Universidad Nacional De Colombia

Facultad De Ciencias
EXTRACCIN E IDENTIFICACIN DE GLICSIDOS CARDIOTNICOS
OBJETIVOS

1. Detectar y analizar la presencia de glicsidos cardiotnicos en hojas de Digitalis sp y

Solanum mammosum .
2. Aprender a evaluar reacciones de identificacin de glicsidos cardiotnicos.
3. Comparar resultados de las diferentes clases de reacciones de deteccin de glicsidos
cardiotnicos de una muestra de Digitalis sp vs muestra problema solanum mammosum.
4. Determinar por medio de cromatografa de capa delgada la presencia de glicsidos
antracnicos en un extracto de Digitalis sp Vs Solanum mammosum.
MARCO TERICO

Algunos compuestos esteroidales ejercen un efecto poderoso sobre el msculo cardiaco y

son conocidos con el nombre de hetersidos o glicsidos cardiotnicos, muchas de estas
sustancias han sido aisladas de especies vegetales, muchas otras se encuentran en
secreciones de algunos sapos o bufos. Los glicsidos cardiotnicos son sustancias
constituidas de una porcin esteroide, una porcin glicosdica y un anillo de gama-lactona,
alfa ,- insaturada o delta-lactona-alfa, -insaturada. Los usos medicinales de algunas de
las plantas que contienen estos compuestos ya eran conocidos por los egipcios desde el
ao 1500 a.c., los romanos usaban Escillamaritima como diurtico, tnico cardiaco, emtico
y veneno para ratas. En la actualidad la fuente natural de glicsidos cardacos est
constituida por Digitalis purpurea que ejerce una accin sobre el msculo cardiaco
(miocardio) de un corazn enfermo y Digitalis lanata que se absorben a nivel intestinal ms
rpido que los glicsidos cardacos de D. purprea.
Los glicsidos cardiotnicos contienen en su molcula uno o ms desoxiazcares solos o
con monosacridos normales unidos siempre al C3 por sustitucin del grupo hidroxilo.Por
hidrlisis enzimtica o cida se generan los azcares libres, una aglicona o genina
esteroidal que puede ser del tipo cardenlido o bufadienlido.Los cardenlidos son
esteroides de 23 tomos de C y poseen una lactona de 5 miembros y insaturada en C17 y
un grupo OH en C14. Los bufadienlidos son esteroides de 24 tomos de C y poseen una
lactona de 6 miembros con doble insaturacin, insaturada en C17 y un grupo OH en C14
[1].

Aglicona de Cardenlido

Aglicona de Bufadienlido

Los glicsidos cardiotnicos pueden ser detectados por pruebas sencillas como la prueba
de Lieberman-Buchard para compuestos esteroidales, reaccin de Keller-Killiani para
detectar lactonas, pruebas para desoxiazcares y CCD empleando reveladores especficos.
Digitalis purpurea es una especie de planta herbcea bienal de la familia de las
scrophulariaceas. El rgano de la planta utilizado por sus virtudes medicinales son las
hojas, La cantidad de principios activos que contienen las hojas vara mucho durante todo el
da. durante la tarde se acumula la mxima cantidad, luego empieza a decrecer, porque la
propia planta destruye los principios activos formados. Al amanecer, las hojas carecen total
o casi totalmente de ellos. Como principales componentes estn en las hojas los glicsidos
A y B y la gitalina, adems de una saponina, la digitonina. Por la gluclisis enzimtica de los
glicsidos A y B se forman la digitoxina y gitoxina. La digitoxina es el ms poderoso
componente y sumamente venenoso.Estos tres glicsidos por hidrlisis en medio cido
forman igual hidrato de carbono pero distintas agliconas: digitoxigenina, gitoxigenina y
gitaligenina [2].
Solanum mammosum es una planta anual perenne de la familia Solanaceae y un pariente
cercano del tomate, es una especie poco comn que se encuentra cerca de viviendas y en
sitios muy alterados, zonas norcentral y atlntica. Arbusto de hasta 1,20 cm de alto,
herbceo o semileoso de tallo espinoso. Entre sus Componentes qumicos encontramos
Catequinas, taninos catequnicos, alcaloides, fenoles simples, flavanonas, hetersidos
cianognicos, saponinas y triterpenos.La fruta tiene diversos usos, tanto ornamentales
como medicinales. Es reputado su uso medicinal en el tratamiento del pie de atleta y la
sinusitis. Tambin es usada como relajante, para tratar la irritabilidad y como detergente.
Los principios activos glicoalcaloides esteroideos (solasodina) se utilizan en la sntesis de
esteroides de utilidad como pesticidas naturales (accin potenciada tambin por los taninos
presentes y los alcaloides) [3].
METODOLOGA

