Andrea Newman

Anatoma Patolgica
20/11/2013

CITOLOGA E IHQ
CLASE 03

En esta clase se continuar con los Mtodos Diagnsticos utilizados en Anatoma Patolgica

1.-AUTOPSIA _______________________________________________________________________________________________________
Es utilizado en cadveres y su funcin ms importante consiste en determinar la causa de muerte del
paciente, es recomendable que como mdicos generales soliciten las autopsias ya que nos pueden
proporcionar bastante informacin sobre el paciente, sin embargo en la actualidad la solicitud de las autopsias
ha ido en decadencia, porque no se le da la importancia que merece.

2.- BIOPSIA __________________________________________________________________________________________________________

Es un mtodo utilizado en Anatoma Patolgica que consiste en extraer un tejido vivo, con el objetivo de
confirmar un diagnstico y en base a ese diagnstico el mdico tratante puede establecer una conducta
teraputica. Existen dos tipos de Biopsias:
- Incisional: se extirpa quirrgicamente slo un trozo de tejido, masa o tumor, es utilizado solo para
diagnstico. Ej.: Puncin con aguja gruesa, microscpica, estereotxica.
- Excisional: es la extirpacin completa de un rgano o un tumor, es utilizado como tratamiento y
tambin para diagnostico. Ej.: linfadenectoma, esplenectoma, colectoma.

3.-CITOLOGA_____________________________________________________________________________________________________
Es un mtodo diagnstico utilizado en Anatoma patolgica, donde se estudia la morfologa de clulas
desprendidas, es decir, no aquellas que estn unidas una a la otra formando un tejido sino que se encuentran
aisladas. Cada clula tiene caractersticas muy particulares dependiendo de su origen, que nos orienta a si se
trata de un proceso inflamatorio o neoplsico (benigno o maligno). Importante saber que la citologa NO nos
brinda un diagnstico preciso, ella es orientadora y a partir del resultado que sta nos proporcione el mdico
decidir si toma una biopsia o no, el patlogo puede recomendar ampliar el estudio (tomar biopsia) basndose
en las caracterstica nucleares y citoplasmticas de las clulas estudiadas.
Conclusin: la citologa tiene por objeto el estudio de clulas desprendidas o extradas de un tejido vivo, para
ver su forma y obtener una impresin u orientacin diagnstica.
Existen casos donde la Citologa si puede proporcionar un diagnostico, como por ejemplo en Infecciones del
tracto gential por Candida, VPH, Tricomona, ya que se observan los cambios estructurales por accin del virus
en clulas del cuello uterino, dndonos una impresin diagnstica.
Nota: la profesora a pesar de que al principio del prrafo anterior dice que si proporciona un diagnostico, al
final repite que la citologa es orientadora, solo da una impresin diagnstica y no un diagnostico definitivo.

INDICACIONES DE LA CITOLOGA ______________________________________________________________________________________

La citologa se usa como despistaje, ya que es econmica, la toma de muestra es sencilla, sin complicaciones
y poco invasiva, por lo tanto sirve para estudiar masas poblacionales, grandes nmeros de personas por
tiempo y as poder tener una impresin diagnstica de esa poblacin estudiada. Ej.: la citologa Crvicovaginal
Despistar lesiones premalignas de malignas
Diagnstico de procesos inflamatorios.
Control post-tratamiento.
1 DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica
Ej.: Infecciones crvico-vaginales por candidiasis o tricomoniasis, en neoplasias de algunos rganos y
tejidos para saber si hay respuesta o no al tratamiento.
VPH puede ser o no el caso, ya que puede tener un NIC (neoplasia intracelular) y la conducta es hacerle
una extraccin de tejido y el mdico puede solicitar la citologa para ver si se extrajo todas las clulas
neoplsicas, pero si el paciente solo tiene VPH recuerden que el virus siempre va estar, por ende la
citologa siempre saldr positiva.

Diagnstico de tumores con primario desconocido.

Persistencia y recurrencia de tumores.

Ej.: en pacientes que fueron portadores de linfoma y que en el tiempo aparezca un aumento de volumen
de un ganglio, antes de extraer el ganglio se le hace una Puncin con Aguja Fina para saber si se trata de
una neoplasia benigna o corresponde al Linfoma que previamente tuvo.

