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OECD/OCDE

Adopte :
17 dcembre, 2001

LIGNE DIRECTRICE DE LOCDE POUR LES ESSAIS DE


PRODUITS CHIMIQUES
Toxicit orale aigu - Mthode par classe de toxicit aigu

INTRODUCTION
1.
Les Lignes directrices de lOCDE pour les essais de produits chimiques sont rgulirement mises
jour pour tenir compte des progrs scientifiques ou des changements dans les pratiques dvaluation. La
Ligne directrice 423 dorigine a t adopte en mars 1996 comme deuxime mthode alternative pour
lessai de toxicit aigu conventionnel dcrit dans la Ligne directrice 401. Suite aux recommandations de
plusieurs runions dexperts, la rvision tait opportune car i) un accord international sur les valeurs limites
harmonises des DL50 utilises dans la classification de substances chimiques avait t ralis, ces valeurs
tant diffrentes de celles prconises dans la version de 1996 de la Ligne directrice, et ii) il est maintenant
jug suffisant deffectuer lessai avec des animaux dun seul sexe, gnralement des femelles.
2.
La mthode par classe de toxicit aigu (1) dcrite dans la prsente Ligne directrice est un
processus squentiel utilisant trois animaux dun seul sexe par tape. Suivant la mortalit et/ou ltat
moribond des animaux, deux quatre tapes sont en moyenne ncessaires pour valuer la toxicit aigu de
la substance dessai. Cette procdure est reproductible, utilise trs peu danimaux et, compare aux autres
mthodes de toxicit aigu (Lignes directrices 420 et 425), cette mthode permet de classer des substances
par ordre de toxicit de faon similaire. La mthode par classe de toxicit aigu est base sur des
valuations biomtriquess (2)(3)(4)(5) avec des doses prdtermines, convenablement spares pour
permettre de classer une substance pour des besoins de classification et dvaluation des dangers. La
mthode, telle quelle a t adopte en 1996, a t valide de manire extensive in vivo par rapport des
donnes de LD50 de la littrature, tant sur le plan national (6) quinternational (7).
3.
Des indications permettant de choisir la mthode dessai la plus approprie pour un but donn
sont prsentes dans le Document dorientation sur les essais de toxicit orale aigu (8). Ce document
contient galement de plus amples informations sur la conduite et linterprtation de la Ligne directrice
423.
4.

On trouvera l'Annexe 1 les dfinitions des termes utiliss dans cette Ligne directrice.

CONSIDRATIONS INITIALES
5.
Il ne faut pas administrer des substances dessai des niveaux de dose dont on sait qu'elles
provoquent des douleurs et une dtresse importante du fait de proprits corrosives ou svrement
irritantes. Au cours de l'essai, on doit tuer avec humanit les animaux moribonds et les animaux qui
souffrent de faon manifeste ou qui montrent des signes de dtresse grave. Ces animaux doivent tre pris
en compte dans linterprtation des rsultats au mme titre que les animaux morts au cours de lessai. Les
critres pour dcider de tuer les animaux moribonds et ceux qui souffrent de faon manifeste ainsi que des
orientations pour reconnatre une mort prvisible ou imminente font lobjet dun autre document
dorientation (9).

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6.
La mthode utilise des doses prdtermines et donne des rsultats qui permettent le classement
des substances dans le Systme de classification globalement harmonis (SGH) de substances entranant de
la toxicit aigu (10).
7.
La mthode ne vise pas le calcul dune valeur prcise de la DL50. Comme la mort dune partie
des animaux reste le principal effet observ, la mthode permet de dterminer dans quelle gamme de doses
la substance doit tre considre ltale. Une DL50 peut tre dtermine seulement dans le cas o au moins
deux doses donnent une mortalit suprieure 0% et infrieure 100%. Grce lutilisation dun choix de
doses prdtermines, indpendamment de la substance dessai, et le lien explicite entre classification et
nombre danimaux dans diffrents tats observs, la cohrence entre laboratoires est favorise.
8.
Le laboratoire doit rassembler toutes les informations disponibles sur la substance dessai avant
de procder lessai. Ces informations contiendront lidentit et la structure chimique de la substance, ses
proprits physico-chimiques, les rsultats obtenus dans tous autres essais de toxicit in vitro et in vivo, les
donnes toxicologiques de substances structurellement apparentes et lusage escompt de la substance.
Ces informations sont ncessaires pour rassurer les personnes concernes quant la pertinence de lessai
pour la protection de la sant humaine et elles seront utiles dans le choix de la dose initiale approprie.

