Anlisis de artculo

Por: jhon Fredy Cano Ramirez; cdigo: 6384412; grupo 301102_12

Mtodos bio-analticos mltiplexes

para el alimento y el control del
medio ambiente
Objetivos de la investigacin
Este articulo habla sobre los avances tecnolgicos
recientes en la
miniaturizacin de sistemas analticos, cuyo fin es el de poder determinar, la
trazabilidad alimentaria la cual se define como la capacidad de rastrear un
alimento desde su origen hasta el consumidor, dando lugar a una identificacin
fiable de sus ingredientes, para un control sanitario y un seguimiento del
alimento durante toda la cadena de produccin, esto se realiza debido a la
cantidad de contaminantes a las que se encuentran expuestos, los alimentos.
Por otra parte la gran cantidad de ingredientes que son adicionados en los
alimentos, y su diversificacin de insumos, hace que sea importante descubrir
el origen cualquier posible contaminacin y poder mitigarla con el fin de
garantizar la seguridad del alimento, puesto que este punto se ha convertido en
una de las cuestiones prioritarias en la cadena de abastecimiento alimentario,
que busca la seguridad del consumidor adems de la satisfaccin de sus
expectativas de calidad.

Metodologa empleada para el desarrollo de la investigacin

Los mtodos por los cuales se espera lograr dichos objetivos son los llamados
mtodos analticos de gran alcance. stos incluyen el gas analtico tradicional
[de los mtodos e.g., y la cromatografa lquida (CROMATOGRAFA GASEOSA
y LC) junta al espectrometra total (MS), a los mtodos que cultivan
microbiolgicos clsicos junto a la identificacin bioqumica y serolgica, al
electroforesis y a los inmuno anlisis en los formatos tradicionales (e.g., las
inmuno manchas e inmuno anlisis radiactivos). La combinacin de los
detectores del MS con tcnicas de la LC-separacin es probablemente la
metodologa lo ms comnmente posible aplicada para identificar los
contaminantes en el alimento y las muestras ambientales.
Puesto que los productos contienen cada vez ms, hoy en da mltiple
ingredientes procesados, que se envan a menudo de diversas partes del
mundo, y las lneas de montaje de la parte y los espacios de almacenaje

comunes, la seguridad del alimento y el control del medio ambiente se

convierte en una tarea desafiadora.
En que se fundamenta tericamente los mtodos empleados en el
artculo.

En una perspectiva de los progresos recientes en bio tecnologas mltiplexes

analticas y sus usos para la seguridad del alimento y el control del medio
ambiente teniendo en cuenta entonces:
En primera medida las tecnologas mltiples donde podemos nombrar
Series planas: Hoy en da muy empleada
que ofrecen altas
capacidades de multiplexacin a los ensayos biolgicos obligatorios, y
ellos son en particular tiles cuando la seleccin de multi anlisis es
necesaria.
A veces de medida corta, automatizacin, volmenes reducidos de la
muestra y la alta sensibilidad estn entre las ventajas principales
ofrecidas por tales sistemas. Las tecnologas de serie plana ms
prominentes ya aplicadas al anlisis de alimentos y ambiental incluyen
el Laboratorio de investigacin Naval (NRL) ponen en orden biosensor
basado en la fluorescencia de reflexin total interna (TIRF), la serie CL
micro y la Superficie Plasmon Resonancia (SPR) - El biosensor del
arsenal de NRL.
El biosensor del arsenal de NRL el cual se basa en una gua de onda
planas que dirija la luz evanescente de la excitacin a los fluoroforos
que estn limitados a la superficie. Se compone de tres porciones: un
arsenal de los elementos moleculares inmovilizados del reconocimiento
(generalmente anticuerpos), una imagen que captura y sistema de
proceso, y un Fluido que maneja la unidad. Las versiones comerciales
del biosensor arsenal tienen 6 disponibles recientemente [convertidos].
El biosensor arsenal se ha utilizado para la deteccin de molculas, de
toxinas, de protenas, de bacterias y de virus pequeos en usos
numerosos en seguridad del alimento, diagnstico, seguridad de la
patria y el control del medio ambiente.
rdenes micro CL-basados. El arsenal paralelo del sensor de la
afinidad (PASA) era el primer biosensor para la deteccin multiplexada
de antibiticos en la leche [9]. El PASA se basa en un CL ledo fuera del
arsenal micro va la cmara fotogrfica del CCD, incluye una clula de
caudal metro y un sistema hidrulico integrado para la direccin el
reactivo. Las virutas disponibles, micro puesta en orden con los haptens
o anticuerpos, se insertan en la clula de caudal o metro y se colocan
en el compartimiento oscuro. La luz se emite de los microarrays va la
reaccin qumica con la ayuda de una etiqueta de la enzima, omitiendo
la necesidad de una fuente de luz.

