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1.
Se sabe, por lo general, que hay algunas prdidas de sacarosa en el jugo de caa desde el momento de
su extraccin en los molinos hasta que llega a la sala de cocimiento. Esta prdida es debida a
la inversin durante el proceso de fabricacin pero el monto de la prdida, su importancia econmica y
cmo lo puede corregir, son factores no entendidos por todos. A medida que el jugo de la caa no tratada
qumicamente salpica sobre las panes del molino expuestos al jugo y pasa luego por las canaletas y
caeras durante la recirculacin, entra en contacto directo con billones de microorganismos que estn
adheridos a las superficies del metal y del cemento.
La multiplicacin de los microorganismos en los jugos diluidos extrados de la caa de azcar y su
acumulacin en la superficie de los molinos, dan como resultado una prdida considerable de la sacarosa.
Por lo tanto, los microorganismos contribuyen a la prdida de rendimiento de azcar de dos maneras:
Incuestionablemente son la principal fuente de invertasa en el jugo de caa.
La transferencia de energa requerida para que la reaccin siga avanzando hacia la destruccin
de azcar y prdidas para el ingenio, es generada por microorganismos que utilizan la energa obtenida
de la inversin de sacarosa para su crecimiento y reproduccin.
Se sabe que ciertas especies de bacterias producen una enzima, la invertasa y que concentraciones bien
pequeas de sta enzima transforma rpidamente a la sacarosa en glucosa y fructosa. Los fangos que se
acumulan en los molinos constituyen la fuente ms importante de invertasa, y aunque la limpieza
frecuente de los fangos ayuda a reducir las prdidas de sacarosa no hay duda que la rpida multiplicacin
de los microorganismos en un nutriente tan rico como el jugo de caa hace impracticable la eliminacin de
los fangos que se forman en los molinos y por consiguiente la prdida de sacarosa. Adems de la
invertasa producida por los microorganismos en algunas ocasiones hay tambin cantidades apreciables
de esta enzima en el jugo, tal como se extrae de la caa.
Precisando la problemtica, presente y teniendo en cuenta la accin de bactericidas en el jugo de caa se
considero como definicin del problema.
Es posible evitar la inversin de la sacarosa utilizando el bactericida Bactol Q en el jugo de caa de la
Empresa Agroindustrial Pucal SA?
1.
En la presente investigacin, la hiptesis queda definida de la siguiente manera:
"La dosis adecuada del bactericida Bactol Q inhibe la inversin de la sacarosa en mayor porcentaje
que la limpieza con agua caliente"
H0= No hay efecto del bactericida sobre el promedio de ndice de inversin de la sacarosa.
Ha= Hay un efecto del bactericida sobre el promedio de ndice de inversin de la sacarosa.
2.
FORMULACIN DE LA HIPTESIS
3.
FORMULACIN DE OBJETIVOS
Objetivos Generales
Minimizar las perdidas por microorganismos en los molinos de caa de azcar, empleando agua
caliente y/o uso de bactericida.
Objetivos Especficos
Determinar la dosis adecuada de bactericida Bactol Q que influya favorablemente en el
rendimiento de la sacarosa.
ANTECEDENTES AL SEGUIMIENTO:
El ingenio azucarero de industrial Pucal SAC. cuenta en la actualidad con un tanden de cuatro
molinos con una capacidad promedio de 200 TCH.
El jugo extrado ofrece un medio ideal para la propagacin de microorganismos que causen
destruccin de sacarosa; McCleery En estudios realizados sobre estas perdidas reporta que pueden
alcanzar hasta el 1.0% de la sacarosa en el jugo.
Los limos o fangos que se acumulan en los molinos constituyen la fuente mas importante de
invertasa, y aunque la limpieza frecuente de los molinos, ayuda a reducir las perdidas de sacarosa no hay
duda que la rpida multiplicacin de los microorganismos hace impracticable la eliminacin de los fangos
que se forman en los molinos y por consiguiente la perdida de sacarosa.
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Para estimar el mayor rendimiento de sacarosa como resultado del uso de bactericidas en
cualquier ingenio se requiri contar con datos exactos sobre la pureza, y las cantidades de azcar
invertido de los jugos del trapiche; jugos mixtos durante periodos sin tratamiento y periodos con
tratamiento.
