Microbiologa - 1

Morfologa y estructura bacteriana

I.

ESTRUCTURA
BACTERIANA A.
Envuelta celular
- Membrana citoplasmtica
- Pared celular
- Membrana externa

II.

B.

Estructuras
externas
- Flagelos
- Fimbrias o pillis
- Cpsulas

C.

Estructuras
internas
- Nucleoide
- Citoplasma
- Esporas

MORFOLOGA DE LAS
BACTERIAS A.

Tamao de

las bacterias
B.

Formas de las bacterias

- Cocos
- Bacilos
- Espirilos

C.
-

Caractersticas de las colonias

Tamao
Morfologa
Bordes
Superficie
Consistencia
Pigmentacin
Hemlisis
Olor

Gustavo A. Daz Martn.

Centro de Formacin Profesional Instituto

Villaverde

Curso 2009-2010

I. ESTRUCTURA
BACTERIANA.
La primera aproximacin que vamos a efectuar al mundo de las bacterias
comenzar por un detallado anlisis de su anatoma, la cual slo ha sido
posible desde la utilizacin del microscopio electrnico. Tras estudiar con
detalle las estructuras de que estn compuestas las bacterias, abordaremos su
estudio morfolgico como entidades individuales, considerndolas segn la
morfologa celular y su forma de agrupamiento. Por ltimo veremos como se
agrupan las bacterias en gigantescos acmulos (comparados con su tamao) y
podremos observarlas a simple vista en forma de colonias, cuyas
caractersticas tambin estudiaremos.
Aunque las bacterias son unidades funcionales que actan como un solo
individuo, realizaremos una divisin de sus estructuras vlida solo desde un
punto de vista didctico.
Vamos a considerar las estructuras segn la posicin que ocupan en
relacin con la envuelta celular, que consideraremos el lmite normal de
cualquier clula:
- Estructuras de la envuelta celular,
- Estructuras externas,
- Estructuras internas.
I.A.

Estructuras de la envuelta celular.

La clula bacteriana propiamente dicha est limitada por una estructura

integrada, la envuelta celular, de complejidad variable. En la mayor parte de las
clulas, la envuelta celular consta de pared celular y de membrana
citoplasmtica subyacente. La existencia de bacterias con formas distintas a la
esfrica demuestra que esta estructura tiene la suficiente rigidez como para
soportar la presin superficial y la presin interna de la clula. Algunas
bacterias poseen una pared celular muy delgada, casi confundida con la
membrana citoplasmtica; otras en cambio presentan una tercera capa o
membrana externa adosada a la pared celular. La pared celular es la
responsable de la diferente impregnacin tintorial de las bacterias al ser
teidas mediante la tincin de Gram, que tan bien conocis ya.
Membrana citoplasmtica:
La membrana citoplasmtica es una estructura indispensable para todas
las clulas bacterianas. Est situada en la superficie interna de la pared celular
y rodea totalmente al citoplasma. Las membranas citoplasmticas bacterianas
son similares, en cuanto a composicin y estructura, al resto de las
membranas biolgicas. Las membranas citoplasmticas de las clulas
eucariotas poseen esteroles entre la bicapa fosfolipdica, mientras que las
bacterias poseen un componente diferente: los hopanoides.
La membrana citoplasmtica tiene escasa resistencia mecnica y no
contribuye significativamente al mantenimiento de la forma de la bacteria, ya
que las formas alargadas tienden a adoptar formas esfricas cuando se elimina
la pared celular. Aunque la membrana es una estructura diferente de la pared

celular, ambas estn unidas por algo ms que la cohesin lateral, y hay
evidencias que sugieren la existencia de algn tipo de enlace entre las dos
estructuras. La membrana puede invaginarse para formar orgnulos conocidos
como mesosomas, que adoptan diversas formas. Su funcin principal parece
centrarse en su participacin como iniciador de la divisin celular.
Pared celular
La forma y rigidez de las bacterias se debe casi por completo a la
presencia de una estructura polimrica grande que sirve de apoyo y se
extiende por el exterior de la membrana citoplasmtica,

