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Replicacin del ADN

Una vez que se comprob que el ADN era el material hereditario y se descifr su
estructura, lo que quedaba era determinar como el ADN copiaba su informacin y
como la misma se expresaba en el fenotipo. Matthew Meselson y Franklin W. Stahl
disearon el experimento para determinar el mtodo de la replicacin del ADN. Tres
modelos de replicacin era plausibles.
1. Replicacin conservativa durante la cual se producira un ADN completamente
nuevo durante la replicacin.

Modificada
2. En la replicacin semiconservativa se originan dos molculas de ADN, cada una
de ellas compuesta de una hebra de el ADN original y de una hebra complementaria
nueva. En otras palabras el ADN se forma de una hebra vieja y otra nueva. Es decir
que las hebras existentes sirven de molde complementario a las nuevas.

Modificada de NCBI
3. La replicacin dispersiva implicara la ruptura de las hebras de origen durante la
replicacin que, de alguna manera se reordenaran en una molcula con una mezcla
de fragmentos nuevos y viejos en cada hebra de ADN.

El experimento de Meselson-Stahl consiste en cultivar la bacteria Escherichia coli en


un medio que contenga nitrgeno pesado (15Nitrgeno que es mas pesado que el
istopo mas comn: el 14Nitrgeno ). La primera generacin de bacterias se hizo
crecer en un medio que nicamente contena 15Nitrgeno como fuente de N. La
bacteria se transfiri luego a un medio con 14N. Watson y Crick haban pronosticado
que la replicacin del ADN era semiconservativa, de ser as el ADN extrado de las
bacterias luego de cultivarlas por una generacin en 14N tendra un peso intermedio
entre el ADN extrado del medio con 15N y el del extrado de medio con 14N y as fue.

Los detalles del experimento que incluye un proceso de ultracentrifugacin en


cloruro de Cesio (CeCl2) puede encontrarse en el Curtis.
La replicacin del ADN, que ocurre una sola vez en cada generacin celular,
necesita de muchos "ladrillos", enzimas, y una gran cantidad de energa en forma
de ATP (recuerde que luego de la fase S del ciclo celular las clulas pasan a una
fase G a fin de, entre otras cosas, recuperar energa para la siguiente fase de la
divisin celular). La replicacin del ADN en el ser humano a una velocidad de 50
nucletidos por segundo, en procariotas a 500/segundo. Los nucletidos tienen que
se armados y estar disponibles en el ncleo conjuntamente con la energa para
unirlos.
La iniciacin de la replicacin siempre acontece en un cierto grupo de nucletidos,
el origen de la replicacin, requiere entre otras de las enzimas helicasas para
romper los puentes hidrgeno y las topoisomerasas para aliviar la tensin y de las
protenas de unin a cadena simple para mantener separadas las cadenas
abiertas.

Una vez que se abre la molcula, se forma una rea conocida como "burbuja de
replicacin" en ella se encuentran las "horquillas de replicacin" . Por accin de la la
ADN polimerasa los nuevos nucletidos entran en la horquilla y se enlazan con el
nucletido correspondiente de la cadena de origen (A con T, C con G). Los
procariotas abren una sola burbuja de replicacin, mientras que los eucariotas
mltiples. El ADN se replica en toda su longitud por confluencia de las "burbujas".
Dado que las cadenas del ADN son antiparalelas, y que la replicacin procede solo
en la direccin 5' to 3' en ambas cadenas, numerosos experimentos mostraron que,
una cadena formar una copia continua, mientras que en la otra se formarn una
serie de fragmentos cortos conocidos como fragmentos de Okazaki . La cadena que
se sintetiza de manera continua se conoce como cadena adelantada y, la que se
sintetiza en fragmentos, cadena atrasada.
Para que trabaje la ADN polimerasa es necesario la presencia, en el inicio de cada
nuevo fragmento, de pequeas unidades de ARN conocidas como cebadores, a
posteriori, cuando la polimerasa toca el extremo 5' de un cebador, se activan otras
enzimas, que remueven los fragmentos de ARN, colocan nucletidos de ADN en su
lugar y, una ADN ligasa los une a la cadena en crecimiento.

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Traduccin, redaccin y diagramacin a cargo de :
Dr. Jorge S. Raisman y Dra. Ana Mara Gonzalez, ana@unne.edu.ar

ADN (cido desoxirribonucleico)

Un cido nucleico compuesto de dos cadenas polinucleotdicas que se disponen


alrededor de un eje central formando una doble hlice, capaz de autorreplicarse y
codificar la sntesis de ARN.
Lugar donde esta "depositada" la informacin gentica.
cido nucleico que funciona como soporte fsico de la herencia en el 99% de las
especies. La molcula, bicatenaria, esta formada por dos cadenas antiparalelas y
complementarias entre si. Su unidad bsica, el nucletido, consiste en una molcula
del azcar desoxirribosa, un grupo fosfato, y una de estas cuatro bases
nitrogenadas: adenina, timina, citosina y guanina. Frmula

Alelo (del griego allelon = "el uno al otro", recprocamente): Formas alternativas
de un gen, se hereda separadamente de cada padre (p. ej. en el locus para el
color de ojos puede haber un alelo para ojos azules o uno para ojos negros). Uno o
ms estados alternativos de un gen.