Los multi inmuno anlisis del analito en un formato competitivo

indirecto de ELISA se pueden poner en ejecucin para el anlisis
multiplexado rpido, automatizado. Generalmente, la muestra se premezcla con un anticuerpo especfico y el excedente inyectado
anticuerpos arsenales micro. Los lazos libres del anticuerpo puntos y
entonces el anticuerpo secundario, etiquetado con el perxidos
(VAINA), se introduce. La formacin del complejo inmuno es detectada
por la emisin ligera en presencia de un substrato basado luminol de la
VAINA.
Sensores SPR-basados. Los bio sensores de SPR no requieren el uso
de los elementos del reportero de generar una seal, que es
conveniente durante el desarrollo del anlisis y durante el uso
ahorrando pasos de etiquetado y lavando pasos. Los bio sensores de
SPR se basan en el fenmeno ptico que ocurre cuando la onda
evanescente, generada por la luz, obra recprocamente con los
electrones libres en una pelcula metlica fina. Los sensores de SPR se
utilizan en multi canal y ponen en orden disposiciones basadas. Los
sensores disponibles en el comercio ms populares de SPR son los
cuatro sistemas basados de Biacore del canal del flujo (4FC). La mayor
parte de los instrumentos son completamente automvil acoplado con
una capacidad de 192 muestras (dos 96 placas bien del micro ttulo).
Actualmente, hay un sistema de Biacore 4000 SPR disponible de
cuidado mdico de GE, con la posibilidad de deteccin simultnea de
16 puntos en el 4FCs. Muchos mtodos para la seguridad del alimento
y el control del medio ambiente se han desarrollado previamente en
plataformas de la base de Bia (vase seccin 3).
Las tecnologas planar nuevamente que emergen incluyen bio virutas
del sensor del (PDA) y rdenes polidiacetileno micro elctricos,
divulgaron recientemente el desarrollo de las virutas liposoma-basadas
PDA reticuladas para la deteccin mltiplex el patgeno. Los
supramolecules de PDA experimentan un cambio del color de azul al
rojo bajo varios estmulos (e.g., temperatura, pH y tensin mecnica),
incluyendo los acontecimientos obligatorios que ocurren en la
superficie. El estado rojo del PDA tambin produce fluorescencia. Para
la produccin de la viruta, se ponen en orden las liposomas de PDA
usando el etil amina como un inter vinculando en la amina cubri las
diapositivas de cristal de un observador de tiro del arsenal y conjug
con diversos anticuerpos. El atar para apuntar bacterias se puede
supervisar por el ojo desnudo, debido a la transicin cromtica, o
midiendo la salida fluorescente