formada por una mezcla de azcares y pptidos: el peptidoglucano. El cido

murmico parece ser caracterstico de los peptidoglucanos de las paredes
celulares bacterianas. Para un estudio ms detallado sobre la composicin y
estructura de la pared celular y para la observacin de abundantes dibujos y
esquemas, os remito a la pgina web del Todars, Texbook on line of
Bacteriology, o al cap. 4 del libro Biologa de Microorganismos (Brock).
Membrana
externa
La membrana externa tiene una forma y una constitucin similar a la de
otras membranas biolgicas. Se comporta como una barrera hidrofbica para
difusin de una gran cantidad de sustancias, participa en la conjugacin y en la
divisin celular y contiene protenas especiales, las porinas, que intervienen
en la toma de nutrientes y la difusin pasiva de pequeas molculas hacia el
espacio periplsmico. Tambin contiene lipopolisacridos que son los
principales componentes antignicos de superficie.
La funcin de la envuelta celular es la de una barrera osmtica y de un
sistema regulador que separa el citoplasma del medio, y proporciona a la
bacteria el entorno relativamente aislado que necesitan los organismos vivos.

I.B
Estructuras
externas.
En el exterior de las clulas bacterianas podemos encontrar tres clases
de estructuras: los flagelos, u orgnulos relacionados con la locomocin y
quimiotaxis; las fimbrias o pilli, y la cpsula, o capa mucosa que rodea a la
clula. Ninguna de ellas resulta esencial para la existencia de la clula,
pudiendo eliminarse por diversos medios y sin que exista inhibicin del
crecimiento bacteriano o alteracin de su funcin metablica.
Flagelos
Los flagelos bacterianos son prolongaciones filamentosas largas que se
extienden ms all de la superficie celular. Son los responsables de la
locomocin de las bacterias y se hallan implicados en la quimiotaxis y en la
percepcin bacteriana. Debido a su delgadez, son difciles de ver en las
preparaciones en fresco, siendo necesario teirlos mediante tcnicas
especiales para ponerlos de manifiesto.
Los flagelos aparecen sobre todo en los bacilos. Su nmero es
relativamente constante dentro de cada especie bacteriana. Los flagelos
pueden estar localizados solo en los extremos de la bacteria o estar repartidos
a lo largo de la superficie celular.
Las bacterias flageladas se clasifican segn el nmero y localizacin de
los flagelos: las bacterias que tienen un nico flagelo se denominan
montricas; las que tienen dos o mas flagelos en uno de los extremos de la
clula son loftricas; aquellas que tienen penachos en ambos extremos son

anftricas, y si los flagelos estn dispuestos por toda la superficie celular se

denominan pertricas.
Los flagelos se componen de tres porciones claramente diferenciadas:
filamento, codo o manguito y cuerpo basal. El filamento tiene una longitud
media de 15 a 25 m y se halla unido al cuerpo basal a travs del manguito.
La composicin proteica del filamento hace que este posea caractersticas
antignicas que a veces son tiles para la identificacin bacteriana. El manguito
flagelar es una especie de "articulacin universal" que permite la transmisin
del movimiento desde el cuerpo basal hasta el filamento. El cuerpo basal es la
porcin ms compleja, encontrndose dentro de la

envuelta celular y actuando como un verdadero motor.

