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Ministrio da Sade
Todos os direitos reservados. permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte e que no seja para
venda ou qualquer fim comercial. A responsabilidade pelos direitos autorais de textos e imagens desta obra da rea tcnica.
Pode ser acessada na ntegra na Biblioteca Virtual em Sade do Ministrio da Sade: http://www.saude.gov/bvs.
Tiragem: 1a Edio - 2012 - 5.000 exemplares
Elaborao, distribuio, informaes:
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Gesto do Trabalho e da Educao na Sade
Departamento de Gesto da Educao na Sade
Esplanada dos Ministrios, bloco G, sala 725
CEP: 70058-900, Braslia - DF
Telefones: (61) 3315 2858 / 3315 3848 - Fax: (061) 3315 2862
E-mails: sgtes@saude.gov.br / deges@saude.gov.br
Homepage: www.saude.gov.br/sgtes
Coordenao:
Maria Auxiliadora Crdova Christfaro
Mnica Sampaio de Carvalho
Mozart Julio Tabosa Sales
Autores:
Ftima Regina Gomes Pinto
Letcia Maria Correia Katz
Reviso tcnica:
Catarina de Oliveira Neves
Coordenao editorial:
La Simone Carvalho
Mario Correia da Silva

Impresso no Brasil / Printed in Brazil

Projeto grfico, diagramao, capa e arte-final:


Breno Santos Pessoa de Luna
Dino Vincius Ferreira de Araujo
Apoio tcnico:
Maria Aparecida Timo Brito
Maria Ivanildes Resende de Oliveira
Ilustrao:
Antonio Carlos Acioli da Silva Junior
Normalizao e reviso editorial:
Centro de Estudos e Pesquisa em Sade Coletiva (CEPESC)
Endereo: Rua So Francisco Xavier, 524 7 andar Bl. D
Maracan Rio de Janeiro RJ
www.cepesc.org.br
cepesc@ims.uerj.br/ cepesc@cepesc.org.br
(21) 2569-1143/ 2234-7457

Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP)


(Ficha catalogrfica elaborada pela bibliotecria Sandra Infurna, CRB n 7 4607)
P659
Pinto, Ftima Regina Gomes

Caderno de referncia 2: citopatologia no ginecolgica / Ftima Regina Gomes Pinto, Letcia Maria Correia Katz
Braslia: Ministrio da Sade; Rio de Janeiro: CEPESC, 2012.
86p. (Coleo Cadernos de Referncia; 2)
ISBN 978-85-324-0034-5
1. Citopatologia. 2. Educao em Sade. 3. Ensino Profissional. 4. Ensino Tcnico. I. Ttulo. II. Katz, Letcia Maria Correia.
III. Programa de Formao de Profissionais de Nvel Mdio para a Sade.
CDU 576.385:37
Ttulos para indexao:
Em ingls: Notebook Reference 2: no gynecological cytopathology
Em espanhol: Cuaderno de Referencia 2: no ginecolgica citopatologa

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Lista de abreviaturas e siglas


BAAR
BBS
DEGES
DNA
DQ
EA
ETSUS
HCl
HE
HIV
IgA
LBA
ml
mm
MMG
MS
PAAF
PAS
pH
Profaps
RNA
rpm
SGTES
SUS

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Bacilos lcool-cido resistentes


Soluo salina balanceada de Hank
Departamento de Gesto da Sade
cido desoxirribonucleico
Diff-Quick
Corante composto por eosina, verde-luz ou brilhante e pardo de Bismarck
Escola Tcnica do SUS
cido clordrico
Hematoxilina - Eosina
Vrus da imunodeficincia humana
Imunoglobulina A
Lavados Broncoalveolares
Mililitro
Milmetro
Mtodo de May-Grenwald-Giemsa
Ministrio da Sade
Puno aspirativa por agulha filha
cido Peridico de Schiff
Potencial Hidrogeninico
Programa de Formao de Profissionais de Nvel Mdio Para a Sade
cido ribonucleico
Rotaes por minuto
Secretaria de Gesto da Educao na Sade
Sistema nico de Sade
Micra

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SUMRIO

Apresentao............................................................................................................................... 7
1 Tcnicas de coleta em citopatologia geral.............................................................................

2 Processamento tcnico e laboratorial dos espcimes citolgicos.........................................

21

3 Padres citopatolgicos gerais em condies benignas e malignas......................................

43

4 Padres citopatolgicos em rgos especficos...................................................................... 53


Referncias.................................................................................................................................. 81
Apndice..................................................................................................................................... 83

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Apresentao

A Secretaria de Gesto do Trabalho e da Educao na Sade (SGTES) do Ministrio da Sade
(MS), por meio da Coordenao-Geral de Aes Tcnicas em Educao na Sade do Departamento de
Gesto da Educao na Sade (DEGES), desenvolve polticas e programas com o propsito finalstico
de ordenar recursos humanos para a sade, como determina o Art. 200 da Constituio Federal, e, nesta
perspectiva:
Atender ao que dispe a Lei N 8080/90, especificamente no seu Art. 6;
Contribuir para a adequada formao, alocao, qualificao dos profissionais e valorizao e
democratizao das relaes do trabalho;
Ampliar as oportunidades de formao profissional e de qualificao tcnica para trabalhadores
do nvel mdio, tendo como propsito a qualidade das Redes de Ateno Sade do SUS;
Consolidar, nos planos poltico, pedaggico e administrativo, as Escolas Tcnicas do SUS
(ETSUS).

A efetividade, o atendimento oportuno e a qualidade dos servios de sade guardam intrnseca
relao com a formao e a qualificao profissional. Portanto, imprescindvel que os acordos e
respectivos contratos de colaborao entre os entes federativos, objetivando a organizao da rede de
ateno sade, assegurem recursos para o cumprimento e efetivao dos processos de formao e de
qualificao tcnica para o grupo de trabalhadores. Profissionais estes que formam o maior segmento da
fora de trabalho da rea da sade, os tcnicos de nvel mdio.

A efetivao dos objetivos do Programa de Formao de Profissionais de Nvel Mdio para a
Sade (PROFAPS) implica a definio de diretrizes e prioridades para a rea de formao profissional e
de qualificao tcnica com foco nos trabalhadores de nvel mdio do SUS.

Entre essas prioridades est a formao do Tcnico em Citopatologia. Para tanto, foi definido plano
de trabalho cuja execuo resultou no estabelecimento das Diretrizes e Orientaes para a Formao,
fundamentadas nas diretrizes e princpios das polticas nacionais da educao e da sade, publicadas em
2011.

Nessa linha, a SGTES/DEGES investiu na aquisio e produo de recursos e material didtico
especfico para os cursos de formao profissional tcnica, prioritrios no PROFAPS e que esto sendo
desenvolvidos pelas ETSUS.

Para o curso tcnico em citopatologia, a Coordenao-Geral de Aes Tcnicas em Educao
na Sade, junto com as ETSUS e especialistas da rea, definiu e coordenou o processo de elaborao e
produo de material didtico especfico, o que traduz a relevncia da formao profissional tcnica de
nvel mdio na poltica nacional de sade. Este atlas (impresso e digital) um desses recursos.

Organizado tendo como referncia as diretrizes para a formao do tcnico em citopatologia,
seguramente, base tanto para a elaborao e definio do projeto poltico-pedaggico como para o
desenvolvimento do curso.

A produo de material bibliogrfico para o Curso Tcnico em Citopatologia inclui:
Atlas de Citopatologia Ginecolgica (verso impressa e digital)
Caderno de Referncia 1: Citopatologia Ginecolgica
Caderno de Referncia 2: Citopatologia No Ginecolgica
Caderno de Referncia 3: Tcnicas de Histopatologia

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Caderno de Referncia 2

Apoiar o desenvolvimento do curso o objetivo especfico, contudo tem-se como propsito


consolidar e ampliar a articulao das Escolas Tcnicas com as Redes de Ateno Sade do SUS e, a
partir dessa base, consolidar as Escolas como rede de excelncia na formao profissional e na qualificao
tcnica do nvel mdio na rea da sade.

Nessa perspectiva, fundamentada nos princpios das polticas de sade, de educao e da regulao
do trabalho, o SUS desenvolve a ordenao dos recursos humanos para a sade.

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1 Tcnicas de coleta em
citopatologia geral

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1 Tcnicas de Coleta em Citopatologia Geral


Historicamente, o primeiro relato da utilizao do exame citolgico foi no ano de 1838, por Johannes
Mller, que descreveu a imagem microscpica de clulas malignas obtidas por raspado superficial de
tumores excisados cirurgicamente. Posteriormente, o patologista francs Lebert avaliou citologicamente
espcimes provenientes de efuses, secrees traqueobrnquicas e urina. Mas foi no incio do sculo
XX, precisamente no ano de 1920, que houve um avano importante no diagnstico citolgico com a
utilizao da citologia esfoliativa e aspirativa pelos patologistas Aurel Babes, George Papanicolaou e
James Ewing. Na dcada de 1930, o exame citolgico passou a ser utilizado no diagnstico de tumores
dos vrios stios anatmicos. Neste perodo, Ewing e seus colaboradores popularizaram o uso da agulha
fina para o diagnstico de leses superficiais e profundas, difundindo ainda mais o uso da citologia geral.

Reconhecidamente, a avaliao citolgica apresenta uma srie de vantagens quando comparada
a outros mtodos diagnsticos como, por exemplo, a bipsia. um procedimento com menor grau
de invaso, dispensa o uso de anestesia na maioria das vezes, possui menores taxas de complicaes,
durante e aps a coleta, e fornece resultados rpidos e de baixo custo. No entanto, temos que levar em
considerao a possibilidade de maior nmero de resultados inconclusivos em amostras escassas ou com
artefatos, m interpretao diagnstica pela ausncia da arquitetura tecidual, dificuldade de acesso a
certos rgos e na obteno de espcimes representativos em algumas leses, alm de obscurecimento dos
elementos celulares pela presena de sangue. A quantidade e qualidade do material citolgico so fatores
determinantes na preciso diagnstica e esto diretamente relacionados ao uso de tcnicas adequadas de
amostragem e ao processamento apropriado dos espcimes.

Podemos dividir os espcimes citopatolgicos em dois grandes grupos, dependendo da tcnica
empregada na coleta das amostras:

Obtidos atravs da puno aspirativa com agulha fina (PAAF) ou por capilaridade.
Obtidos a partir da raspagem de uma leso ou de clulas que descamam naturalmente
compreendem os imprints, raspados, escovados, lavados e tambm as anlises de escarro, urina,
secreo mamilar e lquidos cavitrios.

1.1 Puno

um mtodo simples, rpido e seguro que confere boa preciso diagnstica. Pode ser realizado
ambulatorialmente. Complicaes como sangramento, hematomas, processos inflamatrios e pneumotrax,
so raras.

Algumas etapas preliminares e cuidados especficos so necessrios na realizao do procedimento,
como o preparo fsico e psicolgico do paciente, a antissepsia do local a ser puncionado e um pequeno
curativo oclusivo aps a puno. indicado o uso de anestsico na puno de rgos profundos.
Contraindicaes para puno
Presena de distrbios de coagulao.
Tosse (nos casos de puno de tireoide ou transtorcica).
Cisto hidtico (fgado).
Tumor do corpo carotdeo (pelo risco de hemorragia).
Uso de anticoagulantes.

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Caderno de Referncia 2

1.1.1 Puno aspirativa com agulha fina (PAAF)


Introduzida em 1926 por Martin e Ellis nos Estados Unidos da Amrica (EUA), s ganhou
popularidade no incio dos anos 1950, quando patologistas suecos passaram a usar agulhas de menor
calibre. Atualmente utilizado em larga escala em vrios pases, consiste na obteno de amostras de
ndulos ou tumores de qualquer topografia, seja de rgos superficiais, como mama, tireoide, linfonodos
e glndulas salivares principalmente, seja de rgos profundos, como pulmo, fgado, pncreas e
retroperitnio. Nesses ltimos, so guiados por mtodos de imagem como ultrassonografia ou tomografia
computadorizada.
As agulhas empregadas na coleta dos espcimes so de pequeno calibre, entre 0,5 mm e 0,7
mm. Entretanto, em caso de material espesso ou purulento, podem ser utilizadas agulhas de 0,8 mm.
Comumente as agulhas para aplicao de insulina, de 0,45 mm, so utilizadas para puncionar ndulos
mais superficiais. Outros equipamentos, como seringa plstica descartvel de 10 ml ou 20 ml, luvas
cirrgicas, gaze estril, soluo de lcool iodado para antissepsia, lminas de vidro para microscopia
com extremidade fosca e fixador integram o restante do material necessrio para realizar o procedimento.
Alguns autores recomendam o uso da pistola (porta-seringa), enquanto outros a dispensam.

Figura 1 - Portaseringa.
Instrumento utilizado para
apoiar o conjunto de seringa
e agulha.

Para a realizao da PAAF, devemos colocar o paciente em posio adequada, identificar a leso
por palpao, fazer a antissepsia local, acoplar a agulha seringa e fixar a leso entre o dedo indicador e
o mdio. Em seguida, proceder puno de acordo com a tcnica descrita na figura abaixo.

Figura 2 - Posicionamento do
paciente para a realizao da
PAAF de ndulo da tireoide.

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1 Tcnicas de Coleta em Citopatologia Geral

Figura 3 - Tcnica da PAAF.


a - Manter o mbolo na posio zero,
introduzir a agulha na leso perpendicularmente superfcie da pele;
b - Promover forte presso negativa
no interior da seringa, deslocando
o mbolo para estabelecer vcuo,
mantendo-o;
c - Efetuar movimentos de vai e vem
com a agulha na leso, em diversas direes e profundidades, mantendo a
presso negativa, at aparecer material
no incio da seringa;
d - Soltar o mbolo da seringa, desfazendo a presso negativa, ainda com a
agulha na leso;
e - Retirar a agulha da leso e comprimir o local com uma gaze;
f - Retirar a agulha da seringa com o
mbolo na posio zero;
g - Puxar o mbolo da seringa, fazendo
vcuo;
h - Acoplar a agulha na seringa para em
seguida, empurrando o mbolo, depositar o material na lmina e preparar o
esfregao, fixando-o em seguida.


Materiais lquidos, puncionados de ndulos csticos, necessitam de centrifugao prvia a fim
de utilizar o sobrenadante na confeco do esfregao. Em tais casos, as amostras so encaminhadas ao
laboratrio em recipiente limpo ou na prpria seringa (sem a agulha, fechada com a tampa desta e vedada
com esparadrapo), mantendo-as em geladeira se no puderem ser encaminhadas imediatamente. No
preciso fixao prvia do material nem o uso de anticoagulante.

Nos espcimes predominantemente celulares dos ndulos slidos, remover a agulha da seringa
e puxar o mbolo para trs, a fim de permitir a entrada de ar na seringa. Acoplar novamente a agulha e,
com o orifcio do bisel tocando levemente a superfcie de uma lmina, empurrar o mbolo da seringa a
fim de depositar uma gota do material, com 2 mm a 3 mm de dimetro, diretamente sobre a lmina para a
preparao dos esfregaos.

A tcnica de confeco dos esfregaos varia de acordo com o tipo de amostra obtida e com a
familiaridade do profissional por determinado mtodo. Em se tratando de material hemorrgico
e semisslido, utilizar a extremidade de outra lmina inclinada em 45 para estender o espcime
delicadamente, em movimento nico, rpido e uniforme, semelhante ao que feito no esfregao para
hematologia. Para espcimes excessivamente fluidos, inclinar a lmina para baixo e remover, com papel
absorvente, o excesso de lquido que se deslocou por gravidade, utilizando a parte mais consistente que
restou na lmina para confeccionar o esfregao. Quando a amostra for constituda por coloide ou outro
tipo de substncia semelhante, deve-se comprimi-la entre duas lminas, puxando-as horizontalmente em
direes opostas, suavemente. Quando o material for colhido no prprio laboratrio, aps confeco dos
esfregaos (em torno de seis por puno), deve-se lavar a agulha e a seringa com 10 ml de soluo salina,
colocar o lavado em um tubo limpo devidamente identificado e centrifug-lo a fim de obter esfregaos
adicionais com o material sedimentado.

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Caderno de Referncia 2

Figura 4 - Confeco dos esfregaos.


a - O material a ser examinado dever ser colocado no centro da lmina.
b - Utilizar outra lmina na mo direita, inclinada em 45, para fazer o esfregao.
c; d; e - Deslizar o material suavemente at a extremidade da lmina de modo a obter um esfregao homogneo e fino, no
centro da lmina.

1.1.2 Puno por capilaridade


Considerada uma variante da metodologia original, dispensa o uso da seringa na coleta dos espcimes. Parte do princpio de que o mais importante na obteno do material o efeito do corte e o
deslocamento do tecido com a ponta da agulha e no a presso negativa causada pela suco da seringa.
Inicialmente utilizada em 1986 pelo francs Zajdela na coleta de material do tecido ocular, teve seu uso
estendido para outros rgos em virtude de ser um mtodo menos traumtico, de mais fcil aplicao e
que confere excelente celularidade s amostras. Os materiais necessrios para este procedimento so os
mesmos empregados na PAAF.
Tcnica

Localizar e fixar o ndulo.


Fazer a assepsia do local a ser puncionado.
Introduzir a agulha na leso e efetuar movimentos rpidos e repetidos de vai e vem, em vrias
direes.
Remover a agulha da leso ao perceber a presena de material no bisel.
Acoplar a agulha com o material coletado a uma seringa descartvel de 10 ml, com o mbolo j
deslocado, e eliminar pequenas quantidades da amostra em vrias lminas. Confeccionar os esfregaos e fixar de maneira idntica tcnica anterior.

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1 Tcnicas de Coleta em Citopatologia Geral

Pele

Agulha

Ndulo

Figura 5 - Puno por capilaridade.

1.2 Imprints

Os materiais citolgicos so obtidos a partir de amostras de bipsia, da superfcie de corte de um
rgo ou de leses midas. A tcnica consiste na remoo de clulas superficiais atravs do contato ou toque
direto da lmina sobre o material que se quer examinar. Esta tcnica oferece informaes diagnsticas
complementares nos estudos das leses da mama, de rgos do aparelho digestivo, pele, medula ssea etc.
Os imprints so de grande valia no exame intraoperatrio como mtodo auxiliar da congelao,
podendo, inclusive, substitu-la quando o material escasso ou quando se pretende evitar as alteraes
artefatuais decorrentes do processo de congelamento do tecido. Tambm so utilizados em salas de
necropsia para confirmao diagnstica rpida de suspeitas levantadas na macroscopia.