Control estadstico de una poblacin. Es importante que como mdicos rurales registren los resultados
de las citologas Crico-vaginales, ya que hoy en da no existe un registro bien estructurado y por lo
tanto no se sabemos la incidencia de distintas enfermedades, como por ejemplo, de lesiones
premalignas de cuello uterino en el Edo. Mrida.

SITIO DE TOMA DE MUESTRA DE LA CITOLOGA ______________________________________________________________________

Se dividen en dos grupos:

Crvico-vaginales: son las ms frecuentes

Otros: se pueden obtener de cualquier rgano prcticamente y nos orienta en la presencia de
patologas. No es lo mismo que una mujer se haga un biopsia de mama, as sea incisional, a que se
haga una citologa por PAAF en la que solo se introduce una aguja fina y que en cualquier ambulatoria
el mdico puede realizarla. Se le puede hacer puncin a mamas, tiroides, rbol bronquial a travs del
fibrobroncoscopio, ganglios linfticos, tejidos blandos, es decir, todo rgano que se pueda acceder con
una aguja de ese tamao, por lo que no se puede hacer puncin de aguja fina de rganos internos,
como rin.

TIPO DE CITOLOGA ________________________________________________________________________________________________

Se dividen en dos grupos:

Descamacin espontnea o Citologa exfoliativa: el material que se va a obtener corresponde a

clulas que se desprenden normalmente, da a da, en nuestro epitelio, no se ejerce ninguna fuerza o
presin para su obtencin, no hay que raspar.

Ej.: Citologa Crvico-vaginal: para tomar la muestra de Exocervix se utiliza una esptula de AYRE pero si
la tenemos se puede usa un hisopo, y lo ideal para la toma de Endocervix es un cepillo (cito-brush), a
pesar que se realiza con un cepillo no se ejerce fuerza a la hora de tomar la muestra por lo que NO es una
toma activa sino una Citologa exfoliativa, si no lo tenemos tambin se puede usar un hisopo.
Esputo: se obtienen clulas que se desprenden espontneamente del rbol bronquial, haciendo que el
paciente tosa y expectore, para luego hacer un tendido sobre la lmina y proceder a colorear.
Orina: se estudian las clulas que se observan en orina, se realiza en casos de sospecha de neoplasia
de vas urinarias, el paciente recoge la muestra (primera orina de la maana) por tres da consecutivos ya
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Anatoma Patolgica
que la descamacin del urotelio no es tan rpida o constante como la del epitelio del cuello uterino, la orina
es centrifugada y se obtiene las clulas descamadas para su estudio.

Toma activa por raspado: se ejerce fuerza para tomar la muestra.

Ej.: Cepillado y lavado bronquial: se introduce un Fibrobroncoscopio y en su extremo hay pequeos cepillos
para extraer tejido del rbol bronquial y con los mismos cepillos se hace el tendido sobre la lmina.
Generalmente sta se solicita en caso de sospecha de Neoplasia maligna mientras que la Citologa exfoliativa
es solicitada en caso de que se sospeche de Procesos Infecciosos.
Lesiones de piel: se hace un raspado activo con una hojilla o aguja (sin cortar al paciente), en casos de
parsitos o micosis.

Toma activa por Impronta: se hace a partir de un

fragmento de tejido tipo biopsia, obteniendo el resultado de
la citologa antes que el de la biopsia. Se hace en casos
urgentes donde no se puede esperar los tres das de
procesamiento de la biopsia. Se realiza tomando el
fragmento y presionndolo varias veces contra la laminilla
(como sellos sobre la lmina) y alguna de las clulas quedan
pegadas. El tejido no puede estar fijado en formol al
momento de presionarlo contra la laminilla ya que es posible
que no se desprenda ninguna clula. Es muy utilizada en
casos de ganglio linftico y muchas veces da ms
informacin la impronta que la biopsia por corte congelado.

Toma activa por Puncin-Aspiracin con Aguja Fina (PAAF): es una forma de citologa por toma
activa, es un mtodo sencillo, econmico, poco invasivo y brinda mucha informacin ya que se puede
obtener gran cantidad de material y tiene gran valor porque nos puede dar una orientacin diagnstica
rpida. Se realiza con una aguja fina (calibre 21 22) que en jeringas normales que se pueden obtener
en cualquier farmacia. La pistola permite un mejor manejo de la jeringa sin embargo no es necesaria.
Lo ideal es que se haga guiada ya sea por un Ultrasonido o TAC en caso de que se trate de lesiones
no palpables.

