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J. Soc. Ouest-Afr. Chim.

(2006) 022 ; 59 - 67

COMPOSITION EN ACIDES GRAS, STEROLS ET TOCOPHEROLS


DE LHUILE VEGETALE NON CONVENTIONNELLE EXTRAITE DES GRAINES
DE JATROPHA CURCAS (EUPHORBIACEAE) DU BENIN
S. T. Djenontin 1, J. Dangou1, D. V. Wotto1,
K.C. D. Sohounlhoue1*, P. Lozano2, D. Pioch2
1- Laboratoire dEtude et de Recherche en Chimie Applique (LERCA), Ecole Polytechnique
d'Abomey-Calavi (EPAC), Universit d'Abomey-Calavi (UAC), 01 BP 2009 Cotonou
(Rpublique du Bnin; ksohoun@bf.refer.org
2- UMR CIRAD T64 Gnie des Procds dElaboration des Bioproduits (GPEB), 13 rue J.F. Breton
BP 5035 34398 Montpellier Cedex 5 (France).
(Reu le 23/09/2005 Accept aprs rvision le 2/10/2006)
Summary : The physico-chemical characterization of the vegetable oil extracted from seeds of Jatropha curcas
(Euphorbiaceae) collected in south of Benin (Savalou) is reported. Unsaturated fatty
are in majority with the preponderance of oleic and linoleic acids (42.3 and 36.6% respectively). The study of the
insaponifiable fraction (0.8%p) permitted to identify the sterols and tocopherols contents (130 mg/100g and 19,9
mg/100g respectively). The major sterol and tocopherol are -sitosterol (86.1 %) and -tocopherols (76.9%)
respectively of total sterols and tocopherols. The phospholipids (0.6g/100g) were quantified on the basis of
phosphorus content. These physicochemical data of oil were compared with those of others conventional
vegetable oils common use in Benin.
Key words: non edible oil, Jatropha curcas, Euphorbiaceae, fatty acids, sterols, tocopherols.
Rsum : La caractrisation physico-chimique de l'huile vgtale extraite de graines de Jatropha curcas
(Euphorbiaceae) rcoltes dans le sud du Bnin (Savalou) est rapporte. Les acides gras insaturs sont
majoritaires avec la prdominance des acides olique et linolique (42,3 et 36,6% respectivement). L'tude de la
fraction insaponifiable (0,8%p) a permis de rvler que lhuile de Jatropha curcas contient 130 mg/100g de
strols (dont 86,1% de -sitostrol) et 19,9 mg/100g de tocophrols (dont 76,9% de -tocophrol). Les
phospholipides (0,6g/100g) ont t quantifis sur la base de la teneur en phosphore. Ces donnes physicochimiques de lhuile ont t compares celles dautres huiles vgtales conventionnelles de grande
consommation au Bnin.
Mots cls: huile vgtale non conventionnelle, Jatropha curcas, Euphorbiaceae, acides gras, strols, tocophrols.

I- INTRODUCTION

La flore bninoise riche et diversifie,


regorge dinnombrables plantes olagineuses
que l'on utilise pour lalimentation, la
savonnerie, lclairage etc. (Noix de palme,
graines de coton, graines darachide etc.).
Il serait intressant dans un souci
dinnovations de cibler dautres olagineux
dimportance conomique pour linstant
faible mais nanmoins dignes dintrts
scientifique et technologique (Jatropha
curcas, Azadirachta indica, Blighia sapida)
[1]
.

Encore appel pignon dInde, pourghre,


"physic nut", le Jatropha curcas est connu en
langue nationale Fon au sud du Bnin sous la
dnomination de Kpotin ce qui signifie
bois de clture. Il est de la famille des
Euphorbiaces.
Il se prsente sous un arbuste de prs de
quatre mtres de hauteur latex translucide,
avec des rameaux pais, corce bronze
verdtre. Les feuilles sont glabres, entires
ou cinq lobes peu profonds et longs
ptioles. Les fruits sont des capsules ovodes,