PRINCIPE DE LESSAI
9.
Le principe de cet essai est quavec un processus squentiel, utilisant un nombre minimum
danimaux par tape, des informations sur la toxicit aigu de la substance sont obtenues qui sont
suffisantes pour les besoins de classification. Une dose dtermine de la substance est administre par voie
orale un groupe danimaux. La substance est teste dans un processus squentiel dans lequel trois
animaux dun seul sexe (normalement des femelles) sont utiliss chaque tape. Labsence ou la
manifestation de mortalit lie la substance dans un groupe ayant reu une dose une tape donne
dtermine ltape suivante, cest dire:

- arrt de lessai,
- administration de la mme dose trois animaux supplmentaires,
- administration de la dose immdiatement suprieure ou infrieure trois animaux
supplmentaires.
10.
Des dtails concernant le mode opratoire sont dcrits en Annexe 2. La mthode rend possible
dexercer un jugement concernant la classification de la substance dessai dans une classe de toxicit
dlimite par des valeurs pralablement fixes de DL50.

DESCRIPTION DE LA MTHODE
Choix de l'espce animale
11.
Le rat est l'espce prfre mais dautres espces peuvent tre utilises. Normalement on utilise
des femelles (9). Ltude de la littrature sur les essais traditionnels de DL50 permet de conclure quil y a
peu de diffrence de sensibilit entre sexes et que, lorsquil y a une diffrence, les femelles sont
gnralement lgrement plus sensibles (11). Cependant, si la connaissance des proprits toxicologiques
et toxicocintiques de composs structurellement voisins indique que les mles sont probablement plus
sensibles, il convient d'employer des mles. Dans ce cas il faut fournir une justification adquate.
12.
Il faut prendre des animaux adultes sains provenant de souches couramment utilises en
laboratoire. Les femelles doivent tre nullipares et non gravides. Au dbut de lessai, chaque animal doit
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tre g de 8 12 semaines et son poids doit se situer un intervalle de 20 % par rapport au poids moyen
des animaux prcdemment exposs.
Conditions d'hbergement et d'alimentation
13.
La temprature du local des animaux d'exprience doit tre de 22C ( 3C). Le taux d'humidit
relative devrait tre 30% au moins et ne pas dpasser 70%. Sauf pendant le nettoyage de la salle, une
humidit relative entre 50 et 60% est idale. Un clairage artificiel est utilis et la squence doit tre de 12
heures de lumire et 12 heures d'obscurit. Pour l'alimentation des animaux, on peut utiliser la nourriture
classique de laboratoire avec de l'eau potable satit. Les animaux peuvent tre groups par dose.
Toutefois le nombre d'animaux par cage ne doit pas faire obstacle une observation prcise de chaque
animal.
Prparation des animaux
14.
Les animaux sont choisis au hasard, marqus pour permettre une identification individuelle et
gards dans leurs cages pour les acclimater aux conditions de laboratoire pendant au moins cinq jours
avant l'exprience.
Prparation des doses
15.
En gnral, la substance dessai doit tre administre volume constant pour toute la gamme de
doses en variant la concentration de la prparation. Lorsquun produit liquide ou un mlange font lobjet
de lessai, lutilisation du produit non dilu, donc concentration constante, peut tre plus approprie pour
lvaluation du risque de dette substance. Certaines autorits rglementaires le veulent ainsi. Dans aucun
cas, le volume de dose maximal ne peut tre dpass. Le volume maximal de liquide qui peut tre
administr en une seule fois dpend de la taille de l'animal d'essai. Pour les rongeurs, le volume ne doit pas
dpasser 1 mL/100 g de poids corporel, sauf dans le cas de solutions aqueuses pour lesquelles on peut
utiliser 2 mL/100 g de poids corporel. Il est recommand d'utiliser une solution (ou suspension ou
mulsion) aqueuse chaque fois que cela est possible, sinon on peut utiliser une solution dans de l'huile (par
exemple de l'huile de mas) et ventuellement une solution dans d'autres vhicules. En ce qui concerne les
vhicules non aqueux, leur toxicit doit tre connue. Les doses doivent tre prpares juste avant
ladministration sauf si la stabilit de la prparation pendant la dure de la priode dutilisation est connue
et juge acceptable.