Es muy efectiva en caso de Neoplasias e Inflamaciones de ah se obtiene mucho material, pero una puncin
en un sitio sano no se va a obtener nada.
Quiste: cavidad con contenido lquido (pus, sangre o tumor) rodeado de tejido fibroso, el PAAF es excelente
para llegar a ese contenido, poder aspirarlo, obteniendo gran cantidad de material
Observar en un PAAF de un ndulo en mama, cmo se ve la aguja en el Ultrasonido y la jeringa ya cargada
de material (diapositiva 14).
PAAF en tiroides se utiliza obligatoriamente equipos de imageneologa para guiarse ya que se trata de una
zona donde se encuentran estructuras muy importantes y no se puede correr con el riesgo de punzarlas
(diapositiva 15). Normalmente es realizada por el mdico tratante en conjunto con un imagenelogo, en el
caso de los obstetras pueden hacerlo solos ya que ellos tienen buen manejo del ultrasonido, sin embargo es
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Anatoma Patolgica
recomendable que lo hagan dos personas, para que la persona que introduce la aguja disponga de sus dos
manos. La amniocentesis es un tipo de PAAF.

MANEJO DE LA MUESTRA______________________________________________________________________________________________
El punto de diferencia ms importante con respecto a la Biopsia es el manejo de la muestra, ya que se fija de
manera distinta.
Al igual que en la Biopsia debe llenarse con la mayor cantidad de informacin posible la Solicitud de Citologa.
En aquellos casos de citologas Crvico-vaginales siempre debe estar la edad de la paciente y la FUR (fecha
de la ltima regla), porque el patlogo no solo hace diagnstico de procesos infecciosos o no, tambin en
base a las caractersticas de las clulas del cuello uterino el patlogo puede decir si la paciente est
funcionando bien desde el punto de vista hormonal; si hay maduracin o no de esas clulas acorde al da de
ciclo menstrual.
Es recomendable preparar el material necesario antes de proceder a realizar la citologa.
Rotulen la lmina colocando el nombre y edad del paciente.
Los pasos son tomar la muestra, realizar el extendido y fijar inmediatamente, la citologa es mucho ms lbil;
ms fcil que la clula se autolice, incluso ms que la biopsia.
Por ltimo el traslado de la muestra al laboratorio de Anatoma Patolgica.

PASOS PARA LA TOMA DE MUESTRA__________________________________________________________________________________

Los materiales para toma de muestra: son el espculo, la esptula de
AYRE que viene con extremos especializados para introducirlos en el
exocervix y el cepillo cito-brush para el endocervix y las jeringas. Existen
agujas especiales para las punciones de Tiroides que son un poco ms
largas que las normales y se pueden reutilizar.
El extendido de la muestra: la mayora de las lminas tienen un extremo
esmerilado donde se puede escribir con lpiz de grafito y eso no se va a
borrar, si no hay otra donde se le puede pegar un tipo de etiqueta o existen
marcadores indelebles para rotular la lmina con el nombre la paciente legible.
Fijacin inmediata de la muestra: es este caso no se fija con formol, lo ideal es fijarla con Spray, los cuales
son bastante accesibles, se roca la lmina que ya contiene la muestra, una vez rociada baja el riesgo de que
ese material se desprenda y se pierda. En caso no disponer de los fijadores en Spray que son polmeros o
plsticos solubles en agua, se puede utilizar Laca para el cabello pero se le tiene que notificar sto al
patlogo, no es de rutina solo en emergencias.
Tambin se pueden utilizar fijadores lquidos como el alcohol isoproplico 95%,
entonces luego de rotular la lmina y realizar el extendido, se introduce la lmina en
el envase con alcohol, sin temor porque no se desprenden las clulas, stas se
adhieren a la lmina y as se lleva al patlogo, incluso se pueden colocar en el
envase de alcohol varias lminas y se separan sosteniendo cada una con un clip es
su extremo, sin que se contamine la muestra. Otro fijador es el Alcohol-ter 50%,
que contiene 50% de alcohol y 50% de ter, , mejor que el alcohol solo
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Anatoma Patolgica
y el procedimiento es igual que con el alcohol isoproplico 95%.
En el caso de la jeringa que contiene la muestra se puede aspirar una proporcin de alcohol por cinco
proporciones de lquido correspondiente a la muestra. Ej.: Si la jeringa contiene 5cc de lquido, se aspira 1cc
de alcohol. La jeringa con lquido tenga o no alcohol se puede meter en la nevera mientras el patlogo la
procesa, pero no puede estar ms de 24hr si no contiene alcohol, si tiene alcohol debe procesarse antes de
los tres das de tomada la muestra. Lo ideal es que se fije, incluso es preferible que se le coloque as sea un
poco de formol si no dispones de alcohol. Si le pusieron o no fijadores lquidos debe notificarse al patlogo.
El patlogo al recibir la jeringa centrifuga el lquido y realiza el extendido
Coloracin: la coloracin de rutina en la citologa es la de
Papanicolaon, existe un kit excelente llamado PAP-MART, que es el
mismo Papanicolaon pero en pasos ms cortos, en 3-4min ya est
coloreada la lmina, es utilizada en casos de emergencia ya que es
muy costoso.
Las propiedades de tincin con Papanicolaon: los ncleos se ven
basoflicos (morado), el citoplasma va a dar una serie de matices
dependiendo de la maduracin de la clula y los microorganismos
ser de un Azul verdoso o rosado, segn afinidad tintorial de la
clula. Es diferente a la H-E pues tiene ms colores.
George Papanicolaon por casualidad en 1928 hizo un hallazgo de algunas clulas que se desprendan del
cuello uterino (endocervix) pero que se encontraron en extendidos de vagina y no se saba la causa. Para
1939 se pudieron hacer por primera vez identificaciones de clulas neoplsicas malignas con 100% de certeza
de que eran de cuello uterino sin otras manifestaciones de la enfermedad, es decir, se pude hacer diagnstico
de Neoplasia de cuello uterino primario y luego el mtodo se perfeccion y hasta el da de hoy se utilizan.

