UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMERICA

Facultad de Medicina Veterinaria

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE MEDICINA
VETERINARIA

PROYECTO DE TESIS
1. Equipo de investigacin:
Grande Vidal, Lesly Melisa
Tesista

_____________________
Firma

Barrios Arpi, Luis Manuel

Asesor de tesis

_____________________
Firma

2. Ttulo:

3. Cdigo:

Deteccin de anticuerpos contra Babesia canis en perros

con signos clnicos compatibles con babesiosis en la ciudad
de Lima, Per
4. rea de investigacin:
B

Programas
Animales de
compaa

Lneas
1. Caninos

5. Resumen:
La babesiosis canina es una enfermedad mundial, prevalente en regiones tropicales,
transmitida por las garrapatas y causada por parsitos hemoprotozoarios del gnero Babesia y
tambin considerada una zoonosis. Estos organismos causan principalmente la destruccin de
eritrocitos, pudiendo ocasionar diversas complicaciones que involucran mltiples rganos. Si
bien, uno de los mtodos diagnsticos de la enfermedad es el frotis sanguinos, este mtodo no
ofrece resultados satisfactorios. Por otro lado la immunofluorescencia indirecta (IFI) ha
demostrado ser un mtodo confiable para la deteccin indirecta de parsitos en infecciones
patentes u ocultas. Es por ello que el presente estudio busca detectar la presencia de
anticuerpos contra Babesia canis en perros con sintomatologa compatible con babesiosis,
mediante IFI. Para esto se proceder a tomar muestras de sangre de perros con signos clnicos
compatibles con babesiosis, para finalmente obtener as el suero de cada animal, el cual ser
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registrado tomando en cuenta las variables de edad, sexo y raza. Las muestras sern
provenientes de la Clnica de Animales Menores de la Facultad de Medicina Veterinaria de la
UNMSM como de otros consultorios ubicados en la ciudad de Lima. La coleccin de sangre
se obtendr de la vena ceflica y se dejar por treinta minutos en ngulo de 30 grados hasta
separar el suero del coagulo. Las muestras de suero sern enviadas al Centro de diagnstico
para salud de la poblacin animal, donde se realizar la prueba de inmunofluorescencia
indirecta. El presente estudio sera el primero en detectar la presencia de Babesia canis en
Lima, Per, dando paso a estudios posteriores en mtodos diagnsticos, medidas de
prevencin y control adecuadas para esta enfermedad.
Palabras claves: babesiosis, perros, inmunofluorescencia indirecta (IFI)
6. Planteamiento del problema:
La babesiosis canina es una enfermedad de distribucin mundial, transmitida por la garrapata
y causada por parsitos hemoprotozoarios del genero Babesia. En la actualidad estn
identificadas ms de 100 especies de Babesia transmitidas por garrapatas capaces de producir
la enfermedad en un amplio rango de huspedes vertebrados, incluyendo animales
domsticos, silvestres e incluso en el hombre, tomando importancia de esta manera al
clasificarse como una zoonosis.
El perro representa el animal de compaa de mayor importancia como husped de las
distintas especies de Babesia. Se han descrito dos especies de Babesia capaces de parasitar al
perro: una grande, Babesia canis, y otra pequea, Babesia gibsoni. La enfermedad se
presenta en todo el mundo, siendo ms frecuente en zonas tropicales y sub tropicales, cuyas
caractersticas de temperatura y humedad son propicias para el desarrollo de la garrapata.
El diagnstico se basa en la identificacin del parasito en el frotis sanguneo, esto depende
del nivel de parasitemia. El mantenimiento de ciertos niveles de parasitemia, detectables o no
por mtodos laboratoriales, favorece el contagio de nuevos vectores que parasiten a animales
enfermos o portadores inaparentes de babesiosis. Es por ello que un frotis negativo no es
indicativo de ausencia del parasito, recomendndose pruebas serodiagnsticas. Estas han
demostrado ser pruebas confiables para la deteccin indirecta de parsitos en infecciones
patentes u ocultas.
Las personas pueden actuar como huspedes accidentales de Babesia cuando son picados por
garrapatas infectadas. No estn bien documentadas los informes de casos de babesiosis
humana causada por los piroplasmas de animales domstico tales como Babesia bovis o
Babesia canis. Sin embargo los animales domsticos constituyen una fuente de exposicin a
las garrapatas, las que pueden albergar estos organismos infecciosos para los humanos.
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Las investigaciones en Argentina basadas en un diagnstico de frotis sanguneo identificaron