O esfregao preparado pressionando-se o material direta e suavemente sobre uma lmina limpa
por duas ou trs vezes, em vrios locais, devendo ser imediatamente fixado para evitar o dessecamento.
Para retirar o excesso de sangue e fluido do material, deve-se previamente secar a superfcie de corte com
uma toalha de papel ou gaze.

Esta tcnica possui algumas limitaes, uma delas a obteno de amostras com escassa
celularidade quando realizada em tumores de textura fibrosa, como os fibromas, fibrossarcomas e
inflamaes cicatriciais. Alm disso, quando realizada em leses ulceradas, a amostra pode conter restos
celulares, bactrias e clulas inflamatrias, que podero ocultar a etiologia da leso ou mascarar processos
tumorais. Nesses casos, se houver alguma rea slida, recomenda-se a utilizao concomitante de outros
mtodos, como a citologia aspirativa ou o raspado superficial da leso, para aumentar o nmero de clulas
esfoliadas.
1. 3 Raspados

Obtemos raspados de superfcies cutneas ou mucosas, como pele, boca, uretra, canal anal etc.,
utilizando-se lminas de bisturi, swabs, esptulas ou escovas apropriadas. recomendvel no lavar a leso
previamente nem usar medicaes tpicas, para no prejudicar a qualidade das amostras. Rotineiramente,

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Caderno de Referncia 2

so feitas duas a trs raspagens da leso ou da rea que se pretende examinar, de forma suave para evitar
sangramentos. O material colhido deve ser uniforme e suavemente estendido sobre uma lmina de vidro
limpa, em uma fina camada, e imediatamente fixado em lcool a 95% ou com spray fixador.

Em caso de leses vesiculares, estas devem ser rompidas com uma pequena inciso fazendo a
raspagem de suas margens, pois o material existente na base, por ser mal preservado, dificulta o diagnstico.
Em leses no ulceradas ou no vesiculares, aconselha-se aplicar previamente uma compressa de soluo
fisiolgica por alguns minutos, a fim de propiciar maior descamao e melhor preservao celular.
1.4 Escovados

Atravs de aparelhos endoscpicos que possibilitam a visualizao direta da leso a ser estudada,
os escovados permitem adquirir espcimes brnquicos, esofgicos, gstricos e intestinais, principalmente.
Muitas vezes, este mtodo mais eficaz em detectar neoplasias malignas do que a biopsia brnquica, por
exemplo. Nesse caso, aplica-se uma escova na superfcie da leso endobrnquica, atravs do broncoscpio
de fibra ptica, espalhando o material colhido numa lmina para a confeco dos esfregaos ou coloca-se
em um meio lquido de coleta para a realizao de cell block.

O procedimento pode ser feito ambulatorialmente sob sedao leve e com anestesia tpica. O
paciente deve estar em jejum de pelo menos quatro a seis horas e com acesso venoso perifrico. Uma
pequena escova introduzida juntamente com a sonda de um fibroscpio pela cavidade oral, nasal ou anal,
dependendo da localizao do tumor, e suavemente deslizada por cima da leso para efetuar a raspagem.
Posteriormente, a escova retrada para o interior da sonda e retirada junto com esta. Recomenda-se
efetuar o escovado antes de biopsiar a leso, para evitar amostras hemorrgicas. O material escovado
deve ser transferido rolando-se a escova sobre uma lmina de vidro limpa, espalhando-o uniformemente e
fixando-o imediatamente em lcool a 95% ou spray, visando preservar os detalhes da morfologia celular.
Aps a realizao dos escovados aconselha-se fazer, ainda, um lavado da escova, agitando-a em soluo
salina a fim de se examinar tambm o sedimento centrifugado.
1.5 Lavados

Consistem na instilao de soluo salina tamponada na rea da leso, preferencialmente sob
viso endoscpica direta, seguida da aspirao do material. Em geral, so realizados ambulatorialmente,
mediante sedao leve. Os lavados so acondicionados em recipientes limpos com a indicao do local
da coleta. Quando provenientes de diferentes localizaes anatmicas, devem ser colocados em frascos
distintos. Para evitar sua deteriorao, o material deve ser enviado imediatamente ao laboratrio para
processamento ou ser devidamente preservado segundo o tipo de lavado.
1.5.1 Lavado brnquico

Mtodo alternativo e mais comum do que o aspirado, consiste em lavar a mucosa com a instilao
de 3 ml a 10 ml de soluo salina e, em seguida, aspirar o lquido que dever ser centrifugado, utilizandose o concentrado para fazer esfregaos e cell blocks. Armazenar o material aspirado em geladeira at no
mximo 24 horas aps a coleta, sem usar anticoagulante ou fixador. Na impossibilidade de processamento
laboratorial imediato, preservar o material adicionando quantidade idntica de etanol a 50% (ou 70%) ou
Carbowax (a 2% em lcool a 50%).
1.5.2 Lavados broncoalveolares (LBA)

Permitem que as vias areas distais sejam lavadas com vrias alquotas de soluo salina estril.
A primeira alquota mais representativa de material das vias areas mais largas e as seguintes representam

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1 Tcnicas de Coleta em Citopatologia Geral

material do compartimento alveolar. Os lavados broncoalveolares devem ser refrigerados (entre 4 C a 8


C) por no mximo duas horas, evitando-se o congelamento.

um mtodo particularmente til para o diagnstico das infeces oportunistas nos pacientes
imunocomprometidos. O Pneumocystis carinii, historicamente, foi o patgeno pulmonar mais identificado
por este mtodo nos pacientes infectados pelo HIV. O LBA tambm utilizado para o diagnstico de
malignidade com uma sensibilidade de 35% a 70%, principalmente nos tumores difusos ou multifocais.
1.5.3 - Lavados esofgicos

Comumente so realizados durante o exame de endoscopia digestiva alta. Aps a coleta, colocar o
material em etanol a 50% ou 70% ou em soluo de Carbowax, na proporo de 1:1. Recomenda-se jejum
de oito horas antes da obteno dos espcimes.
1.5.4 - Lavados gstricos

So obtidos de reas suspeitas da mucosa gstrica sob viso endoscpica direta. Os pacientes
devem fazer jejum prvio de 12 horas. Para a preservao celular, adicionar igual volume de etanol
a 95%, colocando os recipientes contendo o material embalado no gelo e os enviando de imediato ao
processamento.
1.5.5 Lavados peritoneais

Devem ser colocados em recipientes heparinizados (trs unidades de heparina por mililitro da
capacidade volumtrica do recipiente coletor) e refrigerados a 4 C at a confeco do esfregao. Havendo
demora no processamento, acrescentar etanol a 50% em partes iguais.

Nos lavados hemorrgicos, alguns autores recomendam a adio de anticoagulantes como citrato
de sdio a 3,8% (1 ml para cada 5 ml de lquido ) ou heparina (cinco a dez unidades para 10 ml de lquido).
1.6 Lquidos cavitrios

A anlise citolgica de material proveniente de lquidos pleurais, pericrdicos ou ascticos til
na investigao de neoplasias malignas, primrias ou metastticas, e tambm no diagnstico de patologias
benignas, infecciosas ou no.

A coleta no precisa ser realizada em ambiente hospitalar, mas em local limpo e reservado para
pequenos procedimentos. Com o paciente adequadamente posicionado, fazer a antissepsia do local a ser
puncionado e anestesiar os diversos planos at atingir a cavidade. Com uma seringa de 20 ml, retirar o
lquido para exame, coloc-lo em recipiente limpo e envi-lo ao laboratrio to logo seja possvel ou
mant-lo na geladeira at a entrega. Volumes inferiores a 2 ml ou superiores a 500 ml so considerados
inadequados para anlise.

Os espcimes so geralmente processados a fresco, sem a adio de anticoagulantes. Ocasionalmente, nos lquidos hemorrgicos, recomenda-se o uso de citrato de sdio a 3,8% ou de heparina. Caso o
processamento laboratorial s possa ser iniciado mais de 12 horas aps a coleta, alguns autores sugerem
adicionar etanol a 50% para melhor preservao do material.

de extrema importncia a elaborao de cell blocks como tcnica complementar no estudo dos
fluidos, pois possibilita a obteno de amostras adicionais permanentes que podero ser utilizadas para
realizao de coloraes especiais.

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Caderno de Referncia 2

b
a

Figura 6 - Amostras de lquidos


cavitrios.
a - Tubos de coleta.
b - Tubo de ensaio.

Figura 7 Lminas com material j centrifugado, pronto para


o processamento laboratorial.

1.7 Materiais obtidos espontaneamente


1.7.1 Escarro

Foi um dos espcimes mais utilizados para o diagnstico citolgico das leses do trato respiratrio,
devido relativa facilidade para sua obteno e por provocar pouco desconforto ao paciente. Com o
advento da broncoscopia e da puno aspirativa por agulha fina (PAAF), seu uso tem declinado.

Seus componentes so constitudos por uma mistura de elementos celulares e no celulares. A
adequacidade da amostra estabelecida pela presena de clulas cilndricas ciliadas e de numerosos
macrfagos alveolares, indicativos de que o trato respiratrio inferior foi representado.

Amostras mltiplas, colhidas em dias consecutivos, aumentam a sensibilidade (de 42% com amostra
nica para 91% com cinco amostras), que tambm varia com a localizao do tumor maligno, sendo de 46%
a 77% para leses centrais e de apenas 31% a 47% para as leses perifricas. A especificidade do mtodo
alta, variando de 96% a 99%. Atravs da citologia esfoliativa possvel diagnosticar tumores centrais
da rvore brnquica e, menos frequentemente, tumores perifricos menores ou at mesmo detectar leses
precursoras do carcinoma escamoso. O escarro obtido aps broncoscopia aumenta a acuidade diagnstica.

A coleta deve ser realizada de preferncia pela manh, quando o paciente o acordar, em jejum
matinal, aps rigorosa higiene bucal (escovao dos dentes e da lngua), geralmente em trs dias consecutivos. No intuito de obter material de origem pulmonar, o paciente orientado a tossir vrias vezes,

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1 Tcnicas de Coleta em Citopatologia Geral

eliminando a secreo diretamente em um recipiente de boca larga, seco e limpo. Caso haja dificuldade
em conseguir escarro espontneo, pode-se fazer nebulizao simples ou inalao com indutores da tosse.
O material deve ser levado imediatamente ao laboratrio ou conservado na geladeira por no mximo 12
horas. Os esfregaos devem ser preparados a partir de reas que contm fragmentos teciduais, sangue ou
ambos, e devem ser imediatamente fixados em etanol a 95%. Quando a preparao imediata no possvel, deve-se fazer uma pr-fixao do escarro na diluio de 1:1 com etanol a 50% ou 70%, ou utilizar
soluo de polietilenoglicol a 2% (Carbowax) em etanol a 50%. Uma vez utilizado o polietilenoglicol,
este dever ser removido em banho de lcool, antes da colorao.
1.7.2 Urina

Com este espcime possvel detectar leses pr-cancerosas e patologias da pelve renal, bexiga,
ureter e uretra. Antes da coleta o paciente deve esvaziar a bexiga (a primeira urina da manh no
adequada para o exame) e fazer uma hidratao bebendo um copo de gua a cada 30 minutos, durante
o perdo de uma hora e meia a duas horas. Colher a prxima urina espontnea da manh diretamente no
recipiente coletor, de preferncia no laboratrio que ir processar o material, aps asseio da genitlia com
gua e sabo. Para promover a mobilizao de urina no interior da bexiga e facilitar a descamao celular,
alguns autores aconselham 15 minutos de exerccios fsicos (correr, pular) antes da coleta. Volumes entre
25 e 100 ml de urina espontnea ou cateterizada so suficientes e o processamento deve ser imediato ou
realizado em at seis horas aps a coleta. Durante esse perodo, manter a urina refrigerada ou preservada
em etanol a 50% (em partes iguais) ou a 70% (na proporo de duas partes de urina para uma de lcool).
1.7.3 Secreo mamria

Objetivando auxiliar o diagnstico de infeces agudas, papiloma ductal, dilatao cstica ductal
e, mais raramente, o diagnstico de neoplasias, a avaliao citolgica de descargas papilares geralmente
utilizada em pacientes que no apresentam massas palpveis nem anormalidades na mamografia e naquelas
com secreo sanguinolenta.

Para coletar o material, comprimir delicadamente a rea subareolar e o mamilo entre os dedos
polegar e indicador. Sem pressionar, colocar a secreo diretamente na lmina, prxima extremidade
fosca, estendendo o material com o auxlio de outra lmina. Fixar imediatamente em lcool a 95% ou
deixar secando ao ar.

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2 Processamento tcnico e
laboratorial dos espcimes
citolgicos: adequabilidade
das amostras

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos


A qualidade do diagnstico citolgico depende de vrios fatores operacionais, sobretudo da adequabilidade, tanto da coleta quanto dos esfregaos quanto do processamento laboratorial dos espcimes.
Os materiais encaminhados ao laboratrio so obtidos pelo mdico assistente durante o exame clnico e
geralmente chegam como esfregaos fixados ou a fresco. Aps o registro de entrada do material, se j
devidamente fixados, os esfregaos podem ser corados. Espcimes mucoides ou lquidos, normalmente
a fresco, necessitam de etapas complementares antes da colorao: se lquidos, submet-los centrifugao, confeccionar os esfregaos a partir do sedimento e fixar em seguida; se mucoides, precisam ser
pr-tratados ou homogeneizados antes da centrifugao, fixando-os aps secar ao ar.

Alguns procedimentos especficos descritos abaixo so necessrios para a obteno de material
citolgico de qualidade, diretamente relacionados com a adequabilidade da amostra.
2.1 Pr-fixao

Tcnica que garante a preservao de espcimes lquidos (do trato urinrio, gastrointestinal ou respiratrio, sobretudo escarro) por dias ou mesmo meses, se necessrio, mantendo a morfologia celular at a
confeco do esfregao. Esta tcnica possui algumas desvantagens, tais como: a coagulao de protenas,
a condensao da cromatina, menor adeso celular e limitao ao uso de certas tcnicas de colorao. As
solues mais comumente utilizadas para este fim so: etanol a 50%, o fixador de Saccomano ou os preparados comerciais especficos.

Dentre eles, o etanol a 50% o melhor e deve ser adicionado coleo lquida em partes iguais,
misturando-se bem. Com exceo do escarro, concentraes maiores no so recomendadas, especialmente em materiais ricos em protenas, porque endurecem a amostra impossibilitando a confeco do esfregao. Para a preservao de escarro, excepcionalmente, utiliza-se o etanol a 70%. O fixador de Saccomano,
inicialmente utilizado na pr-fixao de escarro, teve seu uso estendido para a preservao de lquidos
durante a citocentrifugao, pois evita o colapso celular causado pelo ressecamento do material quando
seco ao ar. constitudo de etanol a 50% com aproximadamente 2% de polietilenoglicol (Carbowax). O
Carbowax slido temperatura ambiente mas pode ser mantido em soluo estoque se adicionarmos
500 ml de etanol a 50% a 500 ml de Carbowax derretido. Para obter um litro de fixador de Saccomano,
misturar 434 ml de gua destilada, 526 ml de etanol a 95% e 40 ml de soluo estoque. Recomenda-se
adicionar quatro gotas do fixador aos fluidos corporais e duas gotas para amostras de urina. Uma vez que
o fixador de Saccomano contm polietilenoglicol, este deve ser removido com um banho de lcool antes
da colorao, para que o material se mantenha adequado avaliao citolgica.
2.2 Centrifugao

O processamento de lquidos de qualquer espcie comea com a centrifugao, visando concentrar
os elementos celulares no sedimento que se forma no fundo do tubo da centrfuga. A centrifugao pode
ser feita com a centrfuga convencional ou com a citocentrfuga, dependendo do tipo de material, ambas
com regulagem de tempo e velocidade de rotao (cronmetro e tacmetro, respectivamente). A quantidade do sedimento obtido aps a centrifugao inicial decide a prxima etapa do processamento: sedimentos
escassos ou invisveis devero ser citocentrifugados, enquanto que os de maior volume fornecem material
propcio para a confeco dos esfregaos ou dos cell blocks.

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Caderno de Referncia 2

2.2.1 Centrifugao convencional



Utiliza um aparelho constitudo basicamente por um eixo central de grande velocidade, uma cabea fixa e tubos coletores.
Tcnica
Registrar o volume do lquido e suas caractersticas macroscpicas (cor, transparncia, viscosidade,
presena de grumos etc.). Caso apresente cogulo ou grumo, remov-lo para processamento em
cell block.
Colocar 5 ml a 15 ml de lquido, a fresco, no tubo da centrfuga e tampar.
Misturar o espcime agitando suavemente o tubo em movimentos circulares.
Balancear a centrfuga colocando os tubos com igual quantidade de lquidos um em frente ao
outro e centrifugar o material entre 1.500 rpm a 2.000 rpm por cinco a dez minutos.
Desprezar o sobrenadante invertendo o tubo coletor em papel toalha ou retir-lo com uma pipeta,
evitando qualquer lquido residual no sedimento.
Alguns autores aconselham adicionar 10 ml de soluo salina balanceada de Hank (BBS) ao
sedimento e repetir a centrifugao.
Colher o sedimento com uma ala de platina ou aspirar com pipeta, coloc-lo sobre lminas de
vidro previamente identificadas e preparar os esfregaos.


Fixar imediatamente algumas lminas em etanol a 95% e deixar outras secarem ao ar, corando-as
pelo mtodo de Papanicolaou ou pelo Diff-Quick, respectivamente. Colorao rpida pelo azul de toluidina pode ser utilizada nas situaes que necessitem de um diagnstico citolgico imediato, em esfregaos
no fixados. Utilizar sedimentos remanescentes ou qualquer fragmento formado para fazer cell block.

