Unach Ec Lab - Clin 2016 0009

UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE SALUD
CARRERA LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO
TESINA DE GRADO PREVIO A LA OBTENCIN DEL TTULO DE

LICENCIADOS EN CIENCIAS DE LA SALUD MENCIN
LABORATORIO CLNICO E HISTOPATOLGICO
TEMA:
DETERMINACIN DE PROTENA P-30 Y RASTREO DE

ESPERMATOZOIDES EN PERSONAS VCTIMAS DE AGRESIN
SEXUAL EN EL CENTRO DE INVESTIGACIN DE CIENCIAS
FORENSES-TUNGURAHUA EN EL PERODO ENERO-AGOSTO
2015.
Autores:
Jhomayra Michael Cisneros Valencia.
Carla Gabriela Villarroel Villarroel.
Tutor:
Lic. Vernica Cceres.
Riobamba-Ecuador
2016.
I
CERTIFICACIN DEL TRIBUNAL
El tribunal de defensa privada conformada por la Lic. Elena Brito Presidente del tribunal;
Lic. Vernica Cceres Miembro del tribunal y la Lic. Mercedes Balladares Miembro del
tribunal, certifican que las seoritas: Jhomayra Michael Cisneros Valencia portadora de
la cdula 0202141685 y Carla Gabriela Villarroel Villarroel portadora de la cdula
0604077362, egresadas de la carrera de Laboratorio Clnico e Histopatolgico de la
Universidad Nacional de Chimborazo, se encuentran aptas para el ejercicio acadmico
de la defensa pblica de la tesina previo a la obtencin del ttulo de Licenciadas en
Ciencias de la Salud en Laboratorio Clnico e Histopatolgico con el tema de
investigacin: DETERMINACIN DE PROTENA P30 Y RASTREO DE

ESPERMATOZOIDES EN PERSONAS VCTIMAS DE AGRESIN SEXUAL
EN EL CENTRO DE INVESTIGACIN DE CIENCIAS FORENSES-
TUNGURAHUA EN EL PERODO ENERO-AGOSTO 2015.
Una vez que han sido realizadas las revisiones peridicas y ediciones
correspondientes a la tesina.
Presidente del tribunal Miembro del tribunal Miembro del tribunal
II
III
IV
DEDICATORIA:
Dedico el presente trabajo a mi hija
Camila quien es la mayor inspiracin
de mi vida, por quien he luchado y
luchar por alcanzar mis sueos y ser
mejor cada da.
A mis familiares y amigos que me
apoyaron y motivaron a conseguir
este logro.
Carla Gabriela Villarroel Villarroel

Con mucho orgullo dedico este
esfuerzo investigativo a mi madre
Marcia Valencia y a mi ngel Gustavo
Valencia, por ser mi luz, mi gua, mi
inspiracin y mi apoyo incondicional y
por haber depositado en m todo su
amor, f y confianza.
A todos y cada una de las personas

que me desearon xitos o que
simplemente contribuyeron en este
logro.
Jhomayra Michael Cisneros Valencia.
V
AGRADECIMIENTO
Agradecemos principalmente a DIOS

por haber guiado nuestras vidas e
iluminado el camino del saber. A
nuestra familia por su apoyo
incondicional en el transcurso de
nuestra carrera. Y tambin
agradecemos a la UNACH y a sus
docentes.
Quienes han impartido sus
conocimientos, que ahora lo vamos a
poner en prctica en nuestra vida
profesional.
Jhomayra y Carla
VI
RESUMEN
El estudio de las manchas de semen tiene gran importancia en la criminalstica, pues al igual
que la sangre, constituye una prueba muy precisa. Debido a su procedencia, su estudio
generalmente se encuentra asociado a delitos que afectan las buenas costumbres y el buen
orden de las familias, por ejemplo; casos de violacin, acto carnal con menores y el ultraje al
pudor, entre otros. En todos los casos, el informe pericial que emite el experto adquiere
fundamental importancia para la investigacin, esclarecimiento del hecho y calificacin legal.
Dentro del Cdigo Orgnico Integral Penal ecuatoriano se clasifica los tipos de agresin sexual
y se establece la condena al acusado segn los artculos 166, 167, 170, 171, 173 y 175.
Entre los ensayos inmunocromatogrficos para la deteccin de protena P-30 que se

comercializan, se encuentran pruebas como PSA-check-1; Seratec PSA Semiquant y One Step
ABAcard PSA.
El kit ABAcard PSA es el ms empleado en el rea forense, este utiliza anticuerpos

monoclonales antiP-30 humanos que se unen al antgeno prosttico especfico (P-30)
formando un complejo antgeno-anticuerpo. El lmite inferior de deteccin es de 4 ng/mL, por
lo que una muestra que contenga una cantidad igual o superior, es evidenciada por la prueba,
determinando un resultado positivo.
La visualizacin microscpica de espermatozoides sigue siendo considerada la prueba

definitiva para la demostracin de esperma en los laboratorios de biologa forense.
La tcnica Kernechtrol-Picrondigocarmn KPIC o rbol de Navidad se utiliza de forma corriente

como tincin identificativa de clulas espermticas. Este mtodo se caracteriza por discernir
principalmente espermatozoides completos o cabezas de espermatozoide de clulas no
espermticas, bien clulas epiteliales o levaduras, que regularmente estn presentes en las
muestras procedentes de una agresin sexual. La composicin de la tcnica es de sulfato de
aluminio, nuclear Fast Red, cido pcrico e ndigo carmn.
VII
VIII
NDICE GENERAL
PORTADA I
CERTIFICACIN DEL TRIBUNAL... II
ACEPTACIN DEL TUTOR. III
DERECHOS DE AUTORA.. IV
DEDICATORIA.. V
AGRADECIMIENTO.. VI
RESUMEN. VII
ABSTRACT.. VIII
INTRODUCCIN -1-
CAPTULO I -3-
TEMA -3-
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA: -3-
1.2 FORMULACIN DEL PROBLEMA: -4-
1.3. OBJETIVOS -4-
1.3.1. OBJETIVO GENERAL: -4-
1.3.2. OBJETIVOS ESPECFICOS: -4-
1.4. JUSTIFICACIN -5-
CAPTULO II -6-
2.1. POSICIONAMIENTO PERSONAL -6-

2.2. FUNDAMENTACIN TERICA -6-
2.2.1 LQUIDO SEMINAL -6-
FORMACIN DEL LQUIDO SEMINAL -6-
COMPOSICIN DEL LQUIDO SEMINAL -8-
VOLUMEN DEL SEMEN -8-
2.2.2 PRUEBAS DETERMINANTES DE AGRESIN SEXUAL -9-
PRUEBAS ORIENTATIVAS -9-
PRUEBAS CONFIRMATORIAS O ESPECFICAS -9-
2.2.3 LA ESCENA DEL CRIMEN - 13 -
PROTECCIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN - 13 -
OBSERVACIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN - 13 -
FIJACIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN - 13 -
RECOLECCIN DE INDICIOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN - 14 -
IX
PROTOCOLO DE RECOLECCIN DE INDICIOS BIOLGICOS EN DELITOS SEXUALES - 14 -
SEMEN LQUIDO - 15 -
EXUDADO DE LA CAVIDAD ANAL - 16 -
EXUDADO DE LA CAVIDAD VAGINAL - 16 -
EXUDADO DE LA REGIN DEL GLANDE - 17 -
EXUDADO DE LA CAVIDAD ORAL - 18 -
LAVADO DE PREPUCIO (GLANDE) - 20 -
LEVANTAMIENTO DE SEMEN SOBRE EL CUERPO - 20 -
MCULAS DE SEMEN EN TELAS COMO CORTINAS, ALFOMBRAS, VESTIMENTAS, ETC. - 21 -
ROTULADO FORENSE - 22 -
EMBALAJE LOS INDICIOS ENCONTRADOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN - 22 -
ETIQUETADO - 23 -
2.2.4 PROTENA SEMINAL P-30 - 24 -
PROTOCOLO PARA DETERMINACIN DE PROTENA P-30 - 25 -
PROTOCOLO PARA PREPARACIN DE LA MUESTRAS - 26 -
PROTOCOLO PARA OBTENCIN DE MUESTRA EN UN SOPORTE SOLIDO - 27 -
2.2.5 TINCIN DE RBOL DE NAVIDAD - 29 -
PREPARACIN DE REACTIVOS TINCIN RBOL DE NAVIDAD COLORANTE ROJO RPIDO
NUCLEAR (KERNECHTROT) - 31 -
PROTOCOLO DE TINCIN ARBOL DE NAVIDAD - 32 -
PRINCIPIO DE LA TINCIN RBOL DE NAVIDAD - 33 -
SISTEMA DE CAPTURA DE IMGENES MICROSCPICAS (INFINITY ANALYZE) - 35 -
2.2.6 INFORME PERICIAL - 35 -
CONTENIDO DEL INFORME PERICIAL - 36 -
2.2.7 PENALIZACIN DE DELITOS SEXUALES - 37 -
CLASIFICACIN DE LAS PENAS - 37 -
CONDENAS ESTABLECIDAS EN DELITOS SEXUALES - 37 -
LA AUDIENCIA DE JUZGAMIENTO - 40 -
LA SENTENCIA - 41 -
2.2.8 CIENCIAS FORENSES - 41 -
CENTROS DE INVESTIGACIN DE CIENCIAS FORENSES - 42 -
ACREDITACIN DE PERITOS - 42 -
REQUISITOS PARA CALIFICAR COMO PERITOS - 42 -
CADENA DE CUSTODIA - 43 -
LUCES FORENSES - 43 -
2.3. DEFINICIN DE TRMINOS BSICOS - 45 -
2.4. HIPTESIS - 48 -
2.5. VARIABLES DE LA INVESTIGACIN - 48 -
2.6. OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES - 48 -
CAPTULO III - 49 -
3. MARCO METODOLGICO - 49 -
3.1. MTODO CIENTFICO - 49 -
3.2. TIPO DE INVESTIGACIN - 49 -
X
3.3. TIPO DE ESTUDIO - 49 -
3.4. POBLACIN Y MUESTRA - 49 -
3.5. TCNICAS E INSTRUMENTOS PARA LA RECOLECCIN DE DATOS. - 49 -
3.6. TCNICAS PARA EL PROCESO Y ANLISIS DE DATOS - 50 -
CAPTULO IV - 61 -
4.1 CONCLUSIONES - 61 -
4.2 RECOMENDACIONES - 61 -
4.3 ANEXOS - 65 -
XI
INTRODUCCIN
En el ao de 1826 qued registrado uno de los primeros esfuerzos para identificar la presencia
de semen en una prenda, cuando Ollivier dAngers y Barruel reportaron un caso en el que
fueron consultados. El sospechoso afirmaba que unas manchas encontradas en su ropa fueron
hechas por carne cruda de animal. Los expertos examinaron las reas de la ropa junto con
otros controles, y compararon su respectiva humectabilidad con agua, la naturaleza y color del
extracto acuoso, y el comportamiento del extracto en una solucin de alcohol absoluto. El
extracto tena un olor espermtico, era alcalino, y sus restos al secarse era pegajosos. Por lo
que concluyeron que la mancha no pudo haber sido causada por grasa animal, y que se trataba
de una mancha de semen.
Orfila, uno de los mdicos forenses ms respetados de la poca, report 1827 una serie de
mtodos de anlisis qumico para la identificacin de fluido 10 seminal. Los mtodos que
desarroll se basaban en la apariencia de las manchas cambios en el color y consistencia al ser
sometidos al calor e inmersin en agua, el olor emitido al humedecer la mancha, y el
comportamiento del extracto acuoso frente al tratamiento con diferentes agentes qumicos.
Las manchas de semen eran comparadas bajo estos criterios con descargas vaginales, con
moco nasal y manchas de saliva.
Orfila no tena demasiada confianza en los mtodos por microscopa y opinaba que deban
utilizarse siempre mtodos qumicos para la identificacin de las manchas. Devergie, en 1839,
encontr que se podan localizar espermatozoides en el canal uretral de la vctima, a travs de
un examen microscpico. Not que haba encontrado espermatozoides en manchas con 10
meses de antigedad y que la confirmacin a travs de la deteccin con espermatozoides era
ms certera que los mtodos qumicos utilizados para la identificacin de semen.
Sin embargo, no fue hasta 1839 cuando HL Bayard public procedimientos confiables para la
deteccin espermatozoides por microscopa, y fue en 1897 cuando el Dr. W. F. Whitney
desarroll el mtodo denominado tincin de rbol de Navidad, mtodo actualmente utilizado
en INACIF.
La mayora de los mtodos qumicos utilizados inicialmente fueron poco a poco abandonados
por la mayora de investigadores, y la generalidad empez a basar sus estudios en la
microscopa. Posteriormente surgieron nuevos mtodos bioqumicos para la deteccin de
semen, y s empez a utilizar la enzima fosfatasa cida, presente en gran concentracin en el
semen, en relacin con otros fluidos corporales. Est enzima fue reportada por primera vez
-1-
por Kutscher y Wohlbergs en 1935, sin embargo, Lundquist en 1945 le dio aplicacin forense.
Tambin se utilizaron otras metodologas para detectar manchas de semen; en 1927, report
que numerosos fluidos biolgicos, incluidas las manchas de semen, florecan al ser sometidos a
luz ultravioleta. Desde ese entonces muchos autores han publicado artculos al respecto y
muchos laboratorios utilizan esa metodologa de rutina.
Posteriormente, surgieron mtodos inmunolgicos para deteccin de semen en diferentes

superficies, inicialmente se utilizaron reacciones de precipitacin, algunas reacciones de
formacin de cristales, y finalmente los utilizados actualmente que se basan en la
inmunocromatografa. Este ltimo mtodo es el utilizado para deteccin de la protena
seminal P-30, que fue identificada por Sensabaugh en 1978, y se bautiz en un principio en
funcin de su peso molecular -30 000 daltons-.
En la actualidad se utilizan una combinacin de mtodos bioqumicos, inmunolgicos y

microscpicos para la deteccin e identificacin de semen en cualquier superficie, el INACIF
utiliza las pruebas de fosfatasa cida, protena seminal P-30 y tincin de rbol de Navidad.
"Siempre que dos objetos entran en contacto transfieren parte del
material que incorporan al otro objeto". Edmund Locard.
-2-
CAPTULO I
TEMA: Determinacin de protena P-30 y rastreo de espermatozoides en personas vctimas de

agresin sexual en el Centro de Investigacin de Ciencias Forenses-Tungurahua en el perodo
Enero-Agosto 2015.
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA:
Durante el ao 2014 segn datos que arroja la OMS indican que el 35% de las mujeres del
mundo han sufrido violencia de pareja o violencia sexual por terceros en algn momento de su
vida. Por trmino medio, el 30% de las mujeres que han tenido una relacin de pareja refieren
haber sufrido alguna forma de violencia fsica o sexual por parte de su pareja. Un 38% de los
asesinatos de mujeres que se producen en el mundo son cometidos por su pareja.
En Ecuador algunas cifras escalofriantes difundidas por el INEC datan que 1 de cada 4 mujeres
en el Ecuador ha vivido violencia sexual, 380.000 mujeres han sido violadas, cifra difundida en
el Atlas de Desigualdades Socio Econmicas del SENPLADES.
El embarazo en nias entre 10 y 14 aos aument en un 78% en los ltimos diez aos en el
pas. Todo embarazo en nias menores de 14 aos es producto de Violacin.
En el pas 3.684 nias de entre 12 a 14 aos fueron vctimas de violencia sexual en el 2010, lo
cual representa 10 denuncias diarias, no sabemos cuntas quedaron embarazadas.
Se denuncian entre 10 y 14 violaciones diarias, ese es el rango desde hace cinco aos.
Para la investigacin de hechos delictivos el Gobierno implement Centros de Investigacin de

