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RESUMO: O objetivo deste trabalho foi definir um protocolo para rpida multiplicao in vitro de
jambu, uma planta medicinal da Amaznia com atividade larvicida contra Aedes Aegyptii.
Segmentos nodais advindos de plantas adultas mantidas em casa de vegetao foram submetidos
a trs concentraes de hipoclorito de clcio. Brotos axnicos resultantes do tratamento com
0,25% deste agente desinfestante foram utilizados como fonte de explantes para quatro
experimentos de multiplicao. O meio de cultura indicado foi o MS suplementado com 0,1 mg L-1
de cinetina, que proporcionou 100% de explantes com brotao, 93,33% de plantas enraizadas
e ausncia total de calos. Experimentos comprovaram que as posies centrais da gema
promovem 86,67% de explantes com brotao e brotos com 7,61 cm de altura, alm de induzir
100% de plantas enraizadas, e que o substrato Plantmax o mais indicado para a aclimatao,
apresentando 78,81% de plantas vivas. Deste modo, esta espcie pode ser produzida em larga
escala pelo protocolo aqui estabelecido.
Palavras-chave: micropropagao, plantas medicinais, Amaznia, atividades anestsica e
larvicida, Acmella oleracea
ABSTRACT: Micropropagation of jambu [Acmella oleracea (L.) R.K. Jansen]. The objective
of this work was to develop a protocol for a fast in vitro multiplication of jambu, an Amazonian
medicinal plant with larvicidal activity against Aedes aegyptii. Nodal segments from adult plants
maintained in a greenhouse were subjected to three calcium hypochlorite concentrations. Axenic
sprouts resultant of the treatment with a 0.25% solution of this disinfectant agent was utilized as
explant source for four multiplication experiments. MS medium supplemented with 0.1 mg L-1
kinetin was established, which led to 100% explants with sproutings, 93.33% rooted plants and
total absence of callus. Experiments proved that bud central positions resulted in 86.67% explants
with sproutings and in 7.61cm-height sprouts, besides inducing 100% rooted plants; also,
Plantmax substrate was the most indicated for acclimatation, presenting 78.81% live plants.
Thus, this species can be produced in large scale through the protocol here established.
Key words: Micropropagation, medicinal plants, Amazonia, larvicidal and anesthetic activities,
Acmella oleracea
INTRODUO
A Acmella oleracea (L.) R.K. Jansen
(Compositae), popularmente conhecida como jambu,
uma espcie medicinal da Amaznia que promove
sensao de formigamento e, por isso, a populao
do Norte do Brasil utiliza o ch de suas folhas no
tratamento de males da boca e da garganta, bem
como anestsico para dor de dente (Lorenzi & Matos,
2002). Embora no haja, at o momento, ensaios
farmacolgicos sistematizados com este vegetal,
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MATERIAL E MTODO
Este trabalho foi realizado com Acmella
oleracea L. R. K. JANSEN, popularmente conhecida
como Jambu. Esta espcie da famlia Compositae
foi identificada pelo Prof. Dr. Ari de Freitas Hidalgo e
a excicata encontra-se depositada no Herbrio da
Universidade Federal do Amazonas, sob o nmero
HPM/UFAM:042-C. As plantas aqui utilizadas foram
compradas na Feira do Japiim I, no ms de agosto
de 2004. Para os testes de assepsia, foram utilizados
explantes provenientes de plantas adultas, mantidas
por seis meses em vasos na casa de vegetao da
Universidade Federal do Amazonas. Segmentos
nodais de jambu, com aproximadamente 0,5 cm foram
lavados com detergente ODD neutro e enxaguados
em gua corrente. A primeira assepsia foi realizada
com a imerso dos explantes em soluo de Benomil
1% (m/v), por uma hora, seguida de um banho em
soluo de lcool 70% por 1 minuto. Na seqncia,
aos explantes foi adicionada uma soluo de
hipoclorito de clcio 0,50% (m/v) por 30 minutos. O
mesmo procedimento foi realizado como descrito
anteriormente, porm, com solues de 0,25 e 0,10%
(m/v) de hipoclorito de clcio, respectivamente. Ao
trmino de cada etapa de desinfestao, os explantes
foram lavados trs vezes com gua destilada estril
e inoculados em meio de cultura MS basal, acrescido
de 30,0 g L-1 de sacarose e 8,0 g L-1 de agar-agar, e
mantidos em sala de crescimento. Aps 30 dias, os
explantes foram avaliados quanto presena ou
ausncia de fungos e bactrias, bem quanto a sua
porcentagem de sobrevivncia.
Quatro experimentos foram montados para
desenvolver o protocolo de multiplicao in vitro desta
espcie. Para estes experimentos, os explantes foram
retirados de plantas axnicas crescidas in vitro. No
primeiro, segmentos nodais foram inoculados em
meio de cultura MS suplementado com as citocininas:
benzilaminopurina, cinetina e thidiazuron nas
RESULTADO E DISCUSSO
Todos os explantes tratados com a
concentrao de 0,50% (m/v) de hipoclorito de clcio
morreram (Tabela 1).
Segundo Nietsche et al. (2006), este fato
pode ser explicado pela relao entre o tamanho do
explante e a ao do agente desinfestante, uma vez
que tecidos pequenos so muito susceptveis
degenerao dos tecidos causados pelo hipoclorito
de clcio. Com este experimento, tambm foi
verificado que, com o tratamento de 0,10% (m/v) de
hipoclorito de clcio nenhum explante foi
descontaminado, indicando que concentraes muito
baixas desta substncia no apresentam atividade
bactericida efetiva no jambu. Embora o tratamento
com 0,25% de hipoclorito de clcio tenha
proporcionado baixa porcentagem de explantes vivos
e descontaminados, esta espcie possui uma alta e
rpida taxa de multiplicao, que o nmero de brotos
por gema multiplicado pelo nmero de gemas por
haste (Oliveira & Silva, 1997), tornando possvel
assim, a proposta de desenvolver um protocolo de
micropropagao in vitro para este vegetal a partir
desta assepsia.
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TABELA 2. Efeito de diferentes tipos e concentraes de citocininas no desenvolvimento in vitro de explantes(1) de jambu.
(1)
Mdias seguidas das mesmas letras, nas mesmas colunas, no diferem estatisticamente, entre si, pelo teste de Tukey ao nvel de 5%.
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TABELA 3. Efeito das diferentes posies da gema no desenvolvimento in vitro de explantes(1) de jambu.
(1)
Mdias seguidas das mesmas letras, nas mesmas colunas, no diferem estatisticamente, entre si, pelo teste de Tukey ao nvel de 5%.
TABELA 4. Efeito de diferentes diluies dos meios de cultura basais, MS, B5 e WP e suas diluies pela metade
e pela quarta parte, no desenvolvimento in vitro de explantes(1) de jambu.
(1)
Mdias seguidas das mesmas letras, nas mesmas colunas, no diferem estatisticamente, entre si, pelo teste de Tukey ao nvel de 5%.
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AGRADECIMENTO
FAPEAM e SUFRAMA pelo apoio
financeiro e ao Dr. Ari de Freitas Hidalgo pela
identificao da espcie vegetal.
REFERNCIA BIBLIOGRFICA