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lgrement trilobes ou anguleuses, deux


ou trois graines. Ses graines qui contiennent
de lhuile ne sont pas encore valorises au
Bnin.
Les prcdentes recherches effectues sur le
Jatropha curcas [2,3,4,5] se sont limites la
dtermination de sa composition en acides
gras et nont pas abord le dosage des strols
et tocophrols de la fraction insaponifiable
objet des prsentes tudes.
Ces tudes visent donc la valorisation de la
graine de Jatropha curcas par ltude de la
valeur nutraceutique de son huile.
II- PARTIE EXPERIMENTALE
2-1
Matriels
2-1-1 Graines
La rcolte du lot de graines analyses a t
effectue dans le Centre du Bnin
Savalou (Afrique de lOuest). Elles ont t
convenablement sches au soleil jusqu
ce que les graines sonnent.
Les graines ont t spares des
enveloppes, convenablement tries et
dbarrasses de toutes les impurets, puis
dcortiques et broyes finement. Les
amandes ont t enfin conditionnes
25C dans des papiers aluminium avant
lextraction de lhuile.
2-1-2 Huile
Lhuile non conventionnelle de Jatropha
curcas, a t obtenue par extraction des
graines (finement broyes), au Soxhlet
pendant 6 heures la temprature de 70C.
Les traces d'hexane ont t limines au
rotavapor. L'huile extraite a t
conditionne dans des bouteilles sombres
et sous atmosphre inerte de diazote.
2-2 Mthodes
2-2-1 Caractrisation physico-chimique
de lhuile
La teneur en eau et en matires volatiles
est dtermine selon la norme NF T 60-201
et les matires extractibles l'hexane
(teneur en huile) par la norme NF V03924. Lacidit, lindice de peroxyde,
lindice de saponification sont dtermins

respectivement suivant le protocole des


normes NF T60-204, NF T60-220, NF ISO
3657.
Lindice diode est calcul selon la formule
suivante sur la base de la composition en
acide gras dtermine en chromatographie
en phase gazeuse.
I I = M ( I 2 )i% AGI i / MAGI i
O
%AGIi : pourcentage en acide gras insatur
obtenu par CPG ;
MAGIi : masse molaire molculaire de l'acide
gras insatur correspondant ;
M(I2) : masse molaire molculaire du diode =
254 g/mol.

2-2 -2 Dosage des lments minraux de


lhuile de Jatropha curcas.
Les lments minraux (N, P, Ca, Mg, Mn,
Zn, Cu, Na) ont t doss par ICP (plasma
Couplage Inductif) aprs minralisation
de l'chantillon. Le principe de l'ICP
repose sur l'mission atomique et les
phnomnes d'mission ayant lieu dans un
plasma. La temprature trs leve du
plasma (7000 10000 K) par rapport
celle d'une flamme (1000 K) permet une
meilleure dissociation des espces
chimiques. Les chantillons sont mis en
solution
selon
la
procdure
de
minralisation par voie sche. Le
spectromtre, de marque Varian Vista, est
quip du dtecteur CCD (Coupled Charge
Device). Lappareil (Jobin Yvon JY) tait
aux longueurs d'onde suivantes : =
214,914 nm pour le phosphore et =
589,592 nm pour le sodium. Les dosages
ont t effectus en ralisant un talonnage
qui respecte les conditions du milieu
analys (matrice, acidit). Les calculs ont
t effectus par interpolation par rapport
la gamme dtalonnage.
La validation des rsultats analytiques
repose sur lanalyse dchantillons de
rfrence internes (tmoins), dont la teneur
en lments minraux est connue.

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2-2-3 Dtermination de la composition


