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    TNSPITUTO DEL WR DEL FERU Proyecto yultinacional de Ciencias del Mar omA-TMARPE nproductivided de las aguas costeras frente al Ferd # 18 QUINTCOS Y DE PRODUCTIVIDSD BN EL AGUA DE MAR primera Parte oscar Guillén y Raquel I. de Rondén La Punta, 1975 Line = pert AUALTSYS QUTIGCOS Y TE PRODUCTIVEDAD EN EL AGUA DB KAR Prinera parte por oscar Guillén y Raquel r. de Ronéén (Tastétuto del var y Proyecto multineefonel de ciencias del Mar OBA) rerBgDugcroN Los autores del texto presentan 1a deseripesén de los sétotos usa = os en el Institute del war, asi cono también sua conentar:os, Los cuales estén basados en las experiencias de trabajo. ‘sta recopilaciéa he sido preparada « padido de los becaries del Proyecto yultinacional de e O01, de "Produetivided de las iguas coz texas frente al peru” y de loa estudiantes universitarios, para que sizva de gufa practia on los estudios de oveancgrafia quinioe y Productividad. ‘BEPERMINACTON DE LA SALINTDAD Bn Jos estudios coancgréfiecs os de gran importancia 1a determinacin do 1a clorinidad. £1 conosiniento de ealinidad es inpreseindible para 1a detersinacién de Ine corrientes submarinas, trawwzorte 6 sdentifion ci6n de sagas de agua y para 1a trasmieisn del sonido debajo del agua. lis concentracin del elore casi siempre constante, on relacién con Las concentraciones de los mayores constituyentes del agua de mar. uonrwrpaD a clorinidad del agua de sar (C1*/,, hhe sido definida com 0.3285254 ‘veces el peso de 1a plata preoipitade couo haluro de plata deade 1 ki- Lograno de agua de sar, (Todas ins peeadas han sido hechas en el va~ fo) = 0.3235254 Bota 06: 18 moderna defirioisa ce 1a clorinidad, hecha por Jacobaen y Knudsen en 1940. La diferencia con las anteriores defi nicionee se debe a que los pesos atémicos acoptades de} cloro y de 1a plata han venido sufriends variseion SALTNTDAD Ususimente se expresa el contenido de sal del egua de mar como ealini- aaa 8 °/, fen vaefo, de loa sélidos obtenidos de 1 kilograno de agua de mar cuando os s6lidoe han aido § esta es una convenoién a cus) aproxina al peso en granos, eados a pesc constants a 400°C, 1a materia org nica coupletanente oxidada, ¢1 broao y yodo reemplazada por una equivar Lente cantidsd de cloro y todos lor oarbonatos convertidos en Zxidos. iss sguas ocednioss contienen otrar sales (haldgenoa, earbonatos y bi - carbonates), las cuales son expressdes por ou valor de aalinidad. Bn le prdotica, le salinided os definida on términos de olorinidas por a eouaoién de Knudsen: 8*/,, = 04050 + 1.8050 02 a ouoRosrpa Bate valor Cl/tc4) e8 1a cantided deterninade por métodos volunétricos y 00 definide on la ntens forse que la clorinidad, excepto que La unt~ aad de mus 2000 a) re de ngua do mar a uns dotersinada ten s=nbures Batudioe relacionados con 1a determinsoién de 1a salinidad han aldo rep, Laados en 1959 por los doctores + P, Hermanns K. Kallo, Fs Koouy, We Manioon y Ps Tohernta, quienes recosendarén lo sigutenter HL aétods de rutina mira ln detersinacién do 1a salinidad abe cor simple, répido y exoto. Desde ol punto do vista de cimplicidad y ro pidez, ol método de Mohr-Keudson eo el nfs conventento y da una oznoti tad do 4 0.02 */,, 8. BL Andioader de eromato del nétodo Mohr-Knutson puode ser reemplazato por ol flusrosetanate de sodio con un ligero ineremato en aa uxe~ situa. El nétodo de Mohr-tnudsen puede ser aodifioads pera inoresentar la « Locidac, sin pérdide de exactitud, usando un agitator magnético. Bn algunce atoratorios estén usando aétotos potenclométricos para fa- ollitar 1 deteccién del punto final, 108 cuales tienon 1a ventaja de Anorenentar la precisiéa, EL método potencioadtrico os usade en traba Joe no rutinartos. Ts oeflorita Saruhasht (1953) en Japén ba desarrollado un micro xétode enploando como indieador el fluoroveianato de aotio, ol cus) solamente requiere 1/10 de 1a cantidad de muestra y reactive del nétodo de Mobr~ Knudsen, Bete aétodo es rapido y exacto. Le deaventaja de este zioro dtodo 9 que origina maycres errores volunétrizos. Hian sido deserzolladce dives sos nétodos pare 1a determinsoién de 1a ea Linidad: por medio-to-le-densidad, por-medio de la vondactividad elée- oa y por a7 del dnd’ s0 de rafeases6n; Thomas, Thompson y Utter- bork (1934) sotinarda 2 cusimtaed usando la relaciéa eonductiviged — ctowinsdad, veondy wn pent: de Shenstone Tae moasingetén en ol pue Snhletehas y Fradohay en el Inabitnto de Oceanogratte ee Woods Kole, ha bAGndowe odtendo wis exactitud del 9.909%/,, 8 y tua velocidad do 20 6 do Tonses ha aide tntrodueida an 1956 yor aovereiuaciones ver hora, roma 7 anon (396°) @aeetiaxon calinfweten inductive para meétr la palinide Gol ogc co mar, o} cual Srene une cxaatitud de 0.00 */,. + arroximutenenic. He un dnet-vuento ro-teble y no zequiere de un oon trol de texporature pare Ine muericas. Un grape Ao etents tices con dos pew Cox del N.T.0. reoxasinarén Ino polaciones extee oterintead-toassént y deasidad-conductivisen. Cor + Catktn, Greamaaigh y Riley (2962) mec tenc6n una muy uniforse selactén entve 1a Sonsidad 0 y la 028 vided y mucho mas inctorto en La relaciés anton Ww imiatdedeelorinsied, Be 1966 tuorea publtcedes por hoa onator ce detinieiéa 6e la selinidad conc: 1.0+ y UNESCO lap tablaa oveanognétton, yatsener on (2) 2 1.80655 an fae e4Gn salinitad-oondustividad fu6 hallada empleando una gren ve claién on te dete 16n de conduett-= vided © 15°C, uanndo ademfe agua noraal de Copenhagu. Deapads de convertir los valores de clorinidad en salinidad urando le singoien de le olorinidad y de 1a eovaexén (2) 26 2 tivided 9 15°C + 8 fableoié le relaciéa entre Ia galinided y 1a oongue- 0.00996 + aa,2972mRyg + 12,00032R%5- @) ro,ste6mn}, + s,oa6om, - 2.323182, ta eouacién (3) e8 Ia ditina definietén de 1a salinided, bessda on le nodida de 1a conduotivided 20n respecto al agus normal de Copenhague. Bl n6todo conductoaétrice cotd Libre do errores volunétricos y parece ser relativamente répido y 1e foil manejo on ol mar y on el Labora! rho. Un salinénotro puede ser éufinido cono un instrunento que deteraina Je walinided del agua de rar, mediante 1a medioién de alguna propie - and del agus, 1a que tone relaoién constants con 1s cloriniéad. Comunzente 1a proptodad uedida eo le conductividad eléotrica, Reotentes avancce on le eatinseién de lo calinidad ban side tratados fen forma saplia y detallada yer Johnaton (1964). Para 1a determinacién de 1a salinidad en el agua de mar 90 describe a continuacién doe métodos: A) Volunétrico de Wohr-Knudoen, mdiftondo y 8) Ueando ealinésetro. A) M@nopo voLMmRTco Ds MoMR-RUDSEN ‘Powpaueno os hal6genos en ol agua de mar gon detersinados por title ein con nitrato de plata, usando cono indieador el cromato ae potactor a cnt + ane" €252222 4g,600, Jia soluctén de nitrate de plate debe ser standarizala con agua do mar normal, de conooida cloriniaad y obtenida dol 1g oratorio Hidrogrético de Copenhegue. 2s= EQUIPO Y APARAOS ESPEOTALES Son necesarion: 1) Zotellas da vidréo de 500 mh. 2) Plpetso y turetas autoaticas tipo Knudsen 3) Agitader magnétieo con ous reepectives dmfnes recubtertos de matertal pléstieo. 4) Yass de viarto de 100 =). Pes Burotas y plpetae eutoaéticns Knudsen 8 wma ppete y una bars rogulere yara haver le determinacién de le salintdad tongtica Knudsen. a plpeta awiondties es de wi volisen de 15 ml, y dete aer calibra ae ans:e do wares, Adonds lo mtona pApete debe usaree para ‘ne: un semis de deterasracton ba Lovet Knudsen es us Instrumente my delesdo y de consiicotée compisoads, Beté calibpada en dobles mili- Litres, ce deotr que un valor de 19.00 al. correoponde a juna ontregs de 38 al. de aoluoién. Estas turetaa no son abeolutanente aznotus s+ ous fabsSoantes dan loa corres - pondiontes certificades Ue eorreces én. + 0A DE MUESTRA Y SU AAMC AWr3N0 So tona Is muestra on uns botolla de 500 al., Lavindole previa, onto por lo mnos 3 veces, ifunoa deben Llenaree totalmente tee botellas porgue en verano pueden reventar. as botellas 42 von sex bien tayadas y guardaias en ous respeotiras oajas- Cuando estas botellas o Ise do agua morsel eean waades para Le Geterminscién do 1a oalinidad, dete teneree on cuenta yue ad - choo andlieie deben roalizarse en un theapo no mayor de 1 hora Aguslnonte deben eer tapedae entre titulactén y ttulactén. += REAGEIVOS Son los siguientes: 4.1. Soluotén Se pesa 8.0 yranoo de F,0r0, qufsicanente puro luego se ALouelve en 100 ml. de agua destilads. 