INSTITUTO TECNOLGICO

SUPERIOR DE IRAPUATO
Prctica #2: Coliformes Totales y Fecales en
Agua de Consumo Humano.

Docente: Dra. Ma. Azucena Mrquez Lucio

Alumnos:
IS10110682Salomn Negrete, Miguel ngel
IS10110683Ramirez Nez, Miguel ngel
IS10110064Martinez Prez, Christian Ivn
IS10110606Ramirez Garca, Mario
IS10110754Sanchez Bermejo, Natalie
I
17/09/2013

INDICE
INDICE DE FIGURAS ............................................................................................ IV
INDICE DE TABLAS .............................................................................................. IV
1. INTRODUCION ................................................................................................ 1
1.1 CONFIABILIDAD............................................................................................ 4
2. ANTECEDENTES ............................................................................................. 4
2.1 MICROORGANISMOS PATGENOS PRESENTES EN EL AGUA .............. 4
2.2 MICROORGANISMOS INDICADORES ......................................................... 5
2.2.1 COLIFORMES TOTALES Y FECALES ................................................... 7
2.3 TECNICA DEL NMERO MS PROBABLE (NMP) .................................... 10
2.3.1 LMITES PERMISIBLES DE MICROORGANISMOS EN AGUA DE
CONSUMO HUMANO .................................................................................... 12
3. OBJETIVO ...................................................................................................... 13
4. MATERIALES Y REACTIVOS ........................................................................ 13
5. METODOLOGA DE MANEJO DE MUESTRA............................................ 15
5.1 Previo a la toma de muestra ........................................................................ 15
5.2 MANEJO DE MUESTRA .............................................................................. 16
5.3 MEDIOS DE CULTIVO ................................................................................ 16
5.4 ANALISIS DE MUESTRA ............................................................................ 16
5.4.1 Tcnica del NMP para Coliformes Totales y Coliformes Fecales .......... 16
6. Clculos. ......................................................................................................... 19
7. DIAGRAMAS .................................................................................................. 21
.............................................................................................................................. 22
II

8. RESULTADOS ............................................................................................... 22
8.1 PRUEBA PRESUNTIVA .............................................................................. 22
8.2 PRUEBA CONFIRMATIVA .......................................................................... 23
8.2.1 NMP para coliformes totales en verde bilis brillante .............................. 23
8.2.2 NMP para coliformes fecales en Caldo E. coli ....................................... 23
8.2.3 NMP calculado por tablas del NMP ....................................................... 24
9. DISCUSIONES ............................................................................................... 24
10.

CONCLUSIONES ........................................................................................ 26

11.

CUESTIONARIO ......................................................................................... 26

12. ANEXOS ......................................................................................................... 30

12.1 FICHAS TECNICAS ................................................................................... 30
BIBLIOGRAFA ..................................................................................................... 33

III

INDICE DE FIGURAS
Figura 1: bacilo Gram negativo, E. coli .................................................................... 9
Figura 2: Termmetro Taylor con escala 0-140C................................................. 15

INDICE DE TABLAS
Tabla 1: lmites mximos permisibles para agua de consumo humano bajo la NOM127-SSA1-1994 ..................................................................................................... 12
Tabla 2: Lmites mximos permisibles para agua envasada ................................. 12
Tabla 3: lmites mximos permisibles para agua y hielo para consumo humano. . 13
Tabla 4: materiales a utilizar en la prctica. .......................................................... 13
Tabla 5: Se indica en esta tabla los diferentes medios de cultivo a utiliza en el
procedimiento junto con sus concentraciones (g/ml) correspondientes ................ 16
Tabla 6: se presenta la cantidad de tubos positivos para la prueba de caldo
lactosado 24h y 28h .............................................................................................. 22
Tabla 7: No. De tubos positivos de E. coli y verde bilis brillante en la prueba
confirmativa. .......................................................................................................... 23
Tabla 8: lectura en conjunto de las diferentes pruebas de anlisis en esta prctica.
.............................................................................................................................. 24
Tabla 9: lmites mximos permisibles de C. fecales y Totales en agua para consumo
humano. ................................................................................................................ 28
Tabla 10: Requisitos para la recarga artificial de acuferos con agua residual tratada
.............................................................................................................................. 28
Tabla 11: lmites mximos permisibles para contaminantes en aguas de rehso . 30
Tabla 12: ficha reactiva para etanol ...................................................................... 33

IV

1. INTRODUCION
La potabilidad del agua es de gran importancia en cuanto a Salud Pblica, ya que
sta puede servir como vehculo de microorganismos patgenos, es decir,
productores de enfermedades llamadas comnmente "de origen hdrico" tales como
Salmonelosis (Tifoidea y Paratifoidea), Shigelosis, Clera, Hepatitis, etc. Estos
microorganismos son todos de origen entrico. Se sabe que los microorganismos
patgenos que llegan a los depsitos de agua, proceden de las descargas
intestinales de hombres y animales. Adems, ciertas especies de bacterias,
particularmente Escherichia coli, y varios microorganismos similares, denominados
coliformes, Estreptococos fecales y Clostridium perfringens, son habitantes
normales del intestino grueso de hombres y animales y en consecuencia siempre
estn en las materias fecales. As pues, la presencia de cualquiera de estas
especies en el agua es evidencia de contaminacin fecal y el camino est abierto a
los patgenos ya que se encuentran en las materias fecales.
La evaluacin rutinaria del agua en busca de microorganismos patgenos, como
Salmonella spp. y Shigella spp. puede ser difcil de realizar ya que el nmero de
estas bacterias es relativamente escaso, por lo que se tiene que recurrir a pruebas
bacteriolgicas del agua potable que demuestren la presencia de microorganismos
indicadores que siempre estn presentes en materia fecal, fcil de demostrar y que
sirva de gua para conocer el grado de contaminacin fecal.
Surge as el concepto de "Indicador de contaminacin fecal", el cual ser utilizado
para la valoracin de la potabilidad bacteriolgica de las aguas. De acuerdo con lo
anterior, se ha adoptado con carcter general, el "Grupo Coliforme" como indicador
ms digno de confianza. La OMS incluye dentro del grupo coliforme todos los
bacilos aerobios y anaerobios facultativos Gram negativos, no esporulados, que
producen cido y gas al fermentar la lactosa, a 35 37 C. Las especies clsicas
de este grupo son Escherichia coli y Enterobacter aerogenes. El microorganismo
indicador ms comnmente utilizado es Escherichia coli, considerando la OMS
1