SISTEMA BETHESDA_______________________________________________________________________________________________
No necesito que lo aprendan, pero que sepan que existe, se utiliza para el rea de Ginecologa y se llama
Bethesda porque fue una reunin de varios organismos internacionales en el Instituto Nacional de Cncer en
Bethesda que es una ciudad de Estados Unidos, el objetivo de la reunin fue unificar criterios y
nomenclaturas, ya que antes de la Clasificacin de Sistema de Bethesda exista cualquier cantidad de
categorizaciones para las citologas. Se introdujeron dos conceptos las Lesiones Intraepiteliales de bajo grado
(LIEBG) y las Lesiones Intraepiteliales de alto grado (LIEAG), que en cualquier parte del mundo se debe saber
a qu se refiere.
As es como se debe reportar un informe de Citologa por
el Sistema de Bethesda:
Calidad de la muestra: buena o suficiente o no.
La seccin III solo para aquellos casos que no entran en la
seccin II, sino que ya hay cambios en las clulas
epiteliales.
Recuerden que el rea crvico-vaginal pueden haber
clulas epiteliales planas o escamosas que corresponden
a exocervix y vagina y pueden haber clulas glandulares.
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DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica
Epitelio Plano Estratificado no Queratinizado es el epitelio normal de la vagina y Exocervix.
El trmino clulas epiteliales escamosas se refiere a Epitelio Plano Estratificado Queratinizado o no.
Los LIE aparecen en la Seccin III, los de bajo grado corresponde a la infeccin por VPH o NIC I con VPH y
los de alto grado a los NIC II y NIC III y ms all aparecen los carcinomas propiamente.
Pueden hacerse comentarios adicionales. Ej.: respuesta hormonal de la paciente; si est acorde o no al siclo
menstrual, presencia de agentes infecciosos.

CONCLUSIONES____________________________________________________________________________________________________
Al hacer diagnstico de un LIE de bajo grado ya se est
haciendo una deteccin antes de que se convierta en cncer.
Hay que educar, sugerir a nuestros
realizacin de citologas Crvico-vaginales.

seres

queridos

la

La PAAF aporta gran cantidad de material y mientras ste sea

mayor, mejor ser la orientacin diagnstica que el patlogo
puede hacer.
La citologa es fundamental pero solo nos da una orientacin
diagnstica, sucede que a veces la citologa solo reporta
hallazgos compatibles con VPH y el paciente no solo puede
tener VPH sino que tambin puede tener NIC pero eso puede
o no aparecer en la citologa, ya que hay que recordar que en
la citologa se estudian clulas descamadas, dentro de las
que pueden estar o no clulas con NIC. Es el mdico el que
debe decidir si biopsiar o no, ya que l es el que est viendo
directamente todo el epitelio de la paciente. Es por esto que la
citologa solo da una orientacin diagnstica pero el
diagnstico definitivo lo da solo la Biopsia.

