b)

Muestreo por enjuague. Aplica a superficies blandas como sellos,

lonas, mangas, o superficies duras circulares, sinuosas o irregula
res como la superficie en vlvulas, bombas, cuchillas, agujas, entre
otras. En este mtodo es necesario establecer:
La magnitud total del rea compartida de los equipos por el
residuo y el o los productos, ya que es una informacin crtica
a ser utilizada para determinar el LAAR
El solvente, en el cual sea soluble el residuo
El volumen del solvente de tal forma que entre en contacto
con toda la superficie a muestrear
La temperatura del solvente
Dispositivo de enjuague (piseta, jeringa, entre otros)
El contenedor de la muestra (tubos de ensaye, matraces, entre
otros, incluyendo el cierre), su manejo y almacenaje entre el
muestreo y su determinacin
Es importante determinar el volumen mnimo del solvente de enjua
gue que asegure el contacto con toda la superficie a muestrear.
c) Muestreo por recirculacin de solvente. Aplica a equipos mayores
donde sea posible recircular solvente -como los son tanques, tu
beras, mezcladores- con el propsito de muestrear toda la super
ficie de los equipos; por ejemplo, un sistema tanque-tubera-bom
ba-centrfuga-tubera. En este mtodo es necesario establecer:
La magnitud total del rea compartida de los equipos por el
residuo y el o los productos, ya que es una informacin crtica
a ser utilizada para determinar el LAAR
El solvente, en el cual debe ser soluble el residuo
El volumen del solvente, de tal forma que entre en contacto
con toda la superficie de los equipos (tanques, reactores,
mezcladores) y auxiliares (tubera, mangueras) a muestrear
La temperatura y tiempo de recirculacin del solvente

24

Volumen de la muestra
Los contenedores de la muestra (tubos de ensaye, matraces,
entre otros, incluyendo el cierre), su manejo y almacenaje en
tre el muestreo y su determinacin
Es importante asegurar que un volumen mnimo del solvente de
enjuague o recirculacin que asegure el contacto con toda la super
ficie a muestrear.
Otros procedimientos de muestreo sugeridos son el muestreo del
siguiente producto a fabricar o placebo fabricado.
En la tabla 1, se presentan algunas las ventajas y limitaciones de los
mtodos de muestreo descritos.
En los mtodos de muestreo por hisopo o similar es necesario esta
blecer las reas crticas a ser muestreadas y, en el caso de muestreo
por enjuague o solvente recirculado, los equipos y/o sus partes.

2.5 Sistemas de medicin del residuo

Para determinar el residuo en la muestra es necesario utilizar un sis
tema de medicin. Los sistemas pueden ser clasificados en funcin
de:
1. La naturaleza de la respuesta analtica en:
a) Sistemas fsico - qumicos. Cuando la respuesta es de tipo fsico
como lo es la absorcin de luz, emisin de luz, voltaje,
fotometra, fluorometra, o qumico como consumo de iones
. OH, consumo de un acomplejante, o alguna combinacin de
stos. Entre estos sistemas tenemos, por ejemplo, cromatografa
e lquidos -de alta resolucin (CLAR), cromatografa de gases
(CG), cromatografa en capa delgada) CCD, CCD acoplada
con densitometra, cromatografa de iones, colorimetra,
ultravioleta, infrarrojo medio, infrarrojo cercano, volumetra,
absorcin atmica, turbidimetra, carbono orgnico total
(COD, electroforesis capilar, potenciometra, conductimetra
o, gravimetra.

dpam

25

b) Sistemas biolgicos. Cuando la respuesta es de tipo biolgico.

Entre estos sistemas se encuentran la bioluminiscencia, ELlSA,
difusin en agar y cuenta microbiana.
c) Sistemas organolpticos: Cuando la respuesta es de tipo olfativo,
ocular o visual.

