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BIOLABO

www.biolabo.fr

UREE Mthode colorimtrique

FABRICANT :
BIOLABO SAS,

Ractif pour le dosage quantitatif de lure


dans le plasma et le srum humains, ou les urines.

Les Hautes Rives


02160, Maizy, France

REF 80221

R1 1 x 125 mL R2 1 x 1,25 mL

R3 1 x 31 mL

REF 80321

R1 1 x 500 mL R2 1 x 5 mL

R3 1 x 125 mL R4 1 x 10 mL

SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES


Tel : (33) 03 23 25 15 50

CODE CNQ : EV

R4 1 x 10 mL

IVD USAGE IN VITRO

Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (5)

PREPARATION DES REACTIFS

Plus de 90% de lure est limine par les reins dans les urines. La
mesure de la concentration plasmatique ou srique en ure est
souvent considre comme un indicateur de la fonction rnal.
Cependant certains facteurs non rnaux influencent galement la
concentration en ure : lurmie est augmente, entre autre, dans les
cas de catabolisme acclr des protines, brlures, traumatismes,
infarctus du myocarde... Le taux dure est abaiss au stade terminal
de grande insuffisance hpatique et saccompagne alors dune
augmentation de lammonimie. Le taux dure est gnralement
tudi conjointement au taux de cratinine (ratio ure/cratinine) pour
affiner le diagnostic dune azotmie post-rnale ou pr-rnale.

Dans un flacon R1 (Salicylate), ajouter le contenu d'un flacon R2


(Urase). Mlanger par retournements lents.
Ractif alcalin (flacon R3) :
Procdure n1 et n2 (manuelle) : Diluer (1+3) avec de leau
dminralise.
Procdure n3 (manuelle ou automatique) : Prt lemploi
Etalon (flacon R4) : transvaser la quantit ncessaire, bien reboucher
le flacon et stocker 2-8C.

Stocker 2-8C, dans le flacon dorigine bien rebouch et labri


de la lumire.

PRINCIPE (4)
Mthode enzymatique et colorimtrique base sur laction spcifique
de lurase qui hydrolyse lure en ions ammonium et carbonate. Les
ions ammonium forment ensuite avec le chlore et le salicylate un
complexe color bleu-vert. Lintensit de coloration, proportionnelle
la concentration en ure dans le spcimen, est mesure 600 nm.

REACTIFS
flacon R1

mmol/L
mmol/L

> 15

KUI/L

UREASE

Urase

flacon R3

31
1,67

7
62

Aprs ouverture et en labsence de contamination, le ractif alcalin


(flacon R3) dilu est stable 3 mois.

Srum non hmolys ou plasma hparin. Eviter les anticoagulants


contenant des ions fluorure ou ammonium qui interfrent avec le
dosage.
Lure est stable dans le srum ou le plasma :
24 h temprature ambiante.
plusieurs jours 2-8C.
au moins 2 3 mois congel.

mmol/L
mmol/L

Avant dilution : Xi, R36/38, Irritant pour la peau et les yeux


Aprs dilution : nant
S24-25-26-28 : Eviter le contact avec la peau et les yeux. En cas de contact, rincer
abondamment leau claire.

flacon R4

Aprs reconstitution, le ractif de travail (R1+R2) est stable 1 mois


en labsence de contamination.

PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2)

REACTIF ALCALIN

Sodium hypochlorite
Hydroxyde de sodium

Avant ouverture, les ractifs sont stables jusqu' la date de


premption indique sur ltiquette du coffret, sils sont utiliss et
conservs dans les conditions prconises.

Aprs ouverture, le contenu du flacon R4 est stable au moins 3 mois


en labsence de contamination.
Ne pas utiliser les ractifs sils sont troubles ou si labsorbance du
blanc 600 nm est > 0,100 contre de leau dminralise.
Ne pas utiliser le ractif de travail aprs la date de premption
indique sur ltiquette du coffret.

SALICYLATE

Salicylate
Nitroprussiate
flacon R2

STABILITE ET CONSERVATION

Urines de 24 h : diluer (1+19) avec de leau dminralise avant


dosage.
Lure est stable dans les urines :
4 jours 2-8C.
Pour une meilleure conservation, ajouter un antibactrien (Thymol).