1.2. rdenes de la suspensin

 Citometra de Flujo: En el flujo fluorescencia-basado citometra, las

clulas o las partculas se alinean en una corriente del flujo y
pticamente se interrogan. El tamao, la densidad, y la fluorescencia en
las longitudes de onda mltiples se pueden cuantificar creando rdenes
micro de la suspensin.
El multi analito que perfila tecnologa (del xMAP) de Luminex
Corporacin es el arsenal micro de la suspensin ms prominente
disponible en el comercio. Esta tecnologa emplea pequeo Carboxilado
las microesfera del polietileno (5.6 lm), que internamente se tien con un
fluoroforo rojo y un fluoroforo infrarrojo. Hasta 100 que diverso cifr color
de sistemas del grano pueden ser distinguidos variando el cociente de
los dos fluorfosforo. Cada sistema del grano se puede juntar a una
diversa punta de prueba biolgica, permitiendo medidas simultneas de
hasta 100 diversas interacciones biomoleculares en un solo pozo
Carboxilado la superficie del grano permite el acoplador qumico simple
de los reactivo de la captura (e.g., los anticuerpos o las conjugaciones
de la droga-protena).
Recientemente, un muy compacto, robusto y simple de fabricar el
citometro de micro flujo fue desarrollado por Kim et al. [19]. Teniendo
capacidades al punto-de-cuidado y sobre el anlisis de sitio, esto tiene el
gran potencial para usos en el alimento y la supervisin ambiental.

Nanoparticulas. La puesta en prctica de nuevos nano-instrumentos

[p.ej., nanoparticulas de oro (NPs) y puntos cunticos (QDs)] a usos
analticos promete la sensibilidad aumentada, multiplexando
capacidades, y gastos reducidos. Adems, dispositivos basados en NP
ofrecen la simplicidad de configuracin ptica, facilidad de fabricacin, el
gran potencial para la miniaturizacin, el manejo simple y a veces de
ensayos cortos. Por ejemplo, NPS fluorescente, sabido como QDs,
ofrece la deteccin mltiple por conjugando este semiconductor
nanocristales con molculas biorecognition. Sus amplios espectros de la
absorcin y espectros de emisin estrechos los hacen el ideal para la
multiplexacin ptica [20]. Otras propiedades de QDS incluyen el
fotobloqueo insignificante y limpiamente altas producciones cunticas.
Incluso aunque QDS ofrezca muchas ventajas sobre fluofosforo
convencional, su sntesis es considerada variantes difciles, y
comerciales todava son limitadas en el nmero y costoso.

Resultados relevantes y significado de los mismos.

1. Las tecnologas mltiplexes ofrecen el anlisis paralelo de varios
patgeno en un solo funcionamiento experimental, reduciendo tiempo
del anlisis, el trabajo y costos

