TEMA 10

MICROVIRUS
Su nombre allude a su muy pequeo tamao, siendo el ms representativo el
phiX174. Fue el primero al que se identifico su mate gentico como DNA
monocatenario circular (composicin de bases, reactividad frente a exonucleasas,
etc). La cpsida est formada por 4 potenas, se trata de una cpsida con T= 1 por
tanto tiene 20 caras, la rotena que cconstotuye las caras es las protena F, asociada
a ella pero de localizacin interna est la protena J yfinalmente las espculas se
forman como fruto de la asociacin de la protena G, rematada a su vez por una
nica copia por espcula de la rotena H, que forma el botn. Por tanto, el elemento
ms exterior es esta protena H.
El DNA es bastante pequeo, se han identificado un total de 11 protenas
codificadas por microvirus. Si sumamos sus pesos moleculares tenemos que en
total las protenas codificadas seran de 249kD. El peso medio de un Aa es de unos
100Da, por lo que para sintetizar esta sprotenas se necesitaran unos 2300 Aa. Si
todo el material gentio de microvirus fuera codificante, nos dara como mucho
1795 Aa. Por tanto el fago ecesita sinetizar ms Aa que la simple traduccin de su
material gentico, por lo que debe adoptar estrategias alternativas. Como sabemos,
el codn resultante de una cadena e DNA depende de la pauta que utilicemos. El
virus posee sitios de iniciacin internos y adems produce solapamiento de genes.
Tenemos 11 genes diferentes. Dentro de una secuencia codificante encontramos un
codn que acta como 2 sitio de iniciacin, de forma que se permite leer la regin
en la misma pauta obteniendo dos protenas diferentes, una de ellas
correspondiente al gen entero y otra que presenta una parte del mismo gen. Por
ejemplo, A presenta 2/3 de la secuencia de A, y la protena que forma cumple una
funcin distinta ya que esto depende de su plegamiento tridimensional. El hecho de
que compartan una secuencia pero esta no sea totalmente igual permite que este
plegamiento aporte distintas funciones. La diferencia radica de que el sitio de
iniciacin es diferente. Em el solapamiento de genes, la transcripcin se produce en
un determinado momento en una pauta diferente, habiendo un sitio de terminacin
diferente. Con esto el virus consigue mucho rendimiento, de forma que sintetiza
ms protenas de las que su propia informacin gentica le permite. Esto ocurre en
ciertos genes, pero no en los estructurales que requieren un gran nmero de copias.
De hecho, de los diferentes puntos de iniciacin no todos se transcriben con la
misma intensidad.
En cuanto al ciclo de multiplicacin, comienza con la adsorcin, el receptor
bacteriano se localiza a nivel del LPS en la m externa mientras que el receptor viral
es la protena H, que adems acta como protena piloto, modificando la cpsida
para liberar el mterial gentico, que es conducido por esta protena hasta la
membrana citoplasmtica. Una vez que el DNA alcanza el interior celular, el
objetivo del fago es replicar dicho material gentico y sintetizar sus protetnas
estructurales. Esoto se consigue mediente un proceso de 3 etapas: el primer paso

