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DEPARTAMENTO DE QUIMICA
ACADEMIA DE BIOQUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA I
LICENCIATURA EN ANALISIS QUIMICO BIOLOGICOS
PRACTICA #5
propiedades fsicas y qumicas de las protenas
INTEGRANTES:
ITZEL ORTEGA DE ANDA
ITZAETL SANTANA MONTAO
EMMANUEL TISCAREO SALAS
LESLIE NAYELI VITE RODRIGUEZ
ISAURA EDITH DELGADO RODRIGUEZ
Objetivo:
1.- Demostrar algunas propiedades de las protenas por medio de algunas
pruebas cualitativas.
2.-Verificar comportamiento en reacciones de precipitacin y desnaturalizacin.
Introduccin:
Los aminocidos son los componentes bsicos de las protenas. A pesar de que
en la naturaleza existan ms de 500 aminocidos y de que cada especie biolgica
tiene un gran nmero de protenas diferentes a las de los otros organismos, de
manera comn
solamente intervienen en su constitucin 20 aminocidos
diferentes, que son por ellos, considerados indispensables para la vida.
Las protenas son los componentes estructurales bsicos de la materia viviente.
Desde el punto de vista qumico, se caracteriza por el hecho de contener en su
molcula, adems de los elementos C, H, O, N, S, P. carbono, hidrogeno,
oxigeno, nitrgeno, azufre y fosforo y en menor medido el hierro (Fe) y el cobre
(Cu). Todos estos elementos qumicos se hallan grapados formando una
molcula sencilla llamadas aminocidos (Antonio Pea y colaboradores.
(2004)).
De all su importancia en la vida y su constante estudio, pues estos se les
consideran la materia prima de la vida en su mnima expresin.
Los aminocidos son los principales constituyentes de las protenas (de la leche,
la carne y los huevos, por ejemplo). Participan en la composicin de las protenas
de los alimentos para animales y de nuestros alimentos unos 20 aminocidos. Las
plantas pueden sintetizar todos los aminocidos a partir de sustancias bsicas. En
cambio, el hombre y los animales necesitan el aporte de algunos aminocidos
esenciales mediante la alimentacin. (ILEANA MORA BRAUTINGA. (1991).)
Qumicamente,
los
aminocidos
naturales
se
caracterizan por poseer un grupo alcalino, amino (-NH2),
y
otros grupos, acido, carboxlico (-COOH), de acuerdo con
la siguiente formula general de los aminocidos,
en la cual R , es el radical variable que define a
los diferentes aminocidos. Al contener, por
lo menos, un grupo carboxilo y un grupo
amino, los aminocidos se comportan a la vez como cidos y como bases
(lcalis). Los compuestos que como los aminocidos, en disolucin acuosa se
(1991).
Nutricin
Animal.
Costa
Rica:
Resultados
1) Prueba de Million.
Tabla.1 serie de datos con resultado de la prueba de Million.
Numero de tubo
1
2
3
Resultado
+
+
-
T#3
T#3
T#2
T#1
T#3
T#2
T#1
T#2
T#1
2) Reaccin Xantoproteica
No tubo
Observaciones
Solucin de albmina
Formacin de un ppdo
amarillo
Solucin de gelatina
Formacin de 2 fases
Fase Superior: coloracin
amarillo cristalino
Inferior :incolora
Agua destilada
incolora
4 ) Prueba de la Ninhidrina
Se observan los 3 tubos de
ensaye (de izquierda a
derecha)
el
primero
contiene albmina que
presenta un color prpura
fuerte e indica la presencia
de los -aminocidos, el
segundo contiene gelatina
con una coloracin muy
plida y el tercero contiene
agua que es totalmente
incoloro indicando que no
hay aminocidos presentes.
No. Tubo
1
2
Observaciones
Coagulacin
Tomo un precipitado muy
fino y la muestra de color
marrn.
No hubo ninguna
reaccin
Cuestionario
1. Qu se entiende por desnaturalizacin y cmo influye en las
propiedades funcionales de las protenas? Es la prdida de las
estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria),
quedando la cadena polipeptdica reducida a un polmero sin ninguna
estructura tridimensional fija. Dicho cambio aumenta la viscosidad y
disminuye el coeficiente de difusin, disminuye la solubilidad, si se rompen
los puentes de hidrgeno se facilita la agregacin intermolecular
provocando la precipitacin y se pierden las propiedades biolgicas.
2. Qu diferencia hay entre coagulacin y desnaturalizacin? La
desnaturalizacin es un proceso reversible y la coagulacin no lo es.
3. Qu factores influyen en la coagulacin y cules en la
desnaturalizacin? Desnaturalizacin: calor, pH. Coagulacin: calor, pH.
4. Qu efectos tienen el yodoacetato, el mercurio, el cido
tricloroactico, el sulfato de amonio y el fenol sobre las protenas?
Yodoacetato desnaturaliza a las protenas, el mercurio inhibe la accin de
algunas enzimas (como la fosfatasa alcalina en el leucocito, la
fosfohidrolasa cida y la glucosa-6-fosfatasa en el lisosoma del rin, y la
glutaminasa en el cerebro) y tambin altera el espectro de absorcin y
disminuye la fluorescencia y fosforescencia del triptfano y tambin de la
fenilalanina y la tirosina, el cido tricloroactico precipita a las protenas
formando sales insolubles con la forma catinica de la protena, el sulfato
de amonio precipita protenas plasmticas (como las globulinas de la
albmina) y el fenol se utiliza para separar a las protenas de los cidos
nucleicos.
