodiesterases, canais de clcio e receptores GABAA.
A adenosina age nos diversos sistemas fisiolgicos e os efeitos, geralmente, so
opostos aos da cafena (BARRET, 2012; TAVARES; SAKATA; RIOKO, 2012).
Assim, o efeito diurtico resultado do antagonismo dos receptores de adenosina A1 e
A2a. Alm disso, os efeitos estimulantes respiratrios das xantinas so resultado do
antagonismo de receptores de adenosina em centros respiratrios, pois a cafena aumenta a
sensibilidade do centro respiratrio ao gs carbnico. Entretanto, na periferia, a cafena tem
efeito inibitrio sobre a respirao, atravs do bloqueio de receptores de adenosina-A2 no
corpo carotdeo (BARRET, 2012; TAVARES; SAKATA; RIOKO, 2012).
Em relao fosfodiesterases a cafena age gerando o aumento do efeito e da durao
de ao do AMPc intracelular, havendo potencializao dos efeitos das catecolaminas. H
tambm a ativao dos canais de clcio sensveis rianodina encontrados nos retculos
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Vrias pesquisas cientficas vm sendo realizadas sobre a cafena ao passar dos anos,
mas at o presente momento nenhum estudo foi conclusivo. Entretanto algumas concluses
dos efeitos da cafena no organismo humano foram reveladas pelos pesquisadores. Cada
indivduo possui uma sensibilidade prpria cafena, de acordo com a quantidade que for
consumida. Se houver excesso, eles podero apresentar alguns efeitos desagradveis j
descritos acima. Vale ressaltar que todos os estudos cientficos que foram realizados sobre a
cafena at o presente momento no identificaram nenhum malefcio grave no consumo de
doses moderadas da substncia.
A cafena no esporte
A ingesto de cafena tem sido utilizada como estratgia no esporte, com o intuito de
protelar a fadiga. Doses de 3 a 10mg.kg-1 de peso corporal de cafena podem melhorar o
desempenho fsico em exerccios fsicos de diferentes naturezas, sendo o intervalo timo
sugerido de 3 a 6mg.kg-1 de cafena pura. At final do ano de 2003, a cafena fazia parte da
lista de substncias proibidas pela Agncia Mundial Anti-Doping (WADA), na classe de
estimulantes, sendo o limite estipulado para caso positivo de doping at aquele momento era
de 12g/ml de cafena na urina. Contudo, devido s dificuldades de se estabelecer um valor
limtrofe, desde o ano de 2004 a cafena foi includa junto com outras substncias em um
programa de monitoramento da WADA (ALTIMARI, 2010).
A cafena na gravidez
Durante a gestao os efeitos da cafena podem acarretar riscos, tanto para a me
quanto para o feto, pois a cafena tem ao transplacentria, sendo que as concentraes
plasmticas no feto so similares aos da me. H relatos de efeitos teratognicos com a
aplicao de grandes doses em animais (TAVARES, 2012). O consumo da cafena na
gravidez acaba sendo inevitvel uma vez que, segundo Souza e Sichieri (2005), para alguns
indivduos, umas das maiores fontes alimentares so: caf, ch, chocolate e refrigerantes do
tipo cola. O seu consumo to amplo que 98,0% das mulheres em idade reprodutiva
consomem regularmente cafena, seja atravs da alimentao ou atravs de medicao, sendo
que 72,0% dessas mulheres continuam usando cafena durante a gravidez.
O grande risco est relacionado com o consumo excessivo, estudos epidemiolgicos
sobre os efeitos da cafena no desenvolvimento do feto parecem indicar associao somente
com consumo elevado, onde doses de 200mg de cafena significantemente reduziram o fluxo
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ORMH de 1,51 (IC95%: 1,39-1,63) para baixo peso ao nascer em 64.268 gestaes, para
consumo maior que 150mg de cafena/dia. J a segunda sugeriu um provvel efeito da cafena
no peso ao nascer, mas no para prematuridade (SOUZA; SICHIERI, 2005).
Concluso
A cafena um derivado das xantinas, estando presente em plantas amplamente
distribudas nas vrias regies geogrficas. Pode ser encontrada nos gros de caf, nas folhas
de ch e de mate, nas sementes de cacau e em vrias partes do guaran. Devido ao seu amplo
consumo conclui-se que ela a droga mais utilizada no mundo. Seu consumo justificase
pelos efeitos que gera no organismo como: aumento do estado de alerta e reduo da sensao
de fadiga, podendo aumentar a capacidade para realizar determinadas tarefas. Dessa forma,
consumida por atletas que almejam aumentar seu rendimento em atividades fsicas.
Seu consumo dirio pode fazer o indivduo desenvolver tolerncia, assim levando ao
aumento das doses ingeridas. Atravs de pesquisas descobriu-se que o uso na cafena ocorre
at mesmo durante a gestao, seja de forma direta (caf) ou indireta (chocolates), entretanto
no se sabe ao certo quais so as consequncias, apenas sabe-se que a cafena em grandes
concentraes pode diminuir o crescimento fetal.
Dessa maneira, observa-se que a cafena uma substncia consumida por toda
populao mesmo que o indivduo no tenha conscincia de sua presena em determinados
produtos. Os estudos a respeito desse assunto ainda so controversos, mostrando que muito
ainda pode-se pesquisar e descobrir sobre os possveis benefcios ou malefcios da cafena.
Bibliografia
ALTIMARI, Leandro Ricardo et al. Cafena e performance em exerccios anaerbios. Rev.
Bras. Cienc. Farm. So Paulo. v. 42, n. 1, Mar. 2006.
BARRET, E. Kim, et al. Fisiologia mdica de Ganong. 24. ed. Artmed: Porto Alegre, 2012.
BAYNES, W. John; DOMINICZAK. Bioqumica mdica. 3. ed. Elsevier: So Paulo, 1998.
BRUNTON, L. Laurence; CHABNER, A. Bruce; KNOLLMANN. As bases farmacolgicas
da Teraputica de Goodman &Gilman. 12. ed. Artmed. So Paulo, 2011
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