2010 Nematodes Manual FRENCH

Les nmatodes des plantes:
Un guide pratique des techniques

de terrain et de laboratoire
D.L. Coyne, J.M. Nicol et B. Claudius-Cole
Traduit par Patrick Qunherv
PM
Integrated Pest Management
Le prsent guide produit par lInstitut International dAgriculture Tropicale (IITA) et the International Maize
and Wheat Improvement Center (CIMMYT) fait partie de la stratgie du Systemwide Program on Integrated Pest
Management (SP-IPM) pour amliorer la qualit et lapplicabilit de la recherche au contrle des ravageurs.
LIITA, le CIMMYT et le SP-IPM sont sont soutenus par le Consultative Group on International Agricultural
Research (CGIAR; www.cgiar.org). Le financement de la production du guide vient du Centre Technique de
Coopration Agricole et Rurale (CTA) et de Syngenta pour les ditions prcdentes.
Le SP-IPM est un programme de partenariat mondial dont le rle est dunir les efforts des centres internationaux
de recherche agricole et leurs partenaires et de guider ces efforts plus clairement vers les besoins des petits paysans
des pays en voie de dveloppement. Le programme sintresse aux domaines de la recherche qui envisagent de
fournir des solutions aux problmes vitaux pour le dveloppement dune agriculture durable mais dont limpact
est jusquici limit gnralement d aux cloisonnements des efforts entre diffrentes organisations, diffrentes
rgions du monde ou d aux liens inadquats entre chercheurs et paysans. Le SP-IPM espre atteindre des progres
rapides en supprimant ces contraintes, cassant les barrires de lchange dinformation, remplissant les gaps de
la recherche quand ncssaire et dveloppant des modles effectifs de partenariats chercheursvulgarisateurs
paysans afin de promouvoir ladoption des technologies dIPM.
SP-IPM c/o IITA, PMB 5320, Ibadan, Nigeria OU
SP-IPM c/o IITA, Carolyn House, 26 Dingwall Road, Croydon, CR9 3EE, UK
www.spipm.cgiar.org
LIITA est une organisation internationale de recherche pour le dveloppement base en Afrique, fonde en 1967
et gouverne par un groupe dadministrateurs. Sa vision est dtre lun des leaders parmi les partenaires Africains
dans la recherche de solution pour la faim et la pauvret. LIITA possde plus de 100 chercheurs internationaux
dans differentes stations travers le continent Africain. Ce rseau de chercheurs se consacre llaboration de
technologies reduisant les risques des producteurs et consommateurs, augmentant la production locale et gnrant
du bien tre.
IITA, PMB 5320, Ibadan, Oyo State, Nigeria
www.iita.org
Le mandat du CIMMYT est dagir comme catalyseur et leader dans le rseau mondial dinnovation sur le mas et
le bl au service des pauvres dans les pays en voie de dveloppement. En se basant sur une science robuste et des
partenariats effectifs, le CIMMYT cre, partage et utilise des connaissances et technologies visant augmenter la
scurit alimentaire, amliorer la productivit et la profitabilit des paysans ainsi que la durabilit des ressources
naturelles.
CIMMYT, AP 6-641, 06600 Mexico DF, Mexico
www.cimmyt.org
Le CTA a t cr en 1983 dans le cadre de la Convention de Lom signe entre les tats du groupe ACP (Afrique,
Carabes, Pacifique) et les tats membres de lUnion Europenne. Depuis 2000, le CTA opre dans le cadre de
lAccord de Cotonou ACP-UE. Le CTA a pour mission de dvelopper et de fournir des produits et des services
qui amliorent laccs des pays ACP linformation pour le dveloppement agricole et rural. Le CTA a galement
pour mission de renforcer les capacits des pays ACP acqurir, traiter, produire et diffuser de linformation pour
le dveloppement agricole et rural. Le CTA est financ par lUnion Europenne.
CTA, Postbus 380, 6700 AJ Wageningen, Pays-Bas
www.cta.int
Les nmatodes des plantes:

Un guide pratique des techniques
de terrain et de laboratoire
Traduit par Patrick Qunherv
PM
Integrated Pest Management
Remerciements
Les auteurs sont reconnaissants envers SP-IPM et CTA pour leur gnreux soutien financier dans la production
du prsent guide. Les pricipaux bailleurs de SP-IPM qui ont contribu au dveloppement et la production
du prsent guide sont les gouvernements de Norvge, de Suisse et dItalie. Nous reconnaissons galement les
contributions financires verses par CTA et Syngenta pour produire cette dition franaise.
Dr. Braima James (Coordinateur de SP-IPM) a donn limpulsion et son soutien permanent dans la prparation
du prsent guide, qui, nous lesprons, satisfera la demande de nos partenaires et sera utile la sensibilisation et la
rsolution des problmes nmatologiques. Nous remercions Braima pour son soutien indfectible.
Nous apprcions particulirement les conseils et diverses contributions du Dr. John Bridge dans la prparation
du prsent guide.
Nos remerciements vont Luma Al-Banna, John Bridge, Roger Cook, Don Dickson, Jon Eisenback, The Food
and Environment Research Agency [Crown Copyright, UK], Georg Goergen, Dieter Heinicke, Sean Kelly,
Sandra Mack, Mariette Marais, Alex McDonald, Hans Meerman, Edward Oyekanmi, Richard Plowright, Roger
Rivoal, Richard Sikora, Paul Speijer, Hugh Wallwork, Esther van den Berg et Vivien Vanstone pour lautorisation
dutiliser leurs images photographiques. Nous remercions aussi R. Esser pour nous avoir cd une de ses
illustration, ainsi que Graham Stirling pour lutilisation de ses figures et des rfrences affrentes dans les annexes.
Nous remercions M. Duncan Scudamore et Mme Elif Sahin pour leur assistance dans ldition du prsent guide.
Notre remerciement spcial va Patrick Qunherv (Directeur de Recherche IRD, France) qui a traduit le
prsent guide en franais, ainsi qu Komi Fiaboe pour son assistance dans ladite traduction.
ISBN 978-131-348-x
2010 International Institute of Tropical Agriculture
Tous droits reservs. La maison ddition encourage une utilisation quitable du prsent guide tant quune
citation correcte est faite. Aucune reproduction, photocopie ou transmission du present guide nest permise sans
authorisation crite pralable de la maison ddition.
Rimprim en 2010
Cita correcta:
Coyne, D.L., Nicol, J.M. et Claudius-Cole, B. 2010. Les nmatodes des plantes: Un guide pratique des techniques
de terrain et de laboratoire. Secrtariat SP-IPM, Institut International dAgriculture Tropicale (IITA), Cotonou,
Benin.
Une version PDF du prsent document est aussi disponible sur les sites internet de CIMMYT, IITA et SP-IPM.
iii
Sommaire
Prface
Introduction
Biologie de base des nmatodes phtyoparasites
Apparence et structure
Cycle biologique
Les types nmatode

Les endoparasites migrateurs
Les endoparasites sdentaires

Les ectoparasites
3
3
3
7
8
9
Symptmes dattaques de nmatodes
11
Echantillonnage
25
Extraction des nmatodes
31
Symptmes sur les parties ariennes

Symptmes causs par les nmatodes des parties ariennes

Symptmes causs par les nmatodes des racines
Symptmes sur parties souterraines

Galles

Galles versus nodosits bactriennes

Raccourcissement du systme racinaire

Lsions sur racines et tubercules

Pourriture des racines et tubercules

Crevasses et craquelures

Kystes ou racines perles
Outils dchantillonnage
Nombre dchantillons
Schmas dchantillonnage
Priode dchantillonage
Collecte des chantillons de sol
Collecte des chantillons de racines
Collecte dchantillons de parties ariennes
Soins porter aux chantillons
Choix de la mthode dextraction
Prparation des chantillons
Etiquetage
Extraction par la mthode de Baermann
Mthode par broyage des racines
Mthode par tamisage
Mthode par incubation
11
11
11
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14
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19
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28
28
31
32
32
34
40
42
48
Les nmatodes des plantes

iv
Observation directe des tissus vgtaux
51
Manipulation, fixation et coloration des nmatodes
53
Estimation de la densit de nmatodes
61
Analyse des dgts
63
Rfrences et lectures conseilles
65
Annexe 1. Exemples de genres et despces de

nmatodes parasites dimportance agricole mondiale
67
Annexe 2. Identification des principaux nmatodes
72
Annexe 3.Tables dindexation pour la mesure des

dgts dus aux nmatodes
75
Manipulation des nmatodes

La pche aux nmatodes

Envoi des nmatodes pour identification

Services didentification des nmatodes
Comment tuer les nmatodes
Fixation des nmatodes
Tuer et fixer la fois
Prservation des nmatodes sdentaires dans les racines
ou tubercules
Coloration

Masses doeufs de Meloidogyne
Comptage des nmatodes
Indexation des symptmes sur les plantes
Nmatode galles (Meloidogyne spp.) sur manioc

Nmatodes galles sur carottes
Nmatodes galles sur laitues
Index de lsions sur racines de bananiers
Table dindexation pour les nmatodes galles
Table dindexation pour les nmatodes kystes sur le bl
53
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59

60
60
61
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79
81
82
Prface
Ce guide se veut une rfrence simple et facile suivre afin didentifier les problmes dus aux
nmatodes parasites des plantes. Il fournit des instructions claires, largement illustres, sur les
procdures de collecte, et dextraction des nmatodes, aussi bien que sur leurs identifications et
le diagnostic ultrieur. Ce manuel sadresse en priorit aux techniciens et ingnieurs de terrains
et de laboratoires, tous les professionnels intresss par les productions agricoles et la protection
des plantes, particulirement tous ceux qui, dans certaines parties du monde, nont quun accs
limit aux aides techniques et aux laboratoires bien quips. Il a t crit en rponse aux frquentes
demandes de collgues pour un guide pratique daide au diagnostic en nmatologie. Ce guide devrait,
esprons le, simplifier quelques aspects de la nmatologie et aider dissiper quelques mystres lis
ces ravageurs des cultures.
On entend frquemment que les nmatodes ne sont reconnus comme un problme en protection
des plantes que lorsque quun nmatologiste est prsent, et que, sans la prsence de ce nmatologiste,
il ny aurait sans doute pas de problme. Paradoxalement les symptmes non spcifiques lis aux
attaques de nmatodes sont souvent attribus diverses causes qui semblent plus ou moins videntes.
La ralit est quun grand nombre de contraintes se combinent sur une mme culture, et il est
ncessaire de quantifier toutes ces principales contraintes, sans oublier les nmatodes. Toujours
garder lesprit une ventuelle implication des nmatodes, en relation avec les autres maladies et
ravageurs, est un vritable defi. Un defi qui devrait bnficier grandement dune meilleure valuation
quantitative du problme li aux nmatodes travers des procdures amliores au laboratoire et lors
des essais aux champs.
Les nmatodes parasites des plantes sont toujours prsents et susceptibles dinterfrer avec la
croissance des plantes et la production de la culture. Les nmatodes reprsentent des contraintes
significatives en agriculture de subsistance et peuvent tre difficiles contrler. La dtermination
de limportance dune espce particulire de nmatode, dune communaut de nmatodes ou de la
combinaison des nmatodes avec un autre problme nest jamais une tche facile et lest encore moins
en conditions tropicales. Des espces jusqualors non connues pour leur pathognicit aux cultures
sont dcouvertes continuellement, particulirement lors dadaptations de nouvelles pratiques ou lors
dintroduction de nouvelles cultures. La mise en oeuvre ou lamlioration de techniques de diagnostic
ou danalyses en nmatologie peut conduire lidentification de nmatodes comme responsables dun
problme prsent depuis de nombreuses annes, mais qui, par manque dexpertise locale, fut mal
diagnostiqu..
Beaucoup reste apprendre propos des nmatodes et des dommages quils occasionnent aux
cultures. Il y a par exemple un manque vident de donnes fiables sur la relation entre densit de
nmatodes et perte de rcolte pour de nombreuses cultures et pour beaucoup despces de nmatodes.
Dans beaucoup de pays en dveloppement, ces donnes de base nexistent mme pas. Il est cependant
important que des efforts, aussi minimes soient-ils, soient ports lacquisition et lenregistrement
de ces donnes de base dans le futur, travers les publications manant de socits savantes et de
journaux rgionaux ou internationaux.

vi
Nous esprons que ce guide contribuera une meilleure protection des vgtaux,
particulirement l o lexpertise en nmatologie est encore faible comme dans les pays en
dveloppement. Ltape initiale vers ce contrle, passe par la reconnaissance des nmatodes
travers une collection en relation avec les symptmes en collaboration avec un expert
capable didentifier les espces en cause. Ce guide se veut tre le support de cette premire
tape.
Danny Coyne IITA Nematologist, Tanzania.

Julie Nicol CIMMYT Int. Nematologist, Turkey.
Biodun Claudius-Cole Nematologist, Department of Crop Protection and

Environmental Biology, University of Ibadan, Nigeria.
Introduction
Les nmatodes sont des animaux vermiformes, les plus souvent microscopiques. On les retrouve
dans pratiquement tous les milieux, la fois sous forme de parasites ou dorganismes libres. Ils sont
gnralement trs petits, mais certains peuvent atteindre plusieurs mtres de longueur. Ce guide
sintresse spcifiquement aux nmatodes parasites des plantes (ou phytoparasites), qui sont eux trs
petits, voire microscopiques, capables doccasionner des dgts significatifs aux plantes cultives et
sont extrmement rpandus (Annexe 1)
Parce quils sont difficiles ou impossibles observer au champ, et parce que leurs symptmes sont
le plus gnralement non spcifiques, les dommages que les nmatodes infligent aux cultures sont
le plus souvent attribus dautres causes plus visibles. Agriculteurs et chercheurs souvent sousestiment leurs effets. Cependant, il est globalement reconnu que les nmatodes phytoparasites
rduisent la production agricole dapproximativement 11% (Agrios, 2005), soit une perte de rcolte
de plusieurs millions de tonnes chaque anne.
Limportance des dgts causs par les nmatodes dpend dun grand nombre de facteurs, comme
leur nombre, la virulence de lespce ou de la souche, la rsistance (capacit de la plante rduire
le dveloppement de la population de nmatodes) ou la tolrance (capacit de la plante produire
en dpit de lattaque des nmatodes) de la plante hte. Dautres facteurs sont galement aggravants
comme le climat, la disponibilit en eau, le type de sol, la fertilit et la prsence dautres maladies et
ravageurs. Cependant, bien que nous ayons dj quelques connaissances sur les relations nmatodesplantes et facteurs associs, beaucoup reste apprendre. Les seuils de nuisibilit des nmatodes sur
diffrentes cultures dans diverses rgions du monde sont le plus souvent inconnus et le danger li
la prsence des nmatodes demeure approximatif.
Ce nest quune fois que les nmatodes sont reconnus comme causes des dommages aux cultures,
que des mthodes de contrle peuvent tre envisages. Ces mthodes dpendent des espces
incrimines, de la culture et des systmes de culture et des pratiques locales. Si les espces sont
identifies, des pratiques culturales spcifiques peuvent tre appliques comme lutilisation de
cultures ou de varits rsistantes. Cependant des options plus gnrales ou des combinaisons
de celles-ci, comme les rotations, lapplication de pesticides, la lutte biologique et des pratiques
culturales de prophylaxie sont le plus souvent appropries.
Les objectifs de ce guide sont dassister le lecteur afin :
Dobtenir une connaissance de base en biologie des nmatodes
De reconnatre les diffrents groupes trophiques de nmatodes
Didentifier les symptmes de dgts
De collecter des chantillons en vue danalyse nmatologique
De traiter les chantillons pour analyse
De transfrer les nmatodes en vue didentification spcifique.