Tabla 1. Ventajas y limitaciones de los mtodos de muestreo

Ventajas

Limitaciones
Muestreo con hisopo o similar

Disuelve y fsicamente remueve el

residuo
Adaptable a una gran variedad de
superficies
Fcil y econmico
Permite el muestreo de un rea
definida
Aplicable a una gran variedad de
residuos (activos, agentes de limpieza, materias primas,
microorganismos, entre otros)

Invasivo
Materiales del hisopo o del pao
pueden interferir en la determina
cin analtica
El recobro del residuo en la superficie no es total
No permite evaluar la limpieza en
tuberas, vlvulas o sitios de difcil
acceso
Mtodos analticos de mayor sensi
bilidad

Muestreo por enjuague

Adaptable a tuberas y ductos en
sistemas cerrados
Fcil muestreo
No invasivo
Fcil aplicacin
Aplica a sustancias activas,
excipientes y agentes de limpieza
Permite muestrear una mayor rea
Permite el muestreo de superficies
porosas

26

En ciertos casos mayor sensibilidad

del mtodo analtico
No representativo si el residuo no se
encuentra homogneamente distribuido
Aplica a componentes o equipos
mayores

Muestreo con solvente recirculado

Aplica a sustancias activas,
excipientes y agentes de limpieza
El recobro del residuo en la superfi-

Puede ser necesario el uso de unifor

me especializado
Aplica a componentes equipos ma

cie es mejor
Mejor manejo analtico de la
muestra

yores
Mayor volumen de solvente
Mayor tiempo y costo del muestreo

Permite el muestreo de una mayor

rea superficial

Permite el muestreo de superficies

porosas
Adaptable a tuberas y ductos en

sistemas cerrados

Mtodos analticos de menor sensi

bilidad

Muestreo de producto
Considera toda la superficie del
producto fabricado
No requiere de muestreos
adicionales

Especificidad
El residuo puede no estar distribuido de manera homognea
No mide el residuo en trminos de
contenido en superficie

2) Su respuesta molecular en:

a) Sistemas selectivos: Cuando esta respuesta es especfica a la molcu

la del residuo, por ejemplo, los sistemas cromatogrficos, espectros

cpicos, electroforesis capilar, ensayo enzimtico de enlace inmu

noabsorbente (ELlSA), fotometra, entre otros. Generalmente, los

mtodos analticos asociados a este tipo de sistemas tienden a ser

especficos.

b) Sistemas no selectivos: Cuando la respuesta es genrica a la molcu

la del residuo, por ejemplo, potenciometra, volumetra, conducti

metra, gravimetra, osmolaridad, carbono orgnico total (COn

Generalmente, los mtodos analticos asociados a este tipo de siste

mas tienden a ser inespecficos.

cipam

27

2.5.7 Seleccin del sistema de medicin

La tabla 2, describe algunos de los posibles sistemas de medicin a

utilizar en funcin del residuo. Si el laboratorio farmacutico cuenta
con un mtodo analtico para su determinacin con un propsito
diferente como, mtodos analticos para el control de materia prima,
producto a granel, terminado, en estabilidad, entre otros, el sistema
de medicin de dicho mtodo puede ser utilizado, siempre y cuando
su lmite de deteccin o cuantificacin sea apropiado. Una de las ven
tajas de estos mtodos es la especificidad del residuo a los otros com
ponentes de la muestra.

Entre los sistemas de medicin novedosos se tienen la deteccin de

dispersin de luz por evaporacin, espectroscopa IR con transfor
mada de Fourier, emisin de electrones estimulados pticamente,
espectrmetro de masas porttil, microscopa de exploracin de elec
trones y electrodos selectivos de iones.
En la tabla 3 se muestra las ventajas y desventajas de los sistemas de
medicin de uso generalizado en la determinacin de residuos.
Tabla 3. Ventajas y desventajes de sistemas de medicin
Mtodo

Tabla 2. Residuo y sistemas de medicin

Residuo

Frmaco

Materia prima (excipientes, aditivos)

Agente de limpieza

Sistema de medicin

CLAR, CG, CCD, espectroscopa, COT,

ELlSA, electroforesis capilar, absorcin
atmica y fluorescencia
Volumetra, conductimetra,
organolptico, gravimetra,
electroforesis capilar, espectroscopa,
COT, CLAR, CCD
Absorcin atmica, COT,
potenciometra, organolptico,
osmolaridad, electroforesis capilar,
espectroscopa, enzimticos,
cromatografa de iones, conductividad

Sanitizantes

Absorcin atmica, COT,

organolptico, potenciometra,
osmolaridad, electroforesis capilar,
espectroscopa

Solventes

CG, organolptico, espectroscopa

Lubricantes

Gravimetra, organolptico,
espectroscopa

Biocarga

Cuenta microbiana, bioluminiscencia

Endotoxinas

Bioensayo y LAL

28

Ventaja

CLAR

LG

CCD

Sensible, especifico y de
bajo costo

Espectrofotometra

Cuantitativo

COT

Verstil, preparacin
mnima de la muestra,
determinacin en lnea
y sensible
Sensible y especfico