Em se tratando de amostras hemorrgicas, podemos torn-las adequadas usando o mtodo da
Saponina, enzima capaz de lisar seletivamente as hemcias. No entanto, o sucesso do mtodo depende
da adequada durao de sua ao, pois poder haver destruio de todas as clulas do espcime. Deve-se
considerar, tambm, que este mtodo propicia o crescimento rpido de fungos, podendo inviabilizar o
exame da amostra.
Mtodo da Saponina
Centrifugar o espcime a 2000 rpm por dez minutos.
Decantar o sobrenadante e adicionar 25 ml de BBS ao boto celular, misturando no agitador.
Acrescentar soluo de Hank at atingir o volume de 45 ml e misturar.
Juntar 2 ml de saponina a 1%, misturando por inverso e deixar agir por um minuto.
Adicionar 3 ml de gluconato de clcio a 3% e misturar por inverso.
Centrifugar a 2000 rpm por dez minutos e preparar os esfregaos diretamente ou por citocentrifugao.

Para preparar a soluo de saponina a 1 %, dissolve-se 1 g de saponina e 0,2 g de sal cido sdio
p-hidroxibenzoico em 100 ml de gua destilada, filtrando depois em papel de filtro de 8 micrmetros.
A soluo de gluconato de clcio, usada para interromper a ao da saponina, obtida misturando-se
3 g de gluconato de clcio e 0,02 g de sal cido sdio p-hidroxibenzoico em 100 ml de gua destilada,
finalizando com filtrao em membrana de filtro.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

2.2.2 Citocentrifugao

Recomendada no processamento de lquor, aspirados de leses csticas, lavados das agulhas
utilizadas em PAAF e em outros espcimes lquidos de pequeno volume ou que produzam escasso
sedimento na centrifugao convencional. A citocentrifugao tem a vantagem de processar rapidamente
pores lquidas de apenas 0,5 ml ou menos, alm de promover excelente recuperao celular e conferir
maior rapidez e facilidade na interpretao citolgica. Amostras com sedimento espesso devem ser
cuidadosamente diludas antes do processamento, a fim de produzir material em monocamada e evitar
esfregaos inadequados com superposio celular.
Tcnica
Centrifugar inicialmente o material pelo mtodo convencional e decantar o sobrenadante.
Encaixar a lmina e o papel de filtro no suporte da lmina e colocar na centrfuga previamente
balanceada.
Pipetar uma gota ou 0,5 ml do sedimento e colocar no coletor, adicionando duas a trs gotas do
fixador de Saccomano.
Centrifugar a 1.000 rpm (ou a 1.500 rpm, dependendo do fabricante) por cinco a seis minutos,
removendo as unidades com lmina e papel de filtro logo aps.
Levantar cuidadosamente o papel de filtro para separ-lo da lmina, evitando contato com
o sedimento. Antes de descartar o papel de filtro, ele deve ser inspecionado, pois algumas vezes
apresenta sobrenadante aderido que pode ser processado a fim de fornecer informaes adicionais.
Fixar a lmina imediatamente em lcool ou spray. recomendvel usar spray fixador, deixando-a
secar por 10 a 15 minutos antes de mergulhar em lcool a 95%.

Para evitar a perda e facilitar a aderncia celular em lquidos aquosos como amostras de urina e
lquor, recomenda-se usar lminas albuminizadas ou acrescentar duas a trs gotas de albumina ao lquido
antes da centrifugao. Outra opo utilizar lminas foscas ou pr-tratadas com o adesivo Poli-D-lisina.

Figura 8 - Citocentrfuga.
Tubos acoplados com as lminas.

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Figura 9 - Lmina no fixador.

2. 3 Cell blocks (ou blocos celulares)



Tcnica complementar no estudo dos fluidos, algumas vezes tambm aplicada a materiais pastosos,
um dos mtodos mais antigos utilizados no preparo de materiais para exame microscpico. Permite
reconhecer o padro histolgico das doenas atravs da visualizao da arquitetura tecidual, alm de
fornecer amostras adicionais para coloraes especiais, possibilitando a realizao de mltiplos cortes do
material.

Escarro, efuses, sedimento urinrio e material do trato gastrointestinal so particularmente
propcios para esta tcnica, que tambm pode ser usada para materiais residuais ou para qualquer fragmento
tecidual porventura obtido durante o procedimento citolgico. Aps a centrifugao do material, colocar
o sedimento no lquido fixador por determinado perodo, dependendo do tipo de fixador empregado e da
quantidade da amostra. Centrifugar por dois minutos, retirar o material e envolv-lo em papel de filtro,
seguindo as mesmas etapas de preparao das biopsias convencionais.

O fixador mais utilizado na preparao dos cell blocks a soluo de Bouin (750 ml de cido
pcrico aquoso saturado a 1,2%, 250 ml de soluo de formaldedo a 37-40% e 50 ml de cido actico
glacial). No entanto, tambm podem ser utilizadas a formalina tamponada a 10% (100 ml de soluo de
formaldedo a 37-40% e 900 ml de gua corrente) ou a soluo lcool-formaldedo-cido actico (85
ml de etanol absoluto, 10 ml de formaldedo e 5 ml de cido actico). Os blocos celulares podem ser
processados pelos mtodos do gar, sedimento fixado e plasma-trombina.

a
b
Figura 10 - Cell Block.
a - Aps centrifugao e fixao do material,
faz-se o corte.
b - As metades so separadas.
c; d - As metades so colocadas num cassete
para processamento idntico ao da biopsia.

c
d

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

2.3.1 Mtodo do gar



Este mtodo produz preparados de tima qualidade originando um gel coeso do sedimento inteiro
que permite o processamento como se fora tecido. o mtodo de escolha para sedimentos de lavados
gstricos e esofgicos, mas tambm pode ser empregado em efuses e nos lavados do sistema respiratrio.
Utiliza como reagentes a formalina rosa a 10% (preparada com a adio de eosina ao formol a 10% at
que fique rosa ou vermelho claro) e o gar-formalina (mistura de 2 g de gar em 50 ml de formalina rosa
10%), que so misturados, levados ebulio e, depois de frios, armazenados em geladeira.
Tcnica
Misturar quatro a cinco gotas de gar-formalina em soluo (aquecer em banho-maria a soluo
estocada na geladeira, temperatura de 60 C) ao restante do sedimento do tubo.
Colocar o tubo com a mistura na geladeira para solidificar o gar por cerca de 30 min. Para agilizar
o processo, recomenda-se colocar o tubo em becker com gua gelada (previamente guardado na
geladeira).
Depois de solidificado o bloco, desloc-lo suavemente do fundo do tubo com a ajuda da ala de
platina e colocar em papel de filtro cortando-o em tamanho apropriado ao processamento histolgico.
Colocar todo o material em um cassete histolgico, fixar em formalina a 10% e enviar para o
processamento histolgico habitual.
2.3.2 Mtodo do sedimento fixado

Tem como reagente o formol a 10% que endurece o sedimento, permitindo que a amostra seja
encaminhada ao processamento histolgico de rotina.
Tcnica
Adicionar formalina a 10% ao sedimento ou aos fragmentos teciduais formados aps centrifugao
e deixar descansar por, no mnimo, duas horas. Caso necessrio, centrifugar novamente essa mistura
por dez minutos antes de coloc-la em repouso, desprezando o sobrenadante.
Remover cuidadosamente do interior do tubo o sedimento endurecido.
Envolver a amostra em papel de filtro e colocar no cassete histolgico, encaminhando para o processamento histolgico de rotina.
2.3.3 Mtodo do plasma-trombina

Aplicado a lavados brnquicos e plvicos, fluidos serosos e espcimes aspirados, usa a ao
coagulante do plasma e da trombina para obter amostras coesas de clulas dos sedimentos. No
recomendada para espcimes gstricos por conta das enzimas contidas nesses materiais.
Tcnica
Adicionar de duas a trs gotas de plasma ao sedimento remanescente (no fixado) do tubo da
centrfuga, misturando bem. O plasma (obtido em banco de sangue) deve ser estocado no freezer,
podendo ficar na geladeira enquanto estiver sendo usado.
Em seguida, acrescentar duas a trs gotas de soluo de trombina (5.000 unidades de p de trombina
em 5 ml de soluo salina isotnica) e misturar bem.
Aguardar alguns segundos enquanto ocorre a coagulao da mistura (cerca de 30 a 60 segundos).
Depois de formado o cogulo, adicionar lentamente a formalina rosa a 10% e deixar descansar por, no
mnimo, 30 minutos. Cogulos grandes devem ser cortados em pedaos menores antes de serem fixados.
Com uma esptula, remover o cogulo do tubo, envolv-lo com leno de papel e coloc-lo no
cassete e encaminh-lo para o processamento histolgico.

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Caderno de Referncia 2

2.4 Confeco dos esfregaos



O cuidado no preparo dos esfregaos citolgicos primordial na obteno de materiais adequados
para uma interpretao citopatolgica segura. Existem vrios mtodos de confeccionar esfregaos
uniformes e finos, ideais para a anlise microscpica. As lminas devem ser previamente limpas e
desengorduradas com gaze umedecida em lcool e devidamente identificadas na parte fosca.

Dependendo da familiaridade do profissional com a tcnica escolhida e com o tipo de amostra em
questo, deve-se optar por uma das modalidades abaixo na preparao dos esfregaos:
2.4.1 Mtodo do deslizamento (T. Lwhagen)

Utilizado para qualquer tipo de espcime. Coloca-se uma gota do material prximo extremidade
fosca, deslizando-se levemente em direo extremidade contrria com auxlio de outra lmina.
2.4.2 Mtodo do esmagamento

Indicado para espcimes mucoides como escarro, lavados gstricos etc. Uma pequena quantidade
do material colocada no meio da lmina e, com a ajuda de outra lmina, pressiona-se o material,
deslizando-o sobre a superfcie da primeira, em direes opostas.
2.4.3 Mtodo de ala de platina (bacteriolgica)

Aplicado para lquidos serosos. Aps a centrifugao do material, decantar o sobrenadante e remover
uma ou duas gotas da camada superior do sedimento. Em seguida, transferir para lminas j rotuladas usando
a ala de platina para espalhar o material longitudinalmente e entrecruzar em formato de espinha de peixe.
2.4.4 Mtodo de presso

Usado para urina e fluidos aspirados. Depois de centrifugar o espcime, colocar duas a trs gotas
do sedimento numa lmina utilizando uma pipeta ou ala de platina e, pressionando uma segunda lmina
sobre a primeira, separ-las em movimento nico e rpido.

Os esfregaos com distoro celular (por excessiva compresso mecnica no momento da
distribuio da amostra ou por dessecamento do material), distribudos irregularmente em vrias
direes (circular, vai e vem, ziguezague etc.) ou apresentando reas espessas, tornam o espcime
insatisfatrio para a avaliao.
2.5 Fixao das amostras

Confecionados os esfregaos, a fixao tem finalidade de preservar as caractersticas citomorfolgicas e reter certos elementos citoqumicos, aumentando a capacidade celular de absorver os corantes.
Caractersticas do fixador ideal
Penetrar rapidamente nas clulas.
Minimizar a retrao e a distoro celular, substituindo a gua das clulas.
Manter a morfologia celular.
Inativar as enzimas autolticas.
Ter afinidades especficas para as diversas estruturas celulares.
Tornar as membranas citoplasmticas permeveis aos corantes.
Facilitar a aderncia das clulas na lmina de vidro.
Ser compatvel com o mtodo de colorao pretendido.
Ser bactericida.
Ser reprodutvel.
Permitir registro celular permanente.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos


A fixao pode ser feita a seco ou atravs de substncias fixadoras aplicadas imediatamente aps
a confeco do esfregao. Assim, classificamos as tcnicas de fixao em: mida, de cobertura, mista ou
a seco.
2.5.1 Fixao mida

Recomendada para todo tipo de espcime citolgico, consiste na imerso imediata do esfregao
ainda mido na soluo fixadora, a permanecendo at o processamento laboratorial. As clulas no sofrem
ressecamento e com isso evitam-se artefatos celulares, como o aumento da eosinofilia citoplasmtica, do
tamanho nuclear e o borramento da cromatina, que poderiam induzir a erros diagnsticos ou at mesmo
tornar a amostra inadequada.

O fixador mais utilizado atualmente o etanol a 95%, em virtude da sua eficincia, baixo custo
e ausncia de toxidade. Outra vantagem que ele oferece a de poder ser reaproveitado, bastando filtrlo adequadamente antes de um novo uso para minimizar a contaminao do material com resduos
celulares. Outros lcoois, como o isopropanol ou propanol a 80% e o metanol a 100%, tambm podem
ser empregados como fixadores em citologia. A soluo de lcool-ter em partes iguais, preconizada por
Papanicolaou, quase no mais utilizada nos dias de hoje, pois o ter altamente voltil e inflamvel.

O lcool desnatura as protenas e os cidos nucleicos das clulas, tornando-os insolveis e
estveis. tambm um agente desidratante que causa retrao celular e define melhor o detalhe nuclear
das preparaes citolgicas. O tempo de permanncia da amostra no fixador varia entre 10 e 30 minutos,
podendo nele continuar por, no mximo, uma ou duas semanas. Se for necessrio um tempo mais
prolongado, as lminas devem ser estocadas no refrigerador, a fim de garantir melhor preservao celular
e diminuir o risco de evaporao. O recipiente contendo o fixador, geralmente de plstico ou vidro, deve
ter boca larga, vedao satisfatria (de rosca, de preferncia) e tamanho suficiente para garantir que o
esfregao fique totalmente submerso na soluo. Quando vrias lminas so colocadas no mesmo frasco,
deve-se colocar um clipe de metal na extremidade fosca de cada uma delas para evitar a transferncia de
material de umas para as outras e prevenir a aderncia entre elas.

Figura 11 - Fixao mida em


lcool a 95%.


Se, por acaso, ocorrer defeito na fixao e o material ressecar, as clulas escamosas podero ser
recuperadas antes da colorao reidratando-as em soluo de glicerina e gua destilada em partes iguais
por, no mnimo, uma hora. A seguir, mergulham-se as lminas em dois banhos de lcool a 95% deixando-as fixar por dez minutos para, ento, encaminh-las colorao.

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Caderno de Referncia 2

Figura 12 - Material dessecado por defeito de fixao. 200x.

2.5.2 Fixao de cobertura



Utiliza agentes que, alm de fixar as clulas, formam uma espcie de filme protetor sobre o
esfregao facilitando o transporte das amostras citolgicas. Os esfregaos podem ser acondicionados
em caixas de papelo ou de madeira e, por dispensar o uso de recipientes com solues fixadoras
lquidas, sujeitos a quebras e vazamentos, viabilizam o envio dos espcimes para laboratrios distantes e
favorecem o emprego deste mtodo para o escrutnio em massa. No entanto, fixadores de cobertura no
so recomendados para esfregaos advindos de materiais lquidos. Tambm no se deve utilizar sprays
fixadores em materiais hemorrgicos, sob pena de inviabilizar o exame da amostra.

Geralmente esses fixadores contm polmeros de polietilenoglicol e lcool etlico e podem ser
preparados no prprio laboratrio ou adquiridos comercialmente sob a forma de spray. O Carbowax
4000, um dos mais utilizados, permite que os esfregaos sejam armazenados por at uma semana sem
causar distores celulares. Para manipul-lo no laboratrio, amolecer 5 g de polietilenoglicol (Carbowax
composto) em estufa a 56 C, adicionar 95 ml de etanol a 95%, agitando para facilitar a dissoluo, e
deixar descansar por vrias horas temperatura ambiente. Colocar em pequenos recipientes com contagotas para uso oportuno. Eventualmente, utiliza-se fixadores de cabelos (laqu), pois estes contm alta
concentrao alcolica e um mnimo de lanolina ou leo, embora a maioria dos autores no recomende
essa prtica.

O fixador deve ser aplicado sobre o esfregao mido, imediatamente aps sua confeco, deixando-se a lmina secar por 10 a 15 minutos sobre uma superfcie horizontal para s depois envi-la ao
laboratrio. Quando se usa o Carbowax lquido, cinco a seis gotas sobre o esfregao so suficientes. Com
o fixador spray, manter uma distncia de 25 a 30 cm entre a lmina e o bico do tubo para garantir uma
fixao ideal, dirigindo o jato de forma suave e contnua em direo ao esfregao.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Figura 13- A fixao dever ser feita com o


material ainda mido, observando a distncia entre a lmina e o bico do spray.


A permanncia do fixador sobre o esfregao causa de inadequao da amostra. Assim sendo, antes
de iniciar a colorao fundamental remover o polietilenoglicol para permitir a penetrao apropriada dos
corantes, especialmente a hematoxilina e o EA. Com essa finalidade, as amostras so submetidas a dois
banhos sucessivos, de cinco a dez minutos cada, em etanol a 95%.
2.5.3 Fixao mista

Associa a fixao mida com subsequente exposio ao ar e recomendada para o envio de esfregaos a laboratrios distantes. Aps a confeco dos esfregaos, colocar imediatamente as lminas em
fixador lquido, de preferncia o etanol a 95%, retirando-as depois de, pelo menos, 15 minutos. Deixar
secar ao ar e em seguida acondicion-las apropriadamente para o transporte at o laboratrio. Recomenda-se utilizar o mtodo de Ayre e Dakin (1946), que consiste em pingar uma a duas gotas de glicerina sobre
os esfregaos retirados do lcool, cobrir com uma lmina ou lamnula (de 24x60 mm) e envolver em papel
manteiga para o transporte. Ao chegar no laboratrio, o esfregao deve ser novamente colocado em etanol
a 95% antes da colorao.
2.5.4 Fixao a seco

Tambm conhecida como fixao a fresco, geralmente utilizada para coloraes hematolgicas,
como Diff-Quick ou Pantico, e para Giemsa. Os esfregaos devem ser secos o mais rapidamente
possvel, temperatura ambiente ou realizando-se movimentos ao ar para acelerar a secagem. S colocar
os esfregaos em recipientes para transporte depois de completamente secos.
2.5.5 Fixao de esfregaos hemorrgicos

A fim de evitar que o excesso de sangue obscurea os elementos celulares e dificulte ou impea a
interpretao diagnstica, pode-se lanar mo de uma das seguintes opes:
Colocar a lmina em etanol a 50 ou 70%, desidratando depois em etanol a 95%.
Colocar a lmina em etanol a 95% por cinco minutos, depois em soluo de ureia (120 g de ureia
em p dissolvida em 1 litro de gua destilada) por 20 a 30 minutos e, por fim, em etanol a 95%.
Colocar a lmina durante trs a cindo minutos em uma soluo de etanol a 95% (500 ml) com
uma gota de cido hidroclordico e depois mergulh-la em etanol a 95%.