2
Observation dune diminution de croissance/

rduction du rendement dune culture
Etape 1: Rechercher et observer des symptmes dattaque de nmatodes
Etape 2: Collecter des chantillons de sol et de tissus vgtaux
Etape 3: Extraire les nmatodes des chantillons
Etape 4: Identifier les nmatodes
Etape 5: Estimer la densit de nmatodes
Etape 6: Analyser les dommages dus aux nmatodes
Etape 7: Prendre les dcisions concernant les mthodes de contrle
Figure 1. Les tapes dans la reconnaissance et le contrle dun problme

phytosanitaire li aux nmatodes
La figure 1 montre les diffrentes tapes dans la reconnaissance et le contrle dun

problme phytosanitaire li aux nmatodes. Ce guide donne les informations ncessaires
afin de conduire les tapes 1 3. Ltape 4 peut galement tre ralise, mais sans doute
avec laide dun spcialiste en nmatologie. Les rfrences et les lectures conseilles
(page 65) contiennent quelques publications utiles afin de conduire les recherches en
nmatologie bien au-del des tches dcrites dans ce guide.
Biologie de base des nmatodes phytoparasites

Apparence et structure
Les nmatodes phytoparasites sont le plus souvent des vers ronds en forme daiguille de taille variant
de 0,25 plus de 1 mm, certains atteignant 4 mm. Bien que gnralement de forme effile de la tte
et la queue, ils existent avec une trs grande variabilit de formes et de tailles (Fig. 2). Chez quelques
espces, les femelles perdent leur forme effile au fur et mesure de leur croissance, jusqu devenir
des femelles adultes largies, en forme de poire, de citron, de rein ou sphriques.
Comme les autres animaux, les nmatodes possdent des systmes circulatoire, respiratoire et digestif.
(Fig. 3). Les nmatodes phytoparasites diffrent des autres nmatodes qui salimentent sur des
bactries et des champignons par la prsence dune structure spcialise : le stylet (Fig. 3). Ce stylet
est utilis la fois pour injecter des enzymes dans les cellules et les tissus vgtaux des plantes et pour
en extraire le contenu, dune manire trs semblable aux aphids (pucerons) sur les plantes.
Cycle biologique
Le cycle de dveloppement des nmatodes est typiquement divis en 6 : le stade oeuf, 4 stades
juvniles et le stade adulte (Fig. 4). La dure de chacun de ces stades et du cycle biologique
complet diffre selon les espces et dpend de facteurs comme la temprature, la teneur en eau et
la plante hte. En conditions favorables sous les tropiques, de nombreuses espces ont des cycles
de dveloppement trs courts avec plusieurs gnrations par saison. Cela peut conduire des
dveloppements trs rapides de populations partir de seulement un (auto-fertilisation) ou deux
individus.
Par ailleurs, les nmatodes peuvent survivre des conditions dfavorables comme la saison sche ou
les hivers froids. Certaines espces survivent mieux diffrents stades, par exemple les espces du
genre Heterodera survivent mieux sous formes doeufs lintrieur de kystes, le genre Ditylenchus au
quatrime stade juvnile et le genre Anguina au second stade juvnile
Les types nmatode

Les nmatodes phytoparasites peuvent tre spars en deux groupes, les nmatodes des parties
ariennes ceux qui salimentent sur les parties ariennes des plantes et les nmatodes des parties
racinaires ceux qui salimentent sur les racines et tubercules souterrains.
Ils peuvent galement tre regroups selon leur comportement alimentaire et leur mobilit en trois
groupes principaux:
Endoparasites migrateurs des nmatodes mobiles qui salimentent lintrieur des tissus
racinaires des plantes.
Endoparasites sdentaires des nmatodes qui, arrivs sur un site nourricier, cessent dtre
mobiles et salimentent sur ce site nourricier.
Ectoparasites des nmatodes qui salimentent la surface des tissus racinaires des plantes.

4
Pratylenchus (filiforme)[JB]
Helicotylenchus (filiforme/
spiral)[GG]
Discocriconemella (fuseau
paissi)
Nacobbus (arrondie/fuseau)[JB]
Achlysiella (fuseau paissi)[JB]
Tylenchulus (en forme de

poire)[JB]
Rotylenchulus (rniforme)[JB]
Heterodera (forme de citron)
Meloidogyne (forme de gourde

sphrique)[JB]
Scutellonema (filiforme/forme-C)[GG]
Criconematid (annel)
Hirschmanniella (filiforme/
long)[JB]
Tylenchulus
apparence
physique
lextrieur de la
racine (forme de
poire)[EvB]
Ogma : structure de surface (frang/ornement)[EvB]

Figure 2. Diverses formes de nmatodes, comme observes travers le microscope.
(Photographies de J. Bridge [JB], G. Goergen [GG] ou E. van den Berg [EvB].)

5
stylet
oesophage
ovaire
vulve
anus
intestin
Structure typique dun nmatode (daprs R. Esser).
ovaire
femelle
vulve
mle
spicule du mle avec la bursa
Mle et femelle de Scutellonema.

Figure 3. (Haut) Schma de la structure dun nmatode comme observ travers un
microscope. (Bas) Exemple de nmatodes mle et femelle (Scutellonema bradys) vu au
microscope avec indications des organes reproducteurs mle (spicules) et femelle (vulve
et ovaires). Il est noter quil nexiste pas de mles dans toutes les espces. Une bursa de
protection est observe autour des spicules des mles chez quelques espces, comme ici, mais pas
chez toutes les espces.
(Photographie de H. Meerman.)

6
3ime stade juvnile

2ime stade juvnile
(forme infestante)
er
1 stade juvnile
(dans loeuf )
4ime stade juvnile
Racine de mas infeste
Racine de mas saine
Oeuf
Femelle
adulte
Mle adulte
Masse doeufs
Masse doeufs et femelle adulte
Figure 4. Cycle biologique dun nmatode. Meloidogyne est utilis ici comme un exemple sur mas, observ travers
le microscope. Tous les stades ne sont pas la mme chelle. Le cycle biologique dun nmatode endoparasite migrateur
suit les mmes tapes, cependant les femelles demeurent filiformes et ne produisent pas de masses doeufs.
(Photographies de E. Oyekanmi.)

7
Les endoparasites migrateurs (Fig. 5)

Chez les nmatodes endoparasites migrateurs, tous les stades sont mobiles lexception de loeuf. Les
nmatodes traversent les tissus vgtaux de cellule en cellule, ou peuvent quitter les tissus vgtaux
la recherche de nouvelles sources alimentaires. Au cours de leur migration et de leur alimentation,
ces nmatodes pondent des oeufs soit lintrieur du cortex racinaire soit dans le sol environnant
les racines. Les cellules endommages scrtent des toxines qui peuvent tuer les cellules adjacentes,
conduisant la formation de petites tches ou de lsions ncrotiques. Des champignons et des
bactries, agents de pourriture secondaire des racines, sont souvent associs aux dplacements et aux
points dentre crs par les nmatodes endoparasites migrateurs.
Scutellonema bradys sur igname.

cortex racinaire
stle centrale
Hirschmanniella sur riz [JB].

Figure 5. Femelles et oeufs de nmatodes endoparasites migrateurs colors en rouge dans les
tissus racinaires.
(Photographie de J. Bridge [JB].)

8
Les endoparasites sdentaires (Fig. 6)

Les nmatodes endoparasites sdentaires sont capables denvahir les tissus vgtaux ds lclosion
du second stade juvnile stade infestant vermiforme. Ils se dplacent dans le sol la recherche de
racines dune plante hte, traversent les tissus vgtaux afin de trouver un site nourricier. Une fois le
site trouv, le juvnile sy tablit de manire permanente jusqu la fin de son cycle de dveloppement
en femelle adulte. Au fur et mesure de son dveloppement, son corps arrondi prend une forme
sphrique, de citron, de rein ou ovode. Le nmatode salimente sur un trs petit nombre de cellules,
rgules par le nmatode lui-mme laide de substances de croissance. Certaines espces (nmatodes
kystes et nmatodes galles) conduisent la formation de cellules gantes lintrieur des racines de
la plante hte.
Les mles demeurent filiformes, se nourrissant la surface des racines pour quelques jours, pendant
lesquels ils peuvent ou non fconder les femelles avant de migrer nouveau dans le sol pour y mourir.
Les femelles de nmatodes endoparasites sdentaires produisent gnralement un trs grand nombre
doeufs, qui demeurent lintrieur de leurs corps (e.g. nmatodes kystes Heterodera spp.) ou
saccumulent dans des masses doeufs (e.g. nmatodes galles Meloidogyne spp.) rattaches
leurs corps. Quelques autres espces sont sdentaires mais seulement semi-endoparasites, comme
le nmatode rniforme (Rotylenchulus spp.) et le nmatode des citrus (Tylenchulus semipenetrans),
nmatodes qui sont partiellement intgrs dans les tissus racinaires.
Nmatode kystes (Heterodera

spp.) faisant clater le cortex
racinaire du riz.
Nmatode galles (Meloidogyne

spp.) mergeant dune racine de
mas.
Nmatodes kystes adultes sur

crales (Heterodera filipjevi).
Nmatode rniforme
(Rotylenchulus spp.) avec la tte
enfonce dans le cortex racinaire
(semi-endoparasite) [JB].
Figure 6. Nmatodes endoparasites.

(Photographies de J. Bridge [JB].)
Nmatode galles (Meloidogyne

spp.) dans une racine de courge
avec une sortie extrieure des
oeufs [JB].
Nmatodes galles (Meloidogyne

spp.) dans des racines de patate
douce [JB].

9
Les ectoparasites (Fig. 7)

Les nmatodes ectoparasites salimentent de manire externe, la surface des plantes, gnralement
sur les poils absorbants ou le tissu cortical externe des racines. On les retrouve souvent en trs
grand nombre sans que cela soit un problme. Cependant, ils peuvent occasionner de srieux
dommages aux plantes souffrant de stress dorigine biotique ou abiotique (e.g. attaque fongique ou
faible disponibilit en eau). Les exemples de nmatodes ectoparasites sont : les nmatodes annels
(Criconemoides spp.), les nmatodes spirals (Helicotylenchus spp.) et le nmatode agent du bout blanc
sur le riz (Aphelenchoides besseyi).
Il est galement bien reconnu que certains nmatodes ectoparasites sont des agents importants de
transmissions de virus aux plantes (Xiphinema spp.; Longidorus spp.; Trichodorus et Paratrichodorus spp.).
Aulosphora salimentant sur une racine de

riz avec un agrandissement sur la
pntration du stylet dans le tissu racinaire.
Discocriconemella avec un agrandissement de la

tte [GG].
Tylenchorhynchus salimentant sur

une extrmit de racine [JB].
Figure 7. Nematodes ectoparasites.
(Photographies de G. Goergen [GG] et J. Bridge [JB].)
11

Le plus grand dfi lorsquil sagit de reconnatre les nmatodes comme responsables des dommages
observs sur une culture tient au fait que la plupart dentre eux ne produisent pas de symptmes
spcifiques, faciles identifier. En effet, les attaques de nmatodes sont le plus souvent non spcifiques
et facilement confondues avec des symptmes dorigine abiotique ou biotique. Par exemple, les
symptmes de chlorose peuvent tre dus une dficience en azote mais aussi la prsence de
nmatodes, de la mme manire une faible croissance peut tre cause par un manque de fertilit du
sol ou de stress hydrique mais galement par la prsence de nmatodes.
Il est fortement recommand de rechercher la prsence de nmatodes lorsque les cultures souffrent
de pertes de rcolte et montrent lun ou lautre des symptmes dcrits plus bas. Des informations
supplmentaires sur la plante, lhistorique de la parcelle et les pratiques culturales, en complment des
informations apportes par ce guide, devraient vous aider la reconnaissance des possibles nmatodes
impliqus.
Les symptmes dattaques de nmatodes sont observables sur les parties ariennes comme sur les
parties souterraines.
Symptmes sur les parties ariennes

Les symptmes sur les parties ariennes se divisent en deux catgories : ceux qui sont causs par des
nmatodes des parties ariennes qui attaquent le feuillage et ceux qui sont causs par des nmatodes
du sol attaquant les racines.
Symptmes causs par les nmatodes des parties ariennes (Fig. 8)

Ce sont souvent des symptmes spcifiques associs des nmatodes plus aiss diagnostiquer.
Ils comprennent:
Formation de galle, ou gonflement anormal des grains (e.g. Anguina) ou des feuilles (e.g.
Cynipanguina)
Des stries sur feuille, blanchissement et dcoloration des feuilles (particulirement sous
climat tempr) (e.g. Aphelenchoides)
Epaississements, crevasses et croissance dsorganise des tissus (e.g. Ditylenchus)
Ncrose interne de la tige, association avec un anneau rouge (Bursaphelenchus cocophilus)
Ncrose de linorescence
Chlorose/brunissement des feuilles (aiguilles de pins), possible mort de larbre
(Bursaphelenchus xylophilus).
Symptmes causs par les nmatodes des racines (Fig. 9)

Les nmatodes des racines sont la cause, des degrs divers, de dfauts de croissance des parties
ariennes, mais ces symptmes ne sont gnralement pas suffisants pour diagnostiquer un
problme nmatologique. La plupart de ces symptmes peuvent tre le reflet ou confondus
pour dautres problmes comme une alimentation insuffisante en eau ou une dficience de
labsorption minrale. Ils comprennent:

12
Dformation des pis dorge et de bl en

prsence du nmatode des pis
Anguina tritici [RS].
Symptme de lanneau rouge

(Bursaphelenchus cocophilus) dans
un tronc de cocotier [JB].
Plissement/entortillement des
feuilles de riz par Ditylenchus
angustus [JB].
Maladie dUfra sur riz caus par

Ditylenchus angustus [JB].
Pieds davoine svrement attaqus par le nmatode des tiges, causant

le dveloppement clairsem, le rabougrissement, la chlorose (gauche) et
lpaississement du plateau de tallage (droite) associ une infestation par
Ditylenchus dipsaci [HW].
Maladie du bout blanc du riz caus par

Aphelenchoides besseyi [JB].
Stries et dcolorations en rayures sur

feuille de bananier Ensete (Musa) caus
par Aphelenchoides sp. [PS].
Galle sur grain de bl cause par Anguina

tritici (grain cras montrant lmergence
doeufs et de juvniles) [JB].
Figure 8. Symptmes des parties ariennes causs par des nmatodes attaquant le feuillage.
(Photographies de J. Bridge [JB], R. Sikora [RS], P. Speijer [PS] et H. Wallwork [HW].)

13
Chlorose et croissance
rduite dun pied de riz
(gauche) en prsence de
Heterodera sacchari.
Chlorose en taches et dfaut de croissance

des feuilles basses de bl en prsence
Heterodera spp. [HW].
Rduction de densit et defeuillage

sur riz irrigu en prsence
Hirschmanniella spp.
Floraison/maturit retarde et croissance

rduite en tche sur des plants de pomme
de terre attaqus par le nmatode kyste
[DH].
Rduction de la taille de bananiers

plantains ( gauche) avec Pratylenchus
coffeae.
Rduction du tallage et distribution

en taches sur bl attaqu par
le nmatode agent de lsions
(Pratylenchus neglectus) [RR et RC].
Distribution en taches, nanisme et

chlorose de pieds de mas attaqus par
le nmatode galles (Meloidogyne spp.)
[AM].
Dprissement dun citrus avec
Radopholus similis.
Chute dun plant de bananier

caus par Radopholus similis.
Figure 9. Symptmes sur parties ariennes occasionns par des nmatodes attaquant les racines.
(Photographies de R. Cook [RC], D. Heinicke [DH], A. McDonald [AM], R. Rivoal [RR] et H. Wallwork [HW].)