Desventaja

Costoso y mayor tiempo de

anlisis
Costoso, para residuos vol
tiles y mayor tiempo de
anlisis
Preparacin laboriosa de la
muestra, deteccin visual y
no cuantitativo
------Sensibilidad moderada e
inespecfico
Inespecfico y slo para resi
duos solubles en agua

Alto costo, dificultades por

desnaturalizacin de prote
nas y laborioso
Alto costo, dificultades por
Electroforesis capilar' Especfico y moderada
desnaturalizacin de prote
mente sensible
nas y laborioso
----:-----:----~--,--,----:--:--,---------:----.:....
Potenciometra
Rpido y de bajo costo
Inespcfico y baja
sensibilidad
-------------------- ------Conductividad
Rpido y de bajo costo
Inespecfico y baja
sensibilidad
No cuantitativo y subjetivo
Rpido y de bajo costo
Organolptico
ELlSA

cipam

29

2.6 Muestreo
Para fines del desarrollo del mtodo es necesario establecer si la remo
cin del residuo de la superficie ser efectuado por:
a) Hisopo o similar. Es necesario definir la extensin del rea a muestrear,

ya que habiendo fijado el LAR en unidades de peso por unidad de

rea (ejemplo: mg/cm 2), es posible establecer la cantidad espera
da del residuo a ser removido durante el procedimiento de
muestreo. Es importante asegurar que se muestrea la magnitud
de superficie establecida (9 cm 2, 25 cm 2, 50 cm 2, 100 cm 2, u otra
rea especificada), para lo cual se sugiere utilizar plantillas de un
material apropiado, por ejemplo, tefln, aluminio, plstico, con las
dimensiones especificadas (3cm x 3cm, 5cm x 5cm, 5cm x 10cm,
10cm x 1Ocm u otras dimensiones).
b) Enjuague o solvente recirculado. Es importante tener conocimiento

del rea de los equipos que comparte el proceso que genera el

residuo con todos aquellos productos que potencialmente puede
contaminar; esto permite establecer la cantidad esperada del resi
duo a ser removido durante el procedimiento de muestreo. Es apro
piado asegurar el uso de un solvente en el cual el residuo sea solu
ble, el volumen de solvente que permita entrar en contacto con
toda la superficie y un manejo que permita la remocin del resi
duo de la superficie.

La cantidad de residuo a' ser removido durante el mtodo muestreo

se ejemplifica en el anexo B para estos mtodos de muestreos.
Es conveniente sustentar que el residuo permanece estable desde el
proceso de limpieza hasta su tratamiento analtico.
Se sugiere que al trmino de esta etapa del desarrollo se elabore un
mtodo de muestreo preliminar que como mnimo contemple lo
indicado en la numeral 2.4, ya que este puede ser mantenido o
modificado al trmino de la validacin del mtodo analtico.

extraccin, evaporacin, adicin de reactivos, filtracin y lectura en

el sistema de medicin.
Durante esta parte del desarrollo, es necesario realizar entre otros
puntos, lo siguiente:
Investigar y fijar las condiciones de operacin del instrumento, si
aplica
Llevar a cabo estudios que permita describir paso a paso la deter
minacin del residuo en la muestra (extracciones, diluciones, trans
ferencias, adicin de reactivos, entre otros)
Establecer la preparacin de las soluciones de referencia y blancos,
si aplica
Para el caso de mtodos que utilicen una solucin de referencia (SR)
del residuo (mtodo de contenido o lmite de residuo), al conocer la
cantidad de residuo removido durante el muestreo y en funcin del
tratamiento analtico de la muestra es posible establecer el lmite
analtico de aceptacin de residuo (LAAR), el cual permite fijar la
concentracin del residuo en la SR, este lmite podr variar en fun
cin de los resultados del estudio del parmetro de desempeo l/efi
ciencia del recobro" en la validacin del mtodo analtico. El clculo
del LAAR se ejemplifica en el anexo e
Se recomienda que durante el desarrollo del mtodo se establezcan
los criterios de adecuabilidad de! sistema, si aplica, y se lleven a cabo
estudios de robustez siguiendo los lineamientos establecidos en otras
guas. Al finalizar el desarrollo del mtodo, es conveniente elaborar
un procedimiento preliminar que contemple:
Ttulo
Propsito
Fundamento
Materiales

2.6.7 Tratamiento analtico de la muestra

Reactivos y soluciones

Puede consistir desde una simple aforo y lectura directa en el sistema

de medicin o un tratamiento ms complejo como puede ser aforo,

Instrumentos y condiciones instrumentales

30

cipa

31

Adecuabilidad del sistema, si aplica

Preparacin de la SR, si aplica

Preparacin de la muestra

Lectura

Clculos, si aplica

Interpretacin de resultados

Bibliografa

Formatos

Al trmino de su validacin podra ser necesario modificar el mtodo

analtico.

