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Gnero: Azospirillum
I.
INTRODUCCIN:
El suelo es una fuente rica de minerales y nutrientes que la planta necesita
para poder subsistir, desde hace miles de aos los microorganismos presentes en el
suelo empezaron a generar nutrientes y enzimas que favorecan al crecimiento de las
plantas, estos microorganismos benficos formaron simbiosis con las plantas o las
plantas se adaptaron a ellos. Adems cumplen un rol fundamental en el
mantenimiento del ecosistema. Los microorganismos presentes en el suelo ejercen
una accin especfica cuando se relacionan con una especie vegetal. El estudio de la
relacin microorganismo-planta es muy importante ya que permite establecer una
relacin entre el tipo de suelo, la variedad de planta y la micro-biota asociada. Estas
interacciones naturales dependen en gran parte del correcto mantenimiento de los
ciclos biolgicos que se realicen a este nivel (sistema radicular).
El suelo es un substrato imprescindible de la vida en el medio terrestre, pues
en el se encuentran los macronutrientes como el nitrgeno, carbono, hidrogeno y
oxigeno, los cuales son los componentes principales de protenas, coenzimas,
nucletidos y clorofila. Estos macronutrientes y las fitohormonas reguladoras del
crecimiento desempean un rol importante en el desarrollo vegetativo y
rendimientos de cultivos.
Hoy en da se ve la necesidad de fertilizar los suelos por el desgaste que han
ido sufriendo durante todos los aos que la agricultura mal organizada y mal
practicada ha sido empleada por las personas, en la obtencin de alimentos. Frente a
esta necesidad de suelos infrtiles con bajo ndice de nitrgeno, se emplea
fertilizantes qumicos, sin embargo estos no son muy aprovechados por la planta o
cultivos, y aproximadamente un 67% se pierde, quedando un exceso de compuestos
nitrogenados en el ecosistema que representan la mayor fuente de cintaminacion e la
Azospirillum spp.
Parasitologa.
Esp. Microbiologa y
II.
MARCO TERICO:
A. Historia de Azospirillum spp.
En un principio fue llamado Spirillum lipoferum que fue descrito en 1925
por Beijerinck, esta bacteria estuvo olvidada por varias dcadas. Son las
observaciones de Pea-Cabriales y Dbereiner en 1973 las que iniciaran la poca
moderna de esta bacteria. Estudios taxonmicos de S. lipoferum conducen a su
reclasificacin en un gnero nuevo, Azospirillum.
Actualmente son reconocidas seis especies en el gnero Azospirillum. Las
dos primeras en ser descritas fueron A. lipoferum y A. brasilense, siendo stas las
mas ampliamente estudiadas. Posteriormente fueron descritas las especies A.
amazonense, A. halopraeferans, A. irakense y A. largomobile siendo el nombre de
Azospirillum spp.
Parasitologa.
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B. Caractersticas Culturales
Caractersticas Generales:
El genero Azospirillum es una proteobactria, Gram negativa que utiliza
como fuente nitrogenada sustratos como el amonio, nitrato, aminocidos y
nitrgeno molecular. Tiene forma bacilar pleomorfica, se puede apreciar en
algunas cepas la forma de C, con un dimetro de 0.8 a 1 um de largo y 2 a 4 um
de ancho. Tienen una cantidad de G+C equivalente al 68% a 70%.
Son
Caractersticas Diferenciales
Requiere una T optima de crecimiento de 30C a 32C, un pH de 7.0 7.3
(neutro), presenta la enzima oxidasa (oxidasa +), para su cultivo requiere de
biotina. En el medio Nfb semislido desarrolla una pelcula blanquecina y
Fig. 1 Microscopia electrnica de Azozpirillum spp.
densa debajo dela superficie (3 a 5mm), con viraje del indicador al azul; en
Azospirillum spp.
Parasitologa.
