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REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

INSTITUT NATIONAL DE FORMATION SUPERIEURE PARAMEDICALE


CONSTANTINE

BIOCHIMIE DES ET
AMINOACIDOPATHIES

PAR DR H.BOUMECHRA
Anne universitaire : 2014-2015
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PLAN DU COURS

I.
II.
III.
IV.

V.

VI.

INTRODUCTION.
RAPPEL SUR LES ACIDES AMINES.
AMINOACIDOPATHIES.
ETUDE DE QLQ AMINOACIDOPATHIES
1. LIEES AUX AA AROMATIQUES.
1.1. HYPERPHENYLALANINEMIES.
1.2. TYROSINEMIES
1.3. ANOMALIES DU METABOLISME DE Trp.
2. LIEES AUX AA BRANCHES.
3. LIEES AUX AA SOUFRES.
EXPLORATION ET DIAGNOSTIC DES AAPATHIES
1. CONDITIONS DE PRELEVEMENT.
2. TESTS DORIENTATION.
3. DOSAGE DES AA.
4. DOSAGE DE LACTIVITE ENZYMATIQUE.
5. DIAGNOSTIC MOLECULAIRE.
CONCLUSION.

I. INTRODUCTION
Depuis plusieurs dcennies, les maladies hrditaires du mtabolisme ont acquis une place de plus
en plus importante dans la pathologie pdiatrique et ftale.
Elles sont dues des mutations des gnes codant pour des protines impliques dans les voies
mtaboliques (enzymes, protines de structure ou de transport).Ceci induit des taux anormaux des
mtabolites et lapparition des signes cliniques. Parmi ces diverses maladies hrditaires ; les
aminoacidopathies.
II. RAPPEL SUR LES ACIDES AMINES
1.
Structure
Les AA, units monomriques des protines, sont des acides alpha-amins qui possdent :
 Une fonction acide carboxylique COOH.
 Une fonction amine primaire NH.
 Un radical R : partie variable.
Il existe 20AA, appels AA naturels ou standards, qui forment les diffrentes protines connues, ils
sont cods par lADN et incorpors dans la protine lors de la traduction.
2.
Classification
Les AA sont classs en fonction de la nature de la chaine latrale en 7 groupes :
 AA aliphatiques : Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Sr, Thr, Cys, Met.
 AA aromatiques : Ph, Trp, Tyr.
 AA soufrs : Cys, Met.
 AA hydroxyls : Sr, Thr.
 AA dicarboxyliques et leurs amines (acides): Glu, Asp, Gln, Asn.
 Acide alpha-imin : Pro.
 AA diamines (basiques) : Arg, Lys, His.
3.
Mtabolisme
Le mtabolisme des AA comprend :
 Catabolisme : qui a lieu en deux temps :
1. Enlvement de lazote amin et son limination sous la forme dure et de NH.
2. Catabolisme du radical carbon.
 Synthse :
1. 8 AA sont indispensables et doivent tre apports par lalimentation : Leu, Thr, Met, Val, Ile,
Lys, Ph et Trp (le(Leu) trs(Thr) lyrique(Lys) Tristan(Trp) fait(Phe) vachement(Val)
mditer(Met) Iseut(Ile)).
2. Les 12 autres AA peuvent tre synthtiss chez lhomme partir de certains AA
indispensables ou partir des intermdiaires mtaboliques.
III. AMINOACIDOPATHIES
Dfinition :
Groupe derreurs innes du mtabolisme des AA lies une anomalie biochimique gntiquement
dtermine. Ces sont des affections rares, transmises le plus souvent selon le mode autosomique
rcessif et qui peuvent tre classes en deux grandes classes :

