1.

- RGANOS Y TEJIDOS DEL SISTEMA INMUNE

El sistema linfoide est formado por varios tipos de clulas:

linfocitos
clulas accesorias, principalmente macrfagos y otras clulas presentadoras de
antgenos (APC)
(en algunos casos) clulas epiteliales
y funcionalmente est organizado en dos tipos de rganos linfoides:

I. Organos linfoides primarios o centrales, que

A. proporcionan el entorno para la maduracin de linfocitos (linfopoyesis), de

modo que los linfocitos adquieren su repertorio de receptores especficos
para cada tipo de antgeno;

B. los linfocitos se seleccionan de modo que poseen autotolerancia (evitacin

de la autoinmunidad).
Los rganos linfoides primarios son:

el timo, donde maduran los linfocitos T

la mdula sea en el adulto como rgano de maduracin de los linfocitos B
En el feto temprano esta funcin la toma el hgado, aunque paulatinamente se ve
sustituido por la medula.
En las aves, el equivalente funcional de la mdula es la Bolsa de Fabricio.

II. rganos linfoides secundarios o perifricos, que

A. proporcionan el entorno para que los linfocitos interaccionen entre s, o

con las APC y otras clulas accesorias, y para que entren en contacto con
el antgeno;

B. diseminan la respuesta inmune al resto del cuerpo.

Los rganos linfoides secundarios son:

*los ganglios linfticos, que recogen Ag de los tejidos

*el bazo, que recoge Ag de la sangre
*tejidos linfoides asociados a mucosas (MALT), que recogen Ag de las mucosas
en la respuesta secundaria, la mdula sea acta igualmente como rgano secundario.
RGANOS LINFOIDES PRIMARIOS

Timo
Es un rgano plano y blando situado en la cavidad torcica, por encima del corazn.
Est formado por dos lbulos rodeados por cpsula de tejido conjuntivo. A su vez, los
lbulos estn divididos en lobulillos separados entre s por trabculas de tejido
conjuntivo. Cada lobulillo tmico est relleno de clulas linfoides denominadas timocitos,
dispuestas en una corteza de gran densidad celular y una mdula (interior) de menor
densidad celular. Desde la corteza hasta la mdula existe un gradiente de
diferenciacin, de modo que en la corteza se encuentran los timocitos ms inmaduros,
mientras que en la mdula se localizan los timocitos en fases madurativas ms
avanzadas. Tanto la corteza como la mdula estn rellenas de una red de clulas no
linfoides que constituyen el estroma tmico, y que consta de varios tipos celulares:

A. tres tipos de clulas epiteliales:

1. en la corteza ms xterna, las clulas nodriza

2. en la corteza, clulas corticales epiteliales

3. en la mdula, clulas medulares epiteliales.

B. Clulas dendrticas interdigitantes sobre todo en el lmite cortico-medular.

C. Macrfagos, con una localizacin similar a las dendrticas.

Todas estas clulas no linfoides del estroma expresan en sus superficies molculas
MHC de tipo I y/o II, y participan en la maduracin y seleccin de los timocitos hacia
clulas T maduras.
En la mdula tmica aparecen los denominados corpsculos de Hassall: acmulos
concntricos de clulas epiteliales. Su funcin es desconocida, pero su nmero va
aumentando con la edad.
En un captulo ulterior veremos en detalle el proceso de maduracin intratmica de los
linfocitos, pero daremos aqu un breve adelanto:

Los progenitores linfoides de los linfocitos, procedentes de la mdula sea, entran en el

timo y comienzan a dividirse activamente en la corteza; sin embargo, all mueren por
apoptosis ms del 95% de las clulas generadas, que son eliminadas por los
macrfagos. Los sobrevivientes van emigrando hasta la mdula, donde terminan de
madurar, y salen del timo como clulas T vrgenes maduras (inmunocompetentes), por
medio de las vnulas postcapilares del timo.
Durante todo este proceso los timocitos han ido interactuando con clulas estromales
provistas de MHC en sus membranas (clulas nodriza clulas corticales
epiteliales clulas dendrticas), producindose dos fases de seleccin de timocitos:
Seleccin positiva: slo sobreviven aquellos timocitos que hayan generado receptores
TCR capaces de reconocer molculas MHC propias; los dems mueren por apoptosis.
seleccin negativa: se eliminan por muerte celular programada los timocitos que
habiendo superado la seleccin positiva hayan resultado autorreactivos, es decir, los
timocitos que reconozcan molculas del propio individuo (autoantgenos) presentadas
por el MHC propio, o que tengan una afinidad demasiado alta hacia el MHC propio solo
De esta forma slo salen como linfocitos T maduros aquellas clula autotolerantes (no
inmunidad a lo propio) y capaces de reconocer antgenos (molculas extraas al propio
individuo) en el contexto del haplotipo propio del MHC.

El timo de los mamferos va involucionando con la edad, a partir de la pubertad.

En humanos, al nacer, el timo pesa 10-15 g, alcanza su orto en la adolescencia, poca
en la que llega a pesar 40-70 g, y va regresionando, de modo que en la vejez slo pesa
3 g, aunque siempre queda un remanente de zona medular.

Por lo tanto, en la vida adulta, la produccin de linfocitos T en el timo decae bastante,

aunque siempre existe una actividad residual.

RGANOS LINFOIDES SECUNDARIOS

Los linfocitos maduros vrgenes que salen de los rganos linfoides primarios emigran a
los rganos y tejidos linfoides perifricos:

I. Capsulados: en ellos se produce la secrecin de Ac que se distribuirn por la

circulacin; tambin se dan respuestas celulares locales.

A. ganglios (recogen Ag de la piel y de superficies internas)

B. bazo (recoge Ag de la sangre)

II. rganos no capsulados asociados a mucosas (MALT): protegen del Ag que

entre directamente a travs de mucosas (gastrointestinal, respiratoria,
genitourinaria). Su respuesta es la secrecin de inmunoglobulina A secretoria
(sIgA), que recubrir la superficie mucosal (epitelial).

III. .Acmulos ms o menos difusos (no capsulados), dispersos por casi todo el
cuerpo.
Sistema linftico y ganglios linfticos
El componente fluido de la sangre (plasma) se extravasa desde los capilares a los
tejidos, generando el lquido intersticial. Parte de ste retorna a la sangre a travs de
las membranas capilares, pero el resto, llamado linfa, fluye desde los tejidos conectivos
a una red de finos capilares linfticos abiertos, y de all va pasando a vasos cada vez
mayores (vasos linfticos). Finalmente, la linfa llega al mayor vaso linftico, denominado
conducto torcico, que descarga a circulacin sangunea a nivel de la subclavia
izquierda (cerca del corazn). De este modo se cumple una de las funciones del
sistema de vasos linfticos: capturar fluido procedente de los tejidos y reingresarlo en la
sangre, asegurando niveles estables de fluido en el sistema circulatorio.
El corazn no influye sobre la circulacin de la linfa: sta avanza en un solo sentido
debido a los movimientos de los msculos del cuerpo y a la disposicin unidireccional
de las vlvulas de los ganglios linfticos.

La otra funcin (y la que nos interesa aqu) del sistema linftico es capturar antgenos
de los lquidos intersticiales de los tejidos y llevarlos a algunos de los rganos linfoides
secundarios, donde quedarn retenidos para su interaccin con las clulas del sistema
inmune. El antgeno queda retenido en alguno de los ganglios interpuestos a lo largo
del sistema de vasos, pero en el caso de que "pase de largo" entrar en circulacin
sangunea y tendr la oportunidad de ser captado por el bazo.(A los ganglios y al bazo
se les califica como rganos linfoides secundarios sistmicos).

Aparte de estos rganos sistmicos existen folculos linfoides difusos. Son agregados
de clulas linfoides rodeados de capilares linfticos que drenan al folculo. Existen miles
de tales folculos dispersos por casi todos los rganos y tejidos, siendo especialmente
abundantes a lo largo del tracto gastrointestinal, bronquios, tracto respiratorio superior y
tracto genital.

Pero como dijimos, el Ag puede entrar desde el lquido intersticial, pasando a los
capilares linfticos, y de ellos a los vasos linfticos, por los que accede a algn ganglio
linftico regional. Vamos, pues a describir este tipo de rgano linfoide secundario.

Ganglios linfticos
Estn intercalados en la red de vasos linfticos, frecuentemente en la confluencia de
ramificaciones de vasos.
Hay grupos de ganglios especialmente abundantes y estratgicamente situados en:
cuello (ganglios cervicales)

axilas (axilares)

ingles (inguinales)

mediastino

cavidad abdominal

Estos ganglios drenan regiones superficiales (piel) y profundas del cuerpo (excepto el
interior de la cavidad craneal).

- Son la primera estructura linfoide organizada que se encuentra un antgeno que

proceda de los espacios tisulares, y estn especialmente diseados para retener
antgeno, (bien sea solo o formando parte de inmunocomplejos) cuando la linfa
percola por el interior de ellos, y para que interaccione con los linfocitos y otras
clulas que van a iniciar la respuesta inmune especfica.
- Los ganglios humanos suelen medir entre 2 y 10 mm de dimetro, y tienen forma de
juda, con una parte cncava denominada hilio, a donde entra una arteria que se
ramifica arteriolas, vnulas postcapilares vena que sale por el hilio.
- La linfa llega al ganglio por los varios vasos linfticos aferentes, y sale por un nico
linftico eferente a la altura del hilio.
Histolgicamente distinguimos varias zonas dentro del ganglio:
Corteza: es el rea rica en clulas B (con macrfagos). En ella se pueden distinguir:
Folculos primarios, ricos en linfocitos B maduros en reposo
Folculos secundarios (que se forman a partir de los primarios tras la estimulacin
antignica), con su manto y su centro germinal.
Paracorteza: es el rea rica en clulas T (donde adems se localizan clulas
dendrticas interdigitantes).
Mdula: con clulas B, T, clulas plasmticas y abundantes macrfagos.

Seno subcapsular, a donde van a parar los antgenos timo-independientes.

- El antgeno llega solo o transportado por clulas de Langerhans o similares. En la
paracorteza las clulas de Langerhans se convierten en clulas dendrticas
interdigitantes, que procesan el Ag y lo presentan en sus MHC-II (abundantes en
sus largos procesos membranosos) a los linfocitos, provocando la activacin de las
clulas TH, las cuales activan ya a algunas clulas B. Al cabo de 3 o 4 das, algunas
clulas B se diferencian a clulas plasmticas secretoras de IgM e IgG.
- Pero la mayor parte de las clulas B en trance de activacin (y algunas clulas T)
emigran a la corteza, a los folculos primarios. All se producen interacciones entre
clulas dendrticas foliculares, macrfagos, clulas T H y clulas B, que hacen pasar
al folculo a folculo secundario, con su centro germinal. All contina la activacin
de las clulas B, que proliferan (centroblastos) y se diferencian en dos subclones:
Clulas B de memoria
Clulas plasmticas secretoras de anticuerpos. Dichas clulas emigran a la mdula, y
las grandes cantidades de Ac secretados salen a la circulacin linftica.
En resumen:

La linfa llega va linfticos aferentes seno subcapsular va percolando lentamente

(sentido corteza paracorteza mdula), permitiendo la interaccin del Ag con
macrfagos y otras APCs (incluyendo las dendrticas foliculares, que atrapan complejos
inmunes). En el centro germinal se produce la activacin y proliferacin y diferenciacin
de linfocitos B hasta:

1. clulas plasmticas, que pasan a mdula, produciendo Ac que salen por

ellinftico eferente, para alcanzar finalmente la circulacin sangunea, que los
distribuye a todo el organismo;

2. clulas B de memoria, que quedan en el folculo, sobre todo en la zona del

manto.
Bazo

1. un tejido ms denso alrededor de las arteriolas, llamado vaina o manguito

linfoide periarteriolar (PALS), que constituye la zona T del bazo;

2. por fuera del PALS, una zona ms difusa llamada zona marginal, rica en
linfocitos B y con macrfagos. Aqu se encuentran folculos linfoides primarios y
secundarios, parecidos a los vistos en el ganglio.
Es un rgano linfoide secundario grande (150 g en humanos adultos), de forma ovoide,
situado en el cuadrante superior izquierdo del abdomen.
Est especializado en capturar antgenos transportados por la sangre (p. ej., en las
situaciones de infecciones sistmicas). La arteria esplnica se ramifica en numerosas
arteriolas, que descargan a los sinusoides esplnicos; de all arrancan las vnulas, que
finalmente se unen en una sola vena esplnica que sale del rgano.
Posee una cpsula de tejido conectivo, de la que salen hacia el interior numerosas
trabculas que delimitan compartimentos. En cada compartimento se distinguen dos
tipos principales de tejidos: la pulpa blanca y la pulpa roja.
La pulpa blanca est constituida por tejido linfoideo, repartido en:
La pulpa roja es una red de sinusoides venosos que continen macrfagos residentes
especializados (macrfagos de los senos esplnicos), que se encargan de destruir
eritrocitos y plaquetas viejos (proceso de hematocatresis).
El bazo carece de vasos linfticos. El Ag llega a travs de la arteria esplnica, que entra
al rgano por el hilio. La arteria se divide en arteriolas, que a su vez conducen a
capilares, que se abren y vacan su contenido en la zona marginal de la pulpa blanca.
En ausencia de estmulo, la zona marginal posee folculos linfoides primarios, parecidos
a los de los ganglios, ricos en clulas B vrgenes.
En la zona T del bazo (PALS) las clulas dendrticas interdigitantes captan y procesan
el antgeno, presentndolo en sus MHC de clase II a los T H en reposo, activndolos. A
su vez, los TH activados activan a las clulas B. Las B activadas, junto con algunos
linfoctitos T migran a la zona marginal, convirtiendo los folculos linfoides primarios en
folculos secundarios, con sus centros germinales poblados de centroblastos en
multiplicacin.
El bazo recibe cada da ms linfocitos que la suma de todos los de los ganglios
linfticos.
El sistema linfoide mucosal, no capsulado (MALT)
Las mucosas de los tractos digestivo, respiratorio y urogenital suponen una enorme
superficie (unos 400 m2) y constituyen posibles sitios de entrada de numerosos
patgenos. As pues no puede extraar que la evolucin haya desarrollado para ellos
defensas inmunitarias especializadas. Desde el punto de vista histolgico, estas
consisten en tejidos que van desde acmulos dispersos de linfocitos hasta estructuras
organizadas, pero nunca rodeadas de cpsula. Por ello reciben el nombre de tejido
linfoide asociado a mucosas (no capsulado), MALT.

Este conjunto de tejidos reviste una grandsima importancia, habida cuenta de la gran
superficie potencial que ha de defender frente a la entrada de patgenos. Otra idea de
su relevancia la suministra el hecho de que las clulas plasmticas de los tejidos MALT
son ms numerosas que la suma de las clulas plasmticas de bazo, ganglios y mdula
sea.

El MALT consiste en agregados de tejido linfoide no capsulado que se localizan en la

lmina propia y reas submucosas de los tractos gastrointestinal, respiratorio y
genitourinario.

1. amgdalas: linguales (en la base de la lengua), palatinas (en la parte posterior

de la boca) y farngeas o adenoides. Constan de ndulos linfoides no
capsulados, con linfocitos, macrfagos, granulocitos y mastocitos. Las clulas B
se organizan en numerosos folculos, incluyendo secundarios con sus centros
germinales. Poseen un papel defensivo frente a patgenos que entran por los
epitelios nasales y orales.

2. Placas de Peyer del leo: son 30 a 40 ndulos no capsulados en esta parte del
intestino delgado.

3. Apndice, en el inicio del intestino grueso.

Los ms sencillos son simples acmulos difusos de linfocitos, clulas plasmticas y
fagocitos, localizados en los pulmones y en la pared intestinal.
Folculos linfoides aislados.
Folculos linfoides que forman grupos ms o menos densos:
Los tejidos MALT mejor estudiados son los asociados con el tracto gastrointestinal. A
grandes rasgos encontramos clulas linfoides en tres partes:

1. En el mismo epitelio existen linfocitos intraepiteliales (IEL), que en una buena

proporcin (incluso mayoritaria) son fenotpicamente TCR-1 (gd) y CD8 +. Se trata
de un tipo de linfocitos con poca diversidad antignica, pero adaptados frente a
ciertos patgenos que frecuentemente pueden intentar la entrada por este
epitelio.

2. En la lmina propia de todo el intestino se localizan miles de folculos linfoides,

donde encontramos linfocitos TH con TCR-2 (ab), clulas B, clulas plasmticas
secretoras de sIgA y macrfagos.

3. Ms abajo, ya en la capa submucosa, encontramos las Placas de Peyer del

intestino delgado, especie de ndulos, cada uno compuesto de unos 30 a 40
folculos linfoides.
Como ejemplo, veamos cmo funciona un acmulo de este tipo ligado al intestino
delgado:

1. En el intestino delgado, el Ag entra a travs de unas clulas epiteliales

especializadas, denominadas clulas M, que tienen una membrana muy
invaginada (ribete en cepillo) hacia la luz intestinal y una concavidad (llamada
 bolsillo basolateral) que alberga varios linfocitos B, T y macrfagos. Estas clulas
M se sitan en los llamados sitios inductivos: cortas regiones de la membrana
mucosa emplazadas sobre folculos linfoides.

2. Los Ag endocitados por la clula M son transportados al bolsillo basolateral.

Como la clula M es rica en MHC-II, probablemente el Ag llega procesado al
bolsillo, para ser presentado a alguno de los linfocitos TH.

3. Posteriormente se estimulan los linfocitos B del folculo subyacente al sitio

inductivo. Algunos de estos linfocitos B sensibilizados viajan por la linfa,
atraviesan los ganglios linfticos mesentricos, pasan por el conducto torcico a
la sangre; desde la circulacin sangunea regresan por capilares a la lmina
propia del intestino, donde se distribuyen de modo difuso pero extenso, y se
diferencian a clulas plasmticas especializadas en secretar sIgA, que atraviesa
la capa de clulas epiteliales y recubre la zona apical que da a la luz intestinal.
All, la sIgA puede interaccionar con el Ag que dio origen a la respuesta. El resto
de los linfocitos B activados se diferencia in situ y las clulas plasmticas liberan
la IgA en la misma zona.
Clulas linfoides de la piel
Aparte del papel de la piel como barrera inespecfica frente a los patgenos,
desempea un papel tambin como "rgano" del sistema inmune:

1. Clulas de Langerhans: se trata de un tipo de clula dendrtica, dispersa entre

las clulas epiteliales de la epidermis. Captan antgenos por endocitosis o
fagocitosis, y tras ello emigran como clula "a vela" por los linfticos, hasta que al
llegar a la paracorteza de los ganglios regionales se diferencian en clulas
dendrticas interdigitantes, con altos niveles de molculas de clase II del MHC.
All funcionan como potentes presentadoras de antgeno procesado a los
linfocitos TH vrgenes, a los que activan.

2. Linfocitos intraepidrmicos, parecidos, que al igual que los IEL del MALT son
en buena proporcin de tipo gd, e igualmente especializados en determinados
patgenos que pueden entrar por la piel.

3. Los queratinocitos (la clula epitelial de la epidermis) pueden, llegado el

caso, secretar citoquinas, con un papel en la induccin de una reaccin
inflamatoria local.

4. Dispersos en la dermis se pueden encontrar macrfagos y clulas B y T

activadas o de memoria.

reas inmunolgicamente privilegiadas

Se conocen como reas inmunolgicamente privilegiadas aquellas en las que

normalmente no existe respuesta inmune: cerebro, testculos y cmara anterior del ojo.
Estn protegidas por fuertes barreras entre sangre y tejido (p. ej., la barrera
hematoenceflica) y bajas permeabilidades o sistemas especficos de transporte. Su
significado adaptativo estriba en evitar respuestas inflamatorias en lugares donde sera
lesivo para la integridad del individuo.

Recirculacin linfocitaria

Una vez que los linfocitos llegan a un rgano linfoide perifrico, no se quedan all
permanentemente, sino que se mueven de un rgano linfoide a otro a travs de la
sangre y de la linfa. Existe, pues, un trfico linfocitario entre tejidos, sistema linftico y
sangre.

Cada hora del 1 al 2% del "pool" de linfocitos recircula por el circuito. Ello supone que
aumentan las probabilidades de que las clulas especficas para cada Ag puedan entrar
en contacto con ste en los rganos perifricos.

Cuando entra un antgeno, los linfocitos especficos "desaparecen" de circulacin

sangunea antes de 24 horas: esto es lo que se llama "atrapamiento", porque estos
linfocitos han sido reclutados a los rganos linfoides secundarios, donde hacen contacto
con el Ag presentado y procesado por APC.

Al cabo de unas 80 horas, tras su proliferacin, los linfocitos abandonan el rgano

linfoide. En el caso de los linfocitos B, al llegar al tejido donde se produjo la entrada del
Ag se diferencian a clulas plasmticas productoras de Ac.

2.- MADURACIN, ACTIVACIN Y DIFERENCIACIN DE LOS LINFOCITOS T

(ONTOGENIA DE LOS LINFOCITOS T)

El receptor clonotpico de las clulas T (TCR) presenta dos funciones principales segn
la fase de desarrollo en que se encuentre la clula dentro del linaje de los linfocitos T:

1. Durante la maduracin de los timocitos en el timo, participa en la seleccin tmica

positiva y negativa.

2. Una vez que el linfocito T ha madurado, emigra a la periferia, y entonces el

receptor participa en el reconocimiento de antgenos, lo que desencadena un
programa de activacin que lleva a la proliferacin y diferenciacin de las clulas
T en dos subclones: uno de clulas efectoras, y otro de clulas de memoria.
El proceso de reconocimiento vara segn que hablemos de TCR-2 (-) o del TCR-1
(g d ): en el primer caso, y como ya hemos visto, se reconocen pptidos en el contexto
del haplotipo propio del MHC clsico, y se requieren molculas coestimuladoras y
cosealizadoras, notablemente la CD4 (para linfocitos T H) o la CD8 (para los linfocitos
TC); en el caso del g d , no se requiere MHC clsico, y no participan CD4 ni CD8.

Refirindonos a los linfocitos con receptores de tipo -, podemos hacer un avance

resumido de estos procesos de maduracin y activacin:

Maduracin: la enorme diversidad antignica potencial se reduce a un 2% durante la

maduracin intratmica de los timocitos: slo llegan a madurar aquellas clulas
restringidas a reconocer lo no-propio en el contexto del haplotipo MHC propio
(autorrestriccin y autotolerancia). Las fases finales de la maduracin ocurren por dos
rutas de desarrollo diferentes que generan dos subpoblaciones: linfocitos CD4 +
(restringidos por MHC-II) y linfocitos CD8+(restringidos por MHC-I).
Activacin: La activacin de clulas T maduras perifricas se inicia con la interaccin
entre el TCR y un pptido antignico enclavado en la hendidura del MHC. Como ya
comentamos, la baja afinidad (10 -5M) de esta interaccin ternaria se ve potenciada por
la presencia de correceptores y otras molculas de membrana, que funcionan para
fortalecer la interaccin ternaria TCR-pptido-MHC, y para transducir la seal
activadora al interior de la clula T. Ello desencadena la proliferacin clonal y
diferenciacin en dos subpoblaciones, una de T efectoras y otra de T de memoria.
MADURACIN DE LAS CLULAS T

Desarrollo del timo:

El estroma tmico surge al inicio del desarrollo embrionario a partir de capas

ectodrmicas y endodrmicas procedentes del tercer bolsillo farngeo y de la tercera
hendidura branquial. Estas dos estructuras se invaginan, y se cierran, y las dos capas
quedan superpuestas, de modo que la ectodrmica rodea a la endodrmica, formando
el llamado rudimento tmico.

- La capa ectodrmica formar los tejidos epiteliales corticales del timo;

- La capa endodrmica formar los tejidos epiteliales medulares.
El rudimento tmico atrae entonces a clulas de origen hematopoytico, que lo
colonizan: clulas dendrticas, macrfagos y precursores de timocitos.

Al nacer, los humanos tienen ya plenamente desarrollado el timo.

- En su corteza encontramos slo timocitos en fases tempranas de su maduracin,

junto con algunos macrfagos, dentro del estroma cortical a base de clulas
corticales epiteliales.
- En la mdula encontramos timocitos en fases ms avanzadas de maduracin
con clulas dendrticas y macrfagos, todos inmersos en un estroma medular a
base de clulas epiteliales medulares.
Rutas de desarrollo en el linaje de las clulas T
El primer marcador de superficie en aparecer (en ratn) es el Thy-1 (equivalente al CD2
de humanos), que ya no se pierde (por lo tanto, se trata de un marcador que caracteriza
al linaje de T). Estas clulas Thy-1 + CD4- CD8- (dobles negativas) pueden escoger dos
vas alternativas:

1. En una de las dos rutas, las clulas hacen reordenaciones productivas de g y d y

expresan CD3 en su membrana. Suponen slo <1% de los timocitos. Son las
primeras en aparecer: se detectan al da 14 de gestacin, pero desaparecen al
nacimiento.

2. La mayora escoge una va alternativa, que discurre de la siguiente manera:

- Da 16: Las clulas reordenan genes de cadenas b. Si no se logran
reordenaciones productivas, entran en apoptosis. Si la reordenacin es
productiva, la cadena b se asocia con la llamada cadena a sustitutiva (una
especie de "pseudo-a", o cadena a de pre-T, que se abrevia pTa), generando el
receptor pTa:b (junto con CD3). Este receptor induce la proliferacin celular y la
coexpresin de CD4 y CD8: de este modo aparecen los timocitos grandes
doble positivos. El receptor pTa:b tambin induce la reordenacin de genes de
cadenas a.
- Da 17: CD4+ CD8+ TCR-2+ (a b ) CD3+. Se trata de los pequeos
timocitos dobles positivos, que dejan de dividirse. Estas clulas ya provistas
del complejo receptor especfico van a ser sometidas, hasta la poca del
nacimiento (en que alcanzan sus mximos niveles), a seleccin positiva y
negativa:
seleccin positiva: sobreviven aquellas clulas que tengan TCR capaces de
reconocer MHC-I o MHC-II de clulas epiteliales del timo. Con ello se garantiza
la restriccin por propio haplotipo de las clulas T.
seleccin negativa: de aquellas clulas que han pasado la seleccin positiva
mueren por apoptosis las que posean TCR que reconozcan con alta afinidad
pptidos propios enclavados en el MHC o MHC propio solo. Ello tiende a
garantizar la propiedad de autotolerancia por eliminacin de los linfocitos T
autorreactivos.
Los timocitos dobles positivos que superan la doble seleccin tmica se desarrollan en
una de dos posibles rutas alternativas:
CD4+ CD8- TCR-2+ CD3+ (representan el 10% de timocitos)
CD8+ CD4- TCR-2+ CD3+ (un 5% de los timocitos)
adicionalmente, y quiz procedente de los anteriores, al 5 da del nacimiento se
detecta una tercera subpoblacin de CD4- CD8- TCR+ CD3+.
Estas poblaciones abandonan el timo como linfocitos T maduros (inmunocompetentes)
vrgenes, y circulan por la periferia, pudindose establecer en rganos linfoides
secundarios (ganglios) y recirculando continuamente entre sangre y linfa, a la espera de
que en uno de sus asentamientos en ganglios llegue a encontrar su antgeno; si no lo
encuentra, muere al cabo de unas 5 a 7 semanas.
Localizacin intratmica de las diversas fases madurativas:

Los timocitos doble negativos se localizan en la zona subcapsular de la corteza.

Los pequeos timocitos dobles positivos se localizan en la corteza.
Los timocitos maduros CD4+ y CD8+ se ubican en la mdula.
En la corteza, las clulas epiteliales corticales establecen contactos por sus
largos procesos de membrana con los timocitos.

Seleccin tmica positiva y negativa:

En ambos procesos selectivos parecen jugar un papel importante las clulas del
estroma tmico: clulas epiteliales tmicas, macrfagos y clulas dendrticas; todas ellas
expresan en sus membranas grandes niveles de molculas MHC-I y/o MHC-II. Los
timocitos inmaduros dobles positivos (CD4 + CD8+ TCR+ CD3+) interaccionan, por
mecanismos an oscuros, con estas clulas estromales, lo que conduce a la seleccin
positiva y negativa.

En la seleccin positiva se da interaccin de los timocitos con clulas epiteliales

corticales del timo (Las clulas corticales epiteliales van provistas de largos procesos
de membrana que permiten contactos simultneos con varios timocitos). Algunos
autores han sugerido la interaccin de los timocitos inmaduros dobles positivos con
dichas clulas epiteliales por medio del TCR restringido por MHC podra conllevar algn
tipo de seal protectora que librara a estos timocitos de la muerte celular programada;
en cambio, la apoptosis afectara a los timocitos no restringidos por MHC propio.

De los timocitos que sobreviven a la seleccin positiva algunos llevan TCR de baja
afinidad hacia auto-pptidos presentados por MHC, y otros llevan TCR con alta afinidad
hacia auto-pptidos presentados por ese MHC: estos ltimos sufren seleccin
negativa, que ocurre en la zona de transicin cortico-medular y en la mdula
tmica, y en la que las clulas dendrticas y los macrfagos interaccionan con los
timocitos portadores de TCR de alta afinidad hacia {autopptidos-MHC} o hacia MHC
solo.

Los auto-pptidos que inducen la seleccin negativa son aquellos derivados de

protenas expresadas en el mismo timo, as como aquellos procedentes de protenas
ubicuas que llegan al timo por la circulacin.

As pues, la autotolerancia se consigue eliminando clulas T (en realidad sus

precursores inmaduros, timocitos) autorreactivas, y permitiendo el desarrollo de las
especficas que reconocen pptidos extraos (no-propios) enclavados en el MHC propio
(una combinacin que alguien ha denominado como "lo propio alterado").
La seleccin positiva tambin regula otros dos fenmenos en los que no nos vamos a
detener:

Regulacin de reordenaciones de cadenas : la expresin en membrana del

TCR no es suficiente para desconectar los genes de RAG y de TdT, de modo
que contina la reordenacin de segmentos gnicos de cadenas a, pudindose
dar el caso de que una misma clula pueda tener dos tipos de TCR que tienen
en comn sus cadenas b, pero que difieren en las cadenas a, si bien slo uno de
ellos ser funcional.
La seleccin positiva tambin regula la expresin del correceptor (CD4 o CD8)
en las clulas maduras (es decir, el hecho de que dejan de ser doble positivas
para convertirse en CD4+ o CD8+). Ello depende a su vez de la especificidad del
TCR por la clase de MHC (I o II). El mecanismo de esta retencin selectiva de
slo uno de los correceptores es an objeto de investigacin y debate.
ACTIVACIN DE LOS LINFOCITOS T COADYUVANTES

La activacin y expansin clonal de T H es un acontecimiento central en la produccin de

las respuestas inmunes especficas (tanto la humoral como la celular). Se trata de un
proceso complejo que en los ltimos aos est siendo paulatinamente desentraado.
Antes de entrar en detalles, podemos resumirlo para tener una idea general:

Los linfocitos T vrgenes son clulas en reposo que se encuentran "aparcadas"

en la fase G0 del ciclo celular. La activacin, proliferacin y diferenciacin de
estas clulas es un fenmeno complejo.
La activacin se inicia cuando el linfocito T H interacciona, a travs de su complejo
TCR-CD3, con el antgeno peptdico (exgeno) -procedente de procesamiento
endosmico- enclavado en el surco de MHC-II de una clula presentadora. En
esta interaccin inicial, y en la seal que se va a producir, participan, adems,
molculas accesorias, como el correceptor CD4.
Esta interaccin inicial "dispara" una compleja cascada de acontecimientos
bioqumicos, en la que son esenciales actividades quinasas y fosfatasas, y que
culminan con la activacin y expresin de diversos genes, entre los que se
cuentan el de la IL-2 y el de su receptor.
La secrecin autocrina de IL-2 por parte de los linfocitos T H hace que stos
salgan de la fase G0 y entren y progresen en el ciclo celular: ello provoca la
proliferacin y diferenciacin de la clula T en dos subpoblaciones: una de
clulas efectoras (las T coadyuvantes o colaboradoras) y las TH de memoria.
Pero para que ocurra esto se requieren, adems seales coestimulatorias. Si
tales seales qumicas no se suministran al tiempo en que se est produciendo
la interaccin especfica TCR-pptido-MHC, se induce un estado de incapacidad
de respuesta inmune que se denomina anergia, que se manifiesta en tolerancia
inmunolgica hacia el estmulo antignico.
Rutas de sealizacin intracelular
El TCR tiene colas citoplsmicas cortas que por s mismas son incapaces de
sealizacin intracelular. Una vez que dicho TCR se une al pptido: MHC, esta seal se
transduce al interior de la clula T por medio de los dominios citoplsmicos de CD3, el
correceptor CD4 y varias molculas accesorias (CD2, CD45). Dicha transduccin de
seal se realiza por medio de una serie de proten-quinasas y proten-fosfatasas

POBLACIONES PERIFRICAS DE CLULAS T MADURAS

Clulas T -

Un 90-95% de las clulas T perifricas son de tipo a b (o sea, TCR-2), existiendo una
proporcin de CD4+ doble que las CD8+. En general, las CD4+ funcionan como clulas T
coadyuvantes (TH) y las CD8+ lo hacen como T citotxicas (TC), aunque parece que
ambas poblaciones expresan el mismo repertorio de segmentos variables (Va y Vb).