Con los promedios de los datos obtenidos durante el periodo sin tratamiento y con contaminacin. Se
sugiri determinar el contenido de azcares reductores de ser posible por muestreo continuo de jugo
del trapiche y del jugo mixto debiendo evaluarse las muestras.
EVALUACIN DEL PROBLEMA
IMPORTANCIA Y JUSTIFICACIN DEL ESTUDIO
Esta bacteria destruye la sacarosa generando prdidas econmicas produciendo dextrana que es un
polmero de consistencia gomosa que tiene la apariencia de los huevos de rana, generando tambin
efectos perjudiciales al proceso de fabricacin de azcar.
A medida que el jugo de la caa no tratada qumicamente, salpica sobre los puntos del molino expuestos
al jugo y pasa luego por las canaletas y caeras durante la recirculacin, entra en contacto directo con
billones de microorganismos que estn adheridos a la superficie del metal y del cemento. La
multiplicacin de los microorganismos de lo jugos diluidos extrados de la caa de azcar y su
acumulacin en la superficie de los molinos, dan como resultado una perdida considerable de la sacarosa
por lo tanto lo microorganismos contribuyen a la prdida de rendimiento de azcar.
Cuando el Leuconostoc y otras bacterias formadoras de cido se desarrollan en la caa de azcar
recolectada, sta se vuelve cida. Se produce azcar invertido, cidos lctico y actico y, con frecuencia,
dextrana. Con este crecimiento microbiano puede producirse un olor "agrio". En climas hmedos y
calurosos, puede perderse cada da, entre la zafra y el triturado, 1-5 % del azcar total.
El jugo mixto es un medio ideal para el crecimiento de muchos microorganismos, si bien slo unos
cuantos lo logran con xito ya que el jugo tiene un grado Brix de 10-18, un pH de 5,0-5,6, abundantes
sales orgnicas e inorgnicas, aminocidos y otros nutrientes y una temperatura media entre 25 y 30 C.
En este medio, el Leuconostoc mesenteroides, formador de dextrana, est especialmente adaptado para
competir, si bien otros microorganismos microaerfilos catalasa-negativo crecen igualmente produciendo
cido, invertasa y dextrana. En algunos rodillos predominan los Enterobacter spp.; en otros son buenos
competidores las levaduras productoras de alcohol. Afortunadamente la destruccin del azcar por los
microorganismos se reduce durante la fase de clarificacin, que normalmente se lleva a cabo con rapidez,
si bien, en ocasiones, se ve retrasada por paradas programadas o sin programar.
Entre los efectos perjudiciales de Leuconostoc mesenteroides esta la formacin de cristales de azcar en
forma de aguja que retarda la cristalizacin en los tachos, disminuyendo su eficiencia y generando la
formacin de falso grano que ocasiona problemas en la centrifugacin de las masas cocidas por su
facilidad para pasar por las perforaciones de la tela de la centrifuga; incrementando la pureza de la miel
final.
Adems de la deterioracin microbiolgica ocurre tambin deterioracin por accin qumica y trmica.
La deterioracin microbiolgica, sea en el campo, ingenio o refinera produce polisacridos que reducen
los rendimientos de extraccin y cristalizacin aumentan la viscosidad y disminuyen los niveles
de produccin mientras producen as mismo componentes coloreados y formadores de
cidos.
La descomposicin qumica, que incluye la descomposicin trmica disminuye as mismo el pH y produce
componentes coloreados y precursores de la presencia de color. Todos estos componentes no
azucarados tienen que eliminarse durante el procesamiento, ya que arrastran sacarosa con ellos a las
melazas disminuyendo la cantidad de sacarosa recuperada.
Es esencial un anlisis crtico de las causas de las prdidas de sacarosa Para identificar las reas donde
se pueden evitar dichas prdidas aumentando el rendimiento de sacarosa. Las prdidas fsicas debido a
las pobres tcnicas de corte de la caa, almacenamiento o transporte de la caa de azcar, dispersin,
prdida de la Sacarosa en aguas y productos residuales y adsorbentes. Las causas y los medios de
eliminacin de stas prdidas son bien conocidas aunque si se llevaran a cabo en mejores condiciones,
los niveles, de prdidas en algunas reas se podran reducir a una cifra ms aceptable.
