DETERMINACIN DE HUMEDAD MEDIANTE SECADO EN ESTUFA

MATERIAL
Balanza de precisin 0,1 mg como mnimo
Desecador provisto de gel de slice con indicador higromtrico
Estufa de desecacin a 102+/2C
Cpsulas de desecacin
Arena y barilla
PROCEDIMIENTO
1. Secar la cpsula, arena (10 g) y barilla a 102+/2C secada durante 30
minutos
2. Situar la cpsula en el desecador y dejar que se enfre a temperatura
ambiente
3. Pesar la cpsula sin muestra (P1)
4. Colocar la muestra en la cpsula y pesar (P2)
5. Introducir la cpsula en el desecador y llevarla a la estufa
6. Introducir la cpsula en la estufa de desecacin y mantenerla 34 horas
7. Situar la cpsula en el desecador y dejar enfriar
8. Pesar la cpsula (P3) Observaciones: Repetir la desecacin hasta que la
diferencia entre dos pesadas consecutivas no sea mayor de 0,5 mg.
CLCULOS

100

Porcentaje Humedad =(M1-M2) M 1Mo

Siendo:
M0 = Peso, en g, de la cpsula, varilla y arena
M1 = Peso, en g, de la cpsula, varilla y arena y muestra antes del secado
M2 = Peso, en g, de la cpsula, varilla, arena y muestra despus del secado.
DETERMINACION DE PROTEINAS (mtodo kjeldahl)
MATERIAL Y EQUIPO

Balanza analtica, sensibilidad 0.1 mg.

Equipo Kjeldahl 5.3.- Manto calefactor

pHmetro
Material usual de laboratorio.

REACTIVOS

Acido sulfrico concentrado, p.a.

Sulfato de potasio o sulfato de sodio, p.a.
Sulfato cprico, p.a.
Solucin de hidrxido de sodio al 15 % . Disolver 150 g de NaOH y
completar a 1 litro.
Solucin de cido sulfrico 0.1 N. Tomar 2.7 mL de H2SO4 conc. y
completar a 1 litro, luego estandarizar con Na2CO3 anhidro p.a.
Solucin de hidrxido de sodio al 30 %. Disolver 300 g de NaOH y
completar a 1 litro.
Solucin indicadora de rojo de metilo al 1 % en etanol. Disolver 1 g de
rojo de metilo en 100 mL de etanol (95 %).
Solucin de hidrxido de sodio 0.1 N. Tomar 4 g de NaOH y enrasar a
1 litro con agua recientemente hervida y enfriada. Valorar con cido
succnico.
Acido brico al 3 % . Disolver 30 g de cido brico y completar a 1
litro.
Indicador de Tashiro: rojo de metilo al 0.1 % y azul de metileno al 0.1
% en relacin de 2:1, en alcohol etlico.
Solucin de cido clorhdrico 0.1 N. Tomar 8.3 mL de HCl conc. y
enrasar a 1 litro. Valorar con Na2CO3 anhidro.

- PROCEDIMIENTO
a) Realizar la muestra en duplicado.
b) Efectuar un ensayo en blanco usando una sustancia orgnica sin
nitrgeno (sacarosa) que sea capaz de provocar la reduccin de
los derivados ntricos y nitrosos eventualmente presentes en los
reactivos.
c) Pesar al 0.1 mg. alrededor de 1 g de muestra homogeneizada (m)
en un matraz de digestin Kjeldahl.
d) Agregar 3 perlas de vidrio, 10 g de sulfato de potasio o sulfato de
sodio, 0.5 g de sulfato cprico y 20 mL de cido sulfrico conc.
e) Conectar el matraz a la trampa de absorcin que contiene 250 mL
de hidrxido de sodio al 15 %. El disco poroso produce la divisin
de los humos en finas burbujas con el fin de facilitar la absorcin y
para que tenga una duracin prolongada debe ser limpiado con
regularidad antes del uso. Los depsitos de sulfito sdico se
eliminan con cido clorhdrico. Cuando la solucin de hidrxido de
sodio al 15 % adicionada de fenolftalena contenida en la trampa
de absorcin permanece incolora debe ser cambiada (aprox. 3
anlisis ).
f) Calentar en manta calefactora y una vez que la solucin est
transparente, dejar en ebullicin 15 a 20 min. ms. Si la muestra
tiende a formar espuma agregar cido esterico o gotas de
silicona antiespumante y comenzar el calentamiento lentamente.
g) Enfriar y agregar 200 mL de agua. 7.8.- Conectar el matraz al
aparato de destilacin, agregar lentamente 100 mL de NaOH al 30
% por el embudo, y cerrar la llave.

