Relatório Nuno Silva

Nuno Miguel Simes da Silva
Relatrio de Estgio
Mestrado em Anlises Clnicas
Relatrio de Estgio Curricular no mbito do Mestrado em Anlises Clnicas, orientado pela

Dra. Luclia Silveira e pela Dra. Ana Donato, e apresentado
Faculdade de Farmcia da Universidade de Coimbra
Setembro, 2012
Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012
Estagirio
Nome: Nuno Miguel Simes da Silva
Curso: Mestrado em Anlises Clnicas
Instituio: Faculdade de Farmcia da Universidade de Coimbra (FFUC)
Local do estgio: Laboratrio de Anlises Clnicas da FFUC
Orientadores: Dra. Luclia Silveira e Dra. Ana Donato
Incio e fim do estgio: 3/11/2011 a 31/05/2012
Durao (horas): 600
reas: Bioqumica, Hematologia, Imunologia, Microbiologia
2 Nuno Miguel Simes da Silva
ndice
Abreviaturas ............................................................................................................................................. 3
Resumo/Abstract .................................................................................................................................. 5
Introduo .................................................................................................................................................. 6
Caracterizao do laboratrio de estgio ............................................................................. 7
Actividades desenvolvidas ............................................................................................................... 9
1. Bioqumica ............................................................................................................................................ 9
Como se efectuam as anlises de Bioqumica ......................................................................................... 10
1.1. Funo heptica ...................................................................................................................................... 11
1.2. Funo renal ............................................................................................................................................ 18
1.3. Dislipidemias ........................................................................................................................................... 22
1.4. Diabetes mellitus .................................................................................................................................... 26
1.5. Ionograma ................................................................................................................................................ 27
1.6. Funo pancretica ................................................................................................................................ 32
1.7. Avaliao muscular ................................................................................................................................ 33
2. Hematologia ........................................................................................................................................ 34
2.1. Sistema hematopoitico ....................................................................................................................... 35
2.2. Clulas sanguneas maduras................................................................................................................. 36
2.3. Hemograma ............................................................................................................................................. 38
2.4. Anlise da morfologia do sangue - esfregao .................................................................................. 43
2.5. Anemias .................................................................................................................................................... 45
2.6. Coagulao .............................................................................................................................................. 46
2.7. Velocidade de sedimentao dos eritrcitos .................................................................................. 49
Outras reas.............................................................................................................................................. 53
Concluso .................................................................................................................................................... 54
Bibliografia ................................................................................................................................................. 55
Anexos .......................................................................................................................................................... 57
Abreviaturas
ALP
Fosfatase alcalina
ALT/GPT
Alanina aminotransferase/transaminase glutamo-oxaloactica
ASLO
Anti-estreptolisina O
AST/GOT
Aspartato aminotransferase/transaminase glutamo-pirvica
Ca2+
Io clcio
CHCM
Concentrao da hemoglobina corpuscular mdia
Cl-
Io cloreto
CK
Creatina cinase
CQ
Controlo de qualidade
DCE
Depurao da creatinina endgena
Fe2+
Io ferroso
Fe3+
Io frrico
HbA1c
Hemoglobina glicosilada, fraco A1c
HBV
Vrus da hepatite B
HCM
Hemoglobina corpuscular mdia
HCV
Vrus da hepatite C
HDL
Lipoprotena de alta densidade
HIV
Vrus da imunodeficincia humana
IDL
Lipoprotena de densidade intermdia
INR
International Normalised Ratio (coagulao)
ISI
ndice de Sensibilidade Internacional
Io potssio
LDH
Lactato desidrogenase
LDL
Lipoprotena de baixa densidade
LPL
Lipoprotena lipase
Mg2+
Io magnsio
Na+
Io sdio
PCR
Protena C reactiva
PO3-
Io fosfato
PTGO
Prova de tolerncia glicose oral
PTH
Hormona paratiroide
RDW
Red cell distribution width (distribuio do volume dos eritrcitos)
RNA
cido ribonucleico
RF
Factor reumatide
TFG
Taxa de filtrao glomerular
TP
Tempo de protrombina
TPT
Tempo parcial de tromboplastina
UA
Unidade de Alcoologia
VGM
Volume globular mdio
VLDL
Lipoprotena de muito baixa densidade
VS
Velocidade de sedimentao (dos eritrcitos)
-GT
Gama-glutamil transferase
Resumo
As Anlises Clnicas englobam aquilo que se conhece por meios complementares de
diagnstico, no entanto tm muito mais importncia que o adjectivo complementar
sugere, porque muitas vezes so mais determinantes para o diagnstico de uma doena do
que os exames mdicos normais.
Um laboratrio de Anlises Clnicas deve, com os meios sua disposio, executar as
anlises sempre com base nas regras da Qualidade, de modo a reduzir ao mnimo a
probabilidade de erros e a dar os resultados com a maior confiana possvel. fundamental
o controlo rigoroso de cada uma das fases de um processo analtico (pr-analtica, analtica e
ps-analtica), desde que se recebe uma requisio mdica at ao relatrio final da anlise. O
laboratrio deve trabalhar em sintonia com os mdicos: ao laboratrio cabe obter
resultados com qualidade e ao mdico cabe saber interpret-los bem de modo a melhorar a
qualidade de vida dos utentes.
Neste relatrio irei falar um pouco sobre como funciona um laboratrio de Anlises
Clnicas e enfocar-me nas duas reas de trabalho s quais dediquei mais tempo durante o
estgio.
Abstract
Clinical Analyses span what is known as complementary means of diagnosis, but these
are far more important than the adjective complementary suggests, because they often
determine de diagnosis of a disease more than normal medical examinations. A Clinical
Analyses laboratory should execute its analyses always based on its rules of Quality, to
minimize the chances of error and to obtain the most trustworthy results. Strict control of
each of the stages of an analytical process (pre-analytic, analytic and post-analytic) is
required, from the moment a prescription is received to the final report. The laboratory
should work together with doctors: the labs aims are quality results and the doctors must
interpret them as correctly as possible in order to improve the patients quality of life.
In this report I will write about how such a laboratory works and focus on the two
areas of work to which I dedicated more time during my internship.
Introduo
A rea das Anlises Clnicas evoluiu muito ao longo dos sculos, desde os tempos em
que os mdicos provavam a urina dos doentes para avaliar o seu estado de sade at aos
nossos tempos, nos quais existe uma grande variedade de mtodos analticos e de aparelhos
e instrumentos topo-de-gama que permitem realizar vrios testes clnicos com cada vez mais
especificidade e sensibilidade. Hoje em dia as Anlises Clnicas englobam vrias valncias, dos
quais as mais importantes e as abordadas no meu estgio so a Bioqumica, a Hematologia, a
Imunologia e a Microbiologia.
Neste sentido, venho neste relatrio descrever as actividades desenvolvidas ao longo
de 7 meses de estgio. Este foi realizado no Laboratrio de Anlises Clnicas da Faculdade de
Farmcia da Universidade de Coimbra, sob a orientao da Dra. Luclia Silveira e da Dra.
Ana Donato.
A realizao do estgio foi muito importante para mim no sentido em que consegui
adquirir prtica no manuseamento dos aparelhos e na execuo das tcnicas de laboratrio,
aplicando os conhecimentos tericos aprendidos ao longo do Mestrado, e tambm porque
consegui perceber como decorre a rotina de um analista clnico ao longo do dia de trabalho.
A Hematologia uma rea que incide sobre as caractersticas do sangue e dos rgos
hematopoiticos, isto , aqueles que produzem as clulas sanguneas e/ou onde estas sofrem
maturao. O perfil das clulas sanguneas do utente de um laboratrio de Anlises Clnicas
(hemograma) necessrio para despistar patologias que podem ser graves, desde vrios
tipos de anemias at s leucemias.
Independentemente da rea, nas Anlises Clnicas crucial que o trabalho seja feito
com a qualidade necessria. A qualidade abrange um conjunto de normas e procedimentos
que garantem o rigor dos resultados obtidos. O objectivo da qualidade fornecer aos
utentes as tcnicas mais fiveis e o maior grau de satisfao possvel, com o custo mais baixo
possvel para o utente.
Todos os dias necessrio fazer o Controlo da Qualidade (CQ), isto , a vistoria de
todos os passos do trabalho, desde a fase pr-analtica (o registo das amostras no sistema
informtico, as suas condies de transporte, a colheita correcta das amostras), passando
pela fase analtica (o efectuar da anlise propriamente dita da amostra) e acabando na fase
ps-analtica (a validade do resultado obtido). Nenhum mtodo deve ser aplicado sem antes
se efectuar o CQ respectivo, e todos os aparelhos devem funcionar dentro de limites pr-
estabelecidos. importante avaliar com periodicidade o estado dos calibradores, reagentes,

aparelhos, mtodos e tambm os prprios operadores.
O controlo de qualidade consiste no doseamento de um produto especfico
(controlo) que contm o analito que se quer avaliar numa concentrao conhecida. Deve ser
realizado sempre antes de se testarem as amostras nas quais se quer determinar esse
analito.
Neste relatrio vou ento falar dos vrios processos e tcnicas mais importantes nas
reas da Bioqumica e da Hematologia, e se for o caso referir casos especiais que foram
surgindo durante o estgio, que acho que merecem destaque e que portanto se devem
incluir no relatrio.
Caracterizao do Laboratrio de Estgio
O Laboratrio de Anlises Clnicas da FFUC situa-se no novo Plo III da
Universidade de Coimbra, no rs-do-cho junto recepo. A Directora Tcnica do
laboratrio, que a especialista responsvel pelo trabalho de todos os funcionrios e pelos
resultados das anlises, a Dra. Luclia Silveira. O laboratrio composto pelas seguintes
divises:
Recepo e sala de espera;
Gabinetes para os funcionrios do laboratrio;
Sala de colheitas;
Armazm;
Trs casas de banho (homens, senhoras e funcionrios);
O laboratrio em si, composto por duas divises, uma onde se fazem os
testes de Bioqumica, Hematologia e Imunologia e outra mais virada para a
Microbiologia.
A recepo a zona onde os utentes chegam primeiro quando entram no
laboratrio e onde entregam as requisies para a realizao das anlises, bem como as
amostras para anlise que podem ser colhidas pelo doente em frascos apropriados (urina,
fezes e expectorao) e as amostras provenientes da UA (Unidade de Alcoologia) e/ou do
posto de colheitas. composta por um balco, algumas mesas, computadores e algumas
estantes. A sala de espera situa-se na zona atrs do balco da recepo e, como o nome
indica, a rea onde o utente espera pelo atendimento. Para ajudar a passar o tempo, o
utente espera tem sua disposio uma mesa com algumas revistas e um pequeno
televisor.
Se for necessria uma colheita de sangue, o utente encaminhado para a sala de
colheitas, situada num corredor onde tambm se encontram ainda os gabinetes, o armazm
e as casas de banho. Esta sala composta por um lavatrio, uma cadeira onde o utente se
senta para a colheita e um aparelho agitador onde os tubos contendo o sangue so
colocados para impedir a coagulao do sangue. O armazm uma sala onde so guardados
vrios materiais novos, antes de ser preciso utiliz-los.
As amostras provenientes do doente, da UA ou do posto/sala de colheitas seguem
depois para o laboratrio em si, onde so processadas e analisadas. A primeira diviso com a
qual se contacta a diviso de Bioqumica, Hematologia e Imunologia, e em frente a esta
situa-se a diviso de Microbiologia, separada da primeira por uma porta de vidro. As divises
do laboratrio so compostas por diversos aparelhos analticos automatizados, que vieram
tornar mais simples e rpida a execuo das anlises. Dentro desses aparelhos destacam-se:
O aparelho para as anlises de Bioqumica (IZASA AU 400), como a glicemia, a

colesterolemia, bilirrubinas e vrias enzimas;
O ionograma (Spotlyte Na/K/Cl Analyzer), onde so determinadas as concentraes

no soro de vrios electrlitos, nomeadamente o sdio, potssio e cloreto;
O VIDAS, da Biomrieux, um aparelho com duas unidades onde so realizados os

testes de Imunologia, nomeadamente a pesquisa de anticorpos contra uma variedade
de microrganismos patognicos, incluindo o HIV e vrus causadores de hepatites (ex.
HCV);
O aparelho para hemogramas (Coulter, da MaxM), onde feita a contagem de clulas

sanguneas;
O aparelho para proteinogramas (Helena SAS-1 Plus e SAS-2), onde se faz a

caracterizao das protenas sricas dos doentes atravs de uma electroforese e da
leitura das bandas obtidas aps esta;
O aparelho para avaliao da coagulao (Option 4 Plus, da Biomrieux), onde se

