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Facultad de Ecologa y recursos naturales.

Escuela de medicina veterinaria.

Informe de Reproduccin
Animal
Clonacin en Mamferos

Integrantes: Camila Aedo


Azaras Bahamondes
Hctor Parra
Franco Prez
Profesor: Alfonso Snchez
Asignatura: Reproduccin Animal (MVT 168)
Fecha: 7/12/2016

Introduccin
La clonacin se define como los diferentes procesos que pueden ser usados para
producir copias genticamente iguales de una entidad biolgica. El material gentico
de la copia o clon es idntico al del original.1
Cabe destacar que la clonacin se caracteriza por ser un proceso no sexual (o
asexual) ya que no existe variabilidad gentica y el material gentico se obtiene de
solo un progenitor a diferencia de la reproduccin sexual donde existen usualmente
dos progenitores y donde si existe variabilidad gentica gracias a los procesos de
mutacin y combinacin de genes.2
En condiciones naturales si existe la reproduccin asexual la que da lugar a lo que
podramos llamar clones. Un ejemplo de esto son las bacterias que poseen este tipo
de reproduccin ya que se dividen por fisin binaria y la bacteria o bacterias hijas son
idnticas a la original, tambin existe la clonacin natural en el caso de los gemelos
monocigoticos que son los que proceden de la fecundacin de un solo ovulo y un solo
espermatozoide.2
Por otro lado existe la clonacin artificial, la cual como su nombre lo indica es creada
por el hombre y se puede clasificar segn el tipo de mtodo usado y tambin segn el
fin que tendr dicha clonacin estando entre ellas la celular, molecular, teraputica,
reproductiva, etc. Por ejemplo en el caso de la clonacin reproductiva en animales,
uno de sus objetivos es que al tener un animal con buenos rendimientos productivos
se puedan crear copias idnticas de l y as asegurar un buen futuro productivo y
econmico.3
El presente trabajo se centrara en la clonacin en mamferos, la historia de esta, sus
mtodos, implicancias y usos en la medicina veterinaria.
2

Mtodos y Fundamentos de la Clonacin


La clonacin puede dividirse en cuanto a su origen natural o artificial. Primero
entenderemos como clonacin natural, a aquella que se da en la naturaleza, tanto
asexual como sexualmente. Dado que en el presente trabajo abordamos el tema en
animales mamferos, hablamos de tipo sexual, en la que dos organismos, macho y
hembra aportan sus clulas germinativas para formar una nueva clula llamada cigoto
que en un futuro ser un nuevo y completo organismo. Los organismos pluricelulares
son pues, clones ordenados de clulas con un mismo genoma, pero especializadas hacia
funciones distintas. Esto indica que cuando se forma el cigoto, su repertorio de actividades,
aunque limitado, es suficiente para dar origen a organismos con una elevada complejidad
estructural.7

Por otro lado, la clonacin artificial es una tcnica basada en la transferencia nuclear,
en la que participan dos clulas; la que dona su material gentico y la que lo acepta.
Esta ltima suele ser un ovocito al que se le han extrado sus cromosomas que se
encuentran en el citoplasma (ya que an est en meiosis II). Luego, se le inyecta al
ovocito el material gentico del animal que se quiere clonar. Despus de esto se le da
electrochoques, estos

son los que estimulan la formacin de la nueva clula.

Finalmente se injerta esta clula en el tero de una hembra para darle un ambiente
adecuado para su desarrollo. Esto se interpreta con la hiptesis de que el citoplasma
del ovocito receptor contiene todos los elementos (factores de transcripcin y ARN)
para diferenciar al ncleo donado y reorientar el control gentico para el desarrollo de
un nuevo organismo. Para ello existen 3 mtodos diferentes:8
1. Particin: En esta tcnica se utilizan embriones octocelulares, en estado de
preimplantacin. A partir del embrin seleccionado, se toman mitades o secciones que

posteriormente se introducen dentro de zonas pelcidas naturales o artificiales. A


