U. N. A.

M
Facultad de Estudios
Superiores Zaragoza

Titulacin y Cromatografa de aminocidos.

EQUIPO 9
Bravo Ruiz Sharon
1452
Vernica
Galicia Galindo Miriam
Gonzlez Hernndez
Adriana
Santiago Martnez Luis
Fernando
Lab. De Bioqumica Celular y de Tejidos
Semestre 2017-1
11 de Octubre de 2016

 Objetivos.Determinar el PKa del a problema por medio de una curva de titulacin.

Analizar y determinar a en la muestra problema por medio de una
cromatografa en capa fina.

Resultados.Titulacin de Aminocido Neutro: Glicina.

PH
6.98
1.78
2

NaOH
(0.097N)
(mL)
0
2
4

Volume
n
0
2

pH

0
0.22

1
Derivada
0
0.11

Punto de
semi2.24
6
2
0.24
0.12 equivalencia.
2.54
8
2
0.3
0.15
3.02
10
2
0.48
0.24
8.15
12
2
5.13
2.565
9.21
14
2
1.06
0.53
Punto de
Valor interpolado en la grfica 1.
semi9.23
14.5
equivalencia.
9.6
16
2
0.39
0.195
10.06
17
1
0.46
0.46
10.25
18
1
0.19
0.19
10.45
19
1
0.2
0.2
10.61
20
1
0.16
0.16
10.86
21
1
0.25
0.25
11.13
22
1
0.27
0.27
11.51
23
1
0.38
0.38
11.95
24
1
0.44
0.44
12.24
25
1
0.29
0.29
12.4
26
1
0.16
0.16
Tabla 1.- PH registrado durante la valoracin de Glicina con NaOH (0.0947N). Calculo de la
primera derivada y puntos de semi-equivalencia.

Cuva de Ph para un aminocido Neutro: Glicina.

14
13
12
11

10.06

10
9

8.15

PH

7
6
5
4

2.24

3
2
1
0

10

12

14

16

18

20

22

24

26

28

Volumen aadido de NAOH 0.097N (mL)

Grafico 1.- Curva de pH para la valoracin de Glicina. Puntos de equivalencia y

semi-equivalencia marcados.

grafico 1 derivada para UN Aminocido Neutro: Glicina.

12
10
8

pH/Volumen 6
4
2
0

10

15

20

25

30

Volumen aadido de NAOH 0.097N (mL)

Grafico 2.- Grafico de 1 derivada v.s volumen para la valoracin de la glicina para la
determinacin de puntos de equivalencia.

Aminocid
o
(estandar)

Distancia
recorrida por el
eluyente (cm)

Histidina

Distancia recorrida
por la muestra (cm)
1.5

Serina

Treonina

4.5

Glicina

4.5

Fenilalanina

12.1

Metionina

6.5

Lisina

1.5

Valina

5.5

Asparagina
Isoleucina

3
6.5

RF
0.123966
94
0.330578
51
0.371900
83
0.371900
83
0.661157
02
0.537190
08
0.123966
94
0.454545
45
0.247933
88
0.537190
08

Cromatogr
afa en
capa fina.

Tabla 2.- Calculo de Rf para los aminocidos estndar.

Distancia
recorrida por el
eluyente (cm)

Titulacin

1.5

3.7

Distancia recorrida
por la muestra (cm)

12.1

6.7

42

3
6.3
Tabla 3.- Calculo de Rf para los muestras problemas.

RF
0.123966
94
0.305785
12
0.553719
01
0.082644
63
3.471074
38
0.520661
16

Anlisis de resultados. Titulacin de aminocidos.

La solucin de Glicina se llev inicialmente a un pH cido para de esa forma se encuentren
protonados tanto el cido Carboxlico como la amina, es decir, a pH cido, el 100% de las
molculas de aminocido se encuentran en forma de catin. La titulacin con NaOH comprende
dos reacciones de equilibrio:
1) Al ir aadiendo equivalentes de base, el grupo carboxilo (-COOH) se disocia, cediendo
protones al medio y transformndose en un grupo carboxilato (COO -); en este equilibrio el
pH = pK1.
2) Al seguir agregando equivalentes de base se disociar el grupo amino (NH 3) cediendo,
tambin, protones al medio obtenindose la forma totalmente desprotonada de la glicina
(-NH2); En este equilibrio el pH=pK2
Se realiz la grfica de la primera derivada para determinar los volmenes
correspondientes a los 2 puntos de equivalencia. Obtenidos estos volmenes se calcul el
punto de semi-equivalencia; en este punto el PH= pk
Se obtuvo as un pk1= 2.24 para el grupo carboxilo
en la glicina y el pK2=9.23 para el grupo amino.
Tericamente el pK del carboxilo se encuentra entre 2
y 3 mientras que el pka del amino se encuentra
alrededor de 9 encontrndose los valores obtenidos
dentro del rango.

Conclusiones. Titulacin de aminocidos: Al valorar una

muestra de glicina se pudo determinar sus pks
experimentales obteniendo un pka=2.24 para
el grupo carboxilo y un pka=9.23 para el grupo
amino encontrndose estos muy cerca de los
tericos lo que nos permite comprobar la desprotonacin de un aminocido neutro
como lo es la glicina en un medio bsico. Las variaciones que pudieron existir en los

resultados pueden deberse a diversos factores tales como las condiciones en que se
encuentra el potencimetro as como la preparacin del reactivo titulante. De esta
manera se cumpli el objetivo para esta parte de la prctica.