MODE OPERATOIRE
Administration des doses
16.
La substance d'essai est administre en une seule dose en utilisant une sonde gastrique ou toute
autre canule pour intubation approprie. Lorsqu'il n'est pas possible d'administrer la dose en une seule fois,
celle-ci peut tre fractionne sur une priode n'excdant pas 24 heures.
17.
Les animaux doivent tre jeun avant l'administration de la substance ; pour les rats on supprime
la nourriture, mais pas leau, pendant la nuit et pour les souris on supprime la nourriture, mais pas leau,
pendant 3 4 heures. Aprs la priode de jeune, les animaux doivent tre pess et puis la substance d'essai
leur est administre. Aprs l'administration de la substance, les animaux peuvent tre nouveau privs de
nourriture, pendant 3 4 heures pour les rats et 1 2 heures pour les souris. Si la dose est administre par
fractions sur un certain laps de temps, il peut s'avrer ncessaire, en fonction de la dure du traitement,
d'alimenter et de faire boire les animaux.

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Nombre danimaux et niveaux des doses


18.
Chaque tape ncessite trois animaux. Pour la dose initiale on choisit un niveau parmi les quatre
suivants: 5, 50, 300 et 2 000 mg/kg. Le niveau choisi est celui pour lequel on peut sattendre observer de
la mortalit parmi quelques-uns des animaux traits. Les schmas de lAnnexe 2 dcrivent le mode
opratoire suivre pour chacune des doses initiales.
19.
Lorsque des informations sont disponibles qui suggrent une mortalit peu probable au niveau de
dose initial le plus lev (2000 mg/kg de poids corporel), il faut procder un essai limite. En labsence de
telles informations sur la substance dessai, la dose initiale qui est recommande pour des raisons lies au
bien-tre des animaux est 300 mg/kg.
20.
Lintervalle de temps entre ladministration de chaque niveau de dose est dict par le moment du
dbut, la dure et la svrit des effets toxiques observs. Ladministration de la dose suivante doit tre
retarde jusqu ce quon ait obtenu la certitude que les animaux prcdemment soumis au traitement ont
survcu.
21.
Exceptionnellement, et lorsque cela est justifi pour rpondre une exigence dcoulant dun
besoin spcial dune rglementation, on peut prendre en considration dutiliser une dose prdtermine
maximale supplmentaire de 5000 mg/kg (voir Annexe 3). Lessai de substances en catgorie 5 du SCGH
(2000-5000 mg/kg) doit tre dcourag pour des raisons de protection des animaux. Un tel essai est
seulement envisageable lorsquil y a une forte probabilit que les rsultats seront des lments importants
pour la protection de la sant des hommes et des animaux ou de lenvironnement.
Essai limite
22.
Lessai limite est utilis principalement lorsque des informations indiquant que la substance
dessai nest probablement pas toxique sont disponibles, c..d. que la toxicit se situe au dessus de la dose
limite rglementaire. Des informations concernant la toxicit de la substance dessai peuvent tre
recueillies partir de connaissances de substances, produits ou mlanges similaires dj soumis essai,
prenant en compte lidentit et le pourcentage des composants connus pour avoir une importance du point
de vue toxicologique. Quand on ne dispose daucune ou de peu dinformations concernant la toxicit, ou
lorsquon sattend une substance toxique, il faut excuter lessai principal.
23.
Un essai limite un niveau de dose de 2000 mg/kg peut tre excut avec six animaux (trois
animaux par tape). Exceptionnellement, un essai limite un niveau de dose de 5000 mg/kg peut tre
conduit avec trois animaux (voir Annexe 3). Si de la mortalit lie la substance se produit, il peut tre
ncessaire de tester au niveau de dose immdiatement infrieur.