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Caderno de Referncia 2

Colocar uma gota de cido actico glacial em 100 ml de etanol a 95% e mergulhar a lmina na
mistura.
Colocar os esfregaos hemorrgicos no fixador de Carnoy (60 ml de metanol a 95%, 30 ml de
clorofrmio e 10 ml de cido actico glacial) por trs a cinco minutos, at que o sedimento se torne
menos vermelho. Depois transferir as amostras para etanol a 95%. O fixador de Carnoy deve ser
preparado no momento do uso e descartado logo aps. Ao empregar esta tcnica no se esquecer
de reduzir o tempo de permanncia na hematoxilina a fim de evitar que os ncleos se tornem
hipercorados, pois geralmente a retrao nuclear mais intensa que a causada pelo etanol a 95%.
Pode-se utilizar o fixador de Carnoy modificado (soluo com sete partes de etanol a 95% para
meia parte de cido actico glacial) seguido de etanol a 95%.

Esfregaos hemorrgicos provenientes de espcimes lquidos, secos ao ar, podem ser reidratados
mergulhando-os em soluo salina por 30 minutos. Em seguida, fixar em etanol a 95% e corar pelo
Papanicolaou.

Figura 14 - Espcime
hemorrgico e com artefatos de dessecamento.
100x.

2.5.6 Fixao rpida das amostras obtidas por PAAF



Os esfregaos devem ser mergulhados imediatamente em soluo de lcool-formaldedo (160 ml
de formol 10% em 720 ml de etanol absoluto), permanecendo submersos durante 30 segundos a um minuto. Em seguida, podem ser corados pelo mtodo da Hematoxilina-Eosina (HE) rpido (citado adiante).
Este fixador evita a perda de material durante o processamento e os aspectos citomorfolgicos so similares queles normalmente observados nos espcimes fixados em etanol.
2.6 Tcnicas de colorao

Atualmente existe uma variedade de tcnicas de colorao que podem ser utilizadas em citologia,
tanto para o processamento de rotina como para situaes especiais como na imunocitoqumica. Para a
rotina citolgica, a colorao pelo mtodo de Papanicolaou universalmente recomendada.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

2.6.1 Colorao de Papanicolaou



constituda por um corante nuclear natural, a hematoxilina, e dois corantes citoplasmticos: o
orange G6 e o EA (composto por eosina, verde luz ou brilhante e pardo de Bismarck). Essas substncias
esto disponveis comercialmente, mas tambm podem ser preparadas no laboratrio. Com relao ao
EA, de todas as frmulas existentes no mercado, o EA-65 prefervel para os esfregaos no ginecolgicos. Os corantes de Papanicolaou proporcionam excelente demonstrao dos detalhes morfolgicos do
ncleo, promovem boa transparncia citoplasmtica e permitem a diferenciao dos tipos celulares. Uma
ampla variedade de modificaes da tcnica original preconizada por Papanicolaou j foi publicada por
diversos autores e muitos laboratrios fazem suas prprias adaptaes. O mais importante, no entanto,
eleger o tempo de permanncia do esfregao na hematoxilina e no EA, alm da padronizao rigorosa das
etapas do processo visando alcanar resultados reprodutveis.

O mtodo de Papanicolaou pode ser aplicado de forma progressiva ou regressiva. A forma progressiva, como o prprio nome diz, cora o ncleo progressivamente at a intensidade desejada, eliminando a
necessidade de descolorao posterior. mais empregada em citopatologia no ginecolgica, utilizando
uma das seguintes hematoxilinas: Mayer, Delafieilds, Gill-Baker-Mayer ou Gill. Uma vez que dispensa
o banho de gua, usualmente recomendada para esfregaos que no aderem bem s lminas. A forma
regressiva geralmente utiliza a hematoxilina de Harris que cora intensamente o ncleo, removendo-se o
excesso com cido clordrico diludo.

Alguns servios utilizam a tcnica de Papanicolaou modificada descrita a seguir, aliando baixo
custo e maior rapidez na preparao das amostras.
Tcnica
Lavar
1 min e 30s
Lavar
15s
Lavar
1 banho
1 banho
1 mergulho rpido
1 banho
1 banho
3 min
1 banho
1 banho
15 a 30 min

gua destilada
Hematoxilina
gua corrente
Carbonato de ltio
gua corrente
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Orange
Etanol absoluto
Etanol absoluto
EA
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Xilol

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Caderno de Referncia 2

Figura 15 Aparncia das


clulas com a colorao de
Papanicolaou. 200x.


Na tcnica de Papanicolaou, os banhos aps os corantes so realizados no solvente de cada um
deles. Assim, depois da hematoxilina, que aquosa, as lminas so lavadas em gua e aps o orange G e
o EA, corantes alcolicos, so lavadas em lcool. A gua utilizada depois da hematoxilina tem a funo
de remover o corante que no foi ligado ao ncleo, ao complementada com a aplicao de cido clordrico (diferenciao). Como o citoplasma das clulas fica totalmente descorado, as lminas passam pelo
orange G e pelo EA a fim de cor-los, respectivamente, em laranja intenso e brilhante e em rosa, verde
ou azul. A poro dos corantes que no se ligou ao citoplasma removida pelos banhos de lcool que se
seguem. Os ltimos banhos em lcool absoluto eliminam totalmente a gua dos esfregaos (desidratao),
preparando-os para o clareamento com xilol, responsvel por tornar as clulas transparentes.
Fatores que influenciam na reao de colorao
Tipo de fixador usado.
Frmula dos corantes.
Durao dos banhos nos corantes.
Caractersticas da gua corrente usada.
Qualidade da preparao das amostras pelo clnico.
O pH do espcime.

Ncleos plidos so vistos em espcimes dessecados, com restos de fixadores de cobertura, que
passaram tempo excessivo no cido clordrico (ou na gua) ou que no permaneceram o tempo suficiente
na hematoxilina. Fixao em lcool com concentrao superior a indicada, tempo prolongado nos corantes ou uso de corantes muito concentrados ou novos podem deixar os ncleos fortemente corados dando
uma falsa ideia de hipercromasia. Se a hematoxilina no filtrada diariamente, depsitos do corante sobre
o esfregao podem dificultar a leitura.

Quando a bateria de colorao checada diariamente fazendo-se as correes necessrias, muitos
problemas podem ser minimizados. Aconselha-se trocar os corantes depois da colorao de aproximadamente duas mil lminas ou aps um perodo de seis a oito semanas. Os lcoois devem ser trocados quando
mudarem de cor e o xilol ao tornar-se leitoso.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Figura 16 Os ncleos tornam-se plidos


quando o tempo no banho de hematoxilina insuficiente. 200x.

2.6.2 Colorao pela hematoxilina-eosina (HE)



Geralmente utilizada na colorao de cell blocks e de esfregaos de amostras obtidas por PAAF,
cora o citoplasma em rosa e o ncleo em azul, semelhana do que se observa nos esfregaos histolgicos. Apesar de conter corantes comuns aos dois mtodos, o citoplasma no fica to transparente e o ncleo
no to bem definido quanto na colorao de Papanicolaou.
Tcnica
Lavar em gua destilada
Hematoxilina de Harris
Lavar em gua corrente
cido-lcool (1,5 ml de HCI concentrado
em 650 ml de etanol a 70%)
Lavar em gua corrente
Soluo de Carbonato de Ltio
Lavar em gua corrente
Etanol a 50%
Eosina
gua corrente
Etanol a 95%
Etanol a 95%
Etanol absoluto
Etanol absoluto
Xilol
Xilol
Xilol
Montagem

15 mergulhos
2 min
1 min
2 a 3 mergulhos
30s
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
20s
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
15 mergulhos
1 min
15 mergulhos
15 mergulhos
5 a 10 min

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Caderno de Referncia 2

Figura 17 - Corte de cell


block corado por HE.

2.6.3 Colorao rpida com Hematoxilina Eosina (HE)



Especialmente destinada s preparaes obtidas por PAAF, visa aferir a celularidade da amostra
aps a coleta ou fornecer diagnstico imediato. Os esfregaos devem estar fixados em soluo de lcool-formaldedo.
Tcnica
1 min e 40s
Lavar para remover excesso do corante
Banho rpido
Lavar para remover excesso do corante
Banho rpido
Banho rpido
Banho rpido

Hematoxilina de Harris
gua corrente
Eosina
gua corrente
Etanol absoluto
Etanol absoluto-xilol
Xilol
Montagem

2.6.4 Mtodo de May-Grenwald-Giemsa (MMG)



Corresponde a uma colorao hematolgica aplicada aos esfregaos secos ao ar ou obtidos por
PAAF e que cora o ncleo em azul e o citoplasma em rosa. Utiliza como reagentes as solues de May
Grenwald (9,5 g) e Giemsa (11,35 g), dissolvidas em 25 ml de glicerina e maturadas por trs a quatro
dias. Aps esse perodo diluir e misturar as duas solues em 500 ml de metanol PA, deixando amadurecer
por 10 a 30 dias.
Tcnica
Cobrir as lminas com a soluo de MMG por seis minutos.
Sem escorrer a soluo corante, adicionar gua destilada por quatro minutos.
Lavar em gua corrente e deixar secar temperatura ambiente ou em estufa a 40 C.
Clarificar com dois banhos de xilol.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

2.6.5 Mtodo de May-Grenwald-Giemsa (MMG) modificado



Os esfregaos corados por esta tcnica devem ser encaminhados ao processamento fixados a seco.
As solues utilizadas esto disponveis no mercado prontas para o uso, devendo ser diludas em metanol
(1/3 de metanol para 2/3 de May-Grenwald) e em gua destilada (4/5 de gua para 1/5 de Giemsa). Os
esfregaos devem ser mergulhados em cada soluo por cinco minutos, lavados em gua corrente e secos
ao ar ou em estufa a 40 C. Opcionalmente pode-se clarificar com xilol antes da montagem das lminas.
2.6.6 Colorao pelo azul de toluidina

uma colorao rpida, utilizada para diagnsticos imediatos e para constatar a adequabilidade
da amostra com relao celularidade, indicando ou no a repetio do procedimento naquele momento.
Pode ser empregada para vrios tipos de espcimes como os provenientes de lquidos serosos, lavados
plvicos, peritoneais ou brnquicos, amostras de PAAF, imprints (durante a bipsia por congelao),
urina, aspirados de fundo-se-saco vaginais e espcimes ovarianos. As preparaes so coradas a fresco.
Todas as clulas se coram em azul prpura, mas em tons definidos de colorao para o ncleo e o citoplasma, inclusive o nuclolo pode ser identificado com uma colorao mais intensa. O azul de toluidina
dissolvido em etanol a 95% (0,5 g em 20 ml) e misturado com 80 ml de gua.
Tcnica
Processamento de lquidos
Centrifugar o espcime num tubo a 2.000 rpm por sete a dez minutos, decantar
cuidadosamente o sobrenadante, retirando uma a duas gotas da camada superior (com ala
de platina) para colocar na lmina. Adicionar uma gota de azul de toluidina e misturar.
Material obtido por PAAF (ou outro no-lquido)
Colocar uma gota do espcime no centro da lmina e pingar sobre ele uma gota de azul
de toluidina, misturando-os com a ala de platina ou com a ponta da lamnula. Colocar
a lamnula sobre o material e montar sem desloc-la, a fim de evitar distoro celular e
inadequacidade da amostra. Esperar alguns segundos e examinar ao microscpio.

As lminas coradas com o azul de toluidina podem ser colocadas em cmara mida (por exemplo,
em placa de Petri com gaze umedecida, tampada) e guardadas em geladeira por at 24 horas. Depois de
examinadas, devem ser fixadas em lcool a 95% e posteriormente coradas pelo Papanicolaou.
2.6.7 Diff-Quick (DQ)

Tcnica de colorao rpida comumente utilizada para verificar a adequabilidade dos espcimes,
sobretudo aqueles obtidos por PAAF, realizada em esfregaos secos ao ar. Emprega solues aquosas
contendo eosina, azul de metileno e Azure A. Tem a vantagem de facilitar a interpretao da morfologia
celular por enfatizar o tamanho, a forma e o arranjo celular auxiliando no reconhecimento de clulas
neoplsicas. Permite a identificao de substncias como mucina, melanina e hemossiderina e tambm a
presena de micro-organismos. A colorao permanente, permitindo o arquivamento das lminas. Deve
ser evitada em preparados de fluidos coletados com conservantes.

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Caderno de Referncia 2

2.6.8 Pantico

Tambm uma tcnica rpida aplicada no estudo imediato de amostras obtidas por PAAF e que
estabelece no s um diagnstico de urgncia, mas tambm avalia a celularidade do material. Os esfregaos devem ser secos ao ar antes de serem submetidos colorao. Apesar de utilizar trs solues de
corantes (Instant Prov I, II e III), o tempo de processamento de apenas 15 segundos. As lminas podero
ser arquivadas permanentemente.
2.6.9 Colorao de Shorr

Apesar de considerada uma tcnica simples, pois confere boa colorao diferencial entre as clulas epiteliais escamosas superficiais e profundas, est em desuso por conta da perda dos detalhes nucleares
e da transparncia citoplasmtica, quando comparada com a tcnica de Papanicolaou.
2.6.10 Coloraes especiais

Correspondem a mtodos selecionados de colorao que permitem a visualizao de determinadas
substncias ou estruturas, auxiliando no diagnstico de certas condies patolgicas.
Alcian Blue: utilizado para colorao de carboidratos. Auxilia na identificao de coloide, glicognio, mucina e cpsulas de fungos. Cora os ncleos em azul claro.
PAS (cido Peridico de Schiff): tambm cora carboidratos e fungos, conferindo-lhes a cor
magenta. Os ncleos coram-se em preto e o fundo do esfregao em verde.
Prata Metanamina (Mtodo de Grocott): permite identificar fungos e Pneumocystis carinii os
quais se coram em preto. Glicognio e mucina so corados em rosa a cinza e o fundo em verde.
Azul da Prssia (Mtodo de Perls): demonstra depsitos de hemossiderina, corando-os em
azul. O ncleo e outras estruturas se coram em vermelho.
GRAM: permite a especificao da flora bacteriana em Gram positiva ou negativa.
Ziehl-Neelsen: serve para identificar bacilos lcool-cido-resistentes (BAAR).
2.7 Montagem

Tem a finalidade de proteger o material celular contra o dessecamento e a retrao celulares, alm
de prevenir o desbotamento dos corantes nas clulas. Tambm possui a funo adicional de proteger a
amostra para o armazenamento adequado. Por aumentar o ndice de refrao do esfregao, possibilita
melhor visualizao dos detalhes celulares. O material usado na montagem permite a ligao entre a
lmina e a lamnula e representado por uma resina sinttica dissolvida em um solvente, frequentemente
o xilol. Os mais utilizados so o Blsamo do Canad e o Entellan, embora alguns laboratrios usem
tambm o verniz.
Tcnica
Depois de retirar a lmina do xilol, colocar de uma a duas gotas do meio de montagem
sobre a lamnula.
Colocar suavemente a lamnula sobre a lmina exercendo uma leve presso.
Escorrer o excesso do meio de montagem e limpar com xilol.
Afastar as bolhas que se formaram com basto de vidro ou pina.
Deixar secar por alguns minutos antes de iniciar a leitura microscpica.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Alguns artefatos tcnicos relacionados montagem podem interferir na leitura do esfregao e


prejudicar a avaliao diagnstica. O excesso de Blsamo, por exemplo, diminui os detalhes celulares.
Aconselha-se, nesse caso, mergulhar a lmina no xilol, retirar a lamnula e remont-la usando a quantidade
adequada do meio de montagem. Quando o processo de montagem muito lento podem aparecer pigmentos
marrons (corn akes) sobre a superfcie celular, obscurecendo o ncleo. Isso ocorre devido evaporao
do xilol e pelo aprisionamento do ar entre a lmina e a lamnula. Para solucionar o problema, o esfregao
dever ser mergulhado sucessivamente em xilol, lcool absoluto e lcool a 95%, lavado em gua corrente
e em seguida corado novamente com Orange e EA.

Figura 18 - Artefatos de
montagem
(cornflakes),
400x. Os artefatos (setas)
ocorrem quando a montagem demorada, surgindo
pigmentos marrons.

Com o passar do tempo o blsamo pode tornar-se espesso, em virtude da evaporao do solvente,
e interferir na adequabilidade da amostra, no devendo portanto ser utilizado nessas condies. O uso de
lamnulas (ou lminas) mofadas tambm dificulta a leitura do esfregao. Para limpar o mofo, dissolver
40 g de bicromato de potssio em um litro de gua corrente at ficar homogneo. Acrescentar 200 ml de
cido sulfrico aos poucos, mantendo o recipiente em uma vasilha com gua durante esse processo para
minimizar o aquecimento que ocorre com a mistura. Deixar as lamnulas nessa soluo por 48 horas,
lavando-as depois com bastante gua e sabo. Recomenda-se um banho de cinco minutos em lcool
absoluto, colocando-as para secar em estufa posteriormente.
2.8 Adequabilidade das amostras
Para se obter preparaes citolgicas satisfatrias deve-se empregar a tcnica apropriada para os
diversos espcimes. Um exame insatisfatrio no significa que o resultado negativo, mas to somente
que no foi possvel estabelecer nenhum diagnstico, seja de benignidade ou de malignidade.
Recomendaes para os diversos tipos de amostras objetivando a adequabilidade do material:
Aparelho respiratrio
O processamento varia segundo o tipo de amostra.
Escarro: colocar o material em uma placa de Petri e examinar sob fundo escuro (papel embaixo
da placa) e com iluminao direta para selecionar amostras das reas com sangue ou com
partculas slidas e escuras, acinzentadas ou opacas. Confeccionar os esfregaos pelo mtodo do
esmagamento, fixar com spray ou lcool e corar pelo Papanicolaou. Separar esfregaos extras para
coloraes especiais.

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Caderno de Referncia 2

Lavados: enviar a fresco. Remover qualquer fragmento visvel para processar em cell block.
Centrifugar o lquido e fazer esfregaos com o sedimento pela tcnica do esmagamento, fixando
em lcool ou spray. Corar pelo Papanicolaou. Pode ser necessrio citocentrifug-lo.
Escovados: fazer esfregaos aps a coleta e fixar em lcool ou spray. So corados pelo mtodo
de Papanicolaou. Durante a coleta, proceder s tcnicas de colorao rpida em esfregaos fixados
ao ar para avaliar a satisfatoriedade do material. Mergulhar a escova em suspenso salina, para
retirar as clulas aderidas, centrifugar ou citocentrifugar esse material e preparar cell block .
Aparelho digestivo

As amostras so obtidas de lavados ou escovados e se faz imprints em fragmentos de bipsia. O
processamento tem que ser imediato e semelhante aos de outros lavados e escovados. Processar os cell
blocks em gar para evitar degenerao enzimtica. A adio de fixadores ou preservativos aos espcimes
e a presena de alimentos comprometem a adequabilidade do material.
Aparelho urinrio

Colher urina fresca ou cateterizada, processando-a rapidamente (at seis horas). A primeira
da manh no deve ser utilizada. Se houver demora no processamento, aconselha-se a pr-fixao do
material. Pode-se optar por um dos mtodos a seguir:
Homogenizar delicadamente e centrifugar. Em sedimentos abundantes, colocar duas a trs gotas
do material em lminas albuminizadas e realizar esfregaos pelo mtodo de presso. Fixar em
lcool ou spray. Se o sedimento escasso, citocentrifug-lo.
Centrifugar 50 ml de urina e recentrifugar no mesmo tubo. Acrescentar duas a trs gotas de
albumina ou Carbowax no sedimento, agitando-o no agitador. Aspirar com pipeta e colocar na
lmina, fazendo esfregaos por presso. Deixar secar ao ar. Antes de corar, coloc-los em lcool
a 95% por dez minutos. As amostras com fixadores ou anticoagulantes, congeladas e dessecadas
so inadequadas para o processamento.
Lquor

Devem ser encaminhados a fresco, imediatamente. Centrifugar o material, decantar o sobrenadante
e citocentrifug-lo. Corar em Papanicolaou. Process-lo separadamente para evitar contaminao cruzada.
Os materiais podem ser contaminados com talco tornando-os insatisfatrios. s vezes, os materiais so
contaminados com o talco das luvas utilizadas no processamento de coleta, tornando-os insatisfatrios.
Lquidos csticos

Os materiais geralmente so de pequeno volume (1 ml ou menos) e devem ser enviados a fresco em
recipientes apropriados ou na prpria seringa. O processamento realizado de imediato por centrifugao
e, se necessrio, citocentrifugar. Corar pelo Papanicolaou.
Efuses

Geralmente so recebidas a fresco. Devem ser centrifugadas, removendo-se previamente cogulos
ou grumos presentes na amostra para process-los em cell block. Fazer esfregaos com o sedimento,
separando dois deles para fixao em lcool a 95 %, corando-os em Papanicolaou e em HE. Deixar
outro esfregao secar ar e cor-lo por um dos mtodos de colorao rpida, geralmente o DQ. Espcimes
congelados e dessecados so insatisfatrios para avaliao.

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2 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

PAAF

Os esfregaos geralmente so fixados em lcool a 95% ou a seco, embora o lcool absoluto
tambm possa ser utilizado. Corar pelo Papanicolaou ou HE e os secos ao ar por DQ ou pantico.
Centrifugar o material e citocentrifugar o lavado da agulha e da seringa com soluo salina para fazer cell
block. Amostras insatisfatrias podem resultar de falhas tcnicas como suco reduzida ou excessiva na
coleta, esfregaos espessos, fixao inadequada ou colorao defeituosa. Abscessos e leses fibrticas,
calcificadas, necrticas ou com degenerao cstica podem dificultar a obteno de material adequado
por escassez ou ausncia de clulas. Materiais puncionados de reas fora da leso originam diagnsticos
falso-negativos por erro de amostragem.

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3 Padres citopatolgicos
gerais em condies
benignas e malignas

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3 Padres Citopatolgicos Gerais em Condies Benignas e Malignas


Citologia definida como o estudo das clulas, suas estruturas e funes. O ncleo, o citoplasma,
a membrana e a matriz extracelular constituem os quatro elementos bsicos para o estudo do diagnstico
citolgico.
3.1 Clula

O princpio geral do diagnstico citolgico que o ncleo reflete o estado de sade da clula
(normal, inflamao, degenerao, bem como hiperplasia, metaplasia ou neoplasia), enquanto o citoplasma
reflete a origem e a sua diferenciao funcional (exemplo: clulas glandulares produtoras de muco,
clula escamosa protetora). Quando devidamente analisados, o ncleo e o citoplasma revelam riqueza de
informaes sobre a clula.
3.1.1 Ncleo

As informaes contidas no ncleo das clulas no apenas determinam a atividade celular atual,
bem como repassam essas informaes s clulas futuras atravs da reproduo celular. A informao
gentica da clula encontra-se no cido desoxirribonucleico (DNA), presente preferencialmente no ncleo
e, em menor parte, nas mitocndrias.


No ncleo ocorre:
Armazenamento e replicao do DNA.
Sntese (transcrio) do cido ribonucleico (RNA).
Transporte deste RNA para o citoplasma onde os ribossomos traduzem o cdigo gentico em
protenas, determinando a funo celular.



A membrana nuclear , na realidade, a condensao ou marginao da cromatina. A cromatina
um complexo formado por um tipo de reao fsico-qumica do tipo cidobsico entre DNA (cidos
nucleicos), histonas (nucleoprotenas bsicas) e outras protenas cidas no histonas.

Existem dois tipos de cromatina: a heterocromatina inativa (fios condensados), a qual se cora
pela hematoxilina, e a eucromatina ativa representada por reas claras. Este o motivo pelo qual clulas
discariticas ou malignas podem ocasionalmente apresentar ncleos plidos ao invs de hipercromticos,
como descrito frequentemente.

Figura 19 - Carcinoma ductal da mama, 400x. Em destaque, a eucromatina (rea


clara indicada pela seta) e
heterocromatina (era escura apontada pela seta dupla).

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Caderno de Referncia 2

Eucromatina
Heterocromatina

Classificao da cromatina
Fios delgados (parte ativa)
Fios condensados (parte inativa)


As protenas nucleares podem ser classificadas em histonas e no histonas. Histonas so protenas
cilndricas que protegem o DNA e participam da condensao da cromatina formando a heterocromatina.
A heterocromatina e as protenas no histonas so cidas, por isso coram-se basofilicamente na colorao
de Papanicolaou visto que cido tem predileo por base. Juntas so as responsveis pelas caractersticas
tpicas da colorao nuclear. Os cromocentros so partculas de heterocromatina relativamente largas
tendo como exemplo o Corpsculo de Baar que um cromossomo X inativo. Algumas doenas so conhecidas pela ausncia de corpsculos de Barr, como a Sndrome de Turner (XO), e outras com corpsculos de Baar extras, a exemplo da Sndrome de Klinefelter (47XXY). Estes corpsculos podem ser vistos
ocasionalmente em clulas malignas sendo indicativos de cromatina anormal.

A eucromatina se encontra ativa na sntese de RNA correspondendo aos espaos vazios, sendo
conhecida como paracromatina. Portanto, no ncleo hipercromtico encontra-se mais heterocromatina
(inativa) e no ncleo hipocromtico mais eucromatina (ativa).

A intensidade da basofilia do ncleo proporcional a quantidade de DNA presente, no entanto
a hiper ou a hipocromasia dependem de trs fatores: quantidade do corante, tamanho do ncleo (quanto
maior o volume, maior a atividade celular) e da lei de Beer, que relaciona a absoro de luz com as propriedades do material atravessado por esta.

A condensao da cromatina um achado citolgico importante podendo ser fina ou grosseira,
regular ou irregularmente distribuda.
a

Figura 20 a - Clulas apcrinas,


400x. Cromatina fina e
regularmente distribuda (seta).
b - Carcinoma escamoso do colo, 400x. Cromatina finamente granular e irregularmente
distribuda (seta).
c - Carcinoma lobular
da mama, 200x. Cromatina grosseira e regularmente distribuda
(seta).
d - Carcinoma ductal
da mama, 400x. Cromatina grosseira e irregularmente distribuda
(seta).

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3 Padres Citopatolgicos Gerais em Condies Benignas e Malignas

Matriz diagnstica das caractersticas da cromatina


Regular
Irregular

Fina
Geralmente normal
Adenocarcinoma

Grosseira
Plasmcitos, Carcinoma in situ
Carcinoma de Clulas Escamosas


Por um lado, a cromatina pode estar dissolvida (carilise) como uma escama anucleada ou por
outro, como uma massa compacta (picnose), observada nas clulas superficiais. Outra possibilidade de
apresentao da cromatina a sua homogeneizao (aparncia de vidro de relgio), como visto nas infeces virais. Na degenerao, a cromatina encontra-se como partculas redondas, mltiplas e regulares,
podendo variar de tamanho. J no cncer, sua condensao ocorre irregularmente em forma, tamanho e
distribuio. Se dividirmos o ncleo em quadrantes e essa diviso for desigual significa que a cromatina
est irregularmente distribuda, como acontece nos casos de cncer.

Figura 21 - Clulas escamosas superficiais, 200x. Ncleos


picnticos (setas).

Figura 22 - Carcinoma papilfero da tireoide, 400x. Cromatina em vidro fosco (seta).


As alteraes nucleares tambm variam de clula para clula e esta, quando intensa, fortemente
sugestiva de malignidade. Outra caracterstica peculiar e frequente a colorao da paracromatina. A
hipercromasia e a cor azulada associadas ao aumento nuclear, so sugestivos de malignidade, enquanto a
cor avermelhada sugere processos infecciosos. Particularmente comum aps radioterapia, a vacuolizao
nuclear pode ser pequena, redonda, nica ou mltipla, s vezes comprimindo a cromatina.

Nos processos degenerativos o aumento nuclear pequeno e sem hipercromasia diferentemente
dos processos malignos. Nos casos de radiao e m fixao do material (dessecamento) tambm ocorre
aumento do ncleo, mas a cromatina plida, homognea, difusa e sem partculas distintas.

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Caderno de Referncia 2


As modificaes nucleares ocorridas na morte celular so picnose (completa aglutinao da cromatina em um nico ponto), cariorrex (o material picntico quebra-se em partculas com a dissoluo da
membrana nuclear), e carilise ou cromatlise (material nuclear completamente dissolvido, deixando
um espao vazio e plido).

Anormalidades no nmero de cromossomos (poliploidia e aneuploidia) tambm esto associadas
ao cncer. Figuras de mitose anormais esto relacionadas com aneuploidia, mas elas tambm podem ser
vistas nas clulas mesoteliais benignas e efuses serosas.

Na prtica, nenhum critrio patognomnico (caracterstico) de cncer, mas a combinao de
critrios deve ser usada para fazer um diagnstico de malignidade.

Figura 23 rea de necrose


em carcinoma escamoso do
colo, 200x. Cariorrex (setas).

3.1.2 Nuclolo

Os nuclolos podem ser a principal estrutura nuclear proeminente em muitas clulas. Eles variam
em tamanho, nmero e forma, mas usualmente so pequenos, escassos, redondos ou ovais. So compostos
de protenas (em sua maioria), RNA e DNA (em menor quantidade). Podemos diferenciar cromocentro de
nuclolo utilizando como parmetro a colorao dos cidos nucleicos, que mostra nuclolo acidoflico e
cromocentro basoflico.

A funo do nuclolo a sntese do RNA ribossomal. Os ribossomos esto envolvidos com a
sntese de protenas numa relao direta entre o tamanho do nuclolo e a quantidade de protena produzida
pela clula. Nuclolos grandes, mltiplos e irregulares so indicativos de cncer, mas tambm podem ser
observados em condies benignas a exemplo dos processos reparativos. Em geral, mais de seis nuclolos
por ncleo so considerados anormais. Quando o aumento celular atinge um determinado tamanho, em
geral duas vezes o tamanho normal, sinal de que a clula ir se dividir, ou seja, ocorrer mitose de acordo
com os passos abaixo:
Prfase - Dissoluo da membrana nuclear
Metfase - Alinhamento mediano dos cromossomos
Anfase - Separao dos cromossomos
Telfase - Diviso da clula

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3 Padres Citopatolgicos Gerais em Condies Benignas e Malignas

Figura 24 Cisto simples da


mama, 200x. Nuclolos evidentes (setas).


Aumento da atividade mittica e particularmente figuras de mitose atpicas esto associadas
malignidade. No cncer a diviso celular est fora de controle e o ncleo, caso se divida precocemente em
relao ao citoplasma, poder alterar a relao nucleocitoplasmtica. Normalmente o nuclolo involui em
clulas maduras e diferenciadas, mas no cncer ele pode permanecer ativo, como um nuclolo proeminente
ou um macronuclolo.

Em resposta a inflamao ou particularmente a radiao, multinucleao e clulas gigantes
multinucleadas podem ser vistas. Multinucleao pode ser resultado de uma endomitose ou de uma fuso
celular. Na endomitose a diviso nuclear ocorre sem a diviso citoplasmtica e, portanto os ncleos
tendem a ser semelhantes. J na fuso celular os ncleos podem variar em forma e tamanho. Temos como
exemplos de clulas gigantes multinucleadas: clulas do tipo corpo estranho, clulas de Langerhans,
osteoclastos, megacaricitos, clulas malignas, infeco pelo herpes, sinciciotrofoblastos, condiloma e o
carcinoma in situ.

Quando as clulas perdem o citoplasma muitas alteraes podem ocorrer na sua aparncia. Portanto,
um diagnstico de cncer no deve ser embasado apenas nas caractersticas de um ncleo desnudo.
a

Figura 25 - Infeco pelo herpes.


a - Multinucleao e amoldamento nuclear (setas), 400x.
b - Clula gigante multinucleada (seta), 200x.

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Caderno de Referncia 2

3.1.3 Citoplasma

O citoplasma de uma clula corresponde ao contedo que est fora do ncleo e dentro dos limites
da membrana celular, incluindo as organelas e a matriz citoplasmtica (ou citosol). Esta ltima que
corresponde ao maior volume celular, composta por um gel coloidal constitudo principalmente por gua,
no qual as organelas e as incluses esto suspensas. Muitas reaes celulares como a gliclise anaerbica
so catalisadas por enzimas suspensas na matriz citoplasmtica. O citosol altamente organizado, mas
suas estruturas no podem ser observadas ao microscpio ptico.

As organelas, tais como retculo endoplasmtico, mitocndrias e rea de Golgi, no so visveis
nos preparados citolgicos, exceto em certas circunstncias. Por exemplo, as mitocndrias, essenciais
para a respirao celular, so abundantes nos hepatcitos, em clulas apcrinas e tambm em tumores
oncocticos acarretando um aumento da eosinofilia. Produtos de secreo como mucina, em clulas
endocervicais ou em clulas tumorais e glicognio em clulas escamosas intermedirias da crvice podem
ser evidenciados pelo cido peridico de Schiff (periodic-acid Schiff PAS).

Pigmentos e outros materiais intracelulares podem ser facilmente detectados no material citolgico,
a exemplo da melanina no melanoma maligno, da hemosiderina em macrfagos nas reas de hemorragia
e da queratina no carcinoma escamoso queratinizante.

O citoesqueleto o maior componente estrutural da matriz celular, visvel apenas microscopia
eletrnica, sendo o responsvel pela manuteno da forma e pelo movimento celular.
3.1.4 Membrana celular

A membrana celular tem funes bsicas de limite e barreira, alm de contribuir para a homeostase.
semipermevel, facilitando ou impedindo movimentos de vrias substncias atravs dela. Pregas
profundas permitem a expanso celular como ocorre no epitlio transicional da bexiga. Podem apresentar
microvilosidades que lhe conferem um aspecto de borda rendilhada a exemplo das clulas mesoteliais.
Tambm possui a capacidade de incorporar materiais estranhos, tais como bactrias ou produtos de
catabolismo de outras clulas, fenmeno conhecido por endocitose. Este decorre da invaginao da
membrana e englobamento da partcula a ser fagocitada.

A maioria das clulas cresce at preencher seus espaos e esse crescimento inibido pelo contato
com as clulas vizinhas, ou seja, existe um reconhecimento intercelular atravs de suas membranas. Nos
casos de cncer, esta caracterstica perdida e favorece um crescimento contnuo (perda da inibio do
contato) podendo levar a invaso e metstase. Nos preparados citolgicos, a membrana celular poder ser
ntida e bem definida (nas clulas escamosas), ou mal definida (nos histicitos)
3.1.5 Matriz extracelular

Num preparado citolgico o material extracelular representado como o fundo do esfregao
(background) podendo refletir um processo normal, inflamatrio, displsico ou neoplsico. A presena
de hemcias intactas um achado inespecfico, enquanto que clulas inflamatrias em geral indicam um
processo inflamatrio. A resposta do hospedeiro invaso do tumor representada pela ditese tumoral
indicando a ocorrncia de um processo destrutivo tecidual. Caracteriza-se pela presena de hemcias
ntegras ou degeneradas, fibrina e debris celulares necrticos. No entanto, condies outras que no o
cncer podem provocar essas respostas, como a estenose do canal cervical levando ao piometra.

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3 Padres Citopatolgicos Gerais em Condies Benignas e Malignas

Caractersticas citomorfolgicas gerais de malignidade


Clulas
Usualmente numerosas, desorganizadas, grupos empilhados, sinccos.
Clulas atpicas, nicas e isoladas.
Canibalismo, caracterizado por clula dentro da clula.
Pleomorfismo, anisocitose, contornos anormais, aumento da relao ncleo/
citoplasma.
Intensa variao das caractersticas de uma clula para outra clula.
Ncleo
Desorganizado, perda da polaridade, sobreposio, aumentado, hipercromtico
Pleomrfico (forma e tamanho), contornos anormais
Multinucleao, amoldamento, ncleo desnudo
Contorno nuclear irregular e espesso
Nuclolos proeminentes, mltiplos (mais de seis) ou macronuclolos,
Cromatina anormal, irregular, figuras de mitose particularmente anormais.
Citoplasma
Pleomorfismo (perda dos limites celulares).
Colorao anormal: policromasia, orangeofilia.
Produtos celulares anormais: queratina, mucina etc.
Fundo do esfregao (background)
Necrose.
Sangue.
Hemossiderina.
Ditese tumoral.
Caractersticas gerais de malignidade
Hipercelularidade.
Pouca coesividade.
Desorganizao.
Mitoses atpicas.
Caractersticas gerais de benignidade
Escassa celularidade.
Boa coesividade.
Clulas ordenadas.
Presena de clios.