Los diversos tipos de prdidas qumicas, trmicas y microbiolgicas se exponen a continuacin:
a.
Formacin de Dextrana.
La principal causa microbiolgica de prdidas de sacarosa es la formacin de dextranas,
principalmente por la bacteria Leuconostoc mesenteroides, as como la Leuconostoc dextraricum y
por otras bacterias formadoras de lgamo. La dextrana provoca la prolongacin de cristal de sacarosa
a lo largo del eje "C" (el llamado grano "de aguja").
Esta prolongacin hace difcil el purgado de las centrifugas, incrementando las prdidas en melazas y
agua de lavado. La dextrana, da lugar as mismo a unos niveles de prolongacin artificialmente altos
debido a su carcter dextrorrotatorio.
La dextrana es el nombre genrico para los polisacridos que son polmeros de la glucosa.
No todos los tipos de Leuconostoc mesenteroides crecen en una solucin, de sacarosa y entre los
que lo hacen ninguno sintetiza dextrana por encima de los 60C o con un alto Brix.
Por cada molcula de sacarosa consumida solamente la porcin de glucosa se utiliza en la formacin
de dextrana, permaneciendo un ncleo de fructosa. Es la fructosa se descompone subsiguientemente
en cidos orgnicos y componentes colorantes, dando lugar a una disminucin en el pH, que a su
vez, aumenta el nivel de inversin, llevando a una prdida adicional de cidos y colorantes a partir del
b.
c.
azcar invertido as formado. Son subproductos de la formacin enzimtica de dextrana. Los cidos
lcticos y actico, el manitol y el etanol, los cuales destacan el problema de cada de pH la formacin
de colorante y aumento de las prdidas de sacarosa en melazas.
La caa daada, incluyendo la daada que va junto con la caa quemada y la troceada en el corte es
particularmente susceptible al crecimiento de levaduras y bacterias. Son especialmente notables
debido a los productos a que dan lugar hallados en los azcares, las levaduras de la
especie Sacharomyces, que produce etanol y la Clostridium thermosaccharolyticum, productora de
cido butrico. Adems de consumir sacarosa, estos organismos producen sustancias que crean ms
problemas de procesamiento y comercializacin.
Las prdidas de sacarosa debidas a la accin microbiana se pueden eliminar o minimizar mediante la
manipulacin e higiene a temperatura adecuada.
El descenso de la polarizacin puede ser una medida errnea de las prdidas de sacarosa.
Si en primer lugar se invierte la sacarosa reaccionando a continuacin la fructosa y la glucosa as
formadas en proporciones desiguales la polarizacin puede ser artificialmente alta si la fructosa
desaparece ms rpidamente que la glucosa o puede ser artificialmente baja si la glucosa,
desaparece ms rpidamente que la fructosa.
Causas microbiolgicas de la prdida de sacarosa:
Prdidas qumicas de sacarosa
c.
d.
Dextrana (C6H10O5)n
Esta goma, que es un enemigo muy molestoso para el fabricante de azcar, es el producto de varias
fermentaciones (como la producida por el Leuconostoc), y ocurre con frecuencia en caas daadas por
heladas o por ataques de insectos. La formacin de est goma viscosa, convierte rpido la cana en
inservible para la molienda. Su alta rotacin especifica (+200), tres veces mayor que la de la sacarosa,
introduce un serio error en la polarizacin de los productos, de caa, a menos que la goma se elimine
previamente tratndola con alcohol.
Levan
Esta goma la encontr Smith y Steel en productos de caa de Australia, y era producido por la bacteria
Levaniformans. Este organismo es, segn las investigaciones, muy destructor de los azcares crudos,
causando rpidas inversiones de la sacarosa y produciendo la goma mucilaginosa levan, que tiene una
rotacin especifica de -40, y que, hidrolizada con cidos rinde
Cellulan
Una goma encontrada por Brawne. Se forma por ciertas fermentaciones de jugos y de meladuras, y
consta de grumos correosos grandes, que son insolubles en lcalis custicos.