OBSERVATIONS
24.
Les animaux doivent tre observs individuellement au moins une fois pendant les premires 30
minutes et rgulirement pendant les premires 24 heures aprs le traitement. Une attention particulire
simpose pendant les premires 4 heures et quotidiennement pendant 14 jours aprs l'administration de la
substance, l'exception des animaux qui sont morts au cours de ltude ou qui sont retirs de l'tude et tus
avec humanit pour des raisons de protection des animaux. Toutefois, la dure d'observation ne doit pas
tre fixe d'une manire rigide. Elle doit tre fonction des ractions de toxicit, de leur vitesse d'apparition
et de la longueur de la priode de rcupration. Elle peut par consquent tre prolonge, si ncessaire. Les
moments o apparaissent et disparaissent les signes de toxicit sont importants, particulirement quand on
constate un certain retard dans l'apparition de ces signes (12) Toutes les observations sont enregistres de
faon systmatique, une fiche individuelle tant tablie pour chaque animal.
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25.
D'autres observations peuvent s'avrer ncessaires lorsque les animaux continuent manifester
des signes de toxicit. Les observations doivent porter sur les modifications de la peau, des poils, des yeux
et des muqueuses, ainsi que de l'appareil respiratoire, du systme circulatoire, des systmes nerveux
autonome et central, de l'activit somato-motrice et du comportement. Lattention portera en particulier
sur lobservation des diverses manifestations de tremblement, convulsion, salivation, diarrhe, lthargie,
sommeil et coma. Les principes et critres rsums dans le Document dorientation sur les effets sur
lhomme doivent tre pris en considration (9). Les animaux moribonds et les animaux souffrant
manifestement ou prsentant des signes graves de dtresse doivent tre tus pour des raisons humanitaires.
Quand les animaux sont tus pour des raisons humanitaires ou si on les retrouve morts, le moment de la
mort doit tre enregistr de faon aussi prcise que possible.
Poids corporel
26.
Le poids individuel de chaque animal doit tre dtermin peu de temps avant l'administration de
la substance d'essai et ensuite au moins une fois par semaine. Les changements de poids doivent tre
calculs et enregistrs. A la fin de l'essai, les animaux survivants sont pess puis tus avec humanit.
Pathologie
27.
Tous les animaux d'essai (y compris ceux qui sont morts au cours de l'essai ou ceux qui ont t
retirs de l'tude pour des raisons de protection des animaux) doivent tre soumis une autopsie l'chelle
macroscopique. Pour chaque animal, toutes les altrations pathologiques macroscopiques doivent tre
enregistres. Chez les animaux qui survivent 24 heures ou plus ladministration de la dose initiale,
l'examen microscopique des organes prsentant des signes vidents de pathologie doit galement tre
envisag, car cet examen peut fournir des renseignements utiles.

RSULTATS ET RAPPORT
Rsultats
28.
Les rsultats individuels pour chaque animal doivent tre prsents. Toutes les donnes doivent
tre rsumes dans un tableau indiquant pour chaque groupe dessai le nombre d'animaux utiliss, le
nombre d'animaux prsentant des signes de toxicit, le nombre d'animaux retrouvs morts pendant l'essai
ou tus pour des raisons humanitaires, pour chaque animal le moment de la mort, la description des effets
toxiques et leur volution dans le temps ainsi que leur rversibilit et les rsultats de l'autopsie.
Rapport dessai
29.

Le rapport d'essai doit contenir, s'il y a lieu, les renseignements suivants:


Substance d'essai:

- tat physique, puret et s'il y a lieu, proprits physico-chimiques (y compris les


isomres);

- donnes relatives l'identification, numro CAS.