14
Chlorose (jaunissement) ou toute autre coloration anormale du feuillage

Croissance ingale et rduite
Feuillage fin et peu fourni
Symptmes lis au stress hydrique comme fltrissement de la plante ou enroulement des feuilles
Mort de plantes prennes ou ligneuses avec peu ou pas de nouvelles feuilles
Rduction de la taille des fruits et des graines
Faiblesse des rcoltes.
Dautres symptmes peuvent suggrer une infestation par les nmatodes:

Mauvaise rponse lapplication des engrais
Une tendance ragir plus rapidement au stress hydrique que des plantes saines, des
difficults reprendre aprs un fltrissement
Peu ou pas de dveloppement du feuillage au dbut de la nouvelle saison de croissance
Problme important dadventices (fort envahissement), d une moindre comptitivit des
plantes infestes par les nmatodes
Plus grande susceptibilit aux maladies, en raison dune moindre rsistance des plantes
infestes par les nmatodes.
Symptmes sur parties souterraines

Ils sont dus aux nmatodes et sont parfois suffisamment spcifiques pour autoriser le diagnostic
dun problme nmatologique. Larrachage des plantes ou le dgagement des racines est ncessaire
pour observer les symptmes. Les symptmes comprennent:
Formation de galles
Racines raccourcies, paissies, enfles leurs extrmits
Lsions sur les racines
Ncroses sur les racines et les tubercules, pourrissement et mort des racines
Crevasses sur racines et tubercules
Prsence de kystes ou de perles sur les racines
Racines dformes
Architecture racinaire altre.
Galles
Les galles racinaires sont la plupart du temps causes par les nmatodes galles (Meloidogyne spp.),
bien que dautres nmatodes comme Nacobbus aberrans puisse aussi former des galles (Fig. 10).
Lalimentation dautres nmatodes, comme Xiphinema spp., peut galement conduire la formation
dpaississements ou de galles moins dfinies, particulirement lextrmit des racines.
Les galles varient considrablement selon lespce de Meloidogyne, la culture et le cultivar, et
parfois sont observables sur racines et sur tubercules (Fig. 11). Les apparences les plus typiques
comprennent:
Petits paississements bien individualiss en tte dpingle
paississements massifs de tissus vgtaux dforms et coalescents
Renflement des extrmits racinaires
Renflements irrguliers tout au long de la racine
Extrmits racinaires recourbes en forme dhameon
Pas de forme visible dpaississements racinaires autour du site o le nmatode est fix.

15
Galles sur racines de manioc

causes par Meloidogyne spp.
Meloidogyne graminicola sur riz lorigine de plantules

naines et galles [RP] et extrmits de racines en forme
dhameons [JB].
Dformation massive et regroupement de galles sur le systme racinaire de lgumes

attaqus par Meloidogyne spp.
Epaississement terminal sur

une racine de mas attaque
par Meloidogyne spp.
Large dformations et galles

sur racines darbre causes par
Meloidogyne spp.
Figure 10 continu sur la page suivante

16
Dformation du systme racinaire dun bananier avec de nombreuses galles (gauche) et coupe
longitudinale dune racine montrant des femelles de Meloidogyne spp. profondemment incluses
dans le tissu cortical (droite).
Chapelet de galles en perles sur racines de laitue caus par Meloidogyne spp.
Dformation, prsence de galles et galles terminales sur des racines de mas avec Meloidogyne spp.
Galles sur racines de pomme de terre

causes par Nacobbus aberrans [JB].
Figure 10. Galles sur racines et autres symptmes causs par le nmatode galles (Meloidogyne spp.)
et Nacobbus sp.
(Photographies de J. Bridge [JB] et R. Plowright [RP].)

17
Cest une ide fausse trs rpandue de considrer que les plantes de la famille des Gramines
(adventices et crales) ne sont pas affectes par les nmatodes galles. En fait ces plantes sont
galement attaques par les nmatodes galles, mais les galles sont souvent moins visibles. Cependant
de petites galles sont facilement observables (Fig. 10).
Galles sur tubercule digname (Dioscorea spp.).
Coupe transversale dun tubercule digname montrant

une ornementation crnele la surface du tubercule
ainsi que les femelles incluses dans les tissus du cortex.
Galles sur betteraves.
Galles sur pomme de terre.
Galles sur tubercules de manioc.
Galles sur carotte.
Figure 11. Galles sur les organes de rserve causes par les nmatodes galles (Meloidogyne spp.).

18
Galles versus nodosits bactriennes (Fig. 12)

Dautres gonflements de racines peuvent tre causs par des bactries fixatrices dazote (Rhizobium).
On les appelle des nodules ou nodosits et ils sont frquemment observs sur les racines des
lgumineuses. Ils se distinguent des galles par leur contenu et la manire dont ils sont rattachs
la racine. Les nodules frais contiendront un liquide laiteux de rose brun tandis que les galles
seront composes dune matire crmeuse et glatineuse, parfois solide. Les nodules sont faiblement
Nmatodes galles sur manioc et laitue (Deux images gauche) en comparaison des nodules fixateurs dazote (Images
de droite) sur soja, haricot et arachide.
Symptmes similaires aux galles causs par la

maladie de lhernie du chou.
Figure 12. Galles sur racines causes par les nmatodes en comparasion de symptmes similaires.

19
rattachs la racine et peuvent tres facilement dtachs; les galles dues aux nmatodes sont plus
difficiles enlever sans dchirer le tissu racinaire avoisinant.
Quelques maladies racinaires, telle que celle cause par le champignon des racines (Plasmodiophora
brassicae), peuvent conduire la dformation des racines dune manire similaire celle observe lors
dattaques de nmatodes galles. (Fig. 12).
Raccourcissement du systme racinaire

Lactivit des nmatodes peut aussi tre lorigine dun raccourcissement des racines, en consquence
la biomasse racinaire est grandement rduite ou montre une apparence boudine (Fig. 13).
Nanisme et galles sur racines sur

plantules de riz attaques par
Meloidogyne graminicola [RP].
Sevre dprissement racinaire sur plantule

dolivier rsultant de linfestation par un
nmatode agent de lsions (Pratylenchus
spp.).
Symptmes de racines raccourcies sur mas on maize, causs par Paratrichodorus minor [DD].
Figure 13. Raccourcissement de racines.
(Photographies de D. Dickson [DD] et R. Plowright [RP].)
Lsions sur racines et tubercules

Les racines et les tubercules peuvent montrer des surfaces de tissus morts (ncross) rsultant de
lactivit des nmatodes (Figures 14 et 15). Au fur et mesure que les nmatodes salimentent et
migrent lintrieur des tissus vgtaux, ils dtruisent des cellules et altrent les fonctions cellulaires,
causant ainsi la mort des tissus.

20
Symptmes de lsions
racinaires (Pratylenchus thornei)
sur bl.
Racines de mas infestes par Pratylenchus
(droite) compares des racines saines
(gauche).
Trs fortes lsions racinaires sur
framboisier infest par (Pratylenchus
vulnus) [JB].
Racine de bananier montrant des

lsions tendues (ncroses) en
prsence de Radopholus similis.
Figure 14. Symptmes de lsions sur racines.

Lsions internes et ncroses la surface

dune igname infeste par le nmatode de
ligname (Scutellonema bradys).
Lsions sur patate douce

causes par Paratrichodorus
(tubercule du milieu) [MM].
Lsions sur patate douce causes par

Scutellonema bradys.
Pourriture de la pomme de terre cause par

Ditylenchus dipsaci [FERA].
Lsions internes sur patate

douce causes par le nmatode
galles (Meloidogyne incognita)
[JB].
Pourriture du tissu interne de

la pomme de terre cause par
Ditylenchus destructor [FERA].
Figure 15. Ncroses et lsions sur les organes de rserve.

(Photographies de The Food and Environment Research Agency [FERA], J. Bridge [JB] et M. Marais [MM].)

21
Pourriture des racines et tubercules

Les nmatodes eux seuls peuvent conduire des pourritures de racines et de tubercules travers des
migrations importantes, entranant des ncroses et la mort de tissus vgtaux et de racines (Figures 16
et 17). Le nmatode du bananier Radopholus similis, les nmatodes agents de lsions Pratylenchus spp.,
le nmatode de ligname Scutellonema bradys, et Hirschmanniella miticausa sur le taro en sont des
exemples. Frquemment, des infestations bactriennes et fongiques se dveloppent secondairement et
contribuent au pourrissement. (Fig. 17).
Pourrissement, fissures (gauche) et sectionnement (droite) de racines de bananier en

prsence de Radopholus similis, Helicotylenchus multicinctus et Meloidogyne spp.
Ncroses et rduction de la biomasse racinaire de patate douce en

prsence de Scutellonema bradys.
Figure 16. Pourrissement de racines caus par une infestation en nmatodes.

22
Ncroses superficielles sur racines tubreuses

de manioc, causes par une infestation par
un nmatode galles (Meloidogyne spp.),
compares un tubercule sain sur la gauche.
Racine tubreuse de patate douce

infeste par un nmatode galles
(Meloidogyne spp.) [JB].
Pourrissement interne sur tubercule digname caus par une

infection fongique, probablement secondaire une attaque par le
nmatode de ligname Scutellonema bradys.
Maladie de Miti-miti sur taro

cause par Hirschmanniella
miticausa [JB].
Pourriture sche sur igname cause par le

nmatode de ligname (Scutellonema bradys).
Figure 17. Pourrissement sur tubercules suite une infestation par les nmatodes.

23
Crevasses et craquelures
Parfois les racines et les tubercules montrent une surface crevasse et craquele aprs une attaque de
nmatodes (Fig. 18). Ce symptme est souvent attribu tort un stress hydrique ou nutritionnel
durant la croissance. Des craquelures sont souvent observes sur les patates douces, causes par le
nmatode rniforme (Rotylenchulus reniformis). Le nmatode de ligname (Scutellonema bradys)
occasionne le mme symptme sur igname.
Fissures et crevasses la surface dun tubercule digname (gauche) causes

par Scutellonema bradys.
Craquelures de surface sur

tubercule de pomme de terre
causes par Scutellonema bradys.
Crevasses sur patate douce en prsence de Rotylenchulus spp.
Figure 18. Symptmes de crevasses sur tubercules.

24
Kystes ou racines perles (Fig. 19)

Les nmatodes kystes (e.g. Heterodera and Globodera spp.) sont souvent observs loeil nu sur
les racines de leur plante hte, une fois le systme racinaire dbarrass du sol adhrent. Les jeunes
femelles adultes sont visibles sous la forme de trs petites ttes dpingles blanches, donnant une
apparence perle aux racines lorsquelles sont nombreuses. Au fur et mesure de la maturation des
femelles, les kystes, qui contiennent plusieurs centaines doeufs, durcissent et se colorent en brun
ou noir.
Kyste brun et femelle blanche dHeterodera

oryzicola inclus dans les tissus dune racine
de riz [RP].
Femelles blanches
Femelles blanches dHeterodera avenae,

le nmatode kystes des crales,
chacune de la taille dune tte dpingle,
responsable de laspect perl des racines
de bl (gauche) avant maturation en
kystes bruns, remplis doeufs [HW].
Racines de pomme de terre avec

des femelles blanches de Globodera
rostochiensis attaches tout au long de
la surface des racines et leur donnant
cette apparence perle [JB].
Figure 19. Kystes ou racines perles.
(Photographies de J. Bridge [JB], R. Plowright [RP] et H. Wallwork [HW].)
25
Echantillonnage
Aprs avoir observ les symptmes dune possible infestation par les nmatodes, ltape suivante
consiste collecter des chantillons de sol et de racines des plantes infestes. Ces chantillons sont
porter au laboratoire pour analyse, afin de dterminer quels nmatodes sont prsents et quelle densit.
Les spcificits locales suivantes ont des implications sur la mthode dchantillonnage et
doivent tre prises en considration cette tape:
Distribution agrge des nmatodes en raison du systme racinaire de la plante hte et
du comportement saisonnier des nmatodes
Type de culture et historique
Surfaces plantes de diffrentes varits
Teneur en eau du sol
Compaction du sol
Type de sol
Temprature et changements saisonniers.
Outils dchantillonnage
Les outils et accessoires les plus utiles afin dchantillonner, quelques-uns sont montrs sur la figure
20, comprennent une pelle-bche, une truelle main, un tournevis, une gouge, des couteaux
(pour couper les racines), des ciseaux, des sachets en polythylne et des tiquettes. La gouge pour
le sol doit avoir une lame de 2030 cm en longueur et de 2025 mm de diamtre, cylindrique ou
semi cylindrique. La terre se dtache plus facilement des gouges semi cylindriques. Des marqueurs
permanents pour crire sur le sachet, un stylo et un carnet sont galement ncessaires pour noter les
informations.
Figure 20. Un assortiment doutils pour lchantillonnage des nmatodes.
Nombre dchantillons
Il est prfrable de collecter assez dchantillons afin dassurer une reprsentativit suffisante de la
distribution des nmatodes dans le champ. Plus grand sera le nombre de sous-chantillons (prises)
combins pour former lchantillon composite pour chaque champ, plus prcise sera lestimation.
Un quilibre entre temps et ressources disponibles est cependant ncessaire.
La procdure dchantillonnage et le nombre dchantillons collects doivent couvrir la variabilit
due aux nmatodes et leur agrgation. Pour une surface de 0.5 1 hectare, lchantillonnage

26
doit comprendre entre 10 (minimum) et 50 sous-chantillons. La combinaison de ces souschantillons conduit un chantillon composite reprsentatif de la surface de champ chantillonne.
Le rassemblement de ces sous-chantillons aide prserver les nmatodes en maintenant une
temprature et une humidit adquates.
Schmas dchantillonnage
Les nmatodes sont rarement distribus de manire rgulire dans un champ, en consquence
lchantillonnage doit seffectuer en plusieurs parties du champ. Il peut tre intressant, titre
de comparaison de collecter sparment des chantillons des les zones de bonne et de mauvaise
croissances. Maintenir une procdure dchantillonnage constante en termes de collecte et de
couverture au cours dune enqute faunistique ou dune exprimentation doit permettre des
comparaisons significatives entre champs, parcelles, traitements, etc.
Fig. 20. Examples of sampling patterns
A
a
Les schmas dchantillonnage peuvent tre alatoires ou systmatiques (Fig. 21). Lchantillonnage
alatoires ne prend pas en compte la nature agrge de la distribution des nmatodes et nest
seulement reprsentatif que pour des petites surfaces. Lchantillonnage systmatique est une voie
plus structure dans la collecte des chantillons qui prend en compte le champ dans sa globalit et la
distribution agrge des nmatodes.
B
b
Figure 21. Schmas dchantillonnage des nmatodes. (a) Echantillonnage alatoire; (bd) Echantillonnage systmatique.
Priode dchantillonnage
La priode optimale dchantillonnage varie selon les plantes cultives et est fonction des stades
de dveloppement de la plante et des objectifs de lchantillonnage (diagnostic ou prvisionnel).
Lchantillonnage prvisionnel (pas dans lobjet de ce guide) est souvent ralis tt dans la saison,
durant ou juste avant la plantation ou la fin de la culture prcdente afin de dterminer le nombre
de nmatodes prsents (densit).
Beaucoup despces de nmatodes se multiplient abondamment pendant la priode de croissance
des plantes et diminuent durant la mauvaise saison (saison sche); cest plus facile observer avec
des cultures annuelles plutt quavec des plantes prennes ou des arbres. Dune manire idale, les
chantillons devraient tre prfrentiellement collects au milieu de la priode de croissance ou la
rcolte en vue dtablir le diagnostic. Les plantes prennes peuvent tre chantillonnes pendant la
saison pluvieuse ou la priode de croissance vgtative afin didentifier le problme.
Echantillonnage
27
Collecte des chantillons de sol

Dune manire gnrale, il est recommand dviter de collecter des chantillons de sol trop sec ou
trop humide. Cependant, lorsque les cultures sont normalement cultives en conditions trs humide
(riz inond) ou trs sche (sisal), les chantillons de sol doivent tre collects dans ces conditions
particulires.
Il est prfrable de diviser les trs grandes surfaces (suprieures 1 hectare) en parcelles lmentaires
d1 hectare pour lchantillonnage. Prendre ensuite de 10 50 sous-chantillons et les rassembler
pour former un chantillon composite de 1 2 kg. Prlever le sous-chantillon au niveau de la zone
racinaire laide dune truelle, dune gouge, dune pelle ou de tout autre instrument adapte la
plante chantillonne. Prendre soin densacher, dtiqueter et de refermer hermtiquement le sachet
contenant lchantillon (Fig. 22).
Prendre soin
dchantillonner entre
les rangs.
Placer la gouge au dessus

dun large plateau rigide
(prfrablement en
plastique).
Une fois que la

gouge est pleine, la
retirer dlicatement
du sol.
Lchantillon doit
reprsenter une section
diagonale de la surface
du sol (0 cm) jusqu
2030 cm en dessous.
Avec un instrument adapt

et rigide, rcuprer tout
le contenu de la gouge
sur le plateau. Prendre
soin dliminer tout les
rsidus de sol adhrents
la gouge avant de prendre
un autre chantillon.
Figure 22. Collecte et ensachage des chantillons.
Les chantillons peuvent tre

collects avec une pelle main ou
tout autre outil si une gouge nest
pas disponible.
Placer les chantillons dans

des sachets en plastique
pais bien ferms avec un
lien. Libeller clairement
ltiquette cartonne avec
un crayon papier (pas
un stylo bille qui sefface).
Ou, encore plus simple,

marquer les informations
lextrieur du sachet
avec un pais marqueur
indlbile permanent.