Se observan dos tipos de movimiento flagelar: de deslizamiento y de
rotacin. Los primeros son los encargados de dirigir a las bacterias hacia sitios
concretos. Una bacteria con movimiento de traslacin puede llegar a alcanzar
hasta los 55 m por segundo. Los movimientos de rotacin provocaran
desplazamientos aleatorios conocindose tambin como volteretas o vuelcos.
Gracias a los movimientos de traslacin, las bacterias son capaces de evitar
situaciones desfavorables o ser atradas hacia las favorables, por ej. la
presencia de
nutrientes. Esta
capacidad de reaccionar frente a
determinados estmulos ambientales se denomina "taxia" o "fobia"
dependiendo de la direccin del movimiento. Un acercamiento hacia zonas
oxigenadas se denominara aerotaxia; un alejamiento de una fuente luminosa
seria una fotofobia.
Fimbrias o pillis
Estas estructuras solo pudieron ser descubiertas gracias a la utilizacin
del microscopio electrnico, pues su longitud varia entre 0,3 y 1 m. Pueden
aparecer en los extremos de las clulas o pueden estar distribuidas por toda la
superficie en nmero que oscila desde uno a varios centenares por clula.
Las fimbrias pueden ser de dos tipos diferentes, tanto desde el punto de
vista morfolgico como funcional: los pilli sexuales estn implicados en la
formacin de parejas especficas durante la conjugacin bacteriana, y sirven
para iniciar el contacto entre dos clulas, unindolas y facilitando la
transferencia de material gentico. Los pilli sexuales se distinguen de las otras
fimbrias por su mayor longitud y su menor nmero (de uno a diez por clula).
Otras fimbrias parecen tener propiedades adherentes que facilitan la unin a
otros tipos de clulas; p. ej. eritrocitos o leucocitos. La adherencia es
fundamental para la colonizacin bacteriana en el husped animal.
Cpsula
La cpsula es una estructura de naturaleza polisacrida que rodea
completamente a la clula. El tamao aparente de la cpsula varia
ampliamente, siendo con frecuencia mayor que el dimetro de la bacteria. Su
funcin es an objeto de estudio, considerndose que desempea un
importante papel en la proteccin de la bacteria frente a agentes externos
tales como la desecacin, los bacterifagos o los metales txicos. Quizs tenga
mayor importancia la adherencia de las bacterias encapsuladas a superficies
inertes de su entorno natural y a clulas adecuadas para su crecimiento y
supervivencia.
Las cpsulas bacterianas no se tien con los procedimientos habituales,
pues no retienen colorantes con facilidad. Se pueden hacer visibles al
microscopio ptico suspendiendo las clulas en tinta china diluida; este mtodo
se conoce como tincin negativa. La cpsula desplaza las partculas de carbn
coloidal y las clulas parecen hallarse en lagunas, que representan las cpsulas,
situadas sobre un fondo oscuro. Sin embargo, no todas las cpsulas impiden la
penetracin de las partculas de carbn, y algunas no pueden ser observadas
de este modo.

La cpsula es habitualmente inmunognica, y los anticuerpos inducidos

reaccionan con ella. Los anticuerpos se fijan a la cpsula favoreciendo su
fagocitosis o penetrando en la matriz capsular y reaccionando con los
polisacridos. Esta reaccin altera el ndice de refraccin de la cpsula, de
manera
que,
en
preparaciones
hmedas
no
teidas
observadas
microscpicamente, aparecen mejor definidas y ms grandes. En 1902, Neufeld
aplic este abultamiento capsular, o reaccin de Quellung, a la identificacin
serolgica de neumococos, y desde entonces se ha utilizado para la
identificacin serolgica de diversas bacterias encapsuladas.

I.C.

Estructuras internas.

El nucleoide bacteriano
Todo el material gentico de la clula est contenido en una nica
molcula de ADN que mide de 100 a 1400 m de longitud cuando est
totalmente extendida. Generalmente la estructura del DNA es circular, y en la
clula se encuentra en una configuracin superenrollada.
Citoplasma
El citoplasma en las clulas bacterianas parece ser menos complejo que
el de las clulas eucariticas. Est considerado como un gel que contiene
ribosomas, enzimas y, con frecuencia grnulos que pueden representar
productos de almacenamiento. Los grnulos citoplasmticos que generalmente
se observan son aquellos que se tien con ciertos colorantes bsicos, y se
denominan corpsculos metacromticos. Se consideran como un depsito de
energa reutilizable.
La espora
La espora bacteriana es una estructura compleja que se forma dentro de
la clula para asegurar la supervivencia de la especie ante condiciones
ambientales desfavorables. La formacin de esporas es inherente a algunos
tipos de bacilos.
Las esporas pueden observarse en el interior de las bacterias o
libremente despus de la desintegracin de las clulas progenitoras. Cuando
son intracelulares, las esporas presentan forma esferoidal, con el eje
longitudinal paralelo al del bacilo. Su anchura puede ser esencialmente la
misma que la de la clula madre, o ser mayor, deformando la pared de la clula
vegetativa.
El tamao y localizacin de las esporas son relativamente constantes
dentro de cada especie. En funcin de su localizacin la espora puede ser
central, subterminal (entre el centro y el extremo), y terminal. En
ocasiones, su tamao y localizacin pueden dar lugar a una morfologa
caracterstica, como en el caso del bacilo del ttanos, cuya espora terminal
grande confiere a la clula vegetativa que la contiene forma de palillo de
tambor.
La espora es un estado extremadamente resistente en el desarrollo de la
clula. No slo es relativamente impermeable a los colorantes, sino que
tambin es mucho ms resistente que las clulas vegetativas a los efectos
perjudiciales del calor, la desecacin, presin hidrosttica y muchos agentes
qumicos. Algunas esporas son extremadamente resistentes a los
procedimientos habituales de esterilizacin, necesitndose un periodo de casi
tres horas en autoclave para asegurar su destruccin.
Normalmente la iniciacin de la esporognesis en clulas que estn
creciendo activamente es inducida por depleccin de nutrientes. En cada clula
slo se forma una espora. Cuando la espora se encuentra en un medio
favorable para el crecimiento de las clulas vegetativas, germina y la clula
comienza un nuevo ciclo vegetativo.