Asilomar: Conferencia realizada en 1974 donde se acordaron las bases de una


precaria "moratoria" en las investigaciones de ingeniera gentica.

Cromosomas (del griego chroma = color; soma = cuerpo): Estructuras del ncleo
de la clula eucariota que consiste en molculas de ADN (que contienen los
genes) y protenas (principalmente histonas).

Crossing over (del ingls entrecruzamiento): Proceso que ocurre en la meiosis e


incluye la ruptura de un cromosoma materno y uno paterno (homlogos), el
intercambio de las correspondientes secciones de ADN y su unin al otro
cromosoma. Este proceso puede resultar en un intercambio de alelos entre
cromosomas

Evolucin (del latn e- = fuera; volvere = girar): Cambio de los organismos por
adaptacin, variacin, sobrerreproduccin y reproduccin/ sobrevivencia
diferencial, procesos a los que Charles Darwin y Alfred Wallace se refirieron como
seleccin natural.

Eucariotas (del griego eu = bueno, verdadero; karyon = ncleo, nuez):


organismos caracterizados por poseer clulas con un ncleo verdadero rodeado
por membrana. El registro arqueolgico muestra su presencia en rocas de
aproximadamente 1.200 a 1500 millones de aos de antigedad

Gameto (del griego gamos = "unin de los sexos", esposa): Clula reproductora
haploide(n) que cuando su ncleo se fusiona con otro gameto (n) del sexo opuesto
origina un cigoto (2n), que por mitosis desarrolla un individuo con clulas
somticas diploides (2n), en algunos hongos y protistas puede, por meiosis,
producir clulas somticas haploides (n)

Gentica : el estudio de la herencia de los caracteres

Genes (del griego genos = nacimiento, raza; del latn genus = raza, origen):
segmentos especficos de ADN que controlan las estructuras y funciones
celulares; la unidad funcional de la herencia. Secuencia de bases de ADN que
usualmente codifican para una secuencia polipeptdica de aminocidos. Tema
ampliado

Genotipo: La totalidad de los alelos de un organismo.

Haploide (del griego haploos = simple, ploion = nave): Clula que contiene solo
un miembro de cada cromosoma homlogo (nmero haploide = n)

Herencia (del latn haerentia= pertenencias, cosas vinculadas) Transmisin de


caractersticas de padres a hijos.

Hiptesis (del griego hypo (como prefijo) = debajo, tithenai = poner): idea que
puede ser sometida a experimentacin y si no se convalida es descartada; idea
con el menor nivel de confiabilidad.

Homlogos: Un par de cromosomas en cual un miembro del par tiene origen


materno y el otro paterno; se los encuentra en clulas diploides

Istopo (del griego isos = igual, topos = lugar): tomos con el mismo nmero
atmico pero con un diferente nmero de neutrones; se los nombra agregando el
nmero de masa al nombre del elemento, p.ej. carbono 12 o 12C; carbono 14 o 14C.

Locus (del latn: lugar, plural loci): Posicin que ocupa un determinado gen en un
cromosoma.

Meiosis (del griego meio = menor; meiosis = reduccin): Divisin celular en la


cual la copia de los cromosomas es seguida por dos divisiones nucleares. Cada
uno de los cuatro gametos resultantes recibe la mitad del nmero de cromosomas
(nmero haploide) de la clula original

Monmero (del griego monos = solo, meros = parte) molcula pequea que se
encuentra repetitivamente en otra ms grande (polmero)

Nmero atmico: el nmero de protones en el ncleo de un tomo.

Polmero(del griego polys = muchos, meros = parte): Molcula compuesta por


muchas subunidades idnticas o similares.

Protenas: (del griego proteios = primario, del griego Proteo, dios mitolgico que
adoptaba numerosas formas). Polmeros constituidos por aminocidos que
intervienen en numerosas funciones celulares. Una de las clases de
macromolculas orgnicas que tienen funciones estructurales y de control en los
sistemas vivientes. Las protenas son polmeros de aminocidos unidos por
uniones peptdicas.

Radioactividad (del latn radius = rayo): Energa emitida por los ncleos
inestables de determinados istopos (los as llamados "radioactivos") en forma de

ondas o partculas

Recombinacin: El proceso por el cual se produce en la progenie una


combinacin de genes diferentes a los de los padres. En los organismos superiores
por el proceso de entrecruzamiento (crossing over)

Replicacin del ADN ( del latn replere = rellenar): El uso de un ADN existente
como molde para la sntesis de nuevas hebras de ADN. Proceso que en eucariotas
ocurre en el ncleo.

Teora cromosmica de la herencia: sostiene que los factores hereditarios (los


genes) estn situados sobre los cromosomas, que su ordenamiento es lineal y
que, al fenmeno hereditario de la recombinacin, le corresponde un fenmeno en
el mbito celular: el intercambio de segmentos cromosmicos por
"sobrecruzamiento" (crossing over)

Transformacin : 1. Proceso de introduccin de ADN exgeno en una bacteria


por medios fsicos o qumicos. 2. Conversin de una clula animal fenotpicamente
normal en una clula con crecimiento descontrolado, por accin de un virus
oncognico. Se manifiesta adems en alteraciones de la forma celular y en la
prdida de inhibicin por contacto.