La poblacin circulante (perifrica) de clulas T consiste en T vrgenes, T efectoras y T

memoria.

Linfocitos T vrgenes: resumen de su ciclo de vida y de su activacin hasta

clulas efectoras

Las clulas T CD4+ y T CD8+ vrgenes inmunocompetentes que acaban de madurar

abandonan el timo y entran en circulacin en un estado de reposo (G 0 del ciclo celular).
Se caracterizan por:

- bajos niveles de molculas de adhesin

- altos niveles del receptor de alojamiento (homing) llamado L-selectina, que les
permite unirse a la dirigina (addressin) vascular de las vnulas de endotelio alto
(HEV) de los ganglios linfticos. Esto permite la extravasacin del linfocito virgen
hasta el interior del ganglio a partir de la circulacin.
- Expresan la isoforma de alto peso molecular de CD45 (llamada CD45RA),
implicada en la transduccin de la seal de activacin.
Veamos un resumen de lo que pasa con los linfocitos T vrgenes una vez que salen del
timo:

1. Los linfocitos T vrgenes recirculan continuamente entre la sangre y la linfa.

Poseen la capacidad de extravasarse desde la corriente sangunea hasta alguno
de los rganos linfoides secundarios, debido a las interacciones entre sus
receptores de alojamiento y las diriginas vasculares de las HEV de los ganglios y
del MALT. En estos rganos establecen contactos cada da con muchas clulas
presentadoras de antgeno. Si no la encuentra, el linfocito T sale del ganglio va
 linftico eferente, pasa a circulacin, puede entrar a tejidos (de nuevo escrutando
APC adecuadas), y eventualmente regresa al sistema linftico. De esta manera,
aumenta la probabilidad de que un linfocito T encuentre la combinacin
adecuada de pptido:MHC para la que estn preparados sus receptores TCR.

2. Cuando una clula T virgen se encuentra en la paracorteza del ganglio con una
APC que le muestra la combinacin adecuada de pptido:MHC, deja de migrar, y
se embarca en los pasos que le conducirn a ser activada y a producir un clon
de linfocitos T "armados" efectores.

3. Los tres tipos de clulas presentadoras de antgeno profesionales del ganglio

son el macrfago, las clulas dendrticas interdigitantes y las clulas B. Estos
son los nicos tipos celulares capaces de suministrar la seal coestimulatoria. En
prximos temas iremos viendo cmo cada una de estas clulas cumplen
misiones concretas, procesando antgenos de clases diferentes de
microorganismos, pero ya podemos ver en los esquemas cmo cada tipo de APC
se localiza en una zona o zonas determinadas del ganglio. La produccin de T
efectoras tarda varios das en producirse, al cabo de los cuales dichas clulas
"armadas" salen del rgano linfoide secundario para emigrar a los sitios de
infeccin, donde ejercern los efectos pertinentes.
Veamos en un poco de ms detalle las interacciones celulares que conducen
eventualmente a la activacin del linfocito T:

1.Cuando las clulas T emigran a la paracorteza del ganglio, se van uniendo

transitoriamente con las APCs que encuentran en su camino, sobre todo con las clulas
dendrticas. Esta unin inicial es inespecfica, y en ella participan molculas de
adhesin celular: CD2 y LFA-1 de T, que reconocen respectivamente a LFA-3 y las
diversas ICAM (ICAM-1, -2 y -3) de la APC.
2.Esta unin, como acabamos de decir, es transitoria, y permite que mientras tanto el
linfocito T "escrute" grandes nmeros de molculas MHC de la APC, en busca de la
combinacin adecuada pptido:MHC.
3.Si no encuentra esa combinacin especfica, la clula T se despega de la APC y sigue
su camino, interaccionando con otras APCs. Al cabo de unos das, si no ha encontrado
el pertinente pptido antignico enclavado en el surco de MHC, abandona el ganglio va
linftico eferente.
4.Si el linfocito T encuentra su combinacin pptido:MHC, la sealizacin a travs del
complejo TCR-CD3 induce un cambio conformacional en las molculas de LFA-1, de
modo que stas aumentan su afinidad por las ICAM de la APC. Ello permite a su vez
estabilizar la unin especfica entre la clula T y la APC, con lo que el contacto entre
ambas se prolonga (hasta varios das), de modo que da tiempo a que el linfocito T se
active y prolifere hasta diferenciarse en un clon de clulas T armadas efectoras.
Linfocitos T efectores
Unas 48 horas despus de su activacin, la clula T se convierte en un blasto (aumenta
su tamao) y comienza a proliferar en el ganglio linftico, diferencindose al cabo de 5-
7 das en una subpoblacin de clulas efectoras especializadas y otra subpoblacin de
T de memoria. Las clulas T efectoras pueden ser de tres tipos funcionales diferentes:

- TC: son las T matadoras (citotxicas), que suelen ser fenotpicamente CD8 +.
- TH1: son las denominadas T inflamatorias, y su papel estriba en activar a
macrfagos. Suelen ser fenotpicamente CD4 +.
- TH2: denominadas T colaboradoras o coadyuvantes en sentido estricto,
especializadas en secretar ciertas citoquinas que son esenciales en la activacin
de clulas B y T. Suelen ser CD4+.
Las T efectoras, como ya sabemos, pueden ser de tres tipos, pero aparte de que cada
uno posee un arsenal especfico, todas comparten una serie de importantes caracteres
que las distinguen de las T vrgenes:

- Sus requerimientos de activacin son diferentes a las T vrgenes: ya no

necesitan la seal coestimulatoria.
- Tienen ms sensibilidad a la activacin, en parte debido al aumento de
molculas de adhesin CD2 y LFA-1.
- En los humanos, la mitad de las T efectoras pierden la L-selectina (el receptor de
alojamiento), por lo que ya no tienden a extravasarse a los rganos linfoides
secundarios.
- En cambio, expresan otra molcula, la VLA-4, que permite que el T efector se
una al endotelio vascular cercano al sitio de infeccin. De esta manera, pueden
pasar a los tejidos donde se encuentra el microorganismo invasor, donde
ejercern su papel efector.
Los detalles de cmo es la interaccin concreta de cada uno de estos tipos de clulas T
armadas con sus clulas objetivo los iremos tratando en temas ulteriores, pero ahora
vamos a intentar hacernos una idea general de los rasgos comunes:

1. La T armada sale del rgano linfoide secundario y emigra a los tejidos donde
existe infeccin, guiada por cambios en la membrana del endotelio ("endotelio
inflamado"), que son reconocidos por receptores como el VLA-4.

2. La primera interaccin de la T con su clula objetivo es a travs de molculas de

adhesin celular, carentes pues de especificidad antignica. El hecho de que la T
efectora posee niveles superiores de LFA-1 y CD2 hace que se puedan unir
mejor a clulas no presentadoras, que tienen menores niveles de ICAMs y LFA-3
que las APC.

3. La interaccin inespecfica mediante molculas de adhesin celular es breve, a

no ser que en ese pequeo lapso de tiempo, el complejo TCR-CD3-correceptor
interaccione con la combinacin adecuada pptido:MHC. En este caso, la unin
especfica provoca un cambio en LFA-1, que hace que la unin entre T y la clula
objetivo dure ms tiempo, tiempo durante el cual la clula T libera sus molculas
efectoras al estrecho espacio intercelular que separa a ambas clulas.
 4. En este perodo de interaccin estable desencadenado por la unin especfica, la
clula T experimenta un notable fenmeno de polarizacin celular:
- Se produce la reorganizacin del citoesqueleto, de modo que tanto el aparato de
Golgi como el centro organizador de los microtbulos se colocan en la zona de
citoplasma cercana a la parte de la membrana que est en contacto con la clula
objetivo.
- Los grnulos de la clula T se orientan hacia esa zona de membrana, con la que
finalmente se fusionan, liberando su contenido por exocitosis. La consecuencia
es que en el estrecho espacio intercelular se produce una gran concentracin de
esas molculas efectoras, que al llegar a la clula objetivo desencadenarn una
serie de respuestas (dependiendo del tipo de clula-objetivo) destinadas a
eliminar el parsito.

5. Esas molculas secretadas o de membrana producidas de modo polarizado por

la clula T son las mediadoras de las funciones efectoras.

6. Los linfocitos T efectores son de vida corta: al cabo de 2 o 3 das mueren por
apoptosis, una vez cumplida su misin, y ante la bajada del nivel de citoquinas
activadoras como la IL-2.
Linfocitos T de memoria
Los T de memoria surgen como subpoblaciones diferenciadas a partir de la
proliferacin de T vrgenes y T efectores durante una respuesta primaria.
Permanecen en reposo (fase G0) durante mucho tiempo (hasta 30 aos o ms),
como una subpoblacin expandida, una vez que ha declinado la subpoblacin
"hermana" de clulas T efectoras.
Estn preparadas para responder de un modo ms rpido e intenso cuando se
vuelvan a encontrar con el antgeno (en la respuesta secundaria). Ello se debe
en parte a que poseen menores requerimientos para ser activadas.
En general poseen el mismo tipo de molculas de membrana que los T efectores
correspondientes. De hecho,los T de memoria y los T efectores son difciles de
distinguir entre s, salvo que los primeros estn en fase G 0 y tardan ms tiempo
en en responder que los T armados.
Al igual que los T vrgenes recirculan continuamente entre la sangre y la linfa,
pero al carecer de L-selectina y presentar otras molculas de adhesin, su
patrn de recirculacin es distinto: Al carecer de L-selectina, no se unen a las
vnulas de endotelio alto (HEV) de los ganglios. En cambio, tienden al tejido
terciario (no linfoide), incluyendo la lmina propia del intestino, superficies
epiteliales de pulmones, de piel, etc. En general tienden a emigrar al tejido en el
que las clulas T progenitoras fueron estimuladas durante la respuesta primaria.
Esto es un valor adaptativo, ya que es evidente que si un patgeno entr por
determinado sitio, es probable que una segunda entrada de ese agente tenga
lugar en el mismo tipo de tejido.
Clulas Tg-d
Estos linfocitos no fueron descubiertos hasta 1986, en que se reconocieron como una
pequea poblacin de clulas T perifricas que expresan CD3 pero no el "tpico"
receptor TCR -.

Constituyen del 5 al 10% de los T perifricos, y del 1 al 3% de los residentes en

ganglios y otros rganos linfoides. Sin embargo, son muy abundantes en la piel, y los
epitelios intestinal y pulmonar.

En el epitelio intestinal existe una poblacin diferente de linfocitos intraepiteliales (IEL).

Expresan g d, CD3 y CD8, pero carecen de Thy-1 (que como vimos, es el marcador de
linaje de las clulas T maduradas en el timo). Es probable que no procedan del timo,
sino de la mdula sea.

Estos linfocitos epiteliales no recirculan, sino que son residentes fijos en esos tejidos
epiteliales. Lo curioso es que en cada tipo de epitelio la poblacin residente de
T g d muestra un repertorio muy limitado de reordenaciones de segmentos variables;
adems proceden de "oleadas" distintas surgidas durante la vida fetal.

ANERGIA CLONAL

La unin de un linfocito T H con un complejo pptido-MHC II de una clula presentadora

de antgeno puede conducir a dos tipos de respuestas opuestas:

- activacin y expansin clonal

- anergia clonal
La anergia clonal es la incapacidad proliferativa de un linfocito tras un contacto con el
complejo pptido-MHC, y se debe a la carencia de la seal coestimulatoria
proporcionada por la interaccin entre CD28 del linfocito T H y B7 de la APC. No se trata
de una mera no-respuesta pasiva, sino que la anergia es un estado activo de no
proliferacin. Para ilustrar estas ideas, nos remitimos a unos experimentos:

1. Si ponemos en contacto linfocitos T H con APC fijadas por glutaraldehido (y que

por lo tanto no expresan molculas B7 en su membrana), el linfocito entra en
anergia. Esto se debe a que aunque ha contactado por su complejo TCR-CD3
con el pptido-MHC (seal #1), la APC no le ha suministrado la seal
coestimultoria (seal #2), con lo que el TH produce poca IL-2.

2. Para confirmar que la anergia es un estado activo, tomemos el linfocito hecho

anrgico en el experimento 1) y mezclmoslo con APC normales: pues bien, a
pesar de que ahora en principio estn disponibles las molculas implicadas en la
seal #2, el linfocito TH sigue sin capacidad de respuesta. Es decir, una vez que
 un linfocito ha sido hecho anrgico, ese estado se mantiene a pesar de que a
posteriori se le suministre la seal coestimuladora.

3. Para demostrar que la seal #2 (coestimulatoria) es distinta de la seal #1, se

puede realizar el siguiente experimento: tomamos linfocitos normales, y los
ponemos simultneamente en contacto con una APC fijada por glutaraldehido y
con una APC alognica (de distinto haplotipo MHC) normal (no fijada). El
resultado ahora es que el linfocito se activa de modo normal. Esto se debe a que
la APC fijada le suministra la seal #1 especfica (dependiente de interaccin
TCR-pptido-MHC) aunque no la seal #2; pero dicha seal coestimulatoria se la
suministra la APC alognica, que posee su B7.
El requerimiento simultneo de ambas seales implica que slo las APC profesionales
pueden iniciar las respuestas inmunes dependientes de clulas T. Ello es importante
para evitar la autoinmunidad. Como se recordar, no todos los clones de T
potencialmente autorreactivos son eliminados durante la maduracin tmica. Los clones
que "escapan" podran en principio reconocer auto-pptidos en cualquier clula propia
(seal #1), y luego interaccionar con una APC, que les suministrara la seal
coestimulatoria (seal #2), con lo que se activaran, iniciando una peligrosa reaccin de
autoinmunidad. Pero como hemos visto, la realidad es que para que un linfocito T virgen
sea activado, se le deben suministrar las dos seales al mismo tiempo y en la misma
clula, y este criterio slo lo cumplen esas clulas presentadoras profesionales. De esta
manera, se evita la autoinmunidad, y de hecho, si la clula T reconoce un autopptido
en ausencia de la seal de B7 entra en anergia, con lo ese clon ser autotolerante.

3.- PROCESAMIENTO Y PRESENTACIN DE ANTGENOS

Para que un linfocito T reconozca un antgeno a travs de su TCR hace falta que ese
antgeno sea digerido intracelularmente hasta convertirlo en pptidos, y que stos sean
expuestos en el surco de molculas MHC del propio haplotipo. En este tema veremos
pues estos dos aspectos interconectados a los que acabamos de aludir:
 1. Procesamiento del antgeno: es la degradacin del antgeno proteico hasta
pptidos.

2. Presentacin del antgeno procesado: es la asociacin de algunos de esos

pptidos con molculas codificadas por genes del complejo principal de
histocompatibilidad (MHC).

Las molculas MHC de clase I,
de molculas propias, y en el
ciertas bacterias, protozoos) se
En ambos casos los pptidos
endgeno.
en una situacin normal se unen a pptidos derivados
caso de infeccin por un parsito intracelular (virus,
unen a pptidos derivados de protenas del patgeno.
derivan de procesamiento citoslico del antgeno

Las molculas MHC de clase II se unen a pptidos derivados de antgenos

exgenos que previamente han sido introducidos en la clula presentadora por
endocitosis o fagocitosis, y que son sometidos a procesamiento endoctico.
Clulas que presentan antgeno

Como acabamos de ver, en realidad, clulas que presentan antgeno pueden ser tanto
clulas nucleadas enfermas que presenten pptidos de parsitos intracelulares (o de
protenas tumorales) a linfocitos TC como las clulas "profesionales" presentadoras de
antgenos exgenos a los linfocitos TH. Sin embargo, a efectos de nomenclatura, a las
primeras se les suele designar como clulas diana, para no confundirlas con las clulas
presentadoras "profesionales" (APC en sentido estricto):

1. Clulas diana (enfermas por parsitos intracelulares, o tumorales): presentan

pptidos junto con molculas MHC-I propias para que los reconozcan los
linfocitos TC (CD8+).

2. Clulas presentadoras de antgeno (APC): despliegan pptidos asociados con

MHC-II, para su reconocimiento por linfocitos TH (CD4+). Sus principales
caractersticas son:

a. exhiben molculas de clase II constitutivamente en sus membranas

b. internalizan antgenos exgenos va endocitosis y/o fagocitosis,

procesndolos por la ruta endoctica, y presentndolos junto con
molculas MHC-II de sus membranas

c. las principales APC profesionales son

i. monocitos/macrfagos

ii. clulas dendrticas

 iii. clulas de Langerhans de la piel

iv. clulas B maduras

v. clulas dendrticas tmicas

vi. clulas epiteliales tmicas

vii. (en humanos) clulas del endotelio vascular.

Otros tipos celulares en los que se puede inducir la expresin de molculas MHC de
clase II durante una respuesta inflamatoria, actuando entonces tambin como
presentadoras:

- fibroblastos de la piel

- clulas gliales del cerebro

- clulas b de los islotes del pncreas

PROCESAMIENTO DEL ANTGENO

El sistema inmune ha "previsto" dos rutas diferentes de procesamiento, segn que la

amenaza sea un antgeno endgeno (intracelular) o exgeno (extracelular). Como ya
sabemos, en cada caso existe una respuesta inmune diferente: actuacin de clulas T
citolticas (CTL) para el antgeno endgeno, y produccin de anticuerpos para el
antgeno exgeno.

Los antgenos exgenos se procesan por la ruta endoctica, tras lo cual los
pptidos resultantes se unirn a molculas MHC de clase II, lo cual dar la seal
a los linfocitos T coadyuvantes (TH).
Los antgenos endgenos se procesan por la ruta citoslica, tras lo cual sus
pptidos se unirn a molculas de MHC de clase I de la clula enferma, que as
se convierte en diana para la actuacin de linfocitos T matadores (T C, que en su
forma "ejecutora" se denominan linfocitos T citolticos, CTL).
Ruta endoctica de procesamiento
Las clulas presentadoras de antgeno pueden capturar antgenos proteicos por medio
de fagocitosis, por endocitosis (mediada por receptor -como es el caso de los linfocitos
B- o en versin de pinocitosis), o incluso por ambos sistemas (como en el caso de los
macrfagos). Una vez dentro de la correspondiente vescula membranosa, el antgeno
viaja a travs de los compartimentos de la ruta endoctica, y al cabo de 1 a 3 horas,
algunos de los pptidos resultantes aparecen en la membrana, en el surso de
molculas MHC de clase II. El resto es excretado por exocitosis.

Ejemplo: ruta endoctica de las clulas B:

- reconocimiento del Ag por receptor especfico: mIg

- endocitosis mediada por receptor

- vescula recubierta de clatrina

- endosoma temprano (pH 6-6.5)

- endosoma tardo o endolisosoma (pH 5-6)

- (por fusin de vesculas cidas procedentes del complejo de Golgi)

- lisosoma (pH 4.5-5)

En cada compartimento de esta ruta existe una variedad de hidrolasas cidas,

incluyendo abundancia de proteasas: el antgeno proteico se degrada, y se originan
algunos pptidos de entre 13 y 18 aminocidos, que se unirn al MHC-II

Entre las proteasas cidas requeridas dentro del endosoma para este procesamiento
est las catepsinas B, G y L.

Se puede lograr el bloqueo artificial de esta ruta endoctica tratando las clulas con
agentes como la cloroquina (que origina una subida del pH), o los inhibidores de
proteasas (como la leupeptina).

Ruta citoslica de procesamiento

Los antgenos endgenos (p. ej., protenas producidas durante el ciclo intracelular de
virus) se degradan en el citoplasma de la clula enferma mediante la ruta citoslica.
Parece que esta ruta es igual o muy parecida a la que existe en todas las clulas sanas
como mecanismo de renovacin (turnover) de protenas:

- protena a degradar

- sometida a la actuacin del complejo ubicuitinizante

- la protena queda "marcada" con varias ubicuitinas

- unidas a grupos e -amino de lisinas

 - la protena as marcada pasa por el interior hueco (10-20 de )del
proteosoma (una partcula cilndrica a base de sucesivos

- anillos de subunidades de varios tipos de protenas), que

- funciona como un complejo proteoltico

- salen varios pptidos derivados de la protena original

ENSAMBLAJE DE LAS MOLCULAS MHC Y PRESENTACIN DEL ANTGENO

La presentacin del antgeno consiste en la asociacin intracelular de los pptidos

derivados de su previo procesamiento con molculas MHC, con el ulterior
desplazamiento de los complejos MHC-pptido a la membrana celular.

Las molculas MHC de clase I se asocian con el pptido en el interior del retculo
endoplsmico rugoso.
Las molculas MHC de clase II parece que se asocian con el pptido a nivel de
algn compartimento endosmico.
La unin del pptido a la molcula MHC origina la estabilizacin de las cadenas
constituyentes de dicho MHC.

Ensamblaje y estabilizacin de las molculas MHC-I, y presentacin de pptidos

procedentes de procesamiento citoslico (Ruta para antgenos endgenos)
Antes de entrar en detalles digamos como resumen que el MHC de clase I se sintetiza
en polisomas adosados al retculo endoplsmico rugoso. Por otro lado, el pptido
procedente del procesamiento citoslico (en complejos de tipo proteosoma) entra
tambin al lumen del REr, y all logra la estabilizacin definitiva del MHC-I por
asociacin de la cadena a con la b 2-microglobulina. (De hecho, la ausencia del pptido
inhibe la asociacin de ambas cadenas). Los pptidos antignicos de 8 o 9 aminocidos
son los que logran mejor este efecto. Pero veamos esto en ms detalle, porque hay
ms cosas:

Este sistema est formado por dos protenas ancladas a la membrana del REr,
denominadas TAP-1 y TAP-2, y pertenece a la llamada familia de transportadores ABC
(poseen un dominio de unin a ATP). Cada protena est codificada por un gen situado
en la regin II del complejo MHC, cerca de LMP-2 y LMP-7. El transportador selecciona
para su paso al lumen del REr a aquellos pptidos de tamao y caractersticas
apropiadas para que luego sean anclados al surco del MHC-I

La cadena a del MHC-I recin sintetizada se asocia en el interior del REr con la
protena calnexina, que retiene a dicha cadena a en una conformacin parcialmente
plegada.
Luego, la b2-microglobulina recin introducida al lumen del REr, se une a la
cadena a con lo que la calnexina queda desplazada. (El complejo a:b2-m est an en
una configuracin parcialmente plegada).
Mientras tanto, los pptidos antignicos procedentes de procesamiento en el
proteosoma van a entrar al REr por un sistema especfico, llamado complejo de
transporte de pptidos antignicos.
El complejo a:b2-m se une ahora a la porcin intraluminal del TAP-1. En cuanto un
pptido de tamao y caracteres adecuados entra por el transportador TAP, se une al
surco de la molcula MHC-I, y es entonces cuando sta adquiere la configuracin
definitiva, estable y plegada.
El complejo formado por el MHC-I unido al pptido abandona el REr, viajando por el
sistema de vesculas que lo transportar a la superficie celular, de modo que finalmente
quedar expuesto al exterior: ya tenemos al pptido presentado por el MHC-I. Los
pptidos que no se hayan unido regresan al citosol por un sistema diferente de
transporte al del TAP.
Ensamblaje y estabilizacin de MHC-II, y presentacin de los pptidos
procedentes de procesamiento endosmico (Ruta para los antgenos exgenos)
Las dos cadenas (a y b) del MHC-II se sintetizan por separado en ribosomas
igualmente adosados al REr, y en el lumen se ensamblan. Ahora bien, hasta que no
reciba el pptido, el MHC-II por s solo es inestable: cmo se evita esta
desestabilizacin hasta que llegue a encontrarse ms adelante con el pptido? En un
primer momento, la molcula MHC se asocia con la calnexina, pero ms tarde sta es
desplazada por la llamada cadena invariante (Ii):

La cadena invariante Ii forma trmeros (Ii) 3, y cada una de las unidades de Ii se asocia
con una molcula de MHC, de modo que cubre el surco de cada MHC-II. Esta unin Ii:
MHC-II permite:

Que el surco de MHC quede bloqueado, con lo que en el caso de clulas

presentadoras de Ag (que por ser clulas somticas nucleadas tambin estn
procesando pptidos endgenos que deben ser asociados con MHC-I) se evita
que los pptidos derivados de procesamiento citoslico puedan unirse al MHC-II.
Que la molcula MHC-II pueda viajar desde el REr a un compartimento
endosmico de pH bajo donde se encontrar con pptidos derivados de
endocitosis/fagocitosis.
As pues, los complejos Ii:MHC-II viajan por vesculas hasta un tipo de compartimento
cido, donde permanecen unas 2-4 horas. Durante este tiempo la cadena Ii es rota
ordenadamente por proteasas (como la catepsina L) en varios sitios, de modo que la
MHC-II queda unida a un fragmento (llamado CLIP) que sigue cubriendo su surco. En
algn momento de este proceso la vescula "ascendente" que contiene CLIP:MHC-II se
fusiona con una vescula "descendente" que contiene pptidos procedentes de
endocitosis/fagocitosis de antgenos exgenos.
Posteriormente ocurre el desplazamiento de CLIP, debido a que ahora MHC-II se asocia
con la molcula HLA-DM (se trata de una forma especial de MHC-II dedicada a esta
tarea, y sin capacidad de unir pptidos).Esta misma HLA-DM cataliza ahora la entrada
de pptidos al surco de la MHC-II, con lo que ste queda estabilizado.

Finalmente el MHC-II unido al pptido termina de hacer su viaje "ascendente": la

vescula membranosa se fusiona con la membrana celular, quedando expuesto al
exterior el complejo MHC-II unido fuertemente al pptido (el pH neutro del exterior
estabiliza an ms la unin).

Se sigue debatiendo el lugar donde se rompe la Ii y en donde el MHC-II se encuentra

con los pptidos antignicos. Parece que debe ser un compartimento vesicular
procedente del trans-Golgi que se ha fusionado con endosomas. Hay evidencias de que
existe un compartimento cido especializado, llamado MIIC (acrnimo en ingls
de compartimento para MHC-II), donde se produce la rotura final de Ii y la interaccin
de MHC-II con los pptidos antignicos.

Como es lgico, las clulas presentadoras de antgeno (APC) expresan

simultneamente MHC-II (por ser APC profesionales) y MHC-I (por ser clulas
nucleadas somticas). Cmo evitan estas clulas que las MHC-II se unan al mismo
tipo de pptidos endgenos que deben unirse en el REr a las molculas de MHC-I? La
explicacin reside precisamente en el hecho de que el complejo MHC-II es "cubierto" a
nivel de su surco por la cadena invariante (Ii), lo que evita que pptidos endgenos
procedentes de la ruta citoslica ocupen dicho surco.

4.- ANTGENOS
Propiedades generales

Se definen como antgenos aquellas sustancias capaces de inducir una repuesta

inmune especfica. Los antgenos exhiben (o pueden mostrar) una serie de propiedades
inmunolgicas:

- Inmunogenicidad: capacidad de inducir una respuesta inmune especfica,

humoral y/o celular. En este sentido, antgeno sera sinnimo de inmungeno.
clulas B + Ag clulas plasmticas + clulas B de memoria
clulas T + Ag clulas T efectoras + clulas T de memoria.
- antigenicidad: capacidad de combinarse con anticuerpos y/o con receptores de
clulas T (TCR).
si una molcula es inmunognica, tambin es antignica;
sin embargo, la inversa no siempre es verdad: p. ej., ms adelante en este captulo
hablaremos de los haptenos, que por s mismos no desencadenan respuesta inmune,
pero que pueden ligarse a Ac preformados.
 - alergenicidad: capacidad de inducir algn tipo de respuesta alrgica. Los
alergenos son inmungenos que tienden a activar ciertos tipos de respuestas
humorales o celulares que dan sntomas de alergia.
- tolerogenicidad: capacidad de inducir una falta de respuesta especfica en la
rama celular o en la humoral.

Origen de los antgenos:

Exgenos
Son molculas extraas al organismo del animal vertebrado cuyo sistema inmunitario
los puede reconocer con facilidad. Representan la principal fuente de inmungenos
para cualquier individuo sano.
Endgenos
Son los que el individuo reconoce como propios. Generalmente los antgenos
endgenos son tolerados y no se inicia ninguna respuesta inmune contra sus eptopes.

Antgenos timo dependientes:

Se denominan antgenos timo dependientes (TD) a aquellos que requieren de la
colaboracin del linfocito T para inducir la RI. Sus caractersticas son:
Poseen eptopes no repetitivos.
Estimulan a los linfocitos T y B.
Inducen cooperacin T-B.
Generan respuesta inmunolgica primaria y secundaria. Por ende generan
memoria inmunolgica.
El 95% de los antgenos existentes en la naturaleza pertenecen a este grupo.

Antgenos timo independientes (TI):

Los antgenos timo independientes (TI) son aquellos capaces de inducir la produccin
de anticuerpos sin activar a los linfocitos T, mediante la estimulacin solamente de los
linfocitos B. Son generalmente:
Macromolculas, en su mayora polisacridos compuestos de mltiples
repeticiones de azcares.
Estimulan slo a los linfocitos B.
No generan memoria inmunolgica.
La mayora inducen slo respuesta primaria.
Los antgenos TI han sido subdivididos en:

TI-1: Aquellos capaces de inducir la proliferacin y la diferenciacin de un gran

nmero de clones B, sin importar su especificidad (Producen activacin
policlonal). EL lipopolisacrido (LPS) de las bacterias gram negativas, a altas
dosis, es el mejor ejemplo de este grupo.

TI-2: Estn representados, sobre todo por molculas presentes en las cpsulas
polisacridas de algunas bacterias. La respuesta de las clulas B inducidas por
los TI-2 son especficas y proveen una respuesta rpida contra las bacterias
extracelulares. Hay participacin activa de los macrfagos.
Factores que condicionan la inmunogenicidad

El sistema inmune reconoce molculas de los microorganismos, pero no todos los tipos
de molculas tienen la misma capacidad inmunognica:

las ms inmunognicas son las protenas

los hidratos de carbono poseen menor capacidad inmunognica
los lpidos y los cidos nucleicos slo son inmunognicos cuando van unidos a
protenas o a carbohidratos.
Por otro lado, hay que tener ya presente que en la rama humoral pueden actuar de
inmungenos todos los tipos moleculares que acabamos de citar, mientras que en la
rama celular slo lo son las protenas.