en acides gras par CPG
a- Prparation des esters mthyliques
des acides gras
Les esters mthyliques ont t prpars
selon le protocole de norme NF T60-233.
b- Composition massique en acides gras
Pour dterminer la composition en acides
gras, 1L dune solution hexanique
desters mthyliques a t injecte dans un
CPG Agilent 6890 HP series (Agilent,
USA) quip dune colonne de type
INNOWAX (Agilent, USA), de 30m de
long, 0,32mm de diamtre interne et un
film dpaisseur 0,25m. Linjecteur tait
en mode split, ratio 1/80 la temprature
de 250C. Le gaz vecteur tait lHlium de
dbit 1,5 mL/mn. Le dtecteur ionisation
de flamme tait 270C. La
programmation de la temprature du four
tait la suivante: 150C pendant 3mn suivi
dune augmentation de 3C/mn jusqu
220C (26,3mm) qui tait maintenue
constante jusqu la fin de lacquisition
(35,3mn).
Lidentification des pics a t faite par
comparaison des temps de rtention
desters mthyliques dacides gras dhuiles
vgtales comme lhuile dolive, lhuile de
tournesol et lhuile de palme, injectes
dans les mmes conditions opratoires.
Afin de vrifier la reproductibilit des
rsultats, chaque injection tait reprise trois
fois dans les mmes conditions opratoires.
2-2-4 Dtermination des strols totaux
de lhuile
a- Dtermination de la teneur en
insaponifiable
La teneur en insaponifiable a t
dtermine selon la mthode de l'IUPAC
[6]
.
b- Prparation de la fraction strolique
Pour dterminer les strols totaux, 0,5 g
dhuile, 1mL de cholestrol et 5mL de
KOH alcoolique ont t introduits dans un
ballon avec 2 grains de pierre ponce et mis
en reflux pendant 15 min. 5ml dthanol

sont alors introduits dans le ballon par le


haut du rfrigrant. 10mL de cette solution
sont introduits dans une colonne de
chromatographie
remplie
doxyde
daluminium (0,063 < I < 0,2mm). Les
lutions ont t faites successivement avec
5ml dthanol et 30 mL de dithylther. La
fraction obtenue a t aprs vaporation du
solvant, redissoute dans 1mL de
chloroforme.
c- CCM prparative de la fraction
strolique
20 L dune solution talon de cholestrol
et 400 L de la fraction insaponifiable de
huile ont t successivement dposs
l'aide d'un dposeur Linomat IV-Y
CAMAG (Merck, Rf. 022-786) sur une
plaque de silice 60 (Alltech, 20 x 10 cm,
250m d'paisseur). Llution tait faite
par un mlange chloroforme/dithylther
(90/10, %v/v). La partie contenant le dpt
de cholestrol a t rvle par
nbulisation d'un mlange Cu++/H3PO4
(1/1, %v/v) et un passage au four 180C
pendant 10 min.
La bande de strols correspondant au spot
de cholestrol a t gratte et les strols ont
t dsorbs dans du chloroforme (10mL/g
de silice) temprature ambiante sous
agitation magntique pendant 5min. Une
fois la silice devenue transparente une
filtration sur filtre Millipore (0,45m, Rf.
SLFH 013 NL) a permis de rcuprer les
strols totaux sans contaminant solide.
a- Composition et teneur en strols
1L de cette fraction strolique a t
inject en CPG pour dterminer la teneur
en strols de lhuile.
Lanalyse des strols a t faite dans des
conditions isothermes (285C) dans un
appareillage de CPG GC 8000 (Fisons
Instruments) quip dune colonne de type
SAC-5 (Sigma-Aldrich, USA), (longueur
30m, 0,25mm de diamtre interne et
0,25m dpaisseur de film). La
temprature du dtecteur ionisation de
flamme est maintenue 300C et celle de
linjecteur en mode split, ratio 1/100

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300C. L'intgration des pics a t faite


grce un intgrateur Merck D2000. Le
gaz vecteur tait l'hlium (1,5 mL/min).
Pour identifier les pics, nous avons inject
des standards de cholestrol, de -sitostrol
et de stigmastrol (produits de qualit
Sigma, concentration de 1mg/mL). Afin de
vrifier la reproductibilit des rsultats,
chaque injection a t reprise trois fois
dans les mmes conditions opratoires.
Les strols totaux ont t calculs de la
faon suivante :
Strols totaux (mg / g ) =
x

( Ax x ms

x K x 100)

( As

x m)

O :
Ax = Aire du pic du strol X
As = aire du pic de cholestrol
ms = masse de cholestrol ajout
m = masse dhuile
K = facteur de rponse du strol calcul en
fonction de laire de ltalon interne pour une
concentration identique.