28
Collecte des chantillons de racines

Les racines doivent tre collectes au mme moment et au mme emplacement que les chantillons
de sol. En gnral les racines sont places dans le mme sachet que le sol, afin daider prserver les
racines.
En fonction de plantes, un prlvement de 25 100 g de racines suffit, mais une quantit moindre
peut tre collecte lorsque les racines sont fines comme pour le riz, et une quantit plus importante
lorsque les racines sont grosses ou charnues comme pour les bananiers ou les arbres. Quand les
racines fines et grosses sont en mlange, comme pour le bananier, il est suggr de les chantillonner
sparment.
Il faut viter de prlever des chantillons sur des plantes mortes ou en tat de snescence avance,
parce que les nmatodes ont dj souvent quitt ces plantes pour dautres sources de nourriture.
Lorsque les plantes sont de petite taille, lensemble du systme racinaire peut tre considr comme
le sous-chantillon. Il faut prlever la plante entire et son systme racinaire laide dune pelle-bche
ou dune truelle ou pelle main, afin de soulever un bloc de sol contenant les racines sans les briser
et dposer ce bloc sur le sol. Aprs avoir dlicatement secou et retir la plus grande partie de la terre
adhrente, on peut alors prlever les racines avec un couteau ou des ciseaux.
Collecte dchantillons de parties ariennes

Feuille, tige, graine ou toute autre partie arienne doivent tre collectes si des symptmes
sont observs ou si lon suspecte la prsence de nmatodes. Encore une fois, il est important de
slectionner des plantes malades afin de faire une tude comparative avec des plantes saines.
Soins porter aux chantillons

Utiliser de solides sachets en plastique et les tiqueter clairement et systmatiquement. Des tiquettes
en plastiques, crites au marqueur indlbile permanent ou au crayon, peuvent tre places dans les
sachets dchantillons (Fig. 22) ou de manire alternative, le numro dchantillon et les informations
peuvent tre crites directement lextrieur du sachet en plastique avec un marqueur indlbile
permanent. Il est recommand dattacher les tiquettes en papier lextrieur des sachets avec un
lien ou une ficelle. Si vous utilisez des tiquettes en papier, il est prfrable dcrire au crayon
papier plutt quavec un stylo bille ou encre (qui seffacera ou deviendra illisible avec lhumidit).
Toujours se souvenir quune tiquette en papier se dtriore trs vite en condition humide.
Notez quand cest possible:
La plante et son cultivar
La date de plantation
Le nom de lagriculteur
Le lieu (et les coordonnes GPS quand cest possible)
Un numro de rfrence (de parcelle ou de traitement) dans le cadre dune exprimentation
Le prcdent cultural
Echantillonnage
29
Les nmatodes sont trs fragiles et prissables, et il est

important de leur apporter les soins appropris pour les
conserver dans de bonnes conditions. Les chantillons
NE DOIVENT PAS rester exposs au soleil directement
ou dans un vhicule ferm au soleil. Ils ne doivent pas
non plus attendre trop longtemps avant dtre traits au
laboratoire.
Aprs chantillonnage, les chantillons devraient tre
placs dans une glacire (un conteneur thermorsistant;
Fig. 23), ou empaquets dans des boites en carton
solide et placs au frais lombre. Sil est impossible
de procder aux analyses immdiatement, les
chantillons peuvent tre conservs dans un rfrigrateur
(approximativement 10C) jusqu 2 semaines.
Cependant, la survie des nmatodes dcrot avec le
temps et les nmatodes des rgions chaudes peuvent
souffrir du froid.
Figure 23. Glacire transportable

pour la conservation des chantillons.
31

Ltape suivante consiste extraire les nmatodes des chantillons. Cette extraction doit tre ralise
le plus vite possible aprs la collecte des chantillons pour viter leur dtrioration dans le temps.
Il existe quatre techniques de base qui sont expliques dans ce guide:
Mthode par broyage de racines ou de feuilles
Mthode par tamisage
Mthode par incubation.
Trois autres mthodes llutriation, la mthode de Fenwick et la mthode par centrifugationflottaison ncessitent des quipements spcialiss et ne sont pas dcrites dans ce guide. Les dtails
sur ces mthodes peuvent tre retrouvs dans les publications listes en rfrences et dans les lectures
conseilles. Il est galement possible dans certains cas dexaminer les nmatodes directement partir
des tissus vgtaux.
Choix de la mthode dextraction

Le choix de la mthode dextraction dpend des conditions techniques et matrielles disponibles, du
type dchantillon et des espces de nmatodes prsents. Quelques mthodes dextraction sont plus
adaptes certaines espces de nmatodes tandis que dautres sont plus gnrales. Ce guide donne
les dtails des mthodes principales, qui comprend la mthode de Baermann, la plus utile dans
les conditions les plus rudimentaires. Cette mthode donne une estimation fiable des nmatodes
prsents dans le sol, les racines, les graines et les tissus vgtaux tout en tant facilement rptable.
Le tableau 1 montre quelle mthode est mieux adapte pour diffrents types de nmatodes
(sdentaires ou migrateurs) dans des chantillons de sol, de racines ou de feuilles.
Tableau 1. Choix de la mthode dextraction en fonction des diffrents types de nmatodes et dchantillons.
Echantillon de sol
Nmatodes
sdentaires
Baermann (p. 34)
Tamisage (p. 42)
Echantillon de racine/feuille
Nmatodes
migrateurs
Nmatodes
sdentaires
X
X
Nmatodes
migrateurs
X
Broyage (p. 40)
Incubation (p. 48)

32
Si le nmatode recherch est connu tel que dans les parcelles dune exprimentation il est
possible didentifier prcisment quel matriel doit tre chantillonn et comment doivent tre
extraits les nmatodes (sol, racine, tubercule, feuille, etc.). Si vous ne le savez pas, sol et racines
doivent tre analyss afin de rechercher les nmatodes sdentaires.
Prparation des chantillons

Les sols secs doivent tre bien mlangs avant la prise des sous-chantillons pour analyse. Brisez
les mottes et liminez les pierres, les racines et autres dbris de vgtaux. Passez le sol sec travers
un tamis grosse maille dapproximativement 12 mm (Fig. 26, tape 1), rcuprez le dans un
conteneur adapt afin de le mlanger. Prlevez un sous chantillon laide dun bcher ou de tout
autre conteneur de volume connu (Fig. 26, tape 2); un volume de 100 ml de sol est couramment
utilis. De chaque chantillon composite provenant du champ, deux sous chantillons de 100 ml
devraient tre analyss afin den prendre la moyenne.
Pour les sols trs humides, comme les sols de rizires inondes, de petites parties ou agrgats de sol
doivent tre prlevs dans diffrentes zones de lchantillon composite ou la base des racines. Le
volume est alors mesur par le dplacement de leau afin dobtenir des chantillons de mme taille
(Fig. 29, tapes 1 et 2). Remplir le bcher deau un volume prcis (ex. 200 ml) et complter le
volume ncessaire avec lchantillon de sol, par exemple passer de 200 300 ml mesure 100 ml de
sol. Pratiquez alors la mthode dextraction des nmatodes par tamisage.
Les racines doivent tre spares du sol adhrent en les secouant lgrement, ou par un passage sous
leau du robinet ou aprs trempage. Schez les racines avec un papier absorbant puis dcoupez les et
procdez selon la mthode dextraction choisie.
Etiquetage
Il est important dtre clair, prcis et constant lors de ltiquetage des chantillons (Fig. 24). Les
diffrents conteneurs doivent tre marqus laide de marqueurs indlbiles permanents. Utilisez
des tiquettes qui puissent suivrent lchantillon tout au long des tapes de lextraction. Assurez
vous que tous les chantillons soient correctement tiquets tout moment.

33
Etiquetage des chantillons avec

tiquettes de papier et crayon.
Etiquetage des chantillons avec un

marqueur indlbile permanent.
Etiquetage dune extraction type Baermann avec une tiquette plastique de suivi et une
numrotation permanente sur le tamis.
Etiquetage dun rcipent avec une

numrotation permanente (marqueur
ou crayon gras).
Crayon gras.
Figure 24. Matriels et exemples dtiquetage.

34

Cette mthode (ou ses adaptations) est souvent appele mthode modie de Baermann, mthode
des assiettes, ou mthode des plateaux de Whitehead.
Avantages:
Un quipement spcialis nest pas ncessaire
Une mthode facile adapter en fonction des circonstances et des matriels
Une mthode qui extrait un grand nombre de nmatodes mobiles
Une technique simple.
Inconvnients:
Les nmatodes de grande taille, lents et peu mobiles ne sont pas aussi bien extraits
Les extractions sont parfois sales (particulirement lorsque la teneur en argile du sol est
leve) et par consquent difficiles compter
La proportion de nmatodes extraits peut varier avec la temprature, occasionnant des
variations supplmentaires entre chantillons extraits des priodes diffrentes
Lextraction maximale prend 34 jours.
Equipement

Un tamis (ou passoire de mnage) maille grossire (Fig. 25)

Un plateau/assiette/soucoupe de taille lgrement suprieure au tamis
Du tissu de papier
Des bchers ou autres conteneurs pour prparer les chantillons
Une pissette deau
Un marqueur indlbile
Des couteaux, des ciseaux
Une balance
Un espace de travail large et dgag.
La plupart de ces matriels peuvent tre achets directement ou fabriqus facilement partir de
matriels dj existants (Fig. 25). Les entonnoirs seront supports par une tagre ou un portoir
avec leur base un tube en caoutchouc ou plastique ferm par une pince (Fig. 25, haut) ou une
toile moustiquaire attache une section de tuyau de plomberie en PVC de ~10 cm ~15 cm de
diamtre peut tre utilise pour fabriquer les tamis (Fig. 25, milieu). Il est trs important que la
base du tamis soit lgrement surleve (~2 mm) par rapport au fond de lassiette/plateau/soucoupe
utilise, grce par exemple trois ou quatre petits pieds colls la base des tamis (Fig. 25, bas). Si
cela nest pas fait, les nmatodes ne peuvent pas migrer facilement dans leau.
Mthode
Il est trs important de sassurer dun bon et permanent tiquetage de tous les rcipients utiliss
pour chaque chantillon car il est trs facile de faire des erreurs. Les extractions de sol et de racines
doivent tre tiquetes sparment.

35
Exemple de la mthode dextraction sur entonnoirs avec les tubes

en caoutchouc ferms la pince et tiquets la base.
Exemples de diffrents types de tamis et de soucoupes. Le modle gauche est constitu dun tamis
fait main partir de toile de moustiquaire attache une section de tuyau dvacuation en PVC.
Il est trs important de surlever lgrement le tamis.
Tamis fait main partir de toile moustiquaire et de tuyau

dvacuation en PVC, surlev sur cales afin de faciliter la
migration des nmatodes dans leau.
Figure 25. Les diffrentes faons dextraire les nmatodes dun chantillon.

36
Pour les chantillons de sol:

Enlevez les racines de lchantillon et placez les dans un plateau diffrent. Etiquetez.
A laide dun tamis grosse maille, enlevez les cailloux et dbris divers et brisez les mottes de terre (Fig. 26,
tape 1).
Dans un rcipient en plastique (bassine, seau) mlangez lchantillon de sol.
Prlevez un volume de sol (e.g. 100 ml) (Fig. 26, tape 2).
Placez un filtre en papier, (nappe en papier, mouchoir en papier) sur le tamis plac sur le plateau/soucoupe en
plastique en sassurant que la base du tamis est entirement recouverte par le filtre (Fig. 26, tape 3). Etiquetez.
Placez le volume de sol sur le papier-filtre et le tamis. Il est important que le sol ne dborde pas le papier filtre
ces dbordements entranent le salissement des solutions dextraction (Fig. 26, tape 4).
Rajoutez de leau aux plateaux/soucoupes dextraction (Fig. 26, tape 5). Prendre soin de verser dlicatement
leau dans les soucoupes et non sur le papier-filtre ou le sol (entre le bord de la soucoupe et le tamis). Ajoutez
la quantit deau ncessaire pour humidifier mais non couvrir lchantillon de sol ou de tissus vgtaux et pour
viter le desschement. Les chantillons de sol ncessitent plus deau que les chantillons de racines. Si ncessaire
vous pouvez toujours rajouter de leau plus tard.
Laissez (de prfrence lobscurit) au calme pendant une priode dfinie (48 heures si possible) (Fig. 26,
tape 6) en rajoutant de leau si ncessaire. Les nmatodes du sol ou des tissus vgtaux traverseront le filtre de
papier pour se retrouver dans leau au fond du plateau/soucoupe.
Aprs la priode dextraction, rcuprez lexcs deau provenant du tamis et du sol dans la solution dextraction
(Fig. 26, tape 7).
Retirez le tamis et jetez le sol et les tissus vgtaux.
Versez leau de la soucoupe dans un bcher tiquet (ou une tasse), en utilisant une pissette pour rinser la
soucoupe. (Fig. 26, tapes 8 et 9). Laissez les solutions dcanter (Fig. 26, tape 10).
Afin de compter les nmatodes dans la solution dextraction, rduisez le volume en versant dlicatement ou en
siphonnant lexcs deau (attention de ne pas perdre nmatodes et culots de sdimentation), ou en passant la
solution dextraction travers un tamis de trs petites mailles (e.g. 2030 m) (Fig. 26, tape 11). Rcuprez les
nmatodes de ce tamis laide dune pissette dans un bcher (ou tube) avant comptage ou afin de les conserver
pour expdition ou comptage ultrieur (Fig. 26, tapes 12 et 13).
1. Tamisage grossier de
lchantillon pour enlever les plus
gros dbris et les mottes de terre.
2. Mesure standardise
dun certain volume
dchantillon, e.g. 100 ml.
3. Etalement du filtre de cellulose

sur le tamis ou panier.
Figure 26 continue sur la page oppose

37
4. Placer le sol sur le filtre de

cellulose en sassurant que le
sol ne dborde pas en dehors
du filtre.
7. Egoutter le tamis avec

prcaution, le retirer de la
soucoupe et jeter sol et filtre.
5. Verser leau avec prcaution dans

la soucoupe, uniquement dans
lespace compris entre le tamis et la
soucoupe.
8. Verser la suspension
contenant les nmatodes dans
un bcher/tasse tiquet.
10. Laisser les chantillons reposer quelques heures ou une

nuit.
12. Lchantillon peut tre

conserv dans un tube pour
une observation ultrieure.
6. Conserver les chantillons en extraction

pendant 2 jours en vrifiant que les
chantillons soient toujours humides et ne
schent pas avec lvaporation.
9. Rincer abondemment la soucoupe

dans le bcher.
11. Rduire le volume de la suspension par

dcantationou en passant cette suspension sur un tamis
petites mailles (i.e. 28 m) afin de la concentrer dans
un bcher avant lobservation des nmatodes.
13. Si lchantillon doit tre expdi pour analyse, les

nmatodes, aprs dcantation, doivent tre transfrs
depuis le fond du large tube vers un tube plus petit
laide dune pipette.
Figure 26. Mthode dextraction par Baermann pour les chantillons de sol.