A continuacin trataremos los factores que condicionan la inmunogenicidad de los

antgenos, diferenciando los que dependen de la propia molcula antignica y los que
dependen del sistema biolgico (el hospedador donde ocurre la respuesta inmune).

1.- Factores de la molcula inmunognica

Carcter de no-propia
Ante todo, la molcula ha de ser reconocida como una molcula extraa, ajena al
individuo. Tenemos pues, que un primer rasgo condicionador de la inmunogenicidad es
el grado de falta de parecido entre el antgeno con respecto a molculas propias.

En general, molculas que han divergido ampliamente en los distintos linajes evolutivos
actan como buenos inmungenos en especies heterlogas.
En cambio, molculas evolutivamente conservadas (como el colgeno, el citocromo c)
no son buenas inmungenas.
Por otro lado, ciertas molculas propias pueden actuar como autoantgenos, debido a
que proceden de rganos inmunolgicamente privilegiados (secuestrados respecto del
sistema inmune) en las fases tempranas del desarrollo (p. ej., del esperma, tejido de la
crnea).
Tamao molecular
En general, se puede decir que, a mayor tamao, mayor inmunogenicidad. Sustancias
de unos 100.000 dalton (Da) suelen ser buenos inmungenos, mientras que las de
menos de 5.000-10.000 Da son malos inmungenos.

Heterogeneidad en la composicin qumica

A mayor heterogeneidad de composicin qumica, mejor inmunogenicidad.

Los copolmeros sintticos repetitivos de un solo aminocido, o los polisacridos a base

de un solo azcar son malos inmungenos.
La poli [glu-lys] requiere tener 30-40 kDa de p.m. para ser inmunognica;
pero el poli {[glu-lys]-tyr} slo requiere 10 kDa;
si al anterior copolmero lo volvemos ms complejo aadiendo unidades de phe, ya slo
se necesitan tamaos moleculares de 4 kDa para desencadenar respuesta inmune.
La complejidad qumica se expresa tambin en el hecho de que contribuye la estructura
secundaria, terciaria y cuaternaria de las protenas.

Degradabilidad
Slo las molculas degradables por el hospedador son buenas inmungenas. Como
veremos, ello se debe a que la inmunidad humoral y la celular dependen de la
activacin de los linfocitos TH, que a su vez depende de que ste reconozca antgeno
degradado, procesado y presentado por molculas MHC-II de las clulas presentadoras
de antgeno (APC).

Las molculas no degradables no son buenas inmungenas. Por ejemplo, los polmeros
de D-aminocidos no pueden ser degradados por los macrfagos (stos no tienen
enzimas hidrolticas adecuadas), por lo que no pueden se procesados y presentados a
los linfocitos TH.

En general, las molculas grandes e insolubles son mejores inmungenos, ya que son
mejor fagocitadas y procesadas.

2.- Factores del sistema biolgico

Genotipo del receptor
La influencia del genotipo del hospedador se puede comprobar en experimentos
usando razas puras de animales de laboratorio. Supongamos que disponemos de una
raza pura A que induce altos niveles de Ac en respuesta a un determinado Ag, y otra
raza B que produce bajos niveles de Ac ante ese mismo Ag. Los individuos de la
F1 procedentes del cruce de AxB exhiben niveles intermedios de Ac al ser enfrentados
con el citado Ag.

Por anlisis de retrocruzamiento se comprob que los genes que controlan la mayor o
menor respuesta se cartografiaban en una zona concreta de un cromosoma, dentro del
llamado complejo principal de histocompatibilidad (MHC).

Las protenas sintetizadas por dicho complejo MHC funcionan para presentar el Ag
procesado a las clulas T, y juegan un papel esencial en determinar el grado de
respuesta a cada antgeno.

Aparte de la dotacin de alelos del complejo MHC que cada individuo posee, existen
otros genes que tambin influyen en el grado de respuesta inmune, como los que
codifican el BCR, el TCR y los de citoquinas. Esto ser tratado en el captulo dedicado a
la regulacin de la respuesta inmune.
Dosis y ruta de administracin del antgeno

Para cada inmungeno experimental existe un protocolo de administracin ms

adecuado, que supone usar una determinada ruta y cierta dosis, lo que condiciona una
respuesta inmune ptima. Determinar estos parmetros reviste un especial inters a la
hora de la administracin de las vacunas.

Dosis:

- dosis muy bajas de Ag pueden no estimular a los linfocitos (falta de respuesta);

- dosis demasiado altas pueden provocar un estado activo de tolerancia
inmunolgica, por el que los linfocitos entran en una situacin de no respuesta.
- dosis adecuadas son capaces de estimulacin.
- Un protocolo de dosis repetidas espaciadas a lo largo de varias semanas es
mejor que una dosis nica, porque provoca una mayor proliferacin clonal de
linfocitos t y B especficos.
Rutas de administracin: determinan a qu organo linfoide ir a parar el antgeno.

- Por va oral se estimula sobre todo el MALT del tracto digestivo (pero al mismo
tiempo se puede inducir tolerancia sistmica: vase tema 15).
- por va parenteral:
intravenosa: el antgeno podr quedar retenido en el bazo
intradrmica
subcutnea: el antgeno terminar en algn ganglio regional
intramuscular
intraperitoneal
Adyuvantes ( coadyuvantes)
Los adyuvantes son sustancias que cuando se mezclan con un Ag y se inyectan con l,
mejoran la inmunogenicidad de ese antgeno.

Almina: sales insolubles de sulfato alumnico-potsico. Acta mediante varios

mecanismos:

2. precipita el antgeno. Al inyectarse va liberando el antgeno lentamente, con lo

que se suministra un estmulo persistente (el Ag dura varios das en el lugar
donde se inocul).

3. El Ag precipitado tiene mayor tamao, por lo que puede ser fagocitado ms

fcilmente, y por lo tanto es presentado ms efectivamente.

4. Induccin de granulomas.
Polirribonucletidos sintticos: estimulan la proliferacin inespecfica de linfocitos.

Lipopolisacrido bacteriano (LPS): igual efecto que el anterior.

HAPTENOS

Se define como hapteno aquel grupo qumico definido, de pequeo tamao, que por s
mismo es incapaz de desencadenar una respuesta inmune (es decir, no es
inmungeno), pero que unido covalentemente a una molcula portadora se comporta
como inmungeno (llegando a constituir el nico determinante inmunodominante del
conjugado).

Como haptenos se emple una serie de derivados del benceno, como el dinotrofenol
(DNP), en configuraciones distintas (orto, meta, para), as como distintos derivados a
base de distintos sustituyentes en determinadas posiciones conocidas.
Como molcula portadora emple la seroalbmina bovina (BSA).
Obtena as distintas versiones de conjugados BSA-DNP.
Inyectaba conjugados BSA-DNP en un animal de laboratorio, esperaba a que se
produjera la respuesta inmune, y tras una sangra, obtena suero enriquecido en
anticuerpos frente al hapteno (antisuero especfico).
Finalmente, pona en contacto el antisuero con el hapteno original, y en paralelo, con
otros haptenos consistentes en variantes del original (lugar del localizacin de algn
radical, naturaleza qumica del radical).
Las conclusiones que se pueden extraer de estos experimentos son:

Casi ms importante que la naturaleza qumica concreta del hapteno es la configuracin

global del mismo (obsrvese que el hapteno equivale a un epitopo inmunodominante) a
la hora de determinar si dicho hapteno puede reaccionar (y en qu cuanta) con el
antisuero (anticuerpos).
En los experimentos se puede comprobar igualmente la existencia de algunas
reacciones cruzadas, sobre todo cuando dos haptenos comparten una configuracin
parecida.
Igualmente se puede advertir de estos experimentos la enorme diversidad posible de
anticuerpos: cualquier estructura qumica definida, natural o artificial, puede dar origen,
si va unida a un portador, a anticuerpos especficos.

EPITOPOS

Los epitopos o determinantes antignicos son cada uno de los sitios discretos de una
macromolcula que son reconocidos individualmente por un anticuerpo especfico o por
un TCR especfico. Son las regiones inmunolgicamente activas de un inmungeno (las
que se unen de hecho a un receptor de linfocitos o a un Ac libre).

Por lo tanto, a partir de ahora habremos de acostumbrarnos a pensar en los antgenos

como estructuras complejas que suelen constar de varios tipos de epitopos, cada uno
de ellos capaz de unirse con un Ac o un TCR especfico diferente. En este sentido,
las macromolculas son antgenos multivalentes, con muchos tipos de determinantes
antignicos distintos.

Si hablamos de Ag proteicos, esta unin suele implicar varios niveles de la estructura

del antgeno, desde la primaria a la terciaria (y, en su caso) a la cuaternaria.
En el caso de los polisacridos, las ramificaciones debidas a distintos enlaces
glucosdicos suponen conformaciones peculiares que son reconocidas de modo
especfico.

Diferencias en el modo de reconocimiento por parte de clulas B y T

Epitopos de clulas B Epitopos de clulas T

unin con el Ag binaria: Ig - Ag ternaria: TCR - Ag- MHC

(reconocimiento
restringido por el
haplotipo)

se une a Ag soluble? S No

requiere MHC? No S

naturaleza qumica del Protena nicamente protenas

epitopo
Lpido

Polisacrido

Propiedades del parte externa, accesible parte interna,

epitopo
 hidrfilo desnaturalizada

movilidad (flexibilidad) anfiptico

secuencial o pptido lineal; unin a

conformacional MHC

Propiedades de los epitopos de clulas B

1. El tamao de un epitopo depende del tamao del sitio de unin que posea la
inmunoglobulina especfica respectiva. Cada sitio de unin a un epitopo en una
inmunoglobulina se denomina paratopo.

2. Los epitopos de clulas B de protenas nativas suelen consistir en varios

aminocidos hidrfilos de la superficie de la protena, y son los que estn ms
accesibles al Ac libre o al Ac de membrana (del BCR).

3. Los epitopos reconocidos por clulas B pueden ser secuenciales (es decir, una
serie de aminocios contiguos) o no secuenciales (tambin llamados
conformacionales).
Los epitopos secuenciales suelen depender de regiones en forma de bucle, situadas
entre cadenas a consecutivas.
Los epitopos conformacionales dependen de la configuracin nativa de la protena.

4. Si desnaturalizamos una protena, se perdern los epitopos conformacionales

pero permanecern los secuenciales.

5. Los epitopos de B tienden a situarse en regiones flexibles de la molcula,

capaces de "moverse" molecularmente. Parece que ello tiende a facilitar el
encaje con las regiones complementarias (paratopo) del Ac.
Propiedades de los epitopos reconocidos por clulas T

1. El tamao del epitopo de clulas T queda determinado por el tamao del surco
de unin al Ag de la molcula de MHC.
Las molculas de MHC-I unen pptidos de entre 8 y 11 aminocidos.
Las molculas de MHC-II unen pptidos de entre 11 y 17 aminocidos.

2. Los pptidos antignicos reconocidos por clulas T forman un complejo

trimolecular junto con el TCR del linfocito T y el MHC de la clula presentadora o
diana. El antgeno reconocido por clulas T tiene dos zonas de unin: una para
ligarse al TCR, denominada epitopo, y otra para engarzar al MHC, denominada
agretopo.
 3. Los pptidos antignicos implicados en el complejo trimolecular proceden del
procesamiento intracelular del inmungeno proteico original.
4. Los antgenos reconocidos por las clulas T presentan pptidos anfipticos.
Precisamente, quiz la funcin del procesamiento sea "desplegar" el Ag y
exponer estas regiones internas anfipticas, de modo que la porcin hidrfoba
suele actuar de agretopo, mientras que la porcin hidrfila acta de epitopo
propiamente dicho.

5. Debido a que los Ag reconocidos por clulas T lo son unidos a las molculas de
MHC del individuo, y debido a que a su vez existe una gran diversidad de alelos
de MHC en las poblaciones de una especie, los epitopos inmunodominantes en
cada individuo dependen en parte del juego de molculas MHC de ese individuo
(lo cual, depende de su dotacin gentica, obviamente). En una protena slo
una minora de zonas peptdicas tienen capacidad para unirse a las molculas
MHC de cada individuo, y de esas zonas, slo algunos estimulan de hecho a la
clula T.
SUPERANTGENOS

Los superantgenos son unos potentes activadores policlonales de clulas T que

expresan secuencias comunes en sus receptores: llegan a activar hasta la quinta parte
del total de estos linfocitos). Esta activacin es independiente de la especificidad hacia
una combinacin particular de Ag procesado-MHC.

Unen la porcin Vb del TCR y lo entrecruzan con la parte externa del MHC, fuera del
surco que normalmente sirve para exponer y presentar el antgeno. De esta forma,
entrecruzan de modo inespecfico las clulas T H con las APC, de modo que los linfocitos
T se activan sin haber reconocido Ag procesado y presentado en el surco de MHC-II de
las APC. El resultado es que un gran nmero de clones de clulas T segregan grandes
niveles de citoquinas, lo que puede llevar a shock y a muerte.

Ejemplos de superantgenos son ciertas toxinas de Staphylococcus aureus, como la

toxina del sndrome del choque txico (TSS-1), o la enterotoxina.

4.- CLULAS DEL SISTEMA INMUNE

El Sistema inmune consta de una serie de rganos, tejidos y clulas ampliamente

repartidos por todo el cuerpo. Funcionalmente, los rganos se clasifican
enprimarios y secundarios. Los primeros suministran el microambiente para la
maduracin de los linfocitos, mientras que los segundos se encargan de capturar el
microorganismo o antgeno, suministrando el entorno adecuado para que los linfocitos
interacten con l.
Los distintos rganos linfoides estn interconectados por vasos sanguneos y vasos
linfticos, de modo que se constituye un sistema unitario, entrelazado y bien
comunicado. Estos vasos transportan clulas del sistema inmune, de las cuales el tipo
central es el linfocito.

Los linfocitos constituyen el 25% de los leucocitos sanguneos, y el 99% de las clulas
linfticas. Existen unos 10 billones de linfocitos en el cuerpo humano, que equivalen a la
masa del cerebro.

Aunque en la respuesta inmune intervienen varios tipos de leucocitos, slo los linfocitos
presentan las siguientes caractersticas:

Especificidad
Variedad (diversidad)
Memoria inmunolgica
Reconocimiento de lo propio y lo ajeno
HEMATOPOYESIS

La hematopoyesis consiste en la formacin y desarrollo de clulas sanguneas a partir

de la clula madre pluripotencial (stem cell).

- Durante las primeras semanas embrionarias se encuentran clulas madres en

el saco vitelino, las cuales van diferencindose en clulas eritroides, provistas
de hemoglobina embrionaria.
- Desde el tercer mes hasta el sptimo de embarazo, las clulas madre migran,
primero al hgado fetal, y despus al bazo fetal, donde sigue la heamtopoyesis.
- Desde el sptimo mes, va disminuyendo la hematopoyesis en el hgado y bazo,
hasta que desaparece para la poca del nacimiento, y va adquiriendo
preeminencia el papel de la mdula sea.
Todas las clulas sanguneas proceden de la citada clula madre pluripotencial. En la
mdula sea slo hay una de tales clulas por cada 10.000 totales. Son clulas
capaces de autorregeneracin, de modo que durante la vida adulta se mantienen
homeostticamente. En circunstancias de alta demanda de clulas sanguneas
aumenta la capacidad proliferativa de la clula madre.

Tanto en el linaje linfoide como en el mieloide, los progenitores quedan

"comprometidos" o determinados a seguir una determinada ruta de diferenciacin; ello
se debe a que adquieren la capacidad de responder a determinados factores de
crecimiento. En la mdula sea adulta, las clulas de la lnea hematopoytica van
madurando y diferencindose en el interior de un estroma compuesto por clulas no
hematopoyticas (clulas grasas, endoteliales, fibroblastos, etc.). La maduracin se
debe al microambiente suministrado por la matriz celular del estroma junto con factores
difusibles o no difusibles. Entre los difusibles se encuentran diversos factores de
crecimiento.

Las clulas ya diferenciadas adquieren deformabilidad de membranas, lo cual les

permite pasar a travs de la pared sinusoidal, a los senos de la medula sea, desde
donde acceden a la circulacin general.

Factores hematopoyticos de crecimiento

Las clulas hematopoyticas requieren factores de crecimiento para:

supervivencia
multiplicacin
diferenciacin
maduracin
Hay varios tipos de factores:

1. Factores estimuladores de formacin de colonias (CSF), pertenecientes a la

familia de las glucoprotenas cidas. Ejemplos: multi-CSF (tambin llamado IL3,
es un factor multilinaje; GM-CSF (estimulador de la lnea granulocito-macrfago);
M-CSF (de la lnea que conduce al monocito-macrfago); G-CSF (de la lnea que
desemboca en los granulocitos).

2. Eritropoyetina (EPO), que se produce en el rin, y que estimula la lnea que, va

progenitor eritroide conduce a los eritrocitos.

3. Otros factores: principalmente las interleuquinas IL-4 a IL-9, segregadas por

clulas estromales, macrfagos activados, etc.
Regulacin de la hematopoyesis
La hematopoyesis se mantiene durante toda la vida del individuo, de modo que el
nmero de clulas nuevas equilibra al de clulas que se pierden o mueren.

Cada tipo celular tiene una vida media ms o menos caracterstica:

- los eritrocitos viven unos 120 das, al cabo de los cuales son fagocitados por los
macrfagos del bazo
- los neutrfilos duran unos pocos das
- Algunos linfocitos T duran ms de 30 aos.
El cuerpo humano produce unos 400000 millones de clulas de la lnea hematopoytica
cada da.

La hematopoyesis est regulada de forma muy fina, de modo que cada tipo celular tiene
un control diferente, pero adems, esta regulacin es lo suficientemente flexible para
permitir incrementos de 10 o 20 veces ante una infeccin o una hemorragia.
La regulacin de fase estacionaria (en ausencia de infeccin o de hemorragia) se
logra por la produccin controlada de citoquinas por parte de las clulas estromales de
la mdula sea.
Ante una infeccin o hemorragia se produce una hematopoyesis
inducible (incrementada), por la accin de citoquinas segregadas por macrfagos y
linfocitos TH: se incrementa la cantidad de clulas especficas de la mdula sea, que al
madurar tendern a migrar al foco de infeccin o lesin.
La apoptosis posee un claro sentido evolutivo y adaptativo:

evita daos inflamatorios de la necrosis;

el suicidio ("altruismo citolgico") de las clulas es beneficioso para el individuo. Esto es
especialmente cierto para los linfocitos, que tienen per se una gran capacidad
proliferativa, y que estn casi en el lmite de su "potencial cancergeno".
Marcadores de superficie de leucocitos

Los linfocitos y otros leucocitos, as como sus precursores hematopoyticos, presentan

patrones caractersticos de molculas de superficie, que pueden ser aprovechadas
como marcadores para distinguir y caracterizar distintas poblaciones celulares.

Podemos considerar varias clases de marcadores:

- de linaje (p. ej., el CD3 slo existe en el linaje que conduce a los linfocitos T);
- de maduracin (ej.: el CD1 slo aparece en las fases madurativas de clulas T
en el timo);
- De activacin (p. ej., el CD25 es el receptor de la citoquina IL-2, y slo se
expresa en aquellas clulas T estimuladas previamente por el antgeno).
A ttulo ilustrativo, veamos algunas familias de marcadores:

Superfamilia de las inmunoglobulinas donde se incluyen CD2, CD3, CD4, CD8.

Familia de las integrinas: cada miembro de esta familia consta de dos cadenas, a y b
Se distinguen distintas subfamilias, dependiendo del tipo de cadena .
Selectinas (que tienen especificidad de lectinas).
Proteoglucanos (como el CD44), que se unen a componentes de la matriz extracelular.

CLULAS LINFOIDES

Los linfocitos T y B son los responsables de la respuesta inmune especfica.

Se producen en los rganos linfoides primarios a razn de 1000 millones al da, y de all
migran a rganos linfoides secundarios y a espacios tisulares.
En el adulto existe un billn de linfocitos, equivalentes a un 2% del peso corporal.
Suponen del 20 al 40% de los leucocitos totales.
Existen tres poblaciones de linfocitos funcionalmente distintas, caracterizada cada una
por un juego de marcadores, pero son difciles de reconocer morfolgicamente entre s:
 1. clulas T

2. clulas B

3. clulas NK
Los linfocitos T y B vrgenes (no cebados) son pequeos (unas 6 m m de dimetro),
con poco citoplasma, que forma un estrecho anillo alrededor del ncleo. Poseen
cromosomas condensados, con abundante heterocromatina; albergan pocas
mitocondrias, y apenas nada de retculo endoplsmico ni de complejo de Golgi.

En s mismos, en ausencia del Ag especfico, tienen vida corta (de unos das a unas
pocas semanas), y fcilmente sufren muerte celular programada.
En cambio, si entran en contacto con el Ag a partir de sus receptores especficos, sales
de la fase G0 y entran en el ciclo celular (G 0 G1 - S G2 M). En la fase
G2 corresponden a linfoblastos: aumentan su tamao (15 m m), aumenta algo la
eucromatina, aparece un nucleolo patente y aumenta la proporcin del citoplasma,
donde se puede observar un A. de D. bien desarrollado. Estos linfoblastos proliferan y
finalmente se diferencian en dos subpoblaciones:

1. clulas efectoras, de vida corta, con REr bien desarrollado en capas

concntricas, y vesculas de Aparato de G.

2. clulas de memoria, que estn en G0, con vida larga (algunas duran toda la vida
del individuo).
Linfocitos B
En los mamferos, los linfocitos B se diferencian en la mdula sea, mientras que en las
aves lo hacen en la bursa o bolsa de Fabricio.
Constituyen del 5 al 15% de los linfocitos circulantes.
Reconocen al antgeno en forma soluble, por medio de sus inmunoglobulinas de
membrana (mIg), que forman parte del complejo receptor de las clulas B (BCR). En
cada linfocito hay unas 150.000 molculas de mIg (de las clases M y D), que han sido
sintetizadas por l. Todas estas molculas poseen la misma especificidad antignica.
Acompaando a cada mIg, unidas no covalentemente con sta, existen dos tipos de
cadenas acompaantes, llamadas Igae Igb , que son invariantes.
Otros marcadores de superficie:
- MHC II
- receptores para el complemento: CD35 (=CR1) y CD21 (=CR2)
- receptor para IgG exgena: CD32 (=FcgRII), que juega un papel en las seales
negativas para el linfocito B
En ausencia de estmulo antignico, estos linfocitos B maduros vrgenes mueren por
apoptosis al cabo de unos pocos das. Si, en cambio, se une por su BCR al Ag
complementario especfico (y con la ayuda de seales de macrfagos y clulas T), se
pone en marcha la seleccin y proliferacin clonal, que termina (al cabo de 4-5 das)
con la diferenciacin de dos subpoblaciones: una de clulas plasmticas secretoras de
Ac, y otra de clulas B de memoria (cebadas).

Las clulas plasmticas poseen las siguientes caractersticas:

- Carecen de Ig de membrana.
- Son mayores y con ms proporcin de citoplasma que las B de las que
proceden.
- Su RE est muy desarrollado. Esto explica la gran cantidad de Ac secretados
que producen; esos anticuerpos poseen la misma especificidad antignica que la
de las mIg de la clula B original.
- No circulan por la sangre ni por los vasos linfticos, sino que se localizan en los
rganos linfoides secundarios y los lugares de la respuesta inmunolgica.
- Viven unos pocos das; al ser clulas en fase de diferenciacin terminal, carecen
de capacidad mittica, y mueren por apoptosis.
Los linfocitos B cebados de memoria, en cambio, pueden vivir en reposo durante
largos perodos (ms de 20 o 30 aos). Cuando se exponen al Ag especfico, dan una
respuesta inmunitaria ms rpida, ms intensa, y con mayor afinidad. Su aspecto es
similar al de los linfocitos B vrgenes.

Linfocitos T
Durante la infancia, se diferencian en el timo, pero al llegar la adolescencia, el timo
regresiona, y entonces la diferenciacin ocurre sobre todo en la piel y mucosa intestinal.
Poseen un receptor de membrana (TCR) asociado no covalentemente al llamado
complejo CD3, lo que conjuntamente se denomina complejo receptor de las clulas T.
Aunque el TCR es diferente estructuralmente a las Ig, posee zonas homlogas. Una
diferencia importante del modo de reconocimiento antignico del TCR respecto del BCR
es que aqul slo interacciona con el Ag dispuesto en la superficie de clulas del propio
organismo (de hecho, el antgeno procede de procesamiento proteoltico, y le es
"enseado" al linfocito T asociado a molculas de MHC).
Existen dos tipos de TCR, que definen dos poblaciones diferentes de linfocitos T:
TCR2
TCR1
La mayora (85%) de las clulas T poseen el TCR2, y a su vez se pueden dividir en dos
tipos:
Las TCR2 CD4+ funcionan como clulas cooperadoras (T H): reconocen el Ag expuesto
por el MHC-II propio de clulas presentadoras de Ag (APC), y al hacerlo, se activan y
expanden clonalmente, secretando citoquinas que juegan un papel clave en la
activacin de otras clulas (B, T, etc.). A microscopio, la mayora muestran el llamado
corpsculo de Gall (un grupo de lisosomas primario junto con gotitas de lpidos).
Las TCR2 CD8+ generalmente funcionan como clulas T citotxicas o matadoras (Tc).
Un 65% de ellas poseen cuerpo de Gall. Reconocen el Ag expuesto en molculas MHC-
I de clulas propias infectadas con virus o cancerosas, lo cual, junto con las seales
adecuadas de citoquinas, provoca la activacin y proliferacin clonal, con diferenciacin
a linfocitos T citolticos (CTL), que matan extracelularmente a las clulas propias
enfermas.
Clulas agresoras naturales (NK)
*A diferencia de otros linfocitos, carecen de especificidad y de memoria, por lo que
forman parte del sistema de inmunidad natural o inespecfico.
*Representan el 15-20% de los linfocitos sanguneos.
*Sus marcadores distintivos son CD16 y CD57, pero carecen de marcadores de los
linfocitos del sistema especfico.
*Su maduracin es extratmica.
*La mayora (no todos) son linfocitos granulares grandes (LGL), con mayor proporcin
de citoplasma que los linfocitos T o B.
*Poseen mitocondrias y ribosomas libres, pero poco REr. Exhiben gran A. de G.
Poseen dos tipos de funciones:
*accin citotxica
*accin reguladora del sistema inmune a travs de las citoquinas que producen.
Como clulas citotxicas, su papel fisiolgico se est empezando a comprender slo
recientemente: existen buenos indicios de que eliminan por induccin de apoptosis a
clulas propias infectadas con virus o clulas tumorales. Ello lo realizan porque
reconocen clulas propias enfermas en base a que stas poseen menos molculas
MHC-I. Tambin pueden desarrollar citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos
(ADCC).

CLULAS MIELOIDES

Las clulas mieloides son:

Fagocitos: leucocitos polimorfonucleares neutrfilos (PMN) y monocitos, que a su vez

se diferencian a macrfagos.
Clulas dendrticas.
Eosinfilos
Basfilos
Mastocitos
Los fagocitos
Los granulocitos neutrfilos y los monocitos/macrfagos poseen un origen comn. Su
antecesor ontogentico es la clula pruripotencial mielo-monoctica (CFU-GM), que se
diferencia en dos lneas.

Polimorfonucleares neutrfilos
Constituyen ms del 90% de los granulocitos (polimorfonucleares)
Son de vida corta (2-3 das), y se producen en la mdula sea a razn de unos cien mil
millones al da.
Son circulantes, salvo cuando son reclutados a tejidos en inflamacin.
Su ncleo es multilobulado (de 2 a 5 lbulos).
Posee grnulos citoplsmicos de dos tipos: los azurfilos (primarios) y los especficos
(secundarios).
Tras salir de la mdula sea, circulan por la sangre durante 7-10 horas, y luego pasan a
tejidos, donde mueren a los 2-3 das.
Cuando hay infeccin, la mdula sea produce ms cantidad de neutrfilos (la
leucocitosis de neutrfilos es un indicio clnico de infeccin).
Son los primeros fagocitos en llegar a la zona de infeccin, atrados por quimiotaxis
debida a sustancias liberadas en el foco de la infeccin.
Al llegar al foco, actan como fagocitos: ingieren la partcula extraa, incluyndola en
un fagosoma, al que fusionan sus grnulos:
Grnulos azurfilos (primarios): son mayores y ms densos, con tpica morfologa de
lisosoma. Contienen mieloperoxidasa y agentes antimicrobianos no oxidantes
(defensinas, catepsina G y algo de lisozima).
Grnulos especficos (secundarios): son ms pequeos y menos densos a los
electrones; contienen la mayor parte de la lisozima de la clula, as como lactoferrina y
fosfatasa alcalina.
Ambos tipos de grnulos se fusionan con el fagosoma, para digerir y eliminar la
partcula extraa, con mecanismos dependientes de oxgeno ms potentes que los del
macrfago.

Estas clulas constituyen una buena barrera defensiva frente a bacterias piognicas.
Fagocitos mononucleares
El sistema fagoctico mononuclear (SFM) est constituido por los monocitos circulantes
y los macrfagos tisulares. Los promonocitos de la mdula sea, al madurar salen de
ella, diferencindose en monocitos circulantes, que al cabo de unas 8 horas emigran a
distintos tejidos, donde se convierten en macrfagos.

1) Monocitos
- Son clulas de unos 10-18 m m de dimetro, con ncleo en forma de herradura o
de pera.
- Su membrana, vista al microscopio electrnico, aparece con finas rugosidades.
- Su citoplasma posee grnulos azurfilos, que al microscopio electrnico son
densos y homogneos. Dichos grnulos son lisosomas que contienen peroxidasa
e hidrolasas cidas importantes para el mecanismo de muerte intracelular de
microorganismos.
- El aparato de Golgi est bien desarrollado, y se observan mitocondrias.
2) Macrfagos
Como ya dijimos, al cabo de unas 8 horas de su salida de la mdula, los monocitos
migran a tejidos y se diferencian a macrfagos. Los macrfagos pueden ser residentes
(fijos en tejidos) o libres.

Residentes: cumplen misiones concretas en cada uno de los tejidos, pudiendo recibir,
en su caso, denominaciones peculiares. Por ejemplo:
- clulas de Kupffer, en las paredes vasculares de los sinusoides hepticos
- clulas mesangiales de los glomrulos renales
- macrfagos alveolares de los pulmones
- macrfagos de las serosas (p. ej., de la cavidad peritoneal)
 - clulas de la microgla del cerebro
- osteoclastos de los huesos
- histiocitos del tejido conjuntivo
Libres: estn estratgicamente situados para atrapar material extrao en rganos
linfoides secundarios:
macrfagos de los sinusoides esplnicos (en el bazo)
macrfagos de los senos medulares (en los ganglios linfticos)
Los fagocitos mononucleares constituyen el mejor ejemplo de clulas que, siendo en
principio del S.I. natural, en el curso de la evolucin se han adaptado a jugar papeles
centrales en el S.I. adaptativo:

A) En la respuesta inmune natural: los fagocitos presentan dos tipos de actividades:

como tales fagocitos

como productores de citoquinas
1) Actividad fagoctica:

Los fagocitos engullen (fagocitan) partculas extraas (microorganismos y

macromolculas extraas), clulas propias lesionadas o muertas y restos celulares.