2-2-5 Dtermination de la composition et


de la teneur en tocophrols par HPLCUV
Lanalyse des tocophrols des huiles a t
ralise par HPLC en phase normale
[7,8,9,10]
. Une solution 20mg dhuile par
mL dhexane et disopropanol (99:1) a t
filtre laide dun filtre millipore de
0,45m de diamtre. Lappareil et ses
accessoires (pompe, injecteur, dtecteur)
sont des produits de Agilent Sries 1100
(France),
comportant
une
pompe
quaternaire, un injecteur manuel muni
dune boucle dinjection de 20 L et un
dtecteur DAD ( barettes diodes). La
colonne tait de type Luna Si 60, 5m, 4,6
x 250mm (Phenomenex, France). Le
mlange de solvants dans les conditions
isocratiques tait compos dhexane et
disopropanol pour HPLC (99:1, % v:v).
Le dbit de la colonne tait de 1 mL/mn et
la pression de 33 bars avec un dtecteur
DAD la longueur donde de 295nm. Les
pics ont t identifis par injection de
standards de tocophrols (produits Sigma
aldrich). Les courbes dtalonnage taient

traces en procdant une gamme de


dilution de 0,3 8 L/mL.
III- RESULTATS ET DISCUSSIONS

3-1 Caractrisation physicochimique de


l'huile de Jatropha curcas compare
celles dhuiles vgtales de grande
consommation au Bnin.
Les caractristiques physico-chimiques de
lhuile de Jatropha curcas sont prsentes
dans le Tableau I. Elles sont compares
dautres huiles couramment utilises au
Bnin pour des applications diverses.
Lhuile est de couleur jaune clair. La
teneur en huile (49%) du Jatropha curcas
est suprieure celles dhuiles de coton et
darachide.
Par comparaison avec les standards et avec
quelques paramtres de ces huiles
(TableauI), il ressort que lhuile de
Jatropha curcas rpond tous les critres
de qualit qui lui confreraient une bonne
application dans des conditions moins
onreuses de raffinage. La viscosit (17
cSt) est relativement plus faible que celle
de certaines huiles vgtales, de coton
(36cSt), de soja (31cSt). Il en rsulte que
lhuile de Jatropha curcas du Bnin
pourrait tre utilise comme biocarburant
[11]
.
3-2 Composition chimique de huile de
Jatropha curcas
3-2-1 Elments minraux et teneur en
phospholipides.
Le dosage du phosphore permet d'avoir
une estimation de l'ensemble des
phospholipides prsents dans l'huile.
Sur le Tableau II sont reports les lments
minraux et la teneur en phospholipides
contenus dans lhuile de Jatropha curcas
du Bnin.
Les cations divalents (Ca, Mg) sont en
forte proportion (148 ppm et 116 ppm
respectivement)
comparativement
au
cation monovalent (Na, 33,9 ppm). Les
phospholipides (0,6g/100g), sont quantifis
sur la base de la teneur en phosphore. Au
regard des teneurs en Ca, Mg et Na, on
pourrait dduire que lhuile de Jatropha

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Tableau I: Donnes physico-chimiques de lhuile de Jatropha curcas du Bnin compare celles


dhuiles vgtales de grande consommation au Bnin.
Paramtres
Physico-chimiques

Huile de
Jatropha
curcas

huile de
Coton

Huile darachide

Huile de
palme

huile dolive
vierge

Teneur en huile (%)

49

22,9

45 53

67 89

20-27

Indice de rfraction (20C)

1,468

1,470

1,470

1,453

1,468

Viscosit (en cSt 20C)

17,1

36,0

77 82

25 51

75 - 79

Gravimtrie spcifique
(20C)

0,919

0,917

0,914

0,895

0,910

Acidit olique (%)

1,5

36,0

2,9 - 10,8

Indice de peroxyde
(meq/kg)

0,3

20,0

Indice d'iode calcul (mg


dI2 pour 100g dhuile)

100

105

85 90

51 54

75 - 94

Indice de saponification
(mg KOH/100g dhuile)

199

195

189 - 196

195 - 205

184 - 196

Phospholipides totaux
(g/100g)

0,6

Insaponifiable (%)