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Caderno de Referncia 2

Diagnstico diferencial entre reparo (condio benigna reacional) e cncer


Reparo
Coesos, ordenados (em linhas, fileiras), arranjos planos.

Cncer
Pouco coesos, desordenados, sobrepostos

Clulas

Mais coesas, poucas clulas isoladas.

Menos coesas, muitas clulas isoladas.

Citoplasma

Relao ncleo/ citoplasma adequada, no queratinizado, presena de


polimorfonucleares e policromasia.

Relao ncleo/citoplasma aumentada, pode haver queratinizao, no


comum a presena de polimorfonucleares e monocromasia.

Hipocromtico,
fino.

Hipercromtico,
grosseiro.

Grupo

Ncleo

plido,

escuro,

Hipocromtica e regular.

Hipercromtica e
irregular.

Fundo do
Esfragao

Limpo com clulas inflamatrias.

Ditese.

Nuclolo

Macronuclolo, semelhante entre as clulas.

Pode ser significativo e varia entre as clulas.

Cromatina

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4 Padres citopatolgicos
em rgos especficos

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

4.1 Mama

A mama humana normalmente localizada na parede anterior do trax apresentando na sua regio
central uma arola e uma papila. Ela dividida em 15 a 20 lobos mamrios independentes, separados por
tecido fibroso. Cada lobo tem a sua via de drenagem, que converge para a papila, atravs do sistema ductal. Portanto, a mama formada de um lbulo (ou unidade lobular ductal terminal) e de um grande sistema
ductal. Tm como funo principal a produo do leite para a amamentao.

a
b
c
d

e
f
g
h

Figura 26 - Representao Esquemtica da Mama


a - Gradil costal.
b - Msculo peitoral.
c - Unidades lobulares.
d - Mamilo.
e - Arola.
f - Ductos lactferos.
g - Tecido adiposo.
h - Pele.


Doenas fibrocsticas, fibroadenomas, cistos e a maioria dos cnceres se originam frequentemente
dos lbulos. Os grandes ductos podem ser os stios de origem dos papilomas solitrios, carcinoma papilar,
ectasia ductal e possivelmente Doena de Paget.

Embriologicamente, a mama uma glndula sudorpara apcrina modificada, derivada do ectoderma e suspensa pelos ligamentos suspensores de Cooper. Quando esses ligamentos so acometidos por
fibrose (nos casos de cncer) d origem imagem de casca de laranja. Durante a primeira fase do ciclo
menstrual os lbulos tornam-se proliferativos em virtude da presena do efeito estrognico. Nesta fase
pr-ovulatria, as clulas ductais aspiradas se apresentam em monocamada e com citoplasma distinto. Os
ncleos so pequenos, compactos e com nuclolos discretos. J na segunda fase do ciclo (ps ovulatria
ou ltea) o lbulo continua a se proliferar e o estroma, em resposta ao do hormnio progesterona,
torna-se edemaciado. Sendo assim, as clulas se apresentam em vrias camadas com citoplasma indistinto, marginao da cromatina levando ao aparecimento de uma rea clara ao redor do nuclolo, agora
proeminente. Na mama, em contraste com o endomtrio, o maior nmero de mitoses encontrado na
segunda fase do ciclo. Durante a menstruao, em decorrncia da diminuio dos hormnios estrognio
e progesterona, os lbulos voltam s caractersticas normais. Na ps-menopausa o tecido conjuntivo e o
tecido glandular atrofiam e ocorre a substituio gordurosa (liposubstituio).

As doenas que afetam a mama podem ser divididas em trs grupos: inflamao (incluindo aguda,
crnica e mastite granulomatosa), hiperplasia (incluindo doena fibrocstica, alteraes da gestao e a
maioria das neoplasias benignas) e cncer.

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Caderno de Referncia 2

Origem das doenas da mama


Lbulo
Grandes ductos
Doena fibrocstica
Papiloma
Fibroadenoma
Carcinoma papilar
Cisto
Ectasia ductal
Maioria dos cnceres
Doena de Paget
4.1.1 Clulas da mama

O lbulo e os grandes ductos so compostos por dois tipos de clulas: epiteliais e mioepiteliais. O
epitlio que composto por uma ou duas clulas na sua espessura tem funes secretoras e de absoro.
As clulas mioepiteliais que circundam os ductos so contrteis e ao se contrarem movem o produto da
secreo (o leite) atravs do sistema ductal.
Clulas ductais

Clulas epiteliais ductais benignas so usualmente vistas em aspirados da mama como clulas
pequenas e altamente coesas. So vistas em arranjos bidimensionais planos, mas podem apresentar leve
sobreposio refletindo uma hiperplasia benigna. Estruturas microacinares so relativamente raras e esparsas, mas podem aparecer em algumas condies benignas como: adenose esclerosante, fibroadenoma e
na lactao. Entretanto, quando microcinos so numerosos e bem formados, a malignidade deve ser considerada, particularmente quando as clulas esto aumentadas. Nas condies benignas essas clulas so
uniformes, o ncleo redondo a oval, variando de uma vez a uma vez e meia o dimetro de uma hemcia,
ou seja, raramente grande. A membrana nuclear delicada, a cromatina fina, por vezes hipercromtica
e o nuclolo nico e discreto. Quando o tamanho nuclear das clulas ductais de trs a quatro vezes
o dimetro de uma hemcia, a membrana nuclear irregular, o nuclolo proeminente, particularmente
macronuclolo, o diagnstico de malignidade deve ser sugerido. Invaginaes citoplasmticas intranucleares podem estar presentes tanto nas condies benignas como nas malignas. O citoplasma varivel e
usualmente delicado e escasso, mas pode ser mais definido com bordas celulares proeminentes, dando um
aspecto de favo de mel. A presena de vacolos secretores de mucina anormal e indicativo de cncer.

Figura 27 - Fibroadenoma,
200x. Clulas ductais.

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Clulas mioepiteliais

A presena de clulas mioepiteliais ou de ncleos desnudos bipolares indicativa de benignidade. Esses so ovais ou alongados, escuros, suaves e desprovidos de citoplasma. Em geral tm tamanho
equivalente ao dimetro de uma hemcia e podem ser encontrados espalhados no fundo do esfregao ou
sobrepostos a grupos de clulas ductais. Devemos ser extremamente cautelosos com o diagnstico de malignidade na presena desses ncleos desnudos, pois sua presena no patognomnica de benignidade,
apenas refora o cuidado que se deve ter ao sugerir malignidade. Grupamentos de clulas benignas podem
ser identificados em meio a grupamentos de clulas malignas. A presena das clulas ductais e mioepiteliais um forte indicativo de benignidade em contraste com as neoplasias malignas que se caracterizam
pela ausncia de clulas mioepiteliais.

Figura 28 - Fibroadenoma,
100x. Ao fundo h clulas
mioepiteliais soltas (setas).

Clulas Espumosas

A origem dessas clulas incerta podendo ser originrias dos ductos (clulas ductais), de moncitos da medula ssea (histicitos ou macrfagos) ou de ambos. So encontradas isoladamente ou em grupos, tm citoplasma abundante, multivacuolado e bordos celulares relativamente distintos. O citoplasma
muitas vezes contm vrios pigmentos ou incluses. Os ncleos so brandos ou reativos, redondos ou
ovais. Clulas espumosas gigantes multinucleadas podem estar associadas a leses benignas e aos cistos
bem como aos casos de cncer.

Figura 29 - Leso cstica da


mama, 200x. Clulas espumosas (setas) fagocitando a
gordura e o fluido nas leses
csticas da mama.

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Caderno de Referncia 2

Clulas apcrinas

Representam metaplasia das clulas do epitlio lobular. So frequentemente encontradas em aspirados benignos tais como: doena fibrocstica, fibroadenomas e cistos. Elas se apresentam de forma coesa,
regular, plana, porm diferentemente das clulas ductais, essas clulas podem se apresentar tanto isoladamente como em grupos papilares. Sua principal caracterstica o citoplasma abundante e ligeiramente
granular, decorrente da presena de numerosas mitocndrias (semelhantes aos onccitos). Algumas vezes
o citoplasma pode ser denso e com bordos celulares distintos conferindo-lhes aparncia escamoide. Os
ncleos so excntricos e podem variar em tamanho e forma, mas so usualmente uniformes. A membrana
nuclear suave, a cromatina finamente granular e uniformemente distribuda. Nuclolos nicos, redondos
e proeminentes so comuns. A sua presena sugere benignidade estando frequentemente associadas a cistos. Nos processos inflamatrios estas clulas podem ser confundidas com clulas malignas.

Os resultados citopatolgicos de materiais obtidos atravs de Puno Aspirativa por Agulha Fina
(PAAF) da mama ou por descarga mamilar so descritos de acordo com a probabilidade de malignidade
indo at o diagnstico especfico. A reprodutibilidade entre observadores excelente para a categoria positiva para malignidade, pobre para os casos atpicos e bons para as demais categorias.

Figura 30 - Leso cstica da


mama, 200x. Clulas apcrinas (setas).

Categorias diagnsticas na PAAF da mama


Negativo para malignidade
Atpicos
Suspeitos
Positivo para malignidade
Inadequado ou insatisfatrio

Uma amostra de PAAF de mama considerada satisfatria quando encontramos de cinco a seis
grupamentos de clulas bem preservadas e para um diagnstico negativo (benigno) necessrio que essa
amostra seja satisfatria. O mdico deve sempre correlacionar o resultado citopatolgico com os achados
clnicos e radiolgicos (triplo teste). importante ressaltar que um resultado citolgico negativo no
garantia de que o ndulo benigno, em especial nos casos em que os achados clnicos e a mamografia
suspeitam de malignidade. A categoria atpica utilizada nas amostras com pouca probabilidade para
malignidade sendo comum quando se tem uma mistura de achados citolgicos de entidades benignas e
malignas numa mesma amostra. Em geral, a bipsia est indicada. J a categoria suspeita se aplica aos
casos em que os achados so provavelmente de malignidade. Exemplificamos os casos em que as clulas
atpicas so pouco numerosas, mal preservadas, a amostra hemorrgica ou inflamatria impedindo o

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

diagnstico definitivo de maligno, ou ainda quando os achados sugerem um cncer de atipias mnimas
como o carcinoma lobular, tubular ou papilar. A bipsia ento se impe. Diagnsticos positivos para malignidade esto reservados para os casos com caractersticas inequvocas de malignidade.


Trs aspectos no diagnstico so importantes:
A celularidade;
Os arranjos celulares;
O fundo do esfregao (background).

Aspirados hipocelulares podem ser encontrados nos casos de fibroadenoma, alteraes fibrocsticas, necrose gordurosa, alteraes secundrias a radiao, gravidez, lactao e carcinomas in situ ou invasivos (particularmente os tipos tubulares e lobulares). A celularidade moderada comum na gravidez ou
na lactao e nas alteraes fibrocsticas. Nos fibroadenomas, Tumor Phyllodes e carcinomas, incluindo
os invasivos, a celularidade varia de moderada a acentuada. Os arranjos celulares podem ser planos, frouxos, coesos, tridimensionais, ramificados, papilares ou ainda constitudos predominantemente por clulas
isoladas. Dentre os elementos que podemos encontrar no fundo do esfregao destacamos: clulas inflamatrias, detritos amorfos, sangue e mucina. As clulas inflamatrias agudas so comuns nas mastites e nos
carcinomas necrotizantes; as clulas inflamatrias crnicas nas hiperplasias, nas desordens proliferativas
e no carcinoma medular; o sangue pode ser um indicativo de papiloma, carcinoma papilar ou outros carcinomas; mucina ou material mixoide nos fibroadenomas, carcinoma mucinoso ou mucocele.
4.1.2 Caractersticas de benignidade

Dois aspectos so fundamentais no diagnstico de benignidade: presena de clulas ductais coesas
e de clulas mioepiteliais. Outro aspecto a ser considerado a escassa celularidade (embora haja numerosas excees, tais como, fibroadenoma, papiloma, gravidez e mastites). As clulas so relativamente
uniformes (nos casos de proliferao epitelial podem apresentar variaes), esto coesas formando arranjos em lenis ordenados, rara a presena de clulas isoladas e algumas podem exibir sobreposio.
O ncleo pode variar de tamanho, em geral no maior que duas vezes o tamanho de uma hemcia. Sua
forma pode ser redonda a oval e o contorno nuclear suave, quando irregular sugere malignidade. O ncleo pode ser levemente hipercromtico com a cromatina fina e pequeno nuclolo. O citoplasma varia de
escasso e delicado a abundante e apcrino. Vacolos de gordura intracitoplasmtica so mais comuns nos
carcinomas, mas tambm os encontramos em casos benignos a exemplo das alteraes da lactao. As
leses benignas caracterizam-se por uma grande variedade de tipos celulares incluindo clulas apcrinas,
ductais, espumosas, mioepiteliais e histicitos.

Figura 31 - Fibroadenoma,
100x. Clulas ductais e mioepiteliais coesas.

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Caderno de Referncia 2

4.1.3 Caractersticas de malignidade



Os aspirados apresentam abundante celularidade com clulas dispersas, desordenadas e pleomorfismo. O ncleo hipercromtico, frequentemente excntrico, aumentado de volume, com contorno nuclear espessado e irregular e mitoses quando presentes so atpicas. O nuclolo proeminente, irregular
ou mltiplo. No citoplasma lumens podem ser vistos contendo mucina ou lipdios positivos. No fundo
do esfregao pode-se observar hipercelularidade, presena de muco, debris celulares e necrose. Chama
a ateno ausncia de clulas mioepiteliais. Devemos ter o cuidado ao diagnosticar malignidade na
presena de alguns padres de benignidade tais como: aspirado pobremente celular, ausncia de clulas
isoladas, presena de clulas mioepiteliais, e atipia ausente ou escassa.
a

Figura 32 Carcinoma ductal da mama, 200x.


a - Ncleos volumosos, hipercromticos e excntricos (seta).
b - Ncleos hipercromticos, volumosos e irregulares (seta).
c - Mitose atpica (seta).
d - Ncleo atpico, volumoso, hipercromtico e excntrico (seta).

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Quadro comparativo dos padres de benignidade e malignidade dos aspirados (PAAF) da mama
Benignidade
Malignidade
Pobre a moderada (fibroadenoElevada
Celularidade
mas so celulares)
Dissociao celular

Folhetos ou grupos coesivos

So comuns clulas isoladas

Grupos celulares

Limites lisos ou em paliada

Limite denteado

Tamanho da clula

Pequeno

Usualmente grande

Tamanho do ncleo

Tamanho de um eritrcito

Maiores

Pleomorfismo

Nenhum

Comum

Ncleo

Contorno liso

Contorno irregular

Cromatina

Vesicular ou finamente
granular

Em grumos

Necrose

Ausente

Pode estar presente

Clulas mioepiteliais

Muitas

Raras

Clulas isoladas do estroma

Comuns

Raras

Fragmentos do estroma

Comuns

Raros

Vacolos citoplasmticos

Incomuns

Podem ser observados

Incluses intranucleares

Incomuns

Podem ser observados

Mucina

Rara

Comum

Clulas inflamatrias

Podem estar presentes

Podem estar presentes

Macrfagos espumosos

No geral presentes

s vezes presentes

Clulas tumorais gigantes

Ausentes

Podem estar presentes

Calcificao

Pode estar presente

Pode estar presente

Clulas apcrinas

Comuns

Raras

Mitoses

Incomuns

Comuns

Padro cribiforme

Ocasional em fibroadenoma

Presente no carcinoma ductal


in situ cribiforme

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Caderno de Referncia 2

4.1.4 Descarga mamilar



Quando espontnea e no relacionada lactao ou a gravidez um achado anormal. Pode ser
decorrente de uma leso da mama como papiloma ou carcinoma, ou de uma alterao hormonal como no
adenoma hipofisrio. O exame da descarga mamilar pode ser realizado quando a paciente no apresenta
leses palpveis ou anormalidades na mamografia sendo til no diagnstico de pequenos carcinomas de
mama e nos papilomas. Os achados citomorfolgicos de secrees benignas mamilares so: esfregaos
pouco celulares, presena de clulas ductais, espumosas, inflamatrias e hemcias. Quando a secreo
apresenta numerosos agrupamentos papilares de clulas ductais benignas aumentadas de volume provvel que estejamos diante de um papiloma ou de uma hiperplasia intraductal. Fazem parte dos achados de
malignidade os grupamentos de clulas ductais pleomrficas, clulas malignas isoladas, ncleos desnudos, nuclolos, sangue e restos necrticos.

Figura 33 - Descarga mamilar,


100x. Clulas espumosas (seta
preta) e hemcias (seta verde).

Figura 34 - Cisto apcrino, 100x. Clulas apcrinas


(seta).

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Padres citomorfolgicos das principais leses da mama


Cistos mamrios
Fundo limpo ou granular.
Celularidade escassa a moderada.
Presena de clulas espumosas e apcrinas.
Pequenos grupos de clulas ductais benignas.
Leses inflamatrias
Mastites
Exsudato inflamatrio com numerosos polimorfonucleares e histicitos.
Fundo com debris celulares.
Clulas ductais com alteraes reativas.
Abscesso Subareolar
Presena de escamas crneas.
Clulas do epitlio escamoso normais.
Inflamao crnica e aguda com clulas gigantes multinucleadas.
Mastite Granulomatosa
Presena de histicitos, clulas gigantes multinucleadas, linfcitos e plasmcitos.
Tumores fibroepiteliais
Fibroadenoma.
Celularidade de alta a moderada.
Clulas ductais coesas, uniformes com ncleos pequenos.
Presena de clulas mioepiteliais e ncleos desnudos bipolares.
Estroma mixoide.
Tumor Phyllodes.
Alta celularidade.
Presena de estroma metacromtico, clulas estromais fusiformes, sem atipias e com nuclolo.
Hiperplasia pode estar presente.
Carcinoma Intraductal
Clulas neoplsicas isoladas e em grupos irregulares.
Grandes clulas pleomrficas.
Fundo com material necrtico.
Presena de macrfagos, hemossiderfagos e calcificaes.

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Caderno de Referncia 2

Figura 35 - Abscesso subareolar, 100x.


a - Fundo granular inflamatrio.
b - Escamas crneas.
a

Figura 36 - Mastite, 100x.


a - Exsudato inflamatrio
com clulas espumosas.
b - Clula gigante multinucleada.

Figura 37 - Fibroadenoma,
100x. direita (seta verde)
o componente estromal e
a esquerda (seta preta) o
componente epitelial.

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Figura 38 - Carcinoma ductal.


a - Clulas ductais atpicas dispersas, 100x.
b - Clulas ductais atpicas em grupamento frouxo, 200x.

4.2 Tireoide

A funo da glndula tireoide produzir e armazenar hormnios tireoideanos responsveis pelo
metabolismo do organismo. Ela constituda por dois lobos laterais ligados por um istmo e a sua unidade
funcional o folculo que composto centralmente por coloide e circundado por um epitlio folicular. Os
folculos variam de tamanho tendo em mdia 200 de dimetro.

cartilagem
tireoidea
tireoide
traqueia
esterno
clavcula

Figura 39 - Topografia
da tireoide.

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Caderno de Referncia 2

4.2.1 Clulas e material encontrado nos aspirados da tireoide


Clulas foliculares

O folculo normal constitudo por clulas foliculares que produzem os hormnios tireoideanos.
Essas clulas variam de acordo com a funcionalidade da glndula, quanto mais ativas mais abundante
o citoplasma. Elas se apresentam em arranjos de favo de mel ou em arranjos esfricos, constituindo
caracterstica importante do epitlio folicular no neoplsico. Clulas foliculares intactas, esparsas e isoladas tambm so caractersticas de benignidade. No entanto, quando amontoadas formando numerosos
microfolculos (rosetas ou estruturas microacinares) ou papilas, o diagnstico de neoplasia deve ser sugerido. O ncleo redondo ou oval, em geral do tamanho de um linfcito, podendo variar de acordo com a
idade da paciente, com o estado funcional da clula ou com a fixao do material. O amoldamento nuclear
no comum. O contorno nuclear suave e a sua irregularidade sugere carcinoma em especial quando
esta alterao est presente na maioria das clulas. Ncleos aumentados, hipercromticos ou desnudos
ocasionais podem ser vistos em esfregaos benignos. A cromatina finamente granular e moderadamente
hipercromtica variando tambm de acordo com o estado funcional da clula. Quando densa, picntica
e mais aberta sugestiva de hiperatividade. Os nuclolos so infrequentes, contudo podem ser vistos em
clulas reativas ou regenerativas. Quando proeminentes ou mltiplos sugerem malignidade. O citoplasma
das clulas foliculares normais plido e delicado, quando denso e escamoide sugere carcinoma papilar.
Na degenerao as clulas foliculares se dissociam e o citoplasma torna-se espumoso ou granular sendo
indistinguvel dos histicitos. Grnulos de hemossiderina so indicativos de sangramento antigo.

Alteraes regenerativas se assemelhando a reparo tpico so encontradas nas clulas foliculares frequentemente associadas a leses benignas. Nos processos reparativos, semelhante aos observados
em outros tipos de epitlios, encontramos grupamento de clulas coesas, sem sobreposio, citoplasma
denso, abundante, ncleo aumentado de volume, cromatina fina, nuclolo proeminente e manuteno da
relao nucleocitoplasmtica.

Figura 40 - Bcio coloide,


100x. Coloide fluido (seta
preta) e clulas foliculares
atrficas (setas verdes).

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Clulas de Hrtle (onccitos ou clulas oxiflicas)



Representam clulas foliculares repletas de mitocndrias tornando-se onccitos e so encontradas
em diferentes rgos e tumores. Elas no so funcionantes, pois no sintetizam tiroxina e a sntese de tireoglobulina varivel. Seus grupamentos, por concentrarem pouco iodo, so conhecidos como ndulos
frios e so comuns nas leses benignas, como na Tireoidite de Hashimoto, nos bcios, na sarcoidose e
nas neoplasias (benignas e malignas).

Elas so poligonais e com bordos bem definidos tendo como principal caracterstica o citoplasma
abundante, denso e finamente granular com os grnulos correspondendo as mitocndrias. Coram-se de
azul prpura na colorao de Diff-Quick e de azul a laranja brilhante no Papanicolaou. Os ncleos em
geral so excntricos, aumentados de volume, duas a quatro vezes o tamanho do ncleo da clula folicular
normal. Binucleao comum e multinucleao pode ocorrer. A cromatina varia de fina a grosseira e os
nuclolos podem ser grandes, proeminentes ou pequenos e invisveis.
Clulas parafoliculares ou clulas C

So clulas neuroendcrinas, produtoras de calcitonina, encontradas no carcinoma medular e que
usualmente no so identificadas nas PAAFs, a no ser com a utilizao de tcnicas especiais.
Clulas da paratireoide

Essas clulas e os tumores relacionados a elas so indistinguveis das clulas foliculares sem a
utilizao de tcnicas especiais.
Clulas inflamatrias crnicas

Os linfcitos so os principais tipos representativos de inflamao crnica podendo ser confundidos com ncleos desnudos das clulas foliculares tpicas. Estes ltimos, quando comparados com os linfcitos, apresentam cromatina mais fina, homognea e o contorno nuclear mais proeminente. Os linfcitos
podem ser maduros (ncleos pequenos e hipercromticos) ou imaturos (ncleos maiores e uniformes),
apresentarem-se isoladamente ou em grupamentos sendo frequentemente vistos na Tireoidite de Hashimoto.
Clulas ciliadas

No so vistas normalmente nos aspirados da tireoide. Sua presena pode indicar aspirao de
clulas do epitlio respiratrio, do ducto tireoglosso e de cistos branquiais clivados.
Clulas musculares esquelticas

Em geral secundrias a puno inadvertida do msculo esternocleidomastoideo e podem mimetizar coloide.
Gordura

Tecido adiposo maduro pode excepcionalmente ser visto advindo da puno inadvertida do tecido
adiposo subcutneo do pescoo. Mais raramente, lipomas e liposarcomas tambm tm sido descritos.

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Caderno de Referncia 2

Pigmentos/ cristais
Hemossiderina - associada a sangramento corando-se de dourado na colorao de Papanicolaou
e azul escuro em Diff-Quick.
Melanina - relacionada ao uso de medicamentos como a tetraciclina. O carcinoma medular tambm pode produzir melanina.
Cristais de oxalato - podem ser identificados em tecido tireoideano normal, inflamatrio ou neoplsico.
Amiloide

Pode ocorrer no carcinoma medular, no bcio amiloide, na amiloidose e tambm no plasmocitoma
da tireoide. Na colorao de Papanicolaou o amiloide assemelha-se a um coloide denso.
Coloide

Representa os hormnios tireoideanos. uma glicoprotena PAS + que se cora com mucicarmim.
Est presente em muitas patologias particularmente nas leses foliculares (bcios e neoplasias foliculares). A sua quantidade varia de acordo com o estado funcional da glndula, quando abundante est
relacionado a folculos grandes ou macrofolculos, quando escasso relaciona-se a folculos pequenos ou
microfolculos. Em relao a atividade da glndula quanto mais fino e plido, maior a sua atividade e
quanto mais denso, menor a atividade glandular. Microscopicamente o coloide tem ampla variedade de
aparncias, mas na essncia apenas duas: aquoso ou fluido (difuso) e denso (slido).

Figura 41 - Bcio coloide,


100x. Coloide espesso (seta).


Em 2007 na cidade de Bethesda, Maryland, EUA, ocorreu a conferncia para discusso e concluses sobre a terminologia e critrios morfolgicos a serem utilizados nos diagnsticos de PAAF da
tireoide e baseado nesses critrios, descreveremos um pouco sobre os achados mais comuns.

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Sistema Bethesda para laudos citopatolgicos de tireoide


Categorias diagnsticas recomendadas
Classe
Significado
Classe I

Amostra insatisfatria

Classe II

Ndulo benigno

Classe III

Atipia de significado indeterminado


ou leso folicular de significado
indeterminado

Classe IV

Neoplasia folicular ou ndulo suspeito


de neoplasia folicular

Classe V

Leso suspeita de malignidade

Classe VI

Ndulo maligno

Insuficiente para diagnstico ou insatisfatria



Para ser satisfatria, a amostra tem que ter pelo menos seis grupos de clulas foliculares benignas
e cada grupo formado por pelo menos dez clulas. Todas as vezes que um diagnstico especfico (ex.:
tireoidite de Hashimoto) ou de malignidade possvel de ser dado essa amostra tambm ser considerada
satisfatria. Sero considerados insatisfatrios quando muito hemorrgicos, espessos, dessecados ou
quando o nmero de clulas foliculares for inadequado. Uma das excees da adequabilidade inclui uma
amostra com coloide abundante, pois considerada satisfatria mesmo que seis grupos de clulas no
sejam identificados. Um esfregao pouco celular com coloide abundante sinal de benignidade (cisto
coloide). Outra situao caracterizada de insatisfatria inclui cistos fluidos com ou sem histicitos e com
menos de seis grupamentos com dez clulas foliculares tpicas. Ocasionalmente um stio adjacente pode
ser aspirado e o esfregao composto principalmente de clulas de tecido no tireoideano ser considerado
insatisfatrio.
a

Figura 42 - Amostras insatisfatrias, 100x.


a - Material escasso.
b - Material hemorrgico.

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Caderno de Referncia 2

Benignos

Dentre os diagnsticos benignos os mais comuns so os ndulos foliculares. A maioria dos ndulos
foliculares encontrados so proliferaes das clulas foliculares, ou seja, bcio multinodular ou adenoma
folicular. Com menor frequncia, encontram-se ndulos benignos ou pseudondulos em pacientes com
doenas inflamatrias como Tireoidite de Hashimoto e Tireoidite sub aguda. Muitas condies benignas
no causam ndulos, mas produzem alteraes celulares benignas (alteraes por radiao) que podem ser
confundidas com malignidade. Ndulos foliculares benignos so caracterizados por quantidade varivel
de coloide, clulas foliculares com aparncia de benignidade, clulas de Hrtle e macrfagos.
a

Figura 43 - Bcio coloide.


a - 200x. Grupamento
de clulas foliculares
(seta vermelha) e coloide fluido (seta preta).
b - 400x. Clulas foliculares benignas em monocamada (seta).

Atipia de significado indeterminado ou leso folicular de significado indeterminado



Essa categoria reservada para os esfregaos que contm clulas (foliculares, linfoides ou outras)
com atipia nuclear ou arquitetural no suficiente para ser classificada como suspeitos ou malignos e mais
marcada que a encontrada nas alteraes benignas. Os preparados celulares tm escasso coloide e padro
folicular, dificultando diferenciao entre quadro reacional e neoplsico.
Neoplasia folicular ou ndulo suspeito de neoplasia folicular

So representadas por amostras com alta celularidade, clulas isoladas, grupos ou microfolculos, coloide escasso ou ausente e fundo hemtico. As clulas esto normais ou um pouco aumentadas de
volume, relativamente uniformes, citoplasma escasso ou em quantidade moderada. O ncleo redondo,
levemente hipercromtico e com nuclolo invisvel. No entanto, alguma atipia pode ser observada. Deve-se especificar para que tipo de neoplasia a suspeita est direcionada (adenoma ou carcinoma).
a

Figura 44 - Esfregaos da tireoide


- neoplasia folicular.
a - Arranjos microfoliculares, 100x.
b - Clulas de Hrtle (oncocitos),
200x.

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Leso suspeita de malignidade


So amostras com elementos celulares suspeitos para malignidade, mas com insuficincia de clulas para diagnstico definitivo. As alteraes morfolgicas favorecem malignidade e as amostras so
de moderadas a altamente celulares. Deve-se especificar para que tipo de neoplasia est direcionado a
suspeita (suspeito para carcinoma papilar, carcinoma medular, carcinoma metasttico, linfoma e outros).
Ndulo maligno
Esfregaos com elementos citolgicos definitivos que caracterizam malignidade. Deve-se especificar o tipo de neoplasia, que pode ser:
Carcinoma papilar de tireoide.
Carcinoma pouco diferenciado.
Carcinoma medular de tireoide.
Carcinoma indiferenciado (anaplsico).
Carcinoma de clulas escamosas.
Carcinoma misto (especificando os tipos presentes).
Carcinoma metasttico.
Linfoma no Hodgkin.
Outros.
a

d
Figura 45 - Carcinoma
papilfero.
a - Grupamentos celulares em arranjo papilar (setas), 100x.
b - Micronuclolo (seta
verde) e fenda (seta
preta), 400x.
c - Pseudoincluses
intranucleares (setas),
200x.
d - Corpo de psmamoma (seta), 400x.

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Caderno de Referncia 2

Figura 46 Carcinomas, 200x.


a - Carcinoma papilfero.
b - Carcinoma medular.
c - Carcinoma indiferenciado (Anaplsico).

Quadro das caractersticas diagnsticas de bcio coloide e neoplasma folicular


Caractersticas
Celularidade

Bcio coloide
Varivel

Neoplasma folicular
Usualmente celular

Coloide

Abundante

Pequenas quantidades

Grupos celulares

Grandes folhetos

Grupos microfoliculares

Folculos intactos

Presentes

cinos com luz

Ncleos isolados

Comuns

Incomuns

Clulas epiteliais

Incomuns

Podem ser vistas

Clulas de Hrtle

Comuns, pleomorfas

Vista em adenoma da clula de


Hrtle; monomorfas

Feixes de estroma

Pode estar presente

Incomum

Histicitos

Abundantes

Muito ocasionais

Siderfagos

Abundantes

Incomuns

Histicitos multinucleados

Comuns

Incomuns

Cristais de colesterol

No so raros

Incomuns

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

4.3 Pulmo
Anatomia e histologia do trato respiratrio

O aparelho respiratrio pode ser dividido em dois compartimentos, o trato respiratrio superior,
constitudo pela regio sinonasal indo at a traqueia, e o trato respiratrio inferior que se estende da
traqueia aos pulmes. Os pulmes so rgos duplos que ocupam quase toda a cavidade torcica, tendo
como funes primordiais a ventilao e a troca de gases. Cada pulmo pesa em mdia 600g e divide-se
em lobos. O pulmo direito tem dois (o superior e o inferior) e o pulmo esquerdo tem trs (o superior, o
mdio e o inferior). No hilo (entrada) de cada pulmo, o brnquio principal se divide em dois brnquios
lobares esquerda e trs direita. O brnquio lobar apresenta inmeras subdivises, de dimetros cada
vez menores, produzindo os bronquolos respiratrios. Estes se abrem nos alvolos dando origem s
unidades respiratrias ou cinos pulmonares que constituem o territrio de trocas gasosas. Um conjunto
de trs a cinco bronquolos terminais e seus cinos forma o lbulo pulmonar que bem delimitado por
septos finos de tecido conjuntivo, podendo ser reconhecido macroscopicamente. A superfcie pulmonar
recoberta pela pleura que consiste de tecido conjuntivo e camada nica de clulas mesoteliais planas. A
drenagem pulmonar feita pelos vasos linfticos que drenam para os linfonodos hilares.

O brnquio principal revestido por epitlio colunar pseudo-estratificado ciliado com clulas
mucosas de permeio e clulas pequenas basais (ou de reserva) intercaladas entre as clulas colunares.
Clulas endcrinas, neurossecretoras, tambm chamadas de clulas de Kulchitsky esto presentes no epitlio dos brnquios. A lmina prpria dos brnquios maiores contm glndulas produtoras de muco e suas
paredes so constitudas por tecido conjuntivo, msculo liso e lminas de cartilagem. Os bronquolos so
revestidos por clulas colunares ou cubides ciliadas baixas e possuem paredes finas, sem glndulas ou
cartilagem. J os bronquolos respiratrios so revestidos por epitlio no ciliado com ocasionais clulas
secretoras claras, conhecidas como clulas de claras. Os alvolos so revestidos por pneumcitos tipo
I e tipo II e suas paredes so formadas por capilares sanguneos e estroma de sustentao rico em fibras
elsticas.
4.3.1 Clulas do pulmo

Os principais componentes do tecido pulmonar, vistos nos preparados citolgicos, so as clulas
do epitlio respiratrio e os macrfagos.
Clulas colunares ciliadas

So muito especializadas, esto presentes na traqueia e nos brnquios, possuem ncleos basais,
cromatina fina e uma barra terminal marcada com clios.

Figura 47 - Clulas cilndricas


ciliadas. A seta preta aponta os clios, enquanto a seta
vermelha indica a posio da
barra terminal. Observar os
ncleos basais.

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Caderno de Referncia 2

Clulas mucossecretoras (globet cells)



Esto presentes numa relao de uma para seis clulas ciliadas, tambm possuem ncleos basais e
seu citoplasma distendido pela presena de mucinas que so secretadas para a luz das vias respiratrias,
exercendo importante efeito citoprotetor, tanto do ponto de vista de barreira mecnica, como pela presena em sua composio de receptores para microorganismos, imunoglobulinas, antioxidantes e tampes
orgnicos.
Clulas basais ou de reserva

Localizam-se junto membrana basal, so pequenas e indiferenciadas, provavelmente as precursoras das clulas ciliadas e mucossecretoras.
Clulas neuroendcrinas (ou clulas de Kulchistsky)

Esto presentes no epitlio brnquico, tanto de forma isolada como em agregados (corpos neuroepiteliais) e s so identificadas atravs de coloraes especiais ou pela microscopia eletrnica. Esto
estreitamente relacionadas com as terminaes nervosas da mucosa respiratria e tm funes sensitiva
e secretora. Seus produtos de secreo so capazes de modular a proliferao celular, a reparao brnquica, a permeabilidade vascular e o tnus da musculatura dos vasos e brnquios, exercendo importante
papel na patognese da asma. Quando transformadas por carcingenos originam o carcinoma de pequenas
clulas, uma das neoplasias pulmonares mais agressivas.
Clulas de clara (clara cells)

So clulas colunares, no ciliadas, que revestem os bronquolos terminais onde o fluxo areo
mais lento propiciando maior interao com os componentes qumicos inalados. Geralmente no so
identificadas como tais nos preparados citolgicos. Sua funo mais importante a metabolizao de xenobiticos e em algumas situaes podem contribuir para a gerao de intermedirios carcingenos.
Clulas serosas

Juntamente com as clulas mucosas so responsveis pela maior parte dos componentes orgnicos
do fluido que reveste internamente as vias respiratrias e pela secreo de componentes importantes para
a defesa pulmonar tais como a lizosima, lactoferrina e imunoglobulina A (IgA). Elas so encontradas na
superfcie epitelial e nas glndulas da lmina prpria.
Pneumcitos Tipo I

Revestem cerca de 95% da superfcie interna alveolar, so mais numerosas que os pneumcitos II,
so planas, pobres em organelas e com citoplasma extenso. So clulas que no se dividem.
Pneumcitos Tipo II

Encontram-se na superfcie interna alveolar, so clulas redondas com citoplasma vacuolado, difceis de serem distinguidas dos macrfagos alveolares nos preparados citolgicos. So responsveis pela
produo do surfactante, substncia que controla a tenso superficial da interface ar-lquido pulmonar
e que facilita a fagocitose de microorganismos pelos macrfagos alveolares. Quando h leso alveolar,
funcionam como clulas de reserva para os pneumcitos tipo I.