h) Destilar no menos de 150 mL en un matraz que lleve sumergido el

extremo del refrigerante o tubo colector en: a) 50 mL de una
solucin de cido sulfrico 0.1 N, 4 a 5 gotas de rojo de metilo y
50 mL de agua destilada. Asegurar un exceso de H2SO4 para que
se pueda realizar la retrotitulacin.Titular el exceso de cido con
NaOH 0.1 N hasta color amarillo o b) 50 mL de cido brico al 3 %.
Titular con cido clorhdrico 0.1 N hasta pH 4.6 mediante un
medidor de pH calibrado con soluciones tampn pH 4 y pH 7, o en
presencia del indicador de Tashiro hasta pH 4.6 Cada cierto tiempo
es necesario verificar la hermeticidad del equipo de destilacin
usando 10 mL de una solucin de sulfato de amonio 0.1 N (6.6077
g/L), 100 mL de agua destilada y 1 a 2 gotas de hidrxido de sodio
al 30 % para liberar el amonaco, as como tambin verificar la
recuperacin destruyendo la materia orgnica de 0.25 g de L(-)Tirosina. El contenido terico en nitrgeno de este producto es de
7.73 %. Debe recuperarse un 99.7 %.
CALCULO Y EXPRESIN DE RESULTADOS

V : 50 mL H2SO4 0.1 N - gasto NaOH 0.1 N o gasto de HCl 0.1 N

m : masa de la muestra, en gramos
factor:

6.25: para carne, pescado, huevo, leguminosas y protenas en

general
5.7 : para cereales y derivados de soya
6.38: leche
5.55: gelatina
5.95: arroz

Repetibilidad del mtodo: La diferencia entre los resultados de dos

determinaciones efectuadas una despus de otra, por el mismo analista, no
debe exceder 0.06 % de Nitrgeno o 0.38 % de protena. En la planilla de
resultados se indicar mtodo utilizado, identificacin de la muestra, peso
de muestra, gastos de titulacin, factor utilizado y resultados obtenidos de
la muestras en duplicado con 2 decimales.
DETERMINACION DE GRASAS (Mtodo Soxhlet)

MATERIAL Y EQUIPO

Sistema extractor Soxhlet

Balanza analtica
Papel filtro o dedal de celulosa
Bao termorregulado
Estufa de aire 103 + 2C
Tamiz de malla de 1 mm
Manto calefactor o rotavapor
Material usual de laboratorio

REACTIVOS

Eter etlico P.E. 40-60C

Eter de petrleo P.E. 40-60C

PROCEDIMIENTO
a) Preparacin de la muestra: En muestras con mucha humedad
homogeneizar y secar a 103+ C en estufa de aire considerando el
tipo de muestra.
b) Moler y pasar por tamiz de malla de 1 mm
c) Pesar en duplicado 2 a 5 gramos de muestra preparada en el dedal de
extraccin o papel filtro previamente pesado y tapado con algodn
desgrasado. Registrar m
d) Secar el matraz de extraccin por 30 min a 103+ 2C.
e) Pesar el matraz de extraccin Registrar m1
f) Poner el matraz de extraccin en el sistema soxhlet el dedal en el
tubo de extraccin y adicionar el solvente al matraz.
g) Extraer la muestra con el solvente por 6 a 8 horas a una velocidad de
condensacin de 3-6 gotas/seg.
h) Una vez terminada la extraccin eliminar el solvente por evaporacin
en rotavapor o bao Maria bajo campana. Hasta que no se detecte
olor a ter.
i) Secar el matraz con la grasa en estufa a 103+ 2C por 10 min, enfriar
en desecados y pesar.Registrar m2.
CALCULO Y EXPRESION DE RESULTADOS

Donde :

m peso de la muestra
m1 tara del matraz solo
m2 peso matraz con grasa.

Dnde :

m peso de la muestra
m1 tara del matraz solo
m2 peso matraz con grasa.
Los resultados se informan en % de materia grasa en base seca o
hmeda Promediar los valores obtenidos y expresar el resultado con 2
decimales. Repetibilidad : La diferencia de los 2 resultados no debe
ser superior al 2 % del promedio.