la presencia del vector, sin embargo este mtodo no satisface sus expectativas. Un estudio
realizado en Minas Gerais Brasil, por medio de la inmunofluorescencia indirecta evidenci la
presencia de B. vogeli en 136 de un total de 381 perros.
El Per posee zonas tropicales y subtropicales, como las regiones de la costa y selva, que
permiten el desarrollo del vector y por ende de la enfermedad. Sin embargo, no existen casos
reportados de babesiosis canina en el pas es por ello que se requiere de estudios para poder
detectar la enfermedad en el pas y as poder tomar brindar mtodos diagnsticos, medidas de
prevencin y control adecuadas.
7. Antecedentes:
La babesiosis es una enfermedad de importancia mundial causada por diversos
microorganismos hematozoarios del gnero Babesia. En 1956, se diagnostic en Yugoslavia
el primer caso de babesiosis humana, desde entonces, su casustica en humanos ha aumentado
progresivamente en Europa, y en pases americanos como Estados Unidos, por lo cual, desde
el ao 1976 la OMS la clasific como una zoonosis. (Skravalo y Deanovic, 1994).
La babesiosis canina es una enfermedad parasitaria causada por un hemoparsito de la familia
Babesidae (Babesia canis y B. gibsoni), en particular B. canis presenta tres subespecies, B.
canis canis, B. canis vogeli y B. canis rossi. Este protozoario tiene un ciclo indirecto cuyo
vector transmisor principal es la garrapata comn del perro (Rhipicephalus sanguineus) pero
tambin hay otras del gnero Dermacentor sp. (Cholich et al., 2004)
Babesia canis y Babesia gibsoni son las dos especies que causan babesiosis canina en todo el
mundo. Babesia canis canis es transmitida por Dermacentor reticulatus en Europa y Babesia
canis vogeli por Rhipicephalus sanguineus en muchos pases templados y tropicales (Taboada
y Lobetti, 2008).
Babesia vogeli, es el menos patgeno. La enfermedad se presenta en Francia, Australia,
Japn, Brasil, frica del sur y EE. UU., y por lo general causa enfermedad leve en los
animales adultos, pero una enfermedad grave en algunos cachorros. Babesia canis est muy
extendida en Europa (afectando ms de 400 000 perros por ao solo en Francia) y Asia y es
de patogenicidad media. Babesia rossi se presenta predominantemente en el sur de frica y
es aparentemente el ms virulento de la subespecie (Cholich et al., 2004).
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Babesia canis es un microorganismo relativamente grande (2.4 x 5.0 m), de forma