avalia o estado e a velocidade de coagulao do sangue dos utentes. O aparelho
permite realizar testes para avaliar ambas as vias da coagulao (intrnseca e
extrnseca).
No laboratrio existem ainda outros aparelhos onde no se fazem testes analticos
mas que so fundamentais para a realizao correcta das anlises, nomeadamente uma
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centrfuga, que possui vrios programas de centrifugao para urina e sangue, estufas (na
diviso de Microbiologia) onde se guardam meios de cultura inoculados a 37 C para
permitir o crescimento ptimo dos microrganismos, e um frigorfico, onde so
conservados no frio vrios reagentes e produtos de controlo que tm de ser armazenados
a baixas temperaturas para serem preservados.
O laboratrio tem ainda uma pequena sala com vrios frigorficos e congeladores
onde so preservados vrios reagentes, controlos e calibradores que necessitam de ser
guardados a baixa temperatura para se preservar a sua composio, como por exemplo os
controlos utilizados nos hemogramas e os calibradores para vrios parmetros
determinados no aparelho de Bioqumica.
Actividades desenvolvidas
Nesta parte do relatrio irei debruar-me sobre as duas reas das Anlises Clnicas
s quais dediquei mais tempo durante o estgio: Bioqumica e Hematologia. Para alm
destas reas, o meu estgio tambm abrangeu as valncias de Imunologia e Microbiologia,
embora o tempo dedicado a estas tenha sido menor.
1. Bioqumica
A Bioqumica uma cincia cujo objecto de estudo principal so as vias metablicas
do organismo humano, e as alteraes nelas que originam estados patolgicos. A
Bioqumica, assim, abrange o metabolismo dos lpidos, glcidos e protenas, e os
parmetros associados, como por exemplo a glicemia, o colesterol (total, HDL, LDL) e as
protenas totais, bem como vrias enzimas. Os parmetros estudados sero descritos nesta
seco do relatrio.
Como se efectuam as anlises de Bioqumica
Os parmetros bioqumicos so determinados num aparelho auto-analisador
especfico, existente no laboratrio. o autoanalisador AU 400 da IZASA, que utiliza como
sistema de leitura a fotometria, usando filtros entre 340 e 800 nanmetros. O programa
deste aparelho inclui as tcnicas e programas de calibrao e de controlo interno de
qualidade. As tcnicas de anlise usadas pelo auto-analisador podem dividir-se em quatro
tipos de acordo com o seu princpio terico: tcnicas colorimtricas (exemplo: protenas
totais),
enzimticas
colorimtricas
(colesterol),
cinticas
(todas
as
enzimas)
turbidimtricas (microalbuminria).
Este auto-analisador composto por um carrossel onde se pode inserir um certo
nmero de frascos de reagentes. De notar que o aparelho pode determinar um nmero de
parmetros superior capacidade em frascos do carrossel, pelo que sempre que se quer
determinar um parmetro novo deve substituir-se um reagente do carrossel e colocar nele
o(s) novo(s) frasco(s). Cada frasco de reagente serve para um certo nmero de anlises,
sendo que o aparelho (atravs do computador acoplado a ele) avisa sempre que a
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quantidade de reagente disponvel baixa a partir de um certo ponto, sendo preciso

substituir o reagente quando se recebe o aviso.
O aparelho ainda composto por uma srie de pipetas que recolhem os reagentes a
partir do carrossel e o transferem para as cuvetes existentes na zona das reaces. As
amostras/controlos/calibradores so inseridos no aparelho no isolados mas em racks
que contm dez espaos para o produto a analisar e que contm determinadas cores,
consoante o produto que se coloca.
No incio de todos os dias de trabalho, ao ligar-se o auto-analisador, a primeira coisa
a fazer a fotocalibrao, isto , a calibrao dos feixes de luz laser existentes no aparelho
de modo a permitir a leitura correcta dos produtos a analisar. Aps a fotocalibrao estar
completa, pode iniciar-se o trabalho.
O trabalho comea por verificar se algum dos reagentes colocados no aparelho
necessita de ser calibrado. Atravs do computador acoplado ao aparelho, entra-se no
menu Calibrao e v-se se algum dos reagentes requer calibrao; se sim, seleccionamse os reagentes em causa para programar-se a calibrao. De notar que a periodicidade da
calibrao depende da estabilidade dos reagentes; quanto mais instveis, mais
frequentemente tm de ser calibrados. Para calibrar um reagente utiliza-se um produto
calibrador, guardado em eppendorf no frio e que por isso tem de ser descongelado antes
de se usar. Neste laboratrio existe um calibrador geral, que serve para variados
parmetros bioqumicos, e outros calibradores especficos, nomeadamente o calibrador
para o colesterol das HDL. O eppendorf colocado na rack respectiva e introduzido
no aparelho. Por fim, carrega-se no boto Iniciar para iniciar o processo. O aparelho
efectua vrias medies do produto (normalmente quatro) para aumentar a eficcia do
processo (no s a calibrao, como tambm o controlo e as anlises em si).
Aps as medies, deve ir verificar-se no computador se a calibrao foi efectuada
correctamente. A maioria das tcnicas bioqumicas obedece lei de Beer, e devem ter uma
curva de calibrao com linearidade. No entanto, nem todas as tcnicas obedecem a esta
lei, como as tcnicas cinticas e turbidimtricas.
O prximo passo fazer o CQ. No menu Controlo de Qualidade seleccionam-se
os parmetros a controlar e depois vo buscar-se os produtos de controlo, que tal como
os calibradores so guardados a frio. Existem no laboratrio cinco controlos diferentes:
controlo geral N1 e N2; controlo HDL N1 e N2 e controlo ITA N2 (PCR, RF e ASLO).
Os controlos a usar so inseridos no aparelho dentro da rack respectiva.
A verificao do CQ feita no menu Verificao Controlo Qualidade, atravs da

posio do resultado obtido no grfico respectivo da mdia e desvio-padro. Segundo as
regras de Westgard, um resultado deve ser um aviso para o operador apenas se estiver
fora da zona entre +2S e -2S (S: desvio-padro), no entanto no laboratrio fui aconselhado
a repetir os controlos se o resultado estivesse fora da zona entre +1S e -1S.
Se os resultados do CQ forem satisfatrios, passa-se anlise das amostras, sabendo
que os resultados a obter tm por base valores de controlo e calibrao correctos e que,
por isso, as medies sero precisas e exactas. Antes da anlise das amostras, elas tm de
ser centrifugadas, pois o que se analisa o soro e no o sangue total. As amostras de
sangue so centrifugadas a 3000 rpm durante 20 minutos.
As amostras devem primeiro ser programadas no menu Programao de Amostras,
introduzindo-se o nmero de cdigo da amostra( o nmero da amostra do dia/o dia do
ms (exemplo: a segunda amostra do dia 27 ter o cdigo 2/27), acrescentando-se UA ou
PC se a amostra veio da Unidade de Alcoologia da UC ou do posto de colheitas,
respectivamente) e os parmetros a analisar. Introduzem-se as amostras no aparelho e
inicia-se o processo. Os resultados so impressos em folhas numa impressora anexada ao
computador.
1.1. Funo heptica
O fgado dos rgos do corpo humano que mais sangue recebe, nomeadamente
sangue venoso que vem dos intestinos. Este facto, associado enorme quantidade de
enzimas que catalisam uma grande variedade de reaces cruciais manuteno da vida,
bem como a sua estrutura nica, tornam o fgado um rgo fundamental para a regulao
dos processos metablicos do organismo. Nas clulas do fgado (hepatcitos) ocorre o
metabolismo dos lpidos e glcidos, a sntese da grande maioria das protenas do organismo
e tambm a destoxificao do organismo atravs da neutralizao e conjugao de vrios
compostos potencialmente txicos, como frmacos.
A funo heptica pode ser avaliada atravs da determinao de variados parmetros:
bilirrubinas (total, directa e indirecta), transaminases, gama-glutamil transferase, fosfatase
alcalina, lactato desidrogenase, protenas totais, albumina e tempo de protrombina.
A alterao significativa de um ou mais parmetros hepticos pode significar perda de
funo e/ou doena do fgado (hepatopatia). Por exemplo, a destruio do fgado reflectese na diminuio dos nveis de protenas totais e de albumina e no aumento do tempo de
protrombina, dado que o fgado tem um papel importante no controlo da coagulao. Por
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sua vez, um aumento das bilirrubinas e/ou da fosfatase alcalina podem indicar obstruo do
fluxo biliar (colestase).
1.1.1. Bilirrubinas
A bilirrubina um pigmento amarelado que resulta do catabolismo do grupo heme da
hemoglobina, no sistema reticuloendotelial do fgado, bao e medula ssea. O transporte
da bilirrubina ao fgado feito pela ligao desta albumina, dado que a bilirrubina
insolvel em gua. No fgado, a bilirrubina conjugada com cido glucurnico, formando-se
um composto mais solvel chamado bilirrubina conjugada ou directa, para distinguir da
bilirrubina no conjugada ou indirecta, que transportada ao fgado para ser conjugada.
A bilirrubina conjugada depois excretada na blis, que passa da vescula biliar para os
intestinos. No leo terminal e no clon, a bilirrubina conjugada transformada em
estercobilinognio, um pigmento que d a cor s fezes e que excretado nelas na sua
maior parte, e em urobilinognio, um composto que reabsorvido dos intestinos de volta
para a corrente sangunea. O sangue transporta o urobilinognio de volta ao fgado, onde
este composto re-excretado para a blis ou para o sangue, para ser transportado para os
rins. Aqui, o urobilinognio eliminado do organismo na urina.
Se a bilirrubina no excretada, regressa ao fgado e acumula-se no sangue, havendo
um aumento da sua concentrao srica. Este fenmeno leva a que a pele adquira uma
tonalidade amarelada, condio patolgica chamada de ictercia. A avaliao do estado e
progresso da ictercia feita pelo doseamento da bilirrubina, e a distino entre as fraces
conjugada e no conjugada da bilirrubina uma ajuda para o diagnstico diferencial dos
vrios tipos de ictercia. A ictercia pode dividir-se em trs tipos:
Ictercia pr-heptica causada pelo aumento da degradao da hemoglobina,
aumentando a quantidade de bilirrubina para ser conjugada. Normalmente o fgado no
afectado e consegue conjugar e excretar na blis o excesso de bilirrubina. Alm do
aumento da bilirrubina total, h tambm uma subida do urobilinognio no sangue e na
urina. Devido causa deste tipo de ictercia, tambm se pode chamar de ictercia
hemoltica;
Ictercia heptica causada por danos ou doena nos hepatcitos, que no

conseguem desempenhar eficazmente as funes de conjugao da bilirrubina. Esta
acumula-se no sangue e h um aumento da quantidade de bilirrubina excretada nos rins e
que, portanto, aparece na urina. Dado que a quantidade de bilirrubina directa excretada
nos intestinos diminui, o mesmo acontece ao urobilinognio;
Ictercia ps-heptica causada por uma obstruo biliar (colestase), que faz
com que a bilirrubina conjugada regresse ao fgado e se acumule no sangue, de onde
removida pelos rins e eliminada na urina. Dado que pouca ou nenhuma bilirrubina chega
aos intestinos, a quantidade de urobilinognio formado baixa ou nula, e as fezes sero
descoradas.(1)
1.1.2. Transaminases
As transaminases so enzimas que se encontram dentro dos hepatcitos. Para a
avaliao da funo heptica as transaminases mais importantes so a aspartato
aminotransferase ou transaminase glutamo-oxaloactica (AST/GOT) e a alanina
aminotranferase ou transaminase glutamo-pirvica (ALT/GPT).
As transminases catalisam a transferncia reversvel de um grupo amina (NH3) do
aspartato/alanina para o -cetoglutarato, formando-se glutamato e o cetocido
correspondente ao aminocido inicial: oxaloacetato (AST) ou piruvato (ALT). A vitamina
B12 um cofactor requerido por ambas as enzimas.
A AST, alm de se encontrar no fgado (principalmente no citoplasma e
mitocndrias), tambm se encontra em vrios outros tecidos do organismo, incluindo o
msculo esqueltico, msculo cardaco, tecido adiposo e o crebro, entre outros,
enquanto que a ALT encontra-se predominantemente no fgado (embora apenas no
citoplasma) e mais especfica para a funo heptica. Em geral, nas doenas do fgado a
ALT aumenta mais que a AST, excepto no alcoolismo, em que a proporo AST:ALT
superior a 1. Nas doenas hepticas de origem viral, a proporo AST:ALT normalmente
inferior a 1, o que indica que a ALT aumenta mais que a AST. (2)
O aumento das transaminases reflecte uma leso celular, que pode ser heptica.
1.1.3. Gama-glutamil transferase

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A gama-glutamil transferase (ou -GT) uma enzima que regula o transporte de

aminocidos atravs das membranas celulares, catalisando a transferncia de um grupo
glutamil do glutatio para receptores peptdicos.
Esta enzima encontra-se aumentada em vrias patologias hepatobiliares, incluindo
colestase, cirrose e doena infecciosa heptica. Encontra-se aumentada tambm em
situaes de alcoolismo, embora em 20-30% dos doentes alcolicos esta enzima esteja em
nveis normais. Se conjuntamente com o aumento da -GT existir um aumento das
transaminases, nomeadamente da ALT, o problema adjacente ser provavelmente de
origem heptica. A -GT um conhecido indicador sensvel de dano hepatocelular. (3)
1.1.4. Fosfatase alcalina
A fosfatase alcalina (ALP) uma enzima do tipo hidrolase, que catalisa a remoo de
grupos fosfato de muitas molculas, incluindo nucletidos e protenas, cujo pH ptimo
alcalino. Nos humanos, a ALP mais predominante no fgado, canais biliares, rins, ossos e
placenta, embora tambm se encontre noutros tecidos. A ALP possui vrias isoformas, e as
mais encontradas nos humanos so a ALPI (intestinal), a ALPL (fgado, ossos e rins) e a
ALPP (placenta).
A principal funo da ALP esta relacionada com o transporte de lpidos no intestino e
com a calcificao e crescimento sseos. A ALP existe em abundncia no tracto biliar e por
isso um bom marcador de patologias biliares, nomeadamente a colestase (alis, a principal
utilidade da determinao da ALP no soro para a pesquisa de doena colesttica, intra ou
extra-heptica) e tumores que bloqueiam o fluxo da blis, como os da cabea do pncreas.
No entanto, como j foi referido, a ALP possui vrias isoenzimas e distribui-se por todo o
organismo, pelo que no especfica da funo heptica, servindo tambm, por exemplo,
para o diagnstico de patologias sseas e gastrointestinais. Nestes casos, a ALP costuma
estar elevada, mas tambm pode estar diminuda, como por exemplo na doena de Wilson
fulminante ou na desnutrio. (4)
A ALP pode ainda estar aumentada em condies fisiolgicas, como na gravidez,
devido subida da ALP placentria, e nas crianas, devido ao crescimento dos ossos. (5)
1.1.5. Lactato desidrogenase
A lactato desidrogenase (LDH) uma enzima importante para o metabolismo dos

