FAGOCITOSIS IN VIVO

INTRODUCCIN:
Fagocitosis (del griego, -phagos, l que come; kytos, clula), proceso de ingestin de
materia por ciertas clulas que se denominan, en este contexto, fagocitos. Las formas de
vida unicelulares que engullen en masa e ingieren materia del exterior (como otras
clulas, bacterias,o materia inorgnica) presentan fagocitosis. En organismos
multicelulares, este proceso lo llevan a cabo clulas especializadas, casi siempre con el
fin de defender al conjunto del organismo frente a potenciales invasores perjudiciales.
En la especie humana y en otros animales superiores, son clulas errantes que se
distribuyen por todo el cuerpo. Grandes fagocitos, llamados macrfagos, tienen especial
importancia en el sistema linftico, el hgado y el bazo. Estos macrfagos ameboides
viajan tambin por todos los tejidos corporales e ingieren bacterias y otros materiales
del exterior. Fagocitos ms pequeos, que se conocen como leucocitos (un tipo de
glbulos blancos de la sangre), recorren todo el cuerpo a travs del torrente sanguneo.
Son atrados a los lugares donde se produce una infeccin mediante compuestos
qumicos que emiten las bacterias agresoras, y traspasan las paredes de los vasos
sanguneos hasta alcanzar a los invasores. El xito del proceso depende de la naturaleza
del material que penetre. Las protenas unidas a las partculas extraas que entran en la
sangre, atraen a los fagocitos y les permiten adherirse a las protenas e ingerirlas. Sin
embargo, si invaden el organismo formas bacterianas ms activas no
pueden ser ingeridas hasta que los fagocitos las atrapen fsicamente o hasta que sean
recubiertas por determinadas protenas llamadas anticuerpos. Si an as no es posible
ingerirlas, losfagocitos pueden incluso llegar a rodearlas por completo
El inmunlogo ruso Elie Metchnikof fue el primero en descubrir
que muchos microorganismos podan ser englobados y digeridos por clulas fagocticas
a las cuales llam macrfagos. La piel y las secreciones mucosas actan como barreras
y las enzimas proteolticas (enzimas digestivas que escinden las protenas) presentes en
los

lquidos orgnicos destruyen algunos organismos invasores. Adems de estohay

clulas con funciones inmunes innatas que responden rpidamente a los organismos
invasores y los destruyen. Estas clulas son bsicamente de dos tipos: monocitos
(especialmente macrfagos) y leucocitos polimorfonucleados. Ambas son capaces de

ingerir microorganismos por fagocitosis y destruirlos. Tambin sintetizan y segregan

muchas sustancias, entre ellas citoquinas y enzimas, que
protegen frente a lasinfecciones y estimulan el desarrollo de la respuesta inmunitaria.
La fagocitosis por polimorfonucleares neutrfilos se inicia a raz del contacto de esta
clula con factores quimiotcticos endgenos o elaborados por

microorganismos (N-

formilpptidos) (1). Esta unin permite la migracin direccional del fagocito hacia el
agente injuriante y activa el metabolismo oxidativo celular.
El reconocimiento y contacto con material a ser fagocitado est mediado por opsoninas
que pueden ser anticuerpos o el fragmento C3b del complemento. La unin de la
opsonina con la membrana celular gatillala formacin de vacuolas fagocticas y activa la
enzima NADPH oxidasa la cual comienza a generar radicales libres tales como anin
superxido, ion hidroxilo y perxido de hidrgeno.
Esto sucede cuando se est formando el fagosoma. Posteriormente, se produce la fusin
del fagosoma con lisosomas celulares constituyndose el fagolisosoma (4). Al vertir su
contenido al fagosoma, estos organelos aportan mieloperoxidasa que genera hipoclorito
o hipoyodito a partir del perxido de hidrgeno. El anin superxido, el ion hidroxilo,
el perxido de hidrgeno y el hipoclorito son parte de los mecanismos bactericidas
oxgeno-dependientes. Actan sobre la membrana bacteriana produciendo peroxidacin
de lpidos, rompimiento de protenas de membrana y de uniones disulfuro entre ellas y
formacin

de

uniones

Los grnulos especficos y azurfilos de los

cruzadas

entre

lpidos.

polimorfonucleares aportan tambin

diversas protenas con capacidad bacteriosttica y bactericida.

Entre las primeras se encuentran la lisozima que ataca la murena de la pared bacteriana
y la lactoferrina que priva a las bacterias de un elemento esencial para su vida cual es el
fierro.
Los grnulos azurfilos aportan las protenas catinicas microbicidas CAP 57 y CAP 37
que

rompen

la

membrana

externa de bacterias Gram-negativas.

Adems, vierten al fagosoma las enzimas proteolticas catepsina G y elastasa as como

la lisozima. Este grupo de elementos microbicidas conforman los mecanismos
bactericidas oxgeno-independientes. Finalmente, las enzimas hidrolticas de los
lisosomas digieren a los microorganismos muertos (5). Durante la fagocitosis se
produce frecuentemente liberacin de enzimas lisosmicas (6) tales como las proteasas
neutras

las

que

contribuyen a la fluidificacin de la matriz extracelular.

Asimismo aporta mediadores qumicos de la inflamacin tales como las protenas

catinicas. Estos mediadores aumentan la permeabilidad vascular en forma directa o
induciendo la liberacin de histamina en la clula cebada.