1. AApathies par anomalie de transport membranaire : atteignant les membranes rnales,


hpatiques, enterocytaires ou intracellulaires (lysosomes et mitochondries).
2. AApathies par enzymopathies : dficit enzymatique touchant une tape du catabolisme. En
fonction de la localisation de lenzyme applique, lAApathie se traduit par laccumulation des
AA et /ou des intermdiaires mtaboliques.
Les symptmes cliniques sont dus aux effets toxiques de lAA ou des intermdiaires mtaboliques
accumuls dans le plasma ou encore un dfaut dpuration dune substance toxique : NH.
IV. ETUDE DE QUELQUES AMINOACIDOPATHIES
a. AA aromatiques
Plusieurs pathologies, qui touchent les trois AA(Ph, Tyr et Trp),les hyperphnylalaninmies sont
les aminoacidopathies les plus frquentes.
a.1. Les hyperphnylalaninemies
 Phnylctonurie classique(PCU)
AApathie, entrainant laccumulation de Ph dans le plasma et le cerveau, due un dficit dune
enzyme hpatique : phnylalanine hydroxylase, qui catalyse la transformation de la phnylalanine en
tyrosine.
Physiopathologie

Clinique
Les premiers signes napparaissent qu 3-4
3 mois aprs la naissance :
 Encphalopathie grave, toujours rversible.
 Retard mental svre irrversible.
 Troubles du comportement : pilepsie, psychoses, hyperactivit, autisme,
schizophrnie.etc.
 Hypopigmentation globale : yeux clairs, peau pale, cheveux blonds.
 Odeur caractristique des urines : odeur de souris.
Biologie
 Taux de Ph 200mg/l (VN : < 40mg/l).
 Excrtion excessive dacide phnylpyruvique et ses drivs dans les urines.
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Traitement
Un rgime exempt de Ph entrepris temps permet dviter les signes neurologiques.
 Hyperphnylalaninemie atypique.
 Hyperphnylalaninemie nonatale.
 Hyperphnylalaninemie maligne.
a.2. Anomalies du mtabolisme de Trp
 Maladie dHARTNUP.
 Maladie de langes bleus.
 Tryptophanurie congnitale.
a.3. Tyrosinmies

b. AA branchs
La valine, leucine et isoleucine sont des acides amins essentiels dits branchs car ils possdent un
radical R ramifi. Leur catabolisme se distingue du reste des acides amins par sa localisation extra
hpatique.
Plusieurs dficits enzymatiques peuvent toucher cette voie, donnant lieu des maladies
mtaboliques dont la plus connue est la leucinose.
LEUCINOSE : Maladie des urines a sirop drable
Anomalie du catabolisme des AA branchs, due un dficit en BCKDH (dshydrogenase des acides
alpha- ctoniques branchs), qui aura comme consquences :
 Accumulation de Val, Leu et Ile.
 Apparition de lallo-isoleucine,
isoleucine, diastroisomre de la leucine, dans le sang et les urines :
pathognomonique de la leucinose.
Clinique
Elle se manifeste sous deux formes :
 Forme svre : encphalopathie nonatale progressive, lthargie, somnolence, dme
crbral, coma et dcs..
 Forme modre : retard psychomoteur, atteinte neurologique, dcompensation acidoacido
basique.
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Biologie
Sujet normal
10 -50mg/L
15 - 50mg /L
5- 30mg/l

leucinose
260mg /L
80 100mg/l
30 70mg/l

Leucine
Valine
Isoleucine
Traitement
 Rgime dpourvu en AA branchs.
 Insulinothrapie, hmofiltration et dialyse pritonale.
c. AA soufrs
Le groupe des AA soufrs, form par la Met, Cys, Hcy et taurine, se distingue des autres AA par leurs
caractristiques structurales et mtaboliques.
Des erreurs innes de ce mtabolisme sont nombreuses et bien identifies. Les plus frquents sont :