glcidos e que encontrada na maioria dos principais tecidos do organismo. Foram
isoladas cinco isoenzimas da LDH: LDH1, LDH2, LDH3, LDH4 e LDH5. A LDH1 mais
especfica do msculo cardaco, a LDH2 do sistema reticuloendotelial, a LDH3 predomina
no tecido pulmonar, a LDH4 no pncreas, placenta e rins, e a LDH5 no fgado e no
msculo esqueltico. A concentrao de LDH nos tecidos e eritrcitos cerca de cem
vezes superior do plasma, pelo que danos num tecido ou a hemlise podem levar a um
grande aumento dos nveis de LDH no soro. Assim, a determinao da LDH total
importante na avaliao de leses tecidulares. Os nveis de LDH, particularmente de LDH5,
costumam estar aumentados especialmente em patologias hepticas com origem viral. (6)
1.1.6. Protenas totais
O teste das protenas totais (proteinograma) mede os nveis das principais classes de
protenas no organismo: albumina e globulinas (1, 2, e -globulinas). O proteinograma
consiste na separao electrofortica das protenas do soro, obtendo-se um certo nmero
de bandas consoante o meio de suporte utilizado; os mais comuns so o acetato de
celulose e o gel de agarose. Nestes meios surgem cinco bandas: uma correspondente
albumina e quatro s globulinas, onde migram vrias protenas: na banda 1 migram a 1antitripsina e a 1-glicoprotena cida; na banda 2 a haptoglobina e a 2-macroglobulina;
na banda a transferrina e a 2-microglobulina; na banda migram as imunoglobulinas.
Um resultado elevado indica hiperproteinemia e pode estar associado a infeces
crnicas (por exemplo, pelo HIV, HBV e HCV) ou ao mieloma mltiplo, ou ainda a
condies fisiolgicas como a gravidez. Um valor baixo de protenas totais
(hipoproteinmia) pode estar associado a hemorragias, queimaduras, glomerulonefrite,
doena heptica, malnutrio, m absoro e sndrome nefrtica. Normalmente um valor
baixo de protenas totais significa que a concentrao de albumina est baixa. As
concentraes de albumina e de protenas totais so praticamente sobreponveis, visto que
a albumina a principal protena plasmtica.(1)
Procedimento do proteinograma
19
No laboratrio de Anlises Clnicas da FFUC, os proteinogramas fazem-se no no

aparelho de Bioqumica mas sim num aparelho prprio para proteinogramas, da Helena
Biosciences.
Os proteinogramas fazem-se atravs da electroforese de protenas. Primeiro
colocam-se 35 L de soro da amostra no poo respectivo e depois coloca-se o gel de
agarose, o meio de suporte da electroforese. No fim desta, passa-se o gel para a unidade
de colorao, lavagem e secagem. Aps a concluso do processo, no gel devem ver-se
vrias bandas coradas: cada banda corresponde a uma fraco de protenas (albumina, 1,
2, e ) e quanto mais corada estiver, maior a concentrao de protenas dessa fraco.
Finalmente, coloca-se o gel num scanner acoplado a um computador e neste aparece a
imagem digitalizada do gel e um grfico com as percentagens de cada fraco de protenas
da amostra. Esse grfico impresso numa folha.
Em determinadas patologias, algumas bandas aparecem aumentadas ou diminudas em
relao aos valores normais. O tamanho das bandas e a percentagem de cada fraco
proteica ajuda ao diagnstico dessas patologias. Por exemplo, na cirrose heptica h um
aumento das -globulinas e fuso da sua banda com a das -globulinas; na deficincia
imunitria h uma diminuio das -globulinas, visto que as imunoglobulinas (anticorpos)
pertencem a esta banda.
Nos anexos pode ver-se um exemplo de uma folha de resultados de um
proteinograma.
1.1.7. Albumina
A albumina uma protena sintetizada nos hepatcitos e a protena mais
importante do sangue. A albumina a principal reguladora da presso onctica e
transporta muitas substncias endgenas (bilirrubina, vrias hormonas e ies) e exgenas,
como frmacos.
Valores baixos de albumina (hipoalbuminmia) esto associados a m nutrio e a
doenas que causam destruio do tecido heptico, como a cirrose. No entanto, a
hipoalbuminmia tambm pode estar associada sndrome nefrtica ou outras doenas
renais que causem a eliminao de protenas na urina (proteinria). A diminuio dos nveis
da albumina, visto ser a principal protena do sangue, leva quase sempre a uma diminuio
das protenas totais. A hipoalbuminemia resulta na sada de fluido dos vasos sanguneos e
na sua acumulao no espao intersticial, a que se d o nome de edema.(7)
1.2. Funo renal

Os rins desempenham um papel muito importante na regulao do equilbrio hidroelectroltico e cido-base, bem como na neutralizao e eliminao de compostos txicos
para o organismo. A maneira mais significativa pela qual o rim desempenha as suas funes
atravs da formao de urina e da regulao da sua densidade e concentrao. Para alm
destas funes, os rins so ainda o local de sntese de vrias hormonas, entre as quais a
eritropoietina (EPO), importante para a formao dos eritrcitos.
Parmetros analticos renais
O doseamento da ureia e creatinina sricas um mtodo fivel para a pesquisa de
leses glomerulares e/ou tubulares: o aumento destes valores sugere que o rim tem mais
dificuldade na filtrao do sangue. A capacidade de filtrao dos rins pode ser avaliada
atravs das provas de depurao da creatinina. A proteinria e a microalbuminria so
outros parmetros que acompanham as leses glomerulares graves. Em condies normais,
apenas as protenas de baixo peso molecular (inferior a 10.000 Da) so filtradas, mas estas
so depois reabsorvidas no tbulo contornado proximal; assim, normalmente no so
eliminadas protenas na urina. Alm disso, as protenas tm carga predominantemente
negativa, tal como os glomrulos, havendo uma repulso que, para alm do tamanho,
impede a filtrao das protenas. Mas se os glomrulos estiverem danificados, as protenas
de maior peso molecular, nomeadamente a albumina (cerca de 60.000 Da) podem passar
para o filtrado e serem eliminadas na urina.
1.2.1. Anlise sumria de urina (Urina tipo II)
A avaliao da funo renal deve comear com a anlise sumria da urina, tambm
conhecida por urina tipo II. uma anlise de rotina que pode auxiliar nesta avaliao.
A urina tipo II ou sumria de urina um tipo da anlise da urina que visa avaliar
aspectos fsicos da urina, como a cor, turbidez e cheiro, e aspectos qumicos e bioqumicos
como a presena de certas substncias ou clulas na urina. As informaes fornecidas por
esta anlise so tambm muito teis para o eventual estabelecimento de uma patologia
renal ou do tracto urinrio, bem como de outras eventuais patologias como a diabetes ou
doenas hepticas.
21
Os parmetros mais importantes que so avaliados numa urina tipo II so:

Aspectos fsicos aspecto geral, cor, turbidez, cheiro, densidade.
Aspectos bioqumicos pH, presena de protenas, glicose, urobilinognio,
corpos cetnicos, eritrcitos, hemoglobina, leuccitos, outras clulas, cilindros, cristais.
Na urina tipo II inclui-se ainda a observao do sedimento urinrio, que obtido aps
a centrifugao da urina. No laboratrio onde estagiei, a centrifugao da urina feita a
2500 rpm/10 minutos. De seguida, rejeita-se o sobrenadante, deixando ficar no tubo
apenas cerca de 1 mL de urina, que correspende ao sedimento. No sedimento so
pesquisados eventuais leuccitos/eritrcitos e cristais, cuja presena sugere a existncia de
uma patologia renal e de clculos renais, respectivamente.
De notar que para ser vlida, a urina tipo II tem de ser efectuada numa amostra
obtida recentemente. (8)
1.2.2. Ureia
O sangue transporta as protenas para as clulas dos vrios tecidos do organismo.
No fgado as protenas so metabolizadas e os produtos finais do metabolismo so
devolvidos ao sangue. A ureia o principal metabolito das protenas e aminocidos, e
filtrada pelos rins e eliminada na urina em indivduos saudveis. Se a funo renal est
comprometida, a ureia permanece no sangue e o seu valor srico aumenta, uma condio
qual se d o nome de urmia ou hiperurmia. A concentrao sangunea de ureia varia,
para alm da funo renal, de acordo com a idade e a quantidade de protenas ingeridas na
alimentao.
A urmia pode ser classificada como pr-renal, renal ou ps-renal. A urmia prrenal um distrbio resultante da diminuio da perfuso dos rins, que tem por
consequncia a diminuio da taxa de filtrao glomerular, e pode estar subjacente a
diversas causas, como a insuficincia cardaca congestiva, diminuio do fluxo sanguneo
renal, reabsoro das protenas sanguneas aps uma hemorragia gastrointestinal ou ainda
problemas hepticos. (8)
A urmia renal deve-se diminuio da filtrao glomerular como consequncia de
uma insuficincia renal aguda ou crnica resultante de leses nos vasos sanguneos renais,
glomrulos, tbulos e/ou no interstcio. Essas leses podem ser txicas, imunolgicas,
iatrognicas ou idiopticas (por exemplo, glomerulonefrites, necrose tubular ou nefrite

intersticial aguda).
A urmia ps-renal resulta da obstruo do tracto urinrio (ureteres ou bexiga), que
leva reabsoro da ureia para a circulao sangunea.
Perturbaes no valor da ureia srica tambm podem ocorrer por diminuio deste
valor (hipourmia). A hipourmia costuma verificar-se nas situaes de hepatopatia grave,
em que o ciclo da ureia fica comprometido, ou ainda em casos de m nutrio ou aumento
da ingesto de lquidos.
1.2.3. Creatinina
A creatinina um metabolito resultante da desidratao da creatina muscular. A
creatinina passa por difuso dos msculos para o plasma, de onde quase completamente
filtrada (a uma velocidade relativamente constante) a nvel dos glomrulos. Se a
creatininmia (quantidade de creatinina no plasma) for elevada, parte da creatinina pode ser
excretada tambm nos tbulos renais. A quantidade de creatinina excretada diariamente
proporcional massa muscular do indivduo, no sendo afectada pela dieta, idade, sexo ou
exerccio fsico.
Como a creatinina excretada a uma velocidade quase constante e a sua produo
no depende do metabolismo das protenas, ao contrrio da ureia, a creatinina um
excelente parmetro, melhor que a ureia, para avaliar a funo renal.
Valores elevados de creatinina no plasma (hipercreatininmia) indicam uma
diminuio da velocidade de filtrao glomerular ou uma diminuio do volume de urina
produzida e excretada, independentemente de ser uma causa pr-renal, renal ou ps-renal.
A concentrao plasmtica de creatinina inversamente proporcional taxa de filtrao
glomerular (TFG). A hipercreatininmia, assim, causada por uma deteriorao da funo
renal. De notar que os valores da creatinina srica mantm-se dentro dos valores de
referncia at que uma grande parte da funo renal esteja comprometida, pelo que um
valor de creatinina normal no indica por si s que os rins esto a funcionar correctamente
e que a TFG esteja dentro dos valore se referncia. (8)
1.2.4. Depurao da creatinina endgena (DCE)
Dado que a creatinina srica s aumenta para alm dos valores de referncia quando
a funo renal j est seriamente afectada, um indicador pouco preciso desta. Assim,
23
pode avaliar-se a funo renal atravs da determinao da velocidade de remoo da

creatinina do sangue durante a sua passagem pelos rins. A depurao da creatinina
endgena (DCE) define-se como o volume de plasma sanguneo (em mL) que contm a
quantidade total de creatinina endgena excretada na urina por minuto. Para determinar a
DCE, necessrio calcular as concentraes srica e urinria da creatinina num espao de
24 horas, logo tem de se utilizar urina das 24 horas para se calcular este parmetro.
Existem vrias frmulas para o clculo, mas a mais conhecida a frmula emprica de
Cockroft e Gault, que se apresenta a seguir:
DCE = 1,224 [(140 idade (anos)) x peso (kg)] / Conc. Creat.plasma (mL/min)
Esta frmula aplica-se aos homens; para mulheres a concentrao de creatinina em

mdia 15% inferior, pelo que deve alterar-se o valor 1,224 para 1,04.(8)
1.2.5. Microalbuminria e proteinria
A presena na urina de protenas de peso molecular mdio ou alto, incluindo a
albumina, um bom indicador de nefropatia (doena renal). Os termos microalbuminria e
proteinria so geralmente usados como sinnimos, porque a protena mais abundante na
urina em doentes renais costuma ser a albumina.
A pesquisa destes parmetros feita em urinas de 24 horas, para se obterem
resultados mais correctos sobre o estado renal, visto que fundamental saber a quantidade
de urina que os rins produzem num perodo de 24 horas.
A monitorizao destes parmetros de grande importncia no seguimento de
doentes com diabetes mellitus, pois a nefropatia diabtica uma das consequncias graves
desta doena e da falta de monitorizao desta. (9)
1.2.6. cido rico
O cido rico o produto final do metabolismo das purinas (adenina e guanina,

constituintes dos cidos nucleicos). O cido rico filtrado nos glomrulos e parcialmente
reabsorvido nos tbulos; o restante excretado na urina.
O excesso de cido rico (hiperuricemia) pode dever-se a distrbios metablicos,
ingesto em excesso de purinas ou alcoolismo e consequentes danos renais. Como
consequncia da hiperuricemia pode surgir gota, doena na qual se depositam cristais de
uratos nas articulaes, surgindo dores associadas.
Pode ocorrer hipouricemia na doena de Wilson, em hepatopatias com sntese
reduzida de purinas ou em pessoas com deficincias na reabsoro renal. (10)
1.3. Dislipidemias
As dislipidemias so distrbios do metabolismo dos lpidos que levam alterao para
fora dos valores de referncia dos nveis de lpidos na corrente sangunea. Dentro destas
temos as hiperlipidemias (aumento) e as hipolipidemias (diminuio). Para determinar se
um indivduo tem uma dislipidemia devem determinar-se os seus nveis de colesterol (total,
LDL e HDL), os triglicridos e ainda as lipoprotenas. Numa dislipidemia pode estar
aumentado apenas um destes parmetros ou vrios, e de acordo com eles podem
classificar-se as dislipidemias em vrios tipos, por exemplo a hipercolesterolemia LDL e a
hipertrigliceridemia.
1.3.1. Colesterol
O colesterol um composto orgnico (esterol) que muitas vezes considerado
perigoso para o corpo humano, mas que na realidade necessrio porque crucial para
a sntese das hormonas esterides pelas gnadas e pelo crtex adrenal, e tambm para a
sntese da vitamina D. ainda um dos constituintes da blis e fornece estabilidade s
membranas celulares dos animais. O colesterol do organismo vem de duas vias: da dieta
alimentar e da sntese no fgado a partir da acetil-coenzima A.
O
colesterol
perigoso
quando
se
encontra
em
excesso
no
sangue
(hipercolesterolemia). A hipercolesterolemia est associada a um maior risco de doenas