El fagocito se ve atrado por quimiotaxis, se adhiere por receptores al microorganismo o

partcula extraa, con lo que se activa la membrana del fagocito, emitiendo
pseudpodos (basados en el sistema contrctil de actina-miosina), que finalmente se
fusionan, cerrndose y crendose una vescula membranosa que engloba al antgeno,
denominada fagosoma.

La destruccin intracelular de la partcula extraa comienza con la entrada del

fagosoma en la ruta endoctica: el fagosoma se fusiona con los grnulos, para formar el
fagolisosoma.

El contenido vertido de los grnulos, junto con otras actividades del macrfago, supone
una batera de mecanismos microbicidas y microbiostticos, adems de enzimas
hidrolticas que digieren las macromolculas. El material de desecho se elimina por
exocitosis.

Este sera el mecanismo fagoctico bsico (muy similar al ya existente en protozoos

amebianos), pero dicho mecanismo primitivo se ve mejorado (unas 4.000 veces) por
medio de otros componentes del sistema inmune: se trata de un conjunto de molculas,
denominadas opsoninas, que recubren al microorganismo, y que sirven de vnculo de
unin entre la partcula invasora y el fagocito. Como ejemplo de opsoninas se cuentan
la IgG (para la que el fagocito posee el receptor Fcg R) y el componente C3b del
complemento (para el que el fagocito dispone del receptor CR1).

Las actividades antimicrobianas sern estudiadas en detalle en un captulo

posterior (vese 13.2). Aqu slo daremos una clasificacin de las mismas:

I. mecanismos dependientes de oxgeno:

A. intermediarios reactivos de oxgeno (ROI)

B. intermediarios reactivos de nitrgeno (RNI)

II. mecanismos independientes de oxgeno: protenas antimicrobianas preformadas:

A. pptidos catinicos como las defensinas

B. catepsina G (proteinasa neutra)

C. lisozima

D. lactoferrina (secuestra Fe y altera las protenas de FeS)

2) Produccin de citoquinas: Los macrfagos producen citoquinas que atraen a otras
clulas, sobre todo a PMN neutrfilos. Como veremos, dichas citoquinas son las
responsables de muchos de los efectos sistmicos de la inflamacin (p. ej., la fiebre).
Tambin producen factores para fibroblastos y clulas endoteliales, que promueven la
reparacin de los tejidos daados.

B) Papel de los fagocitos como clulas accesorias en las respuestas inmunes

especficas

1. Como clulas presentadoras de antgeno (APC): Como dijimos, no todo el Ag se

degrada totalmente en la ruta endoctica. Como veremos oportunamente, quedan
pptidos de unos 10 aminocidos de longitud, que se asocian dentro del
endosoma con molculas MHC de tipo II. Los complejos {MHC-II + pptido} de la
vescula emigran a la membrana citoplsmica, con lo que quedan expuestos en
la superficie del macrfago, listos para ser reconocidos por los linfocitos
TH especficos, para su activacin.

2. Los macrfagos son activados por los linfocitos THLos linfocitos TH activados tras
su contacto con las clulas presentadoras secretan a su vez citoquinas que
activan a los macrfagos, con lo que stos mejoran sus capacidades fagocticas
y destructivas. De esta forma, los macrfagos activados por citoquinas sirven
como clulas efectoras de la inmunidad celular.
 3. Los macrfagos activados son a menudo los efectores finales de las respuestas
humoralesConforme avanza la respuesta inmune, se produce IgG y se activa el
complemento, los cuales sirven como opsoninas que ayudan al macrfago a sus
funciones fagocticas y citotxicas (mejoras en un factor de 4.000). Por ello, el
macrfago es frecuentemente en encargado final de eliminar al microorganismo
en la rama humoral de la inmunidad.
Clulas dendrticas
Son clulas con morfologas caractersticas: del cuerpo celular salen unas
prolongaciones alargadas, lo que le da aspecto parecidos a los de las clulas
dendrticas nerviosas. Existen dos tipos de clulas dendrticas, con funciones y
propiedades diferentes, aunque ninguna presenta una actividad fagoctica importante.

Clulas dendrticas interdigitantes

Estn presentes en los intersticios de la mayor parte de los rganos (corazn, pulmn,
hgado, rin, tracto gastrointestinal).

El prototipo es la clula de Langerhans de la piel, muy rica en MHC-II. Cuando entran

en contacto con un Ag, migran como clulas "a vela" por los vasos linfticos aferentes
hasta llegar a la paracorteza de los ganglios linfticos regionales, donde se convierten
en clulas dendrticas interdigitantes. All presentan el Ag a los linfocitos TH, para que
se inicie la respuesta inmune. Parece ser que las clulas de Langerhans son tambin
las precursoras de las clulas dendrticas interdigitantes de los rganos citados
anteriormente, y de las de las reas ricas en clulas T del bazo y del timo.

Clulas dendrticas foliculares

No derivan de la mdula sea, y no parece que tengan que ver con las dendrticas
interdigitantes.
Estn presentes en los folculos secundarios de las reas ricas en clulas B de los
ganglios y del bazo, as como en los folculos linfoides asociados a mucosas.
No tienen molculas MHC-II en su superdicie, pero presentan gran cantidad de
receptores para el complemento (CR1 y CR2) y para las IgG (el Fcg R). Los
inmunocomplejos (complejos Ag-Ac) llegan a las reas de clulas B de estos rganos
linfoides secundarios, y all quedan retenidos un cierto tiempo: se unen a los receptores
para Fc de estas clulas, que son muy abundantes en sus "perlas" (engrosamientos
esfricos espaciados regularmente a lo largo de sus prolongaciones).

Eosinfilos
Son granulocitos (es decir, PMN) presentes en sangre y tejidos, y constituyen del 1 al
3% de los leucocitos del individuo sano.
Poseen ncleo bilobulado, citoplasma con abundantes grnulos de contenido bsico,
por lo que se tien regularmente con colorantes cidos como la eosina. Estos grnulos
estn rodeados de membrana, pero al microscopio electrnico muestran en su interior
unos cristaloides.
Son clulas mviles que pueden migrar desde la sangre a los tejidos, atradas por
factores quimiotcticos (como el ECF-A)
Aunque tienen algn papel fagoctico, ste es mucho menos importante que en los
neutrfilos. Su funcin principal es la defensa inespecfica frente a grandes parsitos,
como helmintos: se unen a las larvas esquistosmulas de helmintos previamente
recubiertas por IgE o IgG, y entonces se degranulan, vertiendo una toxina (protena
bsica) y enzimas que controlan la respuesta inflamatoria, hidrolizando factores
anafilcticos liberados por los mastocitos.
Basfilos y mastocitos
Constituyen menos del 1% de los leucocitos.
Su ncleo es bi- o multilobulado (basfilo) o redondeado (mastocito). Poseen
abundantea grnulos azul-violeta, densos a los electrones.
Carecen de funcin fagoctica.
Parece que los mastocitos derivan de la misma rama que los basfilos, pero mientras
estos ltimos son circulantes, los mastocitos residen en los tejidos.
Ambos poseen abundantes receptores Fce RI
Papel central en la hipersensibilidad inmediata (llamada de tipo I, que incluye las
alergias): el entrecruzamiento de alergeno con dos o ms molculas de IgE unidas a la
clula provoca la rpida y total desgranulacin, con lo que se liberan sustancias
farmacolgicamente activas, incluyendo la histamina, que es la responsable principal de
los sntomas alrgicos.
A pesar de este papel "negativo", su misin natural positiva estriba en proporcionar
proteccin frente a parsitos multicelulares.
Plaquetas
Son clulas anucleadas, que derivan de los megacariocitos de la mdula sea.
Su papel no inmune consiste en colaborar en la coagulacin de la sangre.
Su papel inmune se centra en los fenmenos de inflamacin: cuando existe dao a
las clulas endoteliales, las plaquetas se adhieren al tejido lesionado y se agregan,
liberando sustancias que incrementan la permeabilidad, y factores que activan el
complemento, con lo que logran atraer a leucocitos.

6.- COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC)

Todas las especies de mamferos tienen un grupo de genes estrechamente ligados y
muy polimrficos, que fue descubierto por su implicacin en el rechazo o aceptacin de
transplantes o injertos de tejidos u rganos; de ah deriva su nombre de Complejo
Principal de Histocompatibilidad (MHC, del ingls Major Histocompatibility Complex).

Las molculas codificadas por el MHC intervienen de un modo central en el desarrollo

de las respuestas inmunes especficas, tanto la humoral como la celular:

Las molculas del MHC juegan un papel esencial en el reconocimiento del

antgeno por parte de los linfocitos T (tanto los coadyuvantes, T H, como los
citotxicos, TC).
El juego particular de molculas MHC de cada individuo (determinado por el
 conjunto de alelos de los genes MHC que posee) influye sobre el repertorio de
epitopos que pueden reconocer sus linfocitos T C y TH. Por ello, la capacidad de
respuesta frente a los patgenos (es decir, la mayor o menor susceptibilidad a la
enfermedad infecciosa) y los fenmenos de autoinmunidad dependen
parcialmente de esa dotacin concreta de alelos del complejo MHC.
En los aos 30 de este siglo, Gorer & Snell estaban estudiando los antgenos de
superficie de clulas sanguneas, e identificaron varios grupos de genes responsables
de esos antgenos. Se percataron de que uno de esos grupos de genes, los cuales
estaban estrechamente ligados, determinaban el rechazo de trasplantes entre distintos
individuos no emparentados de la misma especie. Por esta razn, denominaron a estas
molculas como antgenos de histocompatibilidad, y al conjunto de genes ligados que
los codificaban complejo principal de histocompatibilidad, MHC. (Snell fue premiado con
el Nobel en 1980 por este descubrimiento).

Organizacin Gentica y herencia del complejo MHC:

*Localizacin y funcin de las regiones MHC

El MHC es un conjunto de genes alineados en una regin grande y continua del
genoma:

en el ratn, se localiza en el cromosoma 17, y recibe el nombre de regin H-2;

en la especie humana se sita en el cromosoma 6, y se conoce como regin
HLA.
Aunque la organizacin de los genes es algo diferente en ambas especies, en las dos
se pueden apreciar tres grandes zonas, que determinan tres tipos de molculas:

1. Genes de clase I (MHC-I): determinan glucoprotenas de membrana que

aparecen en casi todas las clulas nucleadas, que sirven para presentar
antgenos peptdicos de clulas propias alteradas a los linfocitos T citotxicos
(TC).

2. Genes de clase II (MHC-II): determinan glucoprotenas de membrana de clulas

presentadoras de antgeno (macrfagos, clulas dendrticas, linfocitos B), y que
sirven para presentar antgenos peptdicos a linfocitos T coadyuvantes
(colaboradores; TH).

3. Genes de clase III (MHC-III): no todos ellos tienen que ver (aparentemente) con
el sistema inmune, pero entre los que s tienen papeles inmunolgicos cabe citar
los genes de protenas del complemento, y el del factor de necrosis tumoral
(TNF).
Vase la tabla siguiente para un esquema de la organizacin a gran escala (en
humanos) del complejo MHC (o sea, HLA).
Complejo HLA

Clase MHC-II MHC-III MHC-I

MHC

Regin DP DQ DR C4, C2, BF, B C A

etc.

Productos DP DQ DR (ab) protenas del HLA- HLA- HLA-A

gnicos (ab) (ab) complemento, B C
TNFa , TNFb

Ubicacin hacia centrmero brazo corto hacia telmero -

cromosoma 6

El complejo MHC es bastante grande: ocupa unos 2- 3 cM, es decir, unos 4 millones de
pares de bases (un 0.8% del genoma). La regin HLA-I cubre unos 2.000 kb, mientras
que la HLA-II supone unos 900 kb.

7.- INMUNOGLOBULINAS Y OTRAS MOLCULAS DE CLULAS B

El punto clave del sistema inmune adaptativo es su capacidad de reconocimiento

especfico de cualquier tipo de molcula o partcula extraa. Para ello, el sistema
inmune cuenta con las inmunoglobulinas (Ig) y con los receptores de los linfocitos T
(TCR), los cuales exhiben tres importantes propiedades:

- diversidad
- heterogeneidad
- procedencia a partir de reordenaciones de genes.
Las inmunoglobulinas funcionan como

1. la parte especfica del complejo de las clulas B, a nivel de membrana, que

reconoce al antgeno;

2. molculas circulantes, es decir anticuerpos secretados por las clulas

plasmticas procedentes de activacin, proliferacin y diferenciacin de clulas
B. Estos anticuerpos se localizan en el suero, en los lquidos tisulares
(intersticiales) y recubriendo ciertos epitelios internos. Estas Ig circulantes son
los efectores de la rama humoral del sistema inmune especfico (de hecho inician
 la fase efectora, pero como veremos, la eliminacin definitiva del Ag no suelen
hacerla directamente los anticuerpos).
Los receptores de clulas T aparecen slo como molculas de membrana de los
linfocitos T. Reconocen al antgeno restringido por el MHC de la clula diana o de la
clula presentadora. Suministran la base de la inmunidad celular especfica (en el caso
de los linfocitos TC) y del mecanismo de los linfocitos T colaboradores (TH).

Estructura general de las cadenas de las inmunoglobulinas

Cadenas L
Cuando se comparan distintas protenas de Bence-Jones se observa que los 100 a 110
primeros aminocidos difieren entre unas y otras, mientras que los 100-110 ltimos son
prcticamente idnticos. Ello permite distinguir dos regiones claramente diferenciables
en las cadenas ligeras:

regin carboxi-terminal, constante (regin C)

regin amino-terminal, variable (regin V)
Adems, existen dos posibles versiones de cadenas L, segn dos variantes en la regin
C:

cadenas k (kappa)
cadenas l (lambda)
En una misma Ig existen dos cadenas k o dos cadenas l , pero nunca una de cada tipo.

Cadenas H
La cadena pesada posee unos 440 aminocidos (menos dos tipos, que poseen unos
550). Cada cadena pesada posee una regin amino-terminal de 100 a 110 aminocidos,
cuya composicin es variable (VH). El resto de la cadena H muestra en humanos cinco
patrones bsicos de secuencia, distinguibles entre s, que configuran cinco tipos de
cadenas pesadas segn la porcin constante (C H). La longitud de esta porcin
constante suele ser de 330 aminocidos, salvo en dos tipos, que poseen 440
aminocidos.

Cada uno de los tipos de cadena pesada recibe una denominacin a base de una letra
griega, y determinan lo que se denomina clases o isotipos de inmunoglobulinas:

cadena H longitud de la porcin C (en clase o isotipo de Ig

segn la aminocidos)
porcin C

g 330 IgG
m 440 IgM

a 330 IgA

d 330 IgD

e 440 IgE

En el caso de las IgG e IgA, se pueden distinguir, adems, pequeas diferencias de

secuencias dentro de cada clase, que dan origen a subclases, que en humanos son

IgG1, IgG2, IgG3, IgG4

IgA, IgA2.
En otras especies de mamferos tambin se han detectado subclases de IgG e IgA,
pero las subclases de las diferentes especies son distintas entre s. Esto nos sugiere
que las subclases han ido apareciendo tardamente durante la evolucin dentro de cada
lnea filogentica, por lo que no son comparables entre distintas especies.

Cada tipo (o en su caso, cada subclase) de cadena pesada H puede combinarse por
separado con cada una de las dos versiones (k o l ) de cadenas L.

Estructura en detalle de un dominio tpico de inmunoglobulina

Cada tipo de cadena (H y L) de Ig se puede considerar formado a partir de dominios
globulares elongados. Cada dominio consta de unos 110 aminocidos, y sus
dimensiones son de 2,4 x 4,2 nm. Cada dominio est mantenido por un puente disulfuro
que enlaza dos cistenas invariantes, que en la secuencia lineal estn separadas entre
s por unos 60 aminocidos.

Las cadenas L poseen un dominio variable (V L) y un dominio constante (CL).

Las cadenas H poseen un dominio variable (V H) y 3 o 4 (segn clase) dominios
constantes (CH1, CH2, CH3, y en su caso, CH4).
La estructura en detalle de los dominios pudo ser puesta de manifiesto empleando
la cristalografa y difraccin de rayos X: cada dominio presenta una estructura
compacta caracterstica, denominada pliegue de inmunoglobulina. Esta estructura
terciaria peculiar consiste en un "sandwich" de dos lminas b paralelas respecto del eje
longitudinal del dominio. Una de las lminas consta de 3 cadenas b antiparalelas, y la
otra de 4 cadenas b antiparalelas.. Las dos capas b estn estabilizadas entre s por un
puente disulfuro conservado (que une dos cys separadas en la secuencia por otros 60
aminocidos aproximadamente), y por interacciones hidrofbicas entre grupos qumicos
de las cadenas laterales de aminocidos.
Alguien ha comparado acertadamente esta estructura con un bollo de pan, partido
longitudinalmente en dos rebanadas, pegadas entre s por mantequilla (enlaces
hidrfobos) y atravesadas por un palillo de dientes (enlace disulfuro).

El pliegue tpico de la Ig condiciona a su vez interacciones no covalentes entre dominios

emparejados de dos cadenas diferentes:

entre dominios idnticos: CH2-CH2 y CH3-CH3.

entre dominios no idnticos: VH-VL y CH1-CL.
Estructura y funcin de los dominios variables
La variabilidad de secuencia de los dominios variables no est repartida uniformemente,
sino en varias regiones denominadas regiones hipervariables:

tres regiones en el dominio VL: L1, L2 y L3

tres regiones en el dominio VH: H1, H2 y H3.
En cada caso, la suma de estas tres regiones no representa ms que el 15-20% del
total del dominio. El restante 80-85% es mucho menos variable.

Las regiones hipervariables se denominan CDR (iniciales en ingls

de regiones determinantes de complementariedad, ya que conjuntamente forman el
sitio de unin al epitopo). Cada CDR consta de unos 10 aminocidos. La CDR3 suele
ser la ms variable de las tres.
Las regiones ms constantes se denominan regiones FR, es decir,
regiones de armazn o de entramado. Ellas son las que en este caso de los dominios V
constituyen la estructura caracterstica de dos lminas b unidas entre s.
Las regiones CDR de las cadenas L y H estn situadas espacialmente de modo que se
proyectan hacia afuera, y estn cercanas una a otra en la configuracin global. Esto
crea la estructura tridimensional adecuada para la unin con el antgeno.
Obsrvese que la cadena L presenta dos cadenas b adicionales (c y c), pero su
organizacin global es como acabamos de describir.

As pues, la regin de entramado (FR) suministra un "andamio" que soporta las 6

regiones CDR (tres de cada cadena). Este andamio rgido es el que constituye el
dominio globular carcterstico, mientras que el conjunto de las seis CDR de cada brazo
Fab suministra una enorme variedad de tipos de Ac, cada uno de ellos con una
especificidad antignica diferente. Dicha especificidad depende de la longitud de las
CDR y de la composicin de aminocidos de estas CDRs.

La cristalografa de rayos X de alta resolucin se ha aplicado hasta ahora a unos 20

complejos Fab-Ag, lo que ha permitido extraer varias generalizaciones sobre el sitio de
unin al Ag:
Regin bisagra
Las cadenas pesadas de tipo g , a y d presentan entre el primer y segundo dominios
constantes una secuencia de aminocidos sin homologa con otros dominios,
denominada regin bisagra o regin Fx. Se trata de una zona rica en prolina, que
confiere flexibilidad, y que hace que los dos brazos Fab puedan rotar
independientemente uno respecto del otro, formando ngulos variados respecto a Fc.

Vase el experimento que demuestra esto: se tiene una molcula lineal de unos 25 ,
con dos molculas de dinitrofenol (DNP), una en cada extremo. Si mezclamos esta
molcula con anticuerpos anti-DNP, al microscopio electrnico se pueden ver trmeros,
tetrmeros y pentmeros de anticuerpos unidos entre s por puentes de esa molcula.
Obviamente, el ngulo de los brazos Fab de cada molcula de Ac es diferente en cada
tipo de multmeros, lo que demuestra que el brazo Fab puede girar debido
precisamente a la regin bisagra.

De esta forma los brazos Fab se pueden mover y girar para alinear mejor las regiones
CDR con respecto a los epitopos a los que se van a unir. Igualmente esto permite que
la porcin Fc se pueda mover para mejorar sus diversas funciones efectoras.

En la regin bisagra existen abundantes prolinas, lo cual determina su estructura

desplegada, flexible y sensible al ataque por proteasas (recurdese la actuacin de la
papana y la pepsina). Igualmente existen algunas cistenas, lo cual permite la
formacin de puentes disulfuro entre las dos cadenas pesadas a este nivel.

VARIANTES ANTIGNICAS DE LAS INMUNOGLOBULINAS

Las inmunoglobulinas son glucoprotenas; por lo tanto, se pueden comportar como

antgenos al ser inyectados a receptores adecuados. El estudio de las Ig en su faceta
de antgenos revela la existencia de tres tipos de determinantes antignicos, cada uno
de ellos localizado en partes caractersticas de la molcula:

Isotipos y determinantes isotpicos

Se denominan isotipos al conjunto de variantes de inmunoglobulinas comunes a todos
los miembros sanos de una determinada especie.

Los isotipos dependen de las regiones constantes tanto de cadenas pesadas como de
cadenas ligeras. Los isotipos tambin reciben el nombre de clases, y en determinados
casos se pueden diferenciar subclases. Como ya vimos, en humanos se distinguen
cinco isotipos segn caractersticas de las porciones constantes de cadenas pesadas
(IgG, IgA, IgM, IgD e IgE). Cada isotipo puede encontrarse en dos versiones distintas,
segn que las cadenas ligeras sean de tipo k o l .

Cada isotipo (y en su caso, cada subclase) viene determinado por un gen

correspondiente de regin constante. Todos los individuos de una especie cuentan con
el mismo juego bsico de genes de regiones constantes.

Cmo se ponen de manifiesto experimentalmente los isotipos? Se inyecta un Ac de

una especie A en una especie B; esta ltima reconoce como "extrao" (antgeno) al Ac-
A, y produce anticuerpos anti-isotpicosfrente a los anticuerpos de la especie A.

Los anticuerpos anti-isotpicos se emplean, obviamente, para determinar la clase y

subclase de un Ac problema de una especie, as como para caracterizar las Ig de
membrana de las clulas B.

Alotipos y determinantes alotpicos

Los alotipos son el conjunto de variantes allicas presentes en las poblaciones de una
especie: hay individuos que para cada clase o subclase presentan una variante allica
distinta de otros individuos.

Se deben a pequeas diferencias (de uno a cuatro aminocidos) que afectan a las
regiones CH y CL.

Obviamente, los individuos pueden ser homozigticos o heterozigticos para cada

variante, siendo estos alelos de expresin codominante.

Ejemplo: si tenemos dos razas de ratn una homozigtica b 4b4, y otra homozigtica
b5b5, y las cruzamos, la F 1 ser heterozigota b4b5, y en ella se expresarn ambas
versiones alotpicas de Ig de la misma clase.

En humanos se han identificado 25 alotipos de cadenas g , que se denominan con la

letra G seguida del nmero de la subclase, de la letra m, y finalmente, entre parntesis,
una cifra alusiva al alotipo. Ejemplos: G1m(1), G2m(23), G3m(11), G4m(4 a).

Existen dos variantes de IgA2 llamadas A2m(1) y A2m(2).

Se han identificado tres variantes de cadenas k : k m(1), k m(2) y k m(3).

Cmo detectar los alotipos? Se inyecta anticuerpo de una clase o subclase de un

individuo (A) a otro individuo (B) con distinto alotipo de la misma especie: ste produce
anticuerpos anti-alotpicos frente a las variantes alotpicas del individuo A.
Algunas veces, la madre gestante puede producir Ac anti-alotpicos en respuesta a
determinantes alotpicos paternos heredados por el feto.

Idiotipos y determinantes idiotpicos

Se define como idiotipo el conjunto de variantes antignicas caractersticas de cada
anticuerpo de un mismo individuo, debidas a las secuencias de aminocidos de las
porciones VH y VL. A su vez, cada uno de los determinantes caractersticas de un
anticuerpo concreto se denomina idiotopo. El conjunto de los idiotopos es lo que define
a cada idiotipo. El idiotopo puede coincidir o no con un paratopo (con un sitio de unin a
un epitopo).

Obviamente, los Ac producidos por un determinado clon de linfocitos B y las clulas

plasmticas derivadas de ellos llevan el mismo idiotipo.

Normalmente, los distintos clones de linfocitos B producen idiotipos distintos entre s, no

compartidos entre ellos, a los que se llama idiotipos privados.

Pero tambin puede ocurrir que determinados determinantes idiotpicos sean comunes
a dos o ms clones, por lo que en este caso se habla de idiotipos pblicos o de
reaccin cruzada (a veces llamados idiotipos recurrentes). Ello se debe a que distintos
clones de linfocitos B de un mismo individuo (o de la misma raza pura) pueden usar la
misma regin gnica variable de la lnea germinal para construir sus porciones
variables.

Cmo detectar los idiotipos? En el caso de animales de laboratorio, se usan razas

singnicas (para minimizar diferencias iso- y alotpicas). Se inyectan anticuerpos
monoclonales o anticuerpos de mieloma en un animal singnico; pasado un tiempo, de
ste se recuperan anticuerpos anti-idiotpicos. Durante una respuesta inmune normal
se producen anticuerpos anti-autoidiotpicos.

ESTUDIO DE LOS ISOTIPOS HUMANOS DE INMUNOGLOBULINAS

Inmunoglobulina G (IgG)
Es el isotipo ms abundante en suero (8-16 mg/ml), constituyendo el 80% de las Ig
totales.
Existen cuatro subclases en humanos,que se diferencian estructuralmente entre s por
el tamao de la regin bisagra y el nmero de puentes disulfuro entre las cadenas
pesadas.
Estas distintas subclases se deben a que en la lnea germinal existen cuatro genes Cg ,
si bien stos comparten 90-95% de sus secuencias. Ello nos indica, adems, que han
divergido hace poco tiempo en la escala evolutiva a partir de un gen ancestral comn.
Las IgG poseen gran capacidad de desarrollar elevada afinidad de unin al antgeno.
Son las mayoritarias durante la respuesta secundaria.
Difunden ms fcilmente que los dems isotipos al espacio extravascular (hasta el 50%
de las IgG se encuentran en los fluidos tisulares), donde son las principales
responsables de neutralizar toxinas bacterianas (de hecho, son las nicas que
funcionan como antitoxinas).
Las IgG1 e IgG3 funcionan muy bien como opsoninas: se unen a receptores para Fc de
la superficie de clulas fagocticas (sobre todo macrfagos), ayudndolas a fagocitar y
destruir el microorganismo.
La IgG3 > IgG1 > IgG2 activan el complemento por la ruta clsica: el dominio Cg 2 de
dos molculas de IgG se une al componente C1q del complemento, para iniciar la
activacin de ste.
En humanos la IgG1, IgG3 e IgG4 cruzan fcilmente la placenta.

Inmunoglobulina A (IgA)

En humanos existen dos subclases: IgA1 e IgA2. En el suero predomina la subclase

IgA1, constituyendo del 10 al 15% de las Ig totales (1.4-4 mg/ml), y all aparece como
monmeros (sin embargo, en otros animales, la IgA suele ser dimrica.

Pero en las secreciones seromucosas es muy abundante la IgA2, que aparece como
dmero.

Para dar una idea de la abundancia de la IgA de las seromucosas, bastar decir que
cada da se secretan unos 40 mg/Kg de peso corporal, frente a los 30 mg/Kg de IgG.

Las secreciones donde aparece la IgA secretoria (sIgA) son:

saliva
lgrimas
fluido nasal
tracto bronquial
tracto genitourinario
tracto digestivo
leche materna y calostro
La estructura de la sIgA dimrica consta de dos monmeros de IgA2 unidos "cola con
cola" por medio de un pptido conocido como pieza de unin (J), y recubiertos por la
llamada pieza secretora.

Cada monmero presenta una cola adicional con 18 aminocidos. La cola de cada
monmero se une por un puente disulfuro a la pieza J. Esta pieza J es un polipptido de
15 kDa sintetizado en la misma clula plasmtica que est produciendo la IgA2. Dicha
clula plasmtica termina secretando el complejo de las dos unidades de IgA unidas
cola con cola por la pieza J.
El complejo {IgA-J-IgA} es entonces reconocido por el llamado receptor de poli-
Ig, situado en la membrana basal de las clulas epiteliales. Este receptor de poli Ig
pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas, y est constituido por 5 dominios
tpicos de Ig, y anclado a la membrana basal epitelial. Parece que reconoce a la pieza J
ya engarzada a los dos monmeros de IgA.

El receptor de poli-Ig se une entonces a cada monmero de IgA, probablemente

formando puentes disulfuro con los respectivos dominios Ca 2, con lo cual comienza un
fenmeno de endocitosis mediada por receptor: se forma una vescula membranosa
recubierta de clatrina, en cuyo interior se encuentra el complejo {IgA-J-IgA} unido a su
vez al receptor de poli-Ig. Esta vescula intracitoplsmica viaja por el citoplasma, desde
el extremo basal hasta el apical, y termina fusionndose con la membrana que da a la
luz del conducto.

Entonces el receptor de poli-Ig se rompe a nivel del tramo que hay entre el ltimo de
sus dominios Ig y la membrana, con lo que queda libre la forma madura de la IgA
secretada: un complejo de dos monmeros de IgA unidos por la pieza J, y todo ello
recubierto del componente secretor, que como se ve, no es ms que la porcin mayor
escindida del receptor de poli-Ig.

La pieza secretoria recubre buena parte de los dos monmeros de IgA, enmascarando
sus respectivas regiones bisagra. Ello hace que la sIgA est mejor protegida contra las
proteasas, lo que se manifiesta en que posea una alta vida media en el entorno del
conducto al que ha sido secretada. Adems, la IgA2 es intrnsecamente ms resistente
que otras inmunoglobulinas al ataque de las proteasas bacterianas.

