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1. Introduccin:
La membrana celular tiene funciones vitales, como es el transporte y la regulacin de
las molculas que entran y sales de la clula y de los organelos (Singleton 1999).
Adems de que acta como separacin de la clula por medio de sus barreras para
formar compartimientos intracelulares, y mantener un estado saludable de la clula.
Tambin son semipermeables, esto significa que la membrana impide el paso de algunas
sustancias a la clula e impide otras (Guyton 1989). Por ello son muy importantes para
el funcionamiento de la vida y que la clula pueda mantener su equilibrio. Las cuatro
manifestaciones de actividad molecular que estudiaremos en este laboratorio son: el
moviendo Browniano, difusin, smosis y permeabilidad. El movimiento Browniano se
refiere al descubrimiento que tuvo Robert Brown en 1827, donde observo que las
partculas que existen en el ambiente se mueven en distintas direcciones. De estas
observaciones, l y varios cientficos, pudieron llegar a la conclusin de que estas se
mueven espontneamente, tienen mayor movimiento al ser ms pequeas y al aumentar
su temperatura (Vicencio, 2015). Por ello el movimiento Browniano ayuda a mantener
las partculas coloidales suspendidas dentro de la clula, evitando que stas no
precipiten, sin embargo, estas partculas no pueden quedarse suspendidas solamente por
esta fuerza (Riera, et.al. 2013). La difusin es el movimiento de las partculas a favor
de la gradiente de concentracin a travs de una membrana permeable. La difusin no
requiere gasto de energa por parte de la clula y por lo tanto en un movimiento pasivo,
pero si se requiere energa en forma de ATP, sera un movimiento activo (Riera,
el.al.2013). En tanto, la smosis es la transferencia del agua a favor del gradiente de
concentracin a travs de una membrana semipermeable (Riera, et.al. 2014).
Objetivos:
2. Materiales:
Ejercicio #1: Movimiento Browniano
Parte a)
Parte b)
Permanganato de potasio.
3 probetas.
Papa.
Estilete.
Sacabocados.
Caja Petri.
Sal de mesa.
Agua destilada.
Zanahoria.
Estilete.
Sacabocados.
Vaso de precipitacin.
Glicerina.
Agua destilada.
2 alfileres.
Osmmetro.
Agua destilada.
Membrana.
Safranina.
Sacarosa.
2.1.
Procedimientos:
Ejercicio #1
Parte a)
Se coloc sobre un portaobjetos una gota de la solucin con las hojas molidas y
hervidas y una gota de solucin de hojas molidas crudas, ambas separadas y cubiertas
con un cubreobjetos cada una. Ya preparadas las placas, se lo llevo al microscopio para
observarlo.
Parte b)
Sobre otro porta objetos se hizo la misma preparacin pero esta vez se adicion una
mnima cantidad de tinta china para que la muestra, tanto de las hojas hervidas como de
las crudas, tomen un aspecto turbio. Una vez preparadas las placas, se procedi con la
observacin en el microscopio.
Ejercicio #2
Parte a)
Se colocaron cristales de permanganato de potasio sobre la superficie de la gelatina
contenida en la caja petri. Separado del permanganato de potasio se colocaron cristales
de azul de metileno. Una vez preparado esto, se expuso a observacin cada 20 minutos
para encontrar los cambios generados por efecto de la difusin de las sustancias.
Parte b)
Se colocaron tres probetas, cada una con permanganato de potasio en diferente cantidad.
Se examin cada veinte minutos la difusin que presentaba la sustancia.
Ejercicio #3
Parte a)
Se tom la zanahoria y se procedi a rebanar sus extremos con cortes transversales.
Luego se le extrajo su epidermis con sumo cuidado. Con el sacabocados se hizo un
hueco dentro de la zanahoria formando una cavidad de aproximadamente 3 cm de
profundidad. Se marc con los alfileres al interior y al exterior de la zanahoria a la
misma altura. Una vez hecho esto, se introdujo la zanahoria en un vaso de precipitacin
y se lo llen con agua destilada hasta la marca del alfiler externo. La parte de adentro de
la zanahoria se la llen con glicerina igualmente hasta la marca. Finalmente se someti
a observacin cada veinte minutos y tambin al da siguiente.
Parte b)
Se realiz un corte longitudinal a la papa para colocarla sobre una caja Petri. Con ayuda
del sacabocados se hizo una pequea concavidad sobre la superficie de la papa. Se llen
con agua destilada la caja Petri y dentro de la concavidad se puso media cucharadita de
sal de mesa. Se someti a observacin cada 20 minutos durante la prctica y tambin al
da siguiente.
Parte c)
Se coloc un osmmetro en un recipiente con agua destilada y safranina para darle
color, en la base del osmmetro se encontraba una membrana orgnica. Se observ cada
30 minutos, analizando el nivel del agua destilada en el osmmetro.
Ejercicio #4
En dos tinas, una con agua dulce y otra con agua salada, se colocaron distintos tipos de
vegetales en ambas soluciones, se introdujo la mano en ambos recipientes para palpar la
superficie de los vegetales y establecer las respectivas comparaciones.
Ejercicio #5
Parte a)
Se procedi con la extraccin de la gota de sangre de la especie Homo Sapiens todava
viva. Antes, se desinfect con el algodn en alcohol la regin del dedo donde se iba a
realizar el pinchazo. Inmediatamente se pinch el dedo del espcimen con la lanceta. Al
brotar la gota sangre a la superficie del dedo se la distribuye en tres placas portaobjetos.
A cada una de estas placas se les adicion una gota de solucin hipotnica, isotnica e
hipertnica respectivamente y se cubri con el cubreobjetos. Finalmente se llev las
placas a observacin en el microscopio.