111. Parmetros de desempeo en la

validacin del mtodo analtico
En la tabla 4 se indican los parmetros de desempeo a estudiar en
funcin de la aplicacin analtica del mtodo.

Tabla 4. Parmetros de desempeo para la validacin del

mtodo analtico
Parmetro de

Contenido de

Lmite de

Lmite a nivel

desempeo

residuo

residuo

detectable

Si

Si

Precisin del
sistema
Adecuabilidad
del sistema
Linealidad del
sistema
Especificidad
Estabilidad del
residuo

Si

Si

Si

Si

Si

No

.*

*.

Si

Si

No

Si

No

No

Eficiencia del
recobro
Precisin inter
medial
Estabilidad de
la respuesta
analtica de la

No

muestra l
Lmite de de
teccin

No

Si

Si

Si

No

No

Lmite de
cuantificacin
Tolerancia

Puede ser requerido, dependiendo de la naturaleza del mtodo

Cuando se requiera
1 Se considera un estudio de tolerancia

32

cpam

33

IV. Metodologa y criterios de aceptacin

4.1 Precisin del sistema

La evaluacin de la adecuabilidad del sistema se recomienda para to

dos los mtodos analticos, ya que permite verificar que el sistema de
medicin funciona apropiadamente, independientemente de las con
diciones ambientales.
Es conveniente que antes de llevar a cabo la validacin del mtodo en

El estudio de este parmetro permite determinar la variacin asigna

ble principalmente a un instrumento analtico a una concentracin
baja de una solucin de referencia (ppm, ppb), y si sta es apropiada
para el propsito deseado.
a) Metodologa: El analista preparar, por lo menos por sextuplicado,
soluciones por dilucin o por pesadas independientes a la con
centracin del residuo al LAAR, que en trminos relativos repre
senta el 100% de la muestra procesada para su medicin. Medir
la respuesta analtica bajo las mismas condiciones.

Calcular y, S Y CV de la respuesta analtica.

Para los sistemas biolgicos, puede ser necesario cumplir los cri
terios de validez inherentes al diseo del bioensayo.
b) Criterio de aceptacin:
-7

CV

2% para mtodos fsico - qumicos.

01

3% para mtodos biolgicos.

Valores superiores deben ser justificados. Cualquier otro criterio de

aceptacin, debe ser justificado.
Las frmulas, el procedimiento de clculo y un ejemplo, se descri
ben en el anexo D.
4.2 Adecuabilidad del sistema
La adecuabilidad del sistema para mtodos cromatogrficos se llevar a
cabo segn la metodologa indicada en otras guas o a los lineamientos
y criterios de aceptacin establecidos en ellas.

su etapa de desarrollo, se establezcan los criterios apropiados para la

operacin del sistema de medicin, para que sean evaluados en la
validacin y verificados de manera rutinaria al emplear el mtodo.
Por ejemplo, en el caso de mtodos volumtricos, el volumen de la
titulacin de blancos y/o de un volumen especfico de la SR; en el
caso de mtodos fotomtricos la lectura de soluciones blanco; entre
otros.
4.3 Linealidad del sistema
El estudio de este parmetro permite establecer en un intervalo apro
piado de concentraciones, si la relacin concentracin del residuo
respuesta analtica es lineal; adems de llevar a cabo una primera
estimacin del lmite de deteccin y/o cuantificacin del sistema (nu
meral 4.9, 4.10 Y 4.11) que permite establecer su habilidad para
determinar al residuo.
a) Metodologa: Un analista preparar, por lo menos por triplicado,
cinco niveles de concentracin (intervalo) de la solucin del resi
duo ya sea por dilucin (a partir de una misma solucin concen
trada) o por pesadas independientes (cuando no sea posible pre
pararlas por dilucin). La concentracin intermedia ser igual a la
que se prepara la SR en el mtodo que represente el LAAR (1 00%)
en la muestra procesada para su medicin. Determinar la res
puesta analtica bajo las mismas condiciones de medicin. Para el
anlisis de los resultados reportar la relacin concentracin vs.
respuesta analtica, calcular el valor de la pendiente (b), la orde
nada en el origen (b), el coeficiente de determinacin (rl) y el
intervalo de confianza para la pendiente (1C(,8,.