Inmunoglobulina M (IgM)
Supone del 5 al 10% de las Ig sricas (1.5 mg/ml de media).
Se secreta como pentmeros, con las Fc hacia adentro y los brazos Fab hacia afuera.
Cada monmero lleva un dominio constante adicional (el Cm 2). Las unidades del
pentmero estn unidas entre s por puentes disulfuro entre dominios Cm3 adyacentes
y entre Cm 4 adyacentes, exceptuando dos de las 5 unidades, que usan unin
mediante una pieza J similar a la ya vista para la IgA.
Es la primera inmunoglobulina que sintetiza el neonato por s mismo, y tambin es la
primera en aparecer durante la respuesta primaria.
Al ser un pentmero, tiene una gran valencia terica (10), pero dicha valencia slo se
usa al mximo con pequeos haptenos. En el caso de haptenos o epitopos mayores
slo llega a usar 5 de esas valencias, debido a impedimentos estricos.
El tener gran valencia significa que posee una mayor capacidad que otras Ig para
unirse a antgenos particulados multidimensionales: (p. ej., partculas de virus,
eritrocitos de otro individuo), entrecruzndolos y provocando aglutinacin, por lo que las
IgM son tpicas aglutininas (son de 100 a 1.000 veces ms eficaces que las IgG en este
papel).
Al unirse a este tipo de Ag particulados con epitopos repetitivos cambia de
conformacin: pasa de su configuracin plana (forma de estrella) a una en forma de
grapa o de cangrejo. Ello parece que a su vez sirve para que se pueda activar
eficazmente el complemento por la ruta clsica.
De hecho, fijan y activan muy bien el complemento (debido a que para activar el
componente C1q se requieren dos molculas de inmunoglobulinas cercanas, cosa que
la pentamrica IgM logra "por definicin"). Por ello, la IgM es muy buena citoltica.
Estn confinados en el torrente circulatorio (no se extravasan a tejidos), por lo que son
muy buenos frente a bacteriemias.
Inmunoglobulina D (IgD)
Supone el 0.2% de las inmunoglobulinas sricas (20 m g/ml).
Presenta una regin bisagra bastante amplia, lo que puede ayudar a explicar el hecho
de que es muy susceptible a proteolisis, siendo muy baja su vida media en sangre
(unos tres das).
En su forma libre en plasma, su funcin es desconocida.
Aparece como Ig de membrana, junto con la mIgM, en los linfocitos B maduros
vrgenes, donde parece que su funcin es constituir un receptor antignico, tanto en
activacin como en supresin de los linfocitos B.
Inmunoglobulina E (IgE)
Es la menos abundante en suero (0.3 m g/ml)
Presenta un dominio adicional (el que pasa a ser el Ce 2).
Es la mediadora de las reacciones de hipersensibilidad inmediata (alergias), como la
fiebre del heno, asma extrnseco o el choque anafilctico. Para ello, las molculas de
IgE se unen a receptores especficos para Fc de IgE situados en las membranas de
mastocitos tisulares y de basfilos sanguneos. Cuando dos molculas de IgE unidas a
sus respectivos receptores en estas clulas se entrecruzan con el alergeno especfico,
se produce la desgranulacin, lo que libera extracelularmente mediadores
farmacolgicamente activos, como histamina y ciertas citoquinas. Tambin se provoca
la sntesis de novo de eicosanoides (prostaglandinas y leucotrienos). Todo ello colabora
en los sntomas de alergia.
Pero la IgE tambin juega un papel fisiolgico, beneficioso: confiere proteccin local
frente a ciertos patgenos grandes, como helmintos: sirve para reclutar clulas
plasmticas y efectoras a travs de una reaccin de inflamacin aguda. Si el parsito
ha logrado atravesar la barrera de las mucosas y la de la sIgA, puede ser reconocido
por molculas de IgE especficas previamente unidas a receptores de mastocitos. Ello
desencadena una reaccin de inflamacin aguda en la que las aminas vasoactivas
(histamina) y los factores quimiotcticos atraen a polimorfonucleares neutrfilos; a
continuacin entran en el tejido molculas de IgG, componentes del complemento,
granulocitos y eosinfilos. Estos ltimos reconocen al parsito recubierto por IgG, y
colaboran en su destruccin.
RECEPTORES CELULARES PARA Fc DE LAS Ig

En apartados anteriores hemos venido aludiendo a diversos receptores de la superficie

de distintas clulas que sirven para engarzar inmunoglobulinas a travs de las
porciones Fc de stas. Son molculas ancladas a membrana, y la mayora de ellos
poseen dominios de tipo inmunoglobulina.

Receptores para Fcg:

Fcg IR (=CD64)

Fcg RII (=CD32)

Fcg RIII (=CD16)

Fcg Rn
Receptores para Fce:
Fce RI
Fce RII

8.- LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL ESPECFICA

La rama humoral del sistema inmune especfico est diseada para eliminar a
patgenos extracelulares y evitar la diseminacin de los intracelulares aprovechando
que estos ltimos se transmiten de clula a clula a travs de los fluidos extracelulares.
Ello se consigue mediante la produccin de grandes cantidades de anticuerpos
especficos frente a cada agente forneo.

1. Los anticuerpos, por s mismos no suelen eliminar ms que a ciertos virus o

inactivar toxinas bacterianas.

2. En la mayor parte de los casos, la eliminacin efectiva del patgeno suele

deberse a la induccin de las funciones efectoras de los anticuerpos, que
dependen de la porcin constante de las cadenas pesadas:

a. activacin del complemento por la ruta clsica, que puede conducir a

 i. lisis del patgeno

ii. quimiotaxis de fagocitos

iii. opsonizacin de fagocitos

b. Opsonizacin de fagocitos por inmunocomplejos (Ag-Ac)

c. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC): el anticuerpo se

une a receptores para Fc en la superficie de clulas NK y macrfagos.
Por lo tanto, en la respuesta humoral podemos distinguir dos grandes fases: la de
induccin de la produccin de anticuerpos, y la fase efectora, en la que dichos
anticuerpos, directamente, o ms a menudo indirectamente, eliminan al patgeno. En
este tema nos vamos a centrar solamente en la primera, es decir, cmo se induce la
produccin de inmunoglobulinas circulantes ante un antgeno. Los autnticos
mecanismos efectores humorales los iremos tratando en captulos ulteriores.

Aqu vamos a tratar principalmente de las interacciones celulares y de las seales

qumicas implicadas en el desencadenamiento de la produccin de anticuerpos.
Podemos resumir el proceso en tres apartados interconectados:

1. el linfocito TH virgen reconoce a su pptido antignico (procesado) enclavado

en el surco de MHC-II, en la superficie de una clula presentadora de antgeno
(APC). Ello provoca la activacin y proliferacin clonal de los linfocitos T H.

2. Por otro lado (paralelamente), la clula B reconoce al antgeno nativo por medio
de su BCR (con mIg), lo que desencadena la endocitosis y procesamiento
endosmico de dicho antgeno. Algunos de los pptidos resultantes se "exportan"
y se muestran en el surco de molculas MHC-II del propio linfocito B.

3. El TH activado (resultante de la fase #1) interacciona ahora mediante su TCR con

el complejo {epitopo-MHC-II} del linfocito B. En este contacto entre ambas
clulas tiene lugar un intercambio de seales qumicas que conduce a la
activacin, proliferacin clonal y diferenciacin de las clulas B en dos subclones
hermanos: uno de clulas plasmticas secretoras de anticuerpos, y otro de
clulas B cebadas de memoria.

RESPUESTA PRIMARIA Y RESPUESTA SECUNDARIA

Fases de la respuesta:

1. fase lag (de retardo): es el tiempo que se tarda en la seleccin de un clon

especfico de clulas B y en la produccin de clulas plasmticas secretoras de
Ac y de clulas B de memoria
 2. aumento exponencial (hasta un pico mximo)

3. meseta

4. declive
En total la respuesta puede durar desde unos das a varias semanas, dependiendo de
la persistencia del antgeno.

En la respuesta primaria primero se produce IgM, y luego IgG, siendo en ella la

contribucin global de la IgM ms importante. En cambio, en la respuesta secundaria se
produce mucha mayor cantidad de IgG que de IgM.

Las clulas B de memoria quedan en reposo (G 0) durante muchos aos (incluso

persisten durante toda la vida).

La respuesta secundaria posee una serie de importantes diferencias cualitativas y

cuantitativas con respecto a la respuesta primaria:

Diferencias cuantitativas:
se inicia ms rpidamente (menor fase lag)
alcanza ms intensidad (100 o 1000 veces mayor)
dura ms tiempo, como se comprueba por la fase de meseta ms prolongada y su
declive ms lento.
Diferencias cualitativas:
ocurre cambio de clase, producindose preferentemente IgG, aunque tambin IgA e
IgE
Tiene lugar la maduracin de afinidad por hipermutacin somtica y seleccin
"darwiniana" de los linfocitos con receptores de mayor afinidad.
FASES DE LA INDUCCIN DE LA RESPUESTA HUMORAL

Visin general
Antes de entrar en detalles de cmo se activan y proliferan y diferencian los linfocitos B
hasta que producen y secretan anticuerpos, vamos a dar una idea general del proceso,
ampliando un poco el esquema ya visto en la Introduccin:

1. Un linfocito TH virgen o de memoria entra en contacto con una APC, que le

presenta un pptido antignico enclavado en su MHC-II; ello provoca la
activacin y proliferacin clonal del linfocito TH.

2. Por otro lado, la clula B (virgen o de memoria) reconoce al antgeno nativo, pero
interaccionando con otro epitopo diferente al que reconoci el T H. Acto seguido
internaliza este Ag y lo procesa, presentando algunos de los pptidos resultantes
en sus molculas MHC-II.
 3. El linfocito TH cebado del paso #1 reconoce por su TCR a la combinacin
especfica pptido-MHC-II en la superficie del linfocito B del paso #2, formndose
el llamado conjugado TH:B. En dicho conjugado, el linfocito coadyuvante
suministra dos tipos de seales qumicas al linfocito B:
el TH expresa en su membrana la molcula CD40L (=CD154)
secreta citoquinas.

4. Estas seales son transducidas ("reemitidas") al interior del linfocito B, lo que

provoca cambios en el patrn de expresin gnica. Las protenas producidas por
estos genes inducidos provocan la proliferacin clonal del linfocito, y finalmente
la diferenciacin hasta clulas plasmticas secretoras de anticuerpos y clulas B
de memoria. (La clula B que no reciba estas seales del TH quedar anrgica).
En este apretado resumen se pueden ya apreciar algunas de las caractersticas clave
del proceso:

La clula B puede funcionar como clula presentadora de antgeno (APC) para la T H.

El linfocito TH y el linfocito B, por medio de sus respectivos receptores especficos,
reconocen determinantes (epitopos) diferentes del mismo antgeno o complejo
antignico original. (Cada linfocito B reconoce una parte de una protena, o la porcin
lipdica o hidrocarbonatada de un conjugado con protena).
La inmunoglobulina de membrana (mIg) del linfocito B cumple dos papeles: como
parte del complejo BCR (junto con Iga /Igb ) transmite seales al interior celular, y
como receptor especfico implicado en la endocitosis, para llevar al Ag nativo a la
ruta endoctica para su degradacin y procesamiento.
Fase 1: activacin y proliferacin del linfocito T H
El antgeno nativo puede viajar por s solo a un rgano linfoide secundario, o bien
puede ser transportado (y eventualmente procesado) por una clula presentadora
profesional (APC):

clulas de Langerhans de la piel captan el antgeno, viajan por los vasos linfticos
como clulas "a vela", y al llegar al ganglio se convierten en clulas dendrticas
interdigitantes.
clulas dendrticas intersticiales de los tejidos
macrfagos/monocitos.
En el rgano linfoide secundario la APC presenta algn epitopo a un linfocito T H en
reposo, interaccionando ambas clulas de la forma estudiada en el tema anterior:

seal #1: unin del TCR al epitopo enclavado en MHC-II de la APC

seal #2 (coestimulatoria): unin del CD28 del TH a la B7 de la APC.
Adems, la APC secreta citoquinas como la IL-1 y la IL-6.
Todo ello provoca la activacin y proliferacin de T H, por el mecanismo autocrino
dependiente de la IL-2 que el propio linfocito secreta. De esta forma se producen
grandes cantidades de clulas TH, lo cual va a permitir que algunas de ellas tengan
posibilidades de interaccionar luego con clulas B que presenten el mismo epitopo
enclavado en el mismo tipo de MHC-II.

Fase 2: El linfocito B reconoce especficamente al antgeno nativo

NOTA: la clula B es una magnfica presentadora de antgeno, que a diferencia del
macrfago posee la capacidad de internalizar y procesar solamente el antgeno
especfico para el cual est preparada por su mIg. De hecho es capaz de procesar
antgeno a concentraciones de 100 a 10.000 veces menores de las requeridas por el
macrfago.

Como sabemos, la clula B en reposo posee molculas de mIgM y mIgD asociadas con
cadenas Iga e Igb , constituyendo el complejo receptor especfico BCR.

Aunque la clula B no es una clula fagoctica, puede internalizar antgenos tan

grandes como del tamao de ciertos virus. Ello se produce por endocitosis mediada por
receptor (siendo el receptor el BCR). El antgeno entra a la ruta endoctica, donde se
degrada hasta pptidos, algunos de los cuales pueden ser colocados en el surco de sus
molculas MHC-II. (Mientras tanto, la clula B est renovando continuamente sus
receptores BCR, lo que le permite seguir captando especficamente ms molculas o
partculas antignicas).

Pero al mismo tiempo, el hecho de que se est produciendo unin del antgeno con
BCR (con entrecruzamiento de dos complejos BCR por una misma molcula antignica)
supone el inicio de una ruta de transduccin intracelular de seal: las colas
citoplsmicas de las cadenas Iga /Igb inician una cascada de fosforilaciones y
desfosforilaciones, donde estn implicadas varias proten-tirosnquinas (PTK) como Lyn,
Fyn y Blk. Al cabo de unos 30 segundos se han fosforilado muchas protenas celulares
(por rutas en buena parte an desconocidas), que finalmente conducen a la activacin
de la fosfolipasa C (PLC). A partir de aqu se activan las rutas ya estudiadas del inositol-
trifosfato (IP3) y del diacilglicerol (DAG); la primera conduce a la
calcineurina/calmodulina, y la segunda a la activacin de la protenquinasa C (PKC).
Ambas colaboran en la activacin de una serie de genes tempranos que codifican
factores de transcripcin (como el AP1, c-Myc, etc). En la fase siguiente, los productos
de estos genes van a tener un papel destacado.

Fase 3: Formacin del conjugado TH:B e intercambio de seales

La clula TH cebada especfica reconoce ahora, por medio de su TCR, la configuracin
peculiar del pptido especfico enclavado en el MHC-II, en la superficie del linfocito B;
es decir, el linfocito B est actuando como clula presentadora para el T H.
Tras este contacto inicial se forma el conjugado T H:B en el que ambas clulas dejan
entre s un estrecho espacio intercelular. En esta fase se producen importantes cambios
en el linfocito TH:

reorganiza el aparato de Golgi y el centro organizador microtubular, de modo que

aparecen microtbulos del citoesqueleto orientados hacia el lado que mira a la clula
B. Ambas caractersticas tienen que ver con el hecho de que se van a secretar
citoquinas en esa direccin.
Las molculas de membrana de la clula T se concentran en la zona de contacto
intercelular:
TCR+CD3+CD4 van a participar en contactos con MHC-II+pptido de B

LFA-1 har contacto con ICAM-1 de B

CD28 se ligar con la B7 del linfocito B (pero esto no es imprescindible si el linfocito

TH est ya "armado").

Esta reorientacin implicar una mayor avidez en la unin entra ambas clulas,
permitiendo que este contacto dure ms tiempo, lo cual facilitar las seales que
necesita el linfocito B: CD40L y citoquinas, como veremos a continuacin.
Fase 4: Efecto de las seales del linfocito TH sobre la clula B
Los dos tipos de seales del linfocito T H (CD40L y citoquinas) van a provocar que el
linfocito B sufra una serie de notables cambios. Algunas de estas molculas qumicas
provocan que el linfocito B salga de reposo y entre a ciclo celular (seales de
competencia); otras molculas hacen que el linfocito B progrese a lo largo del ciclo
celular (seales de progresin) y/o que se diferencie.

Las molculas CD40L que el linfocito TH expresa en su superficie se unen a las de

CD40 del linfocito B (que ya estaban preformadas). Esto provoca una seal para que el
linfocito B sintetice y ensamble en membrana receptores para diversas citoquinas (lo
cual ocurre a las 12 horas del contacto inicial del Ag con la mIg). Entonces, el linfocito
B, que hasta este momento estaba en reposo (G 0), puede entrar por fin en el ciclo
celular (G1). Estamos pues, ante una seal decompetencia, que participa en
la activacin del linfocito B.

Las citoquinas secretadas direccionalmente por el linfocito T H se concentran en bolsas

distribuidas en la zona de estrecho contacto intercelular. Cada citoquina va a unirse a
su receptor correspondiente situado en la superficie de la clula B, provocando una
serie de respuestas en dicha clula:

La IL-4 (junto con la IL-1 secretada por macrfagos) actan como seales de
competencia (favorecen la transicin G0 G1).
 Posteriormente, la misma IL-4 sirve ya como seal de progresin (que favorece el
avance del ciclo celular: G1 S M), con lo que empieza laproliferacin
clonal. Otras citoquinas que colaboran en la proliferacin son la IL-2 y la IL-5 (esta
ltima en ratn, pero no en humanos).
La diferenciacin requiere IL-6, as como de nuevo IL-4, IL-5, IL-10 e IFN-g . En
esta diferenciacin se producen dos subclones: uno de clulas plasmticas
secretoras de anticuerpos, y otro de clulas B de memoria.
Esta respuesta de los linfocitos B frente a antgenos timo-dependientes se caracteriza
por:

tener memoria inmunolgica,

poseer maduracin de la afinidad conforme pasa el tiempo,
experimentar cambio de isotipo.
Respecto de este ltimo punto, se sabe que diferentes citoquinas o combinaciones de
citoquinas tienden a inducir preferencialmente ciertos cambios de isotipo. Veamos
algunos ejemplos en el ratn:

la IL-4 tiende a provocar cambio a IgG1, y luego a IgE;

el factor de crecimiento tumoral beta (TGF-b ) provoca cambio a IgG2b y a IgA;
El interfern gamma (IFN-g ) induce cambio a las subclases IgG2a e IgG3.
Parece ser que la base de esta induccin de cambios de clase estriba en que las
correspondientes citoquinas inducen de alguna forma un cambio en la estructura de la
cromatina de las regiones S (de switch, cambio de clase) situadas en el lado 5 de cada
gen CH concreto, promoviendo la recombinacin especfica que ya estudiamos en el
tema 7 (Gentica de los anticuerpos).

RESPUESTA HUMORAL IN VIVO

La respuesta humoral se desencadena en distintos rganos dependiendo de la va de

entrada del antgeno:

si el antgeno entra por la sangre, va a parar al bazo;

si entra por tejidos, es captado por algn ganglio linftico regional;
si se introduce por los epitelios internos, suele ir a parar a tejido linfoide asociado a
mucosas (MALT).
En este apartado vamos a describir cmo se sucede la respuesta humoral en una de
estas localizaciones: el ganglio. Recordemos que el ganglio est diseado para atrapar
y retener antgenos que llegan por alguno de los vasos linfticos aferentes. El antgeno
puede llegar solo, en forma soluble, o bien transportado por clulas "a vela" (que como
se recordar es la forma que adoptan las clulas de Langerhans de la piel al pasar a la
circulacin linftica), o por clulas dendrticas intersticiales de los tejidos, o por
macrfagos.
Por su lado, los linfocitos pueden acceder al ganglio por dos rutas distintas: por los
linfticos aferentes, o desde la sangre, por extravasacin pasando a travs de las
vnulas de endotelio alto (HEV) postcapilares.

Respuesta primaria:
Interacciones iniciales: tienen lugar en la paracorteza.
Las clulas dendrticas interdigitantes, con sus largos procesos de membrana,
interaccionan simultneamente cada una con unos 200 linfocitos T H, presentndoles
pptidos procesados en el surco del MHC-II, con lo que se provoca una gran
activacin y proliferacin clonal de esos linfocitos.
Por su parte, los linfocitos B en reposo internalizan antgeno especfico, y lo
procesan.
Las clulas TH activadas interaccionan con las clulas B, induciendo en stas las
primeras fases de la activacin.
Algunas de estas clulas B de la paracorteza siguen su activacin, proliferacin y
diferenciacin hasta clulas plasmticas secretoras de IgM e IgG, con lo que se
suministra una primera descarga de anticuerpos circulantes. Luego migran a la
mdula sea.
Pero otras clulas B se quedan a mitad de su activacin, y emigran a la corteza, a
los folculos primarios, donde van a seguir una ruta especial que da origen a los
centros germinales de los folculos secundarios.
Eventos en el folculo secundario:
El folculo secundario suministra un microambiente especial en el que las interacciones
entre clulas B y clulas dendrticas foliculares van a conducir a la generacin de
grandes cantidades de clulas B y clulas plasmticas con anticuerpos de alta afinidad
(por maduracin de afinidad tras hipermutacin somtica). Veamos los acontecimientos:

Cuando la clula B "a medio activar"(procedente de la paracorteza) entra en el

folculo primario comienza a dividirse activamente: estas clulas B en rpida
proliferacin se denominan centroblastos, y son ellas las que dan lugar al centro
germinal del folculo, que ahora se llama folculo secundario. Los centroblastos se
caracterizan por su rpida divisin (una vez cada 6 horas) y porque carecen de
inmunoglobulinas de membrana (mIg).
La zona basal oscura del centro germinal est llena de centroblastos, todos ellos
descendientes de un solo linfocito B (o unos pocos). Es decir, se estn produciendo
grandes cantidades de centroblastos todos descendientes de una clula B, por lo
tanto todos tienen la misma especificidad antignica que el linfocito B "fundador" que
originalmente internaliz el Ag que ha dado origen a la respuesta. Es en esta fase de
centroblastos donde ocurre lahipermutacin somtica de las porciones variables de
los genes reordenados de cadenas pesadas y ligeras. (Vase tema 7).
Al cabo de unos 4 das los centroblastos dan origen a los centrocitos, clulas ms
pequeas que no se dividen, y que vuelven a tener mIg en sus membranas Estos
centrocitos ocupan la zona basal clara del centro germinal. Debido a la previa
hipermutacin somtica, cada centrocito, aunque miembro del mismo clon, tendr
 una variante aleatoria distinta de la inmunoglobulina original. Lgicamente, dentro de
esta poblacin habr centrocitos con mIg dotada de mayor afinidad hacia el Ag
original y centrocitos con mIg de menor afinidad.
Es ahora cuando tiene lugar el proceso de seleccin darwiniana de esa poblacin
de centrocitos: aquellos que tengan mIg de mayor afinidad sern seleccionados para
sobrevivir en base a su capacidad de interaccionar con mayor afinidad con el
antgeno nativo dispuesto en la superficie de las clulas dendrticas foliculares:
Parece que las dendrticas foliculares retienen antgeno nativo (solo o formando parte
de inmunocomplejos) en las "perlas" (engrosamientos) de sus largos procesos de
membrana. Ello lo hacen a travs de sus molculas CD23 (repasar en el captulo 2 los
rasgos de estas notables clulas). Ello permite que varios centrocitos interaccionen
simultneamente con una misma clula dendrtica.

En principio ("por defecto", dira un informtico) los centrocitos estn programados para
morir por apoptosis al cabo de unos pocos das, a menos que sean rescatados por el
hecho de que su mIg interaccione con el antgeno retenido en la superficie de las
clulas dendrticas foliculares.

Los centrocitos con receptores (mIg) de baja afinidad tienen que competir en desventaja
con sus "hermanos" de mayor afinidad e incluso con anticuerpos libres de alta afinidad:
estos centrocitos con mIg de baja afinidad pueden encontrarse con el hecho de que los
determinantes del antgeno estn ya ocupados por receptores de centrocitos de alta
afinidad o por anticuerpos.

De hecho, conforme pasa el tiempo, la situacin es cada vez peor para estos
centrocitos: en una respuesta primaria, el nivel de Ac circulantes al principio es bajo,
pero conforme pasan los das sube esta concentracin, de modo que cada vez hay ms
anticuerpos que se pueden unir al antgeno desplegado en las membranas de las
clulas dendrticas. Esto significa que el "listn" para que un centrocito se una al
antgeno se pone cada vez "ms alto": slo lo lograrn los que en la "lotera" de la
hipermutacin somtica hayan resultado "agraciados" con mIg de mayor afinidad.

El resultado es que todo centrocito que al cabo de unos das no se haya unido por su
mIg al Ag en la superfice de la clula dendrtica folicular, al no recibir la seal
"rescatadora", muere por apoptosis, y sus restos son destruidos por los macrfagos de
cuerpos tingibles. Este es el destino de la inmensa mayora de los centrocitos (90%).

Cul es la seal que rescata a los afortunados de la apoptosis y cuya carencia

precipita a la mayora a la muerte pogramada?

Los centrocitos que tienen mIg de alta afinidad que logran unirse a la clula
dendrtica, reciben una seal que induce en ellos la expresin del gen bcl-2, y es
esto lo que les salva de la apoptosis. Parece que en este rescate tambin interviene
 la unin del CD23 de la clula dendrtica folicular con el CD21 del complejo
correceptor del centrocito).
Los centrocitos con mIg de baja afinidad, al no unirse con la clula dendrtica, siguen
su programacin a la muerte, ya que al no inducirse el gen bcl-2 no producen la
seal que interrumpa dicha programacin letal.
Tras la seleccin darwiniana, los centrocitos Bcl-2 + se diferencian en la zona apical
clara en dos suclones celulares: clulas B de memoria y plasmablastos.
Los plasmablastos abandonan el centro germinal y pasan a mdula, donde
terminan su diferenciacin hasta clulas plasmticas secretoras de anticuerpos.
Las clulas plasmticas carecen de inmunoglobulinas de membrana, y son clulas a
trmino, que mueren a las dos semanas. (El hecho de que tengan una vida limitada
es un factor que contribuye a que la respuesta inmune est autolimitada). Secretan
grandes cantidades de anticuerpos que tienen la misma especificidad que el
centrocito correspondiente del que proceden. Los anticuerpos salen por los linfticos
eferentes y entran luego en circulacin sangunea, de donde son distribuidos a todo
el organismo. Se cree igualmente que la diferenciacin a clulas plasmticas rquiere
la interaccin del CD23 de la clula dendrtica folicular con el correceptor de la clula
B (formado po CD19, CD21 y CD81).
Las clulas B de memoria son clulas en reposo (G0), pero no son iguales que las
B vrgenes: expresan ms isotipos en sus membranas (mIgM, mIgG, mIgA, mIgE),
que adems son de mayor afinidad que la mIg original; esto implica que ante una
segunda entrada del Ag se van a activar a menores dosis, y la respuesta secundaria
ser ms rpida. Algunas de ellas se quedan en el folculo, formando parte del manto
que rodea al centro germinal; otras abandonan el ganglio por el nico linftico
eferente, y recirculan. Poseen una gran esperanza de vida (incluso ms de 40 aos),
aunque se desconoce la base de esta notable longevidad. (Existen indicios de que la
diferenciacin a clulas de memoria tambin necesita nuevos contactos entre el
CD40 del linfocito B y el CD40L de la clula TH).
Respuesta secundaria
La respuesta secundaria tiene lugar in vivo de una forma parecida a lo que acabamos
de ver, pero existen algunas diferencias que pasamos a comentar:

Cuando entra el antgeno por 2 vez (o ulterior) parte de las molculas pueden unirse
a anticuerpos persistentes procedentes de la respuesta primaria, de modo que se
forman complejos Ag-Ac.
Cuando los inmunocomplejos entran a ganglio, se unen a las clulas dendrticas
foliculares. Estas clulas "empaquetan" parte de los complejos Ag-Ac en vesculas
membranosas denominadas iccosomas, que se van desprendiendo por gemacin a
partir de los engrosamientos ("perlas") de los largos procesos de membrana.
Las clulas B de memoria generadas durante la respuesta primaria que tengan mIg
de alta afinidad compiten eficazmente con los anticuerpos circulantes para unirse con
el Ag que forma parte de los inmunocomplejos de los iccosomas: se unen a estos
iccosomas, los engullen enteros, procesan el antgeno y se lo presentan (en surco de
MHC-II) a linfocitos TH especficos. Se forma el conjugado TH:B, con lo que la clula B
se activa y prolifera (como centroblastos) en el centro germinal, hasta que al 4 o 5
da se diferencia a clulas plasmticas secretoras de anticuerpos.
 Al igual que en la respuesta primaria, la proliferacin de centroblastos va
acompaada de hipermutacin somtica seguida de seleccin darwiniana sobre los
centrocitos resultantes en base a su capacidad de unin al antgeno atrapado en las
clulas dendrticas.
Como se puede ver, el centro germinal durante la respuesta secundaria difiere en dos
aspectos importantes del de la respuesta primaria:

1. La previa disponibilidad de anticuerpo circulante incrementa la eficacia de las

clulas dendrticas foliculares para atrapar antgeno, lo cual supone una
amplificacin de la seal a las clulas B.

2. El anticuerpo preexistente compite con los centrocitos para unirse con el

antgeno en la superficie de las clulas dendrticas. Ello asegura que en la
respuesta secundaria slo van a contribuir a la produccin de anticuerpos clulas
plasmticas procedentes de clulas B dotadas de receptores de mayor afinidad
que los de la respuesta primaria. Conforme avanza la respuesta, aumenta la
concentracin de anticuerpos al tiempo que disminuye la de antgeno, por lo que
se seleccionan centrocitos con afinidades cada vez ms altas, capaces de
funcionar con concentraciones de antgeno cada vez ms bajas.
RESPUESTA FRENTE A ANTGENOS TIMO-INDEPENDIENTES

Antgenos timo-independientes (TI o Tind) son aquellos que inducen respuesta humoral
en ausencia de contactos con linfocitos TH.

Suelen ser molculas polimricas con epitopos repetitivos.

La mayora son no proteicos (lipopolisacrido, polisacridos), y por lo tanto no
pueden ser procesados y expuestos en el surco de MHC.
Suelen ser resistentes a la degradacin. En los ganglios quedan retenidos en las
membranas de macrfagos de los senos subcapsulares.
12.5.1 Antgenos timo-independientes de tipo 1 (TI-1)
Provocan respuesta humoral en ratones scid carentes de timo. Esto significa que son
totalmente independientes de ninguna funcin de linfocitos T H. A altas
concentraciones se comportan como activadores policlonales de linfocitos B
(mitgenos de B), debido a que interaccionan con molculas de la clula B diferentes
de la mIg, eludiendo las dos seales tradicionales (contactos entre molculas de
membrana de T y B, y citoquinas de T H). Inducen la secrecin de IgM, pero sin
provocar maduracin de afinidad, ni memoria, ni cambio de clase.

A bajas concentraciones provocan una respuesta especfica rpida, anterior a la

respuesta timo-dependiente.

El ejemplo tpico de antgeno TI-1 es el lipopolisacrido (LPS) de bacterias Gram-

negativas.
12.5.2 Antgenos timo-independientes de tipo 2 (TI-2)
Son macromolculas altamente repetitivas (como las de la cpsula del neumococo,
flagelos bacterianos, etc.). Al ser multivalentes provocan un gran entrecruzamiento
de muchos receptores BCR del linfocito B, que junto con citoquinas de un T H cercano
(pero sin contactos directos) provocan la activacin monoclonal de un tipo de
linfocitos llamados clulas B CD5+.

Juegan un papel importante contra bacterias capsuladas (Haemophilus,

Streptococcus pneunomiae) que suelen ser difciles de ingerir por los fagocitos de
forma directa.

9.- INMUNIDAD CELULAR

Actualmente se tiende a considerar como "inmunidad mediada por clulas" cualquier
respuesta contra microorganismos o tumores en la que los anticuerpos jueguen un
papel subordinado o secundario. Pero a estas alturas ya sabemos que en Inmunologa
es difcil "poner puertas al campo":

En la respuesta inmune humoral especfica hay que activar clulas al principio de

dicha respuesta.
En muchas respuestas celulares los anticuerpos juegan papeles esenciales como
"puentes" entre clulas (lo veremos con la citotoxicidad celular dependiente de
anticuerpos, ADCC).
Adems, cualquier respuesta celular va acompaada en paralelo de produccin de
anticuerpos, que a su vez pueden modificar las respuestas celulares de varias
maneras: p. ej., la formacin de complejos Ag-Ac provoca la activacin del
complemento, en la que se liberan pptidos que funcionan como factores
quimiotcticos que inducen la acumulacin de mayor nmero de clulas inmunes y el
aumento de la respuesta inflamatoria.
Por otro lado, no hay que suponer que todas las respuestas celulares dependen de
linfocitos T: de hecho las primeras lneas defensivas contra microorganismos son
inespecficas, y descansan en la identificacin de componentes microbianos comunes
por parte de clulas del sistema de inmunidad natural (macrfagos, granulocitos
neutrfilos, etc.).

Una de las posibles clasificaciones de la inmunidad mediada por clulas sera la

siguiente:

1. Reacciones dependientes de fagocitos del sistema natural:

fagocitosis
produccin de citoquinas
 2. El papel central de las clulas T H en la determinacin del tipo de mecanismo
efector puesto en marcha.