4.2. Soluessn de trate de Plets Se pace 37-12 granos Ce Agog y ee Aisuelve en un Litre io ayva Aeetilada, e¢ reconienda para lograr més emctos reeultator propsrer 1s solucisn de Nitrato de Plata en can'séatne de 10 litzoa. Iie colusidn dobe ver bien mex, sia y guardada on Yotulla ovoure. 45. Agee de Mar vorn Ia clorinidad del agua do Mar Normal ha efdo deteratn as con gran evactiiud y es jwotvcida énicamente por 1a ascoiactén de Coeanograsta Pfsies, Depésito de Agua Nor, ant 2e Charlo%tenlund, Dinamarea. Cada anpolls de agua noreal oontiene aproximadamente 200 ml. y estén rotule ane indicando eu clovinidad con 3 decimales. Puede usarse ol agus de mar cubnormal en lugar del agua de nar normal por av costo elevado de éeta, FROCEDIITENTO ae Se tons 15.0 a. de 1s suestra con 1a pipeta automdtios, previamonte enjuagade dos veces con 1a atone suestra y a2 vaca a un vaso de 100 al. on cuyo interior se ha co Lovado previauente un ian recubierto de material plés- theo Se agreg 6 gotas del indicator de cromate de potasio. Se coloca sobre el agitador magnético el vaso contenien 4o ol ind revestide de material pléstico, los 15.0 ml. de auestra de agua y el indicador de cromato de potasio- So pone en marcha ol azitador nognético, a baje veloci- aaa. Se titule con 1s goluedén de nitrate de plata. A medi- aa que va sgregendo 1a solucién de nitrato de plata, #1 1fguldo canbia de color pasando de amarillo linén a ansrillo, aostrando répidos aunentos do tint: ae color rojo tonate Gontorme aurenta el tinte roJizo debe dig sinulres 1s velocidad de aulida de Ja aolueién, reducidy Gola a una gots por vez hast que toda in muestra tome nun color durazna. En debe cerrurse In Lave do 1a bureta, mantonténdose sien onento, llamado del primer gran cambio de color y pre on aarcha ol agitador y sa observa el color durante 20 segundos. BL color debe volver s wn amarillo pélido, Iuego 98 coz finda agregando nitrato de plata gota s gote, hasta que ol 1fquide comence otra vex a tomar color rojo tomate oon onda gota que se le arent guide se reduce 16 adoién de nitrate de plata s medias gotas hasta que el Liquido mantengs durante 30 segundos un color durezna 0 neranja sucto, in llegar a ser anaranjndo 0 rojo puros Hote o@ el punto final. Si se examina Le solucsén por tansparencia se veré clara y no opaca. Conforms 2 va agregaado le cantided de nitrate de pla- tas 1a muestra, Is velocidad del agitador magnético se dbs ix aumentando on forma gradual, outdando de no pre ducir salpieaduras Sobido a1 cxoeao de velocidad. Innedidtanente oe snota in lecture de los al. de nitra- to de plata gastndos y 90 detione a1 agitator magnétioo. line titulacfones de cada muestza deben hacerse por du - pliesdo, Js lectura de na buretas no debe diferir on fas de 0.02 el. Si esto no se logra seré nocesario res Ligar una tevoera titulacién o las que fuere necesario hasta que @e obtenga doo lecturas dentro de loa limit sndiocados. 6.= GALTRRACTON 6a. Standactaneién gol Witrato de Plate Antes de comenzar ins titulasiones de las muestras de agus de mar para dotoraimw cv clorinidad debe standart aaree 1s solucién de Nitrate de Plata, para conocer 8u concenizioién exacts on partes por atl. Bota concentracién debe osoilar entre 0.150¢/,, ¥ 0v145 °/sq Gs As olorinided del agus de ler Yorgal (alrededor 40 19.580"/.,) pare efectuar los o€loulos neeserios a fin de determinas 1s clovinided. Bp muy importante nantoner 1a concontracién de 1a sol eign de Nitrate de Plata dentro de los 1fmit ae tas tsblas Hidrogedfioas cominnente conosidos por tables de Knudsen, para oncontrar ol fctor de correceién k neces serio pars efeotuar los efloulos que se indiean © conti puneiéns Standarisaetén eo el pros jablecer La 0 que pernite Asfereneéa entre 1a concentracién de 1a eolucién de Hi- ‘trato de Plata (A) y 1a clorinidad del Agua de Mar Yamal (8) que es exfctamente conocida. Bota diferencia es Ta, pada alfa (oc). a standarizacién se express por lasi, guiente formula; CK) = (A) 2 x -10- plot CLerinignd del agus de mar normal (i) = 19.380 Lectura de burets de titulacséa.. (a) = 19.370 (=<) = 40.010 Afs. Se obtsene un valor promedio de alfa de laa tres mejores situlacdorer Goi Agua do ar Korma, Bate valor es o2 usatn pare obtener ml fhetor de corresosén k de laa ta~ bice de Knudaen, cuye Znetor 9 aplieado a 1a Lectura de lee bureiaa de muests do ogua de mar, para obtener 1a clarin‘ sad. For sjosplor (2 0 a 29.380 wer 40.010 39.380 19.32 0.040 (sain t1tulaciéa, desechada) 19.380 19.37 +0.010 19.380 19.37 40.010 Froaedio sees 40,010 St le standarizncién dters valores para alfa (a ) que nc estan dontro de lov Mtaites que le correaponden negin 1a tabla Knudsen, seré neceserio ajuetar 1a eoluctéa. Por ejemplor Be noe arto usar 38.78 ml. de soluctéa de Kitreto de Ma ta (lectura de ta bureta 19.39) para titular 15 al. de Agua de tar Nornal de olorinidad 19.39. £1 contenido de clore on el Agua de Mar Norssi seré igual ar 19.39 x 1.00045 x 1.0248 = 19.88 g/t a normslidad en cloro de $a san de mar es igual a: 19.88 / 35.46 = 0.551 ¥. -ne Luego 1a deseada conconsracién de le soluctén de Nitra to de Plata es igual ar 150-561) / 38-78 = 0.27 N on ién plata Si on lugar de usar 38.78 m1. se usa 38.40 21 de solu - ign de Mitrato de Plate (Lectura de bureta 19.20) para, ‘itular 15.0 mL, de agua de Mar Forme, Le concentrasién ae Ia soluetén aortas 15(0-562) / 38-40 = 0.219 8 Para ajuetaz 1a soluciés © ou exacts norsalidad, el volf nen final tenéria que cor: 0.219 (36.91) {0.217 = 37.25 1itros mero si s@ han praparado 36,91 litros de le solueisn ae Biteato da Plata, ser4 aecosario agregar 340 al. de agua aestiladar 37-25 = 36.91 = 340 BreperaeiGn de] agus Sud-jlornal Alginos Leboratorioe empl 8 agua de mar Sub-Norgal on lugar de Agu Normal, dsbido © considersciones scondnions ya ins dtftoultades para ou obtencién. Mediante este sustitute puede propararse grand: de agua de ar Sub-Wormsl con clorinidad conosida, compardéndola con Agua de Mar Wormal y luego usarle en lugar de esta 1ti- ma en lop andliede de rutine del Agua de Mar. cantiaads is saners eds simple de proparar agua de mar Sub-Norma 1 es obtentendo una oferts cantidad de neue de mar clara y aie Limpta de uns clorinided myor que le del agua normal , uego filtea doo veces por lo menos y ee atluye has ‘te aproxiner su clorinidad tanto como sea positie 1s el agua normat (19.39 °/,,)+ Por ejemplo: Se tonan 20 litros de agua de mar, se hacen las dos £2 traoionas y se halle au clorinidad. E1 contenido de cle raro ( 20°C ) 90 calevis multiplicando 1a elorinidad pr 1.00045 y por 1a densidad del agus de war de esta clord, aidad. Por consiguionte oi lo olorinidad hellada ea 18452, #1 contenidy do cloruro wert 1 18,52 x 2.00085 x 1.02361 = 18.97 grenos ce cloruro por 1itro. Gono el desendo contenide de cloruro ea de 19.88 granos por litro seré necesario agrosar ; 19.88 - 18.97 = 0.91 greace de elorus por Lito, 6 38.49 _x 0.91. 