Pruebas de deteccin

Reaccin de Lieberman-Burchard

Reaccin de Kedde o Raymond

Ensayo para la Digitoxosa o Prueba de Xantidrol

Prueba de Keller-Killiani
RESULTADOS

Fig.1. Montaje de la extraccin de izquierda a derecha: Extracto de hojas de Digitalis sp y extracto

de la muestra problema Solanum mammosum con ter de petrleo. a)Fase orgnica b)Fase acuosa.

Fig.2. Montaje correspondiente a la segunda extraccin realizada, de izquierda a derecha: Extracto

de hojas de Digitalis sp y extracto de la muestra problema Solanum mammosum (utilizando
Cloroformo:Metanol (90:10). a)Fase acuosa b)Fase orgnica.

Fig. 3. Resultados obtenidos de las pruebas realizadas al extracto de Digitalis sp, de izquierda a
derecha: a) Muestra blanco, b) Reaccin de Lieberman-Burchard, c) Reaccin de Kedde o Raymond,
d)Ensayo para digitoxosa o prueba de xantidrol y e) Prueba de Keller-Killiani (desoxiazcares).

Fig. 4. Resultados obtenidos de las pruebas realizadas al extracto de la muestra problema Solanum
mammosum, de izquierda a derecha: a) Muestra blanco, b) Reaccin de Lieberman-Burchard, c)
Reaccin de Kedde o Raymond, d)Ensayo para digitoxosa o prueba de xantidrol y e) Prueba de
Keller-Killiani (desoxiazcares).

Fig. 5. Resultados obtenidos en la prueba de cromatografa en capa delgada. De izquierda a

derecha, placa revelada con Vainillina en horno de calentamiento y placa revelada con reactivo de
Kedde, para A:Solanum mammosum, B: Digitalis sp.
DISCUSIN DE RESULTADOS