preferible emplear la expresin "Coliforme fecal" que comprende un nmero

ligeramente mayor de variedades, todas ellas de claro origen fecal e indicadores de
contaminacin fecal reciente. Para los efectos del anlisis sanitario del agua, se
define el Coliforme fecal como un bacilo aerobio o anaerobio facultativo, Gram
negativo, no esporulado, que fermenta la lactosa con produccin de cido y gas a
44 C (0.5 C) en menos de 24 horas. El mtodo se basa en la inoculacin de
alcuotas de la muestra sin diluir que pueden ser volmenes de 50, 10 y 1 mL, de
10, 1 y 0.1 mL, o diluida en caso necesario, en una serie de tubos por triplicado o
quintuplicado con un medio que contiene lactosa (caldo lactosado o caldo lauril
triptosa).
La valoracin del contenido microbiano de una muestra de agua por el mtodo del
NMP supone la utilizacin de tablas numricas que tienen en cuenta los volmenes
de agua y las cantidades de tubos sembrados en una ms series. Realmente
consiste en tratar estadsticamente el nmero de tubos de cada serie sembrada que
resulten positivos despus de su incubacin. En cuanto a la investigacin de
patgenos en agua, no existe un mtodo nico que permita aislar e identificar todos
estos microorganismos. En general, los mtodos con los que se obtienen mejores
resultados comprenden una fase de concentracin, seguida de tcnicas de
enriquecimiento y aislamiento especficas para cada microorganismo. El
procedimiento para la recoleccin de las muestras de agua para el anlisis
bacteriolgico, depende del tipo de agua que se desee muestrear. Este se har de
acuerdo a la normatividad mexicana vigente. Las muestras para el anlisis
bacteriolgico, se deben tomar en frascos muestreadores que se hayan lavado con
extremo cuidado y esterilizado. En su interior aadir, previo a la esterilizacin, 0.1
mL de solucin de Na2S2O3 (tiosulfato de sodio) al 10%, por cada 120 mL de
muestra con el propsito de neutralizar la accin del cloro que pudiera contener la
muestra, cubriendo adems el tapn del frasco hasta el cuello con papel aluminio.
El anlisis bacteriolgico de la muestra debe practicarse inmediatamente despus
de su recoleccin. Es por ello que se recomienda que de no efectuarse as el
anlisis, se inicie dentro de las dos horas prximas a la recoleccin de la muestra y
2

en ningn caso, este lapso debe de exceder de 24 horas para agua potable y de 6
horas para otros tipos de agua para que sea vlido el resultado del anlisis. Durante
el perodo que transcurre del muestreo al anlisis, se debe conservar la muestra a
4 C, con objeto de inhibir la actividad bacteriana para no obtener resultados falsos
o dudosos.
Por otra parte Debido a que las aguas residuales son de composicin variada
provenientes de descargas de usos municipales, industriales, comerciales, de
servicios, agrcolas, pecuarios, domsticos, incluyendo fraccionamientos y en
general de cualquier uso, as como la mezcla de ellas, contienen diferentes tipos de
microorganismos contaminantes y las diferentes concentraciones, dependiendo de
su fuente. La variada poblacin de microorganismos en esta agua, proviene del
suelo y de origen intestinal, incluyen aerobios y anaerobios estrictos y facultativos
as como tambin numerosos virus como: Poliovirus y virus de la hepatitis.
Igualmente pueden contener formas parasitarias variables como quistes de
Protozoarios y huevecillos de Helmintos (Metazoarios). Asimismo, existe en nuestro
pas el grave problema de contaminacin de ros, lagos acuferos y costas debido a
que estos son utilizados como depsito de todos los desechos generados por las
actividades humanas. Estos microorganismos pueden sobrevivir al tratamiento, por
lo que su reuso p.ej., en riego agrcola, actividades recreativas: Aguas de piscinas,
baos de hidromasaje, aguas potables naturales, actividades pisccolas y aguas
marinas superficiales (playas), representan un riesgo potencial a la salud pblica.
Por todo lo anterior, adems del estudio de las caractersticas fisicoqumicas del
agua se requiere de un estudio microbiolgico. Para este propsito se debern
obtener muestras representativas usando los procedimientos de toma de muestras
establecidos en las Normas Oficiales Mexicanas. Para la determinacin del NMP de
Coliformes Totales y Fecales en este tipo de aguas, es necesario proceder a
preparar diluciones decimales de la muestra, debido a que se espera que la
concentracin de coliformes sea superior en stas que en un agua potable. El
nmero de diluciones vara mucho, dependiendo del origen de la muestra a tratar.

Por lo dems, para su anlisis de proceder en la misma forma que para una muestra
de agua potable.

1.1 CONFIABILIDAD
El procedimiento de fermentacin en tubos mltiples es el mtodo ms usado por
su facilidad y economa. El resultado de esta prueba se expresa por el nmero ms
probable (NMP), pero debe entenderse que este mtodo no es exacto ya que slo
nos da la probable densidad de bacterias coliformes totales o fecales de una
muestra determinada. La confiabilidad est dada por los niveles superiores o
inferiores del lmite de confianza al 95% establecidos en las tablas para cada
NMP/100 mL, no obstante, es una indicacin importante para evaluar la calidad
sanitaria del agua.

2. ANTECEDENTES
Segn la norma mexicana NOM-201-SSA1-2002 define como Agua para consumo
humano a granel, como el agua que no contiene materia extraa, ni contaminantes,
ya sean qumicos, fsicos o microbiolgicos, que causen efectos nocivos a la salud,
que es suministrada en presencia del consumidor.
El abastecimiento de agua para uso y consumo humano con calidad adecuada es
fundamental

para

prevenir

evitar

la

transmisin

de

enfermedades

gastrointestinales y otras, para lo cual se requiere establecer lmites permisibles en

cuanto a sus caractersticas microbiolgicas, fsicas, organolpticas, qumicas y
radioactivasFuente especificada no vlida..
2.1 MICROORGANISMOS PATGENOS PRESENTES EN EL AGUA
Existen muchos microorganismos patgenos en el agua que deben ser
considerados en el anlisis y diseo de cualquier proceso de desinfeccin del agua
potable. Sean estos patgenos: bacterias, virus o protozoarios, es necesario