2.50 granos de Mach por Litres 35-46 Una vez obtonide el agua Sub-Norml, daberé ser bien mez olada y guardade en botellas do vidrio color serrén, he: néticamente cerradss. Gade botella debe ser rotulada eon 1a fechs y ef valor de 1a clorinidud. Se inalmente debe verificarse ou clorinidad en relacién con el agua de lar Yormal, anoténdose lee verifieaciones en el rétu doe Te cancuios de Se doternins o valor de alfa (a¢) prosedio. a de las tables de Knudsen eo halla el factor de corres tsa k, Gon el valor hallado de alfe ( 3.50 ug-atons Po,-P/i on algunas wrofundidaton dei mar. BL eldaioo método para ia determinacién de f6sforo inorginico os el do azul We fosfonolibiate de DENIGES (1920). Otros métodos han sido desert tos port ATKINS (1995), SETWELL (1955), WATENEERG (1937), ROBINSON THOMPSON (19420), VOOSTAR y RAKESTRAY (1951), FUKAT (1954), GRENPIELD y KALBR (1954), HAIVBY (1955), BARNES (1959), MURPHY y. RILBY (1958 y 1962), SURIOKLAND y PARSONS (1965), GRASSHOFF (1968) y otroa. Todos Loe nétedoe para la determinacién de fosfatoa en el agua de aar de penden do 1a formacién del complejo de fosfonslibdato y de 1a subsiguien ‘te weduacién a un compuesto altanente eclereaic de azul. luge métodes que usan el clorure estannoae coms reductor tienen 1a vonts- Ja de sor nds sensibles y de dar una menor interferencia que los compues tos ovgdnicos bidrolizables usados en ctras téenicas. PROCTOR y HOOD (1954) han wecomendado para 1a detersinactén de f6efor0 Anorgénico en el agua de mar, un étodo por extraccsén del complejo fost, nolibdato dentro de iso-butanol y por reducoisn en 1a fase orgénica con ©1,8n. Mo decclora en 75 minuto = 28 - JONES y SPENCER (1963) nostraréa prucbas conparativas de varios uétotos para la deterninacién de fosfatos en el agua da mar. BL sétodo desorito a continuaeién difiere principalnente en ol volusen de muestra, del método de i URPI y RILEY (1962) deserito por STRICKLAND y PARSONS (1968). 1+ PUNDAKEHTO BL fundauento de este uétodo consiste an hacer reacotonar 1a mes ~ tra del agua do mar con un reactive que contions deido wolfbéico, 4oido ascérbico y wn antinonio trivalente. £1 complejo resultan te 4oido heterepolar es redueido in situ pera dar una coloracién azul, el cual es wedide s 8e5car BQUIPO Y APIRATOS ESPROTALES Son necesarioe: Li= Botellas de polletsieno de 100 wl. 2.e Pipetas autondticas de 5 al. 3.- Bopectrafeténetro. 3. ZOWA DE MUESTRA Y SU PROCRSAMTENTO, Se usan botellas de poltetileno de 100 al. de cnpacided para tomar Ise auestras, pero antes deberda ser enjungadas doa veces con el agus do nar que va @ ser analizada. Las sueatras deterdn sr guar dades on un lugar frio y en la oscuridad y solamente ser calentadas 8 1s temperatura del ambiente cuando las suestras van @ ser snali- zadas. Dederdn los susstras ser refrigeradas a O*C 6 menos, af loo anflisis van @ reslizarae después de 1-2 horas. REACTTVOS, Son los siguientes: fede 42 43. 4d 4.5. -29- Solucién se Kolstéato de monic Se disuelve en 500 ml. de agua destilada 15 gr. de paramolib- dato de anonio (1H,)6- Mo70p4- 41,0). QPs Bebe guardarse en dotellas de polietileno protegidas de la luz, Le solucidn es eotable indefinidenente. Solucién de Aeide sulfieice Se agrega 140 al. de doide sulfiiricc cencentrado QP. ( 8 ee 1.82 ) 2 900 al. de agua deatilada, luego ae deja enfriar y ae guarda on una botella de vidrio. Solueiéa de neids wesrbice Se asouelvs 27 gre de ieiCo ascdrbice, Q.P. en 500 al. de agus aeotsiade Se guarda on botella de polietilenc en el congela Gor y recongelarse qusvanente. Le solucién eo estable por ay ches meses, pero no deber guardarse ¢ tenperatura de labora torio por ufo de una genana. Solucién ce tartrate antimontl potésice Se diguolve 0.34 gr. do tartrato antincatl potdsico, QP. en 250 ul. de agua destilada (calentar oi es necessrio). Se gar aa en botella de polietilens o de vidrio. La solucién ea aa- ‘table por suchos nese. Mozela de Resetive Se mezelan 100 ml. de 1a olucién de aclibéato de anonio, 250 nl. de 1s solucién 4oide sulfurico, 10¢ al. de 1a solucién de Acido ascérbico y 30 al. do 1a aclucién tartrato antiuonil po tésico. Bete renctivo debe ser preparsio para cada grupo de anélisie y 01 exceso debe descartarae. No deberé guardarse por age de 6 horas. = 30- 5-- ROCEDTNTENTO he 6. DSERMINACTON D Se lleva a tina aiens tenperstura todas 1s 30°C). suestras (15° 6 Se tonsn 50 nl. de muestra por Juplicado. Se ngrega 5 nl. de 1a nezela do reactives a cada muestra y se agita. Despude de 5 afnutos y dentro de 2-5 horas, ge mide 1a extin~ oi6n de las muestras % 9850A* expleando un eapectrofoténetro ¥ uoando celda de 10 om Se conrige La extinesén aeaide por substraceién de 1a turbi- dee y el resctivo en blanco. ssico Celda s celda sp blanco Cusndo anbas celdas uo In suestra y celda do agus dostilada 20m Llenadas con agua destilada, 1a oxtinoién de las dos cel das debe ser 0.000, pero debido a 1igeros defectos Spticos se puede hallar valores Ligeraserte positive 6 negative. Bato es + sttido cuando 1a turbidez en blanco oa sustrafda, pero ol valor deberd ser hallado cuando se deteraina el reactivo en Dianco, Ena celde ox blanco ol sgue destilada dederd ser caz Diada totos los dfas, ya que suede resultar une marcade turbs doz af el agua destilata personece en 1a celde por un Largo thenpe. Reactive en blanco Se toma 100 al. de agua destilnda, por duplicado, en lugar de ‘agus de mar y se procede cono se ha deserito anterioraente, luego se corrige ¢1 resultade de oxtineién por 1a celda en bina 6.3. - 5 co. Bl remtivo en blanco no deberd exceder 0.02 ug-at/u . Sf esto ocurre deteré usarse agua redestilada, Cada nueva prepa racién del reactive golibdato deberé haceree reactive en blan- co y chequearce echanalnente, urbider on Planes del agua de mar ua tur fot en blanco puede ser una fraceién apectable del to ‘tal de extinoién en aguas superficiales, y por lo tanto debs ré eer detoxninads en mess de superficie ya 10 a de pro fundidad on cada lansaniento, También ce meciré a nds gran - eo provundidades hasta que ios valores sean aproxinadanente constantes, ate velor (ontrainente meno= que 0.0 debajo a 25 m. on aguas lejon de 1a nosta) co casi igual a 1a celda en blanco y pusde @ menudo ser Ligeranente negative. in turbide: deberé ser medics deepaés que todas las musatras lanyan obtenifo 1a texperatura del anbiente, antes de adiosinar te nezole Ge reactive! CALTERAGON Tae Proparnoién de solusiones atantardes Tels Standard de foutatos Se pecs 0.816 gr. do KE,PO, cnhisro, ol cual ha aido Freviazente necade duraate 5 horas a 120°C y ae diaugl ‘ye ca 1000 ul. do sgua destilada on una Sola eraduar da, Se agrege 1.0 al. de cloroforae (como preaervati, vo) y 0 guarda en una Botella oseura, La aclucién ee setable por suchos aoses. ote solucisn contiene: Lal. = 6.0 neat P0,-P 71.2, Soluctén standard de fostatos 12 10 al. de 1a soluctén stanéaré de fosfatos I aon dilus, ose 408 a 1 Litre con agua destileda. Se agrega 1.0 el. de cloroforno, y se guarde en una hotella oscura. Bs estable por muchas sensnas. Lal. + 6.0 x10? ng-2t 70,-P Lal. = 0.60 ng-at P/L on 100 ml. 48 muss ‘tra de agua do ar. 7.2. Processnienter Se prepara 4 soluciones standarda, ouya concentracsén sea equi valente © 3.0 ng-at P/L (5.9 ml. de golucién standard de fos- Fatos II), y se conpleta exactanente = 100 al. con agua destd lada y dos auestras de 100 ni. de agua dectilada que acentian ono blancos, Luego se procede cono se ha indicado anterior- mente reconondéndose que tanto las soluesones standards, cono los blancos do agua de mar ointética, sean colocadas en sedio ‘Me sada grupo de mucstra y trabajadas evactanente cono las otmas. BL factor P es ealeulado de 1a expresién + oy ase 2-8 fonde B, = Ls extinoién media de los 4 standards y B, + La extincién media de los 2 blaneos (no corregi- o por celda a colds en blanco). 