Vhicule (le cas chant):

- justification du choix du vhicule, lorsque celui-ci nest pas de leau.

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Animaux dessai:

- espce/souche utilises;
- tat microbiologique des animaux, sil est connu;
- nombre, ge et sexe des animaux (la justification de lutilisation de mles la place de
femelles, le cas chant;
- origine, conditions d'hbergement, rgime alimentaire, etc.
Conditions de l'essai:

- formulation dtaille de la substance dessai, y compris ltat physique du produit


administr;
- dtails sur le mode dadministration, volume des doses et moment de ladministration;
- dtails sur la qualit de la nourriture et de leau (y compris le type de rgime et sa
provenance et celle de leau);
- la justification du choix de la dose initiale.
Rsultats:

- tableau des rsultats et niveau de dose pour chaque animal (c'est--dire nombre
-

d'animaux montrant des signes de toxicit, y compris de la mortalit, nature, gravit et


dure des effets);
tableau des poids corporels et changements de poids;
poids individuels des animaux le jour du traitement, et ensuite par intervalles dune
semaine, et au moment de la mort ou du sacrifice;
date et heure de la mort si celle-ci intervient avant le sacrifice;
pour chaque animal, moment d'apparition et volution des signes de toxicit et, le cas
chant, leur rversibilit;
pour chaque animal, rsultats de l'autopsie et toutes les observations
histo-pathologiques.

Discussion et interprtation des rsultats.


Conclusions.

BIBLIOGRAPHIE
(1)
(2)

Roll R., Hfer-Bosse Th. and Kayser D. (1986). New Perspectives in Acute Toxicity Testing of
Chemicals. Toxicol. Lett., Suppl. 31, 86.
Roll R., Riebschlger M., Mischke U. and Kayser D. (1989). Neue Wege zur Bestimmung der
akuten Toxizitt von Chemikalien. Bundesgesundheitsblatt 32, 336-341.

(3)

Diener W., Sichha L., Mischke U., Kayser D. and Schlede E. (1994). The Biometric Evaluation of
the Acute-Toxic-Class Method (Oral). Arch. Toxicol. 68, 559-610.

(4)

Diener W., Mischke U., Kayser D. and Schlede E. (1995). The Biometric Evaluation of the OECD
Modified Version of the Acute-Toxic-Class Method (Oral). Arch. Toxicol. 69, 729-734.

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(5)

Diener W., and Schlede E. (1999) Acute Toxicity Class Methods: Alternatives to LD/LC50 Tests.
ALTEX 16, 129-134.

(6)

Schlede E., Mischke U., Roll R. and Kayser D. (1992). A National Validation Study of the AcuteToxic-Class Method - An Alternative to the LD50 Test. Arch. Toxicol. 66, 455-470.

(7)

Schlede E., Mischke U., Diener W. and Kayser D. (1994). The International Validation Study of
the Acute-Toxic-Class Method (Oral). Arch. Toxicol. 69, 659-670.

(8)

OECD (2000) Guidance Document on Acute Oral Toxicity. Environmental Health and Safety
Monograph Series on Testing and Assessment No 24.

(9)

OECD (2000) Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as
Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation Environmental Health
and Safety Monograph Series on Testing and Assessment No 19.

(10)

OECD (1998) Harmonized Integrated Hazard Classification System For Human Health And
Environmental Effects Of Chemical Substances as endorsed by the 28th Joint Meeting of the
Chemicals Committee and the Working Party on Chemicals in November 1998, Part 2, p. 11
[http://webnet1.oecd.org/oecd/pages/home/displaygeneral/0,3380,EN-documents-521-14-no-24no-0,FF.html].

(11)

Lipnick R L, Cotruvo, J A, Hill R N, Bruce R D, Stitzel K A, Walker A P, Chu I; Goddard M,


Segal L, Springer J A and Myers R C (1995) Comparison of the Up-and Down, Conventional
LD50, and Fixed Dose Acute Toxicity Procedures. Fd. Chem. Toxicol 33, 223-231.