Pginas web interesantes

http://textbookofbacteriology.net (en
ingls)
http://www.microbiologytext.com (en
ingls)
http://www.microbiologia.com.ar (en
argentino)

II. MORFOLOGA DE LAS BACTERIAS.

La morfologa bacteriana debe considerarse desde dos puntos de vista:
1) como clulas individuales observables slo al microscopio y
2) como colonias bacterianas apreciables a simple vista despus de
desarrollarse en la superficie de medios de cultivo slidos.
Las diferencias en el tamao, forma y ciertos detalles estructurales son
caractersticos de los principales grupos de bacterias, y proporcionan las bases
fundamentales para su estudio sistemtico e identificacin. De la misma forma,
las colonias bacterianas, compuestas por masas de clulas individuales, tienen
caractersticas de tamao, consistencia, textura y color que poseen un valor
sistemtico, pero no tienen la importancia fundamental de la morfologa
celular.
II.A.

Tamao de las bacterias.

El tamao de las clulas bacterianas se mide habitualmente en

micrmetros, oscilando entre los
1 x 10 m de los bacilos grandes como Bacillus anthracis, y los 0,2 x 0,7 m
de Francisella tularensis. Existen ligeras variaciones de tamao de las clulas
bacterianas dentro de algunas especies, siendo mayores las fluctuaciones entre
las formas bacilares que entre las formas esfricas. Los lmites de tamao
entre las clulas bacterianas y los virus no tienen una frontera bien definida,
pues curiosamente existen virus ms grandes que ciertas bacterias.
II.B.
Formas de las
bacterias.
Desde el punto de vista microscpico, la diferencia ms importante entre
las bacterias es su forma, existiendo tres tipos morfolgicos claramente
distinguibles:
Formas esfricas o
cocos. Formas
alargadas o bacilos.
Formas curvadas, comas o espirilos
Coc
Las bacterias esfricas son las ms homogneas con respecto al
os
tamao, presentando un
dimetro medio de 0,6 a 1,0 m. La forma no siempre es exactamente
esfrica, observndose como ms comunes las siguientes variaciones:
Formas
lanceoladas.
Formas en grano de
caf.
Formas cocobacilares (achatadas)
Las diferencias entre los subtipos de cocos se basan en los
agrupamientos celulares. Estos aparecen como consecuencia de dos factores:

el plano o planos de divisin celular y la tendencia de las clulas hijas a

permanecer unidas entre s, una vez que se completa la divisin.
Los cocos que se separan completamente despus de la divisin
aparecen individualmente, y a esta forma se le llama coco. Cuando hay una
ligera tendencia a que las clulas hijas permanezcan unidas y la divisin celular
ocurre en un solo plano, los cocos se agrupan predominantemente en pares,
llamados diplococos. Si la unin es ms marcada, se ven largas cadenas de
cuatro cocos o ms; estos agrupamientos se conocen como estreptococos.
Cuando los cocos se dividen en varios planos, y hay una elevada tendencia a
que permanezcan unidos, aparecen racimos irregulares de cocos, semejantes a
racimos de uvas; estos agrupamientos se denominan estafilococos.