conocer su resistencia al desinfectante que se est considerando utilizarFuente

especificada no vlida..
Varios organismos patgenos de transmisin fecal-oral pueden estar presentes en
el agua cruda, entre ellos bacterias tales como Salmonella, Shigella y Vibrio
cholerae son clsicos patgenos de preocupacin. Estas bacterias y otros agentes
virales han sido encontrados en abastecimientos de agua desde hace mucho
tiempo. Sin embargo, hoy en da se han identificado otros patgenos importantes
en el agua, como algunos protozoarios, cuya presencia en el agua cruda pudiera
significar graves problemas de salud pblicaFuente especificada no vlida..
2.2 MICROORGANISMOS INDICADORES
Los agentes patgenos transmitidos por el agua constituyen un problema mundial
que demanda un urgente control mediante la implementacin de medidas de
proteccin ambiental a fin de evitar el incremento de las enfermedades relacionadas
con la calidad del agua Fuente especificada no vlida..
La determinacin de microorganismos intestinales normales como indicadores de
contaminacin fecal, en lugar de patgenos, es un principio de aceptacin universal
en la vigilancia y evaluacin de la seguridad microbiana en los sistemas de
abastecimiento de aguaFuente especificada no vlida..
El anlisis microbiolgico en la industria de alimentos se constituye en una
herramienta bsica para control de materias primas, procesos y productos y
manipuladores, ya que permite establecer el valor grado de contaminacin biolgica
de estos, por esta razn el control microbiolgico es parte fundamental en todo
proceso. Los principales objetivos del anlisis microbiolgico son:
1. Asegurar que el alimento cumpla con las normas estatuarias
2. Que se ajuste a normas internas establecidas por la empresa que los procesa
y a las que exija el comprador

3. Que las materias alimenticias que llegan a la planta para ser procesadas
cumplan las normas exigidas y pactadas con el productor
4. Que se mantenga el control del proceso y la higiene de la lnea de fabricacin
El anlisis rutinario de los alimentos para poner de manifiesto un amplio rango de
bacterias patgenas resultara poco prctico para la mayora de las industrias. Es
por eso que se ha convertido en prctica corriente investigar en los alimentos la
presencia de grupos indicadores que determinen la posibilidad de la existencia de
microorganismos causantes de intoxicaciones o de otros riesgos asociados al
crecimiento microbiano. Por ello se le denomina microorganismos indicadores y se
catalogan frecuentemente como de gran importancia al establecer la seguridad y
calidad microbiolgica de los alimentos Fuente especificada no vlida..
Un microorganismo indicador de contaminacin fecal debe reunir las siguientes
caractersticas Fuente especificada no vlida.:

Ser un constituyente normal de la flora intestinal de individuos sanos.

Estar

presente,

de

forma

exclusiva,

en

las

heces

de

animales

homeotrmicos.

Estar presente cuando los microorganismos patgenos intestinales lo estn.

Presentarse en nmero elevado, facilitando su aislamiento e identificacin.

Debe ser incapaz de reproducirse fuera del intestino de los animales

homeotrmicos.

Su tiempo de supervivencia debe ser igual o un poco superior al de las

bacterias patgenas, su resistencia a los factores ambientales debe ser igual
o superior al de los patgenos de origen fecal.

Debe ser fcil de aislar y cuantificar.

No debe ser patgeno.

2.2.1 COLIFORMES TOTALES Y FECALES

La presencia y extensin de la contaminacin fecal es un factor importante en la
determinacin de la calidad del aguaFuente especificada no vlida.. Debido a que
un gran nmero de enfermedades son transmitidas por va fecal-oral utilizando
como vehculo los alimentos y el agua, es necesario contar con microorganismos
que funcione como indicador de contaminacin fecal. Estos deben de ser
constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener una
sobrevivencia similar a la de los patgenos intestinales y debe de ser capaces de
desarrollarse extraintestinalmente Fuente especificada no vlida..
El anlisis de muestras de agua para determinar la presencia de miembros del grupo
coliforme, que habitan normalmente en el intestino del hombre y otros animales de
sangre caliente, da una indicacin sensible de dicho tipo de contaminacin. Dado
que la capacidad de algunos miembros del grupo coliforme para sobrevivir en agua
es limitada, sus nmeros pueden emplearse tambin para estimar el grado de
contaminacin fecal. Fuente especificada no vlida..
El grupo coliforme posee tambin

la capacidad para multiplicarse en aguas

potables, por lo que el grupo coliforme se utiliza como indicador de contaminacin

fecal en agua. En productos alimenticios que han recibido un tratamiento trmico
(pasteurizacin, horneado, coccin, etc.), los coliformes se utilizan como
indicadores de malas prcticas sanitarias Fuente especificada no vlida..
Las bacterias coliformes son un grupo heterogneo compuesto por varios. Existe
poca evidencia que indique que estas bacterias coliformes pertenezcan a un solo
gnero taxonmico. La falta de certeza en cuanto a su filiacin taxonmica y la
imprecisa correlacin entre los mtodos recomendados para la deteccin de
coliformes han presentado problemas. El primero, es que Escherichia coli es
aceptada como bacteria coliforme, la especie contiene variantes que no producen
gas de la lactosa o lo hacen despus de 48 horas, por lo que no se les identifica por
medio de esta tcnica. Segundo, la capacidad de fermentar la lactosa est
7

frecuentemente asociada a genes localizados en plsmidos. Estos determinantes

extracromosomales son fcilmente transferidos entre otras bacterias Gram
negativas no relacionadas a las coliformes, que pueden, en consecuencia, ser
recuperadas en la etapa inicial del anlisis. No obstante en la prctica, la tcnica ha
demostrado su efectividadFuente especificada no vlida..
El grupo de bacterias coliformes totales comprende todos los bacilos Gram
negativos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados, que fermentan la
lactosa con produccin de gas en un lapso mximo de 48 h. a 35C 1C. Este
grupo est conformado por 4 gneros principalmente: Enterobacter, Escherichia,
Citrobacter y Klebsiella Fuente especificada no vlida..
Los coliformes totales se caracterizan por su capacidad de fermentar la lactosa a
35-37C en 24-48 horas y producir cido y gas. Tienen la enzima cromognica B
galactosidasa, que acta sobre el nutriente indicador ONPG. Este nutriente sirve
como fuente de carbono y su efecto consiste en un cambio de color en el medio de
cultivo. La reaccin se detecta por medio de la tcnica de sustrato definido. Las
tcnicas de anlisis ms conocidas son las pruebas de tubos mltiples y la filtracin
con membrana (Araujo, 2009)
El grupo de coliformes fecales, est constituido por bacterias Gram-negativas
capaces de fermentar la lactosa con produccin de gas a las 48 h. de incubacin a
44.5 0.1C. Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la ms
prominente es Escherichia coliFuente especificada no vlida..
La Escherichia y ocasionalmente la Klebsiella tienen la capacidad de fermentar la
lactosa no solo a las temperaturas indicadas, sino tambin a 44.5C. A los miembros
de este grupo se les denomina coliformes termotolerantes (fecales). Se denomina
coliformes termo tolerante a ciertos miembros de bacterias coliformes totales que
estn estrechamente relacionados con la contaminacin fecal, por este motivo,
reciben la denominacin de coliformes fecales. Como se mencion anteriormente,
estos crecen a una temperatura de incubacin de 44.5C. Esta temperatura inhibe
8