38
Pour les chantillons de racines:

Les racines peuvent parfois tre divises en diffrentes catgories, telles que les grosses racines
ligneuses et les fines racines. Il peut tre utile dextraire sparment les nmatodes de chacune de ces
catgories, car si la structure tissulaire des racines varie, les nmatodes peuvent aussi varier en termes
despces et de quantit. Lefficacit de lextraction peut galement varier, avec une extraction plus
lente partir de grosses racines.
Secouez lgrement les racines ou tubercules afin de retirer la terre ou rincez-les sous un robinet
deau puis schez-les lgrement avec un papier absorbant. Pelez les tubercules avec prcaution
laide dun couteau ou dun pluche lgume.
Dcoupez les racines (ou la peau du tubercule) de manire fine avec un couteau ou des ciseaux et
placez les dans une soucoupe tiquete (Fig. 27, tape 1). Mlangez les racines ou tissus vgtaux
avec soins.
Retirez et pesez un sous-chantillon (e.g. 5 g) de racines dcoupes laide dune balance
(Fig. 27, tape 2).
Placez le sous-chantillon pes sur le papier-filtre lintrieur du tamis tiquet (Fig. 27, tape 3).
Suivre le reste de la procdure comme pour lextraction de sol au-dessus (Fig. 26, tapes 513)
Ou bien:
Utilisez la mthode de broyage des racines pour les racines les plus dures (Fig. 28, pages 4041),
puis suivre le reste de la procdure de Baermann (Fig. 26, tapes 513)
Si vous comptez expdier les nmatodes pour identification ou comptage, il est ncessaire de les
fixer suivant le protocole en pages 5760.

39
1. Coupez les racines et/ou les pelures de tubercules et

placez-les dans un rcipent tiquet.
2. Pesez un sous chantillon (aliquote).
3. Placez ce sous chantillon sur le tamis pour extraction.
Puis suivez les tapes 513 de la figure 26.

Figure 27. Mthode dextraction par Baermann pour les chantillons de racines.

40
Mthode par broyage des racines

Cette mthode est galement connue comme mthode dextraction par broyage et incubation.
Avantage:
Un quipement spcialis nest pas ncessaire.
Inconvnient:
La dure du broyage est critique, elle doit tre suffisante pour permettre aux nmatodes
de quitter facilement les tissus vgtaux sans que ces nmatodes ne soient trop
endommags.
Equipement

Bchers
Couteaux/ciseaux
Pissette deau
Marqueur indlbile permanent
Balance
Mixeur de mnage
Mthode
Coupez les racines ou la peau des tubercules en petits morceaux (Fig. 28, tapes 1 et 2). Mlangez
les tissus vgtaux avec soins.
Pesez un sous-chantillon (Fig. 28, tape 3). Placez le dans le bol du mixeur avec juste assez deau
pour couvrir les lames.
Mixez les fines racines et les pelures de tubercules pendant deux priodes de 5 secondes et les
racines plus grosses pendant deux priodes de 10 secondes, avec une brve priode de dcantation
entre les deux (Fig. 28, tape 4).
Versez la suspension de racines broyes et deau dans un bcher, rincez le bcher de tout dbris
vgtaux laide dune pissette deau (Fig. 28, tape 5).
Versez avec prcaution la suspension de racines broyes et deau sur le papier-filtre (Fig. 28,
tape 6) et suivez la mthode dextraction de Baermann (Fig. 26, tape 5 et suivantes).
Les racines peuvent tre colores avant broyage pour amliorer la visibilit des nmatodes aprs
extraction (voir page 60).

41
1. Aprs lavage des tubercules, pelez-les finement avec un couteau ou un pluche-lgume.
2. Coupez grossirement les pelures ou les racines laide dune paire de ciseaux ou dun couteau.
3. Pesez un sous chantillon

(aliquote).
4. Broyez les racines/pelures laide dun mixer.
5. Versez la suspension dans un bcher tiquet,

rincez le bol du mixer.
Puis suivez les tapes 513 de la figure 26.
Figure 28. Mthode par broyage de racines.
6. Versez cette suspension dlicatement sur le filtre

de cellulose plac sur le tamis comme pour la
mthode dextraction de Baermann.

42
Mthode par tamisage

Avantages:
Bonne extraction de tous les types de nmatodes
Meilleure extraction des nmatodes de grande taille, lents et peu mobiles
Utilisable pour lextraction des nmatodes sur sols humides
Utilisable pour lextraction des kystes.
Inconvnients:
Les nmatodes peuvent sdimenter avec des particules de sol si le sol est mal dispers
Les nmatodes sont facilement endommags.
Ncessite un quipement lgrement plus spcialis.
Equipement
Pour les nmatodes libres du sol:
Bchers et seaux
Marqueur indlbile permanent
Tamis mtalliques de 20 cm de diamtre maille de : 2 mm, 90 m (ou 53 m) et 38 m
Equipement dextraction de Baermann
Pour lextraction des kystes (e.g. Heterodera):
En plus des matriels cits plus haut
Tamis mtalliques de 20 cm de diamtre maille de: 2 mm, 250 m, 150 m
Entonnoirs
Papier-filtre (type Kleenex)
Si lon ne sait rien de la prsence de nmatodes kystes, tout le matriel doit tre utilis.
Mthode
Pour les nmatodes mobiles du sol:
Remplir un seau avec 6 litres deau. Tracer la ligne deau lintrieur du seau avec un marqueur afin davoir un
mme volume deau entre chantillons (Fig. 29, tape 3).
Placer un sous chantillon de sol sec tamis et mlang, ou de sol humide de volume connu mesur par
dplacement deau dans un bcher (Fig. 29, tapes 1 et 2) dans le seau (Fig. 29, tape 4).
Mlanger nergiquement la main (Fig. 29, tape 5). Laisser sdimenter pour 30 secondes les particules les plus
grosses (Fig. 29, tape 6).
Verser dlicatement les 3/4 de la partie suprieure de leau du seau travers la colonne de tamis: utilisez un
tamis de 2 mm pour carter les plus gros dbris, ou simplement les deux tamis de 90 m et 38 m pour
collecter les nmatodes sil ny a pas de gros dbris (Fig. 29, tape 7). Ceci ncessite deux personnes. Sassurer
que leau ne dborde pas les tamis ni quelle ne schappe entre les tamis lorsque vous versez leau du seau, ce qui
occasionnerait une perte importante de nmatodes. Verser lentement et frapper lgrement les bords et le dessous
des tamis si ncessaire pour faciliter le passage de leau travers les tamis.
Remplir de nouveau le seau jusqu la ligne (Fig. 29, tape 8) et rpter la procdure une deux fois (Fig. 29, tapes 5 7).
Rinser le contenu des tamis de 90 et 38 m lintrieur dun bcher tiquet en vous assurant que les tamis
soient correctement nettoys (Fig. 29, tapes 911) par un lger lavage du dessous.
Lasser les bchers reposer pendant 23 heures afin de permettre aux nmatodes de sdimenter au fond. Si
ncessaire verser lexcs deau dlicatement.

43
Ligne deau
1. Mesurez un volume
prcis deau dans un
bcher, e.g. 200 ml.
2. Mesurez le volume des aggrgats

de sol provenants de chaque partie de
lchantillon par le volume deau dplac.
4. Versez le volume
dchantillon de sol
pralablement mesur dans
le seau.
7. Versez les de la suspension

travers la colonne de tamis
(de 90 et 38 m) avec le tamis
de 90 m au dessus.
9. Concentrez les suspensions sur

le tamis en rinant dlicatement
le tamis avec un jet deau,
principalement sur larrire.
3. Remplir du volume
deau dfini par la marque
lintrieur du seau.
6. Laissez le sol dcanter

pendant 30 secondes.
5. Mlangez vigoureusement.
8. Remplir de nouveau le seau et

rptez les tapes 5, 6 et 7.
10. Sassurez que les tamis soient

proprement lavs par larrire et que
tous les dbris et les nmatodes soient
bien concentrs sur la partie basse de
la surface du tamis.
Figure 29. Extraction de nmatodes du sol par la mthode de tamisage.
11. Rincez dlicatement les dbris

et les nmatodes des tamis de 90
et 38 m lintrieur dun bcher
tiquet.

44
Les suspensions obtenues peuvent alors suivre la procdure de Baermann (Fig. 26, tapes 313,
page 37).
Pour la collecte des kystes:
Laisser scher lchantillon lair avant extraction (Fig. 30, tape 1).
Remplir un seau avec 6 litres deau. Tracer la ligne deau lintrieur du seau avec un marqueur
afin davoir un mme volume deau entre chantillons (Fig. 30, tape 2)
Placer le sous-chantillon de sol mesur dans le seau (Fig. 30, tape 3).
Mlanger nergiquement le contenu du seau la main, puis laisser sdimenter pour 60 secondes.
Les kystes devraient flotter la surface (Fig. 30, tapes 4 et 5).
Verser lentement la 1/2 suprieure de leau du seau travers la colonne de tamis: 2 mm pour
carter les dbris, 250 m et 150 m pour collecter les kystes (Fig. 30, tape 6).
Rinser le contenu des tamis de 250 et 150 m lintrieur dun bcher tiquet
(Fig. 30, tapes 7 et 8).
Remplir le seau jusqu la ligne et rpter la procdure au moins une fois (tapes 48), en
rassemblant le contenu des tamis dans un mme bcher. Rpter la procdure aussi souvent que
ncessaire jusqu ce quil ny ait plus de kystes dans le seau.
Prparer et tiqueter un morceau de papier-filtre (ltre lait, caf, serviette en papier etc.) pour
un entonnoir (i.e. dans un objet conique) sur un portoir ou un bcher (Fig. 30, tape 10).
Verser le contenu du bcher travers le papier filtre sur lentonnoir (Fig. 30, tapes 11 et 12).
Laisser leau scouler.
Enlever dlicatement le papier-filtre de lentonnoir et placez-le sur un plateau afin de procder
une observation directe sous le microscope (Fig. 30, tape 13). Ouvrir lgrement le papier-filtre,
disperser le contenu sur la surface du papier avant lobservation au microscope.
Ou bien:
Laisser le papier scher sur lentonnoir, avant de le retirer et de le conserver, pour une observation
ou un comptage ultrieur. (Fig. 30, tape 14).

45
Ligne deau
1. Schez lchantillon de sol lair libre

dans une soucoupe.
2. Remplir du volume deau dfini par la

marque lintrieur du seau
3. Versez le volume dchantillon de sol

sec pralablement mesur dans le seau.
4. Mlangez vigoureusement.
5. Laissez le sol dcanter

pendant 60 secondes.
6. Versez lentement la moiti de la

suspension travers la colonne de
tamis de 2 mm, 250 et 150 m.
7. Rincez et concentrez les contenus des 2 derniers tamis, avec un rinage

arrire si ncessaire.
Figure 30 continue sur page suivante

46
8. A laide dune pissette, rcuprez les refus

des tamis de 250 and 150 m lintrieur
dun bcher.
10. Pliez en quatre un morceau

de papier filtre ou de tissu de
cellulose, puis ouvrez le en
forme de cne et placez le sur
lentonnoir dans un bcher ou
sur un portoir.
9. Remplir de nouveau le seau jusqu la

ligne deau et rptez les tapes 48.
11. Versez la solution

dextraction sur le papier-filtre.
12. Laisser leau scouler travers

le papier-filtre.
ou bien
13. Placer le ltre de papier avec les kystes et les

dbris organiques dans une soucoupe avec un peu
deau au fond avant une observation immdiate de
la prsence des kystes.
14. Laisser les filtres et extraits scher

sur lentonnoir pour une observation
ultrieure.
Figure 30. Extraction des nmatodes kystes par tamisage du sol.

47
Les kystes extraits dchantillons schs lair flotteront la surface, mais si les conditions ne
permettent pas un schage de lchantillon, les kystes peuvent tre extraits des chantillons de sol
frais. Beaucoup de kystes devraient flotter encore, mais pas les plus lourds ni les plus jeunes kystes, et
une rduction du temps de dcantation sera peut-tre ncessaire avant le passage sur tamis.
Les kystes peuvent alors tre collects sur le papier filtre directement sous la loupe binoculaire laide
dun pinceau fin. La dtermination de la quantit de kystes dans un sol est utile, mais il peut tre
aussi ncessaire de quantifier le nombre doeufs prsents, en crasant les kystes pour librer les oeufs.
(voir les rfrences et lectures complmentaires).

48
Mthode par incubation

Cette mthode est aussi appele mthode dincubation des racines en sachets plastiques ou bocaux.
Avantage:
Ne ncessite pas dquipement spcialis.
Inconvnients:
Faible rendement de lextraction
Les nmatodes sont souvent en mauvais tat en raison du manque doxygne.
Equipement
Sachets en plastiques, bocaux, flacons ou vaisselle similaire.
Mthode
Couper les tissus vgtaux finement et mlanger les (Fig. 31, tape 1).
Peser un sous-chantillon.
Placer le dans un sachet plastique ferm et tiquet ou dans tout autre contenant ferm (non
mtallique) avec une petite quantit deau (1020 ml) (Fig. 31, tape 2).
Les nmatodes closent des oeufs ou migrent en dehors des tissus vgtaux dans leau sur une
priode de 2 7 jours.
Retirer leau rgulirement (e.g. chaque jour) du conteneur, ce qui contribue la survie des
nmatodes, et rassembler ces suspensions dans un mme bcher tiquet pour chacun des
chantillons (Fig. 31, tape 3).
Remplacer leau aprs chaque prlvement, couvrir et rpter la procdure sur une priode de
27 jours (Fig. 31, tape 4).
Rduire ou concentrer la suspension dextraction pour chaque chantillon, observer directement
ou conserver pour un usage ultrieur en suivant les tapes 1113 de la figure 26.