cardiovasculares como a aterosclerose, enfarte agudo do miocrdio e acidentes vasculares
cerebrais. importante, assim, ter cuidado na alimentao e evitar ingerir alimentos com
excesso de colesterol e gorduras saturadas. No entanto, a hipercolesterolemia tambm se
25
pode dever a factores genticos. Neste caso, mais perigosa porque a terapia com
medicamentos antidislipidmicos menos eficaz. A falta de um gene ou uma mutao
podem causar a diminuio dos receptores do metabolismo do colesterol e das
lipoprotenas, fazendo aumentar a sua concentrao sangunea para valores elevadssimos,
sendo muitas vezes necessrio um transplante de fgado para corrigir o problema.
1.3.2. Lipoprotenas
Para o organismo utilizar os lpidos provenientes dos alimentos, necessrio que
estes sejam absorvidos no intestino. No entanto, os lpidos so insolveis no meio aquoso
do intestino e do sangue, pelo que tm de ser absorvidos na forma solubilizada, atravs dos
sais biliares, sintetizados no fgado a partir do colesterol e armazenados na vescula biliar.
Quando entram na corrente sangunea, os triglicridos e o colesterol da dieta, bem como
o sintetizado no fgado, so solubilizados em complexos esfricos denominados
lipoprotenas. As lipoprotenas contm triglicridos e colesterol esterificado no seu
interior, rodeados de fosfolpidos polares e apolipoprotenas na superfcie. Existem vrios
tipos de lipoprotenas, de acordo com a proporo de colesterol e triglicridos e os tipos
de apolipoprotenas, que conferem aos complexos densidades diferentes. As lipoprotenas
so, assim, classificadas de acordo com a sua densidade.
As lipoprotenas menos densas e de maior tamanho so os quilomcrons,
compostos na sua quase totalidade por triglicridos e obtidos no intestino aps absoro
dos lpidos. Os quilomcrons depois so transportados ao fgado onde so metabolizados
em VLDL (em portugus, lipoprotenas de muito baixa densidade). As VLDL possuem
menos triglicridos e ligeiramente mais colesterol que os quilomcrons, e tm um dimetro
menor. As VLDL circulam pelo sangue e so hidrolisadas pela lipoprotena lipase (LPL), uma
enzima das clulas endoteliais, transferindo glicerol e cidos gordos para os tecidos. O que
resta das lipoprotenas so as IDL (lipoprotenas de densidade intermdia). As IDL podem
circular no sangue ou serem absorvidas para o fgado e hidrolisadas pela lipase heptica,
formando-se LDL (lipoprotenas de baixa densidade). As LDL contm uma grande
quantidade de colesterol e transportam-no pelo sangue para os tecidos. As LDL so muito
susceptveis oxidao e so as principais responsveis pela aterosclerose, pelo que se
costumam chamar de mau colesterol. Por fim, existem ainda as HDL (lipoprotenas de
alta densidade), as mais densas devido proporo protenas/colesterol, sintetizadas no
fgado a partir do colesterol livre. As HDL transportam colesterol dos tecidos perifricos
para o fgado para ser metabolizado, e alm disso tm propriedades antioxidantes e antiinflamatrias, pelo que as HDL costumam ser chamadas de bom colesterol. A seguinte
tabela mostra as caractersticas das lipoprotenas referidas acima:
Densidade (g/mL) Tipo
Dimetro
(nm)
%
protenas
%
colesterol
%
fosfolpidos
% triglicridos
& colesterol
esterificado
>1.063
HDL
515
33
30
29
1.0191.063
LDL
1828
25
50
21
1.0061.019
IDL
2550
18
29
22
31
0.951.006
VLDL
3080
10
22
18
50
<0.95
Quilomcrons 100-1000
<2
84
Tabela 1.
(11)
Para avaliar o risco cardiovascular de um indivduo, um dos parmetros que se

costuma determinar a nvel laboratorial o ndice aterognico. Este parmetro obtido
dividindo o valor do colesterol total pelo valor das HDL. O risco aterognico baixo se a
relao acima for inferior a 5.
O aparelho auto-analisador do laboratrio faz a determinao do colesterol total e
do colesterol das HDL. Para determinar o colesterol das LDL, pode aplicar-se a seguinte
frmula (Frmula de Friedwald, 1972):
LDL = Colesterol total - HDL - TG/5 (mg/dL)
(12)
1.3.3. Triglicridos
Os triglicridos so steres de glicerol ligado a trs molculas de cidos gordos. A
maioria dos lpidos ingeridos na dieta esto na forma de triglicridos e estes so a principal
reserva energtica do organismo. No fgado, os triglicridos so sintetizados a partir de
glicerol livre (no intestino), ou de fosfato de di-hidroxiacetona (produto da via glicoltica,
no tecido adiposo). As reservas de triglicridos so mobilizadas quando h condies de
falta de energia no organismo, por exemplo nos casos de m nutrio ou diabetes.(13)
A sua concentrao srica (trigliceridemia) est directamente relacionada com a
concentrao srica de quilomcrons e de VLDL (as lipoprotenas mais ricas em
27
triglicridos). Um nvel elevado de triglicridos factor de risco para doenas

cardiovasculares e outras doenas, nomeadamente a pancreatite aguda.
1.3.4. Protena C reactiva
A protena C reactiva (PCR) est includa no grupo das protenas de fase aguda.
Todas as protenas de fase aguda elevam a sua concentrao sangunea em resposta a
estados inflamatrios agudos, causados por diversos fenmenos, incluindo infeces,
reaces alrgicas, leses tecidulares, neoplasias ou outros fenmenos que causem necrose
tecidular. A PCR Participa no processo inflamatrio, e liga-se superfcie dos agentes
patognicos, caso sejam eles os responsveis pela inflamao. O seu papel tanto pode ser
pr-inflamatrio ou anti-inflamatrio, consoante as condies do meio onde actua. (14)
Mais recentemente descobriu-se que a PCR importante para decifrar o papel de um
processo inflamatrio em aterosclerose e outras doenas isqumicas. Como referido
acima, as LDL so as lipoprotenas mais associadas aterosclerose porque so fortemente
susceptveis oxidao. As LDL oxidadas acumulam-se no endotlio e causam grandes
danos neste, iniciando-se um processo inflamatrio que leva subida rpida dos nveis da
PCR. Assim, existe uma associao entre a concentrao srica de LDL, os nveis da PCR e
a extenso da doena aterosclertica. Isso faz com que a protena C reactiva seja um bom
indicador de dislipidemia e/ou presena de placas aterosclerticas associadas. (15)
1.4. Diabetes mellitus

A diabetes mellitus ou simplesmente diabetes a disfuno metablica mais
comummente encontrada na Clnica. Pode definir-se como uma sndrome caracterizada
pela hiperglicemia causada pela ausncia ou insuficiente secreo de insulina pelas clulas
beta dos ilhus de Langerhans do pncreas (Diabetes tipo 1, insulino-dependente) ou pela
resistncia aco da insulina causada pela diminuio e/ou esgotamento dos seus
receptores celulares, o que compromete o transporte da glicose para as clulas (Diabetes
tipo 2, no insulino-dependente).
Para o diagnstico da diabetes necessria pelo menos uma amostra de sangue
colhida preferencialmente em jejum e determinar o valor da glicemia. este valor que
define se um indivduo ou no diabtico, embora para a monitorizao da diabetes se

devam utilizar outros parmetros para alm da concentrao de glicose no sangue. (1)
1.4.1. Glicose
Como foi referido acima, o diagnstico da diabetes mellitus feito com a
determinao da glicemia numa amostra de sangue, que de preferncia deve ser colhida em
jejum, mas se as condies no o permitirem, pode utilizar-se uma amostra colhida
aleatoriamente. Uma glicemia em jejum igual ou superior a 126 mg/dL (7,0 mmol/L)
suficiente para o diagnstico de diabetes, independente de estarem presentes os sintomas
da hiperglicemia: poliria, polidipsia, polifagia e glicosria. Se a glicemia se situa entre 110 e
126 mg/dL, considera-se que a pessoa tem intolerncia glicose, no se conseguindo definir
com exactido de a pessoa diabtica. Para isso recorre-se prova de tolerncia glicose
oral (PTGO). (1)
1.4.2. Prova de tolerncia glicose oral (PTGO)
A PTGO utiliza-se quando a glicemia em jejum de um indivduo se situa entre os 110
e os 126 mg/dL. Para a realizao desta prova, deve comear-se por colher uma amostra
de sangue em jejum e determinar a glicemia. Depois, o indivduo deve ingerir uma grande
quantidade de glicose dissolvida em gua (75 g de glicose em cerca de 300 mL de gua), e
duas horas depois deve colher-se outra amostra de sangue. Em pessoas saudveis, a
glicemia s duas horas deve ser inferior a 140 mg/dL. Valores entre 140 e 200 mg/dL
indicam diminuio da tolerncia glicose, e um valor superior a 200 mg/dL confirma o
diagnstico de diabetes. (1) Uma variante da PTGO utilizada em mulheres grvidas para o
diagnstico da diabetes gestacional (mulheres saudveis com hiperglicemia na gravidez), em
que se ingerem 75 g de glicose em gua. Mede-se a glicose em jejum, uma hora depois da
toma e duas horas depois. Os valores de referncia deste teste so: 105 mg/dL em jejum,
180 mg/dL aps 1 h e 153 mg/dL aps 2 h. A mulher considerada diabtica se a sua
glicemia for superior ao valor de referncia respectivo.(1)
1.4.3. Hemoglobina glicada (HbA1c)
29
A hiperglicemia leva ligao no enzimtica de glicose a uma variedade de protenas,

incluindo a hemoglobina, formando-se HbA1c. Este processo denominado glicao ou
glicosilao, e irreversvel em condies fisiolgicas. Assim, a concentrao de
hemoglobina glicada reflecte a concentrao de glicose no sangue, e devido ao tempo de
semivida longo dos eritrcitos (cerca de 120 dias) permite avaliar as flutuaes da glicemia
durante um longo perodo de tempo, at cerca de dois meses antes da medio da HbA1c.
Este parmetro , assim, um ptimo complemento da glicemia no diagnstico e na
monitorizao da diabetes mellitus. O valor de hemoglobina glicada expresso em
percentagem em relao ao total de hemoglobina no organismo; um valor de 6,5% ou
inferior indica que o doente diabtico est a controlar eficazmente a sua glicemia. No
entanto, preciso ter em conta eventuais patologias que alteram as caractersticas dos
eritrcitos e da hemoglobina, como as anemias e talassmias, que levam a uma renovao
mais rpida dos eritrcitos, diminuindo o valor de HbA1c obtido. (1)
No aparelho de Bioqumica do laboratrio, as amostras para anlise da HbA1c
consistem em 1 mL de um reagente hemolisante e 25 L de sangue (amostra) ou de
controlo.
1.5. Ionograma
O ionograma a avaliao da concentrao dos principais electrlitos encontrados
no organismo. Os electrlitos so ies que existem nos fluidos corporais e que
desempenham um papel fundamental no equilbrio da distribuio dos volumes de gua e
dos prprios electrlitos pelos tecidos do organismo (equilbrio hidro-electroltico). Os
electrlitos mais importantes para a regulao deste equilbrio so o io sdio, o io
potssio e o io cloreto, e so esses os ies avaliados no aparelho de ionogramas existente
no laboratrio de Anlises Clnicas da FFUC.
Procedimento para se fazer um ionograma
O aparelho do ionograma do laboratrio mede a concentrao electroltica na
amostra atravs do mergulho desta nos elctrodos selectivos dos ies respectivos, cuja
voltagem depender da concentrao de ies na amostra. A voltagem do elctrodo
selectivo comparada com a do elctrodo de referncia do aparelho, um elctrodo de
prata/cloreto de prata (Ag/AgCl). O aparelho dos ionogramas possui dois padres de
calibrao internos. Antes de se analisarem as amostras, deve utilizar-se uma soluo de

controlo. No laboratrio esto disponveis dois controlos, um normal (para concentraes
normais e um para valores altos. O procedimento de medio do controlo e das amostras
igual: activa-se a funo Analyze Blood do aparelho e mergulha-se o controlo/amostra
no elctrodo selectivo; depois escolhe-se a funo Probe in Blood e o tubo que conduz
ao elctrodo aspira uma parte da soluo para o aparelho. Como j foi dito, a voltagem do
elctrodo selectivo muda consoante a concentrao electroltica, e o detector de sinal do
aparelho transforma a voltagem num valor de concentrao que aparece no leitor do
aparelho no fim da anlise. O resultado ainda impresso numa pequena impressora
embutida na parte de cima do aparelho; no final, anota-se o nmero da amostra no papel,
para identificar os resultados.
1.5.1. Io sdio
O io sdio (Na+) o catio extracelular mais abundante e a partcula
osmoticamente mais activa, pois regula a passagem entre compartimentos da gua por
osmose. O io sdio assim a partcula mais importante na regulao da osmolaridade dos
fluidos do organismo. O sdio absorvido no tracto gastrointestinal, e aquele que
filtrado nos glomrulos depois reabsorvido. O excesso de sdio eliminado na urina.
Quando h sada de sdio, h tambm sada de gua do organismo, havendo alterao
do volume de gua nos compartimentos extracelulares. A diminuio da concentrao
plasmtica de sdio denominada hiponatremia. A hiponatremia pode ter vrias causas:
perda primria de sdio (diarreias); ingesto e/ou reteno excessiva de gua (insuficincia
cardaca ou renal), havendo diluio dos compartimentos do organismo (hiponatremia
dilucional); diurese osmtica com maior perda de sdio que de gua (uso de diurticos ou
diarreias); sndrome da secreo inapropriada da vasopressina ou hormona antidiurtica
(SIADH).
Pode
ainda
ocorrer
uma
pseudo-hiponatremia,
em
doentes
com
hiperproteinemia ou hiperlipidemia; a quantidade excessiva de protenas/lpidos ocupa um