2. Alergnicos del alimento y adlteros proteicos: La generacin

siguiente de las tcnicas de la protena-deteccin se basa en planar
miniaturizada y la suspensin pone en orden y permite anlisis
multiplexado de la protena. Para muchos adlteros, el mtodo de
deteccin ms rpido y ms fcil ha demostrado hasta ahora ser ELISA,
que es el ms de uso general de un formato del singleplex.
Haasnoot et al. [36] desarroll un triplex para la deteccin de protenas
de planta en la leche en polvo, usando un ensaye competitivo inmune en
la combinacin con la tecnologa xMAP. Esto fue realizado por
acoplando protenas de trigo solubles y protenas de la soja y el guisante
a tres juegos de microesfera diferentes.
La tecnologa basada microesfera tambin fue solicitada la deteccin de
la protena de Cry1Ab en maz gentico modificado con un LOD de
0.018% (peso (GMO) /weight), y descrita como el primer uso de un altorendimiento de procesamiento cuantitativo inmuno ensayo en anlisis de
GMO con opciones mltiplexes por Fantozzi y otros. [37].
Recientemente, Bremer y otros. [38] divulgaron el uso de la tecnologa
microesfera-basada para la deteccin indirecta de los somatotropinas
recombinados de los bvidos (rbST) va cambios en biomarcadores
rbST-dependientes mltiples en suero de la vaca. El rbST realza
funcionamientos del crecimiento y de la lactancia del ganado, pero su
uso est prohibido en la unin europea. La deteccin simultnea de la
total insulina-como el factor 1 (IGF1) y una del crecimiento de sus
protenas obligatorias fue demostrada con sensibilidades en la gama de
low-ng/mL.
3. Toxinas
Debido a la diversidad de estructuras de toxina, que varan de
compuestos " el peso bajo molecular " a protenas, es limpiamente
imposible usar una tcnica analtica para su deteccin. Ya que tcnicas
bio analticas utilizan una interaccin con un elemento de reconocimiento
biolgico para la deteccin, ellos permiten la posibilidad de seleccin
simultnea de mltiples toxinas de una matriz sola en una manera
rpida, rentable. El microcanal y biosensores SPR-BASADO han sido
descritos para varias micotoxinas [39]. Tal SPR rpido inmuno el ensaye
fue desarrollado para la deteccin combinada de T2-toxina y HT2-toxina
en cereales naturalmente contaminados y la papilla a base de maz [40].
Mak et al. [43] combin la especificidad de inmuno ensayos con la
sensibilidad y la simplicidad de deteccin magntica para desarrollar una
novela multiplex nanotag magntico (MNT) - la plataforma de deteccin
basada para las micotoxinas que funciona sobre un subp.m. El nivel de
concentracin. A diferencia de etiquetas fluorescentes, MNTs puede ser
descubierto con sensores baratos gigantescos magneto resistente (p.ej.,
sensores de vlvula de vuelta). Ellos relataron la deteccin simultnea
de AFB1, zearalenona y la HT2-toxina con LODS en el nivel de pg/mL.
4. Antibiticos

El empleo extendido de antibiticos veterinarios en alimentos para

animales tiene el potencial para provocar el desarrollo de bacteria
resistente de antibitico. Pruebas de inhibiciones microbianas y ensayos
inmuno basados o a base de receptor son las dos tcnicas de seleccin
principales aplicadas para la deteccin de antibiticos en productos de
alimentos y relacionados. Debido a su alta rentabilidad y amplias
caractersticas de espectro, mtodos de inhibicin microbianos son
preferidos para programas de supervisin a gran escala sobre residuos
de medicina veterinaria.
Sin embargo, ya que estos mtodos confan en la inhibicin de
crecimiento de una bacteria susceptible en la presencia del compuesto
de antibitico, ellos requieren las bastante muy largas veces de
incubacin de 4-18 h [48].
Una alternativa ms rpida es " una clula entera basada " el bio
ensayo, tambin la clula entera llamada biosensor, que ha sido descrito
para la deteccin de tetraciclinas [49]. Este ensaye est basado en una
cepa bacteriana genticamente tramada luminiscente que contiene la
unidad de regulacin de factor de tetraciclina-resistencia (tetraciclina el
elemento sensible) para controlar la expresin del lucferas operan,
causando tetraciclina la produccin dependiente ligera.
Mientras los bioensayos o clula entera biosensor utilizan la respuesta
de clulas enteras para descubrir a agentes biolgicamente activos,
biosensor instrumentos usan elementos de reconocimiento biolgicos
(p.ej., anticuerpos, enzimas, lecitinas, receptores y cidos nucleico)
acoplado a transductores [51]. Para la deteccin de antibiticos,
biosensor electroqumico y ptico el ms con frecuencia es aplicado.
Zacco et al. [57] desarroll una estrategia nueva electroqumica para la
deteccin de antibiticos sulfonamida en la materia prima, la leche
entera con un LOD de 1.4 lg/L basado en cuentas magnticas cubiertas
de clases especificas anti-sulfonamida anticuerpos y sulfonamida
perxido como la trazadora.
Incluso aunque el Q-Kit Biacore a base de equipo para el control de
drogas veterinario en productos alimenticios, incluyendo antibiticos, bagonistas, y medicinas antiparsitas, se han hecho disponibles en el
comercio, los sistemas Biacore sea considerada cara y ofrezca
posibilidades de multiplexacin limitadas. Para proporcionar el control
aumentado, ms eficiente de antibiticos en la cadena alimentaria,
opciones ms baratas y sistemas ms extensos mltiples son
necesarios. Rebe Raz et al. [58] us el IBIS SPR para la deteccin
simultnea de siete antibiticos en la leche. Por multiplexado siete
ensayos inmuno en un formato competitivo, ellos fueron capaz de medir
todo el objetivo los compuestos en partes por mil millones (ppb) nivelan
en la leche desnatada diluida, dentro de 10 minutos.
5. Contaminantes ambientales