3. La citototoxicidad directa que conduce a la lisis de la clula diana enferma es

realizada por varios tipos celulares:
dentro del sistema especfico: linfocitos T citotxicos (matadores), que se denominan
linfocitos T citolticos (CTL) en su fase efectora;
dentro del sistema natural: clulas agresoras naturales (NK) y macrfagos.
Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)
Clulas T CD4+ que median reacciones de hipersensibilidad de tipo retardado, que
en su estado efector se denominan TDTH.
INMUNIDAD MEDIATIZADA POR CLULAS FAGOCTICAS

El alumno encontrar provechoso repasar las caractersticas de las clulas mieloides

fagocticas, tratadas en el tema 2. Aqu profundizaremos en estas clulas, sobre todo en
lo que atae a los mecanismos de destruccin intracelular del patgeno una vez que lo
han engullido.

La actuacin de estas clulas la podemos dividir a efectos pedaggicos, en varias

fases:

1. Quimiotaxis

2. unin del microorganismo al fagocito

3. desencadenamiento de la captacin del microorganismo

4. fagocitosis y mecanismos matadores.

Quimiotaxis
La atraccin de los fagocitos del sistema de inmunidad natural hacia el foco de infeccin
se puede deber a varios factores:

por sustancias de origen directamente microbiano. Tal es el caso de cortos pptidos

derivados de los extremos amino-terminales de protenas bacterianas (p. ej., el
formil-Met-Leu-Phe es quimiotctico para los leucocitos, que llevan receptores
capaces de reconocerlo).
Ciertos componentes microbianos (como la endotoxina de bacterias Gram-negativas)
activan la ruta alternativa del complemento, que libera los pptidos C3a y C5a, que
son muy quimiotcticos sobre fagocitos.
Unin del microorganismo al fagocito
Esta fase es importante, ya que de su xito depende la ocurrencia de la internalizacin
ulterior y el desencadenamiento de los mecanismos matadores. La unin inespecfica
entre bacteria y fagocito se realiza por interaccin entre molculas de superficie del
microorganismo y receptores del leucocito:

molcula bacteriana receptor del fagocito

lectinas Oligosacridos de
superficie

oligosacridos de Lectinas
superficie

b -glucanos CR3 y LFA-1

lpido A (endotoxina) CR3 y LFA-1

Podemos hacer una tabla parecida, pero en la columna de la bacteria ahora vamos a
considerar molculas del hospedador que recubren al microorganismo (opsonizacin), y
que a su vez sirven para que sean reconocidas por receptores de leucocitos:

comp. opsonizantes del Receptor del fagocito

hospedador unidos a la
bacteria

C3b CR1 (*)

inmunoglobulinas FcR (*)

MBP C1qR

(*) Los receptores CR1 y FcR estn entrelazados entre s por medio del citoesqueleto,
lo que explica en parte su accin sinrgica

Los receptores inespecficos de tipo lectina disminuyen en el macrfago activado (en

presencia de IFN-g), mientras que aumentan los CR1 y FcR. Ello permite a las clulas
Th indicar a los macrfagos que entran al tejido que fabriquen ms molculas capaces
de citoadherencia.
Desencadenamiento de la captacin
La captacin del microorganismo se ve facilitada si est recubierto por el componente
C3b del complemento y/o por anticuerpos: esta opsonizacin permite potenciar
poderosamente el mecanismo amebiano del fagocito.

Fagocitosis y mecanismos matadores

En el captulo 2 ya nos referimos a la fagocitosis, por lo que no volveremos a insistir
aqu en ella, sino que nos centraremos en lo que ocurre cuando el microorganismo,
englobado en el fagosoma, recibe la descarga de los grnulos (lisosomas) del fagocito.
El contenido preformado de estos grnulos, junto con sustancias producidas de
novo, constituyen una batera de mecanismos encaminados a la muerte del patgeno.
Estos mecanismos se pueden clasificar en dos grandes tipos: dependientes e
independientes de oxgeno.

Mecanismos dependientes de oxgeno

Los podemos estudiar a su vez bajo dos categoras: los que se basan en intermediarios
reactivos de oxgeno, y los intermediarios reactivos de nitrgeno.

1. Intermediarios reactivos de oxgeno (ROI). La unin de partculas a los

receptores de la membrana del fagosoma del macrfago provoca el
denominadoestallido respiratorio (por activacin de la ruta de la hexosa
monofosfato), que produce mucho NADH.

a. Antes de que el lisosoma se fusione con el fagosoma, en ste tiene lugar

una reduccin de oxgeno molecular (O2) catalizada por la NADH-oxidasa
de la membrana del fagosoma; el anin superxido resultante ( O-2) es
txico por s mismo, pero a su vez da lugar a otros radicales txicos de
vida corta, como el perxido de hidrgeno (H 2O2), el radical hidroxilo (OH)
y el oxgeno singlete (O12). El macrfago se protege de los ROI que
puedan salir del fagosoma por medio de una cadena de reacciones redox
en que participa glutation.

b. Una vez que el lisosoma se fusiona con el fagosoma, aqul libera la

mieloperoxidasa, que acta sobre los perxidos en presencia de haluros
(I- y Cl-), para producir compuestos halogenados (hipohaluros) muy txicos
y de vida larga: cido hipocloroso (ClOH), e hipoiodoso (IOH).

2. Intermediarios reactivos de nitrgeno (NRI)

a. La enzima NOS (xido ntrico-sintetasa) combina el oxgeno molecular

con el nitrgeno guanidino de la L-arginina, para generar xido ntrico
(NO), que es txico para bacterias y clulas tumorales.
Los macrfagos de ratn (pero no los humanos) necesitan para activar
esta ruta a un nivel ptimo dos seales: interfern gamma (IFN-g ) para
 activar la enzima NOS, y factor de necrosis tumoral (TNF) (ver el apartado
13.2.5).

Mecanismos independientes de oxgeno

Estos mecanismos dependen de protenas antimicrobianas preformadas y acumuladas
en los grnulos:

1. Protenas catinicas, con actividades de tipo antibitico:

a. defensinas (en macrfagos de conejo y en PMN neutrfilos humanos).

Son pptidos catinicos , de unos 30 aminocidos, ricos en cys y arg.
Forman canales permeables a los iones en las bicapas lipdicas de los
microrganismos. Actan antes de que tenga lugar la acidificacin del
fagolisosoma.

b. Catepsina G

c. Azurozidina

2. Lisozima, que acta rompiendo el peptidoglucano de bacterias (sobre todo de

Gram-negativas).

3. Lactoferrina (producida por neutrfilos): secuestra hierro, indispensable para las

bacterias.
Activacin de los macrfagos
Los macrfagos en reposo pueden matar, desde luego, pero sus capacidades
microbicidas pueden mejorar por medio de su activacin. Esta activacin puede
provocarse por:

1. productos microbianos que causan

a. activacin directa de monocitos y macrfagos

b. activacin indirecta: los macrfagos sin activar y las clulas NK liberan

citoquinas que a su vez activan a los macrfagos.

2. Ulterior activacin por citoquinas producidas por linfocitos T H, sobre todo por IFN-
g . Provocan atraccin quimiotctica de fagocitos y/o activacin de los
mecanismos dependientes e independientes de oxgeno.
En aos recientes se est viendo que la activacin del macrfago es algo ms complejo
de lo que se crea. La idea clave que ha surgido es que el macrfago despliega unas u
otras de sus funciones efectoras dependiendo de la combinacin particular de estmulos
qumicos que reciba, a saber, citoquinas y molculas inflamatorias.
La activacin de los macrfagos de ratn se puede lograr mediante el IFN-g secretado
por el TH, o por la endotoxina (lpido A) de las bacterias gram-negativas. Pero a su vez,
los macrfagos activados secretan TNF-a , que al actuar sobre macrfagos ya
activados provocan una mayor potenciacin de sus capacidades al activarse la ruta
dependiente del xido ntrico.

En humanos, el macrfago, en presencia de IFN-gamma, activa la 1-alfa hidroxilasa,

que convierte el 15-hidroxicolecalciferol circulante en 1,25-dihidroxicolecalciferol
(calcitriol o vitamina D3). A su vez, este calcitriol activa ms al macrfago al tiempo que
inhibe los linfocitos Th1. Esta respuesta en humanos puede ser parte de la razn de
que cuando falla la eliminacin del parsito haya un cambio desde T H1 a TH2, con lo que
se hace crnica la respuesta celular. La produccin de calcitriol en el caso de
tuberculosis o sarcoidiosis puede llegar a circulacin perifrica, originando una afeccin
de hipercalcemia.

Llegados a este punto, quiz sea bueno llamar la atencin sobre las diferentes fases de
la respuesta inmune en las que participan los macrfagos:

1. En la defensa inicial frente al patgeno: el macrfago sin activar tiene su

capacidad fagoctica basal. Al mismo tiempo secreta citoquinas que ayudan a
otras clulas (p. ej., recordar la IL-1 que participa en la activacin de linfocitos B).

2. En la presentacin del antgeno: acta como clula presentadora para linfocitos

TH, que a su vez se activan secretando citoquinas.

3. En la fase efectora el macrfago se activa por citoquinas (como el IFN-

g secretado por linfocitos TH), lo cual va a potenciar sus actividades
antimicrobianas, antitumorales y de secrecin de citoquinas.
Las citoquinas secretadas por macrfagos en respuesta a componentes microbianos
cumplen importantes papeles: la IL-12 y el TNF-a , en sinergia con otros mediadores,
mejoran la actividad antimicrobiana inespecfica:

el TNF-a mejora la capacidad microbicida de PMN neutrfilos y de los propios

macrfagos;
el TNF-a junto con la IL-12 provocan que las clulas NK liberen IFN-g, el cual
aumenta la actividad de los macrfagos;
el TNF-a induce cambios en las superficies de clulas endoteliales y de fagocitos,
que pueden interaccionar de modo que los fagocitos se extravasan para acceder al
lugar de la inflamacin, donde se localiza el foco de infeccin.
PAPEL DE LAS CLULAS T COADYUVANTES (TH)

Las clulas TH desempean papeles esenciales en la inmunidad celular:

 1. determinan la especificidad de la respuesta inmune (qu antgenos y qu
epitopos son reconocidos);

2. intervienen en la seleccin de los mecanismos efectores destinados a eliminar al

patgeno;

3. ayudan a la proliferacin de las clulas efectoras adecuadas;

4. mejoran las funciones de fagocitos y otras clulas efectoras.

El primero de estos papeles citados ya ha sido abordado en otro captulo: la interaccin
del conjunto de receptores TCR-CD3-CD4 con los epitopos en el MHC-II de clulas
presentadoras condiciona la especificidad de la respuesta.

Pero el sistema inmune ha de efectuar una segunda decisin esencial: qu

mecanismos efectores se ponen en marcha, que sean los adecuados para la naturaleza
de cada infeccin en particular. Dentro de la inmunidad mediada por clulas, existen
varios mecanismos:

1. citotoxicidad directa especfica, por medio de linfocitos T citotxicos CD8 + (CTL);

2. degranulacin de eosinfilos y mastocitos una vez que han contactado con la

clula a eliminar a travs de anticuerpos, que sirven de "puentes" moleculares
(ADCC);

3. activacin de macrfagos y reaccin de hipersensibilidad de tipo retardado.

Entonces, cmo se determina el tipo de accin para cada tipo de situacin? La
respuesta estriba en buena parte en el patrn local de citoquinas producidas al inicio de
la respuesta inmune, desencadenado ante cada tipo de patgeno, as como en la
concentracin local de metabolitos esteroideos y de vitamina D 3 en el tejido linfoide:
estos factores determinan que predomine uno de dos subtipos de clulas T H, lo que
finalmente condicionar el desencadenamiento de uno u otro de los mecanismos
efectores.

As pues, los linfocitos TH presentan dos subpoblaciones, denominadas T H1 y TH2.

Dichas subpoblaciones se desarrollan a travs de una ruta que se bifurca:

THvrgenes estimulaci estimulacin memoria

n
crnica largo plazo
inicial
THP TH0 TH1 THM

TH2

Cada uno de estos tipos de linfocitos TH secreta un patrn caracterstico de citoquinas:

THP TH0 TH1 TH2 THM

... IFN-g IFN-g ... ...

IL-2 IL-2 IL-2 ... IL-2

... IL-4 IL-4 ...

... IL-5 ... IL-5 .

.. IL-6 .

. IL-10 . IL-10

. .. IL-3 IL-3

... ... TNF-a TNF-a

... ... GM- GM-

CSF CSF

(En la tabla se han resaltado en cursiva sobre color amarillo las citoquinas
caractersticas de TH1 y TH2, que no son comunes a ambas subpoblaciones).

Veamos pues, en qu se diferencian funcionalmente los lincitos de ambas

subpoblaciones:

Las clulas TH1 tienden a activar los macrfagos, y responden bien a

Las clulas TH2 tienden a incrementar la produccin de mastocitos y eosinfilos, y
mejoran la produccin de ciertos isotipos de inmunoglobulinas, incluyendo la IgE. Las
clulas TH2 responden bien a antgenos presentados por linfocitos B.
Una vez establecidos, cada uno de estos patrones de respuesta es capaz de inhibir o
suprimir al otro, debido a la accin de ciertas citoquinas de cada tipo de clula T H:

Esta diferenciacin de TH1 y TH2 se descubri en el ratn, pero existen cada vez ms
pruebas de que igualmente existe en la especie humana. A los T H1 se les suele llamar
linfocitos T "inflamatorios", y a los TH2, "coadyuvantes".

Un ejemplo clnico de este papel particular de los dos tipos de clulas T H lo tenemos en
las dos clases extremas de lepra:

en la lepra tuberculoide se inducen sobre todo linfocitos T H1, por lo que hay una
buena activacin de macrfagos, lo cual redunda en que se detectan pocas bacterias
intracelulares.
En cambio, en la lepra lepromatosa se induce la subpoblacin T H2, que colabora
eficazmente en la respuesta especfica humoral; pero los anticuerpos evidentemente
no pueden acceder al interior celular, por lo que existen abundantes bacilos en el
interior de los macrfagos; stos, al no poder ser activados eficazmente, no pueden
eliminar al parsito. Hay gran destruccin de tejidos.
CITOTOXICIDAD MEDIADA POR CLULAS

En este apartado vamos a tratar aquellos mecanismos efectores que dependen de la

accin de clulas del sistema inmune capaces de matar/lisar clulas enfermas (clulas
diana), a las que se unen de modo directo o indirecto:

1. Citotoxicidad directa especfica: es la llevada a cabo por los linfocitos citotxicos

(TC), que estn restringidos por el haplotipo propio MHC-I, y que poseen
CD8+ como molculas correceptoras. (aunque algunas son CD4 + y estn
restringididas por MHC-II)

2. Citotoxicidad directa inespecfica: las clulas agresoras naturales (NK)

reconocen determinantes inespecficos de clulas tumorales o infectadas con
ciertos virus.

3. Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos: es un mecanismo indirecto por

el que clulas matadoras como NK, eosinfilos, etc., interaccionan con el
antgeno por medio de puentes de anticuerpos previamente unidos a receptores
para Fc de la clula.
Citotoxicidad directa especfica (mediatizada por linfocitos CTL)
El papel ms importante de este mecanismo es el de eliminar clulas propias infectadas
por virus. Como veremos, los linfocitos TC en reposo, al activarse apropiadamente,
terminan diferencindose a los llamados linfocitos T citolticos (CTL), que son los
efectores de la inmunidad celular especfica.
El 90% de estos linfocitos son CD8 +, y estn restringidos por el MHC-I propio. Son
capaces de reconocer a la mayora de clulas nucleadas. Pero existe un 10% de
linfocitos TC que fenotpicamente son CD4+ y estn restringidos por MHC-II.

La actuacin de estas clulas la podemos considerar en dos fases:

1. Activacin y diferenciacin de los precursores TC hasta CTL

2. Fase efectora: destruccin de la clula diana, a su vez diferenciable en:

adhesin y formacin del conjugado entre el CTL y la clula diana
golpe letal
disociacin del CTL
destruccin de la clula diana.

Activacin y diferenciacin de los linfocitos T citotxicos

Los linfocitos Tc vrgenes parece que se activan solamente en los rganos linfoides
secundarios, nicos entornos en los que reciben las seales necesarias. Requieren en
realidad 3 seales:

1. La seal especfica suministrada por la interaccin entre su complejo TCR-CD3-

CD8 con el MHC-I de una clula presentadora profesional infectada (p. ej., una
clula dendrtica interdigitante)

2. La seal coestimulatoria suministrada por la misma clula (unin entre B7 y

CD28).

3. La interleucina IL-2.
Parece ser que el Tc expresa tras la interaccin inicial una pequea cantidad de IL-2,
pero en el caso de estos Tc vrgenes no suele ser suficiente para activarlos. La
aportacin clave de IL-2 procede de clulas Th1 cercanas. De hecho, se piensa que
tanto el Th como el Tc vrgenes se activan simultneamente al unirse a la misma clula
presentadora (no olvidemos que las APCs exhiben MHC-I y MHC-II).

En cambio, las clulas Tc de memoria tienen menos requerimientos para su

activacin. De hecho, como ya sabemos, al tener molculas de adhesin celular
diferentes a los correspondientes Tc vrgenes, pueden encontrarse el antgeno (epitopo
peptdico en contexto MHC-I) en tejidos extralinfoides.

1. No requieren obligatoriamente la seal coestimulatoria.

2. No requieren obligatoriamente la ayuda de Th, ya que al unirse de modo

especfico a una clula propia infectada que le suministre el pptido adecuado,
provoca que el Tc produzca no slo receptores de IL-2, sino niveles adecuados
de IL-2 capaces de auto-activarlas.
De esta manera, se provoca la proliferacin y diferenciacin del linfocito en reposo
(virgen o de memoria) hasta que se convierte en linfocito T citoltico (CTL). Este CTL se
caracteriza por poseer algo ms de citoplasma que el T C, y sobre todo por poseer
grnulos densos a los electrones, rodeados de unidad de membrana (llamados a veces
granulosomas) y un aparato de Golgi.

Fase efectora: Ataque y destruccin de la clula diana

1) Formacin del conjugado
Tras el reconocimiento especfico, se produce una interaccin de gran avidez entre
molculas de LFA-1 del CTL y molculas de ICAM-1 de la clula diana. Esta unin dura
unos 5-10 minutos, durante los cuales las seales de la unin intercelular se transducen
al interior del CTL por medio de cascadas de proten-quinasas y proten-fosfatasas, que
conducen a la activacin de una serie de funciones del CTL. Se dice entonces que el
linfocito queda programado para la lisis.

2) Golpe letal
El citoesqueleto del CTL se reorganiza, de modo que tanto el aparato de Golgi como los
granulosomas se sitan en el polo celular que queda en contacto con la clula diana.
Entonces, los grnulos se fusionan con la membrana citoplsmica, producindose la
exocitosis de su contenido al estrecho espacio intercelular ("beso de la muerte").

3) Disociacin del CTL

Antes de que se produzca la lisis de la clula diana, el CTL se separa, probablemente
ayudado por el hecho de que la LFA-1 vuelve al estado de baja afinidad.

4) Destruccin de la clula diana

Parece ser que la destruccin de la clula diana puede ocurrir por varios mecanismos,
predominando uno u otro en funcin de la naturaleza de la superficie de la clula diana,
y del grado de activacin que haya alcanzado el linfocito CTL.

Monmeros de perforina contenida en los granulosomas llegan a la membrana de la

clula diana, y en presencia de Ca ++ se polimerizan para formar cilindros huecos
de poliperforina (con unas 20 unidades), que atraviesan la bicapa lipdica. De este
modo se forma un canal (con un dimetro de 5-20 nm) que es permeable a iones, y
que puede provocar la lisis osmtica de la clula diana (aunque su papel principal es
servir como canal para dejar pasar a otros componentes de los grnulos).
Pero no siempre el efecto de la poliperforina es la lisis. En otros casos parece que el
papel de los canales es el de permitir la entrada de otras sustancias del granulosoma
que inducen la apoptosis de la clula diana. De hecho se ha visto que pueden entrar
fragmentinas (granzimas) que inducen la fragmentacin de los cromosomas en
mltiplos de nuclesoma.
Veamos algunas ideas actuales sobre el mecanismo de apoptosis desencadenado por
los linfocitos Tc.
Antes que nada, hay que aclarar el papel de la granzima B. Como ya sabemos, se
trata de una fragmentina, que induce fragmentacin del ADN en mltiplos de
nucleosomas. Ahora bien, este efecto es indirecto: las fragmentinas no son DNAasas,
sino proteasas. La Granzima B tiene una actividad parecida a la llamada enzima
convertidora de interleucina 1- (ICE).

La ICE es una proteasa endgena con un papel central en la ruta endgena de la

apoptosis. Dicha ruta se puede activar por una serie de estmulos externos (carencia de
factores de crecimiento, ciertos virus, dao al ADN), que transforman la ICE inactiva a
forma activa. Una vez activada, la ICE rompe proteolticamente un sustrato an
desconocido, que induce las ADNasas, que fragmentarn el ADN.

Pues bien, se piensa que la granzima B secretada por el CTL (y que entra a la clula
diana a travs de los canales de perforina) activa a la ICE o bien la sustituye para
desencadenar el mecanismo de esta ruta apoptsica endgena.

Pero este no es el nico mecanismo inductor de apoptosis por parte de los CTLs (de
hecho, algunos clones de CTLs carecen de perforina y de granzimas, y sin embargo
inducen muerte celular de la clula diana). Podemos encontrar otro mecanismo
dependiente de la interaccin entre el llamado ligando Fas del CTL y elreceptor
Fas de la clula diana.

El receptor Fas (tambin llamado APO-1) es una protena de membrana que

pertenece a la llamada familia TNF de receptores de citoquinas.
Por su lado, el ligando de Fas del CTL es una protena de membrana que exhibe
homologas de secuencia con TNF, y se une al Fas.
La unin entre el ligando de Fas con el Fas de la clula infectada o enferma induce en
sta una seal que dispara la ruta endgena de apoptosis, con la consiguiente
activacin de la ICE y subsiguiente fragmentacin del ADN.

Las vesculas del CTL pueden contener TNF-a y TNF-b (=linfotoxina), que junto con el
IFN-g producido por TC o por otras clulas, desencadena efectos citotxicos que tardan
ms tiempo (>3-4 horas) que los anteriores. Se desconoce el mecanismo, pero parece
que igualmente inducen apoptosis.

Cmo se protege el CTL de sus propios mecanismos matadores? Por lo pronto, el

condroitn sulfato (proteoglucano) del CTL se puede unir a la perforina, inactivndola.
Pero puede que haya otros mecanismos: por ejemplo, la hiptesis de Peters dice que la
perforina sale del granulosoma dentro de pequeas vesculas igualmente
membranosas; la membrana de estas sub-vesculas contendran complejos TCR-CD3-
CD8, que encaminaran a las pequeas vesculas hacia la clula diana, pero no al CTL.
Citotoxicidad directa inespecfica mediada por clulas NK
Recordemos que las clulas NK son un tipo de linfocitos granulares grandes (de hecho
NK es casi sinnimo de LGL), que suponen un 5% de las clulas linfoides en sangre, y
que carecen de los marcadores de linfocitos T y B. Se consideran como linfocitos
"inespecficos", pertenecientes al sistema de inmunidad natural.

El mecanismo citotxico de las clulas NK es parecido al de los linfocitos citolticos

(CTL), pero a diferencia de ellos, carecen de especificidad y de memoria, y no estn
restringidos por el MHC clsico.

Poseen un papel importante en los primeros das de una infeccin virsica, al eliminar
clulas en las que el virus se est multiplicando. Constituyen pues un mecanismo
efector celular temprano, antes de que lleguen los linfocitos T C, y especialmente
preparado frente a ciertos virus que usan la estrategia de inducir un descenso del nivel
de MHC-I

Recientemente se ha propuesto un modelo de dos receptores para explicar cmo

reconocen estas clulas inespecficas a las clulas infectadas por virus o tumorales. Se
piensa que las NK reciben seales de dos receptores de modo que distinguen entre
clulas sanas y enfermas.

Segn este modelo, el receptor NKR-P1 se une a oligosacridos de glucoprotenas de

superficie de la clula enferma, procedentes de glucosilaciones anmalas. En principio,
esta seal le indica a la NK que debe prepararse para matar a la clula con la que ha
contactado, pero para ello debe de ocurrir simultneamente una ausencia de seal
procedente de otro receptor, el Ly-49.

El receptor Ly-49 de la clula NK se une a ciertos alelos de molculas MHC-I. Cuando

una clula NK se encuentra ante una clula normal, aunque reciba la seal de NKR-P1,
no la mata, ya que la interaccin entre Ly-49 y las MHC-I enva una seal a la NK para
que detenga su mecanismo matador. En cambio, muchas clulas enfermas (por virus o
tumorales) presentan un bajo nivel de MHC-I, por lo que el mecanismo dependiente de
NKR-P1 no se ve frenado.

La actividad matadora de NK se activa por IFN-a e IFN-b (liberado por muchas clulas
enfermas al inicio de la infeccin), y por IL-12 (producido por macrfagos). A su vez, la
IL-12 y el TNF-a (tambin del macrfago) provocan que la NK secrete grandes
cantidades de IFN-g , con lo que se mantienen a raya ciertos patgenos intracelulares
hasta que se activen las clulas T. Como se ve, un nuevo rasgo que parece indicarnos
de nuevo el carcter de lnea defensiva temprana que intepretan estas clulas. De
hecho, rara vez las clulas NK eliminan efectivamente el virus, pero lo mantienen a raya
hasta que llegan las clulas TC.

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC)

Existen varios tipos de clulas potencialmente citotxicas que poseen receptores para
Fc de anticuerpos, y que pueden por lo tanto participar en la destruccin de clulas
diana (enfermas) o de helmintos recubiertos en ambos casos por anticuerpos. Los
acontecimientos suelen tener lugar en las siguientes fases:

1. formacin de inmunocomplejos (es decir, la clula enferma o el helminto se

recubre de anticuerpos);

2. una clula agresora adecuada (p. ej., la NK) interacciona con la clula enferma o
el parsito a travs de los anticuerpos, que se engarzan con el receptor para Fc
de la clula agresora;

3. finalmente, dicha clula agresora libera por exocitosis el contenido de sus

grnulos, y/o secreta productos txicos, que tienden a matar a la clula enferma
o parsito.
De este modo, clulas que son propiamente del sistema inmune natural, y por lo tanto
son inespecficas, pueden llegar a destruir especficamente mediante el puente de
anticuerpos. De hecho, actan como clulas efectoras finales del sistema humoral
especfico (es decir, pueden llegar a ser los "brazos armados" o "verdugos" en una
respuesta que se inici con la secrecin de anticuerpos).

Las clulas NK, monocitos y PMN neutrfilos poseen el receptor Fcg RIII (=CD16),
de baja afinidad, que reconoce las subclases IgG1 e IgG3.
Los eosinfilos posen Fce R-I y Fce R-II, estando especializados en destruir
helmintos (p. ej., las esquistosmulas, que son las larvas de Schistosoma).
RESPUESTA DE HIPERSENSIBILIDAD DE TIPO RETARDADO

La hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) es una reaccin inflamatoria localizada que

se induce por citoquinas secretadas por ciertas subpoblaciones de linfocitos
TH (concretamente, de TH1) activados previamente por contacto con ciertos tipos de
antgenos, y que se caracteriza por el reclutamiento al foco infeccioso de grandes
cantidades de clulas inflamatorias, sobre todo de macrfagos.

Se llama retardada porque, al contrario que la inmediata, tarda 2 o 3 das en

manifestarse.

La palabra hipersensibilidad alude en principio a efectos negativos sobre el propio

hospedador, pero en muchos casos el efecto consiste en pequeos daos tisulares,
siendo en general la respuesta beneficiosa, puesto que va encaminada a destruir a
ciertos patgenos intracelulares.

Fases de la hipersensibilidad de tipo retardado

En la respuesta hipersensible de tipo retardado podemos distinguir una fase inicial de
sensibilizacin en la que se produce el contacto inicial con el estmulo antignico, y que
no presenta sntomas, y una fase efectora, dependiente de un contacto secundario con
el antgeno, en la que se manifiestan tales sntomas y que es la tendente a eliminar al
patgeno.

Sensibilizacin
La fase de sensibilizacin dura de una a dos semanas, tiempo durante el cual los
linfocitos TH se activan y expanden clonalmente tras el reconocimiento del antgeno
presentado por clulas presentadoras (APCs). Dichas clulas presentadoras pueden
ser:

clulas de Langerhans de la piel, que transportan el antgeno desde la epidermis

hasta los ganglios linfticos regionales, donde lo muestran a los linfocitos T H;
macrfagos;
(en humanos y otras especies) clulas del endotelio vascular.
Al final de esta fase se tiene pues una poblacin expandida de linfocitos T CD4 + de
memoria, que recirculan constantemente.

Fase efectora
Esta fase ocurre en tejido extralinfoide, y es la reaccin de hipersensibilidad en sentido
estricto, detectndose sus sntomas a las 24 horas del contacto secundario con el
antgeno que provoc la sensibilizacin inicial, pero alcanza su apogeo a las 48-72
horas. En esta fase sale fibringeno al tejido, y se convierte en fibrina, que junto con la
acumulacin de linfocitos T y de macrfagos hace que el tejido se hinche y se vuelva
duro (esto es la base de los sntomas de induracin y edema) La podemos subdividir en
tres etapas: desencadenamiento, inflamacin y resolucin.

En el desencadenamiento el linfocito T activado (que ahora denominaremos como

TDTH), ante el contacto secundario con el antgeno presentado por una APC, secreta
ciertas citoquinas, cuyas acciones dan paso a la reaccin de inflamacin.

La inflamacin se produce cuando las citoquinas secretadas reclutan y activan a

macrfagos y otras clulas inflamatorias hacia el sitio de infeccin, ponindose en
marcha una compleja serie de interacciones entre clulas inespecficas del sistema
inmunitario y citoquinas, con amplificacin de la respuesta. Todo ello va encaminado
a destruir al agente patgeno intracelular.
 La resolucin se produce porque los macrfagos activados aumentan su capacidad
de eliminacin del patgeno. Estos macrfagos son la principal clula efectora de la
hipersensibilidad retardada, pudiendo representar el 90% de la poblacin celular
infiltrada.

Como se ve, esta respuesta tiene un claro valor adaptativo en la eliminacin de ciertos
parsitos intracelulares, pero cuando el estmulo es demasiado persistente, la DTH se
vuelve destructiva para el hospedador. Este aspecto inmunopatolgico se manifiesta
en la llamada reaccin granulomatosa: los macrfagos, con los parsitos sin eliminar
en su interior, se adhieren unos a otros, adquiriendo morfologas epitelioides;
posteriormente estas clulas epitelioides se pueden fusionar entre s, generando clulas
gigantes multinucleadas, que pueden llegar a desplazar al tejido normal, con lo que se
formanndulos o tubrculos, que pueden conducir a necrosis del tejido.

Interaccin entre citoquinas y clulas en la DTH

En este epgrafe vamos a ampliar el aspecto molecular y celular de la respuesta de
hipersensibilidad retardada, resaltando cmo las distintas citoquinas actan sobre
distintos tipos celulares, responsables de diversos aspectos de esta respuesta.