El intervalo est en funcin del propsito del mtodo, y por lo

general se expresa como porcentaje de la concentracin de la SR.

34

cipam

35

Para mtodos de contenido se sugiere un intervalo mnimo de 50

a 200% y para mtodos lmite de 50 a 150 por ciento.
b) Criterios de aceptacin
~

lC(b1 ), no debe incluir el cero

Para mtodos de contenido de residuo, r2 > 0.98. Si r2 < 0.98,

no debe existir falta de ajuste al modelo lineal

Cualquier otro criterio de aceptacn debe ser justificado.

Es conveniente trazar la grfica la concentracn (x) vs. la res
puesta analtica (y), e incluir en ella la ecuacn, la lnea de ajuste
y el coeficiente de determinacn.
Las frmulas, el procedimiento de clculo y un ejemplo, se descri
ben en el anexo E.

4.4 Especificidad
El estudio de este parmetro permite determinar si otros residuos
potenciales (agente de limpieza, excipientes, frmacos, intermedia
rios) o sustancias como solvente de remocin, materiales del ele
mento de remocin del residuo (hisopo, pao, tela), del contenedor
y de la determinacin no interfieren en la respuesta analtica del re
siduo.
4.4.7 Materjales de muestreo y anlisis de la muestra

a) Metodologa: Simular a nivel laboratorio por triplicado el mtodo

de muestreo en superficie sin residuo y el tratamiento analtico de
la muestra.
b) Criterio de aceptacin: No se debe presentar la respuesta analtica
caracterstica del residuo de inters.

funcin del proceso de limpieza, de manera individual, combina

dos y combinados con el residuo de inters. Aplicar a la(s)
muestra(s) el mtodo analtico del residuo.
b) Criterio de aceptacin: La respuesta del mtodo nicamente debe
ser debida al residuo de inters o la respuesta debe ser aditiva.

4.5 Estabilidad del residuo

Es necesario establecer que el residuo se mantiene estable desde el pro
ceso de limpieza hasta su tratamiento analtico, ya que si el residuo no
es estable, en ciertos casos puede invalidar al mtodo analtico.
4.5.1 Proceso de limpieza

Este parmetro no es necesario determinarlo cuando el proceso de

limpieza est diseado para degradar el residuo (eemplo, beta
lactmicos, endotoxinas, entre otros).
a) Metodologa: Simular al menos por triplicado a nivel laboratorio la
interaccin del agente de limpieza con el residuo de inters y
agente de limpieza con producto, si aplica, que se presente du
rante el proceso de limpieza (cantidad del residuo, cantidad del
producto, cantidad del agente de limpieza, solvente, temperatu
ra, tiempo de contacto, agitacin, entre otros). Diluir con el sol
vente de muestreo a la concentracin que represente el 100%
de la SR en linealidad del sistema y preparar simultneamente la
SR al1 00%. Aplicar el sistema de medicin tal y como lo indica el
mtodo analtico.
b) Criterio de aceptacin: La respuesta analtica del residuo en las mues
tras simuladas, no debe disminuir de manera importante respecto
a la respuesta de la SR.
4.5.2 Proceso de muestreo

4.4.2 Residuos potenciales

a) Metodologa: Seleccionar otros residuos de importancia (frmacos,

detergentes, excipientes) y preparar al menos por duplicado al
nivel de concentracin esperado en el solvente de remocin; en
36

Es importante investigar la estabilidad del residuo al momento del

muestreo, almacenaje y su tratamiento analtico. Es deseable evaluar
la estabilidad para establecer condiciones apropiadas de almacenaje

clpam

37

(tipo y tiempo) de la muestra. Este estudio permite establecer si el

tratamiento analtico de la muestra debe ser inmediato o es posible
almacenar la muestra a ciertas condiciones y un tiempo permitido,
antes de su tratamiento analtico.
Este parmetro puede ser omitido siempre que el anlisis de la mues
tra se lleve a cabo de manera inmediata o su estabilidad se justifique
de manera cientfica y racional.

a) Metodologa:
Metodologa poro muestreo con hisopo o equivalente: Disolver el
residuo en el solvente de remocin a una concentracin apro
piada. Adicionar por triplicado, un volumen apropiado al ma
terial del elemento de remocin (punta del hisopo, pao, se
gn aplique) de tal forma que en dicho volumen tenga la can
tidad de residuo a muestrear de la superficie. Transferir al con
tenedor de la muestra segn el mtodo de muestreo y proce
der como lo indica el mtodo analtico del residuo para su
determinacin (tiempo inicial).