continuacin, se efecta la implantacin del producto en el endometrio. El nmero mximo
de clulas del embrin, no puede ser superior a 8, porque a partir de este momento, se
inicia la expresin del genoma embrionario. Los individuos obtenidos son prcticamente
idnticos entre s, aunque diferentes a los progenitores, por lo cual se considera que son el
equivalente de los gemelos monocigticos 10. Esta tcnica se ha seguido ampliamente para
la clonacin de animales de granja Como ejemplos de

esta tcnica estn las ovejas

Megan y Morag, del Roslin Institute.9

2. Clonacin por transferencia nuclear de clulas somticas (SCNT:Somatic Cell


Nuclear Transfer): Emplea el uso de dos tipos de clulas: somticas o no sexuales, y
sexuales femeninas, u oocitos. Los ncleos de clulas somticas de individuos postnatales
se transfieren dentro de oocitos o de cigotos enucleados. Esta tcnica tiene la ventaja que
permite conservar el genoma durante la diferenciacin celular y la capacidad del
citoplasma celular para reprogramar la actividad gnica y aumentar la redireccionalidad de
la diferenciacin celular. Sin la aplicacin de estos dos principios, la clonacin no es
posible. Para clonar a un ser vivo mediante SCNT, se extrae el material gentico de ambos
tipos de clulas y, a continuacin, se inyecta el ncleo de la clula somtica que se desea
clonar (donante), dentro del oocito previamente enucleado (receptor). El trasplante de
ncleos somticos dentro de oocitos enucleados tiene como fin reproducir los procesos
bioqumicos y fisiolgicos que, de manera natural, se desencadenan durante la
fertilizacin. Para esto se debe establecer una comparacin entre la fertilizacin y la
clonacin. Durante la fertilizacin, el primer evento que ocurre es la sincronizacin de los
proncleos masculino y femenino. Cuando el espermatozoide atraviesa la membrana
plasmtica del oocito, su ncleo se encuentra en la etapa G 0 del ciclo celular, mientras que
el ncleo del oocito est detenido en la metafase de la segunda meiosis. Los oocitos
recientemente ovulados presentan una elevada concentracin de Factor Promotor de la
Maduracin (siglas en ingls MPF), una proteincinasa que induce la ruptura de la
membrana nuclear y la condensacin de los cromosomas,motivo por el cual pueden hacer

su ingreso al ncleo ciertos factores citoplasmticos que son necesarios para la replicacin
del ADN. Los dos proncleos se llevan entonces a la etapa S del ciclo, caracterizada por
una sntesis activa de ADN.7, 9.

3. Paraclonacin: Consiste en inyectar ncleos de clulas madre embrionarias en cultivo,


dentro de oocitos enucleados y, a veces, de cigotos enucleados. Los blastmeros se
obtienen a partir de varias fuentes como la masa celular interna o el trofoectodermo de
embriones pre implantados y sus ncleos son transferidos dentro de oocitos enucleados 6.
Los individuos obtenidos son casi idnticos entre s, aunque diferentes a los padres del
embrin que aport el ncleo transferido 57. Se ha demostrado que la supervivencia de los
clones formados a partir de clulas madre embrionarias en el instante del nacimiento o
hasta la edad adulta, es 10 a 20 veces mayor que en los derivados de clulas somticas.
Por otra parte, los clones derivados de clulas madre embrionarias tienen mejores
posibilidades de reactivar completamente genes claves para el desarrollo embrionariotales como oct4 y 10oct4- y as constituir una poblacin de clulas verdaderamente
totipotenciales. Sin embargo, las clulas madre embrionarias, aunque requieren un menor
grado de reprogramacin que las clulas somticas, presentan una elevada inestabilidad
epigentica en cultivos in vitro. La inestabilidad se refleja en una expresin aberrante de la
huella gentica, de modo que, cuando estas clulas se utilizan como donantes para la
clonacin reproductiva, el fenotipo fetal y placentario de los clones, exhibe graves patrones
de anormalidad. Sin embargo, cuando se emplean como fuente de ncleos para la
clonacin teraputica, en apariencia no ocurre este error, pues, durante la reprogramacin,
se seleccionan tan slo las clulas competentes.10