 Homocystinurie classique
Maladie hrditaire due un dficit en cystathionine B- synthase.
Clinique: aspect marfanoide, thrombose, luxation de cristallin, dformation squelettique et
ostoporose.
Biologie : - Augmentation de lhomocystine sanguine et urinaire.
- Hypermthioninmie.
Traitement : apport en vitamines B6 ; B9 et B12.
 Homocystinurie sans acidurie mthyl malonique
Maladie hrditaire due un dficit en mthionine synthase.
Clinique : vomissements, retard de croissance staturo-pondral et du dveloppement psychomoteur.
Biologie : - Augmentation de lhomocystine sanguine et urinaire.
- Mthionine normale ou basse.
- Absence dacidurie mthyl- malonique.
Traitement : administration en IM puis peros de lOH Cobalamine.
 Homocystinurie variant
Maladie hrditaire due un dficit en MTHF Rductase.
Clinique : retard mental, psychose, microcphalie, thrombose, convulsion.
Biologie : - Augmentation de lhomocystine sanguine et urinaire.
- Hypomthioninmie.
- Diminution du MTHF plasmatique et urinaire.
Traitement : apport forte dose de btaine avec supplmentation en Met, B12, B9 et PLP.
 Acadmie mthyl malonique Homocystinurie
 Cystinose
V. Exploration et diagnostic des AApathies
1. Conditions de prlvement
 Prlvement sanguin de prfrence sur tube hparin.
 Jeun de 12H doit tre observ. Pour le nourrisson, il doit tre effectu loin possible de la prise
de biberon.
 Le prlvement doit tre rapidement centrifug et conserv par conglation.
 Les analyses urinaires seffectuent sur des urines de 24H et rendues en fonction de la
cratinine.
2. Tests dorientation
Ces tests permettent un dpistage rapide. Ils sont raliss sur des urines matinales fraiches.
== Odeur des urines
 Odeur de souris : PCU.
 Odeur de sirop drable : LEUCINOSE.
 Odeur de choux bouilli : Tyrosinmie de type 1.
== Ractions chimiques :
La plus utilise est la raction de PHENISTIX : test au FeCl qui dtecte les acides alpha-ctoniques.
- Coloration vert fugace : PCU ou TYROSINEMIES
- Coloration bleue : LEUCINOSE.

3. Dosage des AA
 Dosage quantitatif par HPLC
LHPLC sur rsine changeuse dions, mthode de rfrence, permet la sparation et le dosage des AA
lus par coloration avec la Ninhydrine chaud en sortie de la colonne et lecture
spectrophotomtriques 570nm pour tous les AA sauf la proline et lhydroxyproline pour lesquels on
effectue une lecture 440nm.
 Dosage spcifiques
== phnylalanine
 Mthode de Mccaman et Robin : Cette mthode est base sur la formation dun compos
fluorescent lorsqu'on chauffe la Ph Ph 5.8 en prsence de Ninhydrine et dun dipeptide
(L-leu-Ala) :
Ph + NINHYDRINE ====== HYDRINDANTIN + CO+ PHENYLACETALDEHYDE+ NH.
PHENYLACETALDEHYDE + L Leu-Ala ====== BASE DE SCHIFF +HO.
BASE DE SCHIFF + NINHYDRINE====== 5-(O-CARBOXYPHENYL)-5-HYDROXY-3-phnyl-1(LEYCYL-ALANINE)-2-PYRROLINE-4-ONE**+ HO.

 Mthode la Quantase : mthode enzymatique la phnylalanine dshydrognase.


== Tyrosine
Tyr + a- nitrosonaphtol + nitrites ===== coloration jaune.
4. Dosage de lactivit enzymatique
 La recherche dun dfaut de lactivit enzymatique permet de confirmer le diagnostic.
 Effectu sur fibroblastes, leucocytes, biopsie hpatique.
5. Diagnostic molculaire
Lanalyse gntique prend de plus en plus dimportance, par lidentification des mutations et la
confirmation de diagnostic.
Exemple : plus de 500 mutations dcrites pour le gne de la phnylalanine hydroxylase, situ sur le
chromosome 12.
VI. Conclusion
Les aminoacidopathies, erreurs innes du mtabolisme, font partie des maladies orphelines, souvent
graves et dltres.
Un diagnostic prcoce et linstauration dun traitement sont ncessaires pour une vie quasi- normale.