(12)

Chan P.K. and A.W. Hayes. (1994). Chap. 16. Acute Toxicity and Eye Irritancy. Principles and
Methods of Toxicology. Third Edition. A.W. Hayes, Editor. Raven Press, Ltd., New York, USA.

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ANNEXE 1

DFINITIONS
Il y a toxicit orale aigu si des effets dfavorables apparaissent aprs l'administration par voie orale d'une
dose unique de substance ou de plusieurs doses donnes sur une priode de 24 heures.
Mort diffre: lanimal ne meurt, ni apparat moribond, en lespace de 48 heures, mais meurt
ultrieurement au cours de la priode dobservation de 14 jours.
La dose est la quantit de substance d'essai administre. La dose s'exprime en poids de substance d'essai
par unit de poids de l'animal d'exprience (par exemple, mg/kg).
SGH: Systme de classification globalement harmonis. Une activit conjointe de lOCDE (sant humaine
et environnement), du Comit dexperts sur le transport des matires dangereuses (proprits physicochimiques) et du B.I.T (communication des dangers) et coordonne par IOMC (Interorganisation
Programme for the Sound Management of Chemicals).
Il y a mort imminente lorsqon sattend ce quun tat moribond ou la mort intervienne avant le prochain
moment dobservation prvu. Parmi les signes qui sont indicatifs de cet tat chez les rongeurs il y a les
convulsions, la position latrale, la position couche et les tremblements [pour de plus amples dtails voir
(9)].
DL50 (dose ltale 50%) par voie orale: dose unique dune substance dessai, obtenue par calcul statistique,
susceptible dentraner la mort de 50 pour cent des animaux lorsquelle est administre par voie orale. La
valeur de la DL50 est exprime en poids de la substance par unit de poids corporel de lanimal
dexprience (mg/kg).
Dose limite rfre une dose qui est la limite suprieure pour lessai (2000 ou 5000 mg/kg).
tat moribond: ltat avant la mort ou lincapacit de survivre, mme si un traitement est donn [pour de
plus amples dtails voir (9)].
Mort prvisible: la prsence de signes cliniques indiquant que la mort va intervenir un moment futur
connu avant la fin projte de lexprience, par exemple lincapacit datteindre leau ou la nourriture
[pour plus de dtails voir (9)].

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ANNEXE 2
MODE OPERATOIRE A SUIVRE POUR CHACUNE DES DOSES INITIALES
REMARQUES GENERALES
1.
Pour chaque dose initiale, les diffrents schmas dessai qui figurent cette annexe donnent les
processus suivre.

Annexe 2 a: dose initiale de 5 mg/kg de poids corporel


Annexe 2 b: dose initiale de 50 mg/kg de poids corporel
Annexe 2 c: dose initiale de 300 mg/kg de poids corporel
Annexe 2 d: dose initiale de 2000 mg/kg de poids corporel

Les diffrents processus sont indiqus par les flches. Ils dpendent du nombre danimaux morts ou tus
pour des raisons dhumanit.

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DL50 limite
mg/kg

SGH

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Catgorie 1
> 0-5

25

0-1

>

2-3

30

Catgorie 2

5 - 50

0-1

50

0-1

50mg/kg
3 animaux

2-3

50mg/kg
50mg/kg
33animaux
animals

Par tape 3 animaux dun m me sexe (normalement des femelles)


0, 1, 2, 3: animaux m orts ou moribonds chaque tape
SGH: Sytme de classification globalement harm onis (m g/kg)