Esp. Microbiologa y
3.-Formacin
de "velo"
a 5 mm
la superficieusada
en medio
Una Fig.
de las
caractersticas
fenotpicas
msde
ampliamente
como criterio
semi-solido selectivo para Azospirillum"
para el reconocimiento tentativo del gnero Azospirillum es el color rojo
escarlata que toman las colonias al crecer en un medio adicionado del colorante
rojo Congo.
Azospirillum spp.
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C. Clasificacin:
La clasificacin del Genero Azospirillum spp. Se realizo en funcin de las
caractersticas morfolgicas y fisiolgicas segn el Manual de Bergey:
Reino: Bacteria
Phylum: Proteobacteria
Clase: Alpha Proteobacteria
Orden: Rhodospirillales
Familia: Rhodospirillaceae
Genero: Azospirillu
Especies: A. amazonense, A. halopraederans, A. lipoferum, A. brasilienses.
D. Aislamiento de Azospirillum:
1. Zona de recoleccin de muestreo: Azospieillum spp. Tiene como
habitad el suelo de cultivos, especficamente en la zona denominada
rizosfera, en cultivos de Tomate (Lycopersicon sculentus) o de Maiz
(Zea mays).
2. Obtencin de muestras de races: se recolectan las races del
tomate o maz, al final del ciclo vegetativo aproximadamente un mes
Azospirillum spp.
Parasitologa.
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el
suelo
remanente.
Se
cortan
en
secciones
de
Azospirillum spp.
Parasitologa.
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en
8. Identificacion Molecular:
Prueba de PCR: la identificacin genotpica rutinaria de
las especies de Azospirillum, as como su deteccin, se logra
fcilmente y en forma reproducible amplificando mediante el
uso de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) los
genes 16S rDNA [p. ej. usando las secuencias de los
oligonuclotidos 27f (5'-GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG)
y 1495r (5'-CTACGGCTACCTTGTTACGA)] y cortando los
productos amplificados con la enzima de restriccin AluI.
Con esta estrategia se obtienen fragmentos de tamaos
especficos para cada especie de Azospirillum, distinguibles
fcilmente en geles de agarosa.
Azospirillum spp.
Parasitologa.
Incubar de 3 a
5 dias a 30C
Incubar Por 5
dias a 30C
Cultivo puro
primario en vial
con agar nutritivo
Pruebas
E. Importancia de Azozpirillum:
Bioquimicas
Las especies microbianas del genero Azospirillum son muy importantes ya
que favorecen el crecimiento de la planta lo cual ha sido relacionado con el
metabolismo del nitrgeno, a travs de la fijacin biolgica en condiciones de
vida libre o por el incremento de la actividad nitrato reductasa en condiciones
endofficas, con relacin al metabolismo del nitrgeno, Azospirillum adems de
fijar el nitrgeno atmosfrico en condiciones de microaerofilia que lo
asimila como amonio, presenta reduccin asimilatoria del nitrato en
condiciones aerbicas. Cuando Azospirillum crece en condiciones anaerbicas
utiliza el nitrato como ltimo aceptor de electrones provocando denitrificacion:
NO3-
NO2-
(NO)
N2O
N2
que
la
presencia
N2 a (NH 4+). S e
de
sales
de
ha
amonio
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F. Ambiente rizosfrico:
Aparentemente, una bacteria del suelo deber sobrevivir a las mltiples
interacciones que se presentan con la compleja comunidad microbiana que
habita el mismo microambiente, antes de que ocurra cualquier interaccin con
las races de la planta. En el inicio de una interaccin con las races de la planta
hospedera, el microorganismo especfico deber llegar a la superficie de las
races, adherirse y multiplicarse para colonizarla. Si la bacteria tiene la
capacidad de invadir los tejidos internos, se diseminar en el interior de la raz e
incluso en otros rganos de la planta.
