CURVAS DE CONSUMO DE OXIGENO

En condiciones fisiolgicas, el transporte de electrones en la cadena respiratoria mitocondrial esta acoplado

a la fosforilacion de ATP.
Los electrones fluyen a travs de la CTE hasta el oxgeno, ultimo aceptor, solo si el ADP es fosforilado a
ATP. Por lo tanto, el consumo de oxigeno mitocondrial esta regulado por el aporte de NADH y por los
niveles de ADP y P, sustratos de la FOX.
La regulacin de la velocidad de la FOX por los niveles de ADP se denomina CONTROL RESPIRATORIO y
este mecanismo respiratorio permite que cuando los niveles de ADP aumentan como consecuencia del
gasto de ATP, paralelamente aumenta la velocidad de FOX para reponer el ATP consumido.
Como la FOX esta acoplada a la CTE, el aumento de la velocidad de la FOX se refleja en un aumento del
flujo de electrones a travs de la cadena respiratoria y por ende aumenta el consumo de oxigeno.
Experimentalmente, el control respiratorio puede evaluarse en suspensiones mitocondriales de un tejido x
en presencia de oxigeno. Las mitocondrias deben estar intactas y ser incubadas con un medio con
sustratos oxidables que permitan la generacin de coenzimas reducidas.
Las variaciones en el consumo de oxigeno son evaluadas por un dispositivo que tiene un electrodo sensible
a las concentraciones de oxigeno, el polarografo.
Los cambios en la velocidad de consumo de oxigeno (consumo de oxigeno en fx del tiempo) de la
suspensin mitocondrial puede comprobarse agregando ADP al medio: esto provoca un rpido aumento en
el consumo de oxigeno.
LOS SUSTRATOS SON:
SUSTRATO OXIDABLE GENERADOR DE FADH2: SUCCINATO
SUSTRATO OXIDABLE GENERADOR DE NADH: PIRUVATO, MALATO, ALFA CETOGLUTARATO.
SUSTRATO ACTIVADOR GENERADOR DE ATP: ADP
MECANISMOS QUE EXPRESAN EL GRADO DE ACOPLAMIENTO ENTRE LOS PROCESOS DE
OXIDACIN Y DE FOSFORILACION:
CONTROL RESPIRATORIO
RELACIN P:O
CONTROL RESPIRATORIO: RELACIN ENTRE LA RESPIRACIN EN EL ESTADO 3 Y LA
RESPIRACIN DEL ESTADO 4.
RELACIN P:O: RELACIN ENTRE EL FOSFATO INCORPORADO AL ATP Y EL OXIGENO
CONSUMIDO AL OXIDAR EL SUSTRATO.
VALORES BAJOS DE CONTROL RESPIRATORIO O DE NDICE P:O INDICAN MITOCONDRIAS
DAADAS O DESACOPLADAS.
SE REALIZAN 3 GRAFICOS:
SNTESIS DE ATP EN FUNCIN DEL TIEMPO.
CONSUMO DE OXIGENO DEL MEDIO EN FUNCIN DEL TIEMPO.
CONSUMO DE OXIGENO MITOCONDRIAL EN FUNCIN DEL TIEMPO.