maior volume de plasma e portanto a fraco aquosa do plasma, onde se encontra o sdio,
menor, o que pode dar um valor falsamente baixo de concentrao plasmtica de sdio.
Os sintomas da hiponatremia podem ser hipotenso ortosttica, tonturas, fraqueza
generalizada e convulses. (1)
A hipernatremia, isto , uma concentrao elevada de sdio no plasma, costuma
ocorrer na desidratao, que leva concentrao do sdio do organismo, na diurese
osmtica com maior perda de gua que de sdio, na ingesto excessiva de sdio, no
31
aumento da secreo de aldosterona (hiperaldosteronismo primrio) e mesmo em

situaes fisiolgicas como a gravidez, em que as hormonas esterides causam reteno de
sdio. Os sintomas mais comuns da hipernatremia so secura das mucosas, febre, sede e
cansao. (7)
1.5.2. Io potssio
O io potssio (K+) muito mais abundante no espao intracelular que no
extracelular, mas a pesquisa de disfunes envolvendo este io feita principalmente pela
medio do potssio extracelular. Os problemas do organismo que envolvem o potssio
so classificados com base da concentrao plasmtica deste io, e no com base no seu
aumento ou perdas. As necessidades de potssio do organismo so supridas pela dieta e o
excesso excretado na urina.
diminuio da concentrao do potssio no plasma chama-se hipocaliemia. A
hipocaliemia pode ser causada por redistribuio do potssio nos compartimentos do
organismo (movimento do io para o interior das clulas), por uma pouca ingesto ou por
perdas excessivas, renais ou extra-renais, por exemplo, uso de diurticos ou perdas
urinrias por hiperaldosteronismo (renal) ou sudorese excessiva, vmitos ou diarreia
(extra-renal). A hipocaliemia severa afecta muitos dos sistemas do organismo, e pode levar
a desordens neuronais e a arritmias cardacas, que podem ser fatais. (8)
A hipercaliemia um valor elevado de concentrao de potssio no plasma. Uma
consequncia da hipercaliemia a acidose, isto , o aumento da concentrao de ies H+
nos fluidos corporais. Uma alterao dos nveis de io potssio ou hidrognio causa a
redistribuio do outro; no caso da hipercaliemia os ies potssio difundem para dentro
das clulas e isso causa a sada para o espao extracelular dos ies H+ para manter a
neutralidade elctrica no organismo.
A hipercaliemia pode ocorrer por ingesto de potssio em excesso, diminuio da
sua excreo por uso de espironolactona (diurtico poupador de potssio, que elimina
gua mas no K+) ou na doena de Addison (baixa secreo de aldosterona, que faz com
que o rim no consiga excretar o potssio adequadamente). Os sintomas principais so
fraqueza e paralisia muscular, bem como arritmias cardacas. (16)
1.5.3. Io cloreto
O io cloreto (Cl-) o anio mais abundante no organismo, sendo principalmente

extracelular. Tal como o io sdio, o io cloreto importante na regulao da presso
osmtica dos fluidos extracelulares. O cloreto ainda importante na regulao do Ph do
sangue e na formao de cido clordrico no estmago. A maior parte do io cloreto no
organismo humano proveniente da dieta, e o excesso eliminado na urina.
Um valor baixo de concentrao srica de cloreto (hipocloremia) ocorre em
situaes como vmitos, doena de Addison e acidose respiratria com alcalose
metablica. A hipercloremia, uma concentrao elevada de cloreto no soro, comum em
casos de desidratao, diarreia severa (com forte eliminao de bicarbonato, compensada
com o aumento do cloreto), hiperactividade adrenocortical (os esterides adrenais
aumentam a reabsoro tubular de cloreto) e acidose tubular renal com acidose metablica
e alcalose respiratria. (17)
1.5.4. Outros ies
Nesta seco referem-se os ies cujas concentraes so determinadas ao autoanalisador de Bioqumica e no no ionograma.
O io clcio (Ca2+) fundamental para processos biolgicos como a coagulao
sangunea, transmisso de impulsos nervosos, actividade de vrias enzimas e a
contractilidade dos msculos. No soro o io pode circular na forma livre (activa),
complexado com anies (como o fosfato) ou ligado a protenas (albumina). Cerca de 99%
do clcio do organismo est, no entanto, localizado nos ossos. A concentrao de clcio no
soro (calcemia) regulada por hormonas: paratiride (PTH), calcitriol (resultante do
metabolismo renal da vitamina D) e calcitonina. A calcitonina inibe os osteoclastos,
diminuindo a reabsoro ssea e a libertao de clcio para o sangue. A PTH estimula os
osteoclastos, aumentando a calcemia e promovendo a absoro intestinal de clcio atravs
da vitamina D. A diminuio dos nveis sricos de clcio (hipocalcemia) estimula a secreo
de PTH na paratiride e de calcitriol nos rins, aumentando a reabsoro ssea e renal, o
que leva normalizao da calcemia. Um aumento do clcio no soro (hipercalcemia) pode
dever-se a uma excessiva reabsoro ssea (osteoporose, hipertiroidismo) e a
hipocalcemia pode dever-se ao hipoparatiroidismo ou falta de vitamina D. (7)
O io fosfato (PO3-) importante para o metabolismo dos hidratos de carbono e
um constituinte de substncias necessrias vida como os fosfolpidos, cidos nucleicos e
ATP. Grande parte do io est na forma de fosfato de clcio nos ossos, o que est no
sangue circula na forma inorgnica ou orgnica (cido fosfrico, H3PO4). O metabolismo
33
deste io relaciona-se com o do clcio. A PTH provoca a excreo de io fosfato na urina e

a vitamina D aumenta a sua concentrao srica (fosfatemia). O hipoparatiroidismo e a
hipervitaminose D podem levar a hiperfosfatemia, enquanto que o contrrio leva
hipofosfatemia. (7)
O io magnsio (Mg2+) um catio predominantemente intracelular que funciona
como activador de vrias enzimas e ajuda a preservar a estrutura dos cidos nucleicos. A
maioria do magnsio encontra-se nos ossos; o resto est ligado a protenas, ies (fosfato e
citrato) e complexos moleculares. A homeostase do magnsio principalmente regulada
pela reabsoro tubular renal. A hipomagnesemia pode dever-se sua m absoro
(intestinal), diarreia, alcoolismo, pancreatite aguda e patologias renais, enquanto que a
hipermagnesemia se pode dever a insuficincia renal crnica, desidratao ou ingesto em
excesso de anticidos com magnsio. (7)
O ferro na forma de io pode estar no estado frrico (Fe3+) ou ferroso (Fe2+). O
ferro essencial vida por participar em processos vitais como a fosforilao oxidativa e o
transporte de oxignio aos tecidos. um constituinte da hemoglobina e de vrias enzimas.
A homeostase do ferro regulada pela absoro a nvel do duodeno e jejuno, aps
reduo ao estado ferroso pela aco do cido ascrbioco (vitamina C). Nas clulas, o
ferro combina-se com a protena de armazenamento apoferritina para formar ferritina. No
sangue, a maioria do ferro est ligado protena transferrina, e a determinao do io e da
transferrina necessria para o diagnstico e monitorizao de anemias ferropnicas.
Aumentos na concentrao srica de ferro (hipersideremia) devem-se a anemia hemoltica
ou perniciosa, hemocromatose e necrose hepatocelular com libertao das reservas de
ferro; a hiposideremia pode ocorrer com m nutrio ou hemorragias. (7)
1.6. Funo pancretica

O pncreas um rgo fortemente vascularizado, com funes endcrinas e
excrinas. Do lado endcrino do pncreas destacam-se a produo de insulina e glucagina,
hormonas que regulam a glicemia (a insulina hipoglicemiante e a glucagina
hiperglicemiante). A parte excrina desempenha funes importantes de digesto dos
componentes dos alimentos (hidratos de carbono, lpidos e protenas) atravs da secreo
das enzimas amilase, lipase e tripsina. No laboratrio de Bioqumica avalia-se mais
frequentemente a funo excrina do que a endcrina. Para essa avaliao as enzimas mais
utilizadas so a amilase e a lipase pancreticas.
Existem vrias disfunes excrinas que alteram a frequncia e/ou o nvel da secreo
das enzimas e a sua concentrao srica, das quais se podem destacar a pancreatite (aguda
e crnica) e os carcinomas do pncreas. (18)
1.6.1. Amilase
A amilase pancretica uma das enzimas mais estveis do organismo, e catalisa o
metabolismo dos hidratos de carbono provenientes da dieta, nomeadamente o amido e o
glicognio.
A concentrao srica da amilase de elevada importncia no diagnstico e
seguimento da pancreatite aguda. No primeiro dia da doena, a sua concentrao aumenta
rapidamente (hiperamilasemia) e depois desce tambm rapidamente devido sua excreo
a nvel renal. O valor do pico pode atingir quatro vezes o valor normal da enzima. No
entanto, a amilase pancretica aumentada no soro no uma consequncia especfica da
pancreatite aguda; tambm aumenta em queimaduras, cetoacidose, doenas cardacas,
perfurao do duodeno e/ou insuficincia renal. Um valor persistentemente alto de amilase
srica (por 10 dias ou mais) sugestivo de um pseudoquisto pancretico. (18)
Como a amilase excretada na urina, tambm de interesse avaliar a amilasria e a
clearance da amilase durante a pesquisa ou o seguimento de uma pancreatite aguda.
(8)
amilasria aumenta cerca de 24 horas aps o pico da amilasemia e mantm-se elevada por
vrios dias, o que torna a amilasria til no diagnstico de doena pancretica, desde que a
funo renal esteja normal.
1.6.2. Lipase
O comportamento da concentrao srica da lipase pancretica em caso de doena
do pncreas semelhante ao da amilase, aumentando as duas praticamente ao mesmo
ritmo. No entanto, a diminuio que se segue aps o pico srico mais lenta no caso da
lipase, que assim se mantm elevada por mais tempo aps o incio da pancreatite aguda.
Alm disso, a lipasemia (concentrao plasmtica da lipase) aumenta em casos de
hiperamilasemia de origem pancretica, mas mantm-se normal se o aumento da amilase
no se dever a patologia do pncreas. assim uma enzima mais especfica deste rgo. O
35
ideal seria fazer a medio de ambas as enzimas no soro para melhorar a qualidade do
diagnstico de pancreatite aguda. (8)
1.7. Avaliao muscular

Para a avaliao da integridade muscular existe uma enzima, a creatina cinase (CK),
que existe em grande concentrao no citoplasma das clulas musculares e libertada para
a corrente sangunea se estas clulas sofrerem uma ruptura. No msculo existem ainda
outras enzimas e protenas, mas no laboratrio de Bioqumica a CK a enzima mais
utilizada para esta anlise.
1.7.1. Creatina cinase
A creatina cinase (CK) o marcador mais sensvel de leso muscular. O msculo
esqueltico o tecido humano que contm a maior concentrao de CK, muito superior
dos outros tecidos, embora tambm seja abundante no msculo cardaco e crebro. O
organismo humano possui trs isoformas da CK, obtidas a partir da combinao das
subunidades M (muscle) e B (brain). As trs isoformas so a CK-MM, a CK-MB e a CK-BB.
O msculo esqueltico contm principalmente CK-MM e alguns vestgios de CK-MB. No
crebro encontra-se apenas CK-BB, e no msculo cardaco contm cerca de 40% de CKMB, e 60% de CK-MM.
Danos nas clulas musculares causam a libertao da CK para o sangue e o aumento
da sua actividade, e se esse aumento ocorrer numa parte significativa na CK-MB, pode
estar adjacente a problemas cardacos, nomeadamente o enfarte agudo do miocrdio e, em
menor grau, angina de peito e insuficincia cardaca. No entanto, a CK-MB tambm pode
estar aumentada em situaes que no envolvam o corao, como no ps-cirurgia aos
msculos, em doenas neuromusculares crnicas e em crianas.
A actividade da CK tambm aumenta em casos onde est presente necrose ou
regenerao do tecido muscular, como em vrias doenas do msculo (miopatias).
A creatina cinase tambm aumenta no plasma em condies fisiolgicas,
nomeadamente aps o exerccio fsico. Neste caso, atinge o pico cerca de um a dois dias
aps a actividade fsica. Quanto mais intenso for o exerccio, maior o aumento da CK e
mais tarde se verifica o pico de actividade. (8)
2. Hematologia
A Hematologia o ramo das cincias que se dedica ao estudo do sangue, incluindo os
rgos de desenvolvimento das partculas do sangue (rgos hematopoiticos) e as
doenas do sangue. Na Hematologia enquadrada nas Anlises Clnicas incluem-se o estudo
da hemoglobina, das clulas sanguneas, das protenas do sangue, dos mecanismos de
coagulao e da velocidade de sedimentao. Os aparelhos e testes do mbito da
Hematologia sero descritos nesta parte do relatrio.
2.1. Sistema hematopoitico
A hematopoiese o nome dado ao processo de formao, desenvolvimento e
maturao dos elementos do sangue: eritrcitos, leuccitos e plaquetas. Todas as clulas
sanguneas provm de uma nica clula estaminal (stem cell) comum omnipotente, e, de
acordo com a influncia de factores locais e humorais, essa clula estaminal diferencia-se
em clulas pluripotentes linfides (que vo dar origem aos linfcitos) e mielides (que do
origem aos outros leuccitos, eritrcitos e plaquetas). A partir das clulas pluripotentes
existem ainda vrias etapas antes de se chegar s clulas maduras. Na figura da pgina
seguinte est esquematizada a hematopoiese e as suas etapas para cada linhagem celular.
37
Figura 1. As vrias linhagens das clulas sanguneas.
(19)
Cada linhagem de clulas inclui precursores que se podem dividir (blastos) e formas
maduras ou quase maduras que no se conseguem dividir. Os blastos encontram-se
normalmente nos rgos hematopoiticos (medula ssea e ndulos linfticos), mas podem
encontrar-se em teoria tambm no sangue perifrico porque no existe uma barreira bem
definida entre a medula e o sangue, e os blastos s tm dificuldade em passar para o sangue
devido sua plasticidade limitada. (19)
2.2. Clulas sanguneas maduras
2.2.1. Neutrfilos
Os neutrfilos so glbulos brancos (leuccitos) que,
juntamente com os eosinfilos e os basfilos, pertencem ao grupo
dos granulcitos. Possuem um ncleo muito segmentado e a sua
funo principal a defesa do organismo contra bactrias. Fora do
sistema vascular, nos tecidos inflamados, os neutrfilos fagocitam e
lisam as bactrias. (19)
Figura 2.
2.2.2. Eosinfilos
Os eosinfilos so leuccitos granulcitos cujo nome se deve ao
facto de serem acidfilos e corarem na presena do corante eosina, e
cuja principal funo a defesa contra parasitas; eles tm uma aco
Figura 3.
citotxica contra os parasitas e os seus ovos e larvas. Os eosinfilos tm ainda um papel

