TSI: Empleado para la diferenciacin de

enterobacterias, en base a la
fermentacin de glucosa, lactosa,
sacarosa y a la produccin de cido
sulfhdrico.

La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono

fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario
para la produccin de cido sulfhdrico, producen sulfuro de
hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y
el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.

Hierro Kliger: Medio de cultivo usado en

microbiologa de alimentos para la
diferenciacin de enterobacterias, en
base a la fermentacin de glucosa y
lactosa, y a la produccin de cido
sulfhdrico.

La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono

fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario
para la produccin de cido sulfhdrico, el citrato de hierro y
amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se combinan
con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color
negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de
sodio mantiene el balance osmtico. El agar es el agente
solidificante.

SIM : medio semislido destinado a

verificar la movilidad, produccin de indol
y de sulfuro de hidrgeno en un mismo
tubo.
Es til para diferenciar miembros de la
familia Enterobacteriaceae.

El indol producido se combina con el aldehido del reactivo de

Kovacs o de Erlich, para originar un compuesto de color rojo.
Las cepas mviles pueden apreciarse en este medio, por la
turbidez que producen alrededor de la puncin de siembra,
mientras que aquellas cepas productoras de sulfhdrico se
distinguen por la formacin de un precipitado negro de sulfuro
de hierro

MIO: usado para la identificacin de

Enterobacteriaceae en base a su
movilidad, actividad de ornitina
decarboxilasa y produccin de indol.

Detectar 3 reacciones en un mismo tubo: movilidad, presencia

de ornitina decarboxilasa e indol.
La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del medio o
por crecimiento que difunde mas all de la lnea de inoculacin.
La reaccin positiva a la ornitina est dada por un color prpura
del medio. Debido a la fermentacin de la glucosa se reduce el
pH produciendo una condicin cida y originando que el
indicador de pH prpura de bromocresol vire al amarillo
El indol, es producido a partir del triptofano por los
microorganismos que contienen la enzima triptofanasa.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos,
Segn la va utilizada, se originarn productos finales cidos
(cido lctico, cido actico, cido frmico), o productos finales
neutros (acetil metil carbinol).
podra ser reconocida indicador como rojo de metilo, para
revelar la presencia de productos cidos, y por la adicin de
alfa naftol e hidrxido de potasio para evidenciar la presencia
de productos finales neutros. Voges y Proskauer, describieron
una coloracin rojiza que apareca despus de adicionar
hidrxido de potasio a los cultivos de ciertos microorganismos
en medio con glucosa. Esta coloracin se debe a la oxidacin
del acetilmetil carbinol a diacetilo el cual reacciona con la
peptona del medio para dar un color rojo.
El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el rojo de

Caldo MR-VP: utilizado para la

realizacin del ensayo de Rojo de Metilo
y Voges Proskauer.
Es particularmente til para la
clasificacin de enterobacterias.

Urea: Utilizado para diferenciar

1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo

solamente fermenta la glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el
microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo
es no fermentador de azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el
microorganismo produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce
cido sulfhdrico.
1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo
solamente fermenta la glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el
microorganismo fermenta glucosa, y lactosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo
es no fermentador de azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el
microorganismo produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce
cido sulfhdrico.
Cepas mviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas all
de la lnea de siembra.
Cepas inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de
siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de siembra
o en todo el medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Cepas indol positivas: desarrollo de color rojo luego de agregar el
reactivo de Kovacs o de Erlich.
Cepas indol negativas: sin cambio de color.

1-Prueba del rojo de metilo:

Positivo: color rojo.
Negativo: color amarillo.
2-Prueba de Voges Proskauer:
Positivo: desarrollo de un color rojo en pocos minutos despus de una
completa agitacin del tubo.
Negativo: ausencia de color rojo.

microorganismos en base a la actividad

uresica.
Se utiliza para identificar bacterias que
hidrolizan urea, tales como Proteus spp.,
otras enterobacterias y estafilococos.

O/F: Medio de cultivo, que, al ser

suplementado con hidratos de carbono,
se usa para determinar el metabolismo
oxidativo-fermentativo de las bacterias
Gram negativas. Esta prueba es til para
diferenciar especies bacterianas.
Tambin, permite determinar movilidad y
produccin de gas.