es la formacin de crculos bicatenarios, lo que hace que se aemeja ms al material

gentico de la bacteria (Single Strand to Replicative Form). Para esto se requiere la
maquinaria celular, de forma que siguen replicndose estas RF. Cuando estas se
transcriban se generaran los ARNm virales, que sern traducidos por los ribosomas
celulares. Ahora este material gentico que se haba duplicado debe ser
empaquetado en los viriones como SS, por lo que debe pasar las RF a SS.
En el paso de SS a RF, se encarga la maquinaria enzimtica celular ya que estos
virus no tienen tantos recursos como los de DNA bicat. Esta generacin de la
cadena coplementaria es similar a la de la replicacin del cromosoma, sindola
primasa celular la que reconoce el orgine de replicacin, sintetiza unpequeo
fragmento de ARN que constituye el punto de partida. Cuando la pol completa el
proceso y tenemos la copia, esta se considera que tiene polaridad positiva y l copia
que se genera tiene polarida negativa. Una de ellas ser utilizada como molde en la
transcripcin. Una vez que termina el proceso, la RF puede estar superenrollada o
relajada. Esta ltima es la que se obtiene justo despus de la replicacin, y las
girasas forman la RF1. Este DNA bicatenario genera nuevas copias utilizando la
maquinaria cekular, aunque se requiere la participacin de la protena A para que el
material gentico este en conformacin relajada. La prot A genera un corte en la
cadena positiva y permanece unida al extremo 5. El modelo de replicacin es en
theta, anlogo al proceso de replicacin bacteriano. Una vez que tenemos las
distintas copias, las RF sirven como molde para la transcripcin, que unavez ms
depende totalmente del hospedador. Se originan 11 protenas, laa sque provienen
de genes solapados en menor cantidad y las estructuralees en mayor cantidad,
gracias a la existencia d edistintos promotores reconocidos con distinta intensidad.
Falta entonces el ltimo proceso, en el que se forman las SS que se empaquetan. El
punt de partida es la RF, y vuelve a intervenir la protena A ejerciendo un corte,
pero no se origina una onda de replicacin bidireccioal sino que la prot A permanece
unida al extrermo 5 y el extremo 3 resultante del corte y que presenta el grupo
OH va a ser utilizado como molde para ir elongando la cadena, por tanto se genera
la cadena positiva. Este modelo es de crculo odante, ya que el circulo interior va a
servir como molde y la cadena sencilla va a ir elingndose, cubriendo el genoma
completo, Cuando se replica todo, la prot A produce un corte y se genera una sola
copia que se sella tambin por accin de la protena A. El que predomine uno de
estos procesos depende de la situacin que se de dentro de la clula, por ejemplo la
concentracin de protena A. Cmo recnonoce la prot A este ltimo punto de
corte?. A unos 500 nucls del sitio de terminacin se encuentra una seal en forma
de citosinas metiladas por parte de una metilasa del virus que indican a la protena
A que produzca el corte. El ltimo paso es ya el ensamblaje, de forma que primero
se asocian las protenas estructurales que forman la cpsida e intervienen prtenas
del virus que desempean la funcin intermedia de andamiaje. La protena J cumple
la funcin de captar el material gentico y lo lleva hacia el interior de la cpsida.
Para la liberacin interviene la protena E, implicada en la lisis celular.
INOVIRUS

Cpsida helicoildal muy alargada compuesta por 5 protenas, la 8 es mayoritaria y

las dems son minoritarias en cada extremo. El material gentico es algo mayor
que el de microvirus (64kb). La protena de la cpsida presenta una distribucin
peculiar de los Aa, de forma que en el C-terminal hay Aa de naturaleza bsica
(carga +) y se localizan hacia el interior de la cpsida, obteniendo una mayor
estabilidad. La porcin central peredominan los residuos hidrofbicos que permiten
la interaccin entre distintas unidades y en el N-terminal tenemos Aa de naturaleza
cida situados hacia fuera. A nivel del mapa gentico, tenemos 10 genes y no hay
solapamiento ni sitios de iniciacin. Hay una regin central intergnica que no es
codificante. Hay numerosos promotores y se da la situacin de que todas las ondas
de transcripcin generadas en un sentido terminan en el mismo punto, que
corresponde al gen de la protena 8. Por tanto jugando con los promotores, ya sea
con su sencuencia o su posicipon relativa se ptimiza la produccin de partculas
virales. El ciclo de multiplicacin e smuy similar, la SS pasa a RF que se utiliza para
genrar copias del genoma. El receptor se localiza a nivel de los pelos sexuales
bacterianos, en concreto en el pice mientras que el receptor viral es la protena 3.
La entrada se produce mediante la retraccin del pelo y la protena 3 acta como
piloto conduciendo al DNA desde el interior.