ETALON

Ure 0,40 g/L (6,66 mmol/L)

PRECAUTIONS
Les ractifs BIOLABO sont destins du personnel qualifi, pour un
usage in vitro.
Utiliser des quipements de protection (blouse, gants, lunettes).
Ne pas pipeter avec la bouche.
En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment
leau et consulter un mdecin.
Les ractifs contiennent de lazide de sodium (concentration < 0,1%)
qui peut ragir avec les mtaux tel que le cuivre ou le plomb des
canalisations. Rincer abondamment.
La fiche de donnes de scurit peut tre obtenue sur simple
demande.
Elimination des dchets : respecter la lgislation en vigueur.

INTERFERENCES (3)
Pas dinterfrence des substances testes (acide ascorbique,
bilirubine, triglycrides et hmoglobine) avec le dosage.
Young D.S. a publi une liste des substances interfrant avec le
dosage.

REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES


1. Equipement de base du laboratoire danalyses mdicales.
2. Srums de contrle normaux et pathologiques.

Par mesure de scurit, traiter tout spcimen comme potentiellement


infectieux. Respecter la lgislation en vigueur.

IVD

REF

Fabricant Date de premption Usage In vitro Temprature de conservation Rfrence Produit

Made in France

LOT

Consulter la notice Numro de lot Conserver labri de la lumire Suffisant pour diluer avec

Dernire version : www.biolabo.fr

Version : 26/07/2011

CALIBRATION

LIMITE DE LINEARITE

Etalon du coffret (flacon R4) ou BIOLABO Multicalibrator REF 95015


traables sur SRM 909b.
Ou tout calibrant raccord sur une mthode ou un matriau de
rfrence.
La frquence de calibration dpend des performances de lanalyseur
et des conditions de conservation du ractif.
Il est recommand de calibrer nouveau dans les cas suivants :
1. Changement du lot de ractif.
2. Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.
3. Les valeurs de contrle obtenues sortent des limites de confiance,
mme aprs utilisation dun deuxime flacon de srum de contrle
frachement reconstitu.

Procdure n1 et n3 : linaire jusqu 2,5 g/L (41,7 mmol/L).


Procdure n2 : linaire jusqu 1,25 g/L (20,9 mmol/L).

CONTRLE DE QUALITE

CODE CNQ: EV

BIOLABO EXATROL-N Taux I REF 95010.


BIOLABO EXATROL-P Taux II REF 95011.
Tout autre srum de contrle titr pour cette mthode.
Programme externe de contrle de la qualit.
Il est recommand de contrler dans les cas suivants :
Au moins un contrle par srie.
Au moins un contrle par 24 heures.
Changement de flacon de ractif.
Aprs oprations de maintenance sur lanalyseur.
Lorsquune valeur de contrle se trouve en dehors des limites de
confiance, appliquer les actions suivantes :
1. Rpter lopration en utilisant le mme contrle.
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, prparer un srum
de contrle frachement reconstitu et rpter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre
calibrant ou un calibrant frachement reconstitu et rpter le test.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer nouveau
en utilisant un autre flacon de ractif et rpter le test.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service
technique BIOLABO ou le revendeur local.

INTERVALLES DE REFERENCE (2)


Dans le srum ou le plasma

g/L

[mmol/L]

Au-del, diluer le spcimen avec une solution NaCl 9 g/L et refaire le


dosage en tenant compte de la dilution dans le calcul du rsultat. La
limite de linarit dpend du rapport de dilution spcimen/ractif.

MODE OPERATOIRE (TECHNIQUE MANUELLE)


Ramener les ractifs et spcimens temprature ambiante.
Procdure n1(alcalin dilu)
Mesurer dans des tubes essai

Blanc

Etalon

Dosage

Ractif de travail (R1 + R2)

1 mL

1 mL

1 mL

Eau dminralise

5 L

Etalon

5 L

Spcimen (Remarque 1)

5 L

Mlanger et laisser 4 minutes temprature ambiante


ou 2 minutes 37C

Ractif alcalin (flacon R3) dilu

1 mL

1 mL

1 mL

Mlanger. Laisser 8 minutes temprature ambiante ou 5 minutes 37C. Lire les


absorbances 600 nm (590-610) contre le blanc.
La coloration due la raction est stable 2 heures.