Establecer las condiciones de almacenaje a ser estudiadas, por

ejemplo, refrigeracin seis horas, condiciones de laboratorio
ocho horas, condiciones de laboratorio 24 horas. Disolver el
residuo en el solvente de remocin a una concentracin y vo
lumen apropiado en funcin de la cantidad de residuo a
muestrear de la superficie. Transferir el volumen indicado al
contenedor de la muestra segn mtodo de muestreo y pro
ceder a determinar el residuo segn el mtodo analtico para
cada condicin de almacenaje.
Para mtodos lmite, reportar la propiedad medida de las mues
tras y de la SR para la determinacin inicial y a las diferentes
condiciones de almacenaje.
Para mtodos de contenido calcular la media aritmtica de la
determinacin inicial (Yo) y de cada condicin de almacenaje

(y ). Calcular la diferencia absoluta de la media aritmtica de

cada condicin respecto del tiempo inicial ( Idi 1).
b) Criterio de aceptacin:

Establecer las condiciones de almacenaje a ser estudiadas, por

ejemplo, refrigeracin seis horas, condiciones de laboratorio
ocho horas, condiciones de laboratorio 24 horas. Disolver el
residuo en el solvente de remocin a una concentracin apro
piada. Adicionar por triplicado un volumen apropiado al ma
terial del elemento de remocin (punta del hisopo, pao, se
gn aplique) de tal forma que en dicho volumen tenga la can
tidad de residuo a muestrear de la superficie. Transferir al con
tenedor de la muestra segn el mtodo de muestreo y proce
der como lo indica el mtodo analtico del residuo para cada
condicin de almacenaje.
Metodologa poro muestreo por enjuague o solvente recirculado:
Disolver el residuo en el solvente de remocin a una concen
tracin y volumen apropiado en funcin de la cantidad de re
siduo a muestrear de la superficie. Transferir el volumen indi
cado al contenedor de la muestra segn mtodo de muestreo
y proceder a determinar el residuo segn el mtodo analtico
(tiempo inicialr

38

Para mtodos lmite:

La respuesta analtica del residuo en la muestra debe ser similar
a la de la SR a tiempo inicial y a cada condicin de almacenaje
Para mtodos de contenido:

Id I ~ 2% para mtodos cromatogrficos y volumtricos

I di I ~ 3% para mtodos qumicos o espectrofotomtricos

Idi I ~ 5% para mtodos biolgicos

no mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especifi
cacin del residuo en la muestra
Cualquier otro criterio de aceptacin, debe ser justificado
El anlisis de los resultados es similar a el caso de la estabilidad
de la respuesta analtica de la muestra (numeral 4.8), por lo
que las frmulas, el procedimiento de clculo y un ejemplo, se
describen en el anexo H.

cipam

39

4.6 Eficiencia del recobro

Modificar la concentracin de la SR

equipo de inters. Adicionar la cantidad de residuo por un me

canismo apropiado en el rea definida en el mtodo de muestreo,
como puede ser un volumen de una solucin del residuo en un
disolvente voltil (para facilitar su evaporacin), u otro meca
nismo de adicin. El procedimiento anterior debe ser reprodu
cido para los otros dos niveles del residuo. Remover el residuo
tal como lo indica el mtodo de muestreo y determinarlo se
gn el mtodo analtico.

Utilizar un factor de correccin para el contenido del residuo en la

superficie

En la tabla 5 se sugieren el valor de los niveles (%) del residuo,

como intervalo mnimo en funcin del propsito del mtodo.