La IL-2 del linfocito TDTH funciona de modo autocrino, permitiendo la expansin clonal,
con lo que aumenta el nmero de estas clulas, que siguen produciendo ms
citoquinas. Conforme avanza la respuesta, la IL-2 tambin ejerce un efecto
paracrino, estimulando a otros clones de linfocitos T DTH.
La IL-3 y el GM-CSF inducen hematopoyesis del linaje granulocito-monoctico en la
mdula sea. Obviamente ello acarrea que mayores cantidades de PMN y
macrfagos puedan pasar al foco de infeccin.
El IFN-g el TNF-b de las clulas T, as como el TNF-a y la IL-1 de los macrfagos
actan sobre las clulas endotelilales vasculares cercanas al foco de infeccin, con
los siguientes efectos:
aumento de la expresin de molculas de adhesin (ICAM, ELAM, VCAM);

cambios de forma, tendentes a que las clulas endoteliales se separen entre s,

dejando paso para la extravasacin de leucocitos;

las clulas endoteliales estimuladas secretan IL-8 y otros factores quimiotcticos que
atraen a monocitos circulantes (quimiocinas).

Las consecuencias son que los PMN neutrfilos (primeros leucocitos en llegar) y los
monocitos circulantes se adhieren a las clulas endoteliales de las vnulas
postcapilares, pasan por diapdesis y entran al tejido infectado. La entrada de los
monocitos lleva consigo su diferenciacin a macrfagos.

Los macrfagos son atrados y activados en el foco de infeccin debido a la accin

 de IFN-g y del factor quimiotctico y activador de los monocitos (MCAF). Otro factor
secretado por TDTH, llamado MIF (inhibidor de la migracin de macrfagos) evita que
el macrfago "pase de largo" el foco infectivo, afinando su quimiotaxis.
Por lo tanto, los macrfagos van llegando en grandes cantidades al foco infeccioso, y
se van activando (sobre todo por el interfern inmune), experimentando importantes
cambios:
aumentan su tamao

aumentan sus niveles de enzimas lticos en sus grnulos

aumentan su capacidad fagoctica (por opsonizacin con IgG2a -en el ratn-)

incrementan su efectividad matadora de microorganismos intracelulares

funcionan mejor como clulas presentadoras de antgeno, debido a que es mayor el

nmero de molculas MHC de clase II en su membrana, porque secretan mayor
cantidad de IL-1 y porque expresan ms molculas de adhesin como la B7
(coestimulatoria), ICAM-1 y LFA-3.

El que los macrfagos acten mejor ahora como APC supone que activan a ms
linfocitos TDTH, con lo cual se cierra el ciclo, pero amplificado.
Este tipo de respuesta que se retroalimenta positivamente puede llegar a convertirse en
un "arma de doble filo", ya que puede degenerar en una respuesta negativa para el
hospedador, una vez que se traspasa un umbral. Sin embargo, su valor positivo se
ponde de manifiesto en experimentos con ratones transgnicos noqueados (K.O.) que
tienen inactivado el gen del IFN-g : son incapaces de matar aMycobacterium bovis, una
bacteria contra la que los ratones normales se defienden perfectamente.

Efectos de la hipersensibilidad retardada

El efecto positivo de la DTH es que tiende a eliminar ciertos patgenos intracelulares y
antgenos de contacto:

bacterias intracelulares como Mycobacterium tuberculosis, M. leprae, Listeria

monocitogenes, Brucella abortus.
Hongos intracelulares como Candida, Pneumocystis carinii, Histoplasma,
Cryptococcus.
Protozoos como Leishmania.
Larvas de helmintos, como las de Schistosoma.
Virus.
La DTH desempea un papel importante en la defensa contra estos agentes, ya que el
macrfago activado destruye mejor al patgeno, y el contenido de sus grnulos, vertido
a exterior, destruye clulas propias infectadas (en este ltimo papel es importante la
accin del TNF-b ). Obviamente, se produce cierto dao tisular, pero ste suele estar
autolimitado y puede ser reparado ulteriormente.

El papel positivo de la DTH se puede comprobar "por contraste" considerando aquellas

enfermedades en las que precisamente este mecanismo est alterado: por ejemplo, en
el SIDA, en el que existen bajos niveles de linfocitos T CD4 +: ello acarrea que se pierda
la facultad de montar una respuesta de hipersensibilidad retardada, por lo que los
individuos afectados estn sometidos a frecuentes y amenazadoras infecciones
por Candida, Pneumocystis, Cryptococcus, o por bacterias patgenas e incluso
oportunistas que no suelen causar tanta mortalidad en la poblacin sana. De hecho,
una de las maneras de seguir el curso del SIDA es evaluar peridicamente en
laboratorio la capacidad de respuesta DTH con clulas de los pacientes.

Sin embargo, en ciertos casos la propia respuesta defensiva degenera en patolgica: tal
ocurre en la tuberculosis, en la que se pueden llegar a formar ndulos (tubrculos) en
muchos tejidos (tpicamente en los pulmones), que pueden terminar necrosndose
(cavernas caseosas en pulmn).

En una situacin de infeccin crnica por parsito intracelular (como en la tuberculosis)

las citoquinas producidas en la DTH estimulan la proliferacin de fibroblastos y la
produccin de colgeno, potencindose los efectos por la accin de PDGF (factor de
crecimiento derivado de plaquetas) y de TGF-b del macrfago activado. Posteriormente
emigran y proliferan clulas endoteliales (angiognesis, es decir, formacin de nuevos
vasos sanguneos). Se produce pues la sustitucin del tejido normal por tejido fibroso
(cicatrizacin) y formacin de granuloma.

11.- CITOQUINAS
Las citoquinas (o citocinas) son un grupo de protenas de bajo peso molecular que
actan mediando interacciones complejas entre clulas de linfoides, clulas
inflamatorias y clulas hematopoyticas.

Sus funciones son muy variadas, pero se pueden clasificar en unas pocas categoras:

diferenciacin y maduracin de clulas del sistema inmunitario;

comunicacin entre clulas del sistema inmunitario;
en algunos casos, ejercen funciones efectoras directas.
En el pasado reciente hubo un cierto galimatas con la cuestin de su denominacin.
As, muchas de las primeras citoquinas se descubrieron como sealizadoras entre
leucocitos, por lo que se denominaron interleuquinas; otras eran secretadas por
monocitos/macrfagos, por lo que se llamaron monoquinas. Sin embargo, muchas de
esas sustancias son producidas por otros tipos celulares, por lo que se desaconseja el
uso de esas denominaciones, para agruparlas a todas bajo el concepto de citoquinas.
Las quimioquinas (o quimiocinas) son un tipo de citoquinas de pequeo tamao, con
papeles en la respuesta inflamatoria y la quimiotaxis de fagocitos.

PROPIEDADES GENERALES DE LAS CITOQUINAS

Las citoquinas son un grupo de protenas secretadas de bajo peso molecular (por lo
general menos de 30 kDa), producidas durante las respuestas inmunes natural y
especfica. Se unen a receptores especficos de la membrana de las clulas donde van
a ejercer su funcin, iniciando una cascada de transduccin intracelular de seal que
altera el patrn de expresin gnica, de modo que esas clulas diana producen una
determinada respuesta biolgica.

Las citoquinas son producidas por mltiples tipos celulares, principalmente del
sistema inmune. Dentro del sistema inmune natural, los macrfagos son de las
clulas ms productoras de citoquinas, mientras que en el sistema especfico lo son
las clulas T colaboradoras.
La produccin de las citoquinas suele ser breve (transitoria), limitada al lapso de
tiempo que dura el estmulo (es decir, el agente extrao). En muchos casos ello se
debe a que los correspondientes ARNm tienen una corta vida media, que a su vez
depende de que las zonas 3 no traducibles son ricas en A y U.
Considerando las diversas citoquinas, stas pueden exhibir una o varias de las
siguientes cualidades:
- pleiotropa (mltiples efectos al actuar sobre diferentes clulas).

- redundancia (varias citoquinas pueden ejercer el mismo efecto).

- sinergismo (dos o ms citoquinas producen un efecto que se potencia mutuamente).

Por ejemplo, la accin conjunta de IL-4 e IL-5 induce en clulas B el cambio de clase
para que produzcan IgE.

- antagonismo (inhibicin o bloqueo mutuo de sus efectos).

Por ejemplo, el IFN-g bloquea el cambio de clase promovido por IL-4.

Las citoquinas ejercen su accin al unirse a receptores especficos para cada

citoquina en la superficie de la clula en la que ejercen el efecto. La afinidad de cada
receptor hacia su citoquina correspondiente suele ser bastante alta, del orden de lo
femtomolar (10-15 M) a lo picomolar (10-12 M).
Utilizando la analoga de lo que ocurre con las hormonas del sistema endocrino, las
accin de las citoquinas se puede clasificar en:
- de tipo autocrino
- de tipo paracrino

- (en pocas ocasiones) de tipo endocrino.

Las citoquinas "controlan" el sistema inmune de varias maneras, que podemos agrupar
de la siguiente manera:

regulando (activando o inhibiendo) la activacin, proliferacin y diferenciacin de

varios tipos de clulas;
regulando la secrecin de anticuerpos y de otras citoquinas.
Principales tipos de respuesta mediatizados por la accin de las citoquinas:

1. activacin de los mecanismos de inmunidad natural:

a. activacin de los macrfagos y otros fagocitos

b. activacin de las clulas NK

c. activacin de los eosinfilos

d. induccin de las protenas de fase aguda en el hgado (ver tema 16, sobre
el complemento).

2. Activacin y proliferacin de clulas B, hasta su diferenciacin a clulas

plasmticas secretoras de anticuerpos.

3. Intervencin en la respuesta celular especfica.

4. Intervencin en la reaccin de inflamacin, tanto aguda como crnica.

5. Control de los procesos hematopoyticos de la mdula sea.

6. Induccin de la curacin de las heridas.

Hay una aparente paradoja de las citoquinas que debemos explicar: Por qu las
citoquinas, que son inespecficas respecto del antgeno, pueden ejercer acciones de
modo especfico? Veamos varios mecanismos:

Regulacin muy fina de los receptores de cada citoquina: los receptores

celulares indispensables para que una citoquina ejerza su papel slo se expresan en
tipos celulares concretos una vez que stos han interaccionado con el antgeno
(pensemos por ejemplo en los linfocitos cebados con antgeno).
Requerimientos de contactos estrechos clula a clula: la citoquina slo alcanza
concentraciones adecuadas para actuar en el estrecho espacio que queda entre dos
clulas interactuantes; recordar por ejemplo las "bolsas" que se forman en el
conjugado TH:B, donde se alcanzan mejor esos niveles de citoquinas.
 Corta vida media de las citoquinas en sangre y fluidos, lo que asegura que slo
van a actuar en un estrecho margen de tiempo, en las cercanas de la zona donde se
produjeron.

RECEPTORES DE CITOQUINAS

14.4.1 Estructura general de las familias de receptores de citoquinas

Hay diversos tipos de receptores de membrana para citoquinas, pero se pueden
agrupar en cinco familias:

Familia de receptores de citoquinas de la superfamilia de las inmunoglobulinas, que

poseen varios dominios extracelulares de tipo Ig. Como ejemplo, el receptor
especfico para la IL-1.
Familia de clase I de receptores de citoquinas (=familia de receptores de
hematopoyetinas). (Veremos ms detalles de esta familia un poco ms adelante).
Familia de clase II de receptores de citoquinas (=familia de receptores de
interferones). Ejemplos de ligandos son los interferones no inmunes (IFN-a y b) y el
IFN-g.
Familia de receptores de TNF: sus miembros se caracterizan por un dominio
extracelular rico en cistenas. Ejemplos de ligandos: TNF-a, TNF-b, CD40.
Familia de receptores de quimioquinas: son protenas integrales de membrana, con 7
hlices a inmersas en la bicapa lipdica. Interaccionan, por el lado que da al
citoplasma con protenas de sealizacin trimricas que unen GTP. Ejemplos de
quimioquinas que se unen a miembros de esta familia: IL-8, RANTES.
La mayor parte de los receptores de citoquinas del sistema inmune pertenecen a la
familia de clase I (de receptores de hematopoyetinas). Todos sus miembros tienen en
comn poseer una protena anclada a membrana, con un dominio extracelular en el que
hay al menos un motivo caracterstico llamado CCCC (cuatro cistenas cercanas en
posiciones equivalentes) y el llamado motivo WSXWS (Trp-Ser-X-Trp-Ser).
(Adicionalmente, algunos miembros poseen dominios de tipo Ig y/o dominios de tipo
fibronectina). Tras su porcin transmembrana se encuentra una larga cola citoplsmica
con ciertas tirosinas susceptibles de fosforilacin.

La mayor parte de los receptores de clase I poseen dos protenas de membrana:

Cadena a, que es la subunidad especfica de la citoquina, sin capacidad de enviar

seales al citoplasma;
Cadena b, una subunidad transductora de seal, que a menudo no es especfica de
citoquina, sino que es compartida por receptores de otras citoquinas. Esta
cadena b es del tipo que hemos descrito ms arriba (motivos CCCC y WSXWS).
La subunidad transductora de seal se necesita para formar el receptor de alta afinidad,
y para transducir la seal al interior. Ello se logra porque tras la unin, se fosforilan
ciertas tirosinas de la larga cola citoplsmica de la cadena transductora de seal.
En los esquemas comparativos de distintos receptores se puede apreciar que algunos
de ellos poseen el mismo tipo de subunidad b . Este hecho permite explicar dos
cualidades a las que ya hemos aludido: la redundancia y el antagonismo.

Por ejemplo: consideremos los receptores de IL-3, IL-5 y GM-CSF, que como se ve,
comparten el mismo tipo (llamado KH97) de cadena b .

Redundancia: por separado, las tres citoquinas citadas, al tener sendos receptores que
tienen el mismo tipo de cadena b , provocan los mismos efectos biolgicos: proliferacin
de eosinfilos y desgranulacin de basfilos.

Antagonismo: las tres citoquinas compiten entre s por la unin de un nmero limitado
de cadenas b con las a especficas de cada receptor.

La subfamilia de receptores a la que pertenece el receptor de IL-2 (el llamado IL2-R)

consta de tres subunidades:

Cadena a especfica de cada citoquina;

Dos subunidades (cadena b y cadena comn gC) transductoras de seal.
Esta versin trimrica de IL-2R es la que une IL-2 con mayor afinidad, pero en realidad,
el receptor para IL-2 no siempre aparece en esta forma, sino que existe una forma
monomrica (IL-2Ra) de baja afinidad, sin cadenas transductoras, y por lo tanto incapaz
de reenviar la seal, y una forma de afinidad intermedia (IL-2Rbg).

Transduccin de seal
Recientemente se han producido avances importantes en el desentraamiento de la
ruta que conduce desde la unin de la citoquina con el receptor de la clula diana hasta
la activacin de la transcripcin de los genes cuyos productos son responsables de los
efectos de dichas citoquinas. He aqu un modelo general que se puede aplicar a
muchos receptores de las clases I y II:

1. La citoquina provoca la dimerizacin de las dos subunidades del receptor

(cadenas a y b), lo que coloca cercanas a sus respectivas colas citoplsmicas.

2. Una serie de proten-quinasas de la familia de JAK (quinasas Jano) se unen a las

colas agrupadas de las subunidades del receptor, con lo que se esas quinasas
se activan.

3. Las JAK se autofosforilan.

4. Las JAK fosforilan a su vez determinadas tirosinas de las colas del receptor,
 5. Entonces protenas de otra familia, llamada STAT (iniciales inglesas de
transductores de seal y activadores de transcripcin) se unen a algunas de las
tirosinas fosforiladas de las colas del receptor, quedando cerca de las JAK.

6. Las JAK fosforilan a las STAT unidas a las colas del receptor.

7. Al quedar fosforiladas, las STAT pierden su afinidad por las colas del receptor, y
en cambio tienden a formar dmeros entre s. (Las tirosinas fosforiladas que han
quedado libres en las colas del receptor sirven para unir nuevos monmeros de
STATs).

8. Los dmeros de STAT fosforilados emigran al ncleo de la clula, donde actan

ahora como activadores de la transcripcin de ciertos genes, al unirse a
secuencias especiales en la parte 5 respecto de las respectivas porciones
codificadoras.
ANTAGONISTAS DE CITOQUINAS

La actividad biolgica de las citoquinas est regulada fisiolgicamente por dos tipos de
antagonistas:

los que provocan el bloqueo del receptor al unirse a ste:

los que inhiben la accin de la citoquina al unirse a sta.
Como ejemplo de bloqueador de receptor tenemos el antagonista del receptor de IL-1
(IL-1Ra), que bloquea la unin de IL-1a o IL-1b . Desempea un papel en la regulacin
de la intensidad de la respuesta inflamatoria. En la actualidad se est investigando su
potencial clnico en el tratamiento de enfermedades que cursan con inflamacin crnica.

Los inhibidores de citoquinas suelen ser versiones solubles de los respectivos

receptores (y se suelen denominar anteponiendo una "s" al nombre del receptor): la
rotura enzimtica de la porcin extracelular libera un fragmento soluble que retiene su
capacidad de unirse a la citoquina. Existen ejemplos de versiones solubles de los
receptores IL-2R, IL-4R, IL-7R, IFN-g R, TNF-a R, TNF-b R.

El mejor caracterizado es el sIL-2R (versin soluble del receptor de la interleuquina 2),

que se libera durante la activacin crnica de los linfocitos T, y que corresponde a los
192 aminocidos N-terminales de la subunidad a . Este sIL-2R se puede unir a la IL-2,
impidiendo su interaccin con el autntico receptor de membrana, con lo que esto
supone un control sobre el exceso de activacin de los linfocitos T. Este inhibidor se usa
de hecho en clnica como un marcador de la existencia de activacin crnica (caso, p.
ej., de las enfermedades autoinmunes, rechazo de injertos y SIDA).
Algunos virus han evolucionado (como parte de sus mecanismos de evasin del
sistema defensivo del hospedador) para producir protenas que se unen e inactivan a
las citoquinas.

Por ejemplo, los poxvirus codifican una protena soluble que se une al TNF-a , y otra
que se liga a la IL-1. Con ello logran reducir el alcance e intensidad de los mecanismos
inflamatorios naturales que forman parte de la defensa del hospedador.

CONSECUENCIAS BIOLGICAS DE LA SECRECIN DE CITOQUINAS POR PARTE

DE LOS LINFOCITOS TH1 Y TH2

En este apartado no vamos ms que a recordar y profundizar un poco ms en algo ya

tratado en el contexto del tema 13: cmo el distinto espectro de citoquinas secretadas
por las dos subpoblaciones de linfocitos T H determina distintos efectos biolgicos, y
cmo cada subpoblacin controla a la otra.

Las clulas TH1 producen IL-2, IFN-g y TNF-b . Son responsables de funciones de
inmunidad celular (activacin de linfocitos T C e hipersensibilidad de tipo retardado),
destinadas a responder a parsitos intracelulares (virus, protozoos, algunas bacterias).

Las clulas TH2 producen IL-4, IL-5, IL-10 e IL-13. Actan como colaboradoras en la
activacin de las clulas B, y son ms apropiadas para responder a bacterias
extracelulares y a helmintos. Tambin estn implicadas en reacciones alrgicas (ya que
la IL-4 activa la produccin de IgE y la IL-5 activa a los eosinfilos).

En los aos recientes est cada vez ms claro que el resultado de la respuesta inmune
depende en buena medida de los niveles relativos de clulas T H1 y TH2: en una
respuesta a patgenos intracelulares existe un aumento de citoquinas de T H1, mientras
que en respuestas alrgicas y ante helmintos es superior el nivel de las de T H2.

Un punto importante en todo esto es la existencia de una regulacin cruzada entre

TH1 y TH2:

El IFN-g secretado por las TH1 inhibe la proliferacin de las TH2.

Por su lado, la IL-10 secretada por las TH2 inhibe la secrecin de IL-2 e IFN-g por
parte de las TH1. Esta inhibicin en realidad no es directa: la IL-10 produce un
descenso marcado de la cantidad de MHC-II de las clulas presentadoras de
antgeno, que por lo tanto ya no pueden ejercer bien su papel de activar a las T H1.
Adems, las TH2 inhiben por sus citoquinas la produccin en macrfagos del xido
ntrico (NO) y otros bactericidas, as como la secrecin por estos macrfagos de IL-1,
IL-6, IL-8 y otras citoquinas.
Este fenmeno de regulacin negativa cruzada explica las ya antiguas observaciones
de que existe una relacin inversa entre la produccin de anticuerpos y la
hipersensibilidad de tipo retardado.

Obsrvese que los macrfagos y otras clulas presentadoras de antgeno tambin

producen citoquinas (como la IL-12, descubierta hace relativamente poco tiempo) que
regulan a su vez funciones inmunes efectoras. La IL-12 se produce en macrfagos
activados en respuesta a infecciones bacterianas o de protozoos. Esta citoquina
provoca la proliferacin de clulas NK y TH1,que aumentan la produccin de IFN-g .
Este interfern inmune ayuda en la mayor activacin de macrfagos. De esta forma se
cierra este circuito de retrorregulacin positiva entre macrfagos y T H1, destinado a
potenciar funciones efectoras de la rama celular de la inmunidad.

Por otro lado, los macrfagos se ven inhibidos por IL-4 e IL-10 secretadas por los T H2
(de nuevo una manifestacin de la inhibicin cruzada entre la rama especializada en la
respuesta humoral y la centrada en la respuesta celular ante parsitos intracelulares).

Otro aspecto que va quedando claro igualmente es que la predominancia de una u otra
de las dos subpoblaciones de linfocitos TH depende a su vez del microambiente de
citoquinas en que ocurriera la activacin y maduracin inicial a partir de linfocitos en
reposo: por ejemplo, in vitro se ha visto que si un TH se activa por antgeno en presencia
de IL-4, se desarrolla hasta TH2, mientras que si el entorno de activacin es rico en IFN-
g , se desarrolla hasta TH1.

16. EL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

16.1 INTRODUCCIN

Ya antes del fin del siglo XIX Ehrlich haba usado el trmino "complemento" para
designar la actividad del suero que poda complementar la capacidad de los anticuerpos
especficos de lisar bacterias. Pero es Jules Bordet quien descubre (1895) este
componente, caracterizado frente a los anticuerpos por su termolabilidad. En 1907
Ferrata comienza a caracterizar algunos de sus componentes recurriendo a mtodos de
dilisis. Por motivos meramente cronolgicos, los componentes iban recibiendo
denominaciones a base de nmeros tras la letra "C" conforme se iban descubriendo.
Por esta razn, su orden de actuacin no guarda en general relacin con su
nomenclatura.

16.1.1 Nomenclatura
En la ruta clsica (incluyendo el sistema de ataque a la membrana), los componentes
son (segn su orden de actuacin):

C1q, C1r, C1s, C4, C2, C3, C5, C6, C7, C8 y C9.
Muchos de ellos son proenzimas (zimgenos) que requieren su rotura proteoltica para
convertirse en enzimas activas.

Las formas activas se distinguen de las inactivas por una barra horizontal superior
encima del componente implicado. Ej: C1r, C4b2b.

Las formas inactivas se denominan colocando una "i" delante del componente
respectivo. Ej.: la forma inactiva de C4b es iC4b.

Cuando un componente se escinde proteolticamente en dos, el fragmento de mayor

tamao se designa colocando tras la denominacin del componente original una "b"; el
fragmento de menor tamao se designa con una "a" tras el nombre del elemento
original. Ej.: la rotura del C3 genera un fragmento grande, denominado C3b y un
fragmento pequeo, el C3a.

Para nuestra "desgracia" (y de nuevo por motivos histricos), hay una excepcin: el
fragmento grande derivado de C2 se llama C2a, y el fragmento pequeo, C2b.

En la ruta alternativa, los componentes se suelen llamar factores, y en muchos casos su

nomenclatura es a base de una letra mayscula: factor B, factor D, factor H, factor P.

16.1.2 Definiciones y conceptos introductorios

Se define el complemento como un sistema funcional de unas 30 protenas del suero,
que interaccionan entre s de modo regulado formando una cascada enzimtica,
permitiendo una amplificacin de la respuesta humoral. La activacin y fijacin del
complemento a microorganismos constituye un importantsimo mecanismo efector del
sistema inmune, facilitando la eliminacin del antgeno y generando una respuesta
inflamatoria.

La mayora de los componentes del complemento se sintetizan en el hgado (excepto

C1q, D y P). El C1q lo sintetizan clulas epiteliales y el factor D el adipocito.

Existen varios receptores especficos para distintos componentes activados del

complemento, y que se localizan en distintas poblaciones de leucocitos.

Las consecuencias de la activacin y fijacin del complemento incluyen:

lisis del microorganismo o clula diana

opsonizacin, con la consiguiente mejora de la fagocitosis y destruccin
los productos difusibles del complemento activado provocan un incremento de la
quimiotaxis sobre los fagocitos y funcionan como anafilotoxinas en el control de la
respuesta inflamatoria
 amplificacin de la respuesta humoral especfica
eliminacin de los inmunocomplejos
Hasta hace muy poco se hablaba de dos rutas de activacin del complemento (la
clsica y la alternativa), pero recientemente se ha descubierto una tercera va,
denominada va de las lectinas.

la ruta clsica conecta con el sistema inmune adaptativo por medio de su

interaccin con inmunocomplejos.
La ruta alternativa conecta con el sistema de inmunidad natural o inespecfica,
interaccionando directamente con la superficie del microorganismo.
La ruta de las lectinas es una especie de variante de la ruta clsica, pero que se
inicia sin necesidad de anticuerpos, y por lo tanto pertenece al sistema de inmunidad
natural.
Las tres rutas comparten las ltimas fases, consistentes en el ensamblaje, sobre la
superficie del microorganismo, del denominado complejo de ataque a la membrana.

Los componentes de las primeras fases de las rutas clsica y alternativa son diferentes,
pero su comparacin muestra sus semejanzas estructurales y funcionales. Tambin
existen semejanzas entre las protenas C1 de la ruta clsica y las protenas recin
descubiertas de la ruta de las lectinas. Parece ser que las molculas implicadas en
cada ruta debieron evolucionar por duplicacin gnica y ulterior diversificacin.

ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO

En la activacin del complemento, el punto central es la formacin de una C3-

convertasa, capaz de convertir catalticamente el componente C3 en C3b y C3a.

en la ruta clsica (y de las lectinas) la C3-convertasa es el complejo activo C4b2a;

en la ruta alternativa, la C3-convertasa es el complejo activo C3bBb.
Ambas producen grandes cantidades de C3b, que se unen a la superficie del
microorganismo, lo cual a sus vez constituye un "foco" para seguir produciendo e
insertando ms molculas de C3b (cascada de amplificacin).

Por otro lado, cuando a cada una de las C3-convertasas anteriores se le adjunta una
molcula de C3b, se convierte en la correspondiente C5-convertasa, capaz de catalizar
el primer paso de la cascada que conducir al ensamblaje del complejo de ataque a la
membrana.

A continuacin trataremos por separado la activacin en las tres rutas, para

ulteriormente pasar a la descripcin de la porcin comn del ensamblaje del complejo
de ataque a la membrana.
16.2.1 Activacin de la ruta clsica
1) Activacin del complejo C1
La activacin de la ruta clsica comienza por la unin del complejo C1 a anticuerpos
unidos a antgenos (inmunocomplejos).

El C1 es un complejo formado por 5 protenas y estabilizado por iones Ca 2+. Consta de

una molcula de C1q, dos de C1r y otras dos de C1s.

C1q: se puede considerar formado por tres copias de una unidad fundamental. Cada
unidad tiene forma de "Y", y est a su vez constituida por dos grupos de tres
cadenas cada uno que forman entre s una triple hlice. El extremo carboxi-terminal
tiene configuracin globular, y es el sitio de unin a la porcin Fc de la
inmunoglobulina. El componente C1q completo tiene forma de ramillete, con 18
cadenas polipeptdicas (resultado de 3 unidades a base de 2 "ramas" con 3 cadenas
cada una), y con 6
Las dos unidades de C1r y las dos de C1s se disponen descansando sobre los
brazos de C1q. Los dominios catalticos de C1r se sitan hacia el centro.
Uno de los aspectos fundamentales de C1q es su capacidad de unirse a Fc de
inmunoglobulinas, siempre que stas ya estn formando parte de inmunocomplejos.
Veamos esto con ms detalle:

se puede unir a dos o ms IgG a travs de sus respectivos dominios Cg 2; en esta

unin simultnea colabora el hecho de que las distintas molculas de IgG forman
parte de un mismo inmunocomplejo (estn unidas a la misma molcula de antgeno).
se puede unir a dos o ms dominios Cm 3 de distintas subunidades de la misma
molcula pentamrica de IgM. En esta unin interviene un cambio conformacional
previo de la IgM: la IgM pentamrica libre es plana, pero al unirse al antgeno adopta
una configuracin "en grapa" (los brazos Fab forman ngulos con las porciones Fc),
y es entonces cuando el C1q puede unirse a distintos monmeros del mismo
pentmero de IgM.
La unin de varios dominios globulares de un mismo complejo C1 parece que induce en
ste un cambio conformacional, que supone la activacin de una molcula de C1r por
autocatlisis; a su vez, esta C1r activada activa a la otra molcula de C1r. Las dos
molculas activas de C1r ejercen la hidrlisis de las dos C1s, con lo que stas quedan
activadas: las dos C1s activas poseen actividad de sern-esterasas.

2) Produccin de la C-3 convertasa de la ruta clsica

El siguiente paso es la rotura cataltica de C4 por la sern-proteasa de C1s dentro del
complejo activo C1q r2 s2, liberndose el fragmento pequeo C4a (que queda en
disolucin) y el fragmento C4b*. Este C4b * es un intermediario inestable que enseguida
es atacado nucleoflicamente: la mayora de las molculas se hidroliza por agua, para
dar la forma inactiva iC4b, mientras que algunas molculas forman enlaces covalentes
con grupos amino o hidroxilo de molculas de superficie del microorganismo. De esta
forma, el invasor queda con algunas molculas de C4b unidas a su membrana.

El C4b unido covalentemente a la superficie microbiana va a servir ahora como sitio de

unin del componente C2. Se forman as complejos C4b C2 en la membrana del
patgeno, cerca de donde qued fijado el complejo C1.

El C2 de los complejos C4b2 es a su vez otro sustrato del cercano C1s, cuya accin
genera el fragmento pequeo C2b, que queda en solucin y el grande C2a (recurdese
que estamos ante la excepcin en la norma de nomenclatura). Queda en membrana un
complejo ya activado, el C4b2a, que es la C-3 convertasa de esta ruta clsica.

3) Accin de la C-3 convertasa de la ruta clsica

La C3-convertasa C3b2a convierte catalticamente (por hidrlisis) muchas molculas de
C3 a C3a (difusibles) y C3b, que se van anclando a la membrana del microorganismo.

Veamos con un poco de detalle cmo es la rotura del C3:

El C3 intacto posee un enlace tioster interno (adquirido por modificacin

postraduccional de la protena) entre una cistena y una glutamina cercanas entre s.
Este enlace como tal es muy estable (su vida media es de unas 600 horas).
La C3-convertasa cataliza la rutura proteoltica del C3 cerca del extremo amino-
terminal de la cadena a , generando C3a y el componente inestable C3b *.
En el C3b* el enlace tioster se vuelve muy inestable (vida media 60 microsegundos):
el azufre queda con carga neta negativa (-S -), mientras que el carbono queda como
grupo carbonilo (-C+ =O). De esta forma, este enlace se vuelve muy susceptible a
ataque nucleoflico.
Un grupo nucleoflico cercano perteneciente a una protena o azcar de la superficie
del microorganismo reacciona ahora con el grupo electroflico carbonilo del C3b *, lo
que produce la unin covalente (por -CO-O-) entre el C3b y la superficie microbiana.
Este C3b unido a membrana acta a su vez como ncleo "focalizador" para que
continu la activacin del complemento (estamos pues ante un bucle de
retroalimentacin positiva: ver ms adelante). Esta es la forma en que se van fijando
grandes cantidades de C3b a la superficie del microrganismo.