Ciencias Forenses los mismos que se encuentran estratgicamente ubicados en diferentes
zonas del Ecuador siendo as que CICF se encuentran en las ciudades de: Manta, Santo
Domingo, Ambato, Machala, Loja, Nueva Loja, Esmeraldas y Cuenca. Estas ciudades fueron
escogidas considerando la incidencia de los delitos, adems de su ubicacin estratgica.
Adems dichos Centros de Investigacin cuentan tanto con personal capacitado como el
equipamiento apropiado y especfico para la investigacin forense permitiendo de esta forma
esclarecer hechos delictivos y muertes sospechosas que a diario ocurren en nuestro pas.
Segn datos obtenidos del CICF-T en el rea de Biologa Forense a lo largo del perodo Enero a
Agosto del 2015 se han contabilizado 94 casos de agresin sexual de los cuales se han
-3-
analizado un total de 333 evidencias las que arrojaron 102 resultados positivos para Protena
P-30 y en 64 de las evidencias se observ Espermatozoides en las placas.
1.2 FORMULACIN DEL PROBLEMA:
Cmo ayudara la determinacin de protena P-30 y rastreo de espermatozoides a las

personas vctimas de agresin sexual en el Centro de Investigacin de Ciencias Forenses-
Tungurahua en el perodo Enero-Agosto 2015?
1.3. OBJETIVOS
1.3.1. OBJETIVO GENERAL:
Determinar la protena P-30 y rastreo de espermatozoides en personas vctimas de

agresin sexual en el Centro de Investigacin de Ciencias Forenses-Tungurahua en el
perodo Enero-Agosto 2015.
1.3.2. OBJETIVOS ESPECFICOS:
Identificar las pruebas de Biologa Forense utilizadas en casos de agresin sexual.

Explicar el fundamento del mtodo de determinacin de protena P-30 y rastreo de
espermatozoides.
Reconocer las tcnicas apropiadas para el levantamiento de semen en la escena del
crimen.
-4-
1.4. JUSTIFICACIN
En la actualidad la agresin sexual es un tema de preocupacin debido a que sus ndices de

prevalencia han aumentado notablemente, estas agresiones se pueden dar tanto a nivel
intrafamiliar como extrafamiliar.
Las agresiones sexuales se estn dando desde infantes hasta personas adultas mayores y en
muchos de los casos provocando la muerte de los mismos, es as como actualmente se han
reformulado las leyes con el fin de que estas sean ms drsticas y as buscar castigar de
manera ms justa a los agresores.
La investigacin de hechos delictivos antes de la implementacin de los Centros Forenses

estaba a cargo de varios departamentos pblicos, los cuales no contaban con profesionales
especializados en las ramas forenses, ni equipos especficos y tampoco tcnicas forenses
apropiadas para el estudio, por lo tanto estas investigaciones no eran completamente veraces.
Para lograr hacer justicia a estos actos se implementan los Centros de Investigacin de
Ciencias Forenses y dentro de los cuales un rea de Laboratorio de Biologa Forense en los que
se llevan a cabo una serie de procedimientos entre ellos la determinacin de Protena P30 y el
Rastreo de Espermatozoides que van a llegar a la determinacin de la existencia o no de
agresin sexual, tomando en cuenta que en muchos de los casos que se han analizado puede
existir solamente la presencia de Protena P30 mientras que en el Rastreo de Espermatozoides
los mismos no han sido visualizados (esto puede deberse al nmero de hisopados obtenidos al
momento de la toma de muestra, y a la cantidad de muestra depositada en la vctima) siendo
la identificacin de esta protena determinante de agresin ya que solamente est presente en
el lquido seminal humano, producto de una ereccin sin importar que haya habido o no
eyaculacin.
Estos anlisis ayudan al Fiscal con la adquisicin de pruebas contundentes que llevan a que el
acusado de estos hechos pueda ser juzgado como culpable o inocente dependiendo de los
resultados obtenidos y as ayudar a hacer justicia ante estos actos deplorables, que afectan
el bienestar fsico, psquico y social de la vctima, tanto a corto como a largo plazo.
-5-
CAPTULO II
2.1. POSICIONAMIENTO PERSONAL
El presente trabajo de investigacin se sustentara en la escuela epistemolgica pragmtica

porque hay una relacin directa de la teora con la prctica, la teora se sustentar en el marco
terico con una investigacin bibliogrfica y la prctica a travs de los exmenes de laboratorio
forense.
2.2. FUNDAMENTACIN TERICA
2.2.1 LQUIDO SEMINAL
El semen es una mezcla de compuestos qumicos y clulas, producido por las glndulas
seminales y se le denomina lquido seminal. De las clulas, la principal es el espermatozoide.
En la investigacin de delitos sexuales, la bsqueda de semen es de gran importancia debido a
que se puede utilizar un elemento de identificacin humana. (ESTEVEZ, 2008)
Las caractersticas del semen varan no slo entre individuos, sino tambin dentro del mismo
individuo segn la edad o entre distintos eyaculados. Algunas enfermedades, condiciones
genticas, el abuso de alcohol y drogas, la exposicin a determinados agentes qumicos y
acciones quirrgicas pueden reducir drsticamente el nmero de espermatozoides en el
eyaculado oligozoospermia- e incluso provocar su ausencia azoospermia-.
FORMACIN DEL LQUIDO SEMINAL
El semen comienza su formacin en los tbulos seminferos de los testculos (donde se

fabrican los espermatozoides), de ah son retenidos en el epiddimo, donde maduran los
espermatozoides y son conducidos por los conductos deferentes a las vesculas seminales
donde el semen adquiere volumen y fructosa (que sirve de fuente de energa y alimento a los
espermatozoides), finalmente, tras pasar por la prstata y aadir el lquido prosttico, el
semen atraviesa las glndulas de Cowper y Littr que tambin secretan un lquido lubricante al
semen.
Los lugares donde se forma el semen son:
-6-
Tbulos seminferos, de los testculos: aqu se forman los espermatozoides durante un
proceso que se llama espermatognesis, influido por una hormona llamada testosterona y por
la hormona estimulante del folculo. Al principio los espermatozoides carecen de movilidad y
avanzan gracias a los movimientos peristlticos de estos tbulos. Pero, segn van avanzando,
se van diferenciando y adquieren movilidad.
Epiddimo: aqu los espermatozoides son retenidos durante mucho tiempo (10 a 14 das),
recorriendo su trayecto largo y tortuoso lentamente e impulsados por las contracciones
peristlticas del msculo liso de la pared de este conducto. En el epiddimo los
espermatozoides aumentan su capacidad fertilizante. Es el lugar principal de almacenamiento
de los gametos masculinos.
Conductos deferentes: apenas contienen espermatozoides; su funcin, con su gruesa capa

muscular, es la de transportar rpidamente el semen durante el coito, hacia la uretra.
Vesculas seminales: producen una densa secrecin que contribuye de manera muy
importante al volumen del eyaculado, que oscila entre el 46% y el 80%, siendo sta la ltima
parte del semen en salir en una eyaculacin. Esta secrecin es rica en fructosa, que es el azcar
principal del semen y proporciona los hidratos de carbono utilizados como fuente de energa
de los espermatozoides mviles. Tambin contiene pequeas cantidades de un pigmento
amarillo, flavinas en su mayor parte, que aportan al semen una fuerte fluorescencia a la luz
ultravioleta, que tiene mucho inters en medicina legal para la deteccin de manchas de
semen en una violacin.
Prstata: Aporta la segunda parte del contenido del semen en una cantidad abundante que
oscila entre el 13% y el 33% del volumen total del eyaculado. El lquido prosttico es rico en
enzimas (fosfatasas) y en cido ctrico. La prstata produce el fosfato de espermina, un
compuesto poliamnico presente en cantidad abundante en el semen humano. Cuando el
semen se enfra y comienza a secarse, esta sustancia forma los cristales de Bttcher.
Uretra bulbar: contiene las glndulas de Cowper, actualmente conocidas como glndulas
bulbouretrales, y de Littr, que tambin secretan un lquido lubricante al semen, poco
abundante pero rico en mucoprotenas, siendo la primera parte del eyaculado. Facilitan la
lubricacin de la uretra que recorre el pene para el paso del semen a gran velocidad hacia el
exterior, gracias a la contraccin de los msculos bulbouretrales.
-7-
COMPOSICIN DEL LQUIDO SEMINAL
Menos de 10% del volumen del semen de una eyaculacin corresponde a los
espermatozoides, y ms de 90% al lquido seminal. La densidad de espermatozoides en el
semen vara de 50 a 150 millones por mililitro, por lo que cada eyaculacin contiene entre 200
y 400 millones de ellos.
Entre los elementos que contiene el semen se encuentran los lquidos que aporta la vescula
seminal:
Fructosa
Aminocidos
Fosforo
Potasio
Hormonas
La prstata aporta de 15 a 30 por ciento del plasma seminal:
cido ctrico
L-carnitina
Fosfatasa alcalina
Calcio
Sodio
Zinc
Potasio, enzimas para la separacin de las protenas y fibrolisina (una enzima que
reduce la sangre y las fibras del tejido).
El ltimo elemento que se agrega al semen es un fluido que secretan las glndulas uretrales y
bulbouretrales, una protena espesa, clara y lubricante conocida como moco. El semen
contiene algunas otras clulas, desprendidas del epitelio de los conductos excretores y de la
uretra.
(PELLO & RAMREZ, 2015)
VOLUMEN DEL SEMEN
El volumen de eyaculado normal es de 3 ml. Con un rango de 1 a 6 ml. La cantidad de

espermatozoides es de 60 a 100 millones de espermatozoides por ml. El volumen total del
eyaculado y l nmero de espermatozoides pueden variar por muchos factores:
-8-
intervalo previo a la eyaculacin
actividad metablica de la glndulas
obstruccin ductual o eyaculacin retrograda
oligospermia.
azoospermia.
El tiempo de resistencia del espermatozoide despus del eyaculado vara de acuerdo al lugar
fsico de su ubicacin:
Vagina, parte interna y externa 120 horas

Recto 65 horas Ano 46 horas
Regin oral De 6 a 9 horas
En indicios bien embalados y conservados a temperaturas de -20 grados centgrados, se han

encontrado clulas espermticas muchos aos despus. (ESTEVEZ, 2008)
2.2.2 PRUEBAS DETERMINANTES DE AGRESIN SEXUAL
Las pruebas utilizadas para determinar agresiones sexuales pueden ser orientativas y
confirmatorias.
PRUEBAS ORIENTATIVAS
Observacin macroscpica de las manchas de semen haciendo uso del tacto, si es que la
muestra se encuentra acartonada o no y el olor.
Luz ultravioleta: permite hacer una primera aproximacin a la deteccin de manchas de

semen, mediante la exposicin de la prenda, o soporte a analizar, podemos hacer
visibles manchas invisibles al ojo humano. Se suelen utilizar unas gafas de color anaranjado
(filtro), para poder ver mejor la posicin de la mancha. Longitud de onda de 400 nm.
PRUEBAS CONFIRMATORIAS O ESPECFICAS
Estas pruebas confirmatorias pueden ser: electroforticas, enzimticas,

inmunocromatogrficas y microscpicas.
Las pruebas electroforticas que detectan la presencia de protena P- 30 son: la doble difusin
ouchterlony, electroforesis cruzada, elevada inmunoelectroforesis e inmunodifusin radial.
-9-
Principio de ensayos electroforticos
Proponen un mtodo bidimensional sobre papel, combinacin de electroforesis y

cromatografa, lo que permite separar la espermina de los aminocidos del semen y obtener
una separacin sumamente interesante de estos ltimos, que puede considerarse de relevante
valor para la identificacin de dicho humor.
Dentro de las pruebas enzimticas se encuentran: ELISA y fosfatasa cida prosttica
Principio de ELISA
Es una tcnica de inmunoensayo en la cual un antgeno inmovilizado se detecta mediante un

anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable, como cambio de
color o algn otro tipo.
Una desventaja de los mtodos mencionados es que son demasiado sensitivos o muy
sofisticados y consumen mucho tiempo para su anlisis en laboratorios forenses.
Principio de Fosfatasa cida Prosttica (FAP)
Para determinar la presencia de esta enzima se utiliza un mtodo colorimtrico, basado en la

capacidad de la enzima de hidrolizar una variedad de esteres de fosfato, catalizando la salida
del grupo fosfato del sustrato. Subsecuentemente se une a una sal de diazonio que resulta en
la formacin de un precipitado insoluble coloreado a expensas de la actividad de la FA.
(JIMNEZ, 2012)
Los ensayos ms utilizados en el mbito forense son los inmunocromatogrficos en especial

para la determinacin de protena P-30. Dentro de estos anlisis tambin se encuentra la
determinacin de semenogelina I y II.
Principio de ensayos inmunocromatogrficos
Se denomina antgeno a cualquier agente extrao que al entrar en el organismo desencadena

la produccin de anticuerpos especficos contra l.
Los antgenos suelen ser molculas grandes que se hallan formando parte de las estructuras
superficiales de los microorganismos (cpsula o pared bacteriana, envoltura o cpside de los
virus, etc) o de las toxinas que stos segregan en el medio interno.
Para cada antgeno que puede entrar en el organismo, existen linfocitos B capaces de
- 10 -
reconocerlo y de sintetizar protenas que se unen especficamente al antgeno con el fin de
desactivarlo. Estas protenas se denominan anticuerpos.
Los anticuerpos son protenas globulares que se designan tambin como inmunoglobulinas
(Ig). Hay cinco clases que se diferencian por su composicin y funcin biolgica: Ig G, Ig M, Ig A,
Ig D, Ig E.
En todas ellas existe la misma unidad estructural que est formada por cuatro cadenas de
aminocidos, dos son largas y pesadas ("cadenas H", del ingls heavy=pesado) y otras dos ms
cortas y ligeras ("cadenas L", del ingls light=ligero). Estas cuatro cadenas se unen entre s,
adoptando en conjunto la forma de una Y; algunos de los enlaces son puentes disulfuro (-S-S-).
Dentro de cada clase de inmunoglobulinas, todas las molculas tienen una regin constante,
cuya secuencia de aminocidos es igual para todas ellas, y dos regiones variables localizadas en
los extremos de los brazos de la Y. Las regiones variables constituyen los centros de unin del
anticuerpo con el antgeno; cada anticuerpo slo actuar sobre los antgenos que
puedan establecer enlaces con los aminocidos de esas regiones. Por tanto, la unin antgeno-
anticuerpo es especfica.
Al unirse el antgeno con las molculas del anticuerpo especfico, se desencadena una reaccin
antgeno-anticuerpo que puede ser de distintos tipos:
Reaccin de aglutinacin: puede ocurrir cuando las molculas de antgeno se hallan en la