8. caLeuLs La concentracién de los fosfatos en las nusatvas 9 calculads cono siguer 6 PO P/b = BaP onde ¥ = 69 01 factor obtenido en 7.2 Rl = extinoién corregide, obtenisa en 5. - 3 Nomas BL uétodo deserite ne presenta cembiow significativos de tempers ture (menor de 0.2 5 por “@) entre 15% a 30°C. La oxtincién logra ou mixiuo a loa 5 minutos y permanece constan to por muchas hors Poro para trabajos nis preciuos reconte 4a que 1s leotura de Ja extincién se lags dentya de 24 5 horas, porgue puede haber Ligeros osnbios an Ia privera nitad del dfa. a sflic= ests considerada como un avtziente porque e2 un consti tuyen= te de Ins diatosess y de otros organicucs fitoplancténicos. BL rango nornal de eilicatos en ol agua da ner 2 de 0.00 a cerca de 200 ugeat de silicato-eflice por Litera. Loa compuestos de 1a eflice so hallan en el agua de mar, ya sea en ver Aagera solucién, en estado coloidal 0 en partioulas en suspenssén. Las fornas on las cusles son deterninsdos colorinétricanente han sido ‘esdos por ARISTROKG (1952), COOPER (1952) y CHOW y ROBINSGE (19538). Algunos estuaios cobre 1s quinicn de 1a Formacién del a{liconolsbaat ben side eslisades por STRICKLAND (1952). Y adeno MULLIN y RILEY (29958) on Suvestigado loa cabin en el contenido de sflice durante ol gacrdado on difurentes t4pos Ge votella odes los métodos para le oterainsoién de eflicatos en el agua do mar dopenden de ia produccie del osnglejo siiiconolibdato. BL nétodo nfs antiguo pare 1a determinseién de los silicatos es el de DIGNERD y WAIDENPULCIS (1923) outén hace uso del color amarillo del dos, Wo siliconolfbaiee, *1 cual se forma sucndo el nolitdato de anonio y 91 feito culfurino con agregadas el gus 4e bom, ate método ha aide eritieado por TUKAT (1954b) y mejoraio or ARMSTHONG (1951) y MULLIN y RILBY (1955) quience han utilizado uétodog andlogos para 1a eotimacién a Los ailicasce, en log cuales 8) écido silico molfbdico formade ea ne Gueide « saul de nolitdeno. §1 priuszo us6 como agente reductor el cla rare enti snoco, el eusl da une gran veneibilidad, pero le muestra deco loza répidamente; oi segundo empleé ol notol, el cual e8 econénico, os sable y el color “eoultante eu también esteble -35- BL nétoco deserito a continuacién es de MULLIN y RILEY (1955) modifics. 0 per STRICKLAND y PARSONS (1968) . ~ PUNDAMENETO Le nusstra de agua de mar hace reaccionar con golibdato bajo cier tas condiciones que permitan 1a formacién de loa complejos de stii- conolibdates, fonfonolibdate y arsenonolitdate. Luego se Le aliade 1a solucién reductora que contiene netol y Aeddo oxélico el cual re duce el coaplejo siliconolitdato « un compuesto azul y simultdnen = Bente descompons ©1 fosfonsiivdate 6 arsenomolibdato, es decir, que 1a interferencia ac os fosfatos y arsenatos son elisinados. Luego Se mide 1a extincién @ una longited de onda do 100A, usando un es pectrofotonetro y colda de 1.0 6 10.0 en. 2. EQUIPO Y APARATOS SSFECTALES Son necesarioa: 1.~ Boteltas de polsetiieno de 100 ml. 2. Probetas graduadas con tapa de vidrio de 50 mi. 5. Pipetas automfticas de 10 al. 4o> Pipete volusétrica de 25.0 ml. 5. Bopectrofotézetro, 3. TOMA DB NUESTRA Y SU ALMAcENprTENTO ao muestres de agua de mar deberén ser tomadae inmediatarente que las botelias Nansen estén a boréo, en botellas de polietileno de 100 Bl. y guardadas en 1a oscuridad, para prevenir 1a multiplicaoin de lus Gistoness, lus cuales pueden conauair silicatos. Si Lae ue tray no van & ser anslizadas a bordo deberdn ser guarda ae en una congeladora a -20°C. 4 carves Son Loe siguiente; ae 43. 455 = 36 Reactive de yolibdete So poo 4.0 gr. de paranolibdato de anonto Q.Ps (Il,)¢_ Moye Ope, 48,0) ¥ 8 inuelve on 300 ol. de agua destilada, ence ~ guide oe le clade 12.0 1. de geido clorntarico cones (12.8.g. 1.18), ee mescle bien y se completa 500 ml. con nteado agua destilada, en uns fiola graduada. Se guarda en una bote Lia do polistileno y protegida de ta luz. La eolucién seré eetable por muchos meses, Sotuesén tol=suleste Se Morelvs 6.0 gr. de sulfite do sodio anhidro (Wa,80,)s QP em 500 ml. de agua destilada y luego ae le afinde 10.0 gr. de oto! (penetilanino fens} silfato}. Cuando el eetol ha sido Ginuelto 6» Tiltre e través de papel whatean W@ 1 y se guarda fen una botella de vidric, bien tazade Ls solucién puede de- texicran {Seflnente y por eso debe preperarse cada aes. Solucién de dette oxdlico Se pean 50 gr. de detdo oxélico deshidratade Q.P. (COO), 211-0) y ve diouelve on 500 ni. de agua deatilada, ae deja de- cantar y luego 1a solucién ee quarda en une botella de vidrio. Le soluoién ee estable indefinidanente. Solusién dotdo oulférico 50¢ Vv. Se afiade 250 nl. de deido euifirica concentrado (sg. 1.62)en 250 ml. de agua ds ilada. So deja enfrser a le tenperatura G01 Isborstorio y se completa @ 500 al. con un pore de agua aeetslas Reactive Reduotor Se mezola 100 ml. de 1a solueién metoleulfito con 60 ml. dela solusién de oido oxdiico. Enseguida se afiade lentanente 60 FL, do In eolucién de Acido eulsérico al 50 ff, agitando cone tantomente y se cor plete a 300 al. oon agua destilada, Esta soluoién deberd se: preparada para cada grupo de mueatran, ae ae ine neutras deber (a ser Ilevadae a teaperaturas entre 16° y asec. Se tons 10 al. de le solacién de molibdato y 8 vacea a una rsobota greduada von taps da 50 ml. de capscidad. Se agrega 25 nl. de 1a mestra de agua de mar dentro de le probeta greduads que contiene 1a solueién de molibdato y se tape. Iuego ce xezola bien y oe deja por eepacto de 10 minu to. Se afiate ol egente reductor dentro de 1a probeta graduada que contiene 1e solucién de solitdato y la muestra de agua de nar hasta conplotar exactanente 50.0 nl, Eneeguida se agita bien. Poapués de 24 } horas 9» Loo 1a Bitiuetén de 1a goltedsn con va espestrofotéaetro, ussndo ue Longitud de onda de 6100 4* ¥ celda de 1.0 em. Para concentrasiouse menores do 12 nenat/ 0 nce colds de 10 ex. cunndo ee devna ottener valores preci- Se corrign 1a Bxtinoién uodida por gubstraccisn del reactive a blanco. DETERMTHACTOR DEL BLANCO Reactive ex blanco Se toma 25 al. ds agua dostiada en lugar de agua de mar y 86 pro cede cone co ba doscrito antestommente. La extineién del blanco no dobe=@ excoder 4 0.01 uguat/ts ouando se citblea colde de 1.00m. ~ ee ¥ de°0.1-ug-st/l-cuandc se usa-oelda’de-10-oa. y-deboré-ser medido pararoade-~rmpo de" reavtivosvy-chequéato-eemanainento~dursnti 1 orm Te= CALTERACTON 7.2. Agua do Mar Sintétion Se dieuelve 510 gracos de Cla y 100 gramos de SO,Mg. THO ¥ 0450 gronoe de Fal0,.H,0 en agus destilada libre de silicato, be complete a 10 Litres y se guards on tetella de polietilenc. Ua Salinided de esta agus os aproximadanente 33.7*/,,+ EL cop tenido de aflice do esta solucién no deberé exceder da 1a 2 penat/e 7.2. Preparacién de solucién otendarde 7.2.1. Solucién standard de stliestos 1. Se dieuelve 0,960 granos ae fino polvo seeo de fluorsi- Leato de sodio, Wa,8iF, on ngus deatilada y se conple- ‘aa 1 lttro en uno fiola graduade. Luego la solueiéa doberé ser guardada innediatanente en una botella de po Lictileno y pernancoard estable indefinidemente, Beta solucién contione: Lal. = 5 neat st 7.2.2, Soluoisn Standard de Silieato Tr. Se diluye 10 mi. do la solucién standard de silicate T ¥ se completa a 500 al. con agus de uar eintética an un fiola graduada, Esta sclucién deberd usaree innodinta- mente para la oalibracién pargue el contenido de sili: tos comienss a decrecer a las pocas horse debido a 1s polinerizacién, Lal © 0.2 ngeat 86 Lal, + 4 ng-at St/t en 25 al. ae nuestra de agua de mar oe 7.3. Brocediniento Se prepara 4 soluciones standards usando 25.0 ul. de solucién standard de silicatos IT en lugar de la auestra de agua de mir y 2 suestras de agua do nar eintética que astuan cone blancos. ego se procede cono se ha inéioado antertomente. FL factor P es calculedo de le expe P (108) = gee sone donde Bs + La extincién nadia de loa 4 standards. Bb = La oxtineién sedia da los 2 blancss. EL valor del faetor no canble con el tiespo, pero requiere que ea chequendo de vez on cuando. Su valor apréxinds es 100. Si se san coldas de 4.0 4 10.0 en, el factor puede asunirse 0-4 6 0.1, reopectivanente. 