GRAFICO DE CONSUMO DE OXIGENO MITOCONDRIAL EN FX DEL TIEMPO

SUSTRATO oxidable: MALATO O SUCCINATO

CONSUMO
DE OXIGENO
MITOCONDRIAL

SUSTRATO fosforilable: ADP

SUSTRATO fosforilable: ADP

SUSTRATO oxidable: MALATO O SUCCINATO

3
4
5

NO TENGO:
SUSTRATO OXIDABLE QUE GENERE COENZIMAS REDUCIDAS NADH O FADH PARA
PODER SER REOXIDADAS A TRAVS DE LA CTE.
SUSTRATO FOSFORILABLE: AL FALTAR ADP EN EL SISTEMA LA CADENA RESPIRATORIA
ACOPLADA NO PUEDE REOXIDAR LAS COENZIMAS REDUCIDAS POR ESTAR FRENADA LA FOX.
LAS MITOCONDRIAS NO CONSUMEN OXIGENO YA QUE NO SE UTILIZA AL OXIGENO
COMO ULTIMO ACEPTOR DE ELECTRONES PARA LA REOXIDACION DE LAS COENZIMAS.
El agregado de sustrato fosforilable (malato o succinato) no modifica marcadamente el consumo de
oxigeno porque al faltar su sustrato fosforilable, el ADP, est frenada la FOX y la cadena respiratoria
acoplada no puede reoxidar las coenzimas reducidas.
El agregado de ADP exgeno completa el sistema permitiendo la activacin de la FOX.
Esto incrementa el consumo de oxigeno. El ADP agregado se consumir con el tiempo a medida que
la FOX ocurre y esto se reflejar en un cambio de pendiente que se observa al final de esta fase
donde nuevamente el consumo de oxigeno empieza a declinar.
El agregado de ms ADP no incrementa marcadamente el consumo de oxigeno ya que se ha agotado
el sustrato oxidable y con l las coenzimas reducidas que deben ser reoxidadas por la CTE.
El agregado de mas sustrato nuevamente completa el sistema y este evolucionar hasta que se
agote el oxigeno.

GRAFICO DE ESTADOS
ESTADO 4 o ESTADO BASAL: estado metablico en el que
las mitocondrias estn suspendidas en un medio en el cual
existe una alta concentracin de sustratos, fosfatos y
oxigeno. La respiracin es lenta.
ESTADO 3 o ESTADO ACTIVO: Se aade ADP y se estimula
la sntesis de ATP y se incrementa la velocidad del
transporte de electrones y por lo tanto del consumo de
oxigeno. Este estado metablico permanece as hasta que
se consume el ADP aadido.

Los inhibidores son sustancias que impiden la estimulacin del consumo de oxigeno
por el ADP y tambin impiden la FOX del ADP al ATP.
INHIBIDORES
FOX

No inhiben la CTE de manera directa pero actan por inhibicin de la disipacin del
gradiente electroqumico de protones, de modo que evitan la transferencia de la
energa necesaria para la sntesis del ATP. RESULTADO NETO:
CONSUMO DE OXIGENO SE DETIENE SIN PRODUCCION DE ATP
Los desacoplantes son sustancias que tienen 2 caracteristicas:

Son ACIDOS DBILES: producen la translocacion de protones desde el espacio

intermembrana hacia la matriz mitocondrial y al disipar el gradiente, permiten
que la CTE continue activa pero impiden el pasaje de protones por el canal de la
ATP sintasa e inhiben la FOX.
DESACOPLANTES
CTE Y FOX

Son LIPOSOLUBLES: atraviesan fcilmente las membranas plasmticas.

RESULTADO NETO:
CONSUMO DE OXIGENO INCREMENTADO SIN PRODUCCION DE ATP
Desacoplan la CTE de la FOX.

LAS DROGAS SON:

INHIBIDORES DE LA
CTE

INHIBIDORES DE LA
FOX

DESACOPLANTE DE
LA CTE Y FOX

COMPLEJO 1: ENTRA MALATO (SUSTRATO)