C. Simons: Medio utilizado para la

diferenciacin de enterobacterias, en
base a la capacidad de usar citrato como
nica fuente de carbono y energa.

C.L.E.D: Es utilizado para el aislamiento,

recuento e identificacin presuntiva de
microorganismos, pues permite el
desarrollo de la mayora de los
patgenos urinarios y previene el
desarrollo invasor de Proteus spp.

fenol es el indicador de pH.

Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima
ureasa liberando amonaco y dixido de carbono. Estos
productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol
del amarillo al rojo. En este medio, la fermentacin de la
glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del
metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan lentamente
la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella.
El medio basal O.F., fue desarrollado por Hugh y Leifson, para
evidenciar la importancia del significado taxonmico del
metabolismo oxidativo-fermentativo de los hidratos de carbono
por las bacterias Gram negativas.
Cuando un microorganismo es inoculado en 2 tubos del medio
O.F. conteniendo el mismo hidrato de carbono, y uno de los 2
tubos es sellado con vaselina o parafina antes de la
incubacin, se puede diferenciar bien el metabolismo oxidativo
o fermentativo, as como la no utilizacin de un hidrato de
carbono por la bacteria en estudio.
el fosfato monoamnico nica fuente de nitrgeno y el citrato
de sodio nica fuente de carbono.. Las sales de fosfato forman
un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimtico. El
cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de
bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en
medio alcalino. El medio de cultivo es diferencial en base a que
los microorganismos capaces de utilizar citrato como nica
fuente de carbono, usan sales de amonio como nica fuente de
nitrgeno, con la consiguiente produccin de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias
poseedoras de citrato permeasa, a travs del ciclo del cido
tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato da
progresivamente, oxalacetato y piruvato. Este ltimo, en
presencia de un medio alcalino, da origen a cidos orgnicos
que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen
carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al
azul y esto es indicativo de la produccin de citrato permeasa.
La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, la L-cistina es
el agente reductor, el azul de bromotimol es el indicador de pH
y el agar es el agente solidificante.
La diferenciacin de los microorganismos se basa en la
utilizacin que stos puedan hacer de la lactosa; las cepas que
la fermentan, acidifican el medio que vira del verde al amarillo,
mientras que los que no lo hacen, dan colonias incoloras que
viran el medio al color azul. La restriccin de electrolitos en el
medio impide el desarrollo invasor de especies de Proteus, por
tal motivo, es un medio ideal para el recuento de colonias.

El uso del hidrato de carbono, ya sea por fermentacin u oxidacin,

produce acidez en el medio, con el consecuente viraje del color verde al
amarillo.
a-Microorganismos oxidativos del hidrato de carbono en estudio:
producen una reaccin cida solo en el tubo abierto.Presentan poco o
nulo desarrollo y ausencia de produccin de cido en el tubo cerrado.
b-Microorganismos fermentadores del hidrato de carbono en estudio:
producen una reaccin cida en ambos tipos de tubos.
c-Microorganismos que no utilizan el hidrato de carbono en estudio: no
producen cambios ninguno de los 2 tubos, los cuales permanecen
verdes.
-Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.
-Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay
desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.
Microorganismo

Citrato permeasa

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

Positivo

S. typhimurium ATCC 14028

Positivo

E. coli ATCC 25922

Negativo

S. flexneri ATCC 12022

Negativo

Microorganismos

Escherichia coli ATCC 25922

Escherichia coli ATCC 35218

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

P. aeruginosa ATCC 27853

P. mirabilis ATCC 43071

S. aureus ATCC 25923

E. faecalis ATCC 29212

Mac Conkey: se utiliza para el
aislamiento de bacilos Gram negativos
de fcil desarrollo, aerobios y anaerobios
facultativos. Permite diferenciar bacterias
que utilizan o no, lactosa en muestras
clnicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae
desarrollan en el mismo.

la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes

selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora
Gram positiva.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la
colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH
(rojo neutro), la absorcin en las colonias, y la precipitacin de
las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen
colonias incoloras.

Microorganismos

Colonias

Escherichia coli ATCC 25922

Rojas con halo turbio

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603

Rosadas mucosas

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Incoloras, transparentes

Shigella flexneri ATCC 12022

Incoloras, transparentes

Proteus mirabilis ATCC 43071

Incoloras, transparentes

Enterococcus faecalis ATCC 29212

Diminutas, incoloras, opaca