8. gaLotos Ia concentrecién de los eiliestos en lan muestras os caloulada cono sigue: ng-ot 8i/ = BaF Wonde ¥ + ee ol factor obtentdo on 7.5 5, * Bxtincién oorregida, obtentda en 5 nonas ~ No hay un pronunoiado efecto de le temperatura sobre las auestras tenperaturas nayores de 10°, pero debe evitarse tenperaturas que exceden de 25° - 50°C, porque esa tenperatura descoapone el complejo siliconolibdato. = Bl silicate y el nolibdato debon coubinarse antes que el agente Feduotor os sgregado. Hs suficiente 10 minutos para esta reacitn. Ln adieidn de 1s eolucién reductora debe hacerse antes de los 30 inutos, para evita: casbios on 1: $0 efLleomolinéato formedo. formas iaGmerioas del couple La musetze agregida al reactive feide molitdato para mantener As mozcle agua de ms-uolibdato con elerta aoider. Bote previee ne 1a posible forms/éa de formas Lesericas del coaplejo fie nolibéato. BL Aeido oxslico ensegado al agente eductor es para descoaponer al fosfonolibdsto, {mzencrolibdate formado con el compleso sili eonolibdato. BL thenpo rogherido para le fexneesén del color egw) varga con Ie coneenicacsén de los stlicavon. Para concentractones nenores 40 50 ng-nt Si/h uaa hora 9 gufsesente on conto para content = oe de 75-100 ng-at/L se requiere 3 Soras. BL agua deetilada debor4 ser mnzdadn on botella éo poldetiLeno. Bl. uso dol netol cono reduetor heen que el nétods gaa menos eible que cuando ee usa 2 cloruro estannoso, Sin enbarso, 18 sensibilidad no es de prinera importaneia en ln detersinacién de Loe silicatos, porque estos se encuentran en grandes cantidy doe on el agua de sar. Sin euborgo, el netol tiene Ia ventaja de ser née catable que el cloruro cetannosa, y la eatabilided el cotor azul qus se produce con el eflicsnoltbiato 09 mucho mg yore DEFERATWACTON DEL NITRATO REACTIVE Un continuo belance de intezcambia de nitrégeno entre los orginismos re sidentes y ou anbiente es esencial para 1a continuidad de 1s vida en ol a mayor parte del niteégenc conbinado presente en el mar 9¢ halle on forna de nitrates. ios principales métodos pura a detersinacién de Hitzatos en el agua de nar estan basados: 1) Bn 1a reduccién s nitritos 2) Bn 1a produccién de color por 1s adieién do reactivos en sclucién concentrada de foido aul- furico, como un resultado de las propiedades oxidentes del doido attri cos 3) Polarograticanente. a doterninacién de los nitratcs en el agua de mar usando la reducida y 18 difenil bencidina en yresencia de deido sulfirico han ai- 20 desert ten yor HARVEY (1926-1950) y ATKINS (1932-1954), reapectivanen + BL nétoto de HARVEY posteriornents fue mejorado por ZWICKER y RO = ‘BMIGON (1944), quienes denostraron que el reactive de HARVEY era una trienina Ae productos de reduecién de Jn setrionina y que el uso de le eg tricnira pova ora un rasetivo mée satisiactorio. ROCHORD (1947), MATIDA (1951), MARVIN (1955) y FUKAT (1955) elininaron Le mayorga de las €iticultades oncontradas on ln praparacién del Reacti yo de HARVEY, msjorand> 1s preoieiGn del aétodo. te acts rainaeiGn do los nitatos polerograficanents han ido doscritas Por KOMTHOFF, MAIIIG y WATSUYAMA (1944), KEILIN y O2¥0S (1946) y por CHOW y ROBMGON (1953), basados en ln redueoién polarogrética do los ni ‘tratos on prenonein de dones urans ‘Una reduccién batcrogénsa de nitratos a nitrites por el metal Zine he por Tissot y KOT y BRAY (2954). MULLIN y RILEY (1955) el nitrate © nitrite omplesndo hidracina en una solucién bafe rade 8 pI 9.6 en presencia do iones de eobre, los cuales actuan como of telinadon, FO y JCEIGON (2962) deaortbieron un nétodo basado en le duceién con polvo de Tine. =: Ovros nétodos han sido descritos por MONTGOMERY (1962), PROOHAZKOVA (1959) ARNSTRONG (1963). Ura comparacién de los métodon usando hidrack nna y eetricnina es dada por DAL FONT et al (1962). BL efecto del H,8 on la determizacién de os nitrates ha etdo tratado por WILLIASS y COOTBL (1962). BL rango de nitratos ene igus de wor es generalnente de 0,00 ~ 60 ne at/b. BL aétodo desorito rr STRICKLAND y PARSON (1966) esta basado an 2 método de MORRIS y RILEY (1963), incluyendo el uso de cloruro de exp aio (GRASSEOFF, 1964) y colunnas do cadnio-cobre (WOOD, ARMSTRONG y RI~ caanns, 1967). BL nétodo deserito continuacién es el modificado por STRICKIAND y PAR S0u3 (1968), con igezae modi fieuciones. FONDAMEREO El nitrite de agua de mar es reducido cuantitativanente a Nitrito, ‘ouando 1a muestra pasa a través de una coluana que contiene analga- sa de cadsio cublerto con ovbre metalic. Bl nitrito asf producido e detersinado por Aasotacién con eulfantlanida y copulactsa con H-(1 naftd) etilendianine 2ara dar un tinte azo altanente colores. do, ouya extincién es medida. 2s+ BQUIEO Y_APARATOS ESFECIALES Son necesarioa: L.- Golusnas de reduceién. 2. Erlenneyer de 125 ml. 3. Plpetae automtiess de 2.0 y 1.0 ale 4. Protetas de 100 ml. 5. Bopectrofoténetro. 3+ 2OMA DE MUESTRA Y SU_ALMACEXAMTENT oe Se toma 100 al. de suestra, aproximadanente, on una probeta gradua da y se vacea a un erlerneyer de 125 ml. Las nuestra son estatles por muchas horas, si son guardades frias y en le oscuridad, pero los andlisis no deberdn densrar nfs da 12 hor: + St ve piensa gue Gerla por mayor tienyo Ine miastras daberdn ser congeladas 4-20. REaceTvos ade 45. 44s 4.5. Soluoién concentr: elorire de enonio: Se disuelve 175 gr. de cloruro de anonio, @.P. on 500 al. de agua dotilads y ee gusrda on una botella de vidrio 6 de po = Lietsleno. Solucién dilufda de clorure de auontor Se diluye 50 al. de 1a solucién concentrada de cloruro de ang ‘nie a 2000 al. con agus destilada y ee guarda en una botella de vidrio 6 de polistileno. Sulfentianiaa Se poss 5 gr. de oulfonilonide y se disuelve en una aezcle de 50 el. de HCL concentrado y 300 ml. aproximadamonte de agua Aestilada. Tuego 52 completa a $00 al. con agua destileda. a aolucién es eetable por muchos ne: No(.-nares1) ets lendissiog Se yeas O15 gr. del compuesto OH, NHCH,CHWER. 2401 y 96 Ai suelvs on $00 nl. de agua destilada litre de nitrites. La luci6n ord gurdade on una botella amber y renovada cuando aperezea un color pardo fuerte. Proparacién de lee columnas de cadaio: Son preyaratoe ao Iu siguiente nanerar += So lise finanente el netal oadaio y selecesone 1a frag, ae 9 do.- oid que pasa le nella de 2 sm, salle de 0.5 mn. Aa-que es retenida on otra Se tona aproxinadanents 300 gr. del aetel cadnic (este cane dy eon une solueiéa de HCl al 1%, luego 20 trata con une sola cA6n de sulfate de cotre pentahidratado (Cu.S0,.5H,0) «1 26 ahh Joidales en e Liquide eupernadante, dad o8 uti ste para 6 colusae lava brevenente ta que onpiece a formree jartfoulas de cobre somicg Se Leva con abundante agua deotilada (por lo menos 10 veces) hasta quo esté Libre del cobre coloidal. EL fondo de 1a eolume reductora se Liens con cobre muy fix no y ae agrega solucién dilufda de clorurs de ancnio. So Lena 12 columna con los granulos de cadmio coperizade y ae lava 1a columna con solueisn ailufda de cloruro de anonio, Se regula el flujo de 1a muestra. El flujo de una auostra 40 100 sl. a través de Ie colusna debe denorar de 10 = 12 Binutos- Si el flujo denora aonos de 8 minutos, sere nece- serio agregar nfs cobre 2 la base 6 dianinuir la salids del Liquide. $1 el flujo denoza nda de 12 minutos, dedera qui- ‘taree cobre en la base de In ooluana, Se agrega algodén de cobre al extreno superior de 1a colun- Antes de 1a oslibrasi¢n y reduecién de las suestras, las oo Lumnas deberén activarse pasando a través de élla 1 1itro de agua que contione aproxinadanente una concentracién de 20 ng-at/t, de nitritos. Cuando no #0 usan las cclunnas elias deberdn dejarse en oo lueién atlufde de cloruro de anonfo en cantidades ouficten- tes que cubra el setal. Las colunnae deberdn ser regeneradas cuando ou eficiencie (¢5 roducida, on 1a aiguiente forma: Se vac: el contenido de ooo las colusnas en un vaso y se lava con una solucién 4ilusda de Keido nftrice 1% “fy, 1uego oon una soluciéa ae HCl al 1 y finslaente se leva