Mannan
Esta goma se encuentra a veces en los depsitos sedimentarios de jugos y mieles fermentadas, y el cual,
hidrolizada por cidos produce Manosa.
Chitina
Esta sustancia, que estrictamente hablando no pertenece a las gomas, ha sido encontrada por Brawne en
grandes cantidades en las espumas de las mieles de tanques de almacenamiento, la cual hidrolizada con
cido hidroclrico da un azcar amina, la glucosa - amina.
a.
El nmero y la clase de microorganismos encontrados en los jugos de la caa, depende en gran
parte de la cantidad y naturaleza de las sustancias adheridas a la corteza de la caa, las , cuales a su
vez infectan al jugo en el momento de la extraccin. La simple filtracin mecnica del jugo de caa
recin extrado, elimina, segn pruebas en promedio, aproximadamente el 75% de los
microorganismos originalmente presentes.
Debido a que el jugo extrado se infecta rpidamente de microorganismos, los cuales causan una
inversin rpida de la sacarosa se recomienda evitar exponerles a la accin de stos el menor tiempo
posible, y adems mantener los equipos limpios de material en deterioro, como los molinos que
tienen residuos de bagazo impregnados. Se sabe que el uso de vapor para la limpieza de los molinos
reducen grandemente la proliferacin de microorganismos, incluso se recomienda como prctica
corriente el use de antispticos o germicidas para los molinos en combinacin con los lavados y la
limpieza de los molinos.
La infeccin del jugo de caas sanas, en el momento de su extraccin, ser sujeta a poca variacin,
sin embargo, el tipo de fermentacin predominante, en distintos momentos, es la que varia
considerablemente. Uno de los principales factores que determinan el curso de la fermentacin
espontnea del jugo de caa, es la temperatura a la cual est expuesto. Estudios han determinado
que para temperaturas inferiores de 20C parece predominar el tipo viscoso de fermentacin con
mayor frecuencia que de temperaturas entre 20 y 30C.
Los limites de temperatura de los grupos mas importantes de bacterias productoras de gomas, que se
encuentran en los jugos de cana son los siguientes:
Lmites de Temperatura de las Principales Bacterias Productoras de Gomas
GRUPO
Leuconostoc mesenteroides
Bacillus mesenteroides (levan)
Cuadro N 1: Fuente: SPENCER, Guilfor; "Manual de Fabricacin de Caa de Azcar"
b.
c.
La fermentacin viscosa esta asociada con una notable accin reductora, con el resultado de que los
jugos fermentados presentan un aspecto blanquecino. Esta fermentacin da origen a varios
productos de oxidacin, entre los cuales la manita es la ms frecuente. Otra fermentacin que se
realiza es la celulsica, en cuyo curso la sacarosa se asimila por ciertas formas de bacterias, como el
Bacterium xylinium, con formacin de celulosa, este organismo forma grupos de vainas gelatinosas, y
Brawne encontr que el producto de esta fermentacin constaba de celulosa, y representaba
aproximadamente el 7% de los azcares totales fermentados.
Otros factores que determinan el tipo de fermentacin que Los jugos de -caa experimentan son el
pH de los jugos, y la' cantidad y clase de material contaminante que tiene acceso al jugo. El
rendimiento ptimo de dextrana ocurre en el intervalo de pH de 7 a 8 . Las bajas temperaturas y el pH
alto, de 8 favorecer; al Leuconostoc, mientras que para una acidez ligera (pH de 6.5) y una
temperatura alta mas de 65C SON LAS condiciones menos favorables para su crecimiento.
Factores que afectan el nmero de microorganismos
Definicin de trminos usados
CAA DE AZCAR
El tipo de suelo
3.
Los fertilizantes
o
4.