superficie de clulas extraas al organismo. A cada clula se fijan varios anticuerpos, cada uno
de los cuales establece, a su vez, enlace con otra clula. El resultado es un entramado de
complejos antgeno anticuerpo que ser fcilmente reconocido y destruido por los fagocitos.
Esta reaccin tambin se puede producir con los virus.
Este tipo de reaccin es la que se produce en una persona cuando recibe sangre de un grupo
distinto al suyo: los glbulos rojos del donante son aglutinados por anticuerpos presentes en la
sangre del receptor.
Reaccin de neutralizacin: los anticuerpos al unirse a los antgenos bloquean su entrada en

las clulas del organismo, impidiendo as su actuacin.
Reaccin de precipitacin: los antgenos se hallan disueltos en la sangre, (toxinas bacterianas)

y al unirse con el anticuerpo forman complejos insolubles que precipitan y que sern
posteriormente fagocitados.
- 11 -
Opsonizacin: consiste en que la superficie de las bacterias u otros grmenes patgenos es
recubierta por anticuerpos; la regin constante de cada anticuerpo se fija a receptores
presentes en la membrana de los fagocitos, con lo que se facilita la captura y destruccin del
germen invasor.
Sin embargo, una de las funciones principales de los anticuerpos es la activacin del sistema de
complemento, de la que hablaremos ms adelante. (HENOCHOWICS, 2010)
La inmunocromatografa se basa en la migracin de una muestra a travs de una membrana de

nitrocelulosa. La muestra es aadida en la zona del conjugado, el cual est formado por un
anticuerpo especfico contra uno de los eptopos del antgeno a detectar y un reactivo de
deteccin. Si la muestra contiene el antgeno a problema, ste se unir al conjugado formando
un complejo inmune y migrar a travs de la membrana de nitrocelulosa. Sino, migrarn el
conjugado y la muestra sin unirse.
La zona de captura est formada por un segundo anticuerpo especfico contra otro eptopo del
antgeno. Al llegar la muestra a esta zona, los complejos formados por la unin del antgeno y
conjugado quedarn retenidos y la lnea se colorear (muestras positivas). En el caso contrario
las muestras son negativas.
La zona control est formada por un tercer anticuerpo que reconoce al reactivo de deteccin.
Cuando el resto de muestra alcanza esta zona, el anticuerpo se unir al conjugado libre que no
ha quedado retenido en la zona de captura. Esta lnea es un control de que el ensayo ha
funcionado bien, porque se colorea siempre, con muestras positivas y negativas.
Tcnicas de identificacin microscpica de espermatozoides
En la bsqueda microscpica de espermatozoides en muestras de hisopados (secrecin vaginal

anal, bucal), prendas, etc; el mtodo de eleccin es la tincin rbol de navidad, aunque
existen otros mtodos de tincin como:
Mtodo hematoxilina-eosina: mtodo conocido descrito para tinciones citolgicas, su valor

diagnstico de espermatozoides se da dentro de las primeras 12 horas.
Cristal violeta: las muestras son extendidas y fijadas con alcohol ter 50:50 en lminas
portaobjetos y posteriormente coloreadas con cristal violeta por minuto y medio y observadas
con el lente 100x.
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Mtodo de Papanicolaou: mtodo recomendado por la OMS para la tincin de
espermatozoides, sin embargo Randall mostr que solo el 25% de los frotis de las mujeres
voluntarias que haban tenido relaciones sexuales en las ltimas 24 horas presentaban
espermatozoides con esta tincin, lo que excluye el uso rutinario de esta tcnica.
Mtodo de fucsina alcalina: no ha demostrado eficacia en la deteccin de espermatozoides en

las muestras vaginales. (CARREO, 2012)
2.2.3 LA ESCENA DEL CRIMEN
PROTECCIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN
El aislamiento y proteccin de la escena del crimen es la diligencia policial que tiene por
finalidad conservar sin alteraciones de ningn tipo el lugar donde se ha cometido un hecho
delictivo hasta que se hagan presentes los encargados de practicar la investigacin
especializada y la inspeccin tcnico criminalstica.
Para evitar que personas como familiares, periodistas o transentes ingresen a la escena por
curiosidad se deben colocar barreras, sogas o cintas de seguridad con avisos que indiquen:
ESCENA DEL CRIMEN - PROHIBIDO EL INGRESO. (PARRA, 2010)
OBSERVACIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN
Es una habilidad que el investigador debe tener muy desarrollada y apoyada con los otros
sentidos, proviene del latn OBSERVATIO que significa examinar atentamente.
Se debe estar alerta primero con la vista, luego el olfato, el odo y por ltimo el tacto, el cual se
utilizar para una ordenada coleccin y manejo de los indicios despus de la fijacin de estos.
FIJACIN DE LA ESCENA DEL CRIMEN
La fijacin de lugar es imprescindible en todos los casos de investigacin de hechos

presuntamente delictivos, donde se considera necesario el registro de las caractersticas
generales y particulares de un sitio, de un objeto o de las evidencias encontradas, para ilustrar
a las autoridades, sin tener que ir nuevamente al escenario del delito.
La fijacin del lugar de los hechos, sus evidencias y dems manifestaciones materiales se
pueden efectuar aplicando las tcnicas siguientes:
- 13 -
- Fijacin Descriptiva.
- Fijacin Fotogrfica.
- Fijacin Planimtrica.
- Moldeado.
RECOLECCIN DE INDICIOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN
Se efecta una vez que ha sido estudiado y fijado el lugar de los hechos, despus de un
minucioso examen y seleccin exacta de todos los indicios asociados, se levanta, se embala y
etiquetan en forma tcnica, para finalmente suministrarlos al laboratorio.
La coleccin de indicios se efecta despus de haber observado y fijado el lugar de los hechos
y se lleva a cabo con tres operaciones fundamentales que son: levantamiento, embalaje y
etiquetado. (FGE P. J., 2011)
PROTOCOLO DE RECOLECCIN DE INDICIOS BIOLGICOS EN DELITOS SEXUALES
En casos en los que se presume un delito sexual, el semen puede buscarse en la ropa de la
presunta vctima y/ o cadver; en las diferentes zonas anatmicas (vagina, ano, boca, glande,
extremidades, etc.)
Presencia de Espermatozoides en las diferentes cavidades anatmicas en victimas de agresin

sexual.
ESPERMATOZOIDES CABEZAS DE
CAVIDAD
INTACTOS ESPERMATOZOIDES
VAGINA 24 Horas Hasta 7 das
ANO/RECTO 5 Horas (rara vez) 2 a 3 das
BOCA Hasta 24 horas
El cuadro detalla el tiempo en el que se puede encontrar espermatozoides intactos o

nicamente las cabezas, en las diferentes cavidades anatmicas, en vctimas de agresin
sexual. Cabe mencionar que la literatura cientfica muestra una gran variabilidad de datos
sobre el tiempo de supervivencia de los espermatozoides y otros componentes seminales en
- 14 -
cavidades naturales, a menudo debido a que estn basados en declaraciones de las vctimas,
que por sus niveles de trauma o por alegaciones falsas no se ajustan a la realidad.
En casos de delitos sexuales es importante preguntar a la vctima si tuvo relaciones sexuales

con anterioridad a la agresin (hasta 72 horas). En este caso, los restos de semen pueden
pertenecer a la pareja sexual de la vctima, a ms de los de su agresor.
SEMEN LQUIDO
Materiales y Reactivos:
Hisopos estriles
Tijeras estriles
Tubos de tapa roja
Tubos cnicos
Etiquetas
Bolsas de plstico
Pipeta de Plstico
Papel Filtro para muestras biolgicas forenses
Guantes
Mascarillas
Gafas de seguridad
Overol
Procedimiento:
1. Si disponemos de un volumen de ms de 0.5 ml, al aspirarlo con una pipeta de plstico

estril y depositarlo en un tubo cnico o un tubo de tapa roja.
Etiquetar y embalar el tubo en bolsa de papel. Mantener en condiciones de
refrigeracin hasta su llegada al laboratorio.
2. Si disponemos de un volumen menor de 0.5 ml, fijar el semen en papel filtro para
muestras biolgicas forenses ( embalar y enviar)
Nota: En caso de no disponer de papel filtro para muestras biolgicas forenses, sumergir un
hisopo estril, en el semen lquido (< 0.5 ml), dejar secar a temperatura ambiente. Colocar el
hisopo dentro de un contenedor (embalar y enviar)
- 15 -
EXUDADO DE LA CAVIDAD ANAL
Hisopos
Tubos de plstico con tapn de rosca
Etiquetas
Guantes
Overol
Mascarilla
Gafas de seguridad
Procedimiento:
1. Se tomaran dos hisopados por cada regin: primero se tomara la regin externa y
luego se tomara la regin interna
Regin Externa: Tomar dos hisopados humedecidos con solucin salina,
agua estril o agua inyectable sobre la periferia del ano.
Regin Interna: Tomar dos hisopados a una profundidad del ano de 4 cm
en promedio (recto).
En ambos casos dejar secar y regresar los hisopos con la muestra obtenida a su
respectivo contenedor
2. Etiquetar cada hisopo indicando el orden en que fue tomada la muestra.

3. Embalar de manera individual
4. Enviar al laboratorio.
EXUDADO DE LA CAVIDAD VAGINAL
Hisopos
Solucin salina o agua estril
Etiquetas
Guantes
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Mascarilla
Gafas de seguridad
Overol
Procedimiento:
1. Se tomarn dos hisopados por cada regin: primero la regin vulvar y segundo a
nivel de vagina.
Si luego de una inspeccin visual no se observa secrecin a nivel vulvar humedecer
los hisopos, con solucin salina o agua estril y tomar la muestra.
2. Permitir el secado y almacenar en su respectivo contenedor
3. Etiquetar cada hisopo indicando el orden en que fue tomada la muestra.
EXUDADO DE LA REGIN DEL GLANDE
Hisopos
Solucin salina o agua estril
Etiquetas
Guantes
Overol
Gafas de seguridad mascarilla.
Procedimiento:
1. Tomar la muestra mediante hisopo (dos), de la regin del glande. Si luego de una
inspeccin visual no se observa secrecin a nivel del glande, humedecer los
hisopos, con solucin salina o agua estril.
2. Permitir el secado y almacenar en su respectivo contenedor.
3. Etiquetar cada hisopo indicando el orden en que fue tomada la muestra y
embalar.
- 17 -
EXUDADO DE LA CAVIDAD ORAL
Hisopos o Citocepillos
Tubos de plstico 15 ml con tapn de rosca o bolsas de plstico
Tijeras
Etiquetas
Guantes
Overol
Mascarilla
Gafas de seguridad.
Procedimiento:
1. Recuperar la mayor cantidad de muestra que se encuentre en la cavidad bucal

principalmente entre los dientes, carrillo y por debajo de la lengua, rotando el
hisopo para que se impregne en toda su superficie.
2. Repetir el paso 1 con otro hisopo, permitir el secado.
3. Introducir los hisopos en sus contenedores respectivos.
4. Embalar y etiquetar la muestra, mencionar el orden en el que fueron tomados los
hisopos.
Otra opcin para tomar este tipo de muestra es usar un citocepillo, el cual deber
secarse etiquetarse y embalarse en su empaque original.
Nota: Pasadas las 24 horas no se podr obtener ADN del agresor en este tipo de
muestras.
LAVADO DE SEMEN DE LA CAVIDAD ANAL
Jeringa desechable de 20ml

Sonda estril
Frasco de plstico con tapa de rosca o tubo de plstico de 15 o 50ml
Solucin salina o estril
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Etiquetas
Guantes
Overol
Mascarilla
Gafas de seguridad
Procedimiento:
1. Con un volumen de solucin salina estril (5- 10 ml), con la jeringa colocar la
sonda.
2. Irrigar la cavidad anal de la vctima, introduciendo la sonda 4 o 5 cm de
profundidad.
3. Aspirar nuevamente el lquido que contiene las clulas espermticas de la cavidad.
4. Vaciar el contenido de la jeringa a un frasco tapa rosca o tubo cnico. Sellar
hermticamente.
5. Embalar y etiquetar.
Consideraciones:
Cuando se trate de menores de edad, est a consideracin del mdico el
levantamiento de la muestra por medio de la sonda.
LAVADO VAGINAL
Jeringa de 20 ml desechable
Sonda estril
Frasco de plstico con tapa de rosca o tubo de plstico de 15 o 50 ml
Solucin salina estril
Etiquetas
Guantes
Overol
Mascarilla
Gafas de seguridad
Procedimiento:
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1. Aspirar un volumen de solucin estril con la jeringa (5-10ml) y colocar la sonda.
2. Irrigar la cavidad vaginal de la vctima.
3. Aspirar nuevamente el lquido el cual contendr las clulas espermticas de la
cavidad
4. Vaciar el contenido de la jeringa a un frasco tapa rosca o tubo cnicos estriles.
Sellar hermticamente.
5. Etiquetar
LAVADO DE PREPUCIO (GLANDE)
Jeringa de 20 ml desechable
Frasco de plstico con tapa de rosca o tubo de plstico de 15- 50 ml
Solucin salina estril
Etiquetas
Guantes
Overol
Mascarilla
Gafas de seguridad
Procedimiento:
1. Aspirar un volumen de solucin estril con la jeringa ( 5- 10 ml).

2. Irrigar la regin del glande en el individuo.
3. Colectar el lquido el cual contendr las clulas adheridas a la superficie, en un
frasco estril tapa roja.
4. Etiquetar
5. Enviar al laboratorio
LEVANTAMIENTO DE SEMEN SOBRE EL CUERPO
En caso de cadver, tomar en cuenta el tiempo transcurrido despus de la muerte ya que entre
mayor sea este, aumenta la probabilidad de degradacin de las clulas espermticas.
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Etiquetas
Guantes
Cofia y mascarilla
Hisopos
Bolsas de papel
Agua inyectable o solucin salina
Procedimiento:
1. Humedecer dos hisopos estriles con agua inyectable o solucin salina.

2. Aplicar cada hisopo sin presionar sobre la superficie de la mancha y deslizar de
manera circular rotando el hisopo.
3. Permitir el secado de los hisopos.
4. Si los hisopos utilizados vienen acompaados de su contenedor especial,
embalarlos en este.
5. Etiquetar y embalar.
6. Colocar dentro de una bolsa de papel o plstico y sellar.
7. Si el envo es inmediato al laboratorio, conservar a temperatura ambiente; sino,
mantener en condiciones de refrigeracin.
MCULAS DE SEMEN EN TELAS COMO CORTINAS, ALFOMBRAS, VESTIMENTAS, ETC.
Hisopos
Solucin salina estril o agua inyectable
Bolsas de papel
Tijeras
Pinzas
Procedimiento:
Si esta hmeda la mancha dejar secar, recortar alrededor de la misma, y embalarla en

un sobre de papel.
En el caso de las manchas secas sobre superficies lisas o cuero:
1. Humedecer dos hisopos con solucin salina estril o agua inyectable.
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2. Frotar la superficie en donde se encuentra la mancha para recuperar el material
biolgico.
3. Permitir el secado y regresarlo a su contenedor.
4. Etiquetar las muestras.
ROTULADO FORENSE
Previa la realizacin del anlisis biolgico de las evidencias emitidas al laboratorio de Biologa
Forense se debe rotular de manera adecuada las muestras tomadas de las evidencias, cada
laboratorio forense establecer una normativa apropiada para la identificacin de sus
evidencias.
Podemos tomar como modelo de rotulado forense tanto para viales, tubos eppendorf, placas,
etc. los siguientes datos:
Cdigo asignado por el analista forense.

Ciudad y provincia a la que pertenecen las evidencias.
Nombre de la prueba a realizarse y nmero de muestra tomada de la evidencia.
Descripcin del lugar exacto de donde fue tomada la muestra y el tamao del corte en
caso de ser prendas.
(MORENO, y otros, 2012)
EMBALAJE LOS INDICIOS ENCONTRADOS EN LA ESCENA DEL CRIMEN
Es la maniobra que se hace para guardar, inmovilizar y proteger un indicio dentro de algn
recipiente protector.
La tcnica del embalaje est sujeta a la naturaleza de la evidencia, segn el material de la
muestra o indicio, el embalaje se realizar de la siguiente manera:
Embalajes interiores, formados por:
- Embalaje primario (recipientes primarios)

- Embalaje secundario (bolsa de plstico, bolsa de papel, cartn, etc).
Si se coloca varios recipientes primarios en un mismo embalaje secundario, los primeros

debern envolverse individualmente para evitar que haya contacto entre ellos.
- Embalaje exterior, dnde se debe incluir una relacin detallada de su contenido.
- 22 -
El embalaje est constituido por el empaque, el sellado y el etiquetado, por lo tanto estos tres
elementos forman parte de un buen embalaje, y constituye una alteracin si falla uno de ellos.
(FGE P. J., 2011)
ETIQUETADO
Todas las muestras deben ser rotuladas con bolgrafo de tinta indeleble, letra imprenta clara y
legible. Las muestras no rotuladas como se indica, no sern receptadas.
Cada una de las muestras e indicios deben identificarse con los datos de la siguiente etiqueta
adhesiva.
Anverso de la Etiqueta
Tipo de muestra o indicio:
Contenido:
Fecha de recoleccin: Hora que se toma la muestra:
(da/mes/ao) (00h hasta 24h)
Lugar donde se recogi la muestra:
Noticia Tcnica N: Informe N:
Apellidos y nombres de la persona que toma la muestra: Firma y N de CC:
N de celular de la persona que toma la muestra:
Apellidos y nombres de la persona que chequea la muestra: Firma y N de CC:
N de celular de la persona que chequea la muestra:
Observaciones: (condiciones especiales de manejo, transporte o almacenamiento para evitar
para evitar su deterioro o alteracin)
Reverso de la Etiqueta
Instrucciones de Uso
Tipo de muestra o indicio: Debe indicarse si el indicio es biolgico, si se trata de un bala,

arma, vaina o cualquier elemento relacionado, huella dactilar, algn escrito, video,
grabacin, etc.
Contenido: Debe describirse brevemente el indicio.
Fecha de recoleccin: Segn el formato da/mes/ao.
Hora que se toma la muestra: Segn el formato 00h hasta 24h.
N de Noticia Tcnica e Informe: Segn el SIIPNE
Observaciones: Especificar las condiciones especiales de manejo, transporte o
almacenamiento del indicio para evitar su deterioro o alteracin, en especial si el indicio
fue tomado bajo condiciones no favorables.
(MORENO, y otros, 2012)
- 23 -
2.2.4 PROTENA SEMINAL P-30
Historia
En 1971 Hara y col. Describieron un antgeno que hallaron en el plasma seminal humano, al
que denominaron Gamma-seminoproteina.
Li y Beling aislaron posteriormente dos antgenos del plasma seminal. Uno de estos,
denominado Antgeno del semen E-1 era la misma protena descrita anteriormente por
Hara,
Sensabaugh aisl y caracteriz detalladamente la protena especifica del semen , en el plasma

seminal humano y la denomin P-30.
En 1979 Wang y col. Identificaron y aislaron un antgeno especfico del tejido prosttico.
Se propuso el trmino de: antgeno prosttico especfico para describir a esta protena. Se
determin que su peso molecular era de 33 a 34 KD
El antgeno prosttico especfico (frecuentemente abreviado por sus siglas en ingls, PSA) es
una sustancia proteica sintetizada por clulas de la prstata. Su funcin es la disolucin del
cogulo seminal. Es una glicoprotena cuya sntesis es exclusiva de la prstata. Una
pequesima parte de este PSA pasa a la circulacin sangunea de hombres enfermos.
Inicialmente se crea que se trataba de una protena especfica del semen, sin embargo, se ha
determinado que se puede encontrar en mltiples tejidos, incluyendo las mamas, tumores,
glndulas periuretrales, leche materna, lquido amnitico, orina femenina y el endometrio. No
se ha detectado la presencia de P-30 en fluidos vaginales. Tampoco se ha identificado su
presencia en el semen de otras especies animales domsticas (carnero, toro, cerdo, gato),
aunque si se encuentra en primates tales como el orangutn y macaco en rangos de
concentracin semejantes al humano.
El fluido seminal es un buen marcador forense, ya que es estable por mucho tiempo, especfico
porque solo est presente en varones y su deteccin en concentraciones mnimas. La
deteccin de PSA mediante inmunoensayo y el respaldo de la prueba de fosfatasa cida
pueden ser empleadas como pruebas confirmatorias en la deteccin de semen. El PSA como
protena se comporta de manera estable en las mculas de semen como en las prendas e
hisopados vaginales, siendo adems posible su deteccin inmediata en cantidades mnimas.
- 24 -
As mismo la especificidad de especie del PSA como tal la hace muy especfica excluyendo
falsos positivos en relacin con la reaccin de la fosfatasa cida. (QUISPE, GUERRA, & SOLZ,
2009)
Entre los ensayos inmunocromatogrficos para la deteccin de P-30 que se comercializan, se

encuentran pruebas como PSA-check-1 (VEDLAB, Alencon); Seratec PSA Semiquant (Seratec
Diagnostica, Gttingen); y One Step ABAcard PSA (Abacus Diagnostics, California). (JIMNEZ,
2012)
El fabricante de RSID-semen afirma que puede ser detectado 1 mico litro de fluido seminal
humano con su test, mientras que el fabricante del test ABAcard P-30 afirma que se pueden
detectar hasta 4 ng/ml de PSA con su dispositivo de prueba.
En un ensayo practicado por Ying A., Yang H. Yu, E.F. Diamandis y D.J.A. Sutherland en 1994,
ellos reportan que la sensibilidad de la prueba para ABAcard p30 es un poco mejor en este
estudio que el anunciado por el fabricante y es comparable a la sensibilidad de otros dos kits
comerciales, el PSA Seratec y PSAcheck-Semiquant. Con ambas pruebas capaces de detectar
semen humano y fluido seminal, se considera que ofrecen pruebas muy sensibles para la
deteccin de semen.
Muestras de orina de hombres y mujeres fueron probadas con ambos dispositivos. Todas las
muestras de orina masculina y ninguna de las femeninas fueron positivos para la PSA. La
deteccin de PSA en orina de varones se esperaba, porque pequeas cantidades de lquido de
la prstata pueden estar presentes en la orina masculina. (ASECRIMF, 2011)
El kit ABAcard PSA, utiliza anticuerpos monoclonales antiP-30 humanos que se unen al
antgeno prosttico especfico (P-30) formando un complejo antgeno-anticuerpo. El lmite
inferior de deteccin es de 4 ng/mL, por lo que una muestra que contenga una cantidad igual o
superior, es evidenciada por la prueba, determinando un resultado positivo. (JIMNEZ, 2012)
PROTOCOLO PARA DETERMINACIN DE PROTENA P-30
La protena p30 es un marcador aceptado para la deteccin de lquido seminal en casos

donde se sospecha abuso sexual, es detectable tambin en individuos vasectomizados o
azoosprmicos.
- 25 -
PRINCIPIO DEL ENSAYO
Para esta prueba el procedimiento es: 200 microlitros de una muestra se agregan al pozo S y
se deja filtrar. Si el P-30 est presente en el espcimen este reaccionar con el anticuerpo
monoclonal antiP-30 humano mvil y un complejo antgeno-anticuerpo se forma. Este
complejo antgeno-anticuerpo mvil emigra a travs del dispositivo absorbente hacia el rea
de prueba T. En el rea de prueba T un anticuerpo monoclonal antiP-30 humano es
inmovilizado. Este anticuerpo inmovilizado captura el complejo antes mencionado para formar
un emparedado anticuerpoantgenoanticuerpo. Las partculas coloreadas de rosa se
acoplan en una zona angosta de la membrana. Cuando la concentracin de P-30 en la muestra
exceda de 4 ng / ml las partculas color rosa formarn una banda en el rea de prueba T,
indicando as un resultado positivo de la prueba. Como un control positivo interno, la
mancha del anticuerpo P-30 acoplada no podr ligarse al anticuerpo en el rea de prueba
T, porque ya est capturada por el anticuerpo inmovilizador anti inmunoglobulina presente
en el rea de control c formando un complejo. Las partculas capturadas de color rosa
formarn una banda en el rea de control C indicando que la prueba funciona correctamente
y que se ha seguido el procedimiento adecuado.
As la presencia de dos lneas de color, una en el rea de prueba T y otra en el rea de

control C indicarn resultado positivo, mientras que una sola lnea en el rea C indicar un
resultado negativo. (MCA ABACUS DIAGNOSTICS, 2008)
Muestra Requerida
Las muestras y evidencias en las que se determina la presencia de lquido seminal humano
son: hisopados genitales, para genitales y extra genitales, as tambin, manchas
sospechosas en prendas de vestir, preservativos y otros soportes.
PROTOCOLO PARA PREPARACIN DE LA MUESTRAS
Las manchas, los hisopos y las muestras congeladas deben ser descongelados completamente
y llevados a 2-8 C.
1. En un microtubo colocar 750ul de buffer de extraccin La extraccin de muestras de

hisopos (corte longitudinal) o manchas(corte aprox. 3mm 5mm)
2. Agitar en un dispositivo Vortex por 5 segundos.
- 26 -
3. Colocar en refrigeracin por dos horas (2-8C). Este procedimiento recupera
aproximadamente el 99% de p30 extrada del hisopo.
4. Dejar a temperatura ambiente de 3 a 5 minutos.
5. Centrifugue la muestra 3 minutos a 3.600 rpm despus del paso de extraccin.
6. Remover el dispositivo y el gotero del paquete sellado.
7. Etiquetar el dispositivo con el nmero de caso.
8. Adicionar 300ul (6-7gotas con el gotero) de la muestra al pocillo S del dispositivo.
9. Leer los resultados a los 10 minutos.
10. Esta alcuota podra ser almacenada entre 2-8 C sino se usa inmediatamente.
PROTOCOLO PARA OBTENCIN DE MUESTRA EN UN SOPORTE SOLIDO
Existen muchos casos en los que los fluidos biolgicos como el semen se deben retirar de
soportes slidos (prendas de vestir, sabanas, toallas, papel y otros) para posterior estudio de la
protena P-30. Para estos casos, debemos recurrir a un procedimiento llamado levantamiento
de evidencias en donde recuperamos los fluidos biolgicos para estudio, para lo cual
utilizamos el siguiente procedimiento:
1. Observar el soporte solido en la luz forense.