con sbundante agua destilada. Hneeeuida Se soca a 60°C aproximadamenti. Luego ae procede en la forma descrite antertorsonte pera le preparacién de las coluanas. RocEDIUTENTO Ls- Se toma 100 al. de sgun de sar y se veces a un erlenseyer, 1uego 0 agroga 2.0 al. do la colueién concenteada de oloruro de ano- Se vacea 1a muostra on 18 colunna reduetora. En el erlenneyer oe reciben los primeroa 40 al. de 1a nuestia os cuales son desuchados dejando tan seco como sea posible ol erlenneyer. Bn el misno erlenneyer se colectan los eubssguientes 50 ml. ae nuestra. Tan pronto cono seu posible oe le afiade 1.0 al. del reactive oul fanilanida y se nozola bien. Luego so deja por espacio do 246 minutos. Se afiade 1.0 nl. de N-(1-uaftii) etilendienina y a agita, Se espera 10 minutos para que 1a aolucién logre ou adzina inten- sided de color, e} cual ee estable por lo menos 2 horas. Os Ge mide 1a oxtineidn de Ia muestra n una longi tud de onda de 543 Bu, usando un espectrofoténctro y celda de 1.0 on. Si la extin= eign es née grande que 1.25 (ca. 30 ng-at H/L), a0 aide en colda de 0.5 on. 6 se tona 25.0 al. de 2a soluctén con una pipeta voly = 46 - nétrica y se vaces a un erlenseyer y Iuego oe le ailade 25.0 al. de agua destilada. Dlando este valor on 1s férmula que ha de explearae ude abajo. noscla bien y se mide eu extincién, do- Si 1a extineién es menor que 0-1 con celda de 1.0 en. oe debe repetir la lecture usando celda ée 10.0 om. Para extinoifn de 0.1 4 0.2 con celda de 1.0 on. es conventente usar celda du 5.0 9. So corrige 1a extinoién sedida por custracoién del reactivo en bianco (usendo celda de 1.0, =5.0 6 10.0 em, respectivanente). Se= DRTERMTUACTON DEL BLANCO 6.1. Gelde « ceida en blanco Cuando anbas celdss de 1a nuestra y celda de agua destilada son Ienadas con agus dostilada, lo extinetén de las dos cel- as debe ser 0.000 debide a ligeros defectoe Spticos vo puede hablar valores pero ligerasente positive 6 negativo, Esto os peruitido cusndo 1a turbides en blanco ea austrafda, pero el valor deberé ger hallado cuando 9 determina el reactive en blanco. El agua en 1a celda de agua destilada deter sor cox biada todos los afas, ya que puede reaultar una marcads turbi, @ez oi el agua a theapo. stlada persanoce en 1a celda por un largo 6.2, Reactive en bance Bi reaetivo on blanco cuando se usa celda de 1.0 em. Bs cast Amsignificunte pero deber4 sex chequeado ocasionainente, en eambio cusnds se usa colds de 10.0 ox. e8 muy importante. Be lleva ® eabo com en el aétodo deaerite, usando 100 nl. ae gun deotiiads Libre de nitratos (81 el agua deatilada contig ne nitrates eer nece: rio redestilaria, agregindole wn poaus to de peraanganato alcalino)en lugar de agua de mar. Se co- rrige le extincién reoultante por 1a celda a celda en bianco ~ae ¥ no deberd exoeder de 0.1, weande eelda de 10.0 ox. 6.3. Turbidex on boneo Si 1a eoncon*saeién de niteatos es baja y ee use colda de 10.0 on. 1a turbides en blanco seré deterninada y ai su extincién es aprectable, Ine questras Joterén ger filtradaa antes del ang lisse. SALT ACTOR Tot dem de Mar Stntétion Se dtouelve 310 gr. de cloruro de sodio (Cilla), 100 gr. de suk Pato de segnesio (Wg80,.73,0) ¥ 0.50 gr de bicarbonate de scdio (teH0,) en 20 Litros de agua destiled doberca ser quinteanente Paros, Todos los reaetivoe 7.2, Solucién Standard 1 Se disuelve 1.02 gr. de Nitze to de Potasio, Q.P. en 1000 at. do agua destiJada, ueondo uno fiola graduada. Le solueién table inderénsdsnon en 1a ausoneia de la evaparaciéa. Lal. = 10.0 nguat mitrégeno 13. Soluotén Standard IT Se ailuye 2.0 ml. de ie solveién de Nitrate Standard Ta 1,000 ni. con agus de Nar Sinvétiea, Rot: golucién deberé ser eurrdada ex dotella oscurs ¥ acré prapazada innediatanente ane ten de ou v90, concentmacién = 20 neat w/t Se tora 100 a2, de le soluctén standard II de Nitrate y ao ve ora a un erlenneyer do 125 cl. y se procede coo se ha indica -4ee ao, onterdorsente. Luego so mide 1a extincisn de 1a muestra usendo celée de 10 om, BL factor pars cola columns inioislsente debe ser deternineds Gol pronedio de Is extincién de 3 standard y corregida por In extincién del reactive en blenoo. Subsiguientenente cada com nana seré ob queade Giarianonte con un standard. BL factor Fes ealoulads de la expresién: 20.0 Pos geome Gonde Ho = La extincién nedis de log 5 etandards para onda coluana y Bb = La extincién nedia de Los 2 blancea. 8. gaLouLos La concentracién de los nitratcs en las auestras es calculada cons pigue: ae-ct fb = Bx Ec i Gonds P= 09 el footer obtenido on 7-4 = Longitud de celda B, = Extincién corregia, obtenida an 5 © = concentracién de nftritos en la muestra. ons, = Bl uso continio de las Limadures de anslgana de cadnio puede oom, sioner une progr iva desctivacién del reductor, debido posible sents 9 ls formacién de uns caja de Aldrézido de cadsiio o carbo La presencia de un poquite de olnrure de monic bafera ol agua e mar haciéniola slgo cide, ol cual no deactiva las colunnas. ~ BL volumen del flujo a través de le coluana para su lavado no de -4- be ser nenor de 40 al. Por el aétodo deserito alrededcr del 95 % del Witrato es reducido a Nitrite, Los cambioa de tenperstura ao tlenen efecto entre 10° vy 35°C. io es neo jaro Javar lne cclunnas entre muestras, pero ei perma nece ain uso por variaa horse seré necesario lavarlas con 50 al. ae aoluciéa diluféa de cloruro de anonio antes de au zehuso. Cantidades uperiores a amg S*/1, co ha dicho que no interfiere on ol nétodo doserito, sin exburgo ripetides anélisis pueden deacti~ var las oolvnnas debido a 1a formscién de sulfuro de cadmio DETERMINACTOM DEL WIRITO REAGTIVO En el cielo de nitrégeno en el agus de nor, el estulio de los nitrites fe8 muy Stil porque ocupa une pooioisn interaedia entre el anonfaco y ni- trato. Cono loa estados de cxfdactén del nitrégeno se encuentran en equ Librio, 1a concentrasién de los nitrites puede servir como un indicador Ge 1a inestabilidad del otote: In concentracién de los nitritos en el agua de mar varfa generalnente deg Ge 0.00 ~ 4.0 ng~nt/L como nitrito-ni trégenc. Bn Gvens bioldgtoamente produotives hon eido observadaa concentraciones Ge nitettos miyores que 9.0 ng-at/ie os nétodos para 1a determinacién de los nitritos en el agut de mar de~ ponden de 1s diasotactén de un compuesto amino, seguido por we resccitn ae coptlacién para dar un tinte a2, Los més usados son ol fcido sulfa nflico y el alfs-naftilaninas pare senoibilidedes extrenas puede usarse ol oulfanilanide y N-(1-Naftil) etilendianine biclorhidrato. Le disore paneia en los resultados do los nétodoa se debe a Las variaciones en loo reactivos y en 61 prosedintento. ROBINSON y THOMPSON (1948), deseribon un nétodo el cual ge besa en Io Ainzotactén del Acido eulfanflicn y copulecién con alfa-naftilenina pa- Fa dar un color rossdo, cuys intensidad es proporcional @ le concentra ein de los nitrites, Hote nétodo ha mostrade F algo lento y aspecte fotonétitauente los resultados no son tan conatstentes como serfs desea 40. MATIDA (1948), Frefirié usar un reactiv a61ido, 22 eu) Gerado mds sinple, nds conveniente y nde estable (se mucle 1 er. alfa- naftilanina, 10 gr. foido aulfantlice y 09 er. éeido tartérico juntos en un gortero, Para 50 nl., de auestra do agua de sar se agrega 0.3 am aol reactive). Varies téenicas han sido conparaias por BARNES y FOLKARD (1952) y el mg Yodo mda usado og el de BENDSCHNEIDE? y ROBINSON (1952) quienes aplioa~ ron el aétodo de SHIN (1941) al agua de mr, BL n6todo deserito 2 continusosén (952) ol de BENDSCHNBIDER y ROBTUSON Le FOMpauein9 For este nétodo el nitrite del agua de mar se hace reaccionar con un anina aronttica, oulfantlentas en solucién Seida. Bi compuesto a 0 resultante so hace reacotomr con W-(1-Kaftil) etilendianina y forea un tinte azo altanente coloresdo, ouya intensidad os propemio nal a la concentracién de nitritos presente, Luega ae mide 1a ox - Yinotén de In nuestra a una longited de onda da 543 mu, uesndo un espectrofotéaetro y colds de 10 om ‘s+ EQUIPO Y APARATOS SSPEOTALES Son neesaarios L.