Sacarosa
Condiciones climatolgicas y otros
DEXTRANA
Las dextranas Polisacridos de cadena lineal formada por unidades de alfa D glucosa, unida por enlace
alfa 1,6. No son verdaderos productos naturales, se descubrieron en la fabricacin del azcar al observar
masas que obturaban los filtros. Se forman por fermentacin de la sacarosa en presencia de bacterias,
que tienen un contenido de encima especfico: Leuconostoc mesenteroides. Esta rompe el enlace entre
glucosa y fructosa de la sacarosa, unindose las unidades de glucosa, polimerizndola y dando
dextranas. Las dextranas que se obtienen por fermentacin de la sacarosa son de peso molecular mayor
de 75000, 40000 y 10000.
La dextrana exhibe un poder rotatorio mucho mayor que la sacarosa.
Figura N 2: Estructura De Una Dextrana
REDUCTORES
Se llaman reductores a todos los monosacridos que se encuentran, disueltos en el jugo de la caa. Se
calcula como azcar invertido. Anteriormente, se le conoca con el nombre de glucosa, como sinnimo de
azcares reductores. Tienen la propiedad de desviar la luz polarizada hacia la izquierda por le que se les
llaman azcar levgiros.
POL
Por Pol se entiende todos los azcares solubles existentes en el jugo de la caa que tienen la propiedad
de desviar la luz polarizada hacia la derecha
(dextrgiro) y hacia la izquierda (levgiro).
Se entiende por "polarizacin", al procedimiento seguido y por "pol" al resultado obtenido.
BRIX
A los slidos disueltos que se encuentran en el jugo tales como: sacarosa, reductores y no azcares se
les conoce con el nombre de Brix y se expresa en porcentaje.
Se determina por medio de aermetro (brixmetro), refractmetro y por desecacin.
JUGO PRIMARIO
El jugo primario es el jugo extrado por el primer molino, antes de comenzar la dilucin por efecto de la
inhibicin. Tambin se le conoce con el nombre de jugo crusher.
JUGO MEZCLADO
Es el jugo absoluto mezclado con los jugos procedentes de los molinos y el agua de dilucin.
PUREZA
Es la relacin en porcentaje que existe entre el pol contenido y los slidos totales disueltos en el jugo.
Cuando los slidos totales solubles se expresan en grados API, Brix, y/o en slidos refractomtricos o por
desecacin/ las purezas reciben los nombres de pureza aparente refractomtrica y verdadera.
INVERSIN
La sacarosa se hidroliza con facilidad en soluciones cidas a velocidades que aumentan notablemente
segn el aumento de la temperatura y la disminucin del pH, con liberacin de los monosacridos
constituyentes, segn la reaccin:
a esta reaccin hidroltica se aplica generalmente el nombre de inversin, ya que produce un cambio de la
actividad ptica dextrgira propia de la sacarosa a una actividad neta levgira, equivalente a [] D20
39.70, de los productos de la reaccin. .
La invertasa es un catalizador orgnico que acelera la reaccin de inversin de la sacarosa,
desdoblndola por su accin hidroltica, en otras formas de azcares ms simples, usados para la
nutricin de los microorganismos, que de este modo encuentran medios favorables de crecimiento.
LEUCONOSTOC MESENTEROIDES
Las especies de Leuconostoc, especialmente Leuconostoc mesenteroides se establece en el ingenio
azucarero.
Esta especie particular de bacteria es capaz de crecer muy rpidamente en
las condiciones favorables que existen habitualmente en el jugo de caa antes del encalado y del
calentamiento. Aunque el Leuconostoc produce en el jugo de caa grandes cantidades de dextrana, la
cantidad de sacarosa hidrolizada en azcar invertida y convertida en dextrana es varias veces mayor. La
dextrana disuelta en el jugo ocasiona mayor valor en sacarosa aparente (pol) del que debiera obtenerse
del, contenido de sacarosa.
Figura N 3: Vista De Leuconostoc Mesenteroides
METODOLOGA Y PROCEDIMIENTO
TIPO DE INVESTIGACIN
Es de carcter experimental
DISEO DE LA INVESTIGACIN
Para la contratacin de la hiptesis se aplic segn comparaciones estadsticas el diseo con estimulo
creciente, variacin del diseo clsico pues la variable estimulo se aplic en diferentes dosis,
el grupo testigo no recibi estimulo.