El estudio de este parmetro permite investigar el tipo y la magnitud

de la relacin entre cantidad adicionada del residuo a la superficie y
la cantidad que se recupera utilizando un mtodo de muestreo para
una superficie en especfico (hisopo, enjuague o solvente recirculado).
Esta informacin puede ser utilizada para:

Modificar el LAR en la superficie

Modificar el LAAR
Establecer el lmite de cuantificacin y/o deteccin del conjunto
mtodo de muestreo - mtodo analtico

Tabla 5. Intervalo mnimo del residuo en estudios de eficiencia

del recobro
Propsito

Llmite inferior

Llmite aceptable

Lmite superior

de residuo

En el caso de varios tipos de materiales de superficies, este estudio

puede ser llevado a cabo, bajo la situacin del caso conservador y ser
justificado.

a) Metodologa

residuo

Muestreo con hisopo o similar: Seleccionar tres niveles del resi

duo (lmite inferior, lmite aceptable y lmite superior). Para
cada nivel del residuo en al menos en tres cupones de rea
definida en el mtodo de muestreo, adicionar la cantidad de
residuo por un mecanismo apropiado, como puede ser un
volumen de una solucin del residuo en un disolvente voltil
(para facilitar su evaporacin), u otro mecanismo de adicin.
El procedimiento anterior debe ser reproducido para los otros
dos niveles del residuo. De cada cupn remover el residuo tal
como lo indica el mtodo de muestreo y determinarlo segn
el mtodo analtico.
Muestreo por enjuague o solvente recirculado: Seleccionar tres
niveles del residuo: lmite inferior, lmite aceptable y lmite su
perior. Para cada nivel del residuo en, al menos en tres reci
pientes o contenedores, o partes que simulen la superficie del

40

Contenido
de residuo
. ..
Lmite de

50%

100%

200%

50%

100%

150%

Para el anlisis de los resultados del estudio, reportar la relacin

cantidad adicionada vs. cantidad recuperada segn sea el caso.
Utilizando el mtodo de estimacin por mnimos cuadrados,
calcular el valor de la pendiente (b,), la ordenada en el origen
(b), el coeficiente de determinacin (r 2 ), el coeficiente de va
riacin de regresin (CVy/), el intervalo de confianza para la
pendiente (Ic(f3,)) y, el intervalo de confianza para la ordenada
al origen (1C(f3o ))'
Es conveniente trazar la grfica de la cantidad adicionada (x) vs.
la cantidad recuperada (y), e incluir la ecuacin, la lnea de me
jor ajuste y el coeficiente de determinacin.

cpam

41

b) Criterios de aceptacin

EI1CCj31) no debe incluir el cero

Para mtodos de contenido de residuo r2 ~ 0.98. Si r2 < 0.98,

no debe existir falta de ajuste al modelo lineal

El CVy/x no debe ser mayor a:

~

3% si el LAAR est en unidades de mg/mL

---1

8% si el LAAR est en unidades de concentracin de flg/mL

---1

20% si el LAAR esta en unidades de ng/mL

Esta metodologa debe ser llevada a cabo por dos analistas en

dos das diferentes.
Segn sea la determinacin, para el anlisis de los resultados
calcular la media aritmtica (y), desviacin estndar (5) y co
eficiente de variacin (C\!) de los 12 contenidos del residuo.
b) Criterio de aceptacin: El CVy/x no debe ser mayor a:
~ 3%

Las frmulas, el procedimiento de clculo y un ejemplo se descri- .

ben en el anexo F. En ste se explica la utilidad de relacin canti
dad adicionada vs. cantidad recuperada del residuo para utilizar
factores de correccin, como se indica en el numeral 4.6, clculo
del residuo en la muestra, modificar la concentracin de la SR,
modificar el LAAR o modificar el LAR.

---1

8% si el LAAR est en unidades de concentracin de mg/mL

20% si el LAAR esta en unidades de ng/mL

Este parmetro permite establecer la tolerancia del mtodo a corri

das analticas (das de anlisis) y analistas. El estudio debe ser aplica
do al tratamiento analtico de la muestra y no incluir el mtodo de
muestreo.

Metodologa
Muestreo con hisopo o similar: Segn el mtodo de muestreo,
por un mecanismo apropiado adicionar al elemento de
muestreo (hisopo, pao) la cantidad del residuo en funcin del
LAAR o su valor modificado (numeral 4.6 o anexo F) y transfe
rir a su contenedor segn lo establezca el mtodo de muestreo.
Llevar a cabo este procedimiento por triplicado. Determinar el
residuo segn el mtodo analtico. La metodologa debe ser
aplicada por dos analistas en dos das diferentes.

42

ciones del residuo por pesadas independientes al LAAR y deter

minarlo segn mtodo analtico.

Cualquier otro criterio de aceptacin, debe ser justificado.

4.7 Precisin intermedia

a)

Muestreo por enjuague o solvente recirculado: Preparar tres solu

si el LAAR est en unidades de mg/mL

Cualquier criterio de aceptacin mayor, debe ser justificado.