2. Identificar la zona en donde existe fluorescencia para determinar la ubicacin del
supuesto fluido biolgico.
3. La extraccin de muestras en superficies solidas se tomara con hisopo (corte
longitudinal) y en los dems casos se realizara un corte aprox. 3mm 5mm.
4. Agregar en un microtubo con 750ul de buffer de extraccin.
5. Agitar en un dispositivo Vortex por 5 segundos.
6. Colocar en refrigeracin por dos horas (2-8C) Este procedimiento recupera
aproximadamente el 99% de p30 extrada del hisopo. }
7. Dejar a temperatura ambiente de 3 a 5 minutos.
8. Centrifugue la muestra 3 minutos a 3.600 rpm despus del paso de extraccin.
9. Remover el dispositivo y el gotero del paquete sellado.
10. Etiquetar el dispositivo con el nmero de caso.
11. Adicionar 300ul (6-7gotas con el gotero) de la muestra al pocillo S del dispositivo.
12. Leer los resultados a los 10 minutos.
13. Esta alcuota podra ser almacenada entre 2-8 C sino se usa inmediatamente.
- 27 -
Los resultados positivos se pueden ver despus de un minuto dependiendo de la
concentracin de p30.
Para resultados negativos se deben esperar 10 minutos.
INTERPRETACIN DE RESULTADOS
Positivo:
Si existen dos lneas rosadas, una en el rea T de la prueba y en el rea control C, el

resultado es positivo e indica que los niveles de p30 estn sobre 4 ng/ml
Negativo:
Si existe solo una lnea rosada en el rea de control C el test es negativo.
Esto puede indicar que:
a) P30 no est presente sobre 4 ng/ml.
b) Presencia de efecto prozona. Que podra dar un resultado falso negativo debido a la
presencia de altas concentraciones de p30 en la muestra, como por ejemplo lquido seminal no
diluido. En este caso la muestra de ser ensayada nuevamente usando una dilucin 10 a 10.000.
Invlido:
Si no existe lnea rosada visible en el rea de control C el test no es concluyente. Repetir el

test y examinar el procedimiento cuidadosamente.
CONTROL DE CALIDAD
La lnea control en el rea de control C puede ser considerada un control interno del
procedimiento. Otra lnea rosada aparecer siempre si el test se ha desarrollado
correctamente.
Si la lnea de control C no aparece el test es invlido y un nuevo test debe ser desarrollado
siguiendo los correctos procedimientos. Se podra realizar un test de control de calidad usando
estndares de controles positivo y negativo.
- 28 -
LIMITACIONES
1) Los casetes inmucromatogrficos para determinacin de protena P30 es solo para

deteccin en vitro de semen. No para uso diagnstico.
2) El test debe ser desarrollado en estricto acuerdo con estas instrucciones para tener
resultados seguros y reproducibles.
3) Si se sospecha un elevado nivel de p30 y el resultado obtenido es negativo el test debe
ser repetido con una muestra fresca.
4) Resultados positivos se podran obtener con muestras de orina masculina las cuales
han reportado un valor de p30 260ng/ml. El antgeno especifico de la vescula seminal
debe no estar presente en la prueba con orina.
5) Una muestra apropiada debe ser usada puesto que p30 es detectable en el tracto
vaginal solo en un mximo de 2 das
ESPECIFICIDAD
A. La hemoglobina (10gr/l) bilirrubina (100mg/l) y muestras lipmicas (5 g/l) no

interfieren con los resultados de la prueba.
B. Concentraciones altas de protena tales como fosfatasa cida prosttica (1000ng/ml)
albumina (20g/l) HCG (900UI/ml) transferrina (5g/l) y prolactina (1mg/l) no interfieren
con los resultados de la prueba.
C. Se pueden obtener resultados positivos en hombres vasectomizados y en muestras de
orina pos eyaculacin en adultos. (FGE, MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE
LABORATORIO DE BIOLOGA FORENSE, 2012)
2.2.5 TINCIN DE RBOL DE NAVIDAD
La visualizacin microscpica de espermatozoides sigue siendo considerada la prueba

definitiva para la demostracin de esperma en los laboratorios de biologa forense.
La tcnica Kernechtrol-Picrondigocarmn KPIC o rbol de Navidad se utiliza de forma corriente

como tincin identificativa de clulas espermticas. Este mtodo se caracteriza por discernir
principalmente espermatozoides completos o cabezas de espermatozoide de clulas no
espermticas, bien clulas epiteliales o levaduras, que regularmente estn presentes en las
muestras procedentes de una agresin sexual. La composicin de la tcnica es de sulfato de
aluminio, nuclear Fast Red, cido pcrico e ndigo carmn.
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As, de un pellet o sedimento centrifugado se selecciona un pequeo volumen para tincin
microscpica y se prepara un frotis que una vez fijado al calor se tie primero con nuclear Fast
Red y posteriormente con picrondigocarmn. En la visualizacin al microscopio ptico se
destaca la parte posterior de las cabezas de espermatozoide de rojo fucsia refringente, siendo
la zona anterior teida de forma ms suave, resaltando el acrosoma con su caracterstica
transparencia, mientras que la cola del espermatozoide y el cuello resultarn en color verde.
Las clulas epiteliales, si las hubiere en la muestra, por ejemplo por descamacin de tejido
anogenital, toman una coloracin verde en citoplasma y granate en el ncleo. Debido a la
fragilidad de la unin entre cabeza y cola, y a la rapidez de su ruptura por deshidratacin, lo
ms frecuente es la visualizacin de cabezas de espermatozoide.
Recientemente, se ha descrito otro mtodo de tincin mediante fluorescencia especfico de

espermatozoides (HY-LITER, Independent Forensics) donde las cabezas y porciones de la cola
se visualizarn usando filtros compatibles con fluorescena o Alexa 488 por inmunodiagnosis
con marcaje diseado mediante anticuerpos monoclonales. (MARTNEZ & VALLEJO, 2012)
Los espermatozoides tienen tres diferentes regiones: cabeza; cuello y cola. La cabeza es
aplanada y elptica contiene el ncleo con cromosomas empacados densamente. La punta de
la cabeza se encuentra recubierta por una membrana que contiene enzimas esenciales para la
fertilizacin, tales como hialuronidasas y acrosina que rompen la membrana externa del vulo.
Un cuello corto une la parte media con la cabeza, este cuello contiene los dos centriolos del
espermatozoide original. Las mitocondrias en la parte media se encuentran arregladas de
forma espiral alrededor de microtbulos, la actividad de estos mitocondrias es proveer el
adenosn-trifosfato (ATP) necesario para el movimiento de la cola. Constituyen la nica clula
flagelar del ser humano, que le permite un movimiento complejo en forma de sacacorchos.
Estas clulas tambin se caracterizan porque en su estado maduro carecen de retculo
endoplsmico, aparato de Golgi, lisosomas, peroxisomas y otras organelas intracelulares. Por
tal razn estas clulas tienen menor masa y tamao, adems no contienen glicgeno ni otras
reservas de energa, por lo que absorbe nutrientes de los fluidos circundantes, principalmente
fructosa.
Tradicionalmente la observacin al microscopio de espermatozoides, era considerada la

prueba de confirmacin de presencia de semen en una muestra analizada. En la actualidad un
anlisis de protena seminal P-30 con resultado positivo, es considerado confirmatorio de
presencia de semen an en la ausencia de espermatozoides. Existe diversidad de criterios
respecto a la supervivencia de espermatozoides, sin embargo, son considerados el
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componente seminal que puede detectarse a ms largo plazo. Se puede aceptar, en personas
vivas y de forma general un perodo mximo de 7 das para detectar cabezas de
espermatozoides en vagina, dos o tres das en ano o recto y 24 horas en boca.
Frecuentemente se observan espermatozoides intactos (con cola), en vagina dentro de las 24

horas siguientes al acto sexual, pero rara vez se encuentran en boca, ano o recto tras las 5
horas de los hechos. Estos datos se ven afectados por una diversidad de factores imposibles de
controlar, lo que ocasiona variabilidad en los datos mencionados. En prendas de vestir y otras
superficies, absorbentes almacenadas en ambientes secos, los espermatozoides pueden
permanecer por dcadas
Existen diferentes tinciones utilizadas para teir espermatozoides en el rea forense, la tincin
de rbol de navidad es una de las ms difundidas y aceptadas por la comunidad cientfica
forense. Esta tincin utiliza los colorantes rojo rpido nuclear y picro ndigo carmn. La cabeza
se tie de color rosado fuerte a rojo y el acrosoma se tie rosado plido. La parte media se tie
de una coloracin que va de rojo fuerte a lila debido al colorante rojo rpido nuclear. La cola se
teir de una coloracin verde debido a la accin del picro ndigo carmn. Tambin se tien las
clulas epiteliales presentes, observndose como estructuras romboides con ncleos de color
rosado/rojo. (JIMNEZ, 2012)
PREPARACIN DE REACTIVOS TINCIN RBOL DE NAVIDAD COLORANTE ROJO RPIDO

NUCLEAR (KERNECHTROT)
COLORANTE ROJO RAPIDO NUCLEAR (KERNECHTROT) (SOL .1)

REACTIVO CANTIDAD
ROJO RAPIDO NUCLEAR 100 mg
SULFATO DE ALUMINIO 5.0 gr
AGUA DESTILADA 100 ml
COLORANTE INDIGO CARMIN (SOL. 2)
ACIDO PICRICO (comercial) 300 ml
INDIGO CARMIN 1.0 gr
COLORANTE ROJO RAPIDO NUCLEAR
1. Calentar a ebullicin 100 ml de Agua destilada y disolver el sulfato de aluminio.

2. Adicionar el colorante rojo rpido nuclear,
3. mezclar con agitador mecnico o varilla de vidrio hasta disolucin completa.
4. Enfriar y filtrar en papel filtro
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5. Almacenar en frasco gotero mbar. La solucin Kernechtrot es estable a temperatura
ambiente hasta 6 meses, pero puede ser necesario filtrarlo de nuevo despus de estar
sin movimiento.
COLORANTE INDIGO CARMIN
1. Disolver 1 gr de colorante ndigo en 300 ml de cido pcrico comercial

2. Mezclar perfectamente con agitador mecnico o varilla de vidrio
3. Filtrar
4. Guardar en frasco mbar.
La solucin picroindigocarmn es estable a temperatura ambiente hasta 6 meses, pero puede

ser necesario filtrarlo de nuevo despus de estar sin movimiento.
PROTOCOLO DE TINCIN ARBOL DE NAVIDAD
El semen est constituido por espermatozoides y lquido seminal. Entre el 15 20 % de

volumen proviene de la prstata, 60 70 % de las vesculas seminales y solo el 10 % proviene
del epiddimo. El semen es un lquido viscoso de color blanco grisceo y opalescente, su pH
vara entre 7.3 y 7.8 sus amortiguadores fosfatos y bicarbonato de sodio contribuyen a
proteger a los espermatozoides del pH vaginal. Como elemento celular caracterstico del
semen se encuentran los espermatozoides, sin embargo el cuadro celular es mucho ms
complejo: presenta clulas gigantes, clulas epiteliales, leucocitos, clulas prostticas, cilindros
testiculares y bacterias, contiene de 70 a 150 millones de espermatozoides por ml.
El espermatozoide humano maduro mide 60um de largo y es una clula con movimiento
activo, est formado por una cabeza de forma oval vista de frente y forma de pera vista de
perfil con el extremo angosto orientado hacia adelante, una pieza intermedia que contiene
mitocondrias y una cola formada por nueve filamentos que rodean a otros dos centrales. La
mayor parte de la cabeza est ocupada por el ncleo, cuya cromatina est condensada; 2/3 del
ncleo estn cubiertos por el acrosoma. Microscpicamente se compone de cuatro secciones:
el cuello, la pieza intermedia, la pieza principal y la pieza terminal con diferencias
estructurales. La vida aproximada del espermatozoide en canal endocervical es de 114 h, en
fondo de saco vaginal es de 120 h, rectal 65 h, anal 46 h y en la boca 6 h, en cadveres no
existen referencias bibliogrficas en cuanto al tiempo posible de encontrarlos vivos.
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El tiempo de permanencia de los espermatozoides en la cavidad vaginal vara dependiendo de
presencia de menstruacin, infecciones vaginales, el pH vaginal, lavado vaginal, el ejercicio
fsico y la cantidad de espermatozoides eyaculados. La defecacin, afecta el tiempo de
permanencia de los espermatozoides en la cavidad anal. La mezcla de estas variables hace que
en general, los espermatozoides puedan detectarse en vagina hasta tres das despus del
coito. Sin embargo en la literatura relacionada con la investigacin forense, se han observado
algunos casos en los cuales los espermatozoides han sido detectados hasta seis das despus
del coito, en cadveres no existen referencias bibliogrficas en cuanto al tiempo posible de
encontrarlos vivos, pero se debe considerar su afectacin por la putrefaccin. (FGE, MANUAL
DE PROCEDIMIENTOS DEL LABORATORIO DE BIOLOGA FORENSE, 2012)
PRINCIPIO DE LA TINCIN RBOL DE NAVIDAD
En la tincin de clulas espermticas ocurren una combinacin de fenmenos fsicos y

qumicos: la absorcin, capilaridad y smosis participan en cierto grado. El fundamento de la
prueba se basa en la afinidad de los colorantes bsicos por los elementos celulares cidos y de
los colorantes cidos por elementos celulares bsicos. (ASECRIMF, 2011)
MUESTRA REQUERIDA
Las muestras y evidencias en las que se determina la presencia de espermatozoides son: frotis
de hisopados genitales, para genitales y extra genitales.
PROCEDIMIENTO
1) Visualizar en la placa donde se encuentra el frotis y delimitar el frotis con lpiz

demogrfico.
2) Fijar el frotis a calor seco o exponerlo a la llama directamente.
3) Colocar unas cuantas gotas (que cubra el frotis) de la solucin Kernechtrot (rojo
nuclear) y dejar actuar por 20 minutos (Reactivo 1).
4) Lavar con agua destilada.
5) Colocar unas cuantas gotas (que cubra el frotis) de la solucin picrondigocarmine y
dejar actuar de 10 a 15 segundos (Reactivo 2).
6) Aclarar el frotis con etanol al 95 %.
7) Dejar secar y montar la placa.
8) Observar en lente 40 X.
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OBSERVACIN
En el espermatozoide, el material nuclear se tie de color rojo o rojo/prpura, el cuerpo de los

espermatozoides se observa de forma ovalada y teido de rojo con un fondo rosado ligero, el
acrosoma del espermatozoide se tie de color rojo ligero, la regin media y la cola de los
espermatozoides se tien de color verde o azul verdoso. Es necesario contar con un control
positivo de espermatozoides y registrar el resultado mediante una fotografa para guardar
como fotografa digital e imprimirla para adjuntar al expediente del caso.
RESULTADOS
Se reporta como PRESENCIA O AUSENCIA DE ESPERMATOZOIDES
Cuando el material celular es insuficiente se puede reportar como MATERIAL INSUFICIENTE

PARA EMITIR UN RESULTADO
LIMITACIONES
Por la naturaleza de la muestra y el tratamiento que se da en la preparacin de los extractos es

posible observar morfologas atpicas tales como la ausencia de cola.
PROTOCOLO PARA OBTENCION DE MUESTRA EN SOPORTE SLIDO
Existen muchos casos en los que los fluidos biolgicos como el semen se deben retirar de
soportes slidos como son la ropa interior de la vctima o del agresor para posterior estudio de
espermatozoides. Para estos casos, debemos recurrir a un procedimiento llamado
levantamiento de evidencias en donde recuperamos los fluidos biolgicos para estudio, para lo
cual utilizamos el siguiente procedimiento:
1) Observar el soporte solido en la luz forense.