5. Explique qu es la renaturalizacin y d un ejemplo de protena que a
lleve a cabo. Es cuando la protena puede recuperar su conformacin
tridimensional nativa si se restituyen las condiciones iniciales, haciendo uso
de la secuencia de aminocidos, que es lo nico que permanece al final del
proceso de desnaturalizacin; ya que contiene la informacin suficiente
para que se recupere la conformacin tridimensional, y con ella la funcin
biolgica. Un ejemplo es la renaturalizacin de la ribonucleasa A.
Bibliografa del cuestionario.
Discusin
Itzel Ortega de Anda
En esta prctica se realizaron diversas pruebas de coloracin de los
aminocidos en muestras de albmina de huevo, gelatina y agua destilada, de las
cuales resultaron positivas algunas, salvo las de agua destilada que no presentan
aminocidos. Se realizaron cuatro pruebas: prueba con el reactivo de Million,
reaccin xantoproteica, reaccin de Biuret y la prueba de la ninhidrina.
En la primera prueba, se colocaron 3 tubos de ensaye con 3ml de
sustancia: albmina (1), gelatina (2) y agua destilada (3) y se les aadi el reactivo
de Million. El autor menciona que los compuestos que contienen el radical
hidroxibenceno reaccionan con el reactivo formando compuestos rojos. Los nicos
aminocidos fenlicos son la tirosina y sus derivados y solamente ellos dan una
reaccin positiva (Propiedades fsicas y qumicas de los aminocidos y protenas,
s.f.). Entonces, de acuerdo al autor, no se obtuvo ningn resultado positivo
(presencia de tirosina), ya que el primer tubo de ensaye obtuvo un precipitado
color violeta, el segundo tubo de ensaye obtuvo una coloracin violeta y el tercero
no present ningn tipo de coloracin.
La segunda prueba fue la reaccin xantoproteica, en la cual se colocaron
las mismas cantidades de sustancia para identificar ms cido ntrico concentrado
para calentar a bao Mara y al enfriarse, se aadi hidrxido de amonio. En el
primer tubo se obtuvo como resultado un precipitado amarillo, en el segundo tubo
se obtuvieron dos fases: la fase superior tena una coloracin amarilla y la fase
inferior era incolora, y en el tercer tubo no present ninguna coloracin. De
acuerdo al autor, los aminocidos que contienen un ncleo aromtico forman
nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado,
y las sales de estos derivados son de color naranja (Propiedades fsicas y
cuando se trata una solucion alcalina de una proteina con una solucion muy diluida
de sulfato cprico. Este ensayo es especifico para enlaces peptidicos no siendo
positivo para los -aminoacidos. Es un ensayo muy conveniente y que se usa con
gran frecuencia para determinar si ha sido total la hidrlisis de una protena.
El ensayo xantoproteico es la reaccin de formacin de un color amarillo cuando
se trata una protena con cido nitrico concentrado. Este ensayo es simplemente
la nitracin del anillo aromtico de ciertos aminocidos (tirosina, fenilalanina y
triptfano) y es facilmente reconocido por cualquier estudiante como la tipica
mancha amarilla en la piel producida por el cido nitrico. Otra reaccin coloreada
de las protenas es el ensayo de Millon. El reactivo empleado en este ensayo es
una mezcla de nitratos mercurioso y mercrico. Una protena tratada con el
reactivo de Millon y calentada da una coloracin roja. Cualquier compuesto
fenlico da positiva esta reaccin;el ensayo de Millon, como otros basados en
reacciones coloreadas, se basa en la presencia de ciertos aminoacidos en la
molcula de protena.
Philip S. et al. (2000) Qumica orgnica: conceptos y aplicaciones editorial
Pearson, Pag.502
Walter W.(1979) Curso breve de qumica orgnica editorial Reverte ,
Espaa Pag.416
Conclusin
Itzel Ortega de Anda
Se pudieron identificar los diferentes grupos y aminocidos que forman parte de
las protenas presentes en la albmina de huevo y la gelatina, gracias a las
diferentes pruebas de coloracin que se realizaron. No todas dieron un resultado
positivo, pero si el resultado esperado para poder apreciar los diferentes tipos de
aminocidos que conforman a las protenas. Adems, se observaron las diferentes
condiciones para desnaturalizar una protena y para formar cogulos en otra, ya
que ambas dependen exclusivamente de dichos factores para que sucedan.
Leslie Nayeli Vite Rodrguez
Con la prctica realizada se puedo concluir que las biomolculas ms verstiles de
los organismos vivos son las protenas. Las protenas actan como catalizadores,
soporte estructural, proteccin, agentes de transporte, mensajeros qumicos y
factores de reconocimiento celular, para mencionar slo unas cuantas funciones.
Como en el caso de otras biomolculas, la estructura orgnica y los enlaces de las
protenas dan origen a sus extraordinarias caractersticas.
Itzael Santana Montao
El objetivo de la prctica se cumpli y se puede decir que se comprendi tanto la
importancia de conocer las propiedades fsicas y qumicas de los aminocidos a
travs de una serie de reacciones descascarastes, utilizando a favor que todos los
aminocidos poseen un grupo cido (-COOH) y un grupo bsico (-NH2), para
poder as describir a travs de reacciones, sus propiedades acido base, como de
afinidad o repulsin ante otras sustancias a evaluar. el conocimiento de estas
propiedades es fundamental para futuros experimentos, ya que gracias a estas se
puede prever la reaccin o el resultado de cualquier tipo de suposicin de
cualquier problema.
Isaura Edith Delgado Rodrguez
Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en el organismo
ya que cumplen muchas funciones.
Las protenas estn constituidas por aminocidos por los cuales los mtodos se
basan en el reconocimiento de los aminocidos
En las reacciones donde se obtuvo precipitacin se debi a un cambio en el
estado fsico de la protena, mientras que en la coagulacin se ha producido un
cambio en el estado fsico y en la estructura qumica por eso es irreversible.