el crecimiento de los coliformes no tolerantes. Se miden por pruebas sencillas, de

bajo costo y ampliamente usadas en los programas de vigilancia de la calidad del
agua (Araujo, 2009).
La capacidad de reproduccin de los coliformes fecales fuera del intestino de los
animales homeotrmicos es favorecida por la existencia de condiciones adecuadas
de materia orgnica, pH, humedad, etc. Siendo de un gran inters clnico, ya que
pueden ser capaces de generar infecciones oportunistas en el tracto respiratorio
superior e inferior, adems de bacteremia, infecciones de piel y tejidos blandos,
enfermedad diarreica agua y otras enfermedades severas en el ser humano Fuente
especificada no vlida..
El lmite mximo permisible de coliformes fecales para las descargas de aguas
residuales vertidas a aguas y bienes nacionales, as como las descargas vertidas a
suelo es de 1,000 NMP/100 mL como promedio mensual y 2,000 NMP/100 mL como
promedio diario.
2.2.1.1 ESCHERICHIA COLI
Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo (figura 1 ) que se encuentra
clasificado dentro de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entricas), existe
como comensal en el intestino delgado de humanos y animalesFuente
especificada no vlida..

Figura 1: bacilo Gram negativo, E. coli

Es un patgeno emergente asociado a casos de diarrea, colitis hemorrgica,

sndrome urmico hemoltico (SUH) y trastornos de coagulacin (prpura
trombocitopnica trombtica) en seres humanos. La principal va de transmisin
son los alimentos contaminados como carne molida, productos crnicos crudos o
insuficientemente cocidos, embutidos fermentados, leche y jugos no pasteurizados,
vegetales que se consumen crudos, etc. Otras formas de transmisin incluyen la
contaminacin cruzada durante la preparacin de alimentos, el contacto directo del
hombre con los animales, baarse en aguas recreacionales contaminadas y de
persona a persona por la ruta fecal-oralFuente especificada no vlida..
2.3 TECNICA DEL NMERO MS PROBABLE (NMP)
El nmero de organismos coliformes se establece mediante la tcnica del nmero
ms probable (NOM-112-SSA1-1994. Determinacin de bacterias coliformes,
tcnica del nmero ms probable y NMX-AA-042-SCFI-2008. Deteccin y
enumeracin de organismos coliformes, organismos coliformes termotolerantes y
Escherichia coli presuntiva). Tambin llamada tcnica de dilucin en tubo,
proporciona una estimacin estadstica de la densidad microbiana presente con
base a que la probabilidad de obtener tubos con crecimiento positivo disminuye
conforme es menor el volumen de muestra inoculado.
En muchas ocasiones, ya sea por un bajo nmero de microorganismos en las
muestras a analizar, por hallarse presentes microorganismos muy invasivos que se
diseminan en la superficie de medios slidos, o por poseer la muestra
microorganismos que no desarrollen en medios slidos, se hace necesario realizar
recuentos en medios lquidos. La tcnica se denomina nmero ms probable (NMP)
y tiene su fundamento matemtico en las distribuciones de Poisson y binomial
(Ctedra de microbiologa, 2011).
La determinacin de microorganismos coliformes totales por el mtodo del Nmero
ms Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo microbiano de
fermentar la lactosa con produccin de cido y gas al incubarlos a 35C 1C
10

durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales biliares. Esta
determinacin consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase confirmativa. En la
fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de sodio
el cual permite la recuperacin de los microorganismos daados que se encuentren
presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa como fuente de
carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de cultivo caldo
lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el desarrollo de
aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares como el verde
brillante. La determinacin del nmero ms probable de microorganismos
coliformes fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva
y se fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y
producir gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 0.1C por un
periodo de 24 a 48 h. La bsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos
positivos de caldo EC Fuente especificada no vlida..
Los medios utilizados en el mtodo de tubos mltiples (NMP) segn las normas
NOM-112-SSA1-1994

NMX-AA-042-SCFI-2008

para

la

identificacin

enumeracin del grupo coliforme son los siguientes:

-Medios que se pueden utilizar para la prueba presuntiva de organismos coliformes:

Caldo Lactosa

Caldo MacConkey

Caldo formato lactosa glutamato mejorado2

Caldo Lauril triptosa (lactosa)

-Medio de cultivo que se utilizan para la prueba confirmativa de coliformes fecales:

Caldo lactosa (bilis) verde brillante

Medio EC

11

2.3.1 LMITES PERMISIBLES DE MICROORGANISMOS EN AGUA DE

CONSUMO HUMANO

NOM-127-SSA1-1994

Segn la norma mexicana NOM-127-SSA1-1994. Agua para uso y consumo

humano, la cual especifica los lmites permisibles de calidad y tratamientos a que
debe someterse el agua para su potabilizacin. El contenido resultante del examen
de una muestra simple de agua, debe ajustarse a lo establecido a lo siguiente:
Tabla 1: lmites mximos permisibles para agua de consumo humano bajo la
NOM-127-SSA1-1994
ESPECIFICACIN

LMITE MXIMO

Organismos coliformes totales

Ausencia

E. Coli

Ausencia

NOM-041-SSA1-1993

Segn la norma mexicana NOM-041-SSA1-1993 sobre las especificaciones

sanitarias de agua purificada envasada, el producto objeto de este ordenamiento
debe cumplir con las siguientes especificaciones microbiolgicas:
Tabla 2: Lmites mximos permisibles para agua envasada
ESPECIFICACIN

LMITE MXIMO

Mesoflicos aerobios UFC/mL

100

Coliformes totales NMP/100 mL

No detectable

Coliformes totales UFC/100 mL

cero

12

NOM-201-SSA1-2002

Segn la norma mexicana NOM-201-SSA1-2002 sobre las especificaciones

sanitarias de agua y hielo para consumo humano, envasados y a granel, en el cual
estable que el producto objeto de este ordenamiento, debe cumplir con las
siguientes especificaciones microbiolgicas:
Tabla 3: lmites mximos permisibles para agua y hielo para consumo humano.