Historia de la clonacin
Antes de comenzar la clonacin en mamferos, los primeros casos de este mtodo se
vieron en anfibios, especficamente la rana, registrndose la primera clonacin en el
ao 1952 por cientficos de la universidad de Pennsylvania Robert W. Briggs y

Thomas J. King. A travs de transferencia nuclear mediante clulas somticas,


usaron luz ultravioleta daaron el ncleo de un ovulo recin fecundado para luego
sustituirlo con el ncleo de una clula de blastocito de la rana leopardo y as el huevo
comenz a desarrollarse como un renacuajo clon.4
Ms adelante se siguieron haciendo experimentos de clonacin con ranas y
salamandras pero tambin mamferos, como los roedores. En 1975 fue creado el
primer embrin mamfero clonado por J. Derek Bromhall a travs de transferenciaAn
nuclear implantando el ncleo de una clula embrionaria de conejo hacia un ovocito
enucleado de conejo, pero para que el embrin siguiera desarrollndose se debi
haber implantado en el tero de una coneja, lo cual no se hizo. Luego al ao 1984
Steen Willadsen, un embrilogo dans, cre el primer organismo mamfero clonado, us
un proceso qumico para separar una clula de un embrin de cordero octocelular, luego
us una pequea descarga elctrica para fusionarla a un vulo enucleado, la nueva clula
comenz a dividirse. Este se fertilizo y se implanto en el tero de una oveja, la cual dio a
luz 3 corderos.5

Sin embargo el caso ms famoso de clonacin en mamferos ocurri en el ao 1996,


es el de la oveja Dolly ya que este fue el primer mamfero clonado a partir de una
clula de un adulto ya desarrollado y no de una clula embrionada. La clula que dio
origen a Dolly fue una clula ya diferenciada de la ubre de una oveja blanca de raza
6

Finn Dorset , los cientficos tuvieron que encontrar la forma de que las clulas no
muriesen y tampoco se replicaran, esto lo hicieron alterando el medio en el que estas
vivan .Cuando ya haban logrado esto, inyectaron una clula en un ovulo no fecundado
(de una oveja escocesa de cara negra) al cual previamente ya se le haba eliminado su
ncleo, e hicieron que las clulas se fusionaran con el uso de impulsos elctricos Entonces
inyectaron la clula en un vulo no fecundado al cual se le haba eliminado el ncleo, e
hicieron que las clulas se fusionaran mediante pulsos elctricos. Cuando finalmente se
haban unido los ncleos, los investigadores tuvieron que cultivar estas clulas para ver si
se dividan, al cabo de ms o menos 7 das, se formaron 277 fusiones celulares que a su
vez formaron 29 embriones tempranos, los cuales se implantaron el 13 ovejas hembras de
cara negra escocesas usadas como madres de alquiler, pero solo un embarazo llego a
trmino y fue el que dio vida a luz al cordero de raza Finn Dorset al que se le llamo Dolly.

Figura 1: Esquema explicativo del proceso de clonacin usado para crear a la


oveja dolly.
Desde la aparicin de Dolly se marca un antes y un despus en la clonacin de
mamferos, destacndose casos como los de argentina donde el 2002 naci Pampa
gracias a los cientficos de Bio sidus el cual tomo 6 aos de investigacin y su fin era

crear medicamentos a bajo costo a travs de protenas recombinantes secretadas de


la leche de vaca. Desafortunadamente el animal muri poco tiempo luego del parto.6
La clonacin de mamferos en la actualidad es un rea de investigacin en avance,
con fines cada vez ms variados, desde crear medicamentos a base de leche (Los
casos de Dolly y Pampa son un ejemplo de esto) e incluso llegar a clonar animales de
compaa como perros o gatos, sin embargo los costos para hacer estos
procedimientos son altos por lo tanto aunque se sigue practicando aun no es una
prctica tan comn de ver.