Activacin por la ruta alternativa

La ruta alternativa se activa directamente sobre la superficie de muchos
microorganismos. Opera varios das antes de que entre en accin la ruta clsica (la
clsica tiene que esperar a que se hayan producido anticuerpos).

1) Activacin "al ralent" o "marcapasos"

En el suero, en una situacin normal (en ausencia de infeccin) se est produciendo
continuamente una activacin limitada que produce slo pequeas cantidades de C3b *:
El enlace tioster interno del C3 se hidroliza espontneamente en agua, dando una
forma activada llamada C3i. Esto es lo que se conoce como activacin al ralent
(activacin tick-over).

El C3i acta ahora como sitio de unin para el factor B, generando el complejo C3iB,
sobre el que acta el factor D, que rompe el B unido para generar Ba y el complejo
C3iBb, que acta como una C-3 convertasa en fase fluida. Como tal, escinde el C3 en
C3a y C3b*.

Pero como este C3b* est en fase fluida, la mayor parte de l se hidroliza por agua y se
inactiva. Ahora bien, si por casualidad alguna molcula de C3b * se topa con una
superficie no propia (p. ej., la membrana de una bacteria), se une covalentemente a ella
e inicia el bucle de amplificacin de la ruta alternativa (ver apartado siguiente).

Una pregunta asaltar enseguida al sagaz estudiante: por qu el mismo C3b * no inicia
ese bucle en membranas del propio hospedador? La respuesta estriba en que, como
veremos, existen protenas reguladoras que lo impiden. Se trata de una forma ms de
distinguir lo propio de lo ajeno.

2) Bucle de retroalimentacin positiva (amplificacin)

Como acabamos de decir, cuando alguna molcula de C3b * se encuentra con la
superficie de un microorganismo, se une covalentemente a ella, inicindose un circuito
de amplificacin que va a conducir a que muchas molculas de C3b se anclen.

El C3b recin unido a la membrana microbiana sirve para que espontneamente se una
a l el factor B. El resultante complejo C3bB es a su vez sustrato del factor D, que es
otra sern-proteasa, la cual rompe el B unido, generando el complejo activo C3bBb.

El complejo C3bBb es una C-3 convertasa (cuya actividad reside en Bb), pero en
principio se disocia rpidamente a menos que se estabilice por unin con la properdina
(factor P del hospedador), formando ya el complejo estable C3bBbP, que es la C-3
convertasa unida a membrana de la ruta alternativa.

Dicha C-3 convertasa estable rompe numerosas molculas de C3, cuyos respectivos
fragmentos grandes C3b tienden a unirse cerca de la misma convertasa unida a
membrana.

Este bucle de retroalimentacin se activa igualmente por la C4b2a (C-3 convertasa de

la ruta clsica).
3) Regulacin del bucle de amplificacin
Recojamos la pregunta que nos hicimos anteriormente: por qu el bucle positivo que
acabamos de estudiar slo se produce en las membranas de microorganismos y no
tambin en las de las clulas del hospedador? La respuesta estriba en un sistema de
regulacin negativa del complemento que est ocurriendo en las membranas propias:

Conforme se produce en el suero el C3b *, el factor H se une a l, y los dos juntos se

anclan a las membranas celulares del individuo. Entonces acta el factor I, que rompe
al C3, desplazando al factor H, que vuelve intacto al suero, listo para ejercer otra vez su
accin.

Inmediatamente, el factor I vuelve a actuar sobre el solitario C3b unido a la membrana

propia, inactivndolo. El correspondiente iC3b vuelve a sufrir la accin del factor I, que
ahora lo escide en un fragmento pequeo que pasa a solucin (C3c), y otro mayor
unido a membrana, pero totalmente inactivo, denominado C3dg.

16.2.3 Activacin por la ruta de las lectinas

La ruta de las lectinas, reconocida recientemente como una tercera forma de iniciar la
activacin del complemento, consiste esencialmente en una forma distinta de activar los
componentes C2 y C4 de la ruta clsica.

La ruta comienza por la accin de la protena de unin a mananos (MBP). Se trata de

un componente parecido estructuralmente al C1q: hexmeros con 18 cadenas
polipeptdicas idnticas enrolladas de tres en tres. Los hexmeros de MBP se pueden
unir con dos unidades de C1r y dos de C1s, pero parece que va acompaada de su
propia sern-proteasa (denominada MASP), que muestra casi 40% de homologa con
C1r o C1s.

La MBP se une preferentemente a los extremos de manosa, fucosa y glucosamina de

polisacridos o glucoprotenas de membrana de gran variedad de bacterias. De modo
similar a lo que ocurre con el complejo C1, cuando la MBP se engarza con esos
carbohidratos, sufre un cambio conformacional que a su vez activa a su sern-proteasa
(MASP). Una vez activada, la MASP acta secuencialmente sobre C4 y C2, para
producir una C3-convertasa de la ruta clsica.

TRAS LAS C3-CONVERTASAS: LA VA LTICA Y EL COMPLEJO DE ATAQUE A LA

MEMBRANA

La fase final de la activacin y fijacin del complemento consiste, en esencia, en la

formacin de una C-5 convertasa, que al romper enzimticamente el C5 desencadena
el ensamblaje en la superficie del microorganismo del complejo de ataque a la
membrana (MAC).
 La C5-convertasa de la ruta clsica (y de la ruta de las lectinas) se forma por unin
covalente de una unidad de C3b al complejo C4b2a, para generar C4b2a3b.
En la ruta alternativa la C5-convertasa se forma por unin covalente de una C3b
nueva a la C3b que formaba parte de la C3-convertasa: C3bBb3b.
Estas dos convertasas actan de la misma forma: catalizan la rotura de unidades de C5
en C5a (que queda libre) y C5b, que se une a la membrana microbiana. A partir del
C5b, todas las rutas del complemento confluyen (las fases son las mismas).

Una vez unido el C5b al microorganismo, se van aadiendo ordenada y

secuencialmente una serie de componentes del complemento de forma no enzimtica:
al C5b se une una molcula de C6, luego una de C7; es ahora cuando el complejo
resultante (C5b67) experimenta una transicin hidrfoba que hace que el C7 se "hunda"
en la membrana. Realizada esta transicin, se puede unir el C8, y finalmente, 14
unidades del componente C9. Estos monmeros de C9 se ensamblan entre s para dar
una notable estructura (poli-9) en forma de canal hueco que atraviesa la membrana de
lado a lado, con unos 10 nm de dimetro interno.

El conjunto C5b678poli-9 es lo que constituye el denominado complejo de ataque a la

membrana (MAC, segn sus iniciales inglesas), cuyo efecto esencial es producir un
notable desequilibrio osmtico en el microorganismo que conduce a su lisis (en las
bacterias Gram-negativas se inserta en la membrana externa, favoreciendo la entrada
de lisozima, y en las Gram-positivas se inserta en la membrana citoplsmica,
destruyendo los gradientes electroqumicos). Obviamente, la mayor parte de este efecto
reside en el canal de poli-9, pero ya antes de que se ensamble este componente final,
el complejo C5b,6,7,8 posee alguna capacidad ltica. A microscopio electrnico es
posible visualizar el espectacular estado en que queda una clula atacada por el
complemento: su superficie est tachonada de miles de complejos MAC, por los que
entran agua y electrolitos masivamente, provocando en muchos casos el estallido ltico
final del microorganismo.

REGULACIN DEL COMPLEMENTO

El complemento es un sistema inespecfico, que en principio podra atacar al propio

hospedador. No extraa, pues, que la evolucin haya inventado varias estrategias de
control tendentes a evitar los daos y efectos negativos al individuo. Hay varios tipos de
estrategias reguladoras:

1. Varios componentes del complemento activado son muy lbiles en solucin, y se

inactivan por degradacin rpida al alejarse unos cuantos nanometros del lugar
de interaccin con la clula diana (esto le ocurre al C3b no cataltico de las C3-
convertasas).
 2. Existencia de un inhibidor de C1, llamado C1Inh, que se une e inactiva C1r y
C1s del complejo C1.

3. Pero el gran punto de control estriba en evitar la formacin de C3-convertasas en

las superficies del hospedador, por accin de las llamadas protenas de control
del complemento (CCPs), que tienen en comn una o ms copias de un motivo
llamado secuencia corta consenso (SCR):
Protenas de control del complemento

en ruta clsica en ruta alternativa

DAF inhiben unin del inhiben unin del

CR1 C4b con C2 C3b con el factor B

CR1 cofactores que promueven son cofactores para la

MCP (ms factor I) la degradacin de C4b degradacin de C3b

4. Otro punto de control importante reside en evitar la llamada lisis reactiva por
insercin del CAM en membranas propias (tambin conocida como lisis de los
espectadores inocentes):
la protena S (o vitronectina) del plasma se une a C5b67 cuando difunde, e induce
en este complejo libre una transicin hidrfila; por lo tanto, este complejo ya no podr
unirse a membranas cercanas, evitndose la lisis de los espectadores inocentes
(clulas propias, que las pobres no tienen culpa de nada).
La molcula de superficie CD59 se une al C8 del complejo C5b678 que se hubiera
anclado accidentalmente a membranas propias, y evita el ensamblaje del poro de
poli-C9 y del MAC.
RECEPTORES PARA COMPONENTES DEL COMPLEMENTO

Los receptores celulares para componentes del complemento son los responsables de
mediatizar muchas de las propiedades biolgicas de dicho complemento. Estn
presentes en membranas de clulas sanguneas: eritrocitos y leucocitos.

16.5.1 Receptores para derivados de C3

CR1 (=CD35): su ligando es sobre todo el componente C3b, y en menor medida el
iC3b, as como C4b. Sus principales funciones son:

Actuar como receptor opsnico en fagocitos, mediante el cual reconocen y engullen

mejor microorganismos recubiertos con C3b.
Mediante l, los eritrocitos y plaquetas captan inmunocomplejos opsonizados, y los
 llevan a los fagocitos "carroeros" del sistema retculo-endotelial.
En clulas B y clulas dendrticas foliculares permite que los inmunocomplejos
permanezcan ms tiempo en ganglios y bazo, mejorando la interaccin entre el
antgeno y el sistema inmune.
Como vimos en la tabla del apartado 16.4, el CR1 puede actuar como factor que
protege a las clulas propias del ataque del complemento.
CR2 (=CD21): se une a varios productos de degradacin derivados del C3b (como iC3b
y C3dg). Tambin puede ligarse con el virus de Epstein-Barr.

Existe en linfocitos B, en los que al unirse a l productos derivados de C3b, hace que
los inmunocomplejos, mejoren la activacin y la memoria inmunolgica de estas
clulas. Como ya vimos (tema 6) forma parte del complejo correceptor de clulas B.
La unin entrecruzada de un BCR con un correceptor a travs de un complejo
antgeno-C3dg activa 100 veces al linfocito B respecto a la activacin sencilla solo a
travs de BCR.
Posee un papel patofisiolgico, al ser el receptor celular del virus de Epstein-Barr
(EBV), que de esta manera puede entrar a los linfocitos B, a las clulas dendrticas
foliculares y a ciertas clulas epiteliales (como las de la crvix del tero).
CR3 (=CD18/11b): es un miembro de la familia de integrinas con cadenas de tipo b 2.

Mediatiza fagocitosis de partculas opsonizadas por iC3b.

Funciona tambin como lectina, unindose a carbohidratos de la superficie de
diversos microorganismos (levaduras, Staphylococcus epidermidis, Histoplasma
capsulatum, etc.).
Receptores para C5a
Se ha caracterizado un receptor para el pequeo pptido difusible C5a, presente en
todas las clulas del linaje mieloide (monocitos/macrfagos, PMN neutrfilos,
eosinfilos, basfilos y mastocitos). Se trata de una protena de la superfamilia de la
rodopsina, caracterizada por sus 7 segmentos que atraviesan la membrana, y con
parecido con otros receptores que quimioquinas que mediatizan seales quimiotcticas
(como el receptor de pptidos bacterianos formilados) y con el receptor de la IL-
8 (vase tema 14).

Cuando el C5a se une a este receptor situado en la membrana de los mastocitos, se

induce en ellos la degranulacin y liberacin de mediadores farmacolgicamente
activos, como la histamina, que como veremos juegan un papel importante en la
reaccin de inflamacin.

Cuando el C5a se une al receptor de la superficie de fagocitos, permite que el fagocito

engulla complejos de Ag-IgM-complemento.

CONSECUENCIAS BIOLGICAS DE LA ACTIVACIN DEL COMPLEMENTO

 muerte por lisis de muchos microorganismos
los pequeos pptidos C3a y C5a funcionan como anafilotoxinas, desencadenando
la respuesta inflamatoria
opsonizacin de antgenos o de inmunocomplejos, lo que facilita la destruccin por
parte de fagocitos
eliminacin de inmunocomplejos
neutralizacin de ciertos virus.

Lisis del microorganismo

Casi todos los virus envueltos sufren el ensamblaje del complejo de ataque a la
membrana (MAC), lo que conduce a la lisis de la envuelta y desagregacin de la
nucleocpsida (p. ej., en herpesvirus, mixovirus, paramixovirus, retrovirus).

Contra bacterias Gram-negativas el MAC suele ser bastante efectivo, pero hay notables
excepciones: los fenotipos lisos de Escherichia coli y de Salmonella, debido a las
cadenas laterales largas e hidrfilas del lipopolisacrido (LPS), evitan el ensamblaje del
MAC. Igualmente, ciertas cepas de gonococo poseen en su membrana externa
protenas que se unen no covalentemente al MAC, evitando que ste se ensamble en la
bicapa lipdica.

La efectividad del complemento como bacteriolisina (debido al MAC) queda de

manifiesto en enfermedades genticas que impiden fabricar el complejo de ataque a la
membrana: los pacientes son muy sensibles a infecciones por el meningococo
(Neisseria meningitidis). Esto indica, adems, que teniendo en cuenta que esta bacteria
es intracelular, la fase clave en la que el individuo sano puede luchar contra ella es por
medio de su lisis mediante complemento, cuando el patgeno an se encuentra en la
sangre o en el plasma.

Las bacterias Gram-positivas son normalmente resistentes al MAC, debido a que su

pared gruesa de peptidoglucano impide que el complejo ltico alcance la membrana
citoplsmica.

Incluso algunos microorganismos producen protenas que mimetizan las protenas

inhibidoras de la cascada del complemento, por lo que escapan a sus efectos (un
ejemplo ms de la particular "carrera de armamentos" evolutiva entre organismos
superiores y microorganismos).

En sistemas experimentales se puede evaluar la capacidad del complemento de lisar

clulas de mamfero:

Para lisar un eritrocito basta un solo complejo MAC.

En cambio, para lisar clulas nucleadas se requieren muchos MAC. Ello se debe a
que endocitan rpidamente este complejo, antes de que pueda ejercer su efecto.
 Esto es lamentablemente cierto para las clulas tumorales, y supone la razn por la
que no es viable la terapia antitumoral a base de complemento y anticuerpos
monoclonales.
A pesar de su espectacularidad, el MAC no suele ser decisivo en la mayora de las
infeccciones, sino que lo principal es el efecto opsonizante e inflamatorio de otros
componentes del complemento activado.

Opsonizacin del antgeno o de los inmunocomplejos

La unin covalente de C3b y C4b a las bacterias y a los complejos inmunes supone la
creacin de multitud de ligandos reconocibles por los correspondientes receptores CR1
de la superficie de los fagocitos: esto representa una formidable ayuda para la
capacidad destructora intracelular de estas clulas.

Adems de estimular la fagocitosis, la opsonizacin por componentes del complemento

puede igualmente estimular la exocitosis de grnulos, con lo que se liberan al exterior
enzimas proteolticas y la produccin de radicales libres de oxgeno.

El componente C5a estimula a que el fagocito multiplique an ms el nmero de sus

receptores CR1, con lo que se potencia si cabe la opsonizacin y fagocitosis.

En el caso del neumococo (Streptococcus pneumoniae), la cpsula evita que los

fagocitos puedan interaccionar con el C3b depositado en la membrana bacteriana

El importante papel fisiolgico del C3b como opsonina queda en evidencia por
contraste, cuando se observa lo que pasa en ciertas enfermedades genticas en las
que el enfermo no puede fabricar componentes de la ruta clsica, de C3 o de sus
receptores: estos pacientes son muy susceptibles a infecciones por bacterias
piognicas.

Solubilizacin de inmunocomplejos
La unin del C3b a los inmunocomplejos los va disgregando en complejos de menor
tamao, los cuales son retirados de la circulacin por medio de eritrocitos: los
inmunocomplejos llegan al bazo y al hgado"a lomos" de estos eritrocitos; en estos
rganos, los complejos inmunes se separan de los eritrocitos, y pasan a los macrfagos
fijos especializados, que los engullen y digieren. De esta forma, se evita que los
inmunocomplejos se depositen en los tejidos.

Algunos inmunocomplejos solubles (p.ej., los formados con toxinas bacterianas)

contienen pocas IgG, de modo que directamente no pueden ser reconocidos por
receptores FcgR en la superficie de los fagocitos. Estos inmunocomplejos
desencadenan su propia eliminacin activando directamente el complemento: se une
C3b y C4b, que son reconocidos por CR1 en la superficie de eritrocitos, que los pasan
al hgado y al bazo, donde son capturados por macrfagos.

Precisamente, cuando por alguna razn este sistema no funciona adecuadamente, los
complejos Ag-Ac se acumulan en tejidos, dando lugar a enfermedades por
hipersensibilidad de tipo II. Las personas con lupus eritematoso sistmico con
deficiencias en los componentes C1, C2 y C4, forman inmunocomplejos a los que se
une poca C3b, por lo que no pueden ser eliminados, ocasionando ello reacciones
hipersensibles de tipos II y III.

Mejora de la respuesta inflamatoria

1) Conceptos generales
Los pequeos pptidos difusibles C3a y C5a, liberados durante la activacin del
complemento, cumplen la importante funcin de anafilotoxinas: reclutan clulas
inflamatorias al sitio de infeccin (sitio de inflamacin) y activan sus funciones efectoras.

La inflamacin aguda ya haba sido descrita pertinentemente (en sus manifestaciones

visibles) por los romanos (siglo I), que la caracterizaban por los llamados cuatro signos
cardinales: rubor (enrojecimiento), tumor (hinchazn), calor y dolor. Estos signos
reflejan algunos de los mecanismos fisiolgicos puestos en juego: la vasodilatacin
provoca un eritema (de ah el color rojo); el aumento de la permeabilidad capilar supone
un aflujo de fluido rico en protenas (lo que explica la hinchazn) y con abundantes
leucocitos fagocticos (que al daar a clulas vecinas puede originar pus). El calor y
dolor son manifestaciones de sendos sistemas fisiolgicos destinados a ayudar a la
destruccin del patgeno y a la recuperacin del individuo.

Hay que aclarar que la inflamacin no slo se pone en marcha por infecciones, sino en
general cuando hay dao en tejidos. Lo que caracteriza la inflamacin asociada a
infecciones es la implicacin masiva de elementos del sistema inmune, y la regulacin
por citoquinas. Adems, la inflamacin ante infeccin se inicia en ausencia de
activacin del complemento; lo que aporta sta es una gran potenciacin de los efectos
benficos de la inflamacin.

La reaccin inflamatoria aguda incluye dos tipos de respuesta, una localizada y otra
sistmica.

En la respuesta localizada se produce la activacin de tres tipos de cascadas

enzimticas: la de coagulacin, la de quininas (cininas), y la de fibrinolisis (que
seguramente el alumno habr estudiado en la asignatura de Fisiologa Animal). Si la
respuesta es ante una infeccin, adems, veremos otros fenmenos que vamos a
estudiar enseguida.
La respuesta sistmica se suele conocer como respuesta de fase aguda. En ella se
 produce la induccin de fiebre, aumenta la sntesis de ACTH y glucocorticoides,
aumenta la leucocitosis, y el hgado produce las llamadas protenas de fase aguda.
La respuesta de inflamacin aguda restringe el dao al sitio de infeccin o al lugar de la
herida, evitando su diseminacin a otras partes del organismo.

2) La reaccin local antes del complemento: eventos moleculares y celulares

Cuando entra el microorganismo al tejido, la primera clula defensiva que lo detecta
suele ser un macrfago tisular. Al engullir y procesar al patgeno, el macrfago libera
varias citoquinas: TNF-a , IL-1 e IL-6, que son responsables, como vamos a ver, de
muchas de las reacciones localizadas y sistmicas. Veamos sus actuaciones a nivel
local:

las tres actan sobre los fibroblastos y las clulas endoteliales cercanas, induciendo
dos fenmenos: el inicio de la coagulacin (por deposicin de matriz de fibrina), y el
incremento de la permeabilidad capilar.
Inducen la aparicin de gran nmero de molculas de adhesin intercelular en las
clulas del endotelio cercano: ELAM (que va a permitir la extravasacin de
neutrfilos), ICAM (que har lo propio con los linfocitos) y VCAM (que promueve la
extravasacin de monocitos, que al entrar al tejido, se diferencian a macrfagos).
El TNF-a y la IL-1 provocan la secrecin de la quimioquina IL-8 por parte de
macrfagos y clulas endoteliales. Esta IL-8 es un potente factor quimiotctico, que
aumenta el influjo de neutrfilos.
Por otro lado, el IFN-g (producido por linfocitos TH) y el TNF-a del macrfago activan a
ms fagocitos (macrfagos y neutrfilos), que mejoran sus cualidades de fagocitosis y
liberan enzimas lticas. Los macrfagos activados fabrican elementos del complemento,
que pueden actuar localmente.

Al mismo tiempo, el aumento de permeabilidad capilar permite la entrada al tejido de

anticuerpos y componentes del complemento: es ahora cuando se activa el
complemento, una de cuyas consecuencias es la liberacin de los pequeos pptidos
C3a y C5a, cuya accin potencia y mejora la respuesta local de inflamacin.

3) Accin de las anafilotoxinas derivadas de la activacin del complemento

De los pequeos pptidos con actividad de anafilotoxinas liberados durante la
activacin del complemento, el ms potente es el C5a, seguido por el C3a (1/20 de la
de C5a). El C4a tiene poca actividad (slo 1/2500 del C5a). De ellos, slo se ha
caracterizado el receptor de C5a (ver apartado 16.5.2). Nos referiremos conjuntamente
los dos primeros (aunque no producen los dos la misma gama de efectos). Sus efectos
son:

activacin de clulas mieloides. En neutrfilos esto se refleja en la potenciacin de

sus mecanismos matadores: estallido respiratorio, que les permitir producir grandes
cantidades de radicales libres. Se producen prostaglandinas (PG), sobre todo por los
 mastocitos en presencia de IgE, y eicosanoides como los leucotrienos (LT), con
efectos diversos en la respuesta sistmica y en la local (uno de los leucotrienos
acta de factor quimiotctico para fagocitos).
Los neutrfilos aumentan sus molculas de adhesin, lo que les permite adherirse a
las clulas endoteliales, y finalmente pasar por diapdesis al tejido.
Quimiotaxis sobre PMN neutrfilos, monocitos/macrfagos, eosinfilos y mastoscitos
y basfilos.
Degranulacin de mastocitos tisulares: se libera el contenido, con histamina,
serotonina y otros mediadores farmacolgicamente activos, que promueven ms
contraccin de la musculatura lisa e incremento de la permeabilidad capilar.
La potenciacin de la vasodilatacin provoca la salida de fluido al tejido, lo cual a su
vez acelera el paso del patgeno a alguno de los ganglios regionales, con lo que
iniciar la respuesta inmune adaptativa.
4) Respuesta sistmica (respuesta de fase aguda)
Las respuestas sistmicas ante una infeccin dependen principalmente de las tres
citoquinas segregadas por el macrfago en las primeras fases de la inflamacin (IL-1,
IL-6 y TNF-a ):

actan sobre el hipotlamo, y junto con las prostaglandinas intervienen en los

mecanismos fisiolgicos de la fiebre y el dolor. La fiebre es una respuesta adaptativa
de aumento de la temperatura corporal mediante un aumento del metabolismo de
grasas y de protenas en el tejido adiposo, heptico y muscular. En principio pues, la
fiebre es una medida positiva para el individuo, ya que inhibe el crecimiento de
muchos patgenos y mejora la respuesta inmune.
Provocan la liberacin de ACTH, que al actuar sobre las corteza suprarrenal induce
la produccin y secrecin de glucocorticoides, con un papel en la proteccin frente a
situaciones de peligro y estrs.
Conforme estas citoquinas se van acumulando, a las 12-24 horas, inducen la
produccin por los hepatocitos de las protenas de fase aguda:

protena C-reactiva (CRP). Esta protena aumenta unas 1000 veces desde su nivel
basal. Se une a las cubiertas de ciertas bacterias y hongos que en principio son
resistentes al complemento, permitiendo la deposicin de ste. De esta forma el C3b
ahora puede ser reconocido por el receptor CR1 de los fagocitos, que podrn intentar
la destruccin del microorganismo.
Protena de unin a mananos (MBP).
protena amiloide A srica
fibringeno.
El TNF-a tambin acta sobre las clulas endoteliales y los macrfagos, que producen
citoquinas hematopoyticas (GM-CSF, M-CSF, G-CSF), que al llegar a la mdula sea
inducen un aumento de la generacin de leucocitos (leucocitosis).
El TNF-a, la IL-6 y la IL-1 estimulan la produccin de casi todas las protenas del
complemento (sobre todo las de la va alternativa), mientras que el IFN-gestimula la
produccin de todos los componentes del complemento.

5) Regulacin de la inflamacin y reparacin del tejido daado

La respuesta inflamatoria est limitada en cuanto a su duracin y a su intensidad (de
otra forma, llegara a agredir al propio hospedador), y esta regulacin permite la
reparacin del tejido daado.

Uno de los factores que limitan la respuesta es el TGF-a , que a su vez promueve la
acumulacin y proliferacin de fibroblastos. Los fibroblastos van depositando una matriz
extracelular de fibrina (cogulo de sangre), que evita la diseminacin de la infeccin.

Cuando la infeccin remite, y la mayora de restos celulares y del patgeno han sido
eliminados por los fagocitos, comienza la reparacin del tejido:

crecen capilares en el cogulo de fibrina (angiognesis)

la acumulacin de fibroblastos y fibrina se manifiesta como una cicatriz.

17. VISIN FINAL DE CONJUNTO DEL SISTEMA INMUNE

1. INTRODUCCIN

La mayora de los microorganismos que entran a un individuo sano pasan

desapercibidos, ya que son eliminados eficazmente por algn mecanismo de inmunidad
innata.

En el presente tema vamos a recorrer de modo sucinto las distintas estrategias de los
mamferos frente a la infeccin; comenzaremos con mecanismos innatos
(inespecficos), y veremos cmo dichos mecanismos son esenciales para inducir la
ulterior respuesta adaptativa (especfica) ante aquellas infecciones que hayan logrado
escapar a las primeras barreras defensivas.

durante las primeras horas intervienen las barreras naturales y los primeros
mecanismos innatos
a continuacin (hasta el 4 da) se produce la respuesta temprana inducida, que
pertenece an a la inmunidad innata, pero que sirve para mantener "a raya" la
infeccin mientras que se van activando los linfocitos especficos de la respuesta
adaptativa;
a partir de los das 4-5 entra en accin la inmunidad especfica adaptativa,
dependiente de los linfocitos T y B especficos que previamente se han activado y
proliferado clonalmente.
Si el Ag. entra por 2 vez la respuesta adaptativa tarda menos en montarse, debido a
la memoria inmunolgica especfica.
El proceso infeccioso

Los alumnos habrn estudiado oportunamente en la asignatura de Bacteriologa

muchos ejemplos de procesos infecciosos ocasionados por bacterias. Aqu quiero
solamente dejar constancia de algunas ideas generales que nos lleven a una visin
global.

Distintos organismos poseen distintas vas de entrada al hospedador y desencadenan

distintos tipos de patologas. Adems, existen patgenos especficos de ciertos
hospedadores y no de otros (esto puede deberse en muchos casos a que determinados
patgenos requieren determinadas molculas de superficie de ciertos hospedadores, o
a que dependen de interacciones ms o menos especficas con su hospedador para
poder multiplicarse).

Consulten esquemas donde se muestren las posibles fases de una infeccin y de los
mecanismos de defensa. No todos los microorganismos logran avanzar por todas esas
posibles fases.

Hay microbios poco invasivos. Pero no se olvide que algunas bacterias no invasivas
son grandes patgenas debido a la excrecin de potentes toxinas (p. ej., Vibrio
cholerae, Corynebacterium diphteriae, Clostridium tetani)

Los microbios muy invasivos, lo son porque pueden diseminarse por la sangre
(septicemias).

Los microorganismos responsables de enfermedades en humanos son muy diversos, y

agrupan a virus, bacterias, hongos, protozoos y helmintos (estos dos ltimos son
estudiados por la Parasitologa). La gran variedad de potenciales patgenos ha
supuesto, a lo largo de la Evolucin de los animales, un formidable reto adaptativo. En
el caso de los Vertebrados la presin selectiva se plasm en la creacin de un notable
sistema defensivo que puede reconocer esa gran diversidad de patgenos por medio
de una apabullante diversidad de receptores, igual o mayor que la diversidad de
estmulos antignicos que cada animal concreto puede encontrarse a lo largo de su
vida. Adems, el hecho de que haya patgenos que viven en distintos microhbitats
dentro del cuerpo del hospedador ha empujado a la Evolucin a establecer estrategias
apropiadas por medio de distintos tipos de mecanismos efectores.

Los diferentes agentes infecciosos causan diferentes tipos de enfermedades, lo cual

refleja los variados mecanismos que poseen para daar los tejidos del hospedador.
Observe que algunos microorganismos causan un dao directo (por endotoxinas,
exotoxinas o dao citoptico), mientras que otros causan el dao debido a una
actuacin anormal del sistema inmune (enfermedades por inmunocomplejos, auto-
anticuerpos o la reaccin de hipersensibilidad de tipo retardado que hemos estudiado).

A continuacin vamos a repasar ordenadamente los distintos mecanismos defensivos

que se van poniendo en marcha en el hospedador ante una infeccin. En la medida de
lo posible, intentaremos remitir al alumno (por medio de hiperenlaces) al
correspondiente tema donde cada asunto haya sido tratado en ms detalle.

BARRERAS NATURALES

Slo recordar al alumno que eche una ojeada a la parte adecuada del captulo 1.

INMUNIDAD NATURAL O INNATA (PRIMERA ETAPA)

Si el microorganismo logra superar las barreras de los epitelios, entran en accin varios
mecanismos rpidos e inespecficos:

Activacin del complemento por la ruta alternativa y de las lectinas

Una de las primeras cosas que ocurren es la activacin del complemento por la ruta
alternativa y de las lectinas (vase Tema 16), que es un mecanismo humoral natural,
con las consecuencias ya estudiadas, principalmente opsonizacin por fragmentos del
complemento, y lisis directa por el MAC.

Ahora bien, no todos los microorganismos activan y fijan bien el complemento por ruta
alternativa.

Los macrfagos son los principales efectores de la inmunidad natural celular en

los tejidos y sirven como presentadores de antgeno para iniciar la respuesta
adaptativa.
Los monocitos estn madurando continuamente en la mdula sea, y al abandonar la
circulacin y entrar a tejidos se convierten en macrfagos (vase Tema 2). Se
encuentran en grandes cantidades en los tejidos conectivos y alineados a lo largo de
ciertos vasos del hgado y del bazo. Estas clulas fagocticas juegan importantes
papeles en todas las fases de la defensa del hospedador (Consulte el Tema 13 sobre
inmunidad celular).

Recurