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Facultad de Odontologa
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Microorganismos a estudiar:
1. Staphylococcus aureus
Coco inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de dimetro, que se divide en tres planos
para formar racimos de uvas, responde positivamente a la tincin de Gram, es
aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmsfera
con o sin oxgeno, no presenta movilidad ni forma cpsula. Es capaz de crecer
hasta con un 10 % de sal comn. Por esto puede crecer en el agua del mar.
2. Streptococcus mutans
Es una bacteria Gram positiva, esfrica, anaerobia, facultativa, perteneciente al
grupo de las bacterias acido lcticas. Estas bacterias crecen en cadenas o pares,
donde la divisin celular ocurre a lo largo de un eje. No mvil, fermentador de
glucosa, lactosa, rafinosa, manitol,i nulina y salicina. Normalmente no desamina
la arginina para producir amoniaco. Pertenece a la gamma hemoltico.
3. Candida albicans
Suele presentarse como una clula oval levaduriforme de 2 a 4 micras, con
paredes finas; sin embargo, en tejidos infectados tambin se han identificado
formas filamentosas de longitud variable, con extremos redondos de 3 a 5 micras
de dimetro y seudohifas, que son clulas alargadas de levadura que permanecen
unidas entre s.
Hiptesis general
Lo que esperamos de sta prctica es realizar un nuevo cultivo, en donde cada
uno de los microorganismos, staphylococcus aureus, Streptococcus mutans y
Candida albicans, sean sembrados de una manera correcta en una caja petri con
una tcnica de estra simple. Y por tanto, observar el crecimiento de cada una de
las colonias aisladas a las 24 horas del cultivo.
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Material y equipo
Materiales de seguridad:
Mechero de alcohol
Asa bacteriolgica,
Cajas de Petri con cultivos bacterianos crecidos: staphylococcus aureus,
Streptococcus mutans y Candida albicans
3 cajas de Petri con agar-agar
Encendedor
Gradilla
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Nota: al 30% puede servir para todas las bacterias pero es ms peligroso, por el
riesgo de quemaduras al entrar en contacto con piel y mucosas.
Palillos estriles
Portaobjetos limpios
Procedimiento
Siembra de microorganismos
Los tutores entregarn tres cajas de cultivo con microorganismos para su
identificacin. Realizar las observaciones y las pruebas de identificacin para cada
una de ellas
Notas: Durante todo el procedimiento se deben tomar fotografas y hacer
anotaciones. Se entregarn tres cajas de cultivo con microrganismos no
identificados (cajas 1, 2 y 3)
Se entregarn tres cajas de cultivo con tres divisiones que corresponden a los
medios:
manitol salado (A)
sabouraud (B)
agar sangre (C)
Se entregar una caja con CHROMagar para la identificacin de C. albicans. Esta
parte de la prctica slo se realizar si se cuenta con el medio de cultivo.
Procedimiento:
1. Preparar el rea de trabajo estril.
2. Identificar las cajas de Petri con las tres
divisiones por medio de etiquetas (medio A,
medio B y medio C) Exp 1, Exp 2 y Exp 3.
3. Esterilizar y enfriar el asa bacteriolgica en un
extremo del medio cultivo (evitar quemadura por
contacto). (Fotografa 1)
4. Tomar una colonia de la caja 1 (Fotografa 2) y
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Prueba de catalasa
Nota: Durante todo el procedimiento se deben tomar fotografas y hacer
anotaciones.
Procedimiento:
1. Depositar una gota de perxido de hidrgeno sobre el portaobjetos (Fotografa
5)
2. Tomar una colonia con un palillo estril.
3. Depositar la colonia en el portaobjetos y esparcirla amanera de crculos (en un
rea restringida, no en toda la laminilla).
4. Obervar si se liberan burbujas de gas.
5. Desechar el palillo y el portaobjetos en el contenedor para los residuos
biolgicos infecciosos.
Resultados
A) Actividades previas a la clase
1) Prctica de tcnica de siembra en gelatina
2) Actividades de apoyo pgina Virtual lab
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B) Actividades en el laboratorio
1) Siembra de los tres microorganismos
En la siembra de microorganismos
obtuvimos tres cultivos nuevos de cajas
de Petri, gracias a la tcnica de siembra
de estra simple, ya que sta tcnica
nos ayud a diferenciar cada una de las
colonias de bacterias.
Sin embargo, el equipo se percat que
en algunos medios, algunas colonias de
microorganismos no pudieron proliferar.
En la imagen nmero 6 podemos
observar los nuevos cultivos de
staphylococcus aureus, Streptococcus
mutans y Candida albicans, a pocos
minutos de haber terminado su siembra
en nuevos medios de cultivo de lado
derecho, mientras que en el lado
izquierdo se encuentran las colonias de
bacterias originales que nos otorgaron
los tutores.
Fotografa 6. Muestras de colonias de
microorganismos
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2) Prueba de catalasa
Discusin de resultados
Desafortunadamente no tuvimos la oportunidad de comparar nuestros resultados
con los de los dems equipos, sin embargo, en nuestro equipo hicimos hincapi
sobre la importancia que tiene cada medio de cultivo para que los
microorganismos proliferen. De eso depende que en algunos medios proliferen
ms que en otros.
Conclusin
Llego a la conclusin que el medio es un factor verdaderamente importante para la
proliferacin de microorganismos o bien, para la inhibicin total de su crecimiento.
Adems que otro factor que influye son las caractersticas fisiolgicas de cada una
de las bacterias, por ejemplo, su sensibilidad a la exposicin al oxgeno.
Tambin concluyo que las medidas de seguridad ocupan un significativo valor
para la realizacin de todas stas pruebas, porque se no ser as, la realizacin de
sta prctica hubiera sido un fracaso, ya que algunos de los organismos son muy
delicados a el medio ambiente en el que son expuestos.
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BIBLIOGRAFA.