Procdure n2 (alcalin dilu)


Mesurer dans des tubes essai

Blanc

Etalon

Dosage

Ractif de travail (R1 + R2)

1 mL

1 mL

1 mL

Eau dminralise

10 L

Etalon

10 L

Spcimen (Remarque 1)

10 L

Mlanger et laisser 4 minutes temprature ambiante


ou 2 minutes 37C

Ractif alcalin (flacon R3) dilu

1 mL

1 mL

1 mL

Mlanger. Laisser 8 minutes temprature ambiante ou 5 minutes 37C. Lire les


absorbances 600 nm (590-610) contre le blanc.
La coloration due la raction est stable 2 heures.

Procdure n3 (alcalin PUR)

Cordon

0,45-0,86

[7,5-14,3]

Prmatur

0,06-0,54

[1,1-8,9]

Mesurer dans des tubes essai

Blanc

Etalon

Dosage

[1,4-6,8]

Ractif de travail (R1 + R2)

1 mL

1 mL

1 mL

Eau dminralise

5 L

< 1 an

0,09-0,41

Enfant

0,11-0,39

[1,8-6,4]

18-60 ans

0,13-0,43

[2,1-7,1]

60-90 ans

0,17-0,49

[2,9-8,2]

> 90 ans

0,21-0,66

[3,6-11,1]

26-43 g/24 h

[0,43-0,71 mol/24 h]

Dans les urines

Il est recommand chaque laboratoire de dfinir ses propres valeurs


de rfrence pour la population concerne.

PERFORMANCES (Procdure n1)


Taux
moyen

Taux
lev

Inter-srie
N = 20

Moyenne g/L

0,40

1,416

Moyenne g/L

0,35

1,11

S.D. g/L

0,008

0,017

S.D. g/L

0,016

0,034

C.V. %

1,89

1,17

C.V. %

4,5

3,1

Intra-srie
N = 20

Taux
moyen

Taux
lev

Limite de dtection : environ 0,1 g/L


Comparaison avec ractif de la concurrence :

Etalon

5 L

Mlanger et laisser 4 minutes temprature ambiante


ou 2 minutes 37C

Ractif alcalin PUR (flacon R3)

250 L

250 L

250 L

Mlanger. Laisser 8 minutes temprature ambiante ou 5 minutes 37C. Lire les


absorbances 600 nm (590-610) contre le blanc.
La coloration due la raction est stable 2 heures.

Remarques :
1. Srum, plasma ou urines dilues (1+19) dans leau dminralise.
2. Des procdures spcifiques sont disponibles pour les analyseurs
automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
3. Le test peut tre aussi ralis 578 nm. Dans ce cas, la linarit
avec la Procdure n2 est porte 3 g/L.

CALCUL
Le rsultat est dtermin daprs la formule suivante :
Srum et plasma :
Abs (Dosage)
Rsultat =

x concentration de lEtalon

Abs (Etalon)
Urines dilues (1+19) : Multiplier le rsultat par 20 (facteur de dilution).

y = 0,9816 x + 0,0087
r = 0,9961
Sensibilit pour 1 g/L 600 nm

REFERENCES

Procdure n1

Environ 0.400 abs

(1)

Procdure n2

Environ 0.800 abs

(2)

Procdure n3

Environ 0.700 abs

(3)

Note : la sensibilit est plus grande pour des longueurs donde


(4)
(4)

Made in France

5 L

Spcimen (Remarque 1)

TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood, W.B. Saunders (1999) p. 1239-1241.
Clinical Guide to Laboratory Test, 4th Ed., N.W. TIETZ (2006) p. 10961099.
th
YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4 Ed. (1990)
p. 3-599 3-609
SEARCY R.L., REARDON J.E., FOREMAN J.A., Amer. J. Md. Techn.
1967, 33, 15-20
Bernard S. Bioch. clin. Diagnostics mdicaux chirurgicaux 2me d. p.143144. Ed. Maloine PARIS (1989)

Dernire version : www.biolabo.fr

Version : 26/07/2011

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