EJEMPLO DE PUNCIONES______________________________________________________________________________________________
Puncin activa por PAAF

DESGRABES IV AO

Descamacin espontnea
O Citologa Exfoliativa

Puncin Lumbar:
Puncin activa por PAA

Anatoma Patolgica

Puncin de tejidos blandos:

Puncin activa por PAAF

Informacin adicional:
Cunta cantidad debo enviar en la jeringa? No hay lmites establecidos, mientras mayor cantidad ms
informacin se podr obtener, sin embargo el mdico debe decidir la cantidad de acuerdo al criterio de la
lesin, tamao de la lesin, tamao de la jeringa.
Puede hacerse el extendido del endocervix en una mitad de la lmina y en la otra mitad el extendido del
exocervix, o puede hacerse cada extendido en lminas separadas, es indiferente porque el patlogo sabr
cual es cual. Cuando se trata de vagina y exocervix si se deben hacer separadas ya que ambos son Epitelio
Estratificado Plano.

4.-OTROS MTODOS DIAGNSTICOS__________________________________________________________________________________

Existen casos en donde por ninguno de los mtodo mencionado hasta ahora se puede hacer un diagnstico,
como es el caso de tumores poco diferenciados, muy agresivos, las clulas son muy cromticas, es decir, que
pierden su genotipo normal, y no se puede decir con certeza qu tipo de clula es o de donde proviene. Ej.: en
metstasis a ganglios linfticos, donde se puede saber que es una metstasis pero no de donde viene. En
estos casos tenemos que recurrir a Otros Mtodos de Diagnstico, que no son mtodos utilizados de rutina
sino que son complementarios.
El propsito de la clase no es que se los aprendan de memoria pero que si conozcan su existencia, incluso
hay muchos de ellos que no se realizan en Venezuela y que tenemos en ocasiones que enviarlos al exterior.
En lo que respecta a Inmunohistoqumica si es necesario que lo comprendan.
Estos Mtodos Diagnsticos son: Inmunohistoqumica, Inmunofluorescencia, Microscopia Electrnica,
Reaccin en Cadena Polimeraza (PCR), Hibridacin in situ y otros estudios de ADN llamados Microarreglos
donde se estudian porciones de ADN.

INMUNOHISTOQUMICA (IHQ)________________________________________________________________________________________
Se basa en un principio inmunolgico, es una reaccin antgeno-anticuerpo, que permite identificar antgenos
presentes en las clulas o tejidos. Los antgenos pueden estar presentes en la membrana celular, en el
citoplasma o en el ncleo de la clula, dichos antgenos son como cdulas de identidad que nos indican si se
trata de clulas epiteliales, clulas mesenquimticas o clulas linfoides, es decir, nos permite identificar y
clasificar a las clulas.
En antgeno est presente en la clula que conforma los tejidos, mientras que el anticuerpo se agrega de
manera manual y ya vienen preparados en kits muy costosos.
Se puede hacer con tejidos fijados en formol y tambin en tejidos que tienen aos incluidos en bloques de
parafina, pero solo si una vez tomada la muestra fue fijada en formol, porque de lo contario no solo se pierde
la estructura de la clula, sino tambin la informacin que esta clula contiene como son los antgenos, se
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DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica
pierde su expresin antignica. Entonces, se puede realizar en muestras que ya han sido tomadas no hay que
rebiopsiar al paciente, si al colorear la muestra con H-E se obtiene una aproximacin al diagnstico, con ese
mismo material, es decir, del mismo bloque de parafina que ya se le tom al paciente se puede hacer el
estudio de Inmunohistoqumica, no se puede hacer el estudio con una lmina que ya haya sido coloreada con
H-E.
Cuando la reaccin Ag-Ac es positiva se observar en la lmina un color marrn o pardo, esto se debe a que
los anticuerpos estn marcados con una sustancia que se llama cromgeno la cual se activa una vez que se
une el anticuerpo al antgeno de la clula. Ej.: si yo quiero saber que esas clulas tumorales son de origen
epitelial, para tal efecto voy a agregar un anticuerpo que es especfico para clulas epiteliales, si la reaccin
es positiva observo un color marrn o pardo amarillento eso me indica que dichas clulas tienen antgenos de
clulas epiteliales, si no aparece coloracin indica que el anticuerpo no se uni a ningn antgeno por lo tanto
esas clulas no son de origen epitelial pues no tienen antgenos de clulas epiteliales.
Recordar que la Inmunohistoqumica se utiliza en aquellos casos donde con la coloracin H-E no tengo la
certeza de que tipo de clula se trata. La Inmunohistoqumica tambin se puede realizar en muestras de
Citologa sin embargo aqu en Venezuela se prefiere antes biopsiar debido al alto costo de la prueba de
Inmunohistoqumica, tambin se puede hacer en corte congelado, sin embargo hay que recordar que el corte
congelado no da una definicin celular tan buena, entonces podramos gastar un prueba en un material que
quizs no nos vaya aclarar el panorama.
La Inmunohistoqumica NO es una coloracin especial, no permite hacer diagnstico de benignidad o
malignidad, lo que te permite es saber cul es el tipo, lnea o estirpe celular que est generando ese tumor.
Para preservar adecuadamente los antgenos presentes en ese tejido y poder as obtener resultados ptimos
y confiables de ese material que est fijado en bloque de parafina debe haber una fijacin inmediata del
material con formol al 10% y de esta manera se asegura el prevalecimiento de la expresin antignica
(presencia de molculas en la membrana, citoplasma o ncleo celular)