0,8

0,6 - 1,0

0,5 - 1,2

0,4 - 0,8

Strols totaux (mg/100g


dhuile)

130

292-308

147-171

66-93

119-268 [12,13]

Tocophrols totaux
(mg/Kg dhuile)

199

880,0

110

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curcas du Bnin serait plus riche en


phospholipides non hydratables quen
phospholipides hydratables.
Tableau II : quantit relative (ppm) des
lments minraux de lhuile de Jatropha
curcas du Bnin
Elments minraux
(ppm)
Phosphore
Calcium
Magnsium
Sodium
Cuivre
Fer
Manganse
Zinc
Phospholipides
(g/100g)

Jatropha curcas
350
148
116
33,9
Traces (<0,03)
1,0
0,6
1,2
0,6

3-2-2 Composition en acides gras de


lhuile de Jatropha curcas compare
celles des huiles vgtales de grande
consommation au Bnin.
La composition en acides gras de lhuile
de Jatropha curcas est reporte dans le
Tableau III. Elle est conforme aux valeurs
reportes dans la bibliographie [2,3,4,5]. Ces
valeurs ont t ensuite compares celles
dhuiles
vgtales
de
grande
consommation au Bnin. Cette huile se
rapproche de certaines huiles de grande
consommation (huile de table) dont
lindice diode est compris entre 80 et 110
savoir lhuile dolive, darachide (tableau
III) [12,13,14].
Lhuile de Jatropha curcas est de type
insatur (80% dacides gras insaturs) et
peut tre classe dans la catgorie oliquelinolique.
Elle est compose majoritairement
dacides palmitique, starique, olique et
linolique respectivement de 15,0%, 6,3%,
42,3% et 36,6%. L'acide linolique (C18:2,
n-6) et lacide linolnique (C18:3, n-3)
sont appels acides gras essentiels
indispensables la croissance et lactivit

physiologique de tous les tissus. Ils


interviennent dans la rgulation des
troubles cardio-vasculaires. Lhuile de
Jatropha curcas pourrait constituer une
source dacide linolique (omega-6).
Cependant, malgr son potentiel lipidique
lev, l'huile de Jatropha curcas est
toxique cause de la prsence des esters de
phorbol [15]. Il faudrait donc dvelopper des
technologies adquates comme l'extraction
slective au CO2 supercritique (pour
linstant onreuse) ou assiste par enzyme
[16,17,18]
afin de favoriser son utilisation
probable comme huile de table au Bnin.
3-2-3 Composition de la fraction
strolique compare celle dhuiles
vgtales de grande consommation au
Bnin.
Cette famille de composs (figure 1),
surtout le -sitostrol permet de lutter
contre les maladies cardiovasculaires par la
rduction de ladsorption intestinale du
cholestrol [19]. Le -sitostrol constitue le
strol majoritaire (86,1%) suivi du
stigmastrol (8,0%) et du campestrol
(4,1%) des strols totaux. Cette teneur en
strols totaux (130 mg/100g dhuile) a t
compare celle de lhuile dolive (119268 mg/100g) [11,12], darachide et de palme
(147-171
et
66-93
mg/100g
respectivement) [11] (Tableau IV). Il ressort
que lhuile de Jatropha curcas semble
avoir une teneur en strols totaux et
individuels proche de celle de lhuile
dolive et darachide marque par la
prdominance du -Sitostrol (58 -79,7%).
3-2-4 Composition de la fraction
tocophrolitique compare celles des
huiles
vgtales
de
grande
consommation au Bnin.
Il ny a pas dans la littrature consulte, de
donnes relatives la teneur en
tocophrols dhuile de Jatropha curcas.
Les tocophrols (figure 2) [20,21] qui
constituent la classe des vitamines E ont un
pouvoir antioxydant grce leur capacit
inhiber les peroxydations lipidiques [22].