Las frmulas, el procedimiento de clculo y un ejemplo, se des
criben en el anexo G.
4.8 Estabilidad de la respuesta analtica de la muestra
El estudio de este parmetro debe ser llevado a cabo para mtodos
en los cuales despus de haber procesado analticamente la mues
tra, la respuesta analtica no sea determinada de inmediato, como
puede ser el caso de mtodos por CLAR, CG, entre otros. Ya que
es posible que la respuesta cambie con el tiempo, la determinacin
del contenido del residuo no ser confiable, por lo tanto ser nece
sario establecer el tiempo durante el cual la respuesta analtica se
mantiene. Se sugiere al menos evaluar la estabilidad a dos tiempos
apropiados.
a) Metodologa

Muestreo con hisopo o similar: Segn el mtodo de muestreo,

por un mecanismo apropiado, adicionar al elemento de remo
cin del mtodo de muestreo (hisopo, pao) la cantidad del

cipam

43

residuo en funcin del LMR y transferir a su contenedor segn

lo establezca el mtodo de muestreo. Llevar a cabo este proce
dimiento por triplicado y determinar el residuo segn el mto
do analtico hasta antes de la medicin de la respuesta analtica
yfraccionar la porcin a medir segn los tiempos a evaluar, por
ejemplo, 4, 8, 24 horas, incluyendo la medicin inicial. Prose
guir con la determinacin inicial del residuo. Para cada frac
cin, al trmino del tiempo preestablecido, determinar el con
tenido del residuo utilizando una SR recientemente preparada.

Muestreo por enjuague o solvente recirculado: Preparar tres solu

ciones del residuo por pesadas independientes al LMR deter
minar el residuo segn el mtodo analtico hasta antes de la
medicin de la respuesta analtica y fraccionar la porcin a
medir segn los tiempos a evaluar, por ejemplo, 4, 8, 24 ho
ras, incluyendo la inicial. Proseguir con la determinacin ini
cial del contenido del residuo. Para cada fraccin, al trmino
del tiempo preestablecido, determinar el contenido del resi
duo utilizando una SR recientemente preparada. Es importan
te indicar que la SR recientemente preparada representa la SR
al tiempo inicial.
Para el anlisis de los resultados, segn sea el caso, calcular la
media aritmtica de la determinacin inicial (Yo) Y de cada
tiempo de almacenaje (y). Calcular la diferencia absoluta de
la media aritmtica de cada tiempo respecto del tiempo inicial

(1 di!)'
b) Criterio de aceptacin

I d,l ~ 2% para mtodos cromatogrficos y volumtricos

I di I ~ 3% para mtodos qumicos o espectrofotomtricos
Idi I ~ 5% para mtodos biolgicos
No mayor a una magnitud preestablecida, acorde a la especifi
cacin del residuo en la muestra

44

Cualquier otro criterio de aceptacin, debe ser justificado.

Las frmulas, el procedimiento de clculo y, un ejemplo, se descri
ben en el anexo H. Los resultados pueden ser analizados utilizando
otros mtodos estadsticos apropiados, uno de ellos, es la obten
cin de intervalos de confianza que describen la diferencia de los
resultados de un tiempo especfico respecto de los resultados ini
ciales, basados en la distribucin t de Dunnett.
4.9 Lmite de deteccin para mtodos lmite de residuo
Se sugiere estimarlo en primera instancia con los resultados de efi
ciencia del recobro (cantidad adicionada-cantidad recuperada de
residuo) y en caso de que el mtodo haga uso de un instrumento
analtico y que sea posible medir la seal de ruido basal (CLAR, CG,
espectrofotmetro) verificarlo por el mtodo de la seal de ruido. El
valor verificado debe satisfacer los requerimientos establecidos para
el LMR. Otros procedimientos cientficamente sustentados pueden
ser utilizados para determinar el LD.

4.9. 1 Estimacin
a) Metodologa: Con los resultados de cantidad adicionada-cantidad
recuperada del residuo de la eficiencia del recobro (numeral 4.6),
calcular el valor de la pendiente (b), la ordenada al origen (b o)' el
coeficiente de determinacin (r'), la desviacin estndar de re
gresin (Sy/)' la desviacin estndar de la ordenada al origen (Sb )
y el intervalo de confianza para la pendiente (1C(.61 )). Estimar ~I
lmite de deteccin con las siguientes ecuaciones y reportar el caso
conservador (el de mayor magnitud).

LD=

3.3xS y/ x

b'

LD= 3. 3xS bo

cipam

45