0-1

5mg/kg
3 animaux

2-3

2-3

5mg/kg
5mg/kg
33animaux
animals

Debut

2-3

300

0-1

500

1000

Catgorie 4
> 300 - 2000

2-3

10/14

2000

2000mg/kg
3 animaux

2-3

0-1

0-1

2500

Catgorie 5
> 2000 - 5000

2000mg/kg
2000mg/kg
33animaux
animals

- : non class
Essaie 5000 m g/kg: voir Annexe 3

Catgorie 3
> 50 - 300

200

0-1

300mg/kg
3 animaux

2-3

300mg/kg
300mg/kg
33animaux
animals

ANNEXE 2a: SCHEMA DESSAI AVEC UNE DOSE INITIALE DE 5 MG/KG

OECD/OCDE

5000

Catgorie 5 ou
Non class

0
0

DL50 limite
mg/kg

SGH

Catgorie 1
1 > 0-5

25

3 50 lors de la
1re tape

Catgorie 2
> 5 - 50

0-1

2-3

30

0-1

50

autres

200

Catgorie 3
> 50 - 300

0-1

50mg/kg
3 animaux

2-3

50mg/kg
50mg/kg
33animaux
animals

Par tape 3 animaux dun mme sexe (normalement des femelles)


0, 1, 2, 3: animaux morts ou moribonds chaque tape
SGH: Sytme de classification globalement harmonis (mg/kg)

0-1

5mg/kg
3 animaux

2-3

2-3

5mg/kg
5mg/kg
33animaux
animals

Debut

0-1

300

1000

Catgorie 4
>300 - 2000

500

0-1

2-3

11/14

2000

0-1

0-1

2500

Catgorie 5
> 2000 - 5000

2000mg/kg
3 animaux

2-3

2000mg/kg
2000mg/kg
33animaux
animals

- : non class
Essaie 5000 mg/kg: voir Annexe 3

2-3

300mg/kg
3 animaux

2-3

300mg/kg
300mg/kg
33animaux
animals

ANNEXE 2b: SCHEMA DESSAI AVEC UNE DOSE INITIALE DE 50 MG/KG

OECD/OCDE

5000

Catgorie 5 ou
Non class

0
0

423

DL50 limite
mg/kg

SGH

423

Catgorie 2
> 5 - 50

0-1

re

tape

25

30

0-1

50

autres

2-3

la 1

re

200

tape

3 50 lors de

Catgorie 3
> 50 - 300

0-1

50mg/kg
3 animaux

2-3

50mg/kg
50mg/kg
33animaux
animals

Par tape 3 animaux dun mme sexe (normalement des femelles)


0, 1, 2, 3: animaux morts ou moribonds chaque tape
SGH: Sytme de classification globalement harmonis (mg/kg)

3 50 lors de la

Catgorie 1
> 0-5

0-1

5mg/kg
3 animaux

2-3

2-3

5mg/kg
5mg/kg
33animaux
animals
0-1

300

autres

>

500

300 - 2000

1000

Catgorie 4

0-1

2-3

12/14

2000

2000mg/kg
3 animaux

2-3

2000mg/kg
2000mg/kg
33animaux
animals

- : non class
Essaie 5000 mg/kg: voir Annexe 3

2-3

300mg/kg
3 animaux

2-3

300mg/kg
300mg/kg
33animaux
animals

Debut

ANNEXE 2c: SCHEMA DESSAI AVEC UNE DOSE INITIALE DE 300 MG/KG

OECD/OCDE

2500

Catgorie 5
> 2000 - 5000

0-1

0-1

5000

Catgorie 5 ou
Non class

0
0

D L 5 0 ulim ite
m g /k g

SGH

C a t g o rie 1
> 0 -5

25

3 5 0 lo rs d e la
re
1
ta p e

C a t g o rie 2
> 5 - 50

0 -1

30

0 -1

2 -3

50

a u tre s

200

3 3 0 0 lo rs d e
re
ta p e
la 1

C a t g o rie 3
> 5 0 - 3 00

0 -1

5 0 m g /kg
3 a n im a u x

2 -3

55
00
mmg g
/kg
/k g
3 3a a
nn
imima a
u ls
x

P a r ta p e 3 a n im a u x d u n m m e se x e (n o r m a le m e n t d e s fem elle s )
0 , 1 , 2 , 3: an im a u x m o rts o u m o r ib o n d s c h a q u e ta p e
S G H : S yt m e d e cla s s ific a tio n g lo b a lem e n t h a rm o n is (m g /k g )

0 -1

5 m g /kg
3 a n im a u x

2 -3

2 -3

55
mmg g
/kg
/k g
3 3a a
nn
imima a
u ls
x
0 -1

300

a u tre s

500

1000

13/14

Debut

>

2 -3

2000

a u tre s

20 0 0 - 5 0 00

0 -1

0 -1

C a t g o rie 5

2 0 0 0 m g /k g
3 a n im a u x

2 -3

22
00
00
00
mmg g
/kg
/k g
3 3a a
nn
imima a
u ls
x

3 2000 2 2000
L o rs d e la lo rs d e la
re
re
ta p e 1
ta p e
1

C a t g o rie 4
> 3 0 0 - 2 0 00

0 -1

- : n o n c la s s
E s s aie 5 0 0 0 m g /kg : v o ir A n n e x e 3

2 -3

3 0 0 m g /kg
3 a n im a u x

2 -3

33
00
00
mmg g
/kg
/k g
3 3a a
nn
imima a
u ls
x

A N N E X E 2d : S C H E M A D E S S A I A V E C U N E D O S E IN IT IA L E D E 2 00 0 M G /K G

OECD/OCDE

2500

5000

C a t g o rie 5 o u
N o n c la s s

0
0

423

423

OECD/OCDE
ANNEXE 3

CRITRES POUR CLASSER DES SUBSTANCES DESSAI AVEC UNE DL50 ATTENDUE
SUPRIEURE 2000 MG/KG SANS AVOIR RECOURS LESSAI
1.
Les critres pour la catgorie de danger 5 sont destins lidentification de substances dont la
toxicit aigu est relativement faible mais qui peuvent, sous certaines conditions, tre dangereuses pour des
populations vulnrables. La DL50 orale ou dermale de ces substances est escompte se situer dans la
gamme 2000-5000 mg/kg ou de doses quivalentes par dautres routes. Des substances dessai peuvent
tre classes dans la catgorie SGH de danger 5, dfinie par 2000 mg/kg<DL50<5000 mg/kg, dans les cas
suivants:
a) si, sur la base de lincidence de mortalit, lun quelconque des schmas de lAnnexe 2a-2d dirige la
substance vers cette catgorie;
b) si lon possde des indications fiables que la DL50 se situera dans la gamme de la catgorie 5; ou si
dautres tudes sur des animaux ou des observations deffets toxiques constats chez lhomme
suscitent des inquitudes motives pour la sant humaine;
c) par extrapolation, valuation ou mesure de donnes, si la classification dans une catgorie de plus
grand danger nest pas justifie et

lon possde des informations fiables indiquant des effets toxiques


significatifs pour lhomme, ou
de la mortalit est observe en testant par voie orale jusquaux valeurs
de la catgorie 4, ou
lorsqun jugement dexpert confirme des signes cliniques significatifs
de toxicit dans un essai men jusquaux valeurs de la catgorie 4,
hormis la diarrhe, les modifications des poils ou un aspect mal soign, ou
quand un jugement dexpert confirme des informations fiables
indiquant des effets aigs potentiellement significatifs sur la base des
autres tudes sur animaux.

DES ESSAIS DES DOSES SUPRIEURES 2000 MG/KG


2.
Pour des raisons lies la protection du bien-tre des animaux, lessai sur animaux de substances
de la catgorie 5 (5000 mg/kg) doit tre dcourag. Il est seulement envisageable lorsquil y a une forte
probabilit que les rsultats dun tel essai seront des lments importants pour la protection de la sant des
hommes et des animaux (10). Aucun essai un niveau de dose suprieur doit tre entrepris.
3.
Lorsquun essai 5000 mg/kg est ncessaire, seulement une tape(avec trois animaux) est
requise. Si le premier animal trait meurt, le traitement continue avec 2000 mg/kg comme cela est indiqu
dans les schmas de lAnnexe 2. Si le premier animal trait survit, deux autres animaux sont traits. Sil y
a seulement un mort parmi les trois animaux, la valeur de la DL50 est estime suprieure 5000 mg/kg. Si
les deux autres animaux survivent, le traitement continue avec 2000 mg/kg.

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