Ya que, por regla general los hetersidos (glicsidos) son solubles en agua, en la primera
parte de la prctica, se adicionaron 50 mL de agua a cada una de las muestras, esto con el
fin de lograr que se solubilizen en su totalidad generando la homogeneidad de las mismas
permitiendo realizar posteriormente una correcta extraccin de los compuestos de inters.
Despus, se realiz la extraccin del material vegetal con ter de petrleo, siendo este el
mejor agente para la extraccin directa de la grasa en cada una de las muestras por su
carcter apolar, el ter de petrleo en el disolvente disminuye la solubilidad de las
sustancias no grasas, de esta manera logra extraer la mayora de sustancias grasas, es por
esta razn que en este paso nos interesa la recoleccin es de la fase acuosa mas no de la
orgnica, porque se supone que en esta ltima se encuentran los compuestos grasos que
no son de nuestro inters; esta fase orgnica podra contener esteroles, alcoholes de alto
peso molecular, ceras, glicridos o terpenos en cambio, la fase acuosa podra llegar a
contener taninos, alcaloides y glucsidos que son objetivo de estudio en la prctica. Por
esta razn se desecha la fase orgnica y se sigue trabajando con la fase acuosa.
Inmediatamente, obtenida la fase acuosa se le agregan 50 ml de Acetato de Plomo con el
fin de generar la precipitacin de las clorofilas presentes en cada una de las muestras
obteniendo una solucin acuosa libre de clorofilas. La eleccin de un disolvente de
extraccin en general, depende de la solubilidad, volatilidad y toxicidad del compuesto a
extraer en este caso los glucsidos cardiotnicos, son apolares es decir solubles en
solventes orgnicos, en este punto se ha tomado como disolvente de extraccin el
Cloroformo:metanol (9:1) con el fin de lograr extraer los componentes de inters en este
caso la mayora de glucsidos presentes en las muestras; en esta parte finalmente se
trabaja con la fase orgnica, ya que esta contiene los glucsidos, lactonas y azcares, la
indicada para llevar a cabo todas y cada una de las pruebas de deteccin de glicsidos; por
su parte la fase acuosa se desecha y se sigue trabajando con la orgnica. Esta ltima fase
se lleva a concentracin, logrando obtener aproximadamente 5 ml correspondientes para el
desarrollo de las pruebas de deteccin de glucsidos. As, se repartieron para la reaccin de
Lieberman-Burchard, la de Kedde, prueba de xantidrol y prueba de Keller-Killiani (1 ml de
muestra para cada prueba) y 1 ml para CCD. Luego, se llevaron a sequedad los cuatro
tubos con la muestra para llevar a cabo las pruebas de deteccin y se deja 1 ml restante
para realizar CCD.
Por una parte, Digitalis sp contiene hetersidos cardiotnicos (0,30%) derivados de la
digitoxigenina (digitoxina y otros), y de la gitoxigenina y gitaloxigenina (gitoxina, etc.)
flavonoides, saponsidos [4]. Despus de realizar las pruebas, logramos obtener los
resultados (Fig. 3), la cual nos indica y segn lo reportado en la literatura; que para la

reaccin de Lieberman-Burchard, un color rojo-naranja pardo indica la presencia de ncleo

triterpnico y un color azul-verde que cambia con el tiempo indica presencia de ncleo
esteroide con lo que podemos deducir que Digitalis sp presenta esta ltima situacin
(Fig.3b). Para la Reaccin de Kedde o Raymond los glucsidos y agliconas dan color azul o
rojo-violeta indicando que la prueba es positiva, lo que podemos observar es que para
Digitalis sp obtenemos un resultado positivo, es decir que presenta lactonas en su
composicin, ya que el color resultante es un rojo-violeta (Fig. 3c). Para la tercera prueba
indicada como prueba de xantidrol, que nos da a conocer los desoxiazcares presentes en
el extracto vegetal tenemos que para el caso de Digitalis sp es positivo pues la prueba toma
una coloracin roja muy intensa (Fig. 3d). Finalmente para la prueba de Keller-Killiani
buscamos principalmente comprobar la presencia de desoxiazcares en la deteccin
general de hetersidos esteroides que indica que los glicsidos presentes en la muestra
pueden presentar coloracin roja o verde dependiendo el tipo de planta, para este caso
logramos deducir que Digitalis sp da positivo para dicha prueba, ya que, da una coloracin
verde (Fig. 3d) que se desarrolla en la superficie de los dos reactivos esparcindose
gradualmente a la capa superior del cido actico reconociendo generalmente la posible
presencia de D-glucosa, L-Rhamnosa y desoxiazcares como componentes ligados en la
planta [5].
Para Solanum mammosum logramos encontrar en la literatura informacin sobre sus
componentes y/o principios activos, entre los cuales se encuentran los hetersidos
cianognicos, los cuales son un tipo de glicsidos pero no precisamente cardiotnicos y
segn las pruebas realizadas se determina que no contiene glicsidos cardiotnicos de tipo
esteroidal debido a que en la primera reaccin de Lieberman- Burchard, por ejemplo no se
observa un cambio con respecto a la muestra blanco (Fig. 4a-4b). La reaccin de Kedde
nos mostr para esta planta un leve cambio en su coloracin, pues el color observado es
rojo-anaranjado leve indicando posiblemente la presencia de lactonas (Fig. 4c), sin embargo
segn la literatura Solanum mammosum no contiene este tipo de compuestos, lo que
permite analizar que hay podido ocurrir un error durante el desarrollo de esta prueba o que
se haya contaminado dicha prueba. Para la tercera prueba de xantidrol nos da un resultado
negativo, ya que no se observa un cambio de color significante con respecto a la muestra
blanco (Fig.4a.4d). En la ltima prueba realizada correspondiente a Keller-Killiani tambin
se obtuvo un resultado negativo, ya que se observa una coloracin naranja intensa pero en
realidad se le llega a atribuir posiblemente a las trazas de cloruro frrico que son de color
anaranjado mas no por la presencia de algn tipo de glicsido cardiotnico (Fig. 4e). Lo que
permite concluir finalmente que en general Solanum mammosum no contiene glicsidos
cardiotnicos.
Para la cromatografa en capa delgada, en realidad en la experimentacin no se pudo
realizar de una manera adecuada la comparacin entre las dos placas con los diferentes
reveladores; vainillina y el reactivo de Kedde, pero al no tener algn resultado positivo con
las pruebas de identificacin anteriormente descritas, se concluye que Solanum
mammosum no contiene glicsidos cardiotnicos. Al utilizar los reveladores; reactivo de
Kedde y vainillina deben dar manchas rosadas y violetas en ambas placas para confirmar
que efectivamente se trata de glicsidos cardiotnicos. Segn la literatura Digitalis lanata
contiene los glicsidos lanatsido C, que posee la aglicona digoxigenina, unida a dos
molculas de digitoxosa, una molcula de acetildigitoxosa y una molcula de glucosa,
tambin contiene el lanatsido A que posee una estructura similar, con la diferencia de la
aglicosa, digitoxigenina. Digitalis purpurea el glicsido es el purpureoglicsido A, cuya
estructura es idntica al lanatsido C, salvo por la ausencia del grupo acetilo [6].
CONCLUSIONES