La adaptacin de Azospirillum al futuro ambiente rizosfrico probablemente
se inicia con la germinacin de la semilla, la cual exuda infinidad de compuestos
orgnicos que forman parte fundamental de la espermosfera. Posteriormente, la
exudacin de compuestos ser a travs de las races durante el desarrollo de la
planta. Aun cuando las especies de Azospirillum difieren en su capacidad para
Azospirillum spp.
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chrococcum o Streptomyces
mutabilis conduce
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sido
reportados
con
algunas
de
las
mismas
cepas
Azospirillum spp.
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Fig. 5. Estimulacin del crecimiento de las races de maz inocuilado con A. brasilensis
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Azospirillum spp.
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Auxinas
Tiene la capacidad de inducir la elongacin de las clulas del tallo en la
regin subapical y que logran reproducir el efecto fisiolgico del cido indol 3actico (AIA).
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de
la
interaccin
planta-microorganismo
que
depende
tumefaciens,
Agrobacterium
rhizogenes,
Pseudomonas
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Giberelinas
Las giberelinas (GAs) constituyen un amplio grupo de compuestos naturales
(cidos diterpenos tetracclicos) que regulan diversos procesos en el crecimiento
y desarrollo de las plantas, tales como la germinacin, el alargamiento caulinar,
la floracin y la fructificacin (Davies 1995). Desde el punto de vista estructural,
las giberelinas libres se dividen en dos grandes grupos: aquellas que poseen un
complemento completo de tomos de carbono,
(GAs-C20) y aquellas en las que el C20 se pierde (GAs-C19). Todas las GAs
estn carboxiladas en el C7, con la excepcin de GA12-aldehdo y pueden tener
presentes una (GA4), dos (GA1), tres (GA8) cuatro (GA32) funciones
Azospirillum spp.
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Biosntesis y Metabolismo
Las GAs pueden definirse como productos de la va de los diterpenos y su
sntesis, en plantas superiores se inicia con la ciclizacin de un precursor comn
de 20 molculas de carbono, el geranil geranil pirofosfato (GGPP). Este
intermediario es sintetizado en plstidos a partir de cido mevalnico (AM),
isopentenil difosfato proveniente de gliceraldehdo 3-fosfato bien como se
comprob recientemente por piruvato proveniente de la va de las deoxixulosas
5-fosfato (Litchtenthaler, 1999). En tejidos de crecimiento vegetativo, ocurre la
primera fase de sntesis, con la ciclizacin del GGPP en protoplstidos y resulta
en la formacin definitiva del ent-kaureno, en dos pasos sucesivos que requieren
de la actividad de dos enzimas claves: la copalil difosfato sintasa (CPS), la cual
produce el intermediario copalil difosfato y la ent-kaureno sintasa, que sintetiza
el producto final ent-kaureno. En una segunda fase de sntesis, el ent-kaureno es
convertido en Gas biolgicamente activas por una serie de reacciones de
oxidacin, catalizadas por dos tipos de enzimas. Las primeras reacciones ocurren
en membranas extraplastdicas y resultan en una contraccin del anillo B de C6 a
C5, tomando as la molcula la forma giberelica caracterstica. Estas reacciones
son catalizadas por las Citocromo P-450 dependientes monooxigenasas y
culminan con la formacin de GA12, la que se considera la primera GA, como
tal, de la va. Posteriormente y en una tercera fase de sntesis, este intermediario
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Citocininas
Son un grupo de compuestos naturales que regulan la divisin y
diferenciacin celular en tejidos no meristemticos de plantas superiores.
