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Spectroscopie

UV-Visible
Pr. Franck DENAT
ICMUB UMR 5260
9, Av. Alain Savary
BP 47870 21078 Dijon
Franck.Denat@u-bourgogne.fr

Spectroscopie dabsorption UV-Visible


I. Introduction.
Spectroscopie : Etude des interactions entre la matire et un rayonnement
lectromagntique.
Une molcule absorbera une radiation de frquence sil existe des transitions
ncessitant une nergie :

E = h

(h = 6,63 10-34 Js, cte de Planck)

Eexcit
E = h = hc/ = hc

: frquence
: longueur donde
: nombre donde

Efondamental
Absorption dun rayonnement dans le domaine de lUV-Visible : excitation dlectrons
de valence.

II. Le spectre lectromagntique

Modification dtats de spin nuclaire


Rsonance Magntique Nuclaire
Excitation dlectrons de valence
190-400 nm : proche UV
400-700 nm : Visible
700-1100 nm : trs proche IR

Modification dtats de spin lectronique


Rsonance Paramagntique Electronique
Transitions entre niveaux vibrationnels

II. Absorption molculaire, spectre de bandes


- dans un atome :
labsorption du rayonnement donne naissance une seule raie spectrale

Etat d'nergie excit


Transition lectronique
Etat d'nergie fondamental
- dans une molcule :
les tats lectroniques ont des domaines nergtiques larges, dus aux niveaux
vibrationnels et rotationnels :

Etotale = Electronique + Evibrationnelle + Erotationnelle

Rapport 1000:50:1

spectre de bandes

Ex : spectre du benzne a) en solution , b) ltat de vapeur (structure fine)

Le spectre UV-Visible est le trac de A (absorbance) en fonction de (en nm)


Bande dabsorption caractrise par :
sa position max (nm) et son intensit max (L.mol-1.cm-1) ou coefficient dabsorption
molaire
Loi de Beer-Lambert :

# I0 &
#1&
A = "lc = log% ( = log% (
$I'
$ T'

Io

T : transmittance

l : parcours optique (cm)

chantillon concentration c (mol.L-1)

Intrts de la spectroscopie UV-Visible :


- large domaine dapplications (Chimie minrale, organique, biochimie),
90% des analyses mdicales
- analyses quantitatives (loi de Beer-Lambert)
- grande sensibilit : limite de dtection 10-5 M
- prcision : 1 - 5% erreur
- simplicit, rapidit.

III. Les diffrents types de transitions


III.1. Dans les composs organiques
-transitions * : max < 150 nm (UV lointain)
-transitions n * : 150 nm < max < 250 nm, intensit moyenne (50 < < 2000 L.mol-1.cm-1)
-transitions * : max > 190 nm (> 400 nm pour systmes trs conjugus), forte intensit
(1000 < < 10000 L.mol-1.cm-1)
-transitions n * : max > 190 nm, faible intensit (10 < < 100 L.mol-1.cm-1)

Valeurs de max et pour quelques chromophores


Chromophore : groupement prsentant une absorption caractristique dans lUV ou
le visible
Chromophore
nitrile
alkyne
alkene
alcohol
ether
ketone
aldehyde
amine
acid
ester
amide
thiol
nitro
azo

Transition
# to $*
$ to $*
$ to $*
# to %*
# to %*
$ to $*
# to $*
$ to $*
# to $*
# to %*
# to $*
# to $*
# to $*
# to %*
# to $*
# to $*

!max
160
170
175
180
180
180
280
190
290
190
205
205
210
210
271
340

log(")
< 1.0
3.0
3.0
2.5
3.5
3.0
1.5
2.0
1.0
3.5
1.5
1.5
1.5
3.0
< 1.0
< 1.0

http://www.chemistry.ccsu.edu/glagovich/teaching/472/uvvis

Exemples de spectres de composs organiques

Conjugaison : rapprochement des orbitales et * :


: effet bathochrome
: effet hypsochrome

: effet hyperchrome
: effet hypochrome
Conjugaison; mais aussi :
effets de substituants (NR2,
OH, OR, X,),
effets de solvant (polarit),

Rgles de Woodward-Fieser estimation de max

III.2. Dans les espces inorganiques


Transitions lectroniques entre orbitales d
Exemples de spectres de solutions aqueuses
dions de mtaux de transition :

max et dpendent de :
- la nature du mtal
- son degr doxydation
- son environnement (gomtrie, champ de ligand)

III.3. Dans les complexes de transfert de charge


Transition lectronique dun donneur vers un accepteur
Ex : Fe(III)-thiocyanate
Forte intensit : > 10000 L.mol-1.cm-1)

IV. Appareillage
Spectromtre monocanal

Spectromtre multicanaux, optique inverse


dtecteur = PM ou photodiode ou barette de diodes

Systme dispersif : prisme ou rseau (1200 traits / mm)


lampe W (>350 nm)
+ lampe D2 (<350 nm)
( ou lampe Xe puls )

IV.1. Spectromtre simple faisceau monocanal


Rseau tournant : balayage

Largeur de fente (bande passante) rsolution mais rapport signal/bruit (S/N)

IV.2. Spectromtre double faisceau

IV.3. Spectromtre multicanaux ( barette de diodes)

- spectromtre lumineux : S/N lev


- observation instantane de tout le spectre (qques ms) dtecteur HPLC
- rsolution mdiocre

V. Prparation des chantillons


Le plus souvent liquides

V.1. Cellules (cuves)


l = 1 100 mm (standard 1 cm)
Plastique, verre, quartz

V.2. Solvant
- pouvoir de dissolution
- transparent dans la zone dintrt
- spectrophotometric grade : absence dimpurets, agents stabilisants,
- solvants volatils : boucher la cellule

V.3. Sondes immersion

Fibres optiques

Exemples dapplications:
- mesures en ligne pour le suivi de procds
- mesures dans des environnements contamins
- mesures dans des atmosphres explosives ou radioactives
- mesures de cintiques de ractions

VI. Analyses quantitatives


Loi de Beer-Lambert :

# I0 &
#1&
A = "lc = log% ( = log% (
$I'
$ T'

Aech.

cech.

Pente = l ( si l = 1 cm)
- Additivit de la loi de Beer-Lambert :
Ex: mlange de 2 constituants

= 1 + 2 = 1lc1 + 2lc2 = l(1c1 + 2c2)


- Analyse multicomposants :
mesure de A autant de que de constituants dans le mlange

Limites de validit de la loi de Beer-Lambert :


- solutions dilues (c < 0,01 M)
- absence dinteractions solut-solvant
- lumire monochromatique (impossible dans labsolu)
- influence de la lumire parasite, viter de travailler A > 1,5

Les solution talons doivent avoir une composition voisine de celle des chantillons
afin de minimiser les effets des divers constituants (effet de matrice)
Parfois difficile Mthode des ajouts doss :
On prlve plusieurs fois un volume Vx dune solution dun chantillon de [ ]cx
inconnue, on ajoute un volume croissant Ve dune solution talon de [ ] ce

Ve

Vt

Vx

= lce Ve/Vt + lcxVx/Vt = l/Vt ceVe + l/Vt cxVx = aVe + b avec a = l/Vt ce et b = l/Vt cxVx
cx =

b ce
a Vx

Raction simple A B :
A du point isobestique, A constant car A = B =

= lcA + lcB = l (cA + cB) = cte


point isobestique