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Tableau III : Composition massique des principaux acides gras de lhuile de Jatropha curcas du Bnin
compare avec celles dhuile de grande consommation au Bnin.
Acides gras (%)

Jatropha curcas

Coton

Arachide

Palme

huile dolive vierge

Acide palmitique C16:0

15,0

23,1

9,6

47,5

7,5 - 20,0

Acide starique C18:0

6,3

2,2

3,7

5,2

0,5 - 5,0

Acide olique C18:1

42,3

17,4

54,0

36,0

55,0 - 83,0

Acide linolique C18:2

36,6

54,0

22,0

9,3

3,5 - 21,0

Tableau IV : Composition en strols totaux de Jatropha curcas du Bnin compare avec celle dhuile
vgtale de grande consommation au Bnin.
Strols

Jatropha
curcas

Coton

Arachide

Palme

huile
dolive

Campestrol (%)

4,1 1,8

4-8

12 - 15

2,9

Stigmastrol (%)

8,0 1,1

<1

8 - 11

19 21
11 23

- sitostrol (%)

86,1 2,5

86 - 93

58 - 66

79,7

5- avnastrol (%)

0,3 0,1

2-3

9 - 14

56 59
2-3

130,0 7,3

292308

147-171

66-93

119-268

Strols totaux (mg/100g)

0,7

13,5

Tableau V : Composition en tocophrols totaux de Jatropha curcas du Bnin compare avec celle dhuile
vgtale de grande consommation au Bnin.
Tocophrols

Jatropha curcas

Coton

Arachide

Olive vierge

Huile de palme

-tocophrol (%p)

10,2 0,1

32- 49

42 - 59

52 - 87

23,9 0,3

-tocophrol (%p)

12,9 0,2

2-5

10 - 25

32,5 0,2

-tocophrol (%p)

76,9 0,7

31 - 57

32 - 52

7 - 23

40,2 0,4

-tocophrol (%p)

1-8

2-4

3,3 0,1

Tocophrols totaux
(mg/Kg)

199,0 16, 7

110-183

718 818

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Campestrol

-Sitostrol

Stigmastrol

5-Avnastrol

7-Avnastrol

7-Stigmastrol

Figure 1 : Structure des principaux strols dans les huiles vgtales [20,21]

-tocophrol
-tocophrol
-tocophrol
-tocophrol

Figure 2 : Structure des tocophrols [20, 21]

L'huile de graines de Jatropha curcas a


une teneur en tocophrols totaux de 199
mg/Kg. Cette valeur est faible par rapport
celles dautres huiles vgtales telles que le
soja (980mg/Kg), mas (huile 816mg/Kg)
et lhuile de palme (718-818 mg/Kg). Elle
est cependant plus leve que celle de
l'olive (110-183mg/Kg) [23,24]. Lhuile

R1
CH3
CH3
H
H

R2
CH3
H
CH3
H

de Jatropha curcas contient seulement les


, et - tocophrols (10,2 ; 12,9 ; 76,9%
respectivement des tocophrols totaux). Au
vu de cette composition, lhuile de
Jatropha curcas aurait une activit
antioxydante moyenne.
IV- CONCLUSION

Le prsent travail qui rentre dans le cadre


dtudes exploratoires de graines issues
despces forestires peu exploites, a

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port sur la composition chimique de


lhuile extraite de graines de Jatropha
curcas rcoltes Savalou (Bnin). Cette
investigation rvle que lhuile de
Jatropha curcas contient en grande
proportion des acides gras insaturs (acide
olique, acide linolique). Elles ont en
outre, permis pour la premire fois, de
dterminer la teneur en tocophrols totaux
par HPLC de cette huile. Les teneurs en
strols et tocophrols sont proches de
celles des huiles dolive et darachide qui
sont des huiles de grande consommation au
Bnin. La viscosit de lhuile tudie est
plus faible que celle des huiles de coton, de
soja, ce qui offre des possibilits de son
utilisation comme biocarburant. Lhuile de
Jatropha curcas est de la classe oliquelinolique. En plus de sa teneur en
composs nutraceutiques (strols et
tocphrols), elle pourrait servir dhuile de
table si elle ntait pas toxique. Cependant
des mthodes appropries dextraction
comme lextraction par voie enzymatique
pourraient permettre de contourner ce
problme.
REMERCIEMENTS
Les auteurs expriment leur reconnaissance au
Centre Bninois de la Recherche Scientifique et
Technique (CBRST) pour son appui financier ses
travaux de recherche.

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