INDICACIONES DE LA IHQ_________________________________________________________________________________________

Determinar estirpe celular: permite a los patlogos indicar el tipo histolgico del tumor, si es originado
de clulas epiteliales, mesenquimticas o linfoides y en base a eso el mdico establece el tipo de
tratamiento.
Clasificacin de Linfomas: con H-E el patlogo solo puede saber si es Hodgkin o no Hodgkin, pero
no puede saber si son clulas tipo B o tipo T porque stas son iguales vistas por H-E, por lo que se
debe solicitar IHQ. La clasificacin es inmensa as como tambin la conducta teraputica.
A veces el paciente puede debutar con una Adenopata y al extraer el ganglio se trata de una metstasis,
sabemos que es una metstasis si encontramos en el ganglio una lnea celular diferente a la linfoide, por
ejemplo si encontramos clulas epiteliales se tratara de un carcinoma metastsico, pero es difcil saber de
dnde proviene esa clula epitelial, la IHQ es la que nos va permitir saber si se trata de una clula epitelial de
pulmn, de mama Porque cada clula tiene una expresin antignica que la identifica no solo con respecto
a su origen sino tambin a que rgano pertenece.

Localizacin primaria de lesiones metastsicas

Factor pronstico: hoy en da toda paciente con cncer de mama se le tiene que hacer unos estudios
de IHQ obligatorios para saber si el tratamiento que se le va a colocar va a ser hormonodependiente o

DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica
no y cul va a ser en el tiempo la probable respuesta a ese tratamiento, hoy en da tambin se est
utilizando como factor pronstico en carcinoma gstrico, melanoma, entre otros.
Identificar agentes infecciosos: sobre todo virales, ya existen anticuerpos para detectar VPH, CMV,
Hepatitis B, entre otros.

TIPOS DE MARCAJE EN IHQ___________________________________________________________________________________________

La IHQ de acuerdo a donde se encuentre el antgeno va a tener un marcaje:

Marcaje de Membrana: el antgeno se encuentra en la membrana,

de manera que se va a teir solo la membrana. Ej.: Oncogen c-erbB2 HER-2/neu

Marcaje en Citoplasma Filamentos intermedios: como la

keratina, la vimentina, los neurofilamentos, que son estructurales,
es decir, le dan forma a la clula, entonces el marcaje ser
citoplasmtico sin que se tia el ncleo, solo el citoplasma.

Marcaje nuclear: como los receptores hormonales, como es el caso del Estrgeno y Progesterona,
vean como se tie solo el ncleo.

RE(+) y RP(+)

MARCADORES CON IMPORTANTE VALOR PRONSTICO EN CA DE MAMA____________________________________

________

Los Receptores de Estrgeno y Progesterona tienen un importante valor pronstico en el Cncer de Mama,
predice el comportamiento y respuesta al tratamiento. Ej.: las pacientes que resulten Positivos para
Receptores de Estrgenos y Progesterona, RE (+) y RP (+), van a tener mejor respuesta al tratamiento y
mejor pronstico que aquellas pacientes con Cncer de mama con RE (-) RP (-)

DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica

RE (-) RP (-)

El marcador para Oncogen c-erbB-2 (HER-2/neu o HER 2) si ste es positivo indica un mal pronstico, est
asociado con la progresin de la enfermedad y metstasis, se observa en los Cncer de mama ms
agresivos, con mayor plemorfismo y estados ms avanzados.
Plemorfismo: es usado para describir una variabilidad en tamao y forma de clulas y/o sus ncleos, es una
caracterstica tpica de neoplasias malignas expresar una variedad de apariencias.
Conclusin: la IHQ nos sirve para identificar el tipo celular y de donde proviene, Ej.: epitelial de mama. Nos
brinda informacin pronstica. Todo Linfoma se debe someter a IHQ.