Cabe recalcar que los experimentos descritos anteriormente son solo algunos de los ms
importantes en el mbito de la clonacin ya que son los ms exitosos y que han marcado
un hito en el rea, pero se ha reportado que hubo muchsimos ms experimentos en el
tiempo que implicaron nacimiento de individuos con deformaciones, anomalas y/o
enfermedades inusuales, como es el caso de Dolly que desarrollo una artritis y luego muri
por cncer Jaagsiekte que afecta al pulmn, y algunas de sus hermanas tambin lo
padecieron.

USOS DE LA CLONACION

1) Estudio de la diferenciacin celular: Uno de los usos para el proceso de


clonacin es la capacidad de regresar a las clulas a su estado indiferenciado
en otras palabras regresar la clula la toti potencialidad o su pluripotencia para
eso se debe tener encuentra que al diferenciarse las clulas estas suprimen
ciertos genes para su especializacin. Para la clonacin este proceso de
diferenciacin puede revertirse con la expresin de ms genes esto resulta til
en el proceso de replicar seres vivos o rganos, esto va de la mano con la
produccin de clulas madre lo cual resulta til en tratamientos de ciertas
enfermedades o trasplantes 11
2) Reprogramacin gentica: En la clonacin de animales se pueden replicar
individuos que se les ha seleccionado o agregado(por mtodos de trasplante
nuclear) genes con caractersticas deseables, esto en produccin puede ser
muy til ya que se pueden obtener animales ms resistentes o ms adecuados
9

al clima de ciertos lugares, tan bien pueden ser ms productivos( generar ms


carne o leche) de uno o de un rebao en total lo cual resultara ms manejable
y ms rentable para los productores adems de tolerar o aprovechar ciertas
dietas pobres en nutrientes en ciertos lugares.12
3) Uso en medicina: Junto con el uso en clulas madres para tratamiento, otro
uso es el testeo de frmacos. Los clones al ser iguales genticamente
presentaran

resultados

ms

uniformes

que

en

animales

no

relacionados(genticamente) pero parecidos fsicamente esto lo hace ms


general y menos aleatorio ya que la igualdad

descarta las variaciones

individuales pero el hecho de que sea uniforme asemeja ms a pruebas en


grupo asumiendo que todos son semejantes.11
4) Reproduccin de especies en amenaza o extintas: La clonacin tiene el
potencial de restablecer poblaciones de animales en peligro de extincin o
extintos totalmente lo cual resultara til en conservacin de fauna silvestre y
conservacin de esta misma.13
Nota: un problema de esto ltimo es que va de la mano con polticas o
programas de conservacin que lo consideran innecesario en este momento.

10

Conclusin
La clonacin de mamferos desde su inicio ha sido un gran descubrimiento
para la ciencia, pues como hemos visto es una gran herramienta teraputica
para la medicina tanto humana como veterinaria, nos da la posibilidad de tratar
enfermedades que requieren recursos que son muy limitados, como son los
trasplantes, tambin el uso de clulas madre para utilizar en tratamientos
mdicos y facilita la creacin de frmacos de manera mucho ms eficiente.
Tambin es una gran herramienta para la industria de la produccin ganadera,
bilogos moleculares manipulan genticamente al ganado a fin de conseguir
que todo un rebao sea ms eficiente en trminos de lo qu est destinado a
producir, incrementando las ganancias econmicas. En el caso de la utilizacin
para fines de conservacin de fauna, no es usado ya que para algo hay
profesionales expertos y que dedican su vida a esto, adems del rol que
tenemos como sociedad de mantener un equilibrio de la vida en el planeta,
pues la idea es trabajar en conjunto para mejorar la calidad de vida de todos
los organismos de forma natural y que no llegue a tal extremo que debamos
usar este mtodo artificial que es la clonacin. De la misma manera que
existen todas estas facilidades gracias a la clonacin, hoy en da hay un gran
debate acerca del bienestar animal y la tica, por lo cual creemos que todos los
profesionales concernientes a esta tcnica, como son los mdicos veterinarios
y teriogenologos, deben trabajar en conjunto para que haya un mejor
entendimiento y as evitar los casos de mortalidad, malformaciones y
enfermedades que se dan en estos clones.

Bibliografa
11

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