Sin embargo, la separacin de subtipos morfolgicos no es

absolutamente ntida, y en una misma colonia pueden observarse cadenas o
racimos junto con formas aisladas o en parejas. A pesar de todo esto, los
grupos morfolgicos tienen mucho valor prctico en la identificacin y
clasificacin de cocos.
Bacilos
Las formas alargadas o bacilares agrupan una gran cantidad de subtipos
morfolgicos. Las diferencias en anchura, longitud y forma de los extremos de
la clula proporcionan una considerable heterogeneidad a la forma bacilar. En
funcin de la tendencia de las clulas hijas a permanecer unidas, los bacilos
presentan tambin agrupaciones celulares caractersticas, citando como
ejemplo las formas en empalizada ( ///// ) o en V ( <<< ) o en letras chinas.
Aunque son hasta cierto punto caractersticos, los agrupamientos de clulas
bacilares no tienen la misma importancia morfolgica que el agrupamiento de
cocos.
Espirilos:
El tercer tipo morfolgico es la forma espirilar, que puede considerarse
como un bacilo que se ha torcido adoptando la forma de hlice. Aunque la
curvatura se observa ocasionalmente en muchas formas bacilares, en el gnero
Vibrio es suficientemente constante como para tener importancia diferencial.
Los vibrios pueden presentar una forma espirilar si las clulas permanecen
unidas por sus extremos.
Las verdaderas bacterias espirilares pueden ser de dos tipos: con espira
rgida o con espira flexible. Al conjunto de las formas espirilares flexibles se le
conoce como espiroquetas. La clasificacin y diferenciacin de las espiroquetas
patgenas se basa en criterios morfolgicos tales como la longitud de vuelta, el
ngulo en los extremos de la clula, la presencia de una envuelta externa y la
composicin del filamento axial.

II.C.

Caractersticas de las colonias bacterianas.

Cuando las bacterias crecen en la superficie de un medio de cultivo

slido, las clulas en divisin permanecen aproximadamente fijas en su
posicin y forman masas de muchos millones de clulas visibles a simple vista.
Las colonias as formadas varan desde un tamao diminuto, apenas visible,
hasta masas de varios milmetros de dimetro.
Su tamao, forma, textura, olor y en algunos casos color son, a veces,
muy orientativos para la identificacin de las bacterias que la componen.
Aunque estas caractersticas dependen a menudo de la naturaleza del medio
de cultivo y de las condiciones de incubacin, cuando stas se controlan
cuidadosamente, son muy constantes y, en muchas ocasiones, tienen un valor
diferencial considerable.
La morfologa de las colonias es una de las caractersticas bsicas de las
bacterias y es indispensable su estudio para comenzar correctamente una
identificacin preliminar. Las caractersticas morfolgicas ms importantes de
una colonia bacteriana aislada sobre un medio de cultivo slido son:

Tamao:
El tamao de las colonias bacterianas es, en condiciones de cultivo
favorables, bastante uniforme para cada especie o tipo. La visualizacin del
tamao se suele hacer a simple vista, aunque a veces es preferible utilizar
lupas o estereoscopios para poder discernir con mayor claridad las
caractersticas morfolgicas a observar. Las colonias de estreptococos, por ej.,
son relativamente pequeas (menos de 1 mm de dimetro), mientras que las
de estafilococos o las de algunos bacilos pueden alcanzar hasta 1 cm de
dimetro. Es importante destacar que las caractersticas de una colonia deben
estudiarse siempre sobre el mismo tipo de medio de cultivo, para evitar las
diferencias surgidas por la diferente composicin de los mismos.
El tamao de las colonias bacterianas podemos expresarlo en las
siguientes categoras:
- Pequeas o puntiformes: 1 mm de dimetro o menor
- Medianas: hasta 4 mm de dimetro
- Grandes: mayores de 4 mm de dimetro
El tamao de las colonias debe ser considerado y medido en la parte
final de la zona de aislamiento, que es donde presentan su mximo tamao.
No deben valorarse ms que colonias bien aisladas.
Morfologa:
La morfologa de una colonia viene dada por su borde y forma de
elevarse sobre el medio de cultivo.
El borde puede ser liso (redondeado u ovalado) o irregular (aserrado,
lobulado o espiculado). Si pudisemos hacer un corte en un plano
perpendicular a la base de la colonia podramos
encontrar las siguientes posibilidades:
- semiesfrica o
- cerebroide
convexa
- plana con bordes elevados (en crter).
- plana o en disco
- plana con centro elevado (en huevo
frito)
- acuminada
Superficie:
La superficie de la colonia, examinada mediante luz reflejada, puede
mostrar un aspecto liso y brillante a la luz o, por el contrario, una textura
irregular, rugosa y mate, sin brillo. Puede mostrar un aspecto filamentoso o
cerebroide.
La utilizacin de una lupa estereoscpica permite la observacin de esta
caracterstica mediante la deteccin del reflejo del filamento de la lmpara en
la superficie de la colonia.
Consistencia:
Las colonias bacterianas pueden tener una consistencia variable, desde
seca y frgil a grasienta y cremosa o viscosa y pegajosa. Esta caracterstica slo
se aprecia cuando tocamos las colonias con el asa de siembra.
Podremos observar colonias "duras" que se deslizan fcilmente por la
superficie del medio, siendo difcil manipularlas con el asa. A menudo estas
colonias se fragmentan al intentar cogerlas.
Otras colonias tienen apariencia cremosa, con superficie brillante
generalmente y fciles de manipular con el asa. La mayora de las colonias