piriforme, aunque puede observarse bajo distintas formas, y con frecuencia se encuentra se
encuentra en parejas formando un ngulo agudo dentro de los eritrocitos (no obstante,
tambin es comn observar globulos rojos con infeccin nica). Babesia gibsoni es pequeo
(1.0 x 3.2 m), pleomorfica y suele encontrarse aislada dentro de los eritrocitos (Taboada y
Lobetti, 2008).
El cuadro clnico se manifiesta a travs de presentaciones subclnicas y clnicas con cursos
que varan desde sobreagudos, agudos y crnicos. En condiciones naturales, y en zonas
endmicas se puede observar una amplia variedad de manifestaciones clnicas, las ms
frecuentes son hipertermia, anemia regenerativa, palidez de mucosas, trombocitopenia,
postracin, anorexia,
bilirrubinuria, hepato-esplenomegalia, entre otras manifestaciones, dependiendo del curso
(Dominguez, 2011).
El diagnstico definitivo de la babesiosis depende de la demostracin de los organismos
dentro de los eritrocitos infectados, de la amplificacin de su ADN en sangre o tejido
infectado, o bien de resultados serolgicos positivos (Taboada y Lobetti, 2008).
El diagnstico clnico como nico medio no resulta en absoluto fiable, pues ninguno de los
sntomas en patognomnico, sino que, al contrario, son sntomas generales, compatibles con
una gran cantidad de procesos de diferente etiologa y localizacin (Taboada y Lobetti, 2008)
En ocasiones el diagnostico puede ser complicado ya que, aun que los animales aparezcan
afectados clnicamente, no siempre es posible observar los parsitos en los frotis sanguneos,
pues los niveles de parasitemia suelen ser bajos o intermitentes incluso en infecciones
patentes (Manteiga, 2009).
El diagnstico de babesiosis no debe excluirse cuando el resultado de la extensin de sangre
perifrica es negativo, sino que debe recurrirse a pruebas serolgicas. Estas pruebas pueden
son de gran utilidad, sobre todo en estudios epidemiolgicos. La serologa es segura para
detectar parasitemias tan obvias como ocultas. Si bien se dispone de muchas pruebas
serolgicas para la babesiosis canina, la de uso ms comn es la inmunofluorescencia
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indirecta (IFI)
En Argentina la B. canis es la nica especie que se ha sealado, su aparicin es rara y al
parecer es ms frecuente en las zonas tropicales y subtropicales debido a las caractersticas
ambientales de alta humedad y temperatura, que son las propicias para el desarrollo de las
garrapatas (Cholich et al , 2004).
En Venezuela, se estudiaron muestras de sangre de 134 perros. Se Encontr un 2,24% de los
perros, con presencia de infeccin con Babesia spp (Criado-Fornelio et al, 2007).
En estudios sobre la babesiosis canina en Brasil, centrado slo en los perros que viven en
zonas urbanas, sobre todo en las grandes ciudades, donde las tasas de prevalencia variaron de
37,0 % a 67,0 %. (Trapp et al.,2006)
En estudios de Minas Gerais, Brasil se analizaron los perros que viven en zonas rurales, se
encontr que la prevalencia global de infecciones de Babesia (30%) fue menor que las
observadas para sus zonas urbanas (Costa-Jnior et al.,2009)
8. Hiptesis:
Existe la presencia de anticuerpos contra Babesia spp. en perros con sintomatolgica clnica
compatible con babesiosis canina en la ciudad de Lima, Per.
9. Objetivos:
9.1. Objetivo general:
Deteccin serolgica de Babesia canis en perros de la ciudad de Lima, Per.
9.2. Objetivos especficos:
Determinar si la edad, sexo y raza son un factor de riesgo para presentacin de la
enfermedad en los perros de la ciudad de Lima, Per.
10. Materiales y mtodos:
10.1. Lugar de ejecucin y periodo de duracin:
El presente trabajo se llevar a cabo en la Clnica de Animales Menores (CAM) de la
Facultad de Medicina Veterinaria de la UNMSM, ubicada en el distrito de San Borja,
Lima y otras clnicas veterinarias o consultorios de la ciudad.
La realizacin de esta investigacin est comprendida entre los meses de enero a
diciembre del ao 2017.
10.2. Descripcin del material experimental
Materiales de toma de muestra
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Tubos sin anticoagulante

Agujas N 21

Algodn

Alcohol al 70%

Ligadura

Viales

Recipiente hermtico

- Gel refrigerante
10.3. Diseo experimental u observacional
1. Toma de muestras:
a. Lugar de muestreo:
Se colectar sangre de perros con sintomatologa compatible con babesiosis
canina, tomndose en cuenta tambin la infestacin con garrapatas y que sean
atendidos en la CAM-FMV UNMSM, as como otras clnicas o consultorios
veterinarios localizados en la ciudad de Lima.
b. Tipo de muestra:
Se trabajar como mnimo con 1 ml de suero por cada muestra de sangre
colectada por animal.
-

c. Procedimientos:
Un ayudante debe sujetar al perro en posicin decbito esternal sobre
la mesa de exploracin. Este sujetara el cuello y la cabeza del animal
con una mano y con la otra se toma la articulacin del codo, tratando
de extender el antebrazo del perro.
Se realiza la preparacin asptica de la zona que se va a punzar.
Posteriormente se introduce en la vena, la aguja con el sistema
vacutainer y se coloca el tubo sin anticoagulante, se deja llenar
partes del tubo, se retira la aguja de la vena y se coloca algodn con
alcohol, haciendo presin en donde se hizo la puncin.
Evitar mover el tubo, dejarlo a temperatura ambiente en un ngulo de
30 grados hasta formarse el cogulo (30 minutos).
Separa el suero, mantenerla a temperatura de refrigeracin (4 C).

3. Envi de la muestra
- Las muestras de suero sern enviadas al Centro de diagnstico para

salud de la poblacin animal.

La muestra debe ser refrigerada a 4C para su transporte, colocndola
en hielo picado o en una caja fra.