49
1. Couper les racines et peser un sous

chantillon.
2. Placer lchantillon de racines peses dans un bocal, une fiole conique ou

un sachet en plastique pour une priode de 27 jours. Prendre soin de ne pas
fermer hermtiquement le rcipient.
3. Chaque jour, agitez le rcipient

et versez dlicatement la suspension
dans un bcher, en laissant le matriel
vgtal dans le rcipient.
4. Remplacez le volume rcupr par

de leau fraiche.
Figure 31. Mthode dextraction par incubation.
5. Concentrez le volume de la
suspension aprs dcantation ou
en passant cette suspension sur un
tamis petites mailles (i.e. 28 m)
dans un bcher avant lobservation
des nmatodes. Puis suivez la figure
26, tapes 12 et 13.
51
Observation directe des tissus vgtaux

Les tissus vgtaux peuvent tre observs directement pour sassurer de la prsence de nmatodes
sous une loupe binoculaire, par exemple avant denvoyer ce matriel pour expertise. Les femelles
adultes sdentaires, qui sont incluses dans les racines (voir figures 10 et 11) peuvent galement tre
extraites des tissus vgtaux et observes pour identification. Quand les chantillons doivent tre
envoys ailleurs pour identification spcifique, le matriel vgtal (avec des galles) doit tre envoy au
taxonomiste, fix dans une solution de lactoglycrol. Lobservation directe est galement utile pour
la mise en vidence et lobservation des nmatodes des tissus foliaires et des semences (voir Fig. 8),
et pour la collecte individus par individus de certaines espces de nmatodes afin de prparer une
collection de lames, etc.
Pour lobservation directe partir de matriel vgtal:
Laver les tissus vgtaux sous un courant modr deau ou rincer les racines dans un rcipient avec
de leau pendant quelques minutes pour liminer la terre et les dbris adhrents, en prenant soin de
ne pas dplacer les nmatodes ectoparasites se nourrissant ou fixes la surface des racines.
Coupez les tissus vgtaux en pices de ~2 cm avec une paire de ciseaux ou un couteau.
Placer les tissus vgtaux dans le fond dune bote de Ptri avec un peu deau (Fig. 32).
Pour une observation immdiate, dchirez les tissus vgtaux laide daiguilles montes et de
pinces pour librer les nmatodes des tissus. Cette mthode convient aux nmatodes endoparasites
sdentaires (Fig. 32).
Si les tissus vgtaux contiennent des nmatodes endoparasites migrateurs, il peut tre utile de
laisser reposer la bote de Ptri une nuit ou plus. Les nmatodes migreront en dehors des tissus
vgtaux dans leau.
Les nmatodes peuvent alors tre rcuprs pour identification ou fixs (et colors) et/ou expdis
pour identification ultrieure.
Dchirement des gaines foliaires.
Enlvement de lenveloppe extrieure

des grains pour librer les nmatodes.
Figure 32. Examen direct de matriel vgtal dans leau.
53

Diffrentes techniques sont adaptes la manipulation et lidentification des nmatodes. Elles sont
dcrites dans cette section.
Manipulation des nmatodes

En raison de leur taille microscopique, les nmatodes sont difficiles manipuler, particulirement
par les dbutants. Il est presque toujours ncessaire de les manipuler dans un milieu fluide, de leau
la plupart du temps. Lutilisation dune loupe binoculaire au lieu dun microscope est galement
conseille. Les nmatodes doivent tre prlevs ou pchs individuellement lorsquil sagit dtablir
des cultures pures ou de prparer des lames pour identification. En cultures pures, des ensembles
dindividus peuvent tre transfrs laide dune pipette en verre (voir Fig. 35). En rtrcissant
suffisamment louverture de la pipette de verre la flamme laide dun bec Bunsen, il est mme
possible de transfrer les nmatodes individuellement.
La pche aux nmatodes

Pour une identification prcise des nmatodes, il est souvent ncessaire de pcher individuellement
les nmatodes partir de la suspension dextraction et de les disposer sur une lame de verre (Fig. 33).
Cest difficile mais cela devient plus facile avec un peu de pratique. Les nmatodes sont translucides
et parfois difficiles observer, une loupe binoculaire avec un clairage par dessous (diascopie) est
ncessaire. (Fig. 34). Si lon pche les nmatodes partir des tissus ou de la surface racinaire, un
clairage complmentaire par dessus (piscopie) peut tre utile.
Figure 33. Pche aux nmatodes laide dune canne en bambou sous une loupe binoculaire.

54
Diffrents instruments peuvent tre utiliss pour la pche aux nmatodes, par exemple une aiguille
dentomologiste, une charde de bambou, un cil, une soie de porc ou un poil de pinceau coll sur
une aiguille monte, un cure-dent ou une plume (Fig. 35).
Verser laide dune pipette un peu de la suspension de nmatodes (ou des tissus vgtaux infests)
dans une boite de Ptri, une plaque de comptage ou de verre. Garder une suspension de faible
paisseur.
Placer sous la loupe binoculaire au plus faible grossissement.
Bouger lgrement la suspension de manire rassembler les nmatodes au centre de la plaque de
comptage.
Choisir un nmatode et le remonter doucement la surface avec linstrument de pche.
Ajuster la mise au point de la loupe de manire garder le nmatode en vue tandis que vous vous
apprtez le soulever de la suspension aqueuse.
En tenant linstrument en dessous du nmatode, vous le soulevez hors de leau dune lgre
pichenette. Le nmatode habituellement reste accroch lextrmit de linstrument.
Vous dposez la pointe de linstrument dlicatement dans une goutte deau sur une lame, une salire
en verre ou tout autre rcipient adapt avec de leau.
Pour observer les nmatodes sur une lame de microscope, il est prfrable de les dtendre
brivement la chaleur sur une plaque chauffante (pas trop chaud).
Placer des cales en fibres de verre sur les bords de la goutte avant de dposer une lamelle.
Regarder travers le microscope.
Utilisation dune loupe binoculaire avec un

clairage par le fond (diascopie).
Utilisation dun microscope avec un clairage

par le fond (diascopie).
Figure 34. Matriels optiques utiliss pour la manipulation des nmatodes.

55
Figure 35. Exemples dinstruments de pche aux nmatodes: une canne en

bambou; une pipette en verre effile la chaleur; une aiguille monte avec un cil
coll.
Envoi des nmatodes pour identification

Si, aprs chantillonnage et extraction, les nmatodes peuvent tre identifis immdiatement au
niveau du genre et dnombrs, cela donne une indication rapide sur les groupes de nmatodes
prsents et les potentialits de dommages aux cultures. Cependant, si cette expertise nest pas
possible, ou si les nmatodes ncessitent une identification au niveau de lespce, les chantillons de
nmatodes doivent tre envoys pour identification un spcialiste en taxonomie.
Avant lenvoi, les nmatodes doivent tre tus (voir section suivante) et fixs, particulirement sils
doivent sortir du pays dorigine. Les nmatodes peuvent tre envoys vivants sil y a un accord
pralable avec le laboratoire de destination ou sils sont expdis lintrieur dun mme pays.
Parfois, sol et/ou tissus vgtaux peuvent galement tre envoys, mais il y a lieu de respecter les
procdures de quarantaines des pays destinataires.
Les nmatodes doivent tre envoys dans de petits tubes (Fig. 36) et emballs avec prcaution dans
des conteneurs bien isols pour le transport jusquau laboratoire. Les tubes doivent tre lisiblement
tiquets avec un nombre ou un code. Ces nombres ou ces codes doivent tre enregistrs sur des
feuilles spares (une pour accompagner les chantillons et lautre classe) avec tous les dtails
concernant lchantillon conserver jusquau retour de lidentification.

56
Exemples de tubes et flacons pour la conservation ou lexpdition des nmatodes.
Petits tubes utilisables pour lexpdition des chantillons de nmatodes.
Utilisation dune salire en verre pour la fixation

des nmatodes par pipetage de quelques gouttes
dune solution de formaldhyde.
Transfert des nmatodes dans un microtube pour

conservation ou expdition.
Figure 36. Conservation des nmatodes avant expdition.

57
Services didentification des nmatodes

De nombreux taxonomistes dans diffrents laboratoires travers le monde sont capables didentifier
avec prcision les nmatodes. Cependant trs peu dentre eux offrent un service didentification en
routine, particulirement au niveau de lespce. Les centres qui offrent ce service sont:
Plant Disease and Diagnostic Services
CABI Bioscience UK
Bakeham Lane
Egham
Surrey TW20 9TY, UK
Tel: +44 (0)1784 470111
Biosystematics
ARC-PPRI
P/Bag X134
Pretoria 0001, Republic of South Africa
Tel: +27 (0)12 356 9830
Nematology
Department of Plant Protection
Faculty of Agriculture
University of Jordan
Amman 11942, Jordan
Tel: +962 (0)6 535 50003004
Central Science Laboratory
Sand Hutton
York
YO4 1LZ, UK
Tel: +44 (0)1904 462000
Laboratrio de Nematologia
(Meloidogyne spp., Bursaphelenchus xylophilus)
IMAR-CMA
Departamento de Zoologia
Faculdade de Cincias e Tecnologia
Universidade de Coimbra
3004-517 Coimbra, Portugal
Tel: +351 239855760
Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia
(Meloidogyne spp.)
Parque Estao Biolgica - PqEB
Av. W5 Norte
Caixa Postal 02372 CEP 70770-900,
Braslia - DF, Brasil
Tel: +55 (61) 3403660/34484930
Laboratrio de Nematologia da ESALQ
Setor de Zoologia
Av. Pdua Dias, 11
Caixa Postal 9
13418-900 Piracicaba - SP, Brasil
Tel: +55 (19) 34294338/34294269
Avant denvoyer des chantillons pour identification, il est indispensable de prendre contact avec ces
centres et de voir avec eux dans quelle mesure ils sont disposs traiter vos chantillons et quelle est la
meilleure faon de les fixer et de les transporter.
Sur demande, des conseils gnraux et pratiques peuvent tre prodigus par les diffrents laboratoires
de nmatologie travers le monde. Des informations peuvent galement tre recherches auprs des
socits de nmatologie, listes en fin douvrage.
Comment tuer les nmatodes

Il est important de tuer les nmatodes rapidement, car chaque espce possde une forme cadavrique
(habitus) particulire qui aide lidentification quand les nmatodes sont tus correctement.
Une chaleur modre (5565C) est la meilleure faon de tuer les nmatodes sans les vider de
leur contenu. Si la temprature est trop leve, lintrieur du corps est cuit et dtruit et rend
lidentification difficile. Les nmatodes peuvent tre soit tus et fixs successivement ou tus et fixs
en une procdure unique.

58
Une mthode simple et efficace pour tuer les nmatodes consiste ajouter un volume gal deau
bouillante la suspension de nmatodes. Si la totalit du contenu doit tre expdie, il peut tre
intressant de rduire le volume de faon ne remplir que la moiti du tube. Il peut tre galement
plus facile de tuer et de fixer les nmatodes dans un tube plus grand avant den rduire le volume
pour un tube plus petit (Fig. 36), ou de prlever les nmatodes au fond du tube (Fig. 26, tape 13)
avec une pipette afin de les transfrer dans les tubes pour le transport.
Les nmatodes peuvent galement tre tus en plongeant le tube avec la suspension de nmatodes
dans une eau proche de lbullition pour 1 2 minutes, mais cela peut prendre du temps pour un
grand nombre dchantillons. Cela peut tre aussi compliqu mettre en oeuvre, notamment pour
sassurer que le tube dchantillon ne se renverse pas et que les nmatodes ne soient pas perdus.
Fixation des nmatodes

La plus simple mthode pour la fixation des nmatodes est lajout de quelques gouttes de
formaldhyde dans des chantillons de nmatodes frachement tus la chaleur. Deux trois gouttes
dans un tube de 7ml de suspension de nmatodes sont suffisantes (Fig. 37); des chantillons plus
importants en ncessiteront plus. Cest une mthode rapide et facile pour prserver temporairement
de la dtrioration des chantillons durant le transport et la conservation avant identification,
cependant cette mthode ne permet pas une conservation de bonne qualit sur le long terme, avec
des difficults didentification, particulirement si celle-ci nest pas immdiate.
Prendre soin de suivre toutes les consignes de scurit avec le formaldhyde qui est un produit
dangereux pour la sant.
Pipetage de la solution de formaldhyde dans une suspension

de nmatodes dans un tube de 7 ml afin de fixer lchantillon.
Coloration des tissus vgtaux dans une solution de

lactoglycrol-fuchsine acide sur une plaque chauffante.
Figure 37. Fixation et coloration des nmatodes.

59
Tuer et fixer la fois

Chauffer la solution de fixation jusqu bullition dans un tube essai ou dans un bcher immerg
dans de leau bouillante.
Verser un volume gal de la solution de fixation la suspension de nmatodes (i.e. 2 ml solution de
fixation pour 2 ml de suspension = 4 ml).
Ou:
Rassembler les nmatodes dans une salire en verre dans une goutte deau et ajouter 23 ml de
solution de fixation avec une pipette
Les solutions de fixation les plus utilises sont:

TAF
Triethanolamine
2 ml
Formaline (formaldhyde 40%)
7 ml
Eau distille
91 ml
La solution de fixation reste stable pour une trs longue priode et les nmatodes gardent une
apparence proche de leur vivant car ils ne se dsschent pas.
FA 4:1
10 ml
Acide Actic glacial (acide propionique) 1 ml
Eau distille
89 ml
Dans le FA 4:1 les nmatodes conservent leur structure interne bien quils puissent se dcolorer avec
le temps.
Formaline Glycerol
Glycrol
Eau distille
10 ml
1 ml
89 ml
Cette solution a aussi lavantage de prserver les nmatodes du desschement mme si les tubes ne
sont pas correctement ferms. Encore une fois, prendre des prcautions pendant lutilisation de ces
solutions qui sont dangereuses pour la sant.
Prservation des nmatodes sdentaires dans les racines ou

tubercules
Les femelles de nmatodes sdentaires sont ncessaires lidentification des espces. Il est donc
important de conserver et de bien fixer les tissus vgtaux contenant ces nmatodes envoyer pour
lidentification. Un petit sous-chantillon de tissu vgtal infest, plac dans un rcipient contenant
du lactophenol ou du lactoglycrol peut tre suffisant. Une coloration avant la fixation peut
galement aider lidentification.

60
Le lactophnol peut tre achet directement, ou fabriqu en mlangeant volume gal, glycrol, acide
lactic et eau distille (lactoglycrol) et en rajoutant une petite quantit (1%) de phnol. Le phnol est
trs toxique, il est donc conseill dutiliser prfrentiellement le lactoglycrol, bien que ce dernier ne
prserve pas les chantillons pour aussi longtemps.
Coloration
Lobservation des nmatodes lintrieur des tissus vgtaux peut tre facilite par des colorations
appropries, qui colorent les nmatodes tandis que les tissus restent relativement incolores (e.g.
voir Fig. 5). Les racines paisses et charnues doivent tre minces finement avant coloration pour
permettre une transmission suffisante de la lumire aprs blanchiment.
Colorez dans le lactoglycerol + 0.1% bleu coton ou 0.050.1% fuchsine acide, puis dcolorez dans
un bcher contenant une solution volume gal de glycrol et deau distille + quelques gouttes
dacide lactique. La dcoloration est plus efficace quand elle seffectue sur plusieurs jours.
Lavez dlicatement le matriel vgtal de tout reste de sol ou dbris et schez-le dans un
papier absorbant.
Coupez ou tranchez les plus grosses racines ou tubercules en petits morceaux.
Placez les dans une pice de tissu mousseline, attachez les coins avec un lien de coton et
tiquetez clairement chaque sachet de mousseline.
Portez la solution de coloration bullition dans un bcher sur une plaque chauffante.
Placez les sachets de mousseline dans la solution de coloration bouillante pour
approximativement
3 minutes, en fonction de lpaisseur des racines. Utilisez un bcher profond moiti rempli
de la solution de coloration car il risque de dborder quand les tissus vgtaux seront ajouts
(Fig. 37).
Enlevez les sachets de mousseline et rincez sous leau du robinet.
Placez les sachets de mousseline dans la solution de blanchiment et laissez une nuit ou plus.
Observez sous le microscope. Placez les racines cte cte sur une lame de microscope
et crasez les dlicatement laide dune autre lame pose par dessus afin dobserver les
nmatodes colors. Les nmatodes seront colors en rouge avec la fuchsine acide ou en bleu
avec le bleu coton.
Masses doeufs de Meloidogyne

Le colorant Phloxine B colore la matrice glatineuse qui entoure les masses doeufs de Meloidogyne. En
augmentant la visibilit de ces masses doeufs, cette coloration permet un comptage plus rapide des
masses doeufs/femelles adultes prsentes. Les oeufs demeurent viables aprs coloration. La solution est
fabrique en ajoutant 15 mg (une trs petite quantit) de Phloxine B 1 litre deau.
Placez les racines laves dans un plateau ou une soucoupe (blanche de prfrence) contenant la
solution de Phloxine B et laissez agir de 15 20 minutes. Comptez les masses doeufs colors en
rouge.
61
Estimation de la densit de nmatodes

Une fois que les nmatodes ont t extraits du sol ou des tissus vgtaux, ils doivent tre identifis et
dnombrs. Cest ce qui rend possible leur association ou leur potentialit causer des dommages.
Ce guide nest pas un guide didentification des nmatodes parasites des plantes; pour cela voir les
lectures conseilles en pages 65. (Une trs basique description des nmatodes parasites des plantes
les plus communs est donne en Annexe 2). Lestimation de la densit en nmatodes ne doit tre
envisage que les nmatodes sont correctement identifis. Si cette capacit et ce savoir-faire ne sont
pas disponibles, il est conseill denvoyer les chantillons un expert (voir page 57).
Comptage des nmatodes

Les nmatodes extraits peuvent tre observs et dnombrs laide dune loupe binoculaire ou
dun microscope (Fig. 34); laccs aux deux serait idal. Une bonne qualit dclairage par le fond
(diascopie) est essentielle. Un grossissement de 40x est recommand (i.e. un objectif 4x combin
un oculaire 10x), mais un microscope peut galement tre utilis (i.e. avec un objectif 10x), ce qui
peut savrer utile lorsque les nmatodes sont en mauvais tat ou difficiles identifier. Les loupes
binoculaires permettent une meilleure manoeuvrabilit et mise au point, particulirement lorsque les
chantillons sont sales. Les nmatodes qui ne peuvent pas tre identifis dans la plaque de comptage,
doivent tre pchs la main (Fig. 33) et monts sur une lame de verre pour une identification un
plus fort grossissement sous le microscope.
Diffrentes formes de plaques de comptage existent, mais simplement il est ncessaire de disposer
dun fond de bote en plastique transparente au fond de laquelle est grave une grille (Fig. 38). Cela
peut tre facilement prpar en gravant dlicatement le dessous dune petite bote de Ptri. Une petite
plaque rectangulaire ouverte dapproximativement 5 ml de contenance est toujours utile; cela permet
galement de dplacer les nmatodes ou les dbris dans la plaque et de pcher les nmatodes pour une
identification un plus fort grossissement (Fig. 33). Des parois internes en lgre pente peuvent aider
minimiser la distorsion optique cause par le mnisque, tandis quun lger relief de la grille peut
rduire les mouvements de nmatodes entre les lignes.
Les chantillons qui ont dj t concentrs 5 ml peuvent tre compts dans leur totalit, mais
si la densit en nmatodes est leve ou si lchantillon est sale, une proportion de lchantillon
(un aliquote) peut tre compte aprs dilution avec de leau. Cependant, des prcautions doivent
tre prises afin de sassurer de la reprsentativit de laliquote par rapport lchantillon total en
mlangeant bien lchantillon avant la prise de laliquote.