no controlo de reaces anafilcticas e auto-imunes, regulando a influncia dos basfilos.
(19)
2.2.3. Basfilos
Os basfilos ou granulcitos basfilos tm este nome porque
tm afinidade para corantes de pH bsico. A principal funo dos
basfilos e dos seus equivalentes tecidulares (mastcitos) regular a
circulao atravs da libertao de substncias como a histamina, a
serotonina e a heparina. Estas substncias aumentam a permeabilidade
vascular em locais de forte actividade antignica e por isso regulam a entrada
nestes locais de outras clulas inflamatrias.
Figura 4.
(19)
2.2.4. Moncitos
A funo principal dos moncitos a defesa do organismo
contra bactrias, fungos, vrus e outros corpos estranhos. O mtodo
mais comum que os moncitos utilizam para desempenharem esta
funo a fagocitose. Os moncitos tambm destroem as clulas do
organismo que esto no seu fim de vida (como os eritrcitos). Fora
da corrente sangunea, os moncitos desenvolvem-se em histicitos, e no
Figura 5.
endotlio desenvolvem-se em macrfagos. (19)

2.2.5. Linfcitos
Os linfcitos dividem-se em trs grupos principais de acordo
com a sua funo. Os linfcitos T (de timo, o rgo da sua
maturao), cerca de 70% da populao total de linfcitos, fazem a
defesa local (imunidade celular) contra antignios de corpos
estranhos, e por sua vez dividem-se em linfcitos T helper e linfcitos T
Figura 6.
supressores. Os linfcitos B, de bone marrow (medula ssea, onde se d a sua

maturao), desenvolvem-se em plasmcitos, clulas secretoras de imunoglobulinas
(anticorpos), e so responsveis pela imunidade humoral contra vrus, bactrias e
alergenos. As clulas NK (natural killer) esto relacionadas com os linfcitos T e tm uma
aco citotxica directa. (19)
39
2.2.6. Eritrcitos
Os eritrcitos ou glbulos vermelhos so as clulas sanguneas
que transportam o oxignio, ligado hemoglobina, para os rgos e
tecidos do corpo, e a partir destes transportam o dixido de carbono
em direco aos pulmes. So, assim, extremamente importantes para
a realizao das trocas gasosas. O facto de serem clulas anucleadas
permite-lhes optimizar essa funo visto que assim conseguem ligar um maior
Figura 7.
nmero de molculas de oxignio. A sua forma bicncava fornece-lhes uma

elevada plasticidade. (19)
2.2.7. Plaquetas
As
plaquetas
ou
trombcitos
formam
agregados
que,
juntamente com os factores de coagulao humorais, tapam as leses

vasculares impedindo a sada de sangue em excesso. As plaquetas,
durante a coagulao, ainda libertam factores que promovem esse
mecanismo. As plaquetas desenvolvem-se a partir dos megacaricitos
na medula ssea. So as pores nucleadas e citoplasmticas destas
clulas progenitoras. (19)
Figura 8.
2.3. Hemograma
Um hemograma um teste que fornece informaes quantitativas e qualitativas
sobre as caractersticas das clulas sanguneas de um indivduo. Os parmetros do sangue
que so estudados num hemograma so:
- hemoglobina total;
- hematcrito;
- volume globular mdio (VGM);
- hemoglobina corpuscular mdia (HCM);
- concentrao da hemoglobina corpuscular mdia (CHCM);
- distribuio dos glbulos vermelhos (RDW);
- contagem de eritrcitos;
- contagem de leuccitos;
- valor absoluto e percentagem de cada um dos tipos de leuccitos;
- contagem de plaquetas;
- presena de clulas estranhas ou precursores (como os reticulcitos) no sangue.
Um hemograma assim extremamente til para determinar se um indivduo possui
alguma patologia relacionada com o sangue, nomeadamente uma anemia ou leucemia, pois
um ou mais parmetros fora dos valores de referncia pode indicar um problema
relacionado com o desenvolvimento e maturao das clulas sanguneas. No caso de o
indivduo ter uma doena sangunea diagnosticada, torna-se importante a realizao
peridica de hemogramas para a monitorizao e o controlo da doena. O hemograma o
teste mais importante e mais frequentemente pedido no mbito da Hematologia em
Anlises Clnicas. (19)
Procedimento para um hemograma
Obviamente, para se realizar um hemograma necessria uma colheita de sangue,
que pode ser feita no posto de colheitas ou no prprio laboratrio, se for um pedido mais
urgente. Como os resultados dos hemogramas so afectados pela circulao do sangue, as
condies de colheita devem ser idealmente as mesmas em todas as colheitas, para se
terem resultados comparveis. Isso significa que o sangue deve ser colhido sempre
mesma hora e aps um jejum de pelo menos oito horas, porque o estado nutricional
tambm influencia os resultados.
Pode ser colhida uma pequena amostra de sangue a partir dos capilares. A primeira
gota de sangue deve ser descartada por possvel contaminao, e no se deve exercer
demasiada presso no tecido do qual se est a colher o sangue, porque isto tambm pode
alterar a composio da amostra.
Aps a colheita, o sangue transferido para um tubo identificado com um tampa
roxa e contendo uma pequena dose do anticoagulante EDTA (a cor da tampa identifica o
anticoagulante presente) e o tubo agitado com cuidado, para prevenir a coagulao
acidental. A quantidade de EDTA no tubo no deve interferir com a anlise da amostra.
Se o utente fez a colheita no posto, o tubo deve ser conservado no frio e
transportado imediatamente para o laboratrio para anlise; se o sangue foi colhido no
laboratrio e se destina a ser analisado na hora, no preciso conserv-lo.
No laboratrio de Anlises Clnicas da FFUC, o aparelho destinado para os
hemogramas um contador de clulas Coulter MaxM acoplado a um computador, que
pode fazer a anlise de modo automtico (preferencialmente) ou manual.
41
O Coulter MaxM realiza a identificao e as contagens de clulas atravs de um

mtodo de impedncia e da tecnologia VCS (Volume, condutividade e scatter):
- O aparelho utiliza o princpio da impedncia para medir com preciso o volume
fsico que as clulas ocupam num diluente isotnico (volume);
- Utiliza uma corrente alternada com energia suficiente para penetrar as clulas e
fornecer informao sobre o seu contedo (condutividade);
- Utiliza um raio laser que ao atingir as clulas sofre uma disperso (scatter), e atravs
de detectores obtm sinais sobre o ngulo de scatter para obter informao sobre a
granularidade, a lobularidade dos ncleos e a estrutura da superfcie celular.
No fim da anlise, o computador manda imprimir os resultados. Na folha de
resultados so referidos: grficos com a distribuio de cada tipo de clulas, a presena de
eventuais clulas precursoras e os parmetros da lista acima (pg. 36), com as eventuais
indicaes de valores fora da referncia ou de amostra sem condies ideais para anlise
(por exemplo, por estar coagulada). s vezes existem erros na contagem automtica e por
isso tem de se recorrer ao mtodo manual, fazendo-se a aspirao do sangue atravs de
um tubo metlico presente no aparelho.
2.3.1. Parmetros do hemograma
Nesta seco esto referidas caractersticas dos parmetros nomeados na lista da
pgina 35.
a) Hemoglobina
A hemoglobina ou Hb a protena dos eritrcitos que liga o oxignio e tambm o
dixido de carbono e os transporta ao longo do organismo. composta por quatro
subunidades de globina e um grupo central que contm um io Fe2+ ou Fe3+ ao qual se d o
nome de heme. Na anlise pelo aparelho automtico, a hemoglobina oxidada a
cianometa-hemoglobina pela adio de cianeto, e este ltimo composto que
determinado por espectrofotometria. Um valor baixo de hemoglobina pode indicar que a
amostra provm de um doente com anemia. (19)
b) Hematcrito
O hematcrito a proporo do volume total de eritrcitos em relao do volume
total do sangue. No aparelho do hemograma, o hematcrito calculado da seguinte forma:
o aparelho determina o volume globular mdio (VGM) dos eritrcitos e o nmero total
destes; depois multiplica o valor do VGM pelo nmero de eritrcitos para obter o
hematcrito. No aparelho o hematcrito expresso num valor entre 0 e 1, mas tambm
pode ser expresso em percentagem. Um hematcrito baixo pode significar a presena de
uma hemorragia ou uma eritropoiese comprometida por falta de ferro. Um valor alto pode
dever-se a eritrocitose, desidratao, hipoxia ou doena cardaca. (19)
c) Volume globular mdio
O volume globular mdio (VGM) uma medida do tamanho mdio dos eritrcitos e
a sua determinao pode dar ao clnico informaes sobre o estado da eritropoiese num
determinado indivduo. O VGM determinado directamente pelo aparelho automtico, ou
pode ser calculado dividindo o hematcrito pelo nmero total de eritrcitos. (19)
d) Hemoglobina corpuscular mdia
A hemoglobina corpuscular (ou globular) mdia (HCM) uma medida que define, tal
como o VGM, a qualidade dos eritrcitos. utilizada para pesquisar certos tipos de
anemias. Tambm determinada automaticamente ou pode ser calculada dividindo o valor
da hemoglobina pelo nmero de eritrcitos. (19)
e) Concentrao da hemoglobina corpuscular mdia
A CHCM uma medida da concentrao de hemoglobina num dado volume de
eritrcitos. Um valor baixo significa que o sangue provm de um doente com anemia
microctica (eritrcitos pequenos), enquanto que nas anemias macrocticas (eritrcitos
grandes), embora o valor total de Hb esteja alto, a sua concentrao mdia mantm-se
normal. Uma CHCM alta est associada a anemia falciforme. A CHCM determinada
automaticamente ou calculada dividindo a concentrao de hemoglobina pelo hematcrito.
(19)
f) Distribuio do volume dos glbulos vermelhos

A distribuio do volume dos eritrcitos (Red cell distribution width, RDW) um
coeficiente de variao dos eritrcitos com base no seu volume. Calcula-se atravs da
diviso do desvio-padro pela mdia do volume dos eritrcitos e multiplica-se o resultado
por 100, ou ento calculado automaticamente pelo aparelho. Um valor de RDW alto
indica que os glbulos vermelhos tm volumes muito variveis entre si (anisocitose),
enquanto que um valor baixo ou normal d pouca informao clinicamente importante
sobre o volume dos eritrcitos. (19)
43
g) Contagem de eritrcitos
Seguindo o princpio da impedncia e o princpio VCS, o aparelho Coulter faz a
contagem de clulas sanguneas de um modo totalmente automtico, a no ser que surjam
erros nesse mtodo; nesse caso a contagem manual. A contagem de eritrcitos diz
respeito ao nmero total de eritrcitos existente numa amostra de sangue. O valor
normalmente referido em nmero de clulas/litro.
As mulheres tm normalmente um nmero de eritrcitos inferior aos homens,
especialmente aps a puberdade, devido ao sangue perdido nas menstruaes e maior
concentrao de andrognios (estimulantes da eritropoiese) em homens.
Por definio, um nmero de eritrcitos abaixo do intervalo de referncia significa
que o indivduo sofre de uma anemia. Esta diminuio leva queda tambm da hemoglobina
e do hematcrito.
O Coulter tambm consegue, alm de contar, analisar a forma e o tamanho dos
eritrcitos. Por definio, uma variabilidade acima da mdia no tamanho dos eritrcitos
chama-se anisocitose, e uma variabilidade acima da mdia na forma destes (que
normalmente tm a forma de disco bicncavo) chama-se poiquilocitose. Estes dois casos
so mais frequentes em anemias com deficincia de ferro, em perodos de eritropoiese
estimulada ou quando os eritrcitos sofrem danos graves. (20)
h) Contagem de leuccitos
Na cmara de contagem de leuccitos existem reagentes hemolisantes que destroem
os eritrcitos, que iriam de outra forma interferir com a contagem dos glbulos brancos.
As clulas que passem pela cmara e que tenham um dimetro superior a um certo valor
(varivel de acordo com o fabricante do aparelho) so contadas como leuccitos. Eventuais
plaquetas gigantes, clulas precursoras ou eritrcitos resistentes lise so contados como
leuccitos, o que origina uma sobreestimao do nmero destes.
Os feixes laser da cmara conseguem ainda distinguir, dentro dos leuccitos, quais
so neutrfilos, eosinfilos, basfilos, moncitos e linfcitos (contagem diferencial de
leuccitos). O auto-analisador do laboratrio determina o valor absoluto, percentagem e
distribuio do volume e tamanho dos leuccitos; esses parmetros so expressos na folha
de resultados. No grfico da distribuio, os eixos indicam o nmero e o tamanho das
clulas e o analista clnico consegue identificar o tipo de leuccitos com base na posio do
grfico em que se encontram.
Para classificar um nmero baixo de clulas (no geral ou de um certo tipo), usa-se o
sufixo penia. Por exemplo, neutropenia define um nmero baixo de neutrfilos. Para um
valor alto, usa-se o sufixo citose: leucocitose refere-se a um nmero elevado de
leuccitos. (19,21)
i) Contagem de plaquetas
Num contador automtico de clulas sanguneas, estas so separadas por tamanhos
antes de serem contadas. As clulas mais pequenas (os tamanhos de referncia variam com
o fabricante) so geralmente consideradas plaquetas. Um valor baixo de plaquetas
(trombocitopenia) sugere um risco elevado de hemorragia e muito comum em indivduos
alcolicos (Hoffbrand, Victor A. et al., Colour Atlas of Clinical Hematology, 4 edio,
Elsevier, 2010). No entanto, pode estar-se na presena de uma pseudotrombocitopenia,
causada pela agregao de plaquetas ou pela presena de plaquetas gigantes; se o valor das
plaquetas for demasiado baixo e inesperado, deve-se tirar as dvidas pela visualizao
microscpica da morfologia das clulas sanguneas atravs da realizao de um esfregao.
(19)
2.4. Anlise da morfologia do sangue esfregao