10.4. Anlisis de la informacin:

1. Tamao de muestra:
El valor de n obtenido por esta frmula indica el tamao de la muestra para una
poblacin infinita, a efectos prcticos se considera poblacin infinita.

n= Z2 p.q
d2
n: tamao de muestra
Z: nivel de confianza
p: prevalencia esperada
q: 1- p
d: error mximo permisible
Se estima una prevalencia del 30%, se requiere un 5% de precisin sobre la
poblacin y el nivel de confianza se fija en el 95%. Eltamaodelamuestra
necesarioparadichoestudiosegnlafrmulasera:
n:1,962x0,30x0,70/0,052)=323
10.5. Consideraciones ticas
Se tomar las consideraciones de los principios establecidos por el Consejo de
Organizaciones Internacionales de las Ciencias Mdicas (CIOMS), Ginebra, 1985; los cuales
mencionan:
Principio I: el avance del conocimiento biolgico y el desarrollo de
mejores medios de proteger la salud y el bienestar del hombre y de los
animales requieren recurrir a la experimentacin en animales vivos
intactos de una amplia variedad de especies.
Principio III: Los experimentos con animales deben realizarse solamente
despus de la debida consideracin de su relevancia para la salud humana
o animal y para el avance del conocimiento biolgico.
Principio IV: Los animales seleccionados para un experimento deben ser
de la especie y calidad apropiada, y su nmero no debe ser mayor que el
requerido para obtener resultados cientficamente vlidos.

Principio V: Los investigadores y el resto del personal deben tratar

siempre a los animales como seres sensibles y deben considerar como
imperativo tico su cuidado y uso apropiado y evitarles o minimizarles el
disconfort, diestrs o dolor.
11. Literatura citada:
1. Baruch M.M. 2005. Frecuencia y alteraciones hematolgicas identificadas en
animales afectados con ehrlichiosis y babesiosis canina. Tesis de Mdico Veterinario
Zootecnista. Veracruz: Univ. Veracruzana. 28 p.
2. Cholich, L.A. - Moriena, R.A. - Alvarez, J.D. 2004. Identificacin de
hemoprotozoarios causante de la babesiosis canina en la ciudad de Corrientes. En:
Comunicaciones Cientficas y Tecnolgicas. Corrientes: Univ. Nac.de Nordeste.
3. Costa-Jnior L.M., Ribeiro M.F.B., Rembeck K., Rabelo E.M.L., Zahler-Rinder M.,
Hirzmann J., Pfister K., Passos L.M.F. 2009. Canine babesiosis caused by Babesia
canis vogeli in rural areas of the State of Minas Gerais, Brazil and factors associated
with its seroprevalence. Research in Veterinary Science 86: 257260.
4. Craig. E. 2008. Babesiosis. En: Taboada J, Lobetti R, eds. Enfermedades infecciosas
del perro y el gato. 3ra ed. Argentina: Inter-Medica. p 792-807
5. Domnguez G.G. 2011. Prevalencia e identificacin de hemoparsitos (Ehrlichia
canis, Babesia canis y Anaplasma phagocytophilum) en perros de la ciudad de
Cuenca. Tesis de Grado previa a la obtencin del Ttulo de Mdica Veterinaria
Zootecnista. Cuenca: Univ. de Cuenca. 164p.
6. Manteiga E.F. 2009. Estudio clnico, laboratorial y ecogrfico de la Babesiosis canina
en Galicia. Tesis de Doctor. Lugo: Univ. De Santiago de Compostela. 385 p.
7. Mujica F.F.,Orellana N., Forlano M., Barrios N., Puzzar S., Granda F. 2011.
Seropositividad de Babesiosis Canina en las Parroquias Catedral, Concepcin, Juan de
Villegas, Santa Rosa y Unin del Municipio Iribarren Estado Lara. Gaceta de Ciencias
Veterinarias Vol 15 (N 2): 42-48.
8. Schoeman J.P. 2009. Canine babesiosis. Onderstepoort Journal of Veterinary Research
76: 5966.
9. Trapp S.M., Dagnone A.S., Vidotto O., Freire R.L., Amude A.M., Autran de Morais

H.S. 2006. Seroepidemiology of canine babesiosis and ehrlichiosis in a hospital

population. Veterinary Parasitology 140: 223230.
12. Impacto potencial de los resultados de la investigacin:
El presente trabajo sera el primer estudio que detectara la presencia de anticuerpos contra
Babesia canis en perros de la ciudad de Lima, Per. Permitir determinar si existe asociacin
entre la presentacin de la enfermedad y la raza, sexo y edad del animal. Brindado tambin
paso a una bsqueda de implementacin de mtodos diagnsticos, medidas de control y
prevencin.
13. Estrategia operativa (optativo) y cronograma de ejecucin de actividades:
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
15. Presupuesto:
Setiembre

Octubre

Noviembre

Julio

Junio

Mayo

Marzo
X

Abril

Febrero
X

Prueba de IFI: 19,380.00 soles

Total: 19.480.00 soles

Diciembre

Agosto
X

Materiales de Toma de Muestra: 100.00 soles

Enero

ACTIVIDAD

MES

Toma de muestra

Envi de muestras

Anlisis de datos

Anlisis
estadsticos
Redaccin de tesis