Debido a su naturaleza integrada, los bio sensores son ideales para el

control del medio ambiente y la deteccin, pues pueden ser portables y
proporcionar respuestas selectivas, sensibles y rpidas en tiempo real.
Sin embargo, la mayor parte de son solos detectores del analito, y eso
es una desventaja importante porque de la presencia posible por
ejemplo de muchos pesticidas.
Mauriz et al. [15] describieron multi los anlisis inmuno del analito SPR
para el bio sensor ambiental de los pesticidas DDT, chlorpyrifos y
carbaryl en un biosensor de dos vas con sensibilidades de 18-50 ng/L.
De acuerdo con avances recientes en la ingeniera de NP, Nichkova y
otros. [63] describieron el uso de dos QDs disponible en el comercio
como etiquetas en un anlisis inmuno micro, informacin para la
deteccin microscpica simultnea de dos biomarkers de la exposicin
a dos clases importantes de compuestos: insecticidas y herbicidas.
Guo et al. [64] desarroll una prueba de tira de flujo lateral para la
deteccin simultnea de carbofuran y triazophos la utilizacin dos
especfico etiquetado por oro monoclonal anticuerpos como reactivo de
detector con LODS en el agua claveteada en 32 lg/L y 4 lg/L,
respectivamente. El NRL biosensor tambin fue utilizado para las
medidas simultneas de hasta 30 contaminantes. Esto caus un
ordenador de analizador automatizado de agua el sistema apoyado (el
AWACS) que podra medir varios agentes contaminadores orgnicos en
el nivel bajo-ppt en un anlisis solo dentro de un minuto y sin cualquier
muestra previa pre paso de tratamiento [9].
Los biosensor de la Entero-clula proporcionan una de las herramientas
ms nuevas usadas en el control del medio ambiente. Son
particularmente tiles para probar toxicidad y biodisponibilidad del
contaminante, y ese las hace convenientes para la deteccin de agentes
desconocidos. Una prueba biolgica basados en clulas del estrgeno
de la levadura recombinante, expresando era humana y la protena
fluorescente verde en respuesta a los estrgenos, era recientemente
desarrollada y aplicada a la actividad estrogenitos de la investigacin en
el pienso [70].
6. Un multiplexado, a base de cuenta, meso fluidos del sistema (BMS) fue
desarrollado para la deteccin simultnea de ocho principales patgenos
transmitidos por los alimentos {p. ej. Salmonella entrica, S.) Arreglaron
cuentas micro de cristal, cubiertas de sondas de nucletido especficas,
en canales micro en una orden predeterminada. Fluorescentemente
etiquetado PCR los productos de amplios patgeno fueron infundidos en
los microcanales, donde ellos fueron capturados por correspondiendo
sondas. LODs obtenido para los ocho prob patgenos de culturas
puras estaban en la gama 0.5-6 103 CFU/mL. Patgenos probado
correctamente fue descubierto e identificado en 184 muestras
endgenamente infectadas de alimentos, incluyendo huevos, carne de
cerdo, pollo, mariscos, helado y leche en polvo.

BIBLIOGRAFA
Marta lopez, P. m. (11 de 2016). Tecnologias moleculares de trazabilidad
alimentaria . Obtenido de Genoma :
http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/TRAZABILIDAD_ALIMENTARIA
.pdf
Sabina Rebe Raz, W. H. (2011). Multiplex bioanalytical methods for food and
environmental monitoring.