INMUNOFLUORESCENCIA____________________________________________________________________________________________
Tiene el mismo principio que la IHQ, se base en una reaccin Ag-Ac, pero el
Anticuerpo no viene marcado con un cromgeno sino con una molcula
fluorescente llamada Isotiocianato de Fluorescena (fitc) y debe ser observada
con un microscopio especial (microscopa fluorescente)

MICROSCOPA ELECTRNICA___________________________________________________________________________________________
Hoy en da casi en desuso, debido a que ha sido desplazada por la IHQ
por ser menos complicada y brindarnos ms informacin adems los
aparatos de la Microscopia electrnica son extremadamente grandes,
costosos y difciles de manipular. Hace 20 aos atrs era sta la que nos
aclaraba las dudas.
Alcanza una magnificacin bastante grande, utiliza haces de electrones y
permite el estudio ultraestructural de los tejidos (membrana celular y
organelas).

PCR________________________________________________________________________________________________________________
Tcnica basada en Biologa molecular, descrita y creada por Kary Mullis en
1985, motivo por el cual se le otorg el premio Nobel de Qumica en 1993.
PCR significa Reaccin en Cadena de la Polimerasa, con esta tcnica se
amplifica un fragmento muy pequeo de ADN en un gran nmero de copias.
Utiliza un equipo llamado Termociclador que hace el papel de
fotocopiadora copiando muchas veces el mismo fragmento de ADN. Se
fundamente en una propiedad natural de unas enzimas que se llaman
Polimerasas para replicar los fragmentos

10 DESGRABES IV AO

Anatoma Patolgica
Permite identificar agentes infecciosos causantes de enfermedades, identificar personas (cadveres) o hacer
investigacin cientfica sobre el ADN amplificado.

HIBRIDACIN IN SITU_______________________________________________________________________________________________
Se utiliza para detectar o localizar pequeas secuencias especficas de
ADN dentro de algunos tejidos
Permite identificar agentes infecciosos, alteraciones
patologas de origen gentico (neoplasias), etc.

cromosmicas,

Est basada en la capacidad que poseen los cidos nucleicos para

hibridarse (unirse) entre s.
Consiste en colocar una sonda marcada con una sustancia fluorescente
(porcin de ADN previamente conocida) junto a la muestra que contiene
otros fragmentos de ADN, si esta sonda realiza una unin especfica y
exacta se activa esa molcula fluorescente, hacindose la secuencia visible.
Ej.: si la secuencia que quiero identificar es Adenina-Guanina-Citosina, voy a introducir una sonda marcada de
secuencia Timina-Citosina-Guanina, sabiendo que la Adenina se une a la Timina y la Guanina a la Citosina.

MICROARREGLOS O MICROCHIPS (MICROARRAY)____________________________________________________________________

Se utilizan placas slidas de vidrio, plstico o silicio donde
se unen fragmentos de ADN para estudiar la expresin de
diferentes genes pero en grandes cantidades, es decir,
permite definir patrones o niveles de expresin de varios
genes, por lo que se utiliza sobre todo en caso de
Enfermedades Genticas como malformaciones y algunos
tumores que estn asociados a alteraciones genticas.
Las principales aplicaciones son la Clasificacin de
Neoplasia que morfolgicamente pueden ser similares
pero genticamente diferentes, tambin permite evaluar
pronstico del paciente.
Sacado de Wikipedia.
Aplicaciones:
- Estudio de genes que se expresan diferencialmente entre varias condiciones (sanos/enfermos,
mutantes/salvajes, tratados/no tratados).
- Clasificacin molecular en enfermedades complejas. Identificacin de genes caractersticos de una
patologa (firma o signature).
- Prediccin de respuesta a un tratamiento.
- Deteccin de mutaciones y polimorfismos de un nico gen (SNP).

11 DESGRABES IV AO