UNIVERSO O POBLACIN
Muestreo al azar
VARIABLES DE ESTUDIO
Brix
En una probeta de 250 ml se dejo reposar para luego leer el Brix con el hidrmetro. A esta muestra se le
toma la temperatura la cual sirve para hallar el Brix corregido mediante el uso de tablas.
Lectura Polar
En un frasco se agrega 100 ml de muestra aadindole 3 gramos de sub acetato de plomo agitndolo
durante 1 minuto.- Despus de esto se filara y se procede a leer en el polarimetro.
Con la lectura obtenida y con el uso de tablas se determina el pol.
Azcares Reductores
En un frasco kohlrausch de 100 mi se coloc 25 mi de muestra filtrada, posteriormente se le agreg 4 ml
de solucin deplomadora EDTA, se afora con agua destilada, luego se agita por 1 o 2 minutos. Despus
se filtra.
En un matraz se agregan 5 ml de fehling A y 5 ml de fehling B. Con la solucin filtrada y la solucin
anterior se aplica el mtodo de Lane Eynon.
Con el gasto de la titulacin y con las tablas se determina el porcentaje de azucares reductores.
TCNICAS DE PROCESAMIENTO DE ANLISIS DE DATOS
Los datos obtenidos se agruparon, procesaron y evaluaron mediante pruebas estadsticas:
Materiales
Probeta de 25 ml
Vaso de precipitacin
Pinzas
Pipetas de 50 ml
Brixmetros
Termmetros
Baln Kohlrausch
Matraces
Equipos
Cocina elctrica
Polarmetro
Reactivos
Solucin de Fehling A
Solucin de Fehling B
Subacetato de Plomo
Solucin deplomadora
Azul de metileno
PREPARACIN DE REACTIVOS
ACETATO DE PLOMO
Acetato de plomo es un polvo blanco certificado que se usa para clarificacin de azcar, jugos, jarabes en
la determinacin de sustancias reductoras y polarizacion.
SOLUCIN DEPLOMADORA
Disolver 30 gramos de oxalato de potasio, K2C204 . H2O en cerca de 200 cc de agua destilada y en otro
vaso disolver 70 gramos de fosfato de sodio dibsico, Na2HP04 12 H20 en aproximadamente 500 cc de
agua destilada, colocar las dos soluciones en un frasco volumtrico de 1000 cc y completar el volumen a
la marca con agua destilada; se usa Clarificacin de muestras para
determinacin de sustancias reductoras.
AZUCARES REDUCTORES
o
o
Aparatos
Bureta
cocina elctrica
Pipeta
Matraz
Reactivos
Aplicaciones de mtodo
El mtodo volumtrico de Lane Eynon para la determinacin de azcares reductores, es aplicable a todos
los jugos de caa, incluyendo aquellos de caa de campos de los molinos, jugo clarificado y tambin para
jarabe diluido. La nica condicin que se requiere es que la dilucin a que previamente se deje someter el
jugo para su anlisis por el mtodo estndar, sea hecha en tal proporcin, que su consumo, al titularlo
contra 10 cc de liquido Fehling (5 cc. De solucin "A" mas 5 cc de solucin "B")
est comprendido entre 15 y 50 cc. Por lo general, en la prctica, soluciones de un volumen de jugo y 2 0
3 volmenes de agua, darn al titular consumos comprendidos dentro de los limites indicados.
Procedimiento
En realidad el mtodo implica efectuar dos determinaciones sucesivas de azcares reductores en cada
muestra de jugo. La primera determinacin podramos llamarla de tanteo y se realiza con el jugo puro, sin
dilucin.
Es un mtodo rpido que da slo resultados aproximados.
Sin embargo, apae de que da la pauta para el mtodo estndar el mtodo rpido se le considera, en
ciertos casos de suficiente exactitud para fines prcticos, como en el anlisis de ciertos jugos en los que
no se requiere mayor precisin; por ejemplo en jugos de caa de campo.
Mtodo Estndar
Se requiere que el consumo final de la titulacin sea de 1-50 cc del jugo preparado, ya que stos son los
limites de la tabla, que se usar para el clculo del azcar reductor %.
Preparacin y Clarificacin del Jugo
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.