- Rotettas de 100 al. 2. Brlenneyer de 125 nl. Bev Probetae de 50 al. 4o- Pipetas autonttions de 1.0 al. 5.- Bopectrofotsnetzo. 20WA_DE NUESTRA Y Si ALMuomUMTENTS La probeta de $0 ol. y el erlonseyer Se 125 al. usados para le deta mningo{sn debon ser lavados dos veces con 1a nuestra y luego 50 wl. de nuestea en ol erlenmeyer. Las mueatras son luz tenue por suchas horas a toaperature del laboratorio, pero os fandlseis no deterin ser Ienorados as de 5 # 10 horas. Tas mustres Yeberdn sex congeladas si so piensa gusrlarias por un tteapo, pero ndable un quarcedo prolongado. Para trabajos de alta Preo{ei6n en droas sercanas o lo costa ae separa una muestra de 30nk. -52- de musstra pars le medice de le turbides. 4.- RBACEIVOS 4.2, Sulfantianiaa Se poss 5 gr. de sulfantlansia y se dieuelve en una nescla de 50 ul. de HCL concentrads y 300 ul. aproxiaadanente de agua deg tilada. Luego se completa ¢ 500 mi. con agua destilacs. ta ag Iueién es estable par auchos nes: 4.2, H(aweresn) etitendianine So peoa 0.5 gr. dol compuesto Cy fi, SHOHACH,WE,. 2HC1 y se di- fsueive en 500 ml. de agus destiinda libre de nitrites. in solu o46n serf gusrdada on una botella anbir y renovada cuando aya - exes un color pardo fuerte, Procepmerpn Ine nuestras deterén ser tratadzs con los reaetivos tan pronto cone sea posible. u Se toma 50 Bl. de muestra de agua de uer y se vaces a un erlenne yor de 125 ai. 2. Se agrega 1.0 al. del reactive oulfanilanide y se nezola tien. Iwego 80 deja por espa sic de 2 @ minutos. Se afinde 1.0 nl. de N-(1-Nartil) etilendianina y oe agita. Se eapora 10 minutos para que 1a soluesén loge ou afxina inten sided do color, el cual es estable por 10 menoe 2 horas. Se side lo oxtineién de 1a mucstre a una Longitud de onda de 543 Bu, uasndo un espectrofotsnetro y celda de 10 om. = 6.- Se corrige 1a extinoién medica yor oubstracién de le turbider ¥ el resotivy en dlanoos 6. DBTERMINACTON DEL BLANCO 6.1. Gelde 2 colds en bance Cuando unbes eeldas de In muectre y colds de agua destilads gon Menadas con agus destilads, la extinetén de los doe celdas de- bbe ser 0.000 debido a ligerse defectos Spticos ae pusde hallar valores pero ligeranonte positive o negative. Bato es peraiti- © cuando 18 turbider on blanco es austrafda, yero el velor de- bert sor hellads cuando se determine 61 reactivo en blanco, EL agus en 1a colds de agua destilada deveré ser coubiada todoe Loe faa, ya que puede reculter una marcada turbides ei el agus destilada persanece en Ie celéa por un largo tieapo. 6.2. Resotive en blaxes Se leva a eabo como en 61 aétodo desorito, usando agua deatdi Ga Libre de nitritos en lugar de agua de sar, Se corrigs la ex tinetéa rertltante por 1s de celda a eelde on blenco. EL rece tivo en Blanes no deberé excedar de 0.05. El origen de este Blanco es oscuro y parece producirse cusado asbos xesctivos son mozelados, canbiande algo do sn a dia. Debord ye detorminedo para cade grupo de nueasrae, roz anplicads. 6.3. Tube bianes La turbides de se aguas cerconss 9 1s costa puede llegar a th ner une epreciable fracciéa de 1s extinesén total, 1a oual rara uente excede de 0.3 on doterminactones de nitrites. La turdi - oz on blane> sr6 deternincin on muestras de ouperficie ye 10 4m, do profundided en eats venente © nfs grandes profundidades hasta que ol valor Megue o anganiento. Luego #@ nide prograsi~ ser apreciablenents constante. Hate valor (generainente menor que 0.01 detajo de 25 n, on sguae lejos de 1a costa) es aproxi= ae sadanente igual a1 je coléa s celds on blanco y puede eer lige ranente nesativos Ja twreddes en blanco serd medida, tonando 30 al, de muestra do ‘gos do nar, 5 le cul ee le cgregn 1.0 ml. del reactive de sud santiantas, Ge QaLEmacToN ‘Tels Broparactén de solucsones etandarde Tsl-1, Solmeién standard Se posa 0.545 er. de nitrito de sodio, secada previanen- te a 210°C, so disuelve en agua destilada litre de nitns tos y ve completa a 1 lites on una fiola eraduada. Se agregs 1 al. de oloroformo como pr srvativo, €1 cual fasegura una estabilidad de por 1o menos de uno a dos ne- la olueién debord ser guardada en una botells Bate solucién contieno: Lisl = Sagat H 7-1-2, Soluciée standard I Se aide 10.0 fen agua destilads Libre de mitritos y luego se conplets 2,000 ml. on uns foie geaduada + de 1a soluetéa standard 1 y 26 disuslve Lost. = 5210? upat w 1.0 ws = 1,0 ug-at t/a en 50 al. de mucstra de agua do nar. 7.2. Brocodintents Se prepara 4 standards, midiendo 2.0 ul. do 1a soluciéa atan- Gard de nitrite IT y completando au volunen @ 50 al. con agua a Aestiladay hastéadose adente 2 dlsnove, con $0 nls de agus deg ‘tilada oada uno. fuego ge proceda caro ae ha indicado anterior nente. Bl factor P es caleulado de 1a expreaisn: | ao Bom donte Zo = la extineién medie de los 4 standart, Eb = ta oxtincisn media de loa 2 blancos (no corragide por celda a celda en biane). 8. capoutes, Ua concentracisn de los nitritos en laa ouestras es calculads cono signer ages NOgt/t = BL xP donde F = a> 61 factor sbtentdo en 7.2 B, = Sntincién corregida, obtenida en 5. moras = Bete método no es afectado apreciablemente por 1a salinidad, ni Por pequelios cambios en 1a ecnesnteacisn de los reeetivss, en el volunen y por la tenperatura, Sin eubargo se recostenda nante- her In temperatura en ol rango de 15° a 25%. tio es necesario hnodir exactazente 50 ul. de muestra, pero ai debe estar entre 45 mL. y 55 al. ~ Ia renooién de diazotacién requiere 2 minutos. No debe dejarse por nda de @ minutos, > Fars el desarrollo completo de color #8 necesario 10 minutos, BL eolor persanece constante por 1o menos dow har DERERNINAGTON DB 4NONTAGO BL ssonio es 1e prinera fase de 1a mineralizacicn de una oustazoia orag nice y se halle en ol agus de mur cono producto de la actividad vitel Ge los organtemos y de 1s descouposicién de los organianos auertos. Los prineros nétodos fueron desarrollacos por WIRTH y ROBINSON (1933) ¥ MAMTENEERG (1923), 108 cusles fueron eriticados y mejorados por KRUSE y MBLLON (1953). Pootericrmente cate nétedo fue aplicado al agua de nar or STRICKLAND y AUSTIN (1959). Bxisten suchos aétodoe para 1a doterinseiin de anonto on el agua do mar, tales cono los descritos port RIMBY (1953), STRICKLAND y AUSTIN (1959), KoROLEYF (1360), GTLLBAICUD (1962), NEWELL y DAL PONT (1964)5 ROSKIM y de LANZEK (1964), SACT (1966), STRICKLAND y PARSONS (1968). BL nétodo de FROCHAZXOVA (1964) pars la determinseisn de aucnio cose por JOHNSTON (1966). Aoido rubazoseo ba sido sodifiea: in técnica desorita a continuscidn eo 1a desarrollada STRICKLAND y PAR- SoW (1968) quienes tn hecho una axcifieackén ade hipoclorito-fenol ussdo por muchos inveatigadores. itive del métoto PORDAMENTO 1A nuestra do agua de mar ge hace reacoionar en un xedio citrate alealino con hipoclarito de sodio y fenol, on presencia del nitro - Prusiato de sodic, 61 cual actda cone eatalisador. Bl color dese = Frollado de asul indo-fenol eon aonio ea medido a 6400K°, usendo colds de 10 on. BQUIPO Y APARATOS ESPECTALES Son necesarion: -5re Ls Fragcos erlonneyer de 125 al. Probeta de 50 al. Pipetas autonftieas de 2.0 y 5.0 ml. 4e> Bopootrofoténetros ‘TOMA DE MUESTRA Y SU_\LalcENANTENTO Eas muestras de agus de nor yusden guardarse tesporalnente antes dal andlisis en totellas de vidrio o de polietileno, por un perfodo no mayor dele 2 horas, $i Lav mut tras van 8 sor analizadas pootextcr nente estas deberén ser congoladas © -20°C, Wo ea reconendable guar dor las auestras BEACPTVGS 4o1. Agua deiontzsia Debe usarse agua deionizeds para hscer Ins aoluetones, blancos y standards, EL amonio es renovido del agus destilada haciéndola pasar esta 9 través de una pequefia coluant de intereanbiadores de reeine Ge eationes en le forsa de hidrégeno, justanente antes de eer usados y deberé guardarse ol ogua en un fraseo de vidrio bien tapado. 