ESPECIFICACIN

LMITES MXIMO

Coliformes totales

<1.1 NMP/100 mL

3. OBJETIVO
Determinar la presencia de bacterias del grupo Coliforme (totales y fecales), tanto
en agua de consumo humano, como en agua residual, mediante la tcnica del
Nmero Ms Probable (NMP), usando tubos de fermentacin mltiple.

4. MATERIALES Y REACTIVOS
Tabla 4: materiales a utilizar en la prctica.

Cantidad Descripcin
1

Muestra de agua potable de un volumen mnimo de 100 mL obtenida

en recipiente estril y con Tiosulfato de Sodio al 10%.

Tubos de 10mL conteniendo caldo lactosado a doble concentracin

13

12

Tubos de 10mL conteniendo (8mL)x(6 tubos) y (9mL)x(6 tubos) de

Caldo lactosado a concentracin sencilla

Gradilla.

Pipetas estriles de 1 mL graduadas en dcimas.

Esptula

Mechero Bunsen.

1 caja

Cerillos.

Incubadora.

Pipeta de 10mL

Charola para pesado

Propipeta de 3, 5, 10mL

Agitador de tubos Vortex

Asa bacteriolgica
Benzal

14

5. METODOLOGA DE MANEJO DE MUESTRA

5.1 Previo a la toma de muestra
Se comenzar por contar con el equipo que la norma requiere para la toma de
muestra el cual es:

Hielera: impermeable con hielos y que garantice el mantenimiento de bajas

temperaturas por un nivel debajo de los 4 grados, para lo cual siempre se
tendr un termmetro del tipo Taylor metlico (Figura 2) para la lectura de la
temperatura.

Figura 2: Termmetro Taylor con escala 0-140C

Recipiente: previo a la toma de muestra se esteriliz el recipiente de vidrio

incluyendo en su interior la cantidad de 0.3mL de una solucin de Tiosulfato de
sodio al 3% como lo marca la norma de acuerdo a la cantidad de muestra a
tomar la cual fue de 300mL

Rotulo: La muestra ser rotulada conteniendo los siguientes datos:

Nombre de quien toma la muestra

Origen de la muestra
Rombo de seguridad
15

 Direccin completa de la muestra

Fecha y hora de la captacin.

5.2 MANEJO DE MUESTRA

La muestra no puede ser tomada con un tiempo mayor a 6 horas al momento de
comenzar los anlisis microbiolgicos para lo cual fue tomada a las 6:00 a.m. y el
anlisis comenz alrededor de las 11 de la maana.

5.3 MEDIOS DE CULTIVO

A continuacin se dan a conocer los medios de cultivo a utilizar en los diferentes
anlisis a coliformes fecales y totales as como la metodologa de los mismos para
cada muestra y la interpretacin de los resultados.
Tabla 5: Se indica en esta tabla los diferentes medios de cultivo a utiliza en el procedimiento
junto con sus concentraciones (g/ml) correspondientes

Medio

Doble
Concentracin
concentracin (g) sencilla

Mililitros (g)

Caldo lactosado

2.6

1.3

100

Caldo E. coli

N/A

3.3

90

Caldo verde bilis N/A

brillante

3.6

90

5.4 ANALISIS DE MUESTRA

5.4.1 Tcnica del NMP para Coliformes Totales y Coliformes Fecales
La tcnica del NMP comprende siempre una prueba presuntiva y otra confirmativa.
Esto es as porque una positividad en un tubo de la prueba presuntiva no indica
necesariamente la presencia del grupo bacteriano a determinar (Coliformes Totales,
Coliformes Fecales o Estreptococos Fecales), sino tan solo es una presuncin, que
16

habr de confirmarse posteriormente. Sin embargo, una negatividad en la prueba

presuntiva permite dictaminar la ausencia de dicho grupo bacteriano en el agua
examinada. La denominada prueba presuntiva consiste en una metodologa de tipo
general para cualquier grupo de bacterias, mientras que la prueba confirmativa es
especfica. (Lucio, 2009)
5.4.1.1 Prueba Presuntiva para Coliformes Totales y Coliformes fecales
Todas las operaciones debern efectuarse en absolutas condiciones de asepsia.
Preparar tres series sucesivas de 5 tubos con caldo lactosado, una de doble
concentracin y las otras dos de concentracin sencilla. Etiquetar las series con 3,
.8 y 0.09mL. Agitar vigorosamente la muestra por lo menos 20 veces antes de tomar
el volumen que se va a inocular, a efecto de homogeneizar.
Antes y despus de realizar las inoculaciones, la boca de la muestra deber ser
flameada con objeto de evitar contaminacin despus de esto debemos inocular
con una pipeta de 10 mL un volumen de 3mL de muestra en la serie de tubos con
caldo de doble concentracin, con otra pipeta de 1 mL para .8mL de muestra en la
segunda serie de tubos con concentracin sencilla, igualmente con la misma pipeta
podr inocularse la tercera serie de tubos con 0.09mL de muestra.
Incubar todos los tubos a una temperatura de 35 C durante 24-48 horas. 8.
Despus de 24 horas de incubacin efectuar una primera lectura para observar si
hay tubos positivos, es decir, con produccin de cido, si el medio contiene un
indicador de pH, turbidez y produccin de gas en la campana Durham.
Al hacer esta verificacin es importante asegurarse que la produccin de gas sea
resultado de la fermentacin de la lactosa en cuyo caso se observar turbidez en el
medio de cultivo y no confundir con burbujas de aire. Para evitar este tipo de
confusiones es recomendable revisar las campanas Durham antes de proceder a la
inoculacin y desechar aquellos que contengan burbujas de aire de alguna
manera eliminar stas y as poder utilizarlos.
17