Para la muestra de Solanum mammosum se logr determinar que dicha planta no presenta
presencia de glicsidos cardiotnicos.

Se logro determinar la presencia de glicsidos cardiotnicos en la muestra de Digitalis sp

reconocindose de esta manera que es una de las plantas representativas en relacin con
el estudio de dicho grupo de compuestos.
Las reacciones que presentan cambio de color significativo pretende demostrar la presencia
de los glicsidos cardiotnicos de tipo azcares y geninas.
La cromatografa en capa delgada es una buena tcnica, que nos permite corroborar la
presencia de glicsidos cardiotnicos (especficamente uno como por ejemplo Digitoxina
Digoxina) en una determinada muestra, con una mayor precisin, no obstante se hacen
necesarias pruebas de identificacin preliminares a este proceso.
En CCD se denota la presencia de hetersidos cardiotnicos con manchas de color violetarojizo e incluso amarillos en la placa de slica gel para el caso de la muestra de Digitalis sp.
REFERENCIAS

1. Marin Juan Camilo. Prctica 3: Extraccin de Glicsidos Cardiotnicos. Guas de

laboratorio, Farmacognosia y Fitoqumica , Universidad Nacional de Colombia, Facultad de
Ciencias , Departamento de farmacia, Sede Bogot, Pp 9-11.
2. Herbotecnia,2004. [28 Octubre 2016]. Disponible en: http://www.herbotecnia.com.ar/exodigital.html
3.Pinedo M.; Rengifo E.; Cerruti T. 1997. Plantas Medicinales de la Amazonia Peruana.
Estudio de su uso y cultivo. AECI. IIAP.GRL. 304 p. Iquitos-Per
4. Digitalis purpurea Plantas tiles: Linneo. Archivado desde el original el 24 de noviembre
de 2015. Consultado el 29 de Abril de 2016.
5. Trabajo prctico N 5 Glicsidos. Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco.
recopilado de la web el da 28/06/2016 en:
fcn.unp.edu.ar/sitio/farmacognosia/wp-content/uploads/2009/04/tp5_glicosidos_2009.pdf.
6. Sharapin. N, Fundamentos de tecnologa de productos fitoteraputicos, (2000), rea de
Ciencia y Tecnologa del Convenio Andrs Bello & Red Iberoamericana de Productos
Fitofarmacuticos (RIPROFITO).