2) Identificar la zona en donde existe fluorescencia para determinar la ubicacin del
supuesto fluido biolgico.
3) La extraccin de muestras en superficies solidas se tomara con hisopo (corte
longitudinal) y en los dems casos se realizara un corte aprox. 3mm 5mm.
4) Agregar en un microtubo con 200ul de buffer de extraccin
5) Agitar con un dispositivo Vortex por 30 minutos a mnima rpm.
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6) Centrifugue la muestra 8 minutos a 3.600 rpm.
7) Eliminar el sobrenadante con una pipeta.
8) Transferir el sedimento a una placa porta objetos.
9) Fijar la placa.
10) Realizar la tincin rbol de Navidad descrita anteriormente.
(FGE, MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DEL LABORATORIO DE BIOLOGA FORENSE, 2012)
SISTEMA DE CAPTURA DE IMGENES MICROSCPICAS (INFINITY ANALYZE)
La Microscopa es una herramienta fundamental, pero dentro de este trmino encontramos

una gran diversidad instrumental que, basndose en las propiedades fsicas y qumicas de la
ptica, la iluminacin y las propias muestras, permite la observacin de las evidencias a
diferentes niveles de complejidad. (MURCIA, 2009)
Los microscopios Olympus utilizados en los Centros de Investigacin de Ciencias Forenses

satisfacen las exigencias ms altas y diversas estableciendo un nuevo estndar en cuanto a
desempeo ptico y compatibilidad con sistemas accesorios. Estos microscopios son sinnimo
de gran calidad e imgenes de alta resolucin. (OLYMPUS, 2016)
El mtodo de captura ptica utilizado en estos microscopios se llamada Infinity Analyze este
es un Software que contiene aplicaciones que le permiten ajustar los parmetros de captura
como fuente de luz, la exposicin, los ajustes de gamma, o la resolucin. (INFINITY, 2016)
2.2.6 INFORME PERICIAL
Es una estructura formal de presentacin de resultados periciales, adecuada para su

comprensin e interpretacin por parte de lectores que no son especialistas en la materia
peritada. Normalmente, pero no de manera excluyente, se trata de operadores del derecho,
en particular funcionarios judiciales.
El informe pericial no significa dictamen de valoracin pues tiene por finalidad reconocer y
describir de manera prolija y detallada las huellas y seales que hubiera dejado la infraccin. El
perito tiene la obligacin de hacer ante el juez un examen tcnico y exhaustivo del lugar y/u
objeto a fin de que no se pierda ninguna de la piezas de conviccin por ocultas que estn por
difcil que sean de ubicar por lo que se vale de procedimientos tcnicos, su labor constituye en
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facilitar que se incorpore al juicio, todas las huellas seales rastros de la infraccin. (MORENO,
y otros, 2012)
CONTENIDO DEL INFORME PERICIAL
Los requisitos mnimos obligatorios de todo informe pericial son los siguientes:
1. Parte de antecedentes: en donde se debe delimitar el objeto del peritaje, esto es, se
tiene que especificar claramente el tema sobre el que informara en base a lo ordenado
por la jueza o juez, la o el fiscal y / o lo solicitado por partes procesales.
2. Parte de consideraciones tcnicas o metodologa a aplicarse: en donde se debe
explicar claramente, como aplican sus conocimientos especializados de una profesin,
arte u oficio, al caso o encargo materia de la pericia.
3. Parte de conclusiones: luego de las consideraciones tcnicas, se proceder a emitir la
opinin tcnica, o conclusin de la aplicacin de los conocimientos especializados
sobre el caso concreto analizado. La conclusin ser clara y directa en relacin a la
pericia realizada. Se prohbe todo tipo de juicios ambiguos, as como cualquier tipo de
juicio de valor sobre la actuacin de las partes en el informe tcnico.
4. Parte de inclusin de documentos de respaldo, anexos, o explicacin de criterios
tcnicos: deber sustentar sus conclusiones ya sea con documentos y objetos de
respaldo, grabaciones de audio y video, etc) o con la explicacin clara de cul es su
sustento tcnico o cientfico para obtener un resultado o conclusin especifica. Se
debe exponer claramente las razones especializadas del perito para llegar a la
conclusin correspondiente. No se cumplir con este requisito si no se sustenta la
conclusin con documentos, objetos, o con la explicacin tcnica y cientfica exigida
en este numeral.
Sin perjuicio de los requisitos que deben constar obligatoriamente en todo informe pericial,
verbal y escrito, el perito designado puede incluir cualquier otra informacin que considere
relevante como parte de su trabajo.
Contenido de las aclaraciones o ampliaciones del informe pericial: toda aclaracin o

ampliacin del informe pericial deber ser pertinente a la pericia dispuesta, y el perito
responder directamente a los requerimientos ordenados por la o el funcionario judicial
competente. (JUDICATURA, CONTENIDO DEL INFORME PERICIAL, 2014)
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2.2.7 PENALIZACIN DE DELITOS SEXUALES
La pena es una restriccin a la libertad y a los derechos de las personas, como consecuencia
jurdica de sus acciones u omisiones punibles. Se basa en una disposicin legal e impuesta por
una sentencia condenatoria ejecutoriada.
CLASIFICACIN DE LAS PENAS
Las penas que se imponen en virtud de sentencia firme, con carcter principal o accesorio, son
privativas, no privativas de libertad y restrictivas de los derechos de propiedad, de
conformidad con este Cdigo.
Penas privativas de libertad.- Las penas privativas de libertad tienen una duracin de hasta
cuarenta aos. La duracin de la pena empieza a computarse desde que se materializa la
aprehensin. En caso de condena, el tiempo efectivamente cumplido bajo medida cautelar de
prisin preventiva o de arresto domiciliario, se computar en su totalidad a favor de la persona
sentenciada.
Penas no privativas de libertad.- Son penas no privativas de libertad:
1. Tratamiento mdico, psicolgico, capacitacin, programa o curso educativo.
2. Obligacin de prestar un servicio comunitario.
3. Comparecencia peridica y personal ante la autoridad, en la frecuencia y en los

plazos fijados en sentencia.
4. Prohibicin de salir del domicilio o del lugar determinado en la sentencia.
5. Prohibicin de aproximacin o comunicacin directa con la vctima, sus familiares u

otras personas dispuestas en sentencia, en cualquier lugar donde se encuentren o por
cualquier medio verbal, audiovisual, escrito, informtico, telemtico o soporte fsico o
virtual.
CONDENAS ESTABLECIDAS EN DELITOS SEXUALES
Art. 166.- Acoso sexual.- La persona que solicite algn acto de naturaleza sexual, para s o para
un tercero, prevalindose de situacin de autoridad laboral, docente, religiosa o similar, sea
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tutora o tutor, curadora o curador, ministros de culto, profesional de la educacin o de la
salud, personal responsable en la atencin y cuidado del paciente o que mantenga vnculo
familiar o cualquier otra forma que implique subordinacin de la vctima, con la amenaza de
causar a la vctima o a un tercero, un mal relacionado con las legtimas expectativas que pueda
tener en el mbito de dicha relacin, ser sancionada con pena privativa de libertad de uno a
tres aos.
Cuando la vctima sea menor de dieciocho aos de edad o persona con discapacidad o cuando
la persona no pueda comprender el significado del hecho o por cualquier causa no pueda
resistirlo, ser sancionada con pena privativa de libertad de tres a cinco aos.
La persona que solicite favores de naturaleza sexual que atenten contra la integridad sexual de
otra persona, y que no se encuentre previsto en el inciso primero de este artculo, ser
sancionada con pena privativa de libertad de seis meses a dos aos.
Art. 167.- Estupro.- La persona mayor de dieciocho aos que recurriendo al engao tenga
relaciones sexuales con otra, mayor de catorce y menor de dieciocho aos, ser sancionada
con pena privativa de libertad de uno a tres aos.
Art. 170.- Abuso sexual.- La persona que, en contra de la voluntad de otra, ejecute sobre ella o
la obligue a ejecutar sobre s misma u otra persona, un acto de naturaleza sexual, sin que
exista penetracin o acceso carnal, ser sancionada con pena privativa de libertad de tres a
cinco aos.
Cuando la vctima sea menor de catorce aos de edad o con discapacidad; cuando la persona
no tenga capacidad para comprender el significado del hecho o por cualquier causa no pueda
resistirlo; o si la vctima, como consecuencia de la infraccin, sufra una lesin fsica o dao
psicolgico permanente o contraiga una enfermedad grave o mortal, ser sancionada con
pena privativa de libertad de cinco a siete aos.
Si la vctima es menor de seis aos, se sancionar con pena privativa de libertad de siete a diez
aos.
Art. 171.- Violacin.- Es violacin el acceso carnal, con introduccin total o parcial del miembro
viril, por va oral, anal o vaginal; o la introduccin, por va vaginal o anal, de objetos, dedos u
rganos distintos al miembro viril, a una persona de cualquier sexo. Quien la comete, ser
sancionado con pena privativa de libertad de diecinueve a veintids aos en cualquiera de los
siguientes casos:
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1) Cuando la vctima se halle privada de la razn o del sentido, o cuando por enfermedad
o por discapacidad no pudiera resistirse.
2) Cuando se use violencia, amenaza o intimidacin.
3) Cuando la vctima sea menor de catorce aos.
Se sancionar con el mximo de la pena prevista en el primer inciso, cuando:
1) La vctima, como consecuencia de la infraccin, sufre una lesin fsica o dao

psicolgico permanente.
2) La vctima, como consecuencia de la infraccin, contrae una enfermedad grave o
mortal.
3) La vctima es menor de diez aos.
4) La o el agresor es tutora o tutor, representante legal, curadora o curador o cualquier
persona del entorno ntimo de la familia o del entorno de la vctima, ministro de culto o
profesional de la educacin o de la salud o cualquier persona que tenga el deber de
custodia sobre la vctima.
5) La o el agresor es ascendiente o descendiente o colateral hasta el cuarto grado de
consanguinidad o segundo de afinidad.
6) La vctima se encuentre bajo el cuidado de la o el agresor por cualquier motivo.
7) En todos los casos, si se produce la muerte de la vctima se sancionar con pena
privativa de libertad de veintids a veintisis aos.
Art. 173.- Contacto con finalidad sexual con menores de dieciocho aos por medios
electrnicos.- La persona que a travs de un medio electrnico o telemtico proponga
concertar un encuentro con una persona menor de dieciocho aos, siempre que tal propuesta
se acompae de actos materiales encaminados al acercamiento con finalidad sexual o ertica,
ser sancionada con pena privativa de libertad de uno a tres aos.
Cuando el acercamiento se obtenga mediante coaccin o intimidacin, ser sancionada con

pena privativa de libertad de tres a cinco aos.
La persona que suplantando la identidad de un tercero o mediante el uso de una identidad

falsa por medios electrnicos o telemticos, establezca comunicaciones de contenido sexual o
ertico con una persona menor de dieciocho aos o con discapacidad, ser sancionada con
pena privativa de libertad de tres a cinco aos.
Art. 175.- Disposiciones comunes a los delitos contra la integridad sexual y reproductiva.- Para
los delitos previstos en esta Seccin se observarn las siguientes disposiciones comunes:
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1. En estos delitos, la o el juzgador, adicional a la pena privativa de libertad puede
imponer una o varias penas no privativas de libertad.
2. En los casos en los que la o el presunto agresor sea ascendiente o descendiente o
colateral hasta el cuarto grado de consanguinidad o segundo de afinidad, cnyuge,
excnyuge, conviviente, ex conviviente, pareja o ex pareja en unin de hecho, tutora o
tutor, representante legal, curadora o curador o cualquier persona a cargo del cuidado
o custodia de la vctima, el juez de Garantas Penales como medida cautelar
suspender la patria potestad, tutora, curatela y cualquier otra modalidad de cuidado
sobre la vctima a fin de proteger sus derechos. Esta medida tambin la podr solicitar
la o el fiscal, de oficio o peticin de parte la o el juez competente.
3. Para estos delitos no ser aplicable la atenuante prevista en el nmero 2 del artculo
45 de este Cdigo.
4. El comportamiento pblico o privado de la vctima, anterior a la comisin de la
infraccin sexual, no es considerado dentro del proceso.
5. En los delitos sexuales, el consentimiento dado por la vctima menor de dieciocho aos
de edad es irrelevante.
6. Las vctimas en estos delitos pueden ingresar al programa de vctimas y testigos.
LA AUDIENCIA DE JUZGAMIENTO
La Audiencia de Juzgamiento presenta los siguientes momentos procesales:
Expositiva; dentro de este primer momento los sujetos presenta su teora del caso; momentos
donde el fiscal confirma su acusacin puesto que la etapa de juicio se sustancia en base a la
misma y conforme al R.O No. 238. 28 de marzo del 2006, mismo que consta el fallo
pronunciado por la Tercera Sala de lo Penal de la Corte Suprema de Justicia donde indican que
Sin acusacin no hay juicio;
Probatoria; durante este tiempo las partes practican la prueba anuncia en sus escritos, prueba
que introducen judicializando en ese momento esto es presentando los documentos a la otra
parte para que la misma pueda contradecir, en igual sentido los peritos y testigos solicitados
por las partes estn sujetos a responder las preguntas que realicen quien los ha solicitado y a
responder las repreguntas de la contraparte, as mismo a responder las preguntas que por
aclaracin solicite el juzgador.
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Alegatos; en este parte que tiene la audiencia las partes hacen un anlisis de su acusacin y de
lo desarrollado en la audiencia, a fin de lograr el convencimiento del operador de justicia.
Culminada que fuera la Audiencia el juez deber Resolver y dictar sentencia nicamente con
base en la prueba incorporada y practicada en el juicio por las partes, de acuerdo con las reglas
de cada prueba, el derecho y la sana crtica. (JUSTICIA, 2014)
LA SENTENCIA
La palabra sentencia procede del latn sintiendo, que equivale a sintiendo, por expresar la
sentencia lo que siente u opina quien dicta. Por ella se entiende la decisin que legtimamente
dicta el juez competente, juzgando de acuerdo con su opinin y segn la ley o norma aplicable.
La sentencia, se refiere a la resolucin judicial que se d en una causa, segn Guillermo