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

Macrfagos alveolares

Originam-se dos prprios pulmes ou dos moncitos circulantes, sendo tambm conhecidos como
pneumcitos tipo III. Cada alvolo possui de dois a trs macrfagos residentes livres que representam a
primeira linha de defesa alveolar e so frequentemente identificados contendo pigmento de carbono no
seu citoplasma. A presena de hemossiderina no seu citoplasma indicativa de sangramento antigo que
pode estar associado s leses benignas como infartos, ou s neoplasias malignas. Sua forma depende do
tipo e da quantidade do material fagocitado. Geralmente apresentam um ou mais ncleos redondos ou
ovais e o citoplasma vacuolado.
Clulas mesoteliais

So frequentemente vistas nas bipsias aspirativas, particularmente nas leses da pleura. Em geral formam lenis planos com espaos ou janelas entre elas ou podem ser vistas isoladamente. Seus
ncleos so redondos ou ovalados, podendo apresentar fendas, a cromatina fina e uniforme, o nuclolo
pequeno e o citoplasma delicado. Quando reativas, podem ser confundidas com clulas malignas, pois
apresentam citoplasma denso, pleomorfismo nuclear e nuclolo proeminente.
4.3.2 Constituintes no nelulares
Podem ser inalados, produzidos pelo hospedeiro ou formados como reposta a material estranho ou ainda
introduzidos como contaminantes laboratoriais. Os mais frequentes so:
Espirais de Cushmann

So filamentos enrolados de muco que se coram em prpura pelo Papanicolaou. So achados inespecficos e no devem ser relatados no laudo.
Cristais de Charcot-Leyden

So derivados da degenerao dos eosinfilos em pacientes com doenas alrgicas graves como a
asma. Sua estrutura romboide e eosinoflica.
Corpos de Psamoma

Estruturas constitudas de calcificao concentricamente laminadas, vistas tanto em tumores malignos com arquitetura papilar (carcinoma papilfero da tireide e carcinoma do ovrio entre outros) como
em leses benignas como a tuberculose pulmonar e a microlitase alveolar.
4.3.3 Tipos de amostras

A interpretao dos espcimes citolgicos do trato respiratrio requer familiaridade com o tipo de
amostra, ou seja, como o espcime foi obtido e de como foi preparado do ponto de vista tcnico, pois a
citomorfologia e a acurcia diagnstica variam com eles. As amostras podem ser classificadas em escarro
e espcimes brnquicos, j descritos no Captulo 1. Neste captulo, descreveremos apenas as amostras de
Puno aspirativa por agulha fina (PAAF), que pode ser classificada nos seguintes tipos:
Puno aspirativa transbrnquica

til para o diagnstico de leses primrias localizadas abaixo da superfcie brnquica e para o
estadiamento de cncer pulmonar pela amostra de linfonodos do mediastino. A leso aspirada com agulha retrtil que passa atravs de um cateter flexvel adaptado ao broncoscpio. um mtodo bom para
distinguir carcinoma de pequenas clulas dos carcinomas de no-pequenas clulas.

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Caderno de Referncia 2

Puno aspirativa transesofgica



Feita com o endoscpio atravs da passagem de uma agulha pelo esfago. Sua acuidade diagnstica de 70% a 80% que se aproxima da puno aspirativa transbrnquica guiada por ultrassom (84% a
96%).
Puno aspirativa percutnea

Mtodo alternativo para biopsia cirrgica, pois apresenta mnima morbidade, facilidade e rapidez no diagnstico. Seu principal objetivo diferenciar o carcinoma de pequenas clulas daqueles de
no-pequenas clulas. Geralmente realizada por radiologistas, utilizando o ultrassom ou a tomografia
computadorizada como guia. A interveno cirrgica pode ser evitada em mais de 50% dos pacientes com
suspeita clnica de cncer pulmonar. O pneumotrax a complicao mais comum.
Contraindicaes da Puno Aspirativa
Ditese hemorrgica.
Terapia com anticoagulante.
Hipertenso pulmonar severa.
Tosse incontrolvel.
Enfisema avanado.
Suspeita de malformao arteriovenosa.
Paciente no cooperativo.
Suspeita de cisto hidtico pulmonar.
4.3.4 Neoplasias malignas do pulmo (carcinomas broncognicos)

O cncer pulmonar considerado, em todo mundo, o inimigo pblico nmero um e a neoplasia
maligna letal mais comum, tanto em homens quanto em mulheres. Estima-se que haja 1.2 milhes de casos novos por ano e 1.1 milhes de mortes por ano. Nos homens, cerca de 85% a 90% dos casos podem
ser atribudos ao cigarro. Infelizmente, o hbito de fumar tem aumentado nos pases recentemente industrializados, particularmente na sia e na Europa, e o aumento da sua prevalncia entre mulheres jovens
preocupante. Embora tenha havido declnio na taxa de mortalidade, em alguns pases desenvolvidos que
fizeram programas de controle, o prognstico ainda pobre na maioria dos pases com uma sobrevida
de 10% em cinco anos. Assim, a preveno primria, ou seja, estimular aos que nunca fumaram a no
comear a fumar e aos fumantes a parar de fumar, permanece sendo a medida mais eficaz para a reduo
da mortalidade.

As causas para o seu desenvolvimento so inmeras. No entanto, a associao mais forte tem sido
com o uso do tabaco (80% a 90% dos casos de cncer do pulmo esto associados ao uso do tabaco) que
contm inmeras substncias carcingenas, tais como compostos radioativos e agentes iniciadores da
carcinognese. Dentre os muitos carcingenos do tabaco, o benzopireno considerado um dos principais
causadores da mutao no gene TP53 (gene supressor tumoral) observada nos carcinomas pulmonares
dos fumantes. Outros fatores que podem estar envolvidos no desenvolvimento do carcinoma pulmonar
incluem: radiao, gs radnio, poluio do ar, exposio ocupacional a metais (arsnico, nquel), slica
cristalina e aos compostos de nquel como o benzeno e o cloreto de vinil. Exposio ao asbestos potencializa o efeito do tabaco. Vrus e oncogenes virais tambm podem estar associados ao carcinoma pulmonar.

O carcinoma pulmonar geralmente afeta indivduos que esto acima dos 40 anos e apresenta um
pico de incidncia em torno dos 60 anos. Tosse, dispneia, rouquido, hemoptise ou pneumonia so um dos

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4 Padres Citopatolgicos em rgos Especficos

principais sintomas. Em alguns pacientes assintomticos, no entanto, os carcinomas podem ser diagnosticados incidentalmente em exames de imagem

Histologicamente, os carcinomas pulmonares podem ser agrupados nos seguintes tipos: carcinoma escamoso, adenocarcinoma, carcinoma de grandes clulas e carcinoma de pequenas clulas

Estes carcinomas frequentemente apresentam heterogeneidade histolgica, ou seja, em uma leso,
podem ser identificados mais de um tipo histolgico.
a

Figura 48 a - Adenocarcinoma bem diferenciado do pulmo, 200x. Lavado brnquico. Ncleo grande (seta preta) e nuclolo
proeminente (seta vermelha).
b - Adenocarcinoma bronquolo alveolar, 200x. Discreta atipia nuclear (seta preta) e citoplasma delicado (seta verde).
a

Figura 49 - Carcinoma escamoso bem diferenciado. Escovado brnquico, 400x.


a - Clula com citoplasma queratinizado (seta).
b - Escamas crneas em rea de necrose tumoral (seta).

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Caderno de Referncia 2

Figura 50 - Carcinoma de pequenas clulas. Escovado brnquico, 400x.


a - Amoldamento nuclear (seta preta) e cromatina em sal e pimenta (seta verde).
b - Mitose atpica (seta).


O escrutnio dos esfregaos deve considerar que a presena de abundante celularidade e de
grupamentos grandes com clulas apresentando ncleos maiores que o ncleo das clulas brnquicas, ainda
que uniformes, deve levantar a suspeita de malignidade. A anlise citolgica deve ser bastante criteriosa
sempre considerando a heterogeneidade destes tumores, para que se faa uma correta classificao.

Do ponto de vista clnico, a classificao em carcinoma de pequenas clulas e em carcinoma
de no-pequenas clulas fundamental para o planejamento teraputico, uma vez que os carcinomas
de pequenas clulas apresentam comportamento mais agressivo, pois crescem rapidamente e no so
ressecveis cirurgicamente. Com o desenvolvimento de novas terapias para tipos especficos de carcinoma
pulmonar, a distino histolgica e mesmo molecular est se tornando a cada dia mais importante para o
tratamento.
Padres comparativos de benignidade e malignidade dos aspirados (PAAF) do pulmo
Benignidade
Poucas

Muitas

Arranjos

Organizados, ordenados e com


coeso

Desorganizados, com superpopulao e sem coeso

Relao ncleo/citoplasma

Dentro da normalidade

Altos ndices da relao

Aumento nuclear

De quatro a seis vezes menor

Em geral, seis vezes maior

Membrana nuclear

Suave

Irregular

Cromatina

Fina a grosseira, mas regular

Irregular e grosseira

Clios

Presentes

Ausentes

Presena de clulas atpicas

Malignidade

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4.4 Lquidos

A pleura uma delicada membrana serosa que reveste o pulmo (pleura visceral) e a parte interna
da parede torcica (pleura parietal). A pleura visceral e a parietal esto em continuidade e formam um
espao virtual entre elas. Uma pequena quantidade de lquido est presente no espao pleural que age
como lubrificante para facilitar os movimentos respiratrios. A pleura normal possui uma camada nica
de clulas mesoteliais com uma pseudomembrana que repousa num tecido conjuntivo. Neste tecido
conjuntivo podemos encontrar arterolas, vnulas e nervos (perifricos, simpticos e parassimpticos). A
estrutura, a funo e as doenas do pericrdio e peritnio so similares as da pleura.
Clulas mesoteliais

muito importante saber reconhecer as clulas mesoteliais benignas, pois elas podem ser
confundidas com malignidade (particularmente adenocarcinoma), especialmente quando so reativas ou
aparentemente atpicas, como frequentemente se apresentam. As clulas mesoteliais so clulas epiteliais
derivadas do mesoderma. Quando normais ou no reativas, so vistas na PAAF como arranjos planos e
ordenados, apresentando citoplasma e bordos celulares definidos com espaos ou janelas proeminentes
entre elas. Os ncleos no reativos so paracentrais, usualmente uniformes, redondos a ovais, com
cromatina fina e delicada e nuclolos infrequentes. Alteraes reativas das clulas mesoteliais so comuns.
Alm dos arranjos planos e clulas isoladas, grupos tridimensionais com contornos em rosetas ou grupos
papilares podem ser vistos. As clulas reativas apresentam variaes pleomrficas (forma e tamanho). O
citoplasma dessas clulas denso na parte central e delicado e claro na borda. Os ncleos so centrais ou
paracentrais com contorno irregular e nuclolo proeminente. As doenas mais frequentes do mesotlio so
infeces e neoplasias.
Mesoteliomas benignos

So raros na pleura e mais comuns no peritnio. Em geral o tumor cresce como um processo papilar recoberto por uma ou mais camadas de clulas mesoteliais. Na PAAF a celularidade abundante com
arranjos de clulas mesoteliais reativas ou atpicas. Os mesoteliomas benignos fibrosos so mais comuns
na pleura (visceral) que no peritnio e uma das principais caractersticas o predomnio dos fibroblastos
em relao s clulas mesoteliais. A celularidade varivel. Algumas leses so muito vascularizadas
resultando num aspirado hemorrgico. As clulas so fusiformes, lembrando fibroblastos e ncleos desnudos podem ser vistos. Fragmentos de estroma metacromtico frequentemente esto presentes. Mitoses
no so vistas. Em alguns casos a celularidade pode ser maior, com clulas moderadamente pleomrficas
e com cromatina grosseira.
Mesoteliomas malignos

A pleura o local mais frequente dos mesoteliomas malignos, mas estes tambm podem ocorrer
no pericrdio e peritnio. Na PAAF as amostras so usualmente celulares, e os achados citolgicos podem mostrar alteraes puramente epiteliais, bifsicas (epiteliais e clulas fusiformes) at anaplsicas.
O padro bifsico muito caracterstico, mas nem sempre est presente. Alta celularidade com papilas
abundantes e achados clnicos favorveis ajudam no diagnstico. O tipo mais comum do mesotelioma
maligno o carcinomatoso. Os aspectos celulares podem ser mnimos ou inequvocos de malignidade. As
clulas formam agrupamentos planos ou tridimensionais, papilares ou do tipo tbulo acinares, mas podem
ser pouco coesas sob a forma de clulas isoladas. O contorno celular varia de redondo a poligonal ou angular e pequeno componente de clulas fusiformes comum. O citoplasma abundante com bordos bem
definidos. Vacuolizao pode estar presente e ser decorrente de natureza degenerativa ou conter mucina

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mesenquimal metacromtica (cido hialurnico). A presena de clulas epitelioides vacuolizadas sugere


adenocarcinoma. Corpos de psamomas e corpos de asbestos podem ser encontrados, mas nenhum deles
especfico para malignidade.

Figura 52 - Lquido pleural,


400x. Metstase de adenocarcinoma pulmonar. Ncleos atpicos com cromatina granular
e grosseira (setas).

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Referncias
ALI S.Z.; CIBAS E.S. The Bethesda System for thyroid cytopathology: definitions, criteria, and explanatory notes.
New York: Springer, 2009.
BIBBO, M. Comprehensive Cytopathology. 2. ed. Philadelphia: Saunders, 1997.
CIBAS, E.S.; DUCATMAN, B. S. Cytology, diagnostic principles and clinical correlates. 3. ed. Philadelphia: Saunders, 2009.
DeMAY R.M. The art and science of Cytopathology. Vol 1 e 2. American Society of Clinical Pathologists, 1996.
FILHO, G. B. Bogliolo Patologia. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2011.
HAJDU, S.; EHYA, H. A note from history: foundation of diagnostic cytology. Annals of Clinical & Laboratory Science, 2008; 38(3):296-299. Disponvel em: <www.annclinlabsci.org>. Acesso em: 26 dez. 2011.
KOSS, L.G. Diagnostic cytology and its histopathologic bases. 3. ed. Vol 2. Philadelphia: Lippincott, 1979.
KOSS, L.G; STANISLAW, W; WLODZIMIERZ, O. Aspiration biopsy: cytologic interpretation and histologic bases.
2. ed. New York, Tokyo: Igaku-Shoin, 1992.
LIMA, D. & QUEIROZ, C. O laboratrio de citopatologia: aspectos tcnicos e operacionais. Salvador: Editora Universitria/UFPE, 2000.
MCKEE, G.T. Citopatologia. So Paulo: Artes Mdicas, 1997.
PAPANICOLAOU SOCIETY OF CYTOPATHOLOGY. Online Image Atlas. Disponvel em: <http://www.papsociety.
org/atlas.html>. Acesso em: 18 mai. 2012.
RASKIN, R.E. & MEYER, D.J. Atlas de citologia de ces e gatos. So Paulo: Roca, 2003.
SALES, R & ONISH, R. Toracocentese e bipsia pleural. Jornal Brasileiro de Pneumologia. 2006; 32(4):S170-173.
Disponvel em: <www.jornaldepneumologia.com.br>. Acesso em: 6 jan. 2012.
TAKAHASHI, M. Atlas colorido de citologia do cncer. 2. ed. So Paulo: Manole, 1981.
TORRES, F. & LEON, R. Biopsia por puncion con aguja fina sin aspiracion en el diagnostico prequicurgico del nodulo
del tiroides. Revista Cubana Endocrinol. 2001; 12(3):139-44. Disponvel em: <www.bases.bireme.br>. Acesso em: 28
dez. 2011.
TRAVIS W.D., BRAMBILLA E., MULLER-HERMELINK H.K., HARRIS C.C (Eds). World Health Organitazion
Classification of Tumors: pathology and genetics of tumors of the lung, pleura, thymus and heart. IARC Press: Lyon
2004.
ZAKOUR, H. Diagnostic Cytopathology of the breast. Churchill Livingstone, 1999.

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Apndice

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Perfil dos autores


Catarina de Oliveira Neves

Mdica, doutora em patologia pela Universidade Estadual de Campinas (Unicamp); professora
adjunta e Chefe do Departamento de Patologia do Centro de Cincias da Sade da Universidade Federal
de Pernambuco (UFPE), atua na rea da citopatologia do Programa de Residncia Mdica do Hospital das
Clnicas da UFPE.
Ftima Regina Gomes Pinto

Mdica, especialista em citopatologia; citopatologista do Servio de Patologia do Trato Genital
Inferior do Instituto Materno-Infantil de Pernambuco (IMIP) e do Laboratrio da Mulher do Laboratrio
Central de Sade Pblica (Lacen-PE) da Secretaria Estadual de Sade de Pernambuco.
Letcia Maria Correia Katz

Mdica, especialista em citopatologia pela Sociedade Brasileira de Citopatologia e Associao
Mdica Brasileira; mestre em Sade Materno Infantil pelo Instituto Materno Infantil Prof. Fernando
Figueira (IMIP-PE); citopatologista do Laboratrio da Mulher do Laboratrio Central de Sade Pblica
(Lacen-PE) da Secretaria Estadual de Sade de Pernambuco e do Laboratrio da Secretaria Municipal
de Sade de Recife/PE; vice presidente da Sociedade Brasileira de Citopatologia; Vogal da Sociedade
Latinoamericana de Citopatologia (SLAC); revisora do Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina
Laboratorial (JBPML).

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