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Cours de

Biologie
Molculaire
SVI- S5
(2014-15)

Le dogme centrale de la Biologie Molculaire


Reprsente le mcanisme dexpression de linformation gntique (Francis Crick (fin
des annes 50) et Nature (annes 70))

La transcription
= La Copie dADN en ARN
Besoin dun ADN et dune ARN polymrase

Lexpression des gnes


Processus entier qui
permet le dcodage de
linformation porte par un gne donne. Cette
information qui sera traduite en protine.
La transcription diffrentielle des gnes dans une cellule
(spatio-temporelle) qui permet de dterminer sa
fonction et ses proprits.

Introduction:
Les types dARN

Structure dARN
Transcription et ARN polymrases

Introduction

Les types dARN:


ARN codant:

ARN messager (ARNm)

ARN non codant:


ARN ribosomique (ARNr)
-> Chez les procaryotes on trouve les 16S 5S 23
-> Chez les eucaryotes on trouve les 18S -- 5,8S 28S 5S
ARN de transfert (ARNt)
Small ARN
-> Small nuclear ARN
-> Micro ARN

Introduction

Structure de lARN

- Simple brin
- Sucre: Ribose
- LAdenine est
complmentaire
lUracile

Introduction

ADN (T) vers ARN (U)

Introduction
La mme structure de base pour les diffrents ARN:
Structure primaire & structure secondaire

Appariement
Interne
Appariement due la liaison
faite entre les hydrognes de
deux bases complmentaires
du mme brin

Introduction
Visualisation de la transcription
Le processus de la transcription
peut tre visualiser par
microscopie lectronique
(premire fois en 1970)
Les molcules dADN: filaments
Les molcules dARN: Branches
LADN est double brin et
seulement un des brins sert
comme matrice pour la
transcription: le brin non codant
Le brin complmentaire (qui ne
sert pas de matrice): brin codant

Introduction

Le processus de la transcription

1- Initiation

Le processus de transcription est initi quand lARN polymrase se fixe sur


un ADN modle au niveau dun promoteur

2- Elongation

LADN double brin se dnoue.


LARN polymrase fait la lecture de lADN matrice et ajoute les nuclotides lextrmit
3 dun ARN croissant

3- Terminaison

Arrt de la transcription
Quand lARN polymrase rencontre un squence de terminaison au niveau du brin
dADN matrice:
- Relchement de lARNm et de lARN polymrase (du complexe)

Les ARN polymrases


Chez les procaryotes

Une seule ARN polymrase

Les ARN polymrases


Chez les eucaryotes

4 types dARN polymrase

Transcription chez les bactries

Promoteur

Partie codante

Terminateur

Promoteur Procaryote
Promoteur

Partie codante

1er site de xa2on

Boite Pribnow

Terminateur

A- Transcription chez les procaryotes


Linitiation de la transcription ncessite que la sous-unit sigma de lARN polymrase se fixe
Sur loligomre 2 Core-enzyme pour former lholoenzyme 2.

M.Hunter, 2009

- Fixa2on non spcique du complexe lADN moyennant la sous-unit sigma


- Dplacement jusquau promoteur entre les squences:
- Boite TATA situe -10 pb
- Boite pribnow situe -35 p

M.Hunter, 2009

Terminaison Rho-dpendante

- Transcription en pingle cheveux dune courte squence dADN


riche en paires G-C suivie de plusieurs U, et arrt de lARN
polymrase.
- Fixation sur lARN dune protine de terminaison appele Rho (une
hlicase ARN-ADN/ATP-dpendante sous forme dhomohexamre )
et le complexe dlongation est dissoci.
- Libration du brin no-synthtis du brin dADN matrice.
- Enroulement de lARN autour de la protine Rho au niveau d une
rgion denviron 70 nuclotides ( jusqu 100 nuclotides)

Terminaison Rho-indpendante ou intrinsque


-Au niveau dune squence rpte inverse situe aprs la partie
codante et riche en G-C et suivie de 6A
- Formation dune structure en pingle cheveux dan lARN
transcrit et bloque la transcription.
- Rupture des liaisons entre le brin complmentaire no-synthtis
polyU et le brin complmentaire poly-U et libration du brin dARN
de lADN matrice.

A- Transcrip,on chez les eucaryotes



A chaque type dARN correspond une ARN polymrase

La structure de lARN polymerase II une rsolution de 2,8 A.

En blanc, lARN polymerase II; En bleu, la double


hlice dADN; En rouge, LARN en cours de formation;
En vert, La structure qui fait avancer le brin dADN
dans lenzyme

LARN polymrase III


Par Cryo-microscopie lectronique (2007) on a obtenue la structure tridimensionnelle
de lARN polymrase .

-Prsence de cinq sous-units supplmentaires qui interviennent dans la transcription


(tapes initiale et finale).
- Les sous-units assurent la fixation des facteurs de transcription et la recnnaissance
de lADN.

L'initiation de la transcription chez les


Eucaryotes
Elle est plus complexe chez les eucaryotes car les ARN polymrases ne
reconnaissent pas directement leurs squences promotrices :
5 facteurs de transcription gnraux (Transcription Factor) :

TFII-B, TFII-D, TFII-E, TFII-F et TFII-H)


doivent d'abord mdier la Oixation des ARN polymrases et l'initiation
de la transcription.
Le complexe complet [ARN polymrase - facteurs de transcription -
squence ADN du promoteur] est appel complexe de pr-initiation
de la transcription.

Ce complexe assure :

le chargement prcis de l'ARN polymrase II (Pol II) sur le bon


site de dmarrage de la transcription
la dshybridation (ouverture) de l'ADN au niveau du promoteur
le relarguage de Pol II du promoteur

Rfrences:


















hTp://biochimej.univangers.fr/Page2/COURS/7RelStructFonc2on/2Biochimie/
1SyntheseProteines/1SyntheseProt.htm