tienes consistencia mantecosa, siendo muy fcil obtener pequeas porciones

de la misma, que quedan bien adheridas al asa de siembra.
En algunas ocasiones las colonias son extremadamente viscosas y
tienden a formar filamentos mucosos cuando intentamos retirarlas con el asa.
Pigmentacin:

Es caracterstico slo de unas pocas especies bacterianas. La

pigmentacin slo se observa en colonias, y nunca en clulas individuales.
Dentro de las bacterias patgenas, una de las formas pigmentadas ms
importantes es Staphilococcus aureus, cuyas colonias son normalmente de
color amarillo dorado. En ocasiones, el pigmento difunde al medio, dando a
ste una tonalidad caracterstica en algunas especies. Pseudomonas, por
ejemplo, produce un pigmento verdoso que puede ser fcilmente reconocido en
medios incoloros como el Mueller-Hinton.
Hay que tener especial precaucin para no atribuir una falsa
pigmentacin a colonias que se han desarrollado en medios con determinadas
sustancias nutritivas (azcares) e indicadores de cambio de pH. Por ejemplo,
los grmenes que utilizan la lactosa para su metabolismo darn colonias de
color amarillo en un medio que contenga este azcar y un indicador de pH
adecuado.
Hemlisis:
Algunas bacterias, fundamentalmente los cocos, pueden ser capaces de
hemolizar los hematies de un medio nutritivo slido como el agar sangre. Esto
es debido a la liberacin de unas sustancias denominadas hemolisinas. La
hemlisis de los hematies adyacentes a la colonia puede ser intensa o ligera y
se observa como un halo verdoso ms o menos claro alrededor de la colonia.
La hemlisis intensa se denomina eta hemlisis; la hemlisis parcial se conoce
como alfa hemlisis y la ausencia de sta se define como gamma hemlisis. La
produccin de hemlisis en una placa de agar sangre es una de las
caractersticas que ayudan a diferenciar los diferentes tipos de estreptococos.
Olo
r:

Ciertos tipos de bacterias descomponen los sustratos que utilizan para

su metabolismo

desprendiendo sustancias voltiles que proporcionan un olor caracterstico a los

cultivos puros de dichas bacterias. Como intentar definir un olor es tan difcil
como subjetivo, slo os dir que ser nicamente la prctica diaria la que os
permita un reconocimiento adecuado de esta caracterstica.
Puesto que estas caractersticas aparecen en grados y combinaciones
variables de unas bacterias a otras, el aspecto de las colonias es a menudo
bastante caracterstico, permitiendo distinguir distintas clases de bacterias en
cultivos mixtos o contaminados. La diferenciacin en base a un criterio
morfolgico de las colonias es slo orientativa, y para poder identificar una
bacteria se necesita un estudio detallado de sus caractersticas fisiolgicas e
inmunolgicas.
En este video de youtube podis encontrar algunas caractersticas de las
colonias bacterianas:
http://www.youtube.com/watch?v=PYFT3QT_y7Q
Bibliografa
recomendada

Brock. Biologa de
microorganismos.
Microbiologa mdica.

Madiga
n.
Murray.

10 Ed.
1 Ed 2007.

Pearson Prentice
Hall
Elsevier

Captulo
4.
Captulo