EFICIENCIA DE UNA CEPA PROBIOTICA

OBJETIVO GENERAL

Establecer una propuesta factible para encontrar una cepa eficiente en

probiticos comerciales utilizados en el rubro camaronero de la zona,
capaz de inhibir flora bacteriana negativa en los estanques de
produccion.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Determinar mediante un bioensayo la eficiencia de una cepa probitica

comercial con su respectivo aislamiento e identificacin.

Buscar

bacterias

capaces

de

inhibir

el

crecimiento

de

bacterianos causantes de enfermedades a nivel de acuicultura.

agentes

INTRODUCCION

Actualmente en Honduras se usan probiticos comerciales en el cultivo de

organismos acuticos, y aunque no se han realizado estudios en los que se
evalen la profundidad de los beneficios de su aplicacin,

es de mucha

importancia conocer el efecto de los probiticos vivos capaces de producir

metabolitos secundarios con la funcin de inhibir el crecimiento bacteriano en
relacin a microorganismos patgenos vs. Benficos; y as mismo probar otros
compuestos como bacteriocinas; que son toxinas proteicas sintetizadas por una
bacteria con el fin de inhibir el crecimiento de cepas cercanas o similares.
La tcnica ms comn para determinar la sensibilidad de bacterias a los
antibiticos es llamada antibiograma, en esta tcnica se usan pequeos discos de
papel impregnados con cantidades conocidas de antibiticos que se colocan sobre
la superficie de una placa previamente inoculada con la cepa que se desea probar.
Despus de un periodo de incubacin, se observan las zonas de inhibicin (o de
no crecimiento) alrededor de los discos. Una zona de inhibicin (rea clara)
alrededor de un disco indica que el microorganismo fue desplazado por el
antibitico que se difundi al agar.
Para nuestro proyecto, modificaremos esta tcnica impregnando los sensidiscos
con bacterias probitica aisladas previamente identificadas.

JUSTIFICACION

El propsito de esta investigacin es caracterizar una cepa probitica aislada de

probiticos comerciales. Este tema es de gran importancia a nivel de acuicultura
debido a que tiene un impacto directo en la salud ambiental y consecuentemente
en la economa del pas.
Una vez determinando la cepa de inters implementar pruebas susceptibilidad
dando como resultado la inhibicin de microorganismos patgenos de cepas de
Vibrios con el objetivo principal de contrarrestarlos.
Dentro de las cepas patgenas de Vibrio sp. Ms comunes en nuestra zona
tenemos:
-Vibrio

parahaemoliticus,

Vibrio

vulnificus,

V.

harveyi,

V.

Algenoliticus,

Pseudomonas sp y Aeromonas sp.

De las cuales hemos seleccionado 3 cepas para nuestras investigacin:
-Vibrio parahaemoliticus
- Vibrio Vulnificos
- V. Algenoliticus

DISEO METODOLOGICO DEL ENSAYO

Tipo de Estudio: Experimental

rea de Estudio: Laboratorio de Microbiologa Centro Regional del Sur
Institucin ejecutora: Grupo Seajoy; Choluteca Honduras
Fecha de inicio: Noviembre 2015

Primera Etapa: Aislamiento y Caracterizacin de una cepa probitica

a. Se realizara la siembra de un probitico comercial. En una placa de
agar nutriente
b. Incubar las placas a 37C/18-24 horas.
c. Una vez obtenido el crecimiento de las colonias se realizara la respetiva
identificacin mediante la morfologa celular (con una Tincin de Gram)
y morfologa colonial (colonias tpicas).

Segunda Etapa: Bioensayos - Inhibicin de Bacteria patgena

a. Para

cada bacteria

seleccionada se

deber

evaluar la actividad

antibacteriana en una placa de Agar Mueller-Hinton (M-H) inocular 10 l de

un cultivo de 18 horas de diferentes cepas patgenas como ser: Vibrio
parahaemoliticus, Vibrio vulnificus, V. harveyi, V. algenoliticus cultivadas en
el laboratorio de microbiologa de la empacadora Deli, grupo SeaJoy
Honduras.
b. Incubar por un perodo de 24 h a 37C.
c. Una vez verificado el crecimiento bacteriano se colocara un disco de papel
filtro impregnado con la cepa de inters crecida en caldo tripticasa soya
(TSB) de un cultivo de 18 h de la bacteria probiotica.
d. Incubar a 37C durante 24 h.

e. Verificar la inhibicin o crecimiento de la cepa patgena alrededor de la

cepa antagonista.
f. Se determinara el nivel de actividad antibacteriana midiendo el dimetro del
halo de inhibicin y considerando como actividad inhibidora dimetros de
halo mayores de 5 mm.