Cabanellas es El ms solemne de los mandatos de un juez o tribunal, por oposicin a un auto
o providencia en la presente investigacin seria la culminacin del proceso con una dictamen
condenatorio o confirmando el estado de inocencia de la persona acusada. (LEGISLACION,
2008)
2.2.8 CIENCIAS FORENSES
La Ciencia Forense se entiende como el conjunto estructurado y sistematizado de

conocimientos, de carcter tcnico y cientfico, generados por la investigacin y anlisis de
los indicios de un hecho presuntamente delictuoso, con la finalidad de presentar esos
resultados ante la autoridad jurdica correspondiente y coadyuvar en la prevencin del
delito y, en la procuracin y administracin de la justicia. Su estudio incluye disciplinas,
como: Psiquiatra, Estomatologa, Antropologa, Entomologa, Toxicologa, Psicologa,
Biologa y Qumica Forense; Medicina Legal; Criminologa; Criminalstica y Derecho, entre
otras. Tambin contiene aspectos relacionados con la intervencin del experto en el
incipiente Sistema de Justicia Penal Acusatorio, en los procedimientos de procuracin y
administracin de la justicia, tcnicas moleculares en biologa forense y estudio de rasgos
de personalidad.
La Ciencia Forense no se circunscribe al estudio de la muerte o de la violencia que la

produjo, sino que bajo el mtodo cientfico y los avances tecnolgicos de las disciplinas
investiga todo el material sensible significativo que rodea a los hechos en la comisin de
delitos o desarrollo de accidentes, con la finalidad de articular indicios y autores, y aportar
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pruebas definidas que pudieran relacionarse con el hecho que se investiga. Lo anterior
permite demostrar la existencia o no de hechos delictivos ante la autoridad
correspondiente. (UNAM, 2013)
CENTROS DE INVESTIGACIN DE CIENCIAS FORENSES
La Fiscala General del Estado cumpli con el objetivo de crear una red de 8 Centros de
Investigacin de Ciencias Forenses en el Ecuador para impulsar la investigacin cientfica del
delito.
Manta, Santo Domingo, Ambato, Machala, Loja, Nueva Loja, Esmeraldas y Cuenca fueron las
ciudades escogidas por su ubicacin estratgica y por la incidencia de los delitos. Para ello se
realiz un estudio previo en el que participo la Secretaria Nacional de Planificacin y
Desarrollo, SENPLADES.
Segn el art.195 de Constitucin de la Repblica del Ecuador, la Fiscala General del Estado
organizara y dirigir un sistema especializado integral de investigacin, de medicina legal y
ciencias forenses. (HERRERA, 2015)
ACREDITACIN DE PERITOS
El Perito Forense es un experto que posee una formacin prctica-terica en el rea judicial y
procesal. Est capacitado para auxiliar tcnica y cientficamente la investigacin judicial en
reas como la bsqueda y anlisis de la informacin, evaluacin, fijacin, levantamiento e
interpretacin de cualquier tipo de evidencia. Posee la habilidad para el tratamiento de la
evidencia en la cadena de custodia. (PERITOS, 2011)
REQUISITOS PARA CALIFICAR COMO PERITOS.- Las personas que deseen calificarse como
peritos de la Funcin Judicial, deben cumplir con los siguientes requisitos:
1. Ser mayores de edad, ser capaces y estar en ejercicio de sus derechos de participacin;
2. Ser conocedoras o conocedores y/o expertas o expertos en la profesin, arte, oficio, o
actividad para la cual soliciten calificarse;
3. En el caso de profesionales, tener al menos dos aos de graduadas o graduados la
fecha de la solicitud de calificacin, y cumplir con los requisitos de experiencia
establecidos. Para las y los dems expertos tener al menos dos aos de prctica y
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experiencia a la fecha de la solicitud de calificacin, en el oficio, arte o actividad en la
cual tengan inters de calificarse;
4. Tambin se podrn presentar, para justificar la experticia y conocimiento de la o el
solicitante, hasta diez informes periciales realizados en los ltimos dos aos, los cuales
sern analizados por el Consejo de la Judicatura para determinar si acreditan
experticia; y,
5. No hallarse incursas o incursos en as inhabilidades o prohibiciones para ser calificada o
calificado como perito previstas en la ley y este reglamento. (JUDICATURA,
ACREDITACIN DE PERITOS, 2014)
CADENA DE CUSTODIA
La cadena de custodia es el documento escrito en donde quedan reflejadas todas las

incidencias de una prueba. En este documento se reflejan los movimientos y acciones ejercidas
sobre el elemento fsico de la prueba. (MORENO, y otros, 2012)
Es un procedimiento establecido por la normativa jurdica, que garantiza: LA INTEGRIDAD, LA

AUTENTICIDAD y LA CONSERVACIN del indicio o evidencia.
Permite prevenir:
a. Alteraciones o adulteraciones.
b. Sustracciones y sustituciones.
c. Destruccin y descomposicin.
La cadena de custodia se inicia en el lugar donde se obtiene, encuentre o recaude el elemento
fsico de prueba y finaliza por orden de la autoridad competente.
La cadena de custodia no es otra cosa sino la constatacin de todas las personas que han
manejado, almacenado y estudiado los indicios, con anotaciones de fechas y lugares de cada
uno. (FGE P. J., 2011)
LUCES FORENSES
El equipo de luces forenses permite la visualizacin de manchas de sangre, semen, orina y

otros fluidos cuando no pueden verse a simple vista, ya sea por la obscuridad o porque dichos
fluidos hubiesen sido limpiados intencionalmente con el fin de no dejar pistas.
- 43 -
Junto al equipo de luces forenses se utilizan reactivos y luces de nueve colores que se eligen
dependiendo la sustancia buscada. Estas luces son susceptibles de usarse sobre superficie de
distinta naturaleza, y para citar algunos ejemplos tan solo mencionaremos los ms comunes
como son vidrios, automviles, paredes, tela, pisos, lona, tierra, piedras, incluso en campo
abierto. Estas mismas luces se pueden utilizar sobre el cuerpo humano en la bsqueda de
restos de algn fluido, o marcas producidas por el sujeto activo del delito. (LPEZ, 2008)
Una fuente de luz forense se compone de una lmpara de gran alcance que contiene los
componentes ultravioletas, visibles e infrarrojos de la luz. Todos los materiales orgnicos
pueden despedir luz fluorescente (absorba la luz), en una longitud de onda, por ejemplo,
iluminado una huella digital que es invisible al ojo desnudo, con la luz azul verde intensa. La
impresin que despedir ser luz fluorescente amarillo y que llegar a ser claramente visible
sin el uso de polvos o los tintes.
El mismo procedimiento se puede utilizar para identificar otros elementos de rastro

incluyendo semen, saliva, tintas y fibras. Puesto que realzan la visualizacin de la evidencia por
las tcnicas ligeras de la interaccin incluyendo fluorescencia (la evidencia brilla
intensamente), absorcin (La evidencia oscurece), e iluminacin oblicua (evidencia de la
partcula pequea revelada). (VELASQUEZ, 2012)
La fluorescencia es la propiedad de una sustancia para emitir luz cuando es expuesta a

radiaciones de tipo UV, rayos catdicos o rayos X. Las radiaciones absorbidas (invisibles al ojo
humano), son transformadas en luz visible. La luz puede ser apreciada mientras la superficie es
irradiada con la fuente de luz. El espectro de excitacin de las muestras de semen tiene
longitudes de onda que van de 350 nm (Luz UV) a 500 nm (Luz Azul-verde). (ASECRIMF, 2011)
- 44 -
2.3. DEFINICIN DE TRMINOS BSICOS
Abuso sexual.- Cualquier atentado contra la violencia sexual de otra persona, realizado sin
violencia o intimidacin, pero sin que medie consentimiento.
Absorcin.- Es un proceso que separa los componentes de un gas a partir de la inclusin de un

solvente en estado lquido, con el que crea una solucin.
Agresin sexual.- Cualquier atentado contra la libertad sexual de otra persona, realizado con
violencia o intimidacin.
Audiencia.-Acto que se efecta para conocer de determinadas personas, los argumentos a

favor o en contra de decisiones que proyecten las autoridades.
Ciencias forenses: conjunto de disciplinas cuyo objeto comn es el de la materializacin de la

prueba a efectos judiciales mediante una metodologa cientfica. Cualquier ciencia se convierte
en forense en el momento que sirve al procedimiento judicial.
Cadena de Custodia.- Es el conjunto de procedimientos que permiten garantizar la identidad e

integridad de las evidencias o indicios recogidos o levantados en la escena del hecho y que
sern sometidos a un estudio o anlisis. La Cadena de Custodia se inicia en el lugar donde se
obtiene o recolecta cada indicio o evidencia, contina con todos los traslados y movimientos,
tanto internos como externos, y se finaliza por orden de la autoridad competente. Los indicios
y las evidencias deben ser protegidos contra contaminacin, adulteracin, sustraccin, inter-
cambio o destruccin.
Capilaridad.- es una propiedad de los lquidos que depende de su tensin superficial que le
confiere la capacidad de subir o bajar por un tubo capilar.
Etiquetado.- Todo indicio debe ser identificado con una etiqueta correspondiente y nica que
debe contener los siguientes datos:
Fecha y hora.
Nmero de indicio o evidencia.
Nmero de registro (folio o llamado).
Domicilio exacto del lugar de los hechos y/o del hallazgo, ubicacin exacta dentro del
lugar donde el indicio fue recolectado, as como su descripcin material.
Observaciones adicionales.
- 45 -
Nombre completo, sin abreviaturas, del agente policial, perito o auxiliar responsable
de la recoleccin y el embalaje.
Espermatozoide o Espermatozoo.- Clula sexual masculina, producida en los testculos,
destinada a la fecundacin del vulo.
Evidencia.-Es el indicio o rastro sometido a un anlisis y a un dictamen periciales que

permitirn corroborar que tiene relacin con el hecho que se investiga.
Fluidos Orgnicos.- son aquellos que se encuentran en la escena del crimen: sangre, semen
plumas, pelos, secrecin vaginal, etc
Informe Pericial.-hace referencia a los informes redactados por un perito, especialista algn
arte u oficio, que sirva como fuente de asesoramiento al juez en las cuestiones que se
soliciten. Es un documento que contiene informacin clnica y que tiene carcter jurdico. Debe
ser imparcial y el contenido debe mostrarse al juez, a las partes y al cliente, bajo su previo
conocimiento. Consiste en corroborar o desmentir la propuesta de la demanda jurdica y las
razones que nos llevan a tales conclusiones
Indicio.- Todo material sensible significativo localizado en el lugar de los hechos (signo,
muestra, manifestacin, seal, vestigio, marca, rastro, pista, indicador).
Laboratorio Biolgico.- se fundamenta en los procesos de proteccin, bsqueda, fijacin,

coleccin, embalaje, rotulado, etiquetaje, traslado y preservacin, para el anlisis mediante
procedimientos metodolgicos efectivos de la Inmunologa y Bioqumica, de fluidos y material
de origen biolgico, tales como: sangre, semen, saliva, sudor, orina, heces fecales, pulpejos
dactilares, apndices crneos, por cuanto se requiere manejar acuciosamente todos los
indicios de inters criminalstico.
Luminol.- es un derivado del cido ftlico. Se trata de un slido verdoso poco soluble. Su
mayor importancia reside en la reaccin de quimioluminiscencia que da con perxidos en
presencia de complejos de hierro como catalizadores.
Osmosis.- es un proceso fsico-qumico que hace referencia al pasaje de un disolvente, aunque

no de soluto, entre dos disoluciones que estn separadas por una membrana con
caractersticas de semipermeabilidad. Estas disoluciones, por otra parte, poseen diferente
concentracin.
- 46 -
P-30.- Es una glicoprotena producida por clulas de la glndula prosttica en el varn, ha sido
bastante caracterizada y validada por la comunidad Cientfica de Forenses, como un marcador
especfico de la presencia de fluido seminal.
Pericia.- puede ser un estudio que desarrolla un perito sobre un asunto encomendado por un
juez, un tribunal u otra autoridad, que incluye la presentacin de un informe (el informe
pericial o dictamen pericial). Este informe puede convertirse en una prueba pericial y
contribuir al dictado de una sentencia.
Perito.- Es la persona versada en una ciencia arte u oficio, cuyos servicios son utilizados por el
juez para que lo ilustre en el esclarecimiento de un hecho que requiere de conocimientos
especiales cientficos o tcnicos.
Peritaje.- Es el examen y estudio que realiza el perito sobre el problema encomendado para
luego entregar su informe o dictamen pericial con sujecin a lo dispuesto por la ley.
Prueba.-argumento, instrumento u otro medio con que se pretende mostrar y hacer patente la
verdad o falsedad de algo
Semen o Esperma: Es un lquido viscoso y blanquecino que es expulsado a travs del pene
durante la eyaculacin. Est compuesto por espermatozoides (de los testculos) y plasma
seminal que se forma por el aporte de los testculos, el epiddimo, las vesculas seminales, la
prstata, las glndulas de Cowper, las glndulas de Littre y los vasos deferentes.
- 47 -
2.4. HIPTESIS:
En las evidencias analizadas de las personas vctimas de agresin sexual siempre se va a

encontrar protena P30 y espermatozoides producto de la eyaculacin o excitacin sexual.
2.5. VARIABLES DE LA INVESTIGACIN
2.5.1. VARIABLE INDEPENDIENTE: Determinacin de protena P-30 y rastreo de

espermatozoides
2.5.2. VARIABLE DEPENDIENTE: Personas vctimas de agresin sexual en el Centro de

Investigacin de Ciencias Forenses-Tungurahua en el perodo Enero-Agosto 2015.
2.6. OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES
DEFINICIONES TCNICAS E
VARIABLES CATEGORAS INDICADORES
CONCEPTUALES INSTRUMENTOS
Anlisis Protena
Glicoprotena de
P30:
producido con el
Presencia de
Variable fin de licuar el
Protena P30 TCNICA:
Independiente: semen PSA
(Positivo). Observacin
eyaculado y
Determinacin permitir un Marcador en
Instrumento:
de protena P-30 medio para que Ciencias
Rastreo de Resultado de
y rastreo de los Forenses
Espermatozoides: Anlisis
espermatozoides espermatozoides
Presencia de
se movilicen
Espermatozoides
libremente.
(Positivo).
Variable
Dependiente:
Personas
TCNICA:
vctimas de Cualquier
Observacin
agresin sexual atentado contra
Delito
en el Centro de la libertad sexual
Reconocimiento
Investigacin de de otra persona,
Victima Mdico Legal Instrumento:
Ciencias realizado con
Resultado de
Forenses- violencia o
Anlisis
Tungurahua en intimidacin
el perodo
Enero-Agosto
2015.
- 48 -
CAPTULO III
3. MARCO METODOLGICO
3.1. MTODO CIENTFICO
Mtodo Inductivo.- Por que partimos de lo particular para llegar a lo general
3.2. TIPO DE INVESTIGACIN
El tipo que de investigacin que se sustent este trabajo en una INVESTIGACIN DE

CAMPO porque lo realizamos en el mismo lugar de los hechos, tambin es una
INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA porque nos sustentamos en documentos , libros, revistas,
etc. Para sustentar como lo tenemos en el marco terico y es de LABORATORIO porque se
realiz exmenes forenses para determinar si existi agresin sexual.
3.3. TIPO DE ESTUDIO
RETROSPECTIVO y TRANSVERSAL porque al realizar el presente estudio se recolectaron

los datos de los registros del C.I.C.F. Tungurahua del mes de Enero a Agosto del 2015.
3.4. POBLACIN Y MUESTRA
3.4.1. POBLACIN
Personas vctimas de agresin sexual cuyos peritajes fueron remitidos al Centro de

Investigacin de Ciencias Forenses de Tungurahua durante el periodo Enero - Agosto del 2015.
3.4.2. MUESTRA
La muestra no se aplic ninguna frmula porque el universo es pequeo y se trabaj con toda
la poblacin
3.5. TCNICAS E INSTRUMENTOS PARA LA RECOLECCIN DE DATOS.
La tcnica que utilizamos en esta investigacin es la observacin y recoleccin de resultados de

los anlisis forenses realizados y los informes estadsticos del Laboratorio de Biologa Forense
del CICF Tungurahua
- 49 -
3.6. TCNICAS PARA EL PROCESO Y ANLISIS DE DATOS
PERICIAS REALIZADAS DURANTE EL PERODO ENERO-AGOSTO 2015
Alternativa Frecuencia %
Enero 14 12
Febrero 18 15
Marzo 20 16
Abril 28 23
Mayo 5 4
Junio 5 4
Julio 15 12
Agosto 17 14
Total 122 100%
Fuente: Datos obtenidos de C.I.C.F.T.
Elaborado por: Cisneros Jhomayra, Villarroel Carla; Estudiantes de la Carrera de Laboratorio Clnico e Histopatolgico
PERICIAS REALIZADAS DURANTE EL PERODO ENERO-AGOSTO 2015