De los tubos que en esta primera lectura den positivos, ya se pueden hacer las
pruebas confirmatorias para coliformes totales y coliformes fecales.
En caso de no apreciarse alguno o todos los cambios mencionados en el resto de
los tubos, continuarn en incubacin 24 horas ms. Despus de 48 horas (2h) a
partir de la inoculacin, se hace la lectura final.
Si pasadas estas 48h tampoco se aprecia turbidez ni produccin de gas, los tubos
se toman como negativos. (Lucio, 2009)
5.4.1.2 Forma de interpretar los resultados
Si el total de tubos son negativos: el examen se da por terminado, reportando la
ausencia de coliformes totales y fecales en la muestra analizada.
Todos aquellos tubos que den positivos para prueba presuntiva se anotarn
convenientemente y se proceder a realizar la prueba confirmatoria para
coliformes totales y fecales. (Lucio, 2009)
5.4.2.1 Prueba confirmativa para Coliformes Totales
A partir de cada uno de los tubos que han resultado positivos en la prueba
presuntiva, agitndolos previamente para homogeneizar, inocular con tres asadas
tubos conteniendo caldo Lactosa Bilis Verde Brillante (LBVB).
Incubar durante 48 3 h a 35 0.5 C. 3. Despus de la incubacin observar la
presencia de turbidez y de gas.
5.4.2.2 Forma de interpretar los resultados
Si se observa turbidez y produccin de gas: La prueba se considera positiva,
debiendo anotar el nmero de tubos positivos para posteriormente hacer el clculo
del NMP.

18

Si en ninguno de los tubos se observa produccin de gas, aun cuando se observe

turbidez se consideran negativos, establecindose el Cdigo 0, 0, 0 para efecto del
clculo del NMP.
5.4.3.1 Prueba confirmatoria para Coliformes Fecales:
A partir de cada uno de los tubos que han resultado positivos en la prueba
presuntiva, agitndolos para homogeneizar, inocular con tres asadas tubos
contenido caldo E.C. (Escherichia coli).
Incubar durante 24 horas a 44 C (0.5 C), observar presencia de turbidez y gas.
5.4.3.2 Forma de interpretar los resultados
Si se observa turbidez y produccin de gas: La prueba se considera positiva,
debiendo anotar el nmero de tubos positivos para posteriormente hacer el clculo
del NMP.
Si no se observa produccin de gas, aun cuando se observe turbidez: Se reporta la
ausencia de coliformes fecales.

6. Clculos.
De acuerdo a los tubos positivos en las pruebas confirmativas para Coliformes
Totales y Fecales: Establecer los cdigos correspondientes para calcular por
referencia en la tabla estadstica correspondiente el NMP de Coliformes Totales y
Fecales en 100 mL de agua. En caso de no encontrar en las tablas la combinacin
de tubos adecuada, emplear para los clculos la siguiente ecuacin:

. 100
=
100
Los resultados se elaboran de la siguiente manera:

19

Si nicamente se inoculan tres series de cinco tubos cada una con 3, 0.8, 0.09 mL
de muestra, la lectura de los resultados nos permite tener dos cdigos de valores
uno para coliformes totales y otro para coliformes fecales los cuales ledos en la
tabla del NMP nos dar el valor de bacterias correspondientes en 100 mL de
muestra, de manera directa. Si se han realizado diluciones, se ha de obtener una
serie final con valor cero.
A continuacin se establece el triplete de valores correspondiente a las tres series
anteriores a la del valor cero que podr ser leda en la tabla del NMP.
Para efectos de expresar el valor obtenido basndose en 100 mL de muestra habr
de dividirse el resultado de la tabla por el volumen real de muestra inoculada en
cada tubo de la serie central de cada triplete escogido.
Se tendr un triplete de valores para cada tipo de determinacin.
En general se tiene:
NMP/C = (NMP ledo en la tabla) / (Volumen real demuestra inoculada en cada tubo
de la serie central (mL))
Los resultados obtenidos se expresarn de la siguiente manera:
NMP DE COLIFORMES TOTALES: __________ / 100 mL
NMP DE COLIFORMES FECALES: __________ / 100 Ml

20

7. DIAGRAMAS
Tcnica NMP

Prueba
presuntiva

Prueba
confirmativa

Agua para
consumo
humano

Preparar tres series sucesivas

de 5 tubos con caldo lactosado,
una de doble concentracin y
las otras dos de concentracin

Con la misma pipeta

podr inocularse la
tercera serie de tubos
con
0.1
mL
de

Etiquetar las
series con
10, 1 y 0.1

Inocular 10 mL de
muestra en la serie
de tubos con doble
concentracin

Agitar
vigorosamen
te la muestra

Flamear la boca
del frasco antes y
despus de
realizar

Despus de 24
horas de incubacin
efectuar
una

Incubar todos los tubos

a una temperatura de 35
C durante 24-48 horas.

De los tubos que en la

lectura den positivos, ya se
pueden hacer las pruebas
confirmatorias
para
coliformes
totales
y

Si pasadas estas 48 h tampoco

se
aprecia
turbidez
ni
produccin de gas, los tubos se
toman como negativos.

21

Prueba
confirmatoria para
Coliformes Totales

Prueba
confirmatoria para
Coliformes Totales

Incubar durante 48
3 h a 35 0.5 C.

De los tubos positivos agitarlos

previamente para homogeneizar,
inocular con tres asadas tubos
conteniendo caldo Lactosa Bilis
Verde Brillante (LBVB).

Despus de la incubacin
observar la presencia de
turbidez y de gas.

Si hay turbdez POSITIVO

Si

De los tubos positivos agitarlos

previamente para homogeneizar,
inocular con tres asadas tubos
conteniendo caldo E.C.

no

hay

turbidez

Incubar durante 24 horas a

44 C (0.5 C), observar
presencia de turbidez y gas

8. RESULTADOS
8.1 PRUEBA PRESUNTIVA
En la siguiente tabla 6 se muestran los resultados obtenidos a los diferentes
intervalos de tiempo (24h y 48h) requeridos en la prctica.
Tabla 6: se presenta la cantidad de tubos positivos para la prueba de caldo lactosado 24h y
28h

Serie 1 (CLD)
No. De tubos positivos 5
(24hrs)
22

Serie 2(CLS1)

Serie 3(CLS2)

No. De tubos positivos 5

(48hrs)

8.2 PRUEBA CONFIRMATIVA

Para la segunda prueba se involucran dos variables a revisar la presencia de
coliformes fecales y la presencia de E. coli. Lo cuales se presentan en la tabla 7.
Tabla 7: No. De tubos positivos de E. coli y verde bilis brillante en la prueba confirmativa.