FAG O C I TOS I S I N VI VO
Cuando un agente agresor sobrepasa las barreras naturales constitudas por la piel y las
mucosas, un segundo mecanismo de defensa entra en accin y esla fagocitosis.
Esta funcin es ejercida por los macrfagos y neutrfilos.
OBJETIVOS:
Demostrar la actividad fagoctica de algunas clulas encontradas en la cavidad
peritoneal.
MATERIAL:
1. Cultivos vivos de 24 horas de Escherichia coli
2. Cultivos muertos por temperatura de ebullicin de Escherichia coli
3. Ratas inoculadas previamente con E. coli, por va intraperitoneal
4. Solucin colorante de Wright y agua tamponada
5. Tijeras
6. Pinzas de diseccin
7. Torundas
8. Alcohol
9. Lminas portaobjetos
10. Eter
11. Caja para anestesia
12. Saponina

PROCEDIMIENTO:

1. Dos horas antes de la prueba, la rata que ha sido inoculada previamente con el
cultivo muerto de E. coli, se inocula intraperitonealmente con 0,5 mL de cultivo
en caldo de E. coli ajustado al tubo N 3 del nefelmetro de Mac Farland.
2. Hacer una inoculacin igual, en un ratn no preparado previamente.
3. A las dos horas del paso anterior, sacrificar las ratitas inoculdas y al tercer ratn
testigo, ponindolas en una cmara de ter.
4. Abra la cavidad abdominal y realice un frotis de ella, utilizando hisopos.
5. Rote cuidadosamente la torunda sobre una lmina portaobjetos y utilice la
tcnica de coloracin Wright.
6. Observe la presencia de bacterias libres y de clulas en proceso de fagocitosis,
mostrando bacterias englobadas.

PROTENA DE FASE AGUDA: PROTENA C REACTIVA

Protena C reactiva
Otros nombres

CRP

Reactantes de fase aguda

Definicin
La protena C reactiva se produce en el hgado cuando hay una infeccin o inflamacin
aguda en el cuerpo. Su importancia es que reacciona con el sistema del complemento
que es un sistema de defensa contra agresiones externas del cuerpo humano.
Para qu se realiza la prueba
Se utiliza para evaluar la presencia de enfermedades infecciosas bacterianas,
enfermedades inflamatorias (fiebre reumtica, artritis reumatoide, etc.) pero no se eleva
de forma habitual en enfermedades producidas por virus.
La protena C-reactiva es un examen general para verificar si hay una inflamacin en
todo el cuerpo. No es un examen especfico; es decir, puede revelar una inflamacin en
alguna parte del cuerpo, pero no puede sealar la localizacin exacta.

La Protena C reactiva se eleva ante un problema infeccioso o inflamatorio antes que la

VSG y comienza a disminuir antes que ella ante la recuperacin de la enfermedad.
Si se trata la enfermedad con Aspirina o antiinflamatorios desaparece su elevacin.
La protena C reactiva aparece elevada en el infarto de miocardio.
Tambin puede ser de ayuda tras una intervencin de ciruga, ya que aparece elevada
durante 3 4 das, para luego disminuir, si persiste elevada es que hay alguna infeccin
o complicacin post-quirrgica.
En la meningitis bacteriana aparece elevada y no as en la producida por virus, lo que
puede servir para indicar el origen y tratamiento de un proceso de meningitis.

Tcnica de realizacin
Para realizar este anlisis No se precisa estar en ayunas.
Pueden aumentar la Protena C reactiva los anticonceptivos orales y el DIU. Y puede
disminuir sus valores la Aspirina, los antiinflamatorios esteroideos o no esteroideos.
Se puede realizar la toma en un lugar apropiado (consulta, clnica, hospital) pero en
ocasiones se realiza en el propio domicilio del paciente.
Para realizar la toma se precisa de localizar una vena apropiada y en general se utilizan
las venas situadas en la flexura del codo. La persona encargada de tomar la muestra
utilizar guantes sanitarios, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin).
Le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas retengan ms
sangre

aparezcan

ms

visibles

accesibles.

Limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin localizar la
vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.
Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin (mediante la
jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco).
Al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de algodn
o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el brazo y mantenga
la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas.

La sangre extrada se traslada al laboratorio de anlisis en un tubo especial para

bioqumica, que contiene un producto anticoagulante. En general no suelen ser
necesarios ms de 10 mililitros de sangre para una batera estndar de parmetros
bioqumicos.
Se utilizar la tcnica de aglutinacin con ltex

En estas tcnicas se hacen visibles los complejos antgeno-anticuerpo Ag-Ac por la

aglutinacin que producen los anticuerpos cuando el antgeno forma parte o se ha unido
artificialmente a partculas de ltex.
PROCEDIMIENTO
En lminas de color negro con crculos delimitados, se colocar una gota de suero del
paciente, sobre la cual se adicionar el reactivo de ltex.
Luego se homogeniza la mezcla y se espera la formacin de grumos que generalmente
se ubican en la periferia, esto indicar positividad.
Si la mezcla permanece homognea es un resultado negativo.

Valores normales de protena C reactiva en suero

Niveles normales de PCR en adultos:
Valoracin de resultados anormales
Los niveles aumentados de PCR pueden indicar:

Artritis aguda

Menores de 1 mg/ml

Artritis reumatoide

Fiebre reumtica

Otras enfermedades autoinmunes (Sndrome de Reiter, Enfermedad de Crohn,

vasculitis, LED, etc.)

Infarto de miocardio

Infarto pulmonar

Problemas de rechazo de transplantes

Traumatismos

Infecciones bacterianas (urinarias, tuberculosis, etc.)

Cncer.