Agosto Enero
14% 12%
Febrero
Julio
15%
12%
Junio
4%
Mayo
4% Marzo
16%
Abril
23%

ANLISIS E INTERPRETACIN:
Segn el grfico interpretamos que se han realizado 122 pericias que se han remitido al C.I.C.F
Tungurahua de las cuales en el mes de Abril se han incrementado el nmero de casos para el
anlisis de evidencias que han llegado al Laboratorio de Biologa Forense.
- 50 -
PERICIAS ANALIZADAS PARA DETERMINACIN DE PROTENA P-30 Y RASTREO DE
ESPERMATOZOIDES DURANTE EL PERODO ENERO -AGOSTO DEL 2015
Enero 12 13
Febrero 13 14
Marzo 12 13
Abril 23 24
Mayo 3 3
Junio 6 6
Julio 12 13
Agosto 13 14
Total 94 100%
PERICIAS ANALIZADAS PARA DETERMINACIN DE PROTENA P30 Y

RASTREO DE ESPERMATOZOIDES DURANTE EL PERODO ENERO -
AGOSTO DEL 2015.
Agosto Enero
14% 13%
Julio Febrero
13% 14%
Junio
6%
Abril Marzo
Mayo 24% 13%
3%

Segn el grfico interpretamos que de los 122 pericias recibidas en el C.I.C.F. Tungurahua solo
existieron 94 pericias para la determinacin de Protena P-30 y Rastreo de Espermatozoides
notando que Abril es el mes en el que ms pericias se han recibido con un porcentaje que
abarca el 24% del total de pericias analizadas.
- 51 -
INCIDENCIA DE CASOS DE AGRESIN SEXUAL SEGN LAS PROVINCIAS DNDE SE PRESENTAN
Tungurahua 35 37
Pastaza 12 13
Morona Santiago 13 14
Chimborazo 11 12
Bolvar 4 4
Cotopaxi 13 14
Tena 4 4
Zamora Chinchipe 2 2
Total 94 100%
INCIDENCIA DE CASOS DE AGRESIN SEXUAL SEGN LAS

PROVINCIAS DNDE SE PRESENTAN
ZAMORA
TENA CHINCHIPE
4% 2%
COTOPAXI
14% TUNGURAHUA
BOLVAR
4% 37%
CHIMBORAZO
12%
MORONA
SANTIAGO PASTAZA
14% 13%

Segn el grfico se puede notar que la provincia de Tungurahua es la que ms casos de

agresin sexual ha presentado durante el perodo Enero-Agosto 2015 representando un 37%
de incidencia en relacin a las dems provincias.
- 52 -
EVIDENCIAS ANALIZADAS PARA LA DETERMINACIN DE PROTENA P-30 Y RASTREO DE
ESPERMATOZOIDES
Enero 23 7
Febrero 44 13
Marzo 54 16
Abril 89 27
Mayo 18 5
Junio 22 7
Julio 45 14
Agosto 38 11
Total 333 100%
EVIDENCIAS ANALIZADAS PARA LA DETERMINACIN

DE PROTENA P-30 Y RASTREO DE ESPERMATOZOIDES
Agosto Enero
11% 7% Febrero
13%
Julio
14%
Junio Marzo
7% 16%
Abril
Mayo 27%
5%

Segn el grfico interpretamos que el total de evidencias analizadas es de 333, deduciendo

que en los meses de Febrero, Marzo, Abril y Julio se han recibido la mayor cantidad de
evidencias para su anlisis.
INCIDENCIA DE AGRESIN SEXUAL POR GNERO DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO

DEL 2015
Femenino 89 95
Masculino 5 5
Total 94 100%
- 53 -
INCIDENCIA DE AGRESIN SEXUAL POR GNERO
DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015
Masculino
5%
Femenino
95%

Segn el grfico interpretamos que el gnero ms vulnerable de sufrir agresiones sexuales es

el Femenino con una incidencia del 95%.
TIPOS DE EVIDENCIAS ANALIZADAS EN DELITOS SEXUALES PARA DETERMINACION DE

PROTENA P-30 DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015.
Corte Hisopados Secrecin Vaginal 74 40
Corte Hisopados Secrecin Anal 14 8
Corte Hisopados Secrecin Bucal 2 1
Corte Hisopados Secrecin Prepucial 2 1
Corte Hisopados Secrecin Perianal 4 2
Corte Prenda Intima 51 28
Corte Prenda Vestir 27 15
Lavado Cavidad Vaginal 2 1
Paal 1 0
Papel Hignico 1 0
Corte de Tela 1 0
Corte de Colchn 1 1
Corte de Cobija 1 1
Corte de Toalla Genital 2 1
Fibra Vegetal 1 1
Total 184 100%
- 54 -
Segn el grfico interpretamos que de acuerdo a los tipos de evidencias analizadas en el

C.I.C.F. Tungurahua los ms utilizados para la determinacin de protena P-30 son los cortes de
hisopados de secrecin vaginal con un porcentaje del 40% y los cortes de prendas ntimas con
un 28%
TIPOS DE EVIDENCIAS ANALIZADAS EN DELITOS SEXUALES PARA RASTREO DE

ESPERMATOZOIDES DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015
Placas de Secrecin Vaginal 17 11
Placas de Secrecin Anal 4 3
Hisopados Secrecin Vaginal 57 38
Hisopados Secrecin Anal 12 8
Hisopado Secrecin Bucal 2 1
Hisopado Secrecin Prepucial 2 1
Hisopado Secrecin Perianal 4 3
Hisopados Prenda Intima 38 26
Hisopado Prenda Vestir 8 5
Hisopado de Toalla Higinica 2 1
Hisopado Papel Higinico 1 1
- 55 -
Hisopado Funda de Preservativo 1 1
Hisopado de Cobija 1 1
Total 149 100%

Segn el grfico interpretamos que de acuerdo a los tipos de evidencias analizadas en el

C.I.C.F. Tungurahua los ms utilizados para el Rastreo de Espermatozoides son los hisopados
de secrecin vaginal con un porcentaje del 38% y los hisopados de prendas ntimas con un
26%.
EVIDENCIAS QUE ARROJAN RESULTADOS POSITIVOS EN LA DETERMINACION DE PROTENA

P-30 DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015
Corte Hisopados Secrecin Prepucial 1 1
Corte de Colchn 1 1
- 56 -
Toalla Genital 2 2
Total 102 100%

Segn el grfico interpretamos que de todas las evidencias analizadas, las que mayor
incidencia tuvieron y arrojaron resultados positivos para la determinacin de protena P-30
fueron los cortes de hisopados de secrecin vaginal con un 38 % y los cortes de prendas
ntimas con un 35%.
EVIDENCIAS QUE ARROJAN RESULTADOS POSITIVOS PARA RASTREO DE ESPERMATOZOIDES

DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015
Total 64 100%
- 57 -

incidencia tuvieron y arrojaron resultados positivos para rastreo de espermatozoides fueron
los hisopados de secrecin vaginal con un 39 % y los hisopados de prendas ntimas con un
31%.
EVIDENCIAS QUE ARROJAN RESULTADOS NEGATIVOS EN LA DETERMINACION DE PROTENA

P-30 DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015
Corte Hisopados Secrecin Bucal 2 3
Corte de Tela 1 1
Corte Papel Higinico 1 1
Corte de Cobija 1 1
Fibra Vegetal 1 1
Paal 1 1
Total 81 100%
- 58 -
incidencia tuvieron y arrojaron resultados negativos para determinacin de protena P-30
fueron los hisopados de secrecin vaginal con un 43 % y los hisopados de prendas ntimas con
un 19%
EVIDENCIAS QUE ARROJAN RESULTADOS NEGATIVOS PARA RASTREO DE ESPERMATOZOIDES

DURANTE EL PERIODO DE ENERO - AGOSTO DEL 2015.
Hisopados Secrecin Anal 11 13
Hisopado Secrecin Bucal 2 2
Hisopado Secrecin Perianal 4 5
Hisopado Funda de Preservativo 1 1
Hisopado de Cobija 1 1
Hisopado Papel Higinico 1 1
- 59 -
Total 86 100%

incidencia tuvieron y arrojaron resultados negativos para rastreo de espermatozoides fueron
los hisopados de secrecin vaginal con un 35 % y los hisopados de prendas ntimas con un
25%.
- 60 -
CAPTULO IV
4.1 CONCLUSIONES
De acuerdo a las pruebas descritas, se identific que las ms utilizadas en anlisis

forenses para determinar una agresin sexual son la determinacin de protena P-30 y
el rastreo de espermatozoides mediante la tincin de rbol de navidad.
Se explic que para la determinacin de protena P-30 el mtodo se basa en una
reaccin inmunocromatogrfica que utiliza un anticuerpo monoclonal, mientras que
para tincin rbol de navidad el mtodo se fundamenta en la afinidad de la cabeza del
espermatozoide por los colorantes bsicos (kernechtrot) y la afinidad de la cola por los
colorantes cidos (pcrico-ndigo carmn)
En base a las tcnicas reconocidas existen diferentes mtodos para levantar semen en
una escena del crimen y su aplicacin depender del estado en que el mismo sea
encontrado (lquido, cavidades corporales, seco sobre superficies, en prendas o telas).
4.2 RECOMENDACIONES
Se recomienda el uso de las barreras de proteccin en todas las actividades que se

realicen en el laboratorio y extremar el uso de las mismas en la escena del crimen.
El uso de las lmparas forenses es muy til en la identificacin de mculas de semen
en la escena del crimen y en las prendas remitidas para los anlisis de laboratorio.
Los cortes de las prendas para anlisis de protena P-30 deben medir mnimo 0.5 por
0.5 mm y mximo 1 cm para as obtener resultados veraces.
Realizar controles positivos y negativos de cada kit de determinacin de protena P-30
antes de su uso y as mismo despus cada preparacin de reactivos para la tincin de
rbol de navidad.
Los reactivos para la tincin de rbol de navidad deben ser filtrados con frecuencia
para evitar precipitados en la placa.
- 61 -
BIBLIOGRAFA
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FORENSES: https://prezi.com/wopkuii50ojv/luces-forenses/
- 64 -
4.3 ANEXOS
CENTRO DE INVESTIGACION CIENCIAS FORENSES TUNGURAHUA
Fuente: C.I.C.F.Tungurahua
LABORATORIO DE BIOLOGIA CICFT BODEGA DEL LABORATORIO DE BIOLOGIA DEL CICFT
Fuente: Instalaciones del C.I.C.F.Tungurahua Fuente: Instalaciones del C.I.C.F.Tungurahua
- 65 -
FORMACIN DEL LQUIDO SEMINAL MUESTRA DE LQUIDO SEMINAL
Fuente: http://www.aebm.org Fuente: http://revistamundoforense.com
ROTULADO FORENSE MATERIALES TOMA DE MUESTRAS BIOLGICAS
LABIOL 193
PUYO, PASTAZA
P5 Corte de 0,5x0,5 de interior blanco de
la zona mariposa.
Fuente: (MORENO, y otros, 2012) Fuente: https://www.google.com.ec/search?q=materiales
- 66 -
RECEPCIN Y ETIQUETADO DE LAS EVIDENCIAS PREPARACIN DEL MATERIAL PARA EL
ANLISIS
Fuente: Anlisis realizado en el C.I.C.F.T. Lab. Biologa Fuente: Anlisis realizado en el C.I.C.F.T. Lab. Biologa
PRENDAS EVIDENCIAS PRENDAS EVIDENCIAS
- 67 -
PRENDAS EVIDENCIAS HISOPOS EVIDENCIAS
HISOPOS EVIDENCIAS HISOPOS EVIDENCIAS
- 68 -
PRESERVATIVO EVIDENCIA KIT DE ANLISIS DE PROTENA P-3
Fuente: C.I.C.F-Tungurahua Lab. de Biologa Fuente: Anlisis realizado en el C.I.C.F.T. Lab. Biologa
IDENTIFICACIN DE MCULAS DE SEMEN IDENTIFICACIN DE MCULAS DE SEMEN
- 69 -
REALIZACIN DE LOS CORTES EN LAS REGIONES MEDICIN DEL TAMAO DE LOS CORTES
DONDE SE HALLAN LAS MCULAS
COLOCACIN DE LOS CORTES EN LOS TUBOS EPPENDORFF ROTULACIN DE LOS TUBOS EPPENDORFF
- 70 -
COLOCACIN DEL BUFFER DE PROTENA P30 VORTEXEO DE LOS TUBOS EPPENDORFF
CON EL BUFFER
REFRIGERACIN DE LOS TUBOS EPPEDORFF CASSETE DE ABACARD PARA IDENTIFICAR

CON EL BUFFER PROTENA P-30
Fuente: Anlisis realizado en el C.I.C.F.T. Lab. Biologa Fuente: http://www.dczogbi.com/placas.html
- 71 -
ROTULAMIENTO DE LAS PLACAS PARA RASTREO DE HUMEDECIMIENTO DEL HISOPO PARA REALIZAR EL
ESPERMATOZOIDES FROTIS
TOMA DE MUESTRA DE SEMEN DE LA PRENDA EXTENDIDO DE LA MUESTRA EN LA PLACA
- 72 -
REACTIVOS DE LA TINCIN DE RBOL DE NAVIDAD
Fuente: C.I.C.F-Tungurahua Lab. de Biologa
FIJACIN DE LA PLACA CON MUESTRA TINCIN DE LA PLACA CON REACTIVO

KERNECHTROT
- 73 -
LAVADO DE LAS PLACAS DEL REACTIVO DE KERNECHTROT TINCIN DE LAS PLACAS CON REACTIVO
PICROINDIGOCARMINE
ACLARAMIENTO DE LAS PLACAS CON ETANOL MONTAJE DE LAS PLACAS CON PERMONT
- 74 -
OBSERVACIN DE ESPERMATOZOIDES SISTEMA DE CAPTURA DE IMGENES
MICROSCPICAS
OBSERVACIN E IDENTIFICACIN DE CABEZAS DE ESPERMATOZOIDES
Fuente: Anlisis realizado en el C.I.C.F.T. Lab. Biologa
- 75 -
MODELO DE INFORME PERICIAL
Fuente: C.I.C.F.T. Lab. de Biologa
- 76 -

Unach Ec Lab - Clin 2016 0009

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de mi vida, por quien he luchado y

luchar por alcanzar mis sueos y ser

mejor cada da.

A mis familiares y amigos que me

apoyaron y motivaron a conseguir

Carla Gabriela Villarroel Villarroel

A todos y cada una de las personas

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