Parte b)
Se disponen tres hojas de Elodea en tres placas portaobjetos diferentes. A cada una se le
aplica una solucin diferente: hipotnica, isotnica e hipertnica. Se colocan los
cubreobjetos y se observan los cambios que presentan en el microscopio.
3. Resultados
Ejercicio #1: Movimiento Browniano
Descripcin del grfico: En el grafico anterior se muestra, la tinta china con agua.
Discusin: Aunque a simple vista no se lo puede apreciar, a nivel microscpico las
muestras presentaron un movimiento aleatorio en las partculas que contenan. El
movimiento ms agitado se dio en la muestra de las hojas crudas, este era
descoordinado y se notaban choques entre las partculas. En menor medida fue la
muestra de las hojas hervidas donde el Grfico 1 Grfico 2 movimiento era ms
calmado, con menos energa que la muestra anterior, pero aun as, era aleatorio y
chocante. En la tinta china se not un movimiento mucho ms homogneo, ms
coordinado y con una tendencia a fluir hacia una sola direccin. La energa contenida en
cada una de las muestras determin la manera en que se movan.
Ejercicio #2 Difusin
Parte a)
Tabla# 1
Difusiones de cristales de permanganato de potasio y azul de metileno en la
gelatina
Tiempo
9
12
14
15
17
Permanganato de potasio
(mm)
5
7
8
8
10
Chart Title
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
20 min
40 min
60 min
Azul de metileno
80 min
1 dia
Columna1
Parte b)
Tabla #2
Difusin de los cristales de permanganato de potasio en las probetas
Probetas
Tiempo (min)
A
20
23%
40
25%
60
26%
Fuente: Laboratorio de Biologa USQF.
B
60%
63%
64%
C
25%
27%
29%
Grafico #5
Chart Title
70
60
50
40
30
20
10
0
%3
%2
%
20 min
40 min
%
60 min
%2
%3
Grafico #6:
smosis de la zanahoria
Decsenso (ml)
25
20
15
10
5
0
20 min
40 min
60 min
1 dia
Decsenso (ml)
Parte b)
Tabla #5
smosis de la papa
Tiempo (min)
20
40
60
960
Fuente: Laboratorio de Biologa USFQ.
smosis de la papa
Chart Title
12
10
8
6
4
2
0
20 min
40 min
60 min
960 min
Columna2
Parte c)
Tabla #6
Osmmetro
Tiempo (min)
15
30
45
60
Vegetales recipientes A y B
40X
40X
400X
400X
Parte b)
Grafico #9
Discusin de la tabla: Este grfico representa los diferentes estados de las hojas de
elodea en condiciones hipertnicas e isotnicas, adems de un grfico que representa las
cualidades de la hoja de elodea despus de haber sido restituida.
Anlisis de resultados: En condiciones hipotnicas las clulas de elodea tienen un
aspecto cuadrado algo hinchado, dentro de ellas es abundante la presencia de
cloroplastos pegados la pared celular y el espacio en el centro de las clulas corresponde
a la vacuola. Cuando se las somete a condiciones hipertnicas, los cloroplastos se
agrupan en distintas formas tendiendo hacia el centro de la clula y la vacuola se
encogi. Probablemente, la membrana celular se despeg de la pared debido a una
plasmlisis. Por la misma razn, las clulas adquieren una forma retorcida. Al intentar
someterlas de nuevo a un medio hipotnico no regresa a su estado normal, los
cloroplastos permanecen agrupados hacia el centro de la clula.
Parte c)
Grafico #10
4. Conclusiones:
Ejercicio #1
Pude observar el movimiento aleatorio de las molculas sobre distintas muestras.
Comprob mi hiptesis nula puesto que movimiento browniano se da en cualquier tipo
de partculas dispersadas en un agente dispersor como el agua en este cao. Se concluye
que el movimiento presentado en cada una de las muestras es debido al movimiento
aleatorio de las partculas que hace que las molculas de agua estn en constante
colisin con las partculas de la muestra. Este movimiento tambin depende de la
energa trmica, el tipo de sustancia que se est observando y cmo est diluido en el
agua.
Ejercicio #2
Pude analizar la difusin de dos tipos diferentes de sustancias en cuanto a sus
caractersticas. Comprob mi hiptesis alternativa puesto que la sustancia con menor
peso molecular tuvo una mayor difusin que la de mayor peso molecular. Se concluye
que una sustancia de menor peso molecular (como el permanganato de potasio) se va a
difundir ms rpido que una de mayor peso molecular (como el azul de metileno). En
otras palabras, la tasa de difusin es inversamente proporcional al peso molecular.
Ejercicio #3
Pude verificar el proceso de la smosis y la forma en que acta en ciertos vegetales.
Comprob mi hiptesis alternativa puesto que el paso de agua se dio por efecto de la
diferencia de concentraciones a ambos lados de los vegetales. Se concluye que el agua
va a tender a difundir hacia el medio con mayor concentracin de soluto, tal como pas
con la zanahoria donde el agua se difundi hacia la glicerina, y la papa, donde el agua se
difundi hacia la sal.
Ejercicio #4
Pude examinar la forma en que medios isotnicos, hipertnicos e hipotnicos afectan
las caractersticas fsicas de clulas vegetales y animales y cmo reaccionan las clulas
frente a estos medios. Comprob mi hiptesis alternativa puesto que la turgencia de una
clula obedece a un medio hipotnico mientras que la plasmlisis ocurre en un medio
hipotnico. Se concluye que las clulas se ven afectadas por el medio en el que se
encuentran debido a la smosis. En un medio hipertnico las clulas pierden agua, en un
hipotnico, las clulas absorben agua.