Se o resultado do hemograma indicar a presena de clulas precursoras,
nomeadamente reticulcitos (precursores dos eritrcitos que mantm algumas bandas de
RNA no centro), ou se um ou mais parmetros esto sistematicamente alterados e/ou
dbios, deve fazer-se um esfregao sanguneo (s vezes, a prpria folha de resultados
sugere a realizao de um). Um esfregao consiste na colocao entre lmina e lamela de
uma gota de sangue, no espalhar do sangue pela lmina com a lamela e na observao do
sangue ao microscpio.
O esfregao comea com a colocao de uma gota de sangue numa margem da
lmina utilizando um tubo capilar. De seguida coloca-se uma lamela em cima da lmina e
puxa-se para trs at contactar com a gota, fazendo um ngulo de cerca de 30 com a
lmina. Deixa-se que toda a parte inferior da lamela fique coberta de sangue e por fim
movimenta-se a lamela ao longo da lmina sem exercer presso nela (ver figura), de modo
a que o sangue cobra toda a zona central da lmina, com uma densidade cada vez menor
medida que nos afastamos do local onde a gota foi colocada. Quanto maior for o ngulo e
quanto mais rapidamente se movimentar a lamela, mais fino o esfregao. (19)
45
Figura 9. Preparao de um esfregao sanguneo.
(19)
De seguida, passa-se fixao e colorao do esfregao, para que este possa ser
observado ao microscpio. A fixao, que melhora a qualidade do esfregao, feita com
uma soluo de metanol que se deixa actuar na preparao durante 3 minutos. De seguida
procede-se colorao, que feita com uma mistura de corantes bsicos e cidos para
permitir a visualizao de substncias como cidos nucleicos (presentes nas clulas
precursoras como os reticulcitos) ou granulaes. Primeiro utiliza-se a soluo de MayGrnwald (mistura de azul de metileno com eosina), que se deixa actuar por 2 minutos;
depois usa-se o corante de Giemsa (azure e eosina) que deve actuar durante 15 minutos.
Aps esse tempo, lava-se a lmina com uma soluo tampo e deixa-se secar a preparao.
Depois de seca, pode ento observar-se ao microscpio.
O esfregao deve comear por visualizar-se com uma objectiva de pouca ampliao
(10x) para ajudar o tcnico a avaliar a densidade de clulas e a encontrar a melhor rea
para a contagem de clulas. Quando se encontra algo de suspeito, deve passar-se para uma
objectiva de maior ampliao (40x); a anlise cuidada dos leuccitos feita com leo de
imerso e a objectiva de 100x. A contagem de clulas deve ser feita numa rea onde o
esfregao tenha uma densidade celular mdia, pois caso contrrio pode haver uma sub- ou
sobreestimao do nmero de clulas, o que pode levar a um diagnstico errado por parte
do mdico. Segundo as regras do laboratrio, devem observar-se pelo menos dez campos
da preparao e contar as clulas em cada um. Para isso, o laboratrio dispe de
contadores prprios, com botes para cada tipo de clulas, nos quais o observador deve
carregar quando observa uma clula de cada tipo (por exemplo, se ver um linfcito, deve
carregar no boto prprio dos linfcitos, e o nmero de linfcitos observado registado
no mostrador).
As fotografias a cores nas pginas 34, 35 e 36 mostram imagens de cada um dos tipos
de clulas que so mais comummente encontradas em esfregaos.
O esfregao sanguneo mais um mtodo usado em Hematologia como meio
complementar de diagnstico de eventuais doenas do sangue e das suas clulas.(19)
2.5. Anemias
Por definio, chama-se anemia a uma situao na qual o nmero de eritrcitos no
sangue est abaixo do valor de referncia. Este facto arrasta consigo tambm a
hemoglobina e o hematcrito para valores baixos.
Existem vrios tipos de anemias, e estas so classificadas com base no valor de HCM:
se for baixo, diz-se que a anemia hipocrmica; se normal, normocrmica, e se alto,
hipercrmica. A maioria das anemias so hipocrmicas e causa mais comum destas a falta
de ingesto de ferro na dieta. Nestas anemias, os eritrcitos costumam aparecer plidos,
apenas com uma zona fina de hemoglobina na superfcie, dando-lhes um aspecto de anel.
Nas anemias hipocrmicas os eritrcitos costumam aparecer pequenos (VGM baixo), e
quando isso acontece a anemia classificada como microctica. A anemia microctica
normalmente resultado de uma deficiente sntese de hemoglobina, que se pode dever
falta de ferro. A causa mais comum de falta de ferro a perda gastrointestinal atravs de
uma hemorragia. Ao princpio a anemia assim causada normocrmica mas com o tempo,
se no for resolvida, passa a hipocrmica.
Em doenas como tumores ou doenas inflamatrias ou auto-imunes grande parte do
ferro desviado da sntese de heme e por isso ocorre uma anemia secundria.
Uma forma especial de anemia hipocrmica pode ocorrer em indivduos com
contagem de eritrcitos normal e sem falta de ferro, na qual h a sntese de uma
hemoglobina alterada (HbA2) que no transporta o oxignio. Esse tipo de anemia chama-se
talassmia.
Dentro das anemias normocrmicas, a maioria costuma ocorrer por uma lise
excessiva dos eritrcitos com reduo do seu tempo de vida, sem compensao por maior
produo destas clulas: anemias hemolticas. Nestas anemias, devido tentativa de
compensao pela medula, o nmero de reticulcitos aumenta bastante.
Em doentes com sinais notveis de anemia (palidez nas mucosas, perda de sensaes)
a anemia normalmente macroctica e hipercrmica e deve-se falta de vitamina B12 e/ou
folatos, muitas vezes por diminuio da sua absoro (a vitamina B12 requer um factor, o
factor intrnseco, para ser absorvida; sem ele isso no ocorre). A forma mais comum de
anemia macroctica a anemia megaloblstica, que resulta tambm da diminuio da sntese
de cidos nucleicos (devido falta de vitamina B12 e folatos) que leva ao crescimento das
clulas em diviso, resultando num aumento das clulas precursoras e do seu tamanho.
Nos indivduos alcolicos comum existir uma anemia macroctica. (19, 21)
47
2.6. Coagulao
Quando ocorrem danos nos vasos sanguneos, tem de se prevenir a perda de grandes
quantidades de sangue para impedir a falncia dos rgos do corpo humano. A coagulao
tem um papel extremamente importante nesse processo (hemostase). O processo da
coagulao desenvolve-se por vrias fases (a cascata da coagulao) e o produto final
um cogulo estvel constitudo pela protena fibrina. A cascata da coagulao envolve
vrios factores de coagulao, muitos dos quais so enzimas sintetizadas pelo fgado e
que normalmente circulam no sangue num estado inactivo. A maioria dos factores de
coagulao so designados por numerao romana, seguindo a ordem a qual eles foram
descobertos. Os ies clcio (Ca2+) tm tambm um papel importante na coagulao, e o
uso de quelantes de clcio como o EDTA serve para inibir o processo. (22)
Vias da cascata de coagulao
O processo de coagulao divide-se em duas vias principais: intrnseca e
extrnseca. Cada uma das vias leva formao de um cogulo de fibrina, mas em
circunstncias diferentes, e as ltimas fases da cascata de coagulao so comuns s duas
vias.
A via intrnseca inicia-se quando o sangue entra em contacto com superfcies com
carga negativa e pela activao do factor XII de coagulao com uma superfcie exposta,
como o colagnio da matriz subendotelial. Por esta razo, a via intrnseca tambm
conhecida por via de activao por contacto. A activao do factor XII requer vrios
cofactores.
A via extrnseca requer a presena do factor tromboplastina tecidular (factor III ou
factor tecidular), um componente que libertado das leses dos tecidos mas que no
existe no sangue (da a via se chamar extrnseca).
Para a activao de ambas as vias de coagulao so ainda necessrios fosfolpidos.
Estas duas vias tm muitos pontos de interaco entre elas e para o processo de
hemostase ficar concludo no pode ser activada apenas uma das vias. No entanto, apesar
da forte ligao entre elas, as duas vias so estudadas em separado porque os testes
analticos sobre coagulao realizados em laboratrio avaliam as duas vias separadamente:
h o teste do tempo parcial de tromboplastina (TPP) para a via intrnseca e o
tempo de protrombina (TP) para a via extrnseca.
Na fase final do processo de coagulao, as duas vias juntam-se formando uma via
comum, que comea a seguir converso do factor X (protrombinase), inactivo, sua
forma activa Xa. O factor X activado de forma diferente na via intrnseca e na via
extrnseca. A activao do factor X leva converso da protrombina em trombina, uma
enzima que catalisa a transformao do fibrinognio em fibrina. A trombina aumenta a
actividade dos factores V e VIII, acelerando as vias de coagulao, e um forte estmulo
para as plaquetas e clulas endoteliais, ajudando-as a formar cogulos temporrios que
antecedem na hemostase a formao do cogulo de fibrina definitivo.
Figura 10. As vrias fases da coagulao do sangue.
(22)
A interaco dos factores de coagulao ocorre principalmente superfcie das

clulas endoteliais e plaquetas, e embora o sangue possa coagular sem haver contacto com
estas superfcies, as interaces entre os factores aumentam bastante a extenso das
reaces de coagulao. (22)
2.6.1. Testes analticos de coagulao
a) Tempo de protrombina
A determinao do tempo de protrombina (TP) avalia a via extrnseca da coagulao.
O TP medido em segundos e representa o tempo que uma amostra de plasma demora a
coagular na presena de tromboplastina (factor III) e de cloreto de clcio. No laboratrio
de Anlises Clnicas da FFUC, o teste efectuado num aparelho Option 4 Plus da
Biomrieux e requer a adio ao tubo de plasma de uma pequena esfera metlica para
proporcionar o contacto com o plasma, seguida de 100 L da amostra, que incubada por
49
dois minutos. Aps esse tempo, adicionam-se 200 L da mistura de tromboplastina e

cloreto de clcio, e o tempo comea a contar com a adio desta mistura.
Um TP superior a 11-13 segundos indica falta de protrombina ou outros factores que
a afectem. Para resolver o problema do uso de tromboplastinas diferentes pelos vrios
laboratrios, os resultados dos doentes so normalizados com base num valor de
referncia, o ISI (ndice de Sensibilidade Internacional) e referem-se na forma de uma razo
normalizada internacionalmente (INR, International Normalised Ratio), calculada a partir do
ISI. Quanto mais alto for o valor do INR, mais afectada est a coagulao do doente e
maior o risco de hemorragias. O resultado do teste tambm referido, para alm do
tempo e do INR, em percentagem de actividade da protrombina, que em pessoas saudveis
deve rondar os 100%.
O teste do TP uma prova de avaliao da coagulao e ao mesmo tempo uma
prova que avalia a funo heptica.
Um doente com TP/INR elevado, que toma anticoagulantes e que vai ter uma cirurgia
em breve deve ver o seu TP/INR normalizado antes da cirurgia, o que normalmente feito
com injeces de vitamina K (pr-coagulante). (22)
b) Tempo parcial de tromboplastina
Este teste, tambm chamado de tempo parcial de tromboplastina activada (TPTa),
utilizado para analisar a eficcia da via intrnseca. O TPT mede o tempo de coagulao do
plasma a partir da activao do factor XII por um reagente comercial (TriniClot PTT )
atravs da formao de um cogulo de fibrina. O teste realiza-se no mesmo aparelho do

TP, e requer uma esfera metlica para proporcionar uma superfcie de contacto, depois
adicionam-se ao tubo 100 L da amostra, incuba-se durante 5 minutos com 100 L do
reagente (que contm slica micronizada e fosfolpidos) e depois desse tempo adicionam-se
100 L de cloreto de clcio. O tempo comea a contar aquando desta adio.
O intervalo de referncia situa-se entre os 25 e os 38 segundos e se o resultado do
doente estiver fora do intervalo, devem ser feitos outros testes para identificar a origem
do problema da coagulao.
O TPT utilizado para monitorizar doentes medicados com heparina, um
anticoagulante injectvel que muito utilizado em doentes com risco de doena cardaca. A
dose de heparina deve ser aquela que mantm o TPT entre 1,5 e 2,5 vezes superior aos
valores mdios normais do doente. (22)
2.7. Velocidade de sedimentao dos eritrcitos