Qumicamente son purinas, en su mayora derivadas de la adenina, que incluyen
sus respectivos ribtidos, ribsidos y glucsidos. Estas fitohormonas se han
asociado a un gran nmero de procesos fisiolgicos y celulares entre los que se
detallan el retardo de la senescencia por acumulacin de la clorofila, la formacin
de rganos en una gran variedad de cultivos de tejidos, el desarrollo de la raz, la
formacin de pelos radicales, la elongacin de la raz, la iniciacin del tallo, la
expansin de las hojas. Por definicin, son compuestos que en presencia de
concentraciones ptimas de auxinas, inducen la divisin celular en cultivos o
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Etileno
Junto con auxinas, giberelinas y citosininas, el etileno es una hormona muy
importante en el crecimiento y desarrollo de las plantas (Burg 1962). Debido a su
composicin gaseosa en condiciones fisiolgicas, por mucho tiempo, no se quiso
aceptar como una fitohormona; sin embargo diferentes trabajos, demostraron que
su sntesis y accin sobre la planta, era crtica para determinados procesos
fisiolgicos.
El etileno es una molcula muy simple y simtrica, compuesta por 2 tomos
de C (Unidos en doble ligadura) y 4 tomos de H, soluble en agua en
aproximadamente 140 ppm, 25 C y 760 mm Hg (15 veces mas que el oxgeno).
Es muy activo y puede ejercer sus efectos fisiolgicos a concentraciones muy
bajas en el tejido vegetal (0.1 ppm). En plantas superiores, todos los tejidos
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Azospirillum spp.
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es
la
conversin
de
la
S-adenosilmetionina
(SAM)
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Acido Abscsico
Es una hormona vegetal, involucrada diferentes procesos fisiolgicos del
crecimiento y desarrollo de la planta, como la dormicin de yemas y semillas, la
maduracin de frutos y en situaciones de estrs ambiental desfavorables como
dficit hdricos o estrs salinos. El cido abscsico (ABA) se forma en plastidios,
tanto de hoja como de raz y su biosntesis comienza a partir del cido
mevalnico, va farnesil farnesil pirofosfato (FFPP), dentro de lo que se conoce
globalmente como sntesis de los terpenos.
La alternativa ms aceptada de
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Azospirillum spp.
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Interaccin
de
fitohormonas
producidas
por
con
las
cepas
de
Azospirillum
lipoferum
mejoraron
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I. Aplicacin:
Algunas compaas en diferentes pases han registrado inoculantes
de Azospirillum para maz y otros cultivos. Burdman y col. refieren que
en Sudfrica se lleva a cabo la produccin de inoculantes a base
de Azospirillum para 150,000 hectreas de maz y 12,000 de trigo.
Algunas caractersticas de la produccin de inoculantes a base
de Azospirillum han sido discutidas.
Aun cuando el uso de Azospirillum como bioestimulante del
crecimiento de las plantas no se ha generalizado mundialmente, en
Mxico la aplicacin de sta bacteria en diferentes cultivos ha rebasado
con mucho lo hecho en otros pases. En el ciclo agrcola primaveraverano (PV) del ao 1999 la Secretara de Agricultura, a travs de su
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrcolas y Pecuarias
(INIFAP) y de la Fundacin Mexicana para la Investigacin
Agropecuaria y Forestal, A.C., en colaboracin con el Centro de
Azospirillum spp.
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de
sorgo,
cebada
trigo,
empleando
cepas
Azospirillum spp.
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en
mi
opinin,
la
aplicacin
de Azospirillum como
una
agricultura
reducir
moderna,
las
la
elevadas
inoculacin
cantidades
de
III.
Conclusiones:
El genero Azospirillum: es una proteobactria, Gram negativa que utiliza
como fuente nitrogenada sustratos como el amonio, nitrato, aminocidos
y nitrgeno molecular.
Azospirillum es capas de sintetizar fitohormonas: como auxinas,
citosinas, ABA. Las cuales ayudan al crecimiento y mejoramiento de la
calidad de la planta.
Esta bacteria puede crecer en la rizosfera o en el interior de las races.
En la rizosfera acta como in regulador de fitopatogenos pues, inhibe el
crecimiento de hongos fitopatogenos y bacterias.
Azospirillum spp.
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IV.
Bibliografa:
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