Serie 1

No. De tubos positivos 5

Serie 2

Serie 3

de Verde bilis brillante

No. De tubos positivos 5

de E:coli

8.2.1 NMP para coliformes totales en verde bilis brillante

a) NMP calculado por ecuacin seria:

. 100
=
100

13 100
=
= . /
100 . 89 19.45
8.2.2 NMP para coliformes fecales en Caldo E. coli
a) NMP calculado por ecuacin seria:

11 100
=
= . /
100 1.78 19.45

23

8.2.3 NMP calculado por tablas del NMP

La lectura de los resultados (tabla 8) obtenida en el anlisis de agua de horchata
del punto de venta paleteria y nevera la Michoacana
Tabla 8: lectura en conjunto de las diferentes pruebas de anlisis en esta prctica.

Volumen de Denominacin
muestra
de la serie de 5
inoculada
tubos
(mL)

Tubos
positivos en
la
prueba
presuntiva

Tubos
positivos en
la
prueba
confirmativa
para
C.
totales

Tubos
positivos en
la
prueba
confirmativa
para
coliformes
fecales

1CT*CF

.8

2CT*CF

.09

3CT*CF

Con los datos 5, 4, 4 para coliformes Totales y 5, 3, 3 para coliformes Fecales de la

tabla en negritas se consulta la tabla del NMP obtenemos:
NMP DE COLIFORMES TOTALES: 350 /100mL
NMP DE COLIFORMES FECALES: 180/100mL

9. DISCUSIONES
Con el nmero de tubos positivos de la prueba confirmativa tanto para coliformes
totales como coliformes fecales, se realiz el clculo de NMP de coliformes en 100
mL.

Se calcul primero de acuerdo a la frmula establecida en el procedimiento,

la cual es para cuando los valores de las diluciones no concuerdan con las
tablas establecidas en las normas. Los valores tanto de coliformes totales y
de coliformes fecales fueron 312 y 186 NMP/100 mL respectivamente.
24

Despus se obtuvieron los valores de NMP de coliformes totales y fecales

con el nmero de tubos positivos de las pruebas confirmativas de cada una
y consultando el NMP en las tablas, y se obtuvieron los valores siguientes
valores: NMP de coliformes totales= 350 /100mL. Y el NMP de coliformes
fecales= 180/100mL

Se puede comprobar que el valor de NMP obtenido a travs de la frmula es muy

similar al obtenido con las tablas.
Los resultados obtenidos se encuentran muy por arriba de los lmites mximos
permisibles para agua de consumo humano (Recordando que la muestra analizada
fue agua de sabor horchata de venta en peletera La michoacana) establecidos en
las normas NOM-041-SSA1-1993, NOM-127-SSA1-1994 y la NOM-201-SSA12002. Ya que las normas especifican ausencia de microorganismos tanto coliformes
totales como coliformes fecales.
Las muestras analizadas del agua potable presentaron un alto contenido de
microorganismos indicadores de calidad sanitaria, evidenciando un grado de
contaminacin de las mismas y el peligro para la salud por su consumo. El alto
contenido de microorganismos indicadores encontrados en todas las muestras
analizadas sugiere la presencia de grupos microbianos patgenos para la salud del
consumidor de agua potable. De acuerdo a la Norma Oficial Mexicana NOM-127SSA1-1994, Salud ambiental el agua para uso y consumo humano debe
mantenerse mrgenes estrictos en cuanto a coliformes fecales en dichas aguas,
dados nuestros resultados, observando la presencia de coliformes fecales ya no se
cumple con la normatividad que nos indica que los lmites permisibles para
coliformes fecales en aguas para consumo humano no debe existir presencia alguna
de tales microorganismos.

25

10.

CONCLUSIONES

Se determin la presencia del grupo de bacterias coliformes totales y coliformes

fecales en una muestra de agua para consumo humano mediante la tcnica del
nmero ms probable (NMP); con medios de cultivo especficos se comprobaron
las fermentaciones mediante la produccin de gas, con lo cual pudimos
comprobar la presencia de estos microorganismos de estos grupos.
El agua potable en general para consumo humano debe tener un control en su
calidad sanitaria antes de ser destinada a la poblacin. Por esta razn la
determinacin de microorganismos indicadores de calidad sanitaria, como
coliformes totales, coliformes fecales, es de mucha importancia ya que permite
asegurar con alto grado de certeza que la contaminacin que presenta el agua
es de origen fecal.
La presencia de coliformes fecales en agua para consumo nos indica que dicha
agua no es apta para beber ya que esto raera consigo enfermedades, que
pueden ser desde diarreas hasta grandes infecciones con parsitos que podran
atentar contra la salud humana provocando muerte en casos extremos

11.

CUESTIONARIO

1-. Mostrar los clculos realizados para obtener el NMP de Coliformes Totales
y Fecales en el agua analizada.
R=

100

. 100

(Lucio, 2009)

26

2-. Cules son las caractersticas que debe reunir un microorganismo

indicador?
R= Los microorganismos indicadores de contaminacin deben cumplir los
siguientes requisitos: fciles de aislar y crecer en el laboratorio; ser relativamente
inocuos para el hombre y animales; y presencia en agua relacionada, cuali y
cuantitativamente con la de otros microorganismos patgenos de aislamiento ms
difcil. Tres tipos de bacterias califican a tal fin:

Coliformes fecales: indican contaminacin fecal.

Aerobias mesfilas: determinan efectividad del tratamiento de aguas.

Pseudomonas: sealan deterioro en la calidad del agua o una

recontaminacin.

(Araujo, 2009)
3-. Por qu el nmero de Coliformes Totales es siempre mayor que el de
Coliformes Fecales?
R=La existencia de una contaminacin microbiolgica de origen fecal se restringe a
la presencia de coliformes fecales, mientras que la presencia de coliformes totales
que desarrollan a 35C, slo indica existencia de contaminacin, sin asegurar su
origen. (Araujo, 2009)
4-. De acuerdo a la normatividad mexicana vigente Cules son los lmites
permisibles en cuanto a Coliformes Totales y Coliformes Fecales en el agua
para consumo humano?
R= Modificacin a la Norma Oficial Mexicana NOM-127-SSA1-1994, Salud
ambiental. Agua para uso y consumo humano. Lmites permisibles (tabla 9) de
calidad y tratamientos a que debe someterse el agua para su potabilizacin.
(Quezada, 2009)

27

Tabla 9: lmites mximos permisibles de C. fecales y Totales en agua para consumo humano.