62
Extraire les nmatodes dun poids connu de tissus

vgtaux ou dun volume de sol en utilisant lune des
mthodes dcrites prcdemment.
Concentrer la suspension dextraction un volume
prcis laide dune prouvette ou dun tube gradu
(e.g. 10 ml).
Secouer et mlanger la suspension juste avant de prlever
les aliquotes.
Quelques plaques de comptage.
Utiliser une pipette gros diamtre, pour viter quelle ne

se bouche avec des dbris. Lextrmit des pipettes peut
tre coupe si elle est trop troite.
Dposer laliquote dlicatement dans la plaque de
comptage en vitant les projections.
Sil y a peu de nmatodes, comptez les tous dans le
volume total de la suspension.
Si la densit de nmatodes est leve, comptez les
nmatodes partir dun aliquote (e.g. 1 ou 2 ml). La
dilution de la suspension peut savrer ncessaire pour
faciliter le comptage, par exemple en doublant le volume.
Quelques pipettes .
Comptez tous les nmatodes dans la plaque de comptage

de manire systmatique en suivant la grille sur la plaque.
Parfois les nmatodes peuvent flotter la surface, mais
lajout de quelques gouttes de savon liquide peut rsoudre
le problme.
Utilisez un compteur main (encore mieux, un
compteur main multiple; Fig. 38) afin de compter les
diffrentes espces de nmatodes, ou utilisez le systme
Romain de numrotation crite, si les compteurs ne sont
pas disponibles.
Reversez laliquote dans la suspension aprs comptage.
Rptez le comptage sur 2 3 aliquotes par chantillon et
puis calculez la moyenne par chantillon.
Compteurs main simple et multiple.

Figure 38. Instruments de comptage.
Le nombre moyen de nmatodes, calcul partir des

aliquotes, doit tre multipli par le volume total de la
suspension pour avoir une estimation du nombre total de
nmatodes dans les tissus vgtaux ou le sol chantillonn
(e.g. par 100 ml de sol ou 5 g de racine).
63
Analyse des dgts

Indexation des symptmes sur les plantes
Les dgts de nmatodes peuvent tre valus au moment de lchantillonnage au champ. La
quantit de racines endommages peut tre estime visuellement (en pourcentage) en utilisant une
procdure dindexation (Annexe 3). Dutiles estimations de dgts peuvent tre ralises pour les
nmatodes galles en particulier, mais aussi pour dautres nmatodes. Lestimation des dommages
est trs souvent bien relie aux pertes de rcoltes.
Lindexation des dgts lis aux nmatodes donne une premire indication des dommages.
Quand les quipements de base et lexpertise ne sont pas disponibles, ce peut tre le seul moyen
destimation. Cette indexation des dgts peut galement tre utile lorsquil sagit didentifier des
rsistances ou des tolrances aux nmatodes dans des exprimentations de criblages varitaux.
Le nombre dobservations peut aller de une deux, jusqu 25 ou plus, en fonction du type de
culture, de la surface, mais aussi selon que lagriculteur accepte de prendre un risque plus ou moins
lev dans lestimation des dommages. Une personne ou aussi peu de personnes que possible
doivent conduire cette indexation dans un souci de cohrence. Lutilisation de tables dindexations
auxquelles se rfrer est conseille pour la mme raison.
Certains jugements peuvent savrer ncessaire lorsquil sagit destimer les dommages, par exemple
les plantes qui prsentent des attaques trs fortes par les nmatodes galles peuvent avoir trs peu
de racines observer et peu de galles restantes. Lindice de galle apparat minimal, mais en fait les
dommages dus aux nmatodes sont trs levs. Il faut aussi se souvenir que la rponse aux attaques
de nmatodes, en particulier les nmatodes galles, varie selon les plantes et les varits. Diffrentes
espces de nmatodes occasionnent aussi diffrents symptmes, par exemple, une attaque par
Meloidogyne hapla rsultera souvent par un aspect perl des galles (comme sur la laitue dans
lannexe 3), tandis que Meloidogyne incognita occasionnera des galles massives et une fusion racinaire
(Annexe 3).
Les tables dindexations de lannexe 3 donnent des exemples et une base sur laquelle construire
dautres tables pour dautres nmatodes et dautres circonstances. Les tables mesurent les dgts
sur une chelle de 1 5, afin dquilibrer vitesse dindexation et prcision. Si vous disposez de plus
de temps, une indexation sur une chelle de 1 10 devrait vous donner une estimation plus prcise
des dgts.
65
Rfrences et lectures conseilles

Agrios, G.N. (2005). Plant Pathology, 5th edn. Academic Press, USA. 922 pp.
Bridge, J. and Page, S.L.J. (1980). Estimation of root-knot nematode infestation levels on roots using
a rating chart. Tropical Pest Management 26: 296298.
Brown, R.H. and Kerry, B.R. (1987). Principles and Practice of Nematode Control in Crops. Academic
Press, Sydney. 447 pp.
Evans, D., Trudgill, D.L. and Webster, J.M. (1993). Plant Parasitic Nematodes in Temperate
Agriculture. CAB International, Wallingford. 648 pp.
Luc, M., Sikora, R.A. and Bridge, J. (2005). Plant Parasitic Nematodes in Subtropical and Tropical
Agriculture, 2nd edn. CAB International, Wallingford. 871 pp.
Mai, W.F. and Mullin, P.G. (1996). Plant Parasitic Nematodes. A Pictorial Key to Genera, 5th edn.
Comstock, London and Cornell University, Ithaca. 276 pp.
Moens, M. and Perry, R. (2006). Plant Nematology. CAB International, Wallingford. 447 pp.
Perry, R., Moens, M. and Starr, J. (2010). Root-knot Nematodes. CAB International, Wallingford, UK.
488 pp.
Southey, J.F. (1986). Laboratory Methods for Work with Plant and Soil Nematodes. Ref. Book 402.
Ministry of Agriculture, Fisheries and Food. Commercial Colour Press, London. 202 pp.
Speijer, P.R. and De Waele, D. (1997). Screening of Musa Germplasm for Resistance and Tolerance to
Nematodes. INIBAP Technical Guidelines 1. International Network for the Improvement of Banana
and Plantain, Montpellier. 47 pp.
Stirling, G.R., Nicol, J. and Reay, F. (1999). Advisory Services for Nematode Pests Operational
Guidelines. Rural Industries Research and Development Corporation. RIRDC Publication No.
99/41. 111 pp.
Waller, J.M., Lenn, J.M. and Waller, S.J. (2002). Plant Pathologists Handbook, 3rd edn. CAB
International, Wallingford. 516 pp.
Wallwork, H. (2000). Cereal Root and Crown Diseases. Grains Research Development Corporation
Publications, Canberra, Australia. 58 pp.
Whitehead, A.G. (1997). Plant Nematode Control. CAB International, Wallingford. 400 pp.
Zuckerman, B.M., Mai, W.F. and Krusberg, L.R. (eds) (1990). Plant Nematology Laboratory Manual.
University of Massachusetts Agricultural Experiment Station, Massachusetts. 252 pp.
67
Annexe 1.
Exemples de genres et despces de nmatodes parasites
dimportance agricole mondiale
Nmatodes et symptmes
Principales cultures affectes Distribution gographique
Achlysiella
Ncroses des racines
Achlysiella williamsi
Canne sucre
Australasie
Crales et pturages
Tempre: mondiale
Crales de climat tempr,

principalement bl
Tempre: Chine, Europe de lest, Inde,

Afrique du nord, Ouest Asiatique
Arachide
Tropicale: Afrique de louest
Anguina
Galles sur grains et feuilles, dformation des
feuilles
A. tritici
Aphasmatylenchus
Faible dveloppement des racines, chlorose
Aphasmatylenchus straturatus
Aphelenchoides
Ncroses et dformation des feuilles et grains,
destruction du mycelium fongique
A. arachidis (nmatode de larachide
Arachide
A. besseyi (maladie du bout blanc)
Riz
A. fragariae
Framboisier
A. ritzemabosi (nmatode des feuilles)
Chrysanthme
A. composticola (nmatode des champignons) Champignons de couche

Belonolaimus
Ncroses des racines, chlorose, fltrissement
B. longicaudatus
Mas doux, lgumes, arachide,
citrus, cotonnier
Bursaphelenchus
Chlorose et mort des arbres
B. xylophilus (nmatode du pin)
B. cocophilus (nmatode de lanneau rouge)
Ncrose (anneau rouge) du pied et de
linflorescence, chute des fruits
Pin
Cocotier, palmier huile
Criconemella
Chlorose, ncroses des racines et des gousses,
fltrissement
C. onoensis
Riz
C. ornata
C. xenoplax
Arachide
Arbres fruitiers

Tropicale: rgions productrices de riz
Tempre: Europe, Amrique du nord,
Japon
Tempre: Europe, Amrique du nord et du
sud, Afrique de lest et du sud, Australie
Rgions productrices de champignons de
couche
Subtropicale: sud-est des USA
Tempre: Chine, Cor, Amrique du nord,

Taiwan, Europe (Portugal)
Amrique centrale et du sud, Carabe
Tempre et tropicale
Tropicale: USA, Afrique de louest,
Amrique du sud et centrale
Subtropicale: USA
Subtropicale: USA

68
Ditylenchus (nmatode des tiges et bulbes)

Lsions des tiges et des feuilles, dformation
des fleurs et du feuillage, pourriture des bulbes
et des tubercules
D. africanus (nmatode de larachide)
Arachide
D. angustus
Riz
D. dipsaci
Subtropicale: Afrique du sud

Tropicale: Bangladesh, Inde, Birmanie,
Vietnam
Europe, Amrique du nord et du sud, Est de
lAustralie
Tempre: Rgions productrices de
champignons de couche
D. myceliophagus
Haricots, oignons de tulipes et

autres plantes bulbes, crales
Champignons de couche
Helicotylenchus (nmatodes spirals)

Ncroses des racines
H. multicinctus
Trs rpandu sur beaucoup de

cultures
Bananiers et plantains
Tempre et tropicale: ubiquiste
Hemicriconemoides
Destruction des racines, chlorose, mort des
rameaux
H. mangiferae
Arbres fruitiers
Subtropicale: Asie du sud-est, Afrique,

Amrique centrale et du sud, Carabe
Tropicale/subtropicale: Rgions productrices

de bananes
Heterodera (nmatode kystes)

Kystes sur racines, faible croissance racinaire,
chlorose, fltrissement
H. avenae (nmatode kystes des crales)
Crales petits grains (bl, orge, Monde: Asie du centre ouest, Afrique du
avoine)
nord, Nord de lEurope, Chine, Inde,
Australie, nord-ouest des USA
H. cajani
Pois Cajan
Inde
H. ciceri
Pois chiche, lentilles
Mditerrane
H. filipjevi
Crales petits grains (bl, orge, Asie du centre ouest, Inde, Chine, Europe du
avoine)
nord
H. glycines (nmatode kystes du soja)
Soja, haricots
Subtropicale: Amrique du nord et du sud,
Japon, Chine
H. latipons
Crales petits grains (bl, orge, Asia occidental
avoine)
H. mani
Crales petits grains (bl, orge, Asia occidental
avoine)
H. oryzae (nmatode kystes du riz)
Riz
Tropicale: Inde, Bangladesh
H. sacchari (nmatode kystes de la canne Canne sucre, riz
Tropicale: Afrique de louest, Inde
sucre)
H. schachtii (nmatode kystes de la
Betteraves, choux et brassices
Tempre/subtropicale: Europe, Amrique
betterave)
du nord, Afrique de louest et du sud,
Australie
H. zeae (nmatode kystes du mas)
Mas
Tropicale: Inde
Annexe 1. Exemples de genres et despces de nmatodes

69
Hirschmanniella (nmatodes du riz et maladie

de mitimiti)
Lsions racinaires et pourriture du tubercule
(maladie de mitimiti)
H. gracilis
Riz
H. imamuri
Riz
H. oryzae
Riz
H. spinicaudata
Riz
Hoplolaimus
Ncroses des racines
H. columbus
H. pararobustus
H. seinhorsti
Coton
Bananier
Coton, lgumes
Longidorus
Galles lextrmit des racines. Transmission
de virus
L. elongatus
Framboisier, betterave sucre
Meloidogyne (nmatode galles)
Galles des racines et des tubercules, chlorose,
fltrissement
M. acronea
M. africana
M. arenaria
M. artiellia
M. chitwoodi
M. coffeicola
M. exigua
M. graminicola
M. hapla
M. incognita
M. javanica
M. oryzae
M. mayaguensis
M. naasi
Coton, sorgho
Cafier
Arachide
Bl, orge et lgumes
Tropicale
Tropicale
Tropicale: Afrique de louest, Amrique du
sud et du nord, Sud et Sud-est asiatique
Tropicale: Afrique, Amrique du sud et du
nord
Tropicale: USA, Egypte

Tropicale: Afrique
Tropicale: Afrique, Asie du sud, Amrique
du sud
Tempre: Europe, Canada
Tropicale: Afrique du sud

Tropicale: Afrique
Tropicale: mondiale
Mditerrane: Italie, France, Grce et
Espagne, Ouest Asiatique, Isral et Ouest de
la Sibrie
Pomme de terre, betterave sucre, Tempre: Amrique du nord, Mexique,
crales
Afrique du sud, Europe
Cafier
Tropicale: Amrique du sud
Cafier
Tropicale: Amrique du sud
Riz
Tropicale: Sud et Sud-est asiatique
Chrysanthme, lgumes, clou de Tempre/subtropicale: mondiale
girofle
Lgumes, coton, tabac,
Tropicale: mondiale
trs large gamme dhtes
Lgumes, coton, tabac,
Tropicale: mondiale
trs large gamme dhtes
Riz
Tropicale: Asie du sud
Lgumes, papayer, trs large
Tropicale: mondiale
gamme dhte
Bl, orge
Europe du nord, Nouvelle Zlande, Chili,
USA, Iran et ex-URSS