4.2. Soluotén de gono2 Se pose 20 gr, de enol Q.P. y ae disuelve en 200 wl. de aleo- hol etflico al 95 £ v/v. 4.34 Soluotén de Witropruasato de Sodto Se poss 1.0 gr. de nitroprusiato de sodio NajPe (OMt)5- 10.240 ¥ 88 disuelve en 200 m1. de agua defontenda, luego se guirds en luna totella anbar. La solueisa es estable por 1o menos un nee. eS Se yeaun 100 gr. de eitrato dv aniio ¥ 5.0 ge. de hidréxido ce Sodio y se Gicuolven en 500 al, de agus deionieada. sto solu ein e9 estable indefinidanente, Insidn de hipoolorite de oiig Se uss una solucidn de hipoclorite exaereial (Chlorox) el cust no aproxtnadeaente 1.5 4. Esta eoluoiSn deberd ver chequeada perfodioanente, debido 2 que se deseonpone lentanente, Pare odko QIPs (18,805.50) ¥ Se Gisuelve on 500 nl. de agua. Se agrega unos cuantos ora toles (aproxiaadamonte 2 gr.) de yoduro de potaeto(tk)a 50 mi. de equa, aproxinadsnonte y ee vacea & un frasco pequefio, ense~ guide se 1e agregs 1.0 =1. de 1a soluetén de hipoclorito. ello se pesa 12.5 gr, de ticaulfato ae Se agrega S10 gotue de HCL coneentrado y ee titula ol yodo 11- Derailc con uns solucin de tioeulfato. Dediéndose descarter el Apoclorite ciendo se coneuns menos de 12 al, de tiosulfato. 4,6+ Solueisn oxt Se sezela 100 al, de ronctive alesline y 25 al. de 1a scluetéa Bipoclorite de sodio. Beta eolueisn debe prepararse cada dia y deve guardarse bien tapads, 4.7, Solusién de Brooure Potente Se pesa 1.5 gr. de bromurs Je yotaele Q.P. y so disuelve en 250 Bl, de agua deiontzese, LOgEpRMTETO Les da toma con una probeta 50 nl, de muestra y se vaca a un erlon= reyer de 125 a1, 2. Se agregs 2 ml. de Ie solucién fenol y ae agitn. = - fe afade 2 al. de ln solucién de nitroprusiate de sodic y se ead, Se agroga 5 ml. do 1a soluci6n oxidante, se agita y se deja por eapacio de 1 hora a tenpereturas entre 20° y 27°C, tazandose los erlenneyer con papel de slusinio, para eviter la contaninacisn el snorio contenide en 1a atadafera. Se mide la extincién de 1s muestra a 6400 A* usando sspectrofotg metro y colda de 10 om., contra agua destilad: Se corrige 12 extincién solida por ol reactive en blanco. 6. DETERMINATION DEL BLANCO tive biones Se Leva a cabo en 1a mass forsa cono se ha deserito anteriormente usando agua defonizada freaca en lugar de agua de sar. Las extineiones del blancs, ueande celde de 10 em. no deben exce = der ae 0.075. ‘To= SaLTBRACTON Tol. Solucién standard de agonio T Se peoa 0.100 gr. de sulfate de snonio @.P. 7 ae diauelve en agus deotélada, conpletando luego su volumen a 1000 nl, en: guide se le agrega 1 ml, de cloroforas y se guarda 1a solucitn ‘bien topnda y protegids de la lus. La solucién a8 eetable por uchos nes Bota jolucién eontienes Lal + 15 agat w 7-2, Soluctén standard de agonio IT - 60- Se tona 1,0 nl, de 1s goluedén standard de anonio T y se voces una fiols de 500 =1., luego ‘eromuro 49 potaaio y se comple:e 500 al, con agua deionizada, agrega 10.0 al. de solucién de 1a concentraotén del anonso es equtvalente @ 3.0 meat W/te 1-3. Prosediniento Se greparen 4 standards, midiendo 50 nl. de la solucién stan - dard Ge aaonio IZ y 2 blanoos usando agua dedontzeds en Inger de solucién de enonio, tueco se procede cox se ha desorito ap tectommente y ce calcula ol Castor F de la expresién: dondo Ea = Rxtincién media de los 4 standards y Bb = Mxtinoi¢n media de los 2 blaness. saLcues La concentracién de ancnic 01 Ise mieatras es esloulada como siguer neat W/o = BL xP donde B, = Bxtinos¢n corregide, obtenida en 5 y Po = Pactor obtentée en 7.5 nots Bl nitroprusiato de sodio en conventraciones de 0.5 % ea auficien te pera estalizar 1a reaccién y sroducir un blanco estable y bajo. ~ [a fueras y 1a cantided del hiposlorito de sodio tiene un marcado efecto en 1a reacoién en el agua de mar. = Pars su reacoién completa se requiere de 60 minutos, luego ol com lor producido 96 estable por Lo menos 24 horse = Loe asinofleidos y 1a dres on concentractones do 3.0 ng-at W/L en agus de nar filtrada, BL pH ussdo on 1a pm: nte técnica es de 9.8 para ol agus de nary una frac - eign del todo y ae aqui le tasa de fotosintesis quede celoulada. oo aur 10S ESPECTALES Son necesarioe! 1. Botelles clarae de 250 ml. 2, Botellas oscuras de 250 nl. 3. Equipo de filtracién. 4+ Filtvo de nembrana Millipore 5. Pinza 6. Deseoador. 7, Hipoderaica 2idetien de 2 mle 8, Tnoubader. 9+ Contador Gesgor 10. Cajas de cartén oilindrieas con wa 0 doe perforsciones on 1a tarf pars guardar los filtros y las planchetas de cotre. OMA DE MUESTRA Y SU ALMACENCIBWTO a coleceién de muestras debe hacerse con botellas plésticas © do vidrio. Se reconienda la botellan Yan Dorn. Lae muestras debe ~ rén ser transferidas a botellas de politileno y podréa ser guarda- as a la temperatura del nar por un perfodo no mayor de 2 hora Se toma para cuds nivel de mucstreo 3 auestrass doe en totellas ely rae y una en botells negra. \ortv0s 4.1. Agua do mar filtredar BL agua do mar e6 filtrade usando filtro Millipore HAs 4-2. Soluod lavads Goide nftrice: Se prepara aproxinadanente una solucién al 50% ‘/, ae éotao nftrico concentrate y ce agrega 1 g de urea a cada litro. = oe 4.3. Soluce neutral ae formaidside: Se tons una soiuotén de formaldeide al 40 # de buena calidad, se decanta y se guarda 1a solucién en una totella oscura de vidrio bien tapade « 1a oual ee le he agregado uncs ouantas volitas de carvonate da oaleia. 4ods Ampolies de 140+ Se usan anpollas que contienen un ml. de solucién con une con, centracién de 4 uo. Betas anpollas son obtenidas de Dinsaar- FROCEDDATENTO, Les Se toman para cada nivel de sucetreo 3 muestrass 2 en bote Lae olaras y 1 en Botella osoura, dejando un eopscso de 2a 3 nl. on cada una, 2.+ Se sgrega lentamente ol contenido de una anpolla de 140 de Lal. oon 1a ayuda de una jerings hipodéraiea en el fondo de eas botella, luego se enjuaga 1a jerings con un al. ae la muestra tonada cere del euello de 1a botella y oe resresa a As axpolls y sevanente ae vierte @ 1a botella de auestras 54 ¢2 neceoario oe completa ou volunen con agua de mar £81 = trada, se tapa fuertononte y 6 agita suavonente. Luego so guarde protegida de 1a luz. 3.+ Cuando todas las mucetras han sido inoculedas con 14C, cates ae colocan en el dnoubedor, en ous reapectivos lugares co - rrespondientes al porcentase de penetracién de lus, por pe - rfoto do 6 horas aproxinadsnente. 4o= Al final del experimento, se agregs a cada botella 1 al. ae solucién neutral de formsldeido oon Is ayuda de ura jerings 65 - nipodéraiea. 5. Se Filtra el contenido de les auestras, usando filtro de neg brana Millipore EA 25 am. blanco plane. Se enjunga 1a bote~ 1a 2 veces con poreiones de 10 al, aproxinadanente de agua ao nar filtrada y Finalmente oe lava el enbudo y filtro de monbrana con dos © tres poreionos de 5 al. aproxinadamente ae sgua de mer féltradas 6.= Se seca el filtro mediante succiéa y se tranefiere Iuego con Ye ayuda de una pinza a las on; de cartén y 2¢ mumeras Ey Seguids se guarda cn un desecador. Je- Se mide lo radiouctividad de 1a muestra oolocando el filtre correspondiente y 1a plancheta on un contador Geiger. caveuLos La fotosfntesis en las suestras es caloulada de la siguiente ex- presiént 5 ot x Wx 1.05 ne ofa = Sa donde + CRE = Recuento neto dal filtro CHU, = Totsl del recuento del elemento introducido den, tro de 1a muestra. W = Contenido de carton-carbonato presente en el ‘agua on mg C/a?, 1.05 = factor de correccién por desoriminacién y res piraeisn. N= Minero de horas durante la cual las mucstras hhan sido expuestas a 1a lus. DETERMINACTON DE CLOROFILA "A" Y PEO-PTG La determinacién de 1a materia viva de las plantas en una partfoula de materia orgénics de agua de mar, puode ser hecha mediante los andlisis de clorotitas, caretenoe y xantof

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