Especificacin

Limite mximo

Coliformes totales

ausencia

Coliformes fecales

ausencia

5-. Por qu aun cuando los microorganismos patgenos se encuentran en

poca concentracin en un agua stos pueden causar enfermedad?
R= Se debe a que independientemente de la capacidad que poseen algunos
microorganismos de sobrevivir fcilmente en el tracto digestivo de animales de tipo
homeotermos adems de la capacidad facultativa que estos tienen en cuanto a su
proliferacin y posterior supervivencia. (Araujo, 2009)
6-. Cules son los lmites mximos permisibles de C. Fecales para las
descargas de aguas residuales vertidas a aguas y bienes nacionales as como
a suelo?
R=Norma Oficial Mexicana NOM-014-CONAGUA-2003, Requisitos para la recarga
artificial de acuferos con agua residual tratada (tabla10). (Araujo, 2009)

Tabla 10: Requisitos para la recarga artificial de acuferos con agua residual tratada

28

7-. Mencionar 5 enfermedades transmitidas por el agua, indicando el agente

etiolgico correspondiente.
R=
1. Vibrio cholerae: clera. Su transmisin es casi exclusivamente por va
hdrica.
2. Los cocos del gnero Neisseria, son causantes de gonorrea (Neisseria
gonorrhoeae) y meningitis (Neisseria meningitidis).
3. Bacillus anthracis: antrax, enfermedad de animales que puede transmitirse
a humanos (zoonosis).
4. Clostridium tetani que ocasiona una enfermedad en humanos caracterizada
por tetanizacin de msculos, razn por la cual recibe el nombre de ttano.
5. Shigella: causante de la disentera bacilar. (Araujo, 2009)

8-. Adems de representar un riesgo para la salud pblica el vertido de

aguas residuales tratadas inadecuadamente o sin tratar a los depsitos
naturales, Qu otros efectos indeseables puede representar?
R= Representara la inaccesibilidad de dicho efluente, puesto que el uso
irresponsable del tipo de vertederos impacta significativamente al consumo
directo de dicho efluente para cualquier actividad; sin mencionar el riesgo de
impacto significativo, en sectores como lo es la pesca, modificando de esta
manera de manera permanente los recursos naturales que se encuentran
involucrados con el mismo.
9-. Cules son los lmites mximos permisibles de Coliformes Fecales en
aguas residuales tratadas que se re-usan en servicios al pblico?
R= NOM-003-ECOL-1997 (tabla 11)

29

Tabla 11: lmites mximos permisibles para contaminantes en aguas de rehso

12. ANEXOS
12.1 FICHAS TECNICAS
ALCOHOL ETILICO

Informacin de los componentes

Frmula: CH3CH2OH
Composicin: Etanol: 95.00 alcohlico

Grados de NFPA: Salud: 0 Inflamabilidad: 3 Reactividad: 0

30

Propiedades fsicas y qumicas

Apariencia: Lquido incoloro voltil de olor caracterstico y agradable.

Gravedad Especfica (Agua=1): 0.7893 / 20C
Punto de Ebullicin (C): 78 - 79
Densidad Relativa del Vapor (Aire=1): 1.60
Punto de Fusin (C): -114
Viscosidad (cp.): N.R.
Presin de Vapor (mm Hg): 44.0 / 20C
Solubilidad: Soluble en agua, alcohol metlico, ter, cloroformo, acetona y
benceno.

Informacin toxicolgica

DL50 (oral, ratas) = 7.06 g/kg.

Primeros auxilios

Inhalacin: Trasladar al aire fresco. Si no respira administrar respiracin artificial.

Si respira con dificultad suministrar oxgeno. Mantener la vctima abrigada y en
reposo. Buscar atencin mdica inmediatamente.

31

Ingestin: Lavar la boca con agua. Inducir al vmito. No administrar emticos,

carbn animal ni leche. Buscar atencin mdica inmediatamente (puede tratarse
de alcohol desnaturalizado).
Piel: Lavar la piel con abundante agua. Retirar la ropa contaminada y lvela con
abundante agua y jabn.
Ojos: Lavar con abundante agua, mnimo durante 15 minutos. Levantar y separar
los prpados para asegurar la remocin del qumico. Si la irritacin persiste repetir
el lavado. Buscar atencin mdica.

Medidas a tomar en caso de vertido accidental

Evacuar o aislar el rea de peligro. Eliminar toda fuente de ignicin. Restringir el

acceso a personas innecesarias y sin la debida proteccin. Ubicarse a favor del
viento. Usar equipo de proteccin personal. Ventilar el rea. No permitir que caiga
en fuentes de agua y alcantarillas. Si el derrame es pequeo dejarlo evaporar,
tambin se puede absorber con toallas de papel. Si es grande recolectar el lquido
con equipos que no desprendan chispas para evitar que se encienda.

Controles de exposicin/ proteccin personal

Uso Normal: Guantes largos, monogafas. Si es muy concentrado se puede usar

mscara con filtro para vapores, botas y overol.
Control de Emergencias: Ropa de proteccin total que incluya gafas de seguridad,
guantes, respirador para vapores. Si no se conocen las concentraciones o son
muy altas use equipo de respiracin autnomo (SCBA).

32

Controles de Ingeniera: Ventilacin local y general, para asegurar que la

concentracin no exceda los lmites de exposicin ocupacional. Debe disponerse
de duchas y estaciones lavaojos.

Identificacin de los peligros

Altas concentraciones del vapor pueden causar somnolencia, tos, irritacin de los ojos y el tracto
respiratorio, dolor de cabeza y sntomas similares a la ingestin.
Inhalacin: Sensacin de quemadura. Acta al principio como estimulante seguido de depresin,
dolor de cabeza, visin borrosa, somnolencia e inconsciencia. Grandes cantidades afectan el
aparato gastrointestinal. Si es desnaturalizado con metanol, puede causar ceguera.
Ingestin:
Piel: Resequedad.
Ojos: Irritacin, enrojecimiento, dolor, sensacin de quemadura.
A largo plazo produce efectos narcotizantes. Afecta el sistema nervioso central, irrita la piel
(dermatitis) y el tracto respiratorio superior. La ingestin crnica causa cirrosis en el hgado.
Tabla 12: ficha reactiva para etanol

BIBLIOGRAFA
Araujo, M. C. (29 de Abril de 2009). ine. Recuperado el 4 de Septiembre de 2013,
de
http://www.psa.es/webesp/projects/solarsafewater/documents/libro/02_Capit
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Quezada, J. r. (18 de Agosto de 2009). Diario Oficial de la Federacin. Recuperado
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04
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http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5105753&fecha=18/08/2009

33

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http://www.upemor.edu.mx/labo/tarchivos/archivos/HEAL/practica_7.pdf
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http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/201ssa12.html

34