O teste da velocidade de sedimentao dos eritrcitos (abreviado como VS) um
teste hematolgico feito quase diariamente em laboratrio. A VS no especfica de uma
doena especfica mas utilizada como um indicador de um processo inflamatrio ou de
uma leso tecidular. A VS ainda usada para monitorizar as doenas inflamatrias e o seu
tratamento.
O teste baseia-se no princpio da sedimentao, o processo no qual partculas slidas
se acumulam no fundo de um recipiente contendo um lquido. Num tubo contendo uma
amostra de sangue total colhido com citrato trissdico na proporo de 1:4, mantida
estvel durante uma hora, os eritrcitos separam-se gradualmente do plasma e agregam-se.
A velocidade de sedimentao a velocidade qual os eritrcitos se separam do plasma e
se agregam, em condies laboratoriais controladas.
Para fazer o teste, coloca-se uma amostra de sangue total numa pipeta calibrada e
graduada em milmetros, contendo o anticoagulante citrato trissdico (o tubo contm uma
tampa preta, que identifica o anticoagulante) e insere-se nesse tubo um outro, com uma
escala calibrada, e que contm um mbolo que, ao puxar, arrasta consigo o sangue do
tubo. Deve puxar-se o mbolo at o sangue estar na posio zero do tubo calibrado, e
depois deixa-se o sangue incubado na posio vertical durante exactamente uma hora.
Aps esse tempo, mede-se a distncia (em milmetros) na qual os eritrcitos caram e se
separaram do plasma, e essa distncia a velocidade de sedimentao. (23)
Figura 11. Como medir a velocidade de sedimentao dos eritrcitos.
(23)
Factores que afectam a VS
51
a) Doenas
Em pessoas saudveis, os eritrcitos sedimentam lentamente, portanto a VS baixa.
Num indivduo com doena inflamatria, a VS elevada, em muitos casos
proporcionalmente gravidade da doena. Isto porque o aumento da concentrao de
protenas no plasma decorrente da inflamao leva a alteraes nas cargas superfcie dos
eritrcitos (que normalmente so negativas e impedem que as clulas se agreguem com as
protenas, tambm de carga negativa) que fazem com que aumente a atraco entre as
clulas, que assim sedimentam mais depressa. (ver alnea b)
Exemplos de doenas inflamatrias nas quais a VS alta so: febre reumtica, artrite
reumatide e lpus eritematoso. No entanto, de notar que este no um teste
especfico e no serve para o diagnstico de doena; mais usado para monitorizar a
doena ou o tratamento e para detectar inflamao na presena de uma leucocitose.
Outras situaes nas quais a VS pode estar elevada so a tuberculose, infeces agudas ou
crnicas, linfoma de Hodgkin, cancro e mieloma mltiplo. A anemia tambm pode
aumentar a VS sem que haja inflamao, e esta pode estar elevada em situaes fisiolgicas
como a gravidez, devido menor contagem de eritrcitos ou maior quantidade de
fibrinognio no plasma.
b) Propriedades do plasma
A VS afectada pelas protenas do plasma, porque estas influenciam a formao de
agregados de eritrcitos chamados rouleaux, nos quais as clulas se juntam, obtendo-se
formas semelhantes s de pilhas de moedas. Os rouleaux levam a um aumento da massa
efectiva dos eritrcitos e, portanto, da sua velocidade de sedimentao. Quanto maior for
a concentrao de protenas no plasma (por exemplo, fibrinognio, protenas de fase aguda
ou outras globulinas), maior a tendncia para se formarem rouleaux e maior a VS. (23)
c) Propriedades dos eritrcitos
O tamanho, forma e nmero dos eritrcitos tambm influencia o valor da VS. Clulas
macrocticas (maiores) sedimentam mais depressa que as normais ou microcticas, devido
sua maior massa.
Na anemia falciforme, na qual os eritrcitos ficam distorcidos, estes no conseguem
agregar e portanto no sedimentam ou fazem-no muito lentamente: a VS prxima de
zero. Clulas esferocticas (em forma de esfera) tambm sedimentam devagar.
Em anemias, como existem menos eritrcitos no sangue, a sua VS maior. Pelo

contrrio, na policitemia a quantidade de eritrcitos maior e isso faz com que a VS
diminua. Assim, em pessoas com VS elevada importante avaliar o hematcrito e/ou a
quantidade de eritrcitos para ver se a VS alta se deve a anemia ou a outras causas. (23)
d) Factores tcnicos
Factores como a posio do tubo, a temperatura, o tempo de sedimentao e
eventuais vibraes, bem como outros, podem ser uma fonte de erros:
- O tubo deve estar numa posio estritamente vertical; inclinaes, mesmo que
mnimas, podem aumentar o valor obtido;
- As vibraes no local do teste devem ser reduzidas ao mnimo porque estas
tambm levam ao aumento da VS;
- A temperatura da sala deve manter-se constante entre os 20 e 25C; temperaturas
baixas levam as clulas a sedimentar mais lentamente;
- O tempo de durao do teste deve ser exactamente uma hora; a VS aumenta se se
prolongar o teste;
- Devem usar-se tubos estandardizados, pois o dimetro e comprimento do tubo
afectam a VS. (23)
Outras reas
No estgio tambm tive a oportunidade de trabalhar em outras duas valncias das
Anlises Clnicas: Imunologia e Microbiologia. Nesta seco vou descrever sucintamente o
que se faz nestas reas.
A nvel da Imunologia existe uma enorme variedade de parmetros que so
analisados, desde a pesquisa de anticorpos e antignios virais, parasitrios e outros (por
exemplo, anticorpos antitiroideus) ao doseamento de hormonas, passando pela
determinao de marcadores tumorais. O laboratrio possui inmeros aparelhos e tcnicas
do mbito da Imunologia, dos quais o maior o VIDAS da Biomrieux, onde se fazem
testes imunoenzimticos com base em reaces de fluorescncia, desde a pesquisa de
material viral e parasitrio (vrus das hepatites, HIV, anticorpos da toxoplasmose,
citomegalovrus)
at
ao
doseamento
de
hormonas,
principalmente
as
sexuais
(progresterona, testosterona, estradiol entre outras) mas tambm outras, nomeadamente

as hormonas da tiride. Existem ainda outros testes no feitos no VIDAS, mas que
53
servem tambm para o diagnstico laboratorial de vrias doenas; a maioria desses testes
baseada na aglutinao antignio-anticorpo.
A nvel da Microbiologia, o trabalho mais importante feito no laboratrio foi a
inoculao de variados meios de cultura e crescimento de bactrias. A principal parte do
trabalho feito por mim nesta rea incidiu sobre a identificao bacteriana, que possui vrias
fases que incluem a realizao de uma colorao de Gram para avaliar a morfologia e a
reaco tinturial das bactrias, o teste da urina tipo II para a pesquisa de bactrias ou de
produtos do seu metabolismo na urina, e a j referida inoculao de meios de cultura. No
laboratrio s se trabalhou com meios slidos (sendo o mais importante o meio CPS3),
embora nas aulas do Mestrado tambm se tenham usado meios lquidos (caldos). Outras
tarefas da rea de Microbiologia incluem a pesquisa de sangue oculto nas fezes e a pesquisa,
usando testes prprios, de parasitas nas fezes, atravs de reaces enzimticas realizadas
em tiras prprias. Infelizmente, o laboratrio onde estagiei no muito apetrechado em
aparelhos da rea da Microbiologia e por isso esta foi a rea qual dediquei menos tempo
no estgio.
Concluso
A frequentao do Mestrado em Anlises Clnicas e a realizao de um estgio num
laboratrio da especialidade foram sem dvida fundamentais para a minha realizao
pessoal, visto que eu espero no futuro obter um emprego nesta rea. O Mestrado
permitiu-me adquirir vrios conhecimentos que depois foram aplicados no trabalho de
laboratrio durante o estgio e que me vo ser muito teis durante a vida profissional, se
conseguir, como desejo, arranjar emprego nesta rea. O estgio ajudou-me imenso a
aplicar as bases tericas das Unidades Curriculares do Mestrado e a correlacionar esses
conhecimentos entre si, ajudando-me ainda a saber interpretar e a ter esprito crtico na
altura em que se obtm um resultado laboratorial.
O estgio tambm fez com que eu ficasse consciente da enorme responsabilidade que
cai sobre os funcionrios de um laboratrio de Anlises Clnicas, sobretudo no que toca ao
cumprimento das regras da Qualidade internas e externas durante as fases de um processo
analtico.
Em suma, atravs do Mestrado e do estgio consegui atingir o principal objectivo que

tinha quando me inscrevi: adaptar-me com sucesso ao ambiente de um laboratrio de
Anlises Clnicas, quer em termos de conhecimentos tericos adquiridos quer em termos
do trabalho prtico de laboratrio.
55
Bibliografia
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2008
2. Siegenthaler, Walter, Differential Diagnosis in Internal Medicine: From Symptom to
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23. Estridge, Barbara H. et al., Basic Medical Laboratory Techniques, Cengage Learning,
2000
Anexos
57
Anexo I Valores de referncia de alguns parmetros bioqumicos e

hematolgicos
Parmetro
Bioqumica
Valor (es) de referncia

(onde
determinado)
cido rico (soro)
ALT/GPT (soro)
AST/GOT (soro)
Homens: 3,5-7,2 mg/dL

Mulheres: 2,6-6,0 mg/dL
Homens: < 45 UI/L
Mulheres: < 34 UI/L
Homens: < 35 UI/L
Mulheres: < 31 UI/L
Bilirrubina total (soro)
0,3 1,2 mg/dL
Bilirrubina directa (soro)
< 0,2 mg/dL
Clcio (soro)
8,8-10,6 mg/dL
Cloreto (soro)
98-106 mEq/L
Desejvel: < 200 mg/dL
Colesterol total (soro)
Limite elevado: 200-239 mg/dL

Elevado: > 240 mg/dL
Factor de risco elevado: < 40 mg/dL
Colesterol HDL (soro)
Factor de risco negativo: > ou = 60 mg/dL

ptimo: < 100 mg/dL
Quase ptimo: 100-129 mg/dL
Colesterol LDL (soro)
Limite superior: 130-159 mg/dL

Elevado: 160-189 mg/dL
Muito elevado: > ou = 190 mg/dL
Homens < 50 anos: 0,84-1,25 mg/dL
Creatinina (soro)
Homens > 50 anos: 0,81-1,44 mg/dL

Fosfatase alcalina (soro)
Adultos: 30120 UI/L
Fosfato (soro)
2,5-4,5 mg/dL
Gama GT (soro)
Homens: < 55 UI/L
Mulheres: < 38 UI/L

Glicose (soro)
74-106 mg/dL
HbA1C (sangue total)
4-6,2%
Magnsio (soro)
Microalbuminria
(urina das 24 horas)
Potssio (soro)
PCR (soro)
Sdio (soro)
Homens: 1,8-2,6 mg/dL

< 30 mg/dia
3,5-5,1 mEq/L
Crianas: < 1 mg/L
Adultos: < 5 mg/L
135-145 mEq/L
Desejvel: < 150 mg/dL
Triglicridos (soro)
Limite elevado: 150-199 mg/dL

Elevado: 200-499 mg/dL
Muito elevado: > ou = 500 mg/dL
Ureia (soro)
15-43 mg/dL
Hematologia
Eritrcitos (sangue total)
Homens: 4,5-5,9x1012/L
Mulheres: 4,1-5,1x1012/L
Hemoglobina (sangue total)
Homens: 14-17,5 g/dL

Mulheres: 12-15,3 g/dL
Hematcrito (sangue total)
Homens: 0,42-0,50 L/L

Mulheres: 0,35-0,45 L/L
VGM (sangue total)
Adultos: 80-96 fL
HCM (sangue total)
Adultos: 27-33 pg
CHCM (sangue total)
Adultos: 30-35 g/dL
Leuccitos (sangue total)
Adultos: 4,0-11,0x109/L
Neutrfilos
Adultos: 40-75% (2,0-7,0x109/L)
Linfcitos
Adultos: 20-45% (1,0-3,0x109/L)
Moncitos
Adultos: 2-10% (0,2-1,0x109/L)
Eosinfilos
Adultos: 1-6% (0,02-0,5x109/L)
Basfilos
Adultos: < 1% (0,02-0,1x109/L)
Plaquetas (sangue total)
Adultos: 150-400x109/L
Tempo de protrombina (plasma)
Amostra: 11-14 segundos

59
% de actividade: 70-120%
Tempo parcial de tromboplastina 22,6-35 segundos

(plasma)
INR: 0,9 a 1,2
Anexo II Requisio mdica para Anlises Clnicas
Anexo III Folha de resultados de Bioqumica

61
Anexo IV Folha de resultados de um proteinograma

Anexo V Folha de resultados de um hemograma

63

Relatório Nuno Silva

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Relatrio de Estgio Curricular no mbito do Mestrado em Anlises Clnicas, orientado pela

Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012

Nuno Miguel Simes da Silva

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Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012

Nuno Miguel Simes da Silva

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4 Nuno Miguel Simes da Silva

Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012

Alanina aminotransferase/transaminase glutamo-oxaloactica

Aspartato aminotransferase/transaminase glutamo-pirvica

Concentrao da hemoglobina corpuscular mdia

Depurao da creatinina endgena

Hemoglobina glicosilada, fraco A1c

Hemoglobina corpuscular mdia

Lipoprotena de alta densidade

Vrus da imunodeficincia humana

Lipoprotena de densidade intermdia

International Normalised Ratio (coagulao)

ndice de Sensibilidade Internacional

Lipoprotena de baixa densidade

Prova de tolerncia glicose oral

Nuno Miguel Simes da Silva

Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012

Red cell distribution width (distribuio do volume dos eritrcitos)

Taxa de filtrao glomerular

Tempo parcial de tromboplastina

Volume globular mdio

Lipoprotena de muito baixa densidade

Velocidade de sedimentao (dos eritrcitos)

6 Nuno Miguel Simes da Silva

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Nuno Miguel Simes da Silva

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8 Nuno Miguel Simes da Silva

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Nuno Miguel Simes da Silva

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estabelecidos. importante avaliar com periodicidade o estado dos calibradores, reagentes,

Relatrio de Estgio Mestrado em Anlises Clnicas 2011/2012

O aparelho para as anlises de Bioqumica (IZASA AU 400), como a glicemia, a

O ionograma (Spotlyte Na/K/Cl Analyzer), onde so determinadas as concentraes

O VIDAS, da Biomrieux, um aparelho com duas unidades onde so realizados os

O aparelho para hemogramas (Coulter, da MaxM), onde feita a contagem de clulas

O aparelho para proteinogramas (Helena SAS-1 Plus e SAS-2), onde se faz a

O aparelho para avaliao da coagulao (Option 4 Plus, da Biomrieux), onde se

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