DROGAS INHIBIDORAS DEL COMPLEJO 1 SON:
ROTENONA
COMPLEJO 1
NADH
PIECIDINA A
deshidrogenasa AMITAL
Impide la transferencia electrnica desde un centro fe s
de la NADH deshidrogenasa a la ubiquinona.
COMPLEJO 2
COMPLEJO 2: ENTRA SUCCINATO (SUSTRATO)
Succinato
DROGA INHIBITORIA DEL COMPLEJO 2 ES:
deshidrogenasa MALONATO
COMPLEJO 3
DROGA INHIBITORIA DEL COMPLEJO 3 ES:
Ubiquinona o
ANTIMICINA A
citocromo c
Bloquea la transferencia electrnica desde el citocromo
oxidoreductasa b al citocromo c1.
DROGAS INHIBITORIAS DEL COMPLEJO 4 SON:
COMPLEJO 4
CIANURO CN
Citocromo
AZIDA DE SODIO
oxidasa
MONXIDO DE CARBONO CO
OLIGOMICINA: Inhibicin de la ATP sintasa (bloquea el flujo de protones
a travs de la Fo)
VENTURICIDINA: Inhibicin de la ATP sintasa (bloquea el flujo de
protones a travs de la Fo)
ATRACTILOSIDO: inhibe la enzima adenina nucletido translocasa.
AAS: ACIDO ACETIL SALICLICO (ASPIRINA)
DCM: DICUMAROL
VALICOMICINA: ionoforo de K, disminuye el gradiente elctrico.
DNF: 2,3 DINITROFENOL: acta como acido dbil, disminuye la
concentracin de protones en el espacio intermembrana.
TERMOGENINA: forma poros conductores de protones en la membrana
interna de la mitocondria del tejido adiposo pardo.

ALGUNOS CASOS:
SUSPENSION DE MITOCONDRIAS CON SUSTRATO MALATO Y ADP + INHIBIDOR DE CTE DEL COMPLEJO I
(rotenona, piecidina A, amital): Se detiene el consumo de oxigeno mitocondrial (se hace constante)
El agregado de un desacoplante no reestablece el consumo de oxigeno.
SUSPENSION DE MITOCONDRIAS CON SUSTRATO SUCCINATO Y ADP + INHIBIDOR DE CTE DEL
COMPLEJO II (malonato): Se detiene el consumo de oxigeno mitocondrial (se hace constante)
El agregado de un desacoplante no reestablece el consumo de oxigeno
SUSPENSION DE MITOCONDRIAS CON SUSTRATO SUCCINATO Y ADP + INHIBIDOR DE CTE DEL
COMPLEJO I (rotenona, piecidina A, amital): El consumo de oxigeno no se detendr. (no se modifica)
NO se altera el flujo de electrones a travs de la CTE
SUSPENSION DE MITOCONDRIAS CON SUSTRATO MALATO Y ADP + INHIBIDOR DE CTE DEL COMPLEJO
II (MALONATO): Se detiene el consumo de oxigeno. Se altera el flujo de electrones a travs de la CTE.
GRAFICO DE CONSUMO DE OXIGENO DEL MEDIO EN FUNCIN DEL TIEMPO.

CONSUMO
DE OXIGENO
DEL MEDIO

Sustrato

Se termin
el oxigeno

ADP

ADP
Sust

CUANDO LA CURVA DE CONSUMO DE OXIGENO DEL MEDIO EN FX DEL TIEMPO AUMENTA,

LA CURVA DE CONSUMO DE OXIGENO DE LA MITOCONDRIA EN FX DEL TIEMPO DISMINUYE.
Las curvas de CONSUMO DE OXIGENO DEL MEDIO EN FX DEL TIEMPO Y CONSUMO DE OXIGENO
DE LA MITOCONDRIA EN FX DEL TIEMPO son INVERSAMENTE PROPORCIONALES.
UN AUMENTO EN EL CONSUMO DE OXIGENO SE TRADUCE EN UNA DISMINUCIN EN LA
CONCENTRACIN DE OXIGENO DEL MEDIO.

SNTESIS DE ATP EN FUNCIN DEL TIEMPO.

PRODUCCIN
DE ATP

La CTE y FOX estn acopladas (unidas) por eso el grafico de produccin de ATP y el grafico de consumo de
oxigeno son iguales.
UNIN FUNCIONAL DE LA CTE Y FOX: gradiente electroqumico de protones.
UNIN FSICA DE LA CTE Y FOX: membrana mitocondrial interna.