70
Nacobbus (faux nmatode galles)
Galles sur racines
N. aberrans
Lgumes, pomme de terre,

betterave sucre
Tempre/subtropicale: Amrique du nord,

sud et centrale, Europe (en serres)
Paralongidorus
Galles lextrmit des racines.
Transmission de virus
P. australis
Riz
Subtropicale: Australie
Paratrichodorus
Racines rabougries et noires.
P. minor
Lgumes
Tempre/subtropicale: Europe, USA
Pratylenchus (nmatode de lsions)

Ncroses des racines, tronc et tubercules
P. brachyurus
P. coffeae
P. goodeyi
P. loosi
P. neglectus
P. penetrans
P. thornei
P. zeae
Arachide, ananas, manioc

Tropicale: mondiale
Bananier, igname, cafier, citrus, Tropicale: mondiale
plantes pices, Trs large gamme
dhtes
Bananier
Subtropicale: Afrique de lest et de louest,
Iles Canaries
Thier
Subtropicale: Asie du sud et de louest
Pomme de terre, lgumes, crales Australie, Afrique du nord, USA, Canada
petits grains (bl, orge, avoine)
Arbres fruitiers et amandes,
Tempre: mondiale
lgumes, petits fruits, fleurs
Crales petits grains (bl, orge, Australie, Ouest Asiatique, Asie, Afrique du
avoine)
nord, Isral, Mexique, USA
Mas, riz de plateau
Tropicale: Asie du sud et de louest, Afrique
Radopholus
Ncroses des racines et tubercules, pourriture
et sectionnement des racines, chute des
plants
R. citri
Citrus
R. similis (nmatode du bananier)
Bananier, citrus, racines et
tubercules, cocotier, thier,
poivrier et autres pices
R. nativus
Crales et lgumes graines
Rotylenchulus (nmatode rniforme)
Faible croissance racinaire, chlorose, nanisme
R. parvus
Pois cajan, patate douce
R. reniformis
Ananas, lgumes
R. variabilis
Patate douce
Tropicale: Indonsie
Tropicale: mondiale
Tempre: Australie
Tropicale: Afrique
Tropicale: mondiale
Tropicale: Afrique
Annexe 1. Exemples de genres et despces de nmatodes

71
Rotylenchus
Mauvaise croissance
R. robustus
Lgumes, plantules darbres
Scutellonema
Pourriture sche des tubercules, mauvaise
croissance racinaire
S. bradys (nmatode de ligname)
S. cavenessi
Tempre: Europe, Amrique du nord, Inde

Principalement en Afrique et sous les
tropiques
Igname, manioc
Arachide
Tropicale: Afrique de louest, Carabe

Trichodorus
Racines rabougries et noires. Transmission de
virus
T. primitivus
T. viruliferus
Betterave sucre, pomme de terre Tempre/subtropicale: Europe, Amrique
du nord
Trophotylenchulus
Rduction de croissance racinaire
T. obscurus
Cafier
Tropicale: Afrique
Tylenchorhynchus
Raccourcissement des racines
Crales, lgumes
Tempre et tropicale
Tylenchulus
Mauvaise croissance racinaire, lent
dprissement des arbres
T. semipenetrans (nmatode des citrus)
Citrus
Subtropicale/tropicale: rgions productrices

de citrus
Xiphinema
Galles lextrmit des racines.
X. americanum
X. diversicaudatum
Arbres, vigne,
Rosiers, vigne, petits fruitiers
X. index
Vigne, fruitiers, rosiers
Tempre/subtropicale: mondiale
Tempre: Europe, Amrique du nord,
Australie, Nouvelle Zlande
Tempre: Europe, Amrique du sud,
Mditerrane, Afrique du sud, Est de
lAustralie
Adapt du tableau 13.1 de J. Bridge et T.D. Williams, Plant parasitic nematodes, pp.140162, in Waller et
al. (2002) (avec lautorisation de CABI Publishing).

72
Annexe 2.
Identification des principaux nmatodes
Ce guide nest pas un guide de taxonomie des nmatodes phytoparasites, pour cela voir
la partie consacre aux rfrences et lectures conseilles. Une description trs basique des
principaux nmatodes phytoparasites est cependant donne plus bas. La figure 39 montre les
principales diffrences entre nmatodes phytoparasites et nmatodes libres.
Meloidogyne nmatode galles
La femelle adulte est en forme de poire ou sphrode avec un cou allong tandis que les mles
restent vermiformes.
Les juvniles et les femelles sont endoparasites et occasionnent les galles.
Le stylet est fin avec des boutons basaux.
Les oeufs sont pondus dans une matrice glatineuse.
Pratylenchus nmatode agent de lsion
Nmatode vermiforme.
Femelle avec un seul ovaire.
Relativement fort, tte aplatie et queue arrondie.
Rgion labiale plate avec un stylet bien visible de 1419 m de longueur avec des boutons
basaux pais.
Cause de lsions sur les racines des plantes.
Endoparasite migrateur, tous les stades sont infectieux.
Heterodera nmatode kystes
Femelle adulte en forme de citron devenant un kyste maturit.
Femelle semi-endoparasite avec seulement la partie antrieure du corps enfonce dans les tissus
vgtaux.
Oeufs retenus lintrieur du kyste mais parfois aussi dans une masse glatineuse.
Stylet des juvniles bien visible avec des boutons basaux pais.
Helicotylenchus nmatode spiral
Rgion labiale haute, arrondie et conique.
Nmatode gnralement enroul en spirale ou en forme de C.
Femelle avec 2 ovaires et une queue incurve dorsalement.
Ce sont des nmatodes semi-endoparasites ou ectoparasites, gnralement retrouvs dans le sol.
Scutellonema
Mme description de base que Helicotylenchus, mais:
Le stylet est plus court et les boutons basaux sont plus forts.
La forme relche est droite ou en C ouvert.
Ce sont des nmatodes le plus souvent ectoparasites.
Xiphinema et Longidorus
Trs long nmatodes
Le stylet la forme dune longue aiguille avec des boutons basaux pais.
La forme relche est droite le plus souvent.
Ce sont des nmatodes ectoparasites.
Annexe 2. Identification des principaux nmatodes

73
Nmatodes parasites de plantes:
Paratrichodorus [JB]
Hemicriconemoides [JB]
Tylenchorhynchus [JB]
Xiphinema [LA-B]
Heterodera [JB]
Hemicycliophora [JB]
Plectus [JB]
Filenchus [LA-B]
Scutellonema [JB]
Hoplolaimus [JB]
Meloidogyne tte de juvnile [SM]
Meloidogyne partie antrieure de la tte [LA-B]
Xiphinema [SM]
Helicotylenchus [SM]
Longidorus partie antrieure de la tte

[LA-B]
Pratylenchus [SK]
Figure 39 continue sur page suivante

74
Nmatodes libres:
Mononchus [JB]
Discolaimus [JB]
Figure 39. Comparaison de la rgion antrieure des nmatodes parasites des plantes
et des nmatodes libres.
(Photographies de J. Bridge [JB], S. Mack [SM], L. Al-Banna [LA-B] et S. Kelly [SK].)
75
Annexe 3.
Tables dindexation pour la mesure des dgts dus aux
nmatodes
Nmatode galles (Meloidogyne spp.) sur manioc
A utiliser la fois sur racines et tubercules pour une estimation la rcolte ou sur racines en cours de vgtation.
Racines de Manioc
1. Pas de galles, racines nourricires intactes.
2. Au moins une galle observe.
3. Galles nombreuses, environ 50% des racines

affectes.
4. Galles nombreuses, la plupart des racines affectes.
5. Galles nombreuses sur toutes

les racines, ncroses, racines
nourricires fortement galles ou
dtruites.

76
Tubercules de Manioc
1. Pas de galle, tubercules et racines nourricires

sains.
2. Au moins une galle sur les racines.
3. Galles videntes sur les racines, moins de racines

nourricires, rduction de la taille des tubercules.
4. Galles nombreuses, racines ncroses, rduction de

la taille des tubercules.
5. Galles svres sur la plupart des racines, racines

nourricires absentes, peu de tubercules.
Appendix 3. Tables dindexation pour la mesure des dgts dus aux nmatodes
77
Nmatodes galles sur carottes
1. Pas de galle.
2. Peu de galles.
4. Galles assez importantes
3. Galles modrment
importantes.
5. Galles trs importantes.

78
Nmatodes galles sur laitues
1. Pas de galle.
2. Quelques galles.
4. Galles assez importantes.
3. Galles modremment
importantes.
5. Galles svres.
79
Index de lsions sur racines de bananiers

Adapt de Paul Speijer et Dirk De Waele (1997).
0%
5%
10%
25%
50%
75%
100%

80
Indexation sur Musa

Exemple de notation de cinq moitis de racines en pourcentage de racines ncroses en prsence de
nmatodes endoparasites migrateurs (Daprs Paul Speijer et Dirk De Waele, 1997).
10 cm
% racine ncrose
de chaque moiti de racine
0%
1%
2%
17%
12%

0%
5%
10% 15% 20%
% proportion de chaque moiti de racine

(5 20% = 100%)
Choisir au hasard 5 racines fonctionnelles par bananier. Chacune dau moins 10 cm de longueur.
Couper chaque racine dans le sens de la longueur et carter une des moitis. Noter lautre moiti sur
le pourcentage de cortex racinaire prsentant des ncroses. Chaque racine contribue pour 20% de
lchantillon total ce qui donne 100% pour les 5 racines. Si la moiti de la racine est ncrose alors
comptez 10%. Sil ny a pas de ncrose comptez 0% (voir la gure ci-dessus). Une fois que vous avez
index chaque racine parmi 20, additionnez les 5 pourcentages pour avoir le pourcentage total de
ncroses pour lensemble de lchantillon.
81
Table dindexation pour les nmatodes galles

Daprs John Bridge et Sam Page (1980)
0 Pas de galle sur les racines.
2 Quelques galles, bien visibles,

racines principales saines.
5 50% des racines sont affectes.

Quleques galles sur les racines principales.
Rduction du systme racinaire.
8 Toutes les racines avec des

galles, y compris la racine pivot,
peu de racines saines visibles.
1 Quelques galles,
difficiles voir.
3 Quelques grosses galles,

bien visibles, racines principales
saines.
4 La prsence de grosses galles

prdomine mais les racines
principales restent saines.
6 Galles sur les racines

principales.
7 Majorit des racines

principales avec des galles.
9 Toutes les racines

svrement galles,
gnralement la plante meure.
10 Toutes les racines svrement

galles, plus de systme racinaire,
gnralement plante morte.

82
Table dindexation pour les nmatodes kystes sur le bl

Adapt de A.D. Rovira dans Brown and Kerry (1987).
1 Pas de dommage,
racines saines.
3 Dommages
lgers.
4 Dommages
modrs.
2 Dommages
superficiels.
5 Dommages
svres.
Rseaux utiles et organisations

Afro-Asian Society of Nematologists
(http://www.ifns.org/membership/aasn.html)
Australasian Association of Nematologists
(http://nematologists.org.au)
Brazilian Nematological Society
(http://www.ciagri.usp.br/~sbn/sbn_i.htm)
Cereal Nematodo Network
Chinese Society of Plant Nematologists
(http://www.ifns.org/membership/cspn.html)
Nematology Initiative in East and Southern Africa
Egyptian Society of Agricultural Nematology
(http://www.ifns.org/membership/esan.html)
European Society of Nematologists
(http://esn.boku.ac.a)
International Federation of Nematology Societies
(http://www.ifns.org/)
Japanese Nematological Society
(http://www.ifns.org/membership/jns.html)
Nematological Society of India
(http://www.ifns.org/membership/nsi.html)
Nematological Society of Southern Africa
(http://www.ifns.org/membership/nssa.html)
Organization of Nematologists for Tropical America
(http://www.ontaweb.org)
Society for Invertebrate Pathology
(http://www.sipweb.org/)
Society of Nematologists
(http://www.nematologists.org)
West and Central African Nematology Network
Crdits:
Photographies: Toutes les photographies des auteurs ou autrement crdites.
Edition, design, mise en page et rvision: Green Ink Publishing Services Ltd, UK (www.greenink.co.uk)
Imprimeur: Pragati Oset Pvt. Ltd, India (www.pragati.com)
Les nmatodes parasites des plantes sont toujours prsents dans les parcelles des agriculteurs, mais les dommages quils
occasionnent sont souvent attribus dautres ravageurs ou maladies ou problmes lis la culture. En particulier dans
les pays en voie de dveloppement, o les ressources et les facilits dinvestigations sont rares, il est souvent difficile
didentifier et de quantifier le problme des nmatodes.
Ce guide a pour objectif daider surmonter ces limitations en fournissant une rfrence facile suivre pour identifier
les problmes dus aux nmatodes. Ce guide fournit des instructions claires, avec de nombreuses illustrations, sur les
procdures de collecte dchantillons et dextraction des nmatodes, aussi bien que des informations sur des identifications
approfondies et une aide au diagnostic. Ce manuel est destin aux techniciens, aux agriculteurs, aux agents des services
agricoles et tous ceux qui sont intresss par la production agricole et la protection des cultures, particulirement dans
ces parties du monde ou laccs une expertise et des laboratoires reste limite. Ce guide, esprons le, devrait simplifier
certains aspects de la nmatologie et faciliter la comprhension de ce problme phytosanitaire souvent mystrieux.
ISBN 978-131-348-x
Les nmatodes des plantes : Un guide pratique

2010 Nematodes Manual FRENCH

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Les nmatodes des plantes:

Un guide pratique des techniques

Les nmatodes des plantes:

Biologie de base des nmatodes phtyoparasites

Symptmes dattaques de nmatodes

Extraction des nmatodes

Symptmes sur les parties ariennes

Les nmatodes des plantes

Observation directe des tissus vgtaux

Manipulation, fixation et coloration des nmatodes

Estimation de la densit de nmatodes

Analyse des dgts

Rfrences et lectures conseilles

Annexe 1. Exemples de genres et despces de

Annexe 2. Identification des principaux nmatodes

Annexe 3.Tables dindexation pour la mesure des

Manipulation des nmatodes

Indexation des symptmes sur les plantes

Nmatode galles (Meloidogyne spp.) sur manioc

Les nmatodes des plantes

Danny Coyne IITA Nematologist, Tanzania.

Les nmatodes des plantes

Observation dune diminution de croissance/

Etape 2: Collecter des chantillons de sol et de tissus vgtaux

Etape 3: Extraire les nmatodes des chantillons

Etape 4: Identifier les nmatodes

Etape 5: Estimer la densit de nmatodes

Etape 6: Analyser les dommages dus aux nmatodes

Etape 7: Prendre les dcisions concernant les mthodes de contrle

Figure 1. Les tapes dans la reconnaissance et le contrle dun problme

La figure 1 montre les diffrentes tapes dans la reconnaissance et le contrle dun

Biologie de base des nmatodes phytoparasites

Les types nmatode

Les nmatodes des plantes

Achlysiella (fuseau paissi)[JB]

Tylenchulus (en forme de

Heterodera (forme de citron)

Meloidogyne (forme de gourde

Ogma : structure de surface (frang/ornement)[EvB]

Biologie de base des nmatodes phytoparasites

Structure typique dun nmatode (daprs R. Esser).

spicule du mle avec la bursa

Mle et femelle de Scutellonema.

Les nmatodes des plantes

3ime stade juvnile

4ime stade juvnile

Racine de mas infeste

Racine de mas saine

Biologie de base des nmatodes phytoparasites

Les endoparasites migrateurs (Fig. 5)

Scutellonema bradys sur igname.

Hirschmanniella sur riz [JB].

Les nmatodes des plantes

Les endoparasites sdentaires (Fig. 6)

Nmatode kystes (Heterodera

Nmatode galles (Meloidogyne

Nmatodes kystes adultes sur

Figure 6. Nmatodes endoparasites.

Nmatode galles (Meloidogyne

Nmatodes galles (Meloidogyne

Biologie de base des nmatodes phytoparasites

Les ectoparasites (Fig. 7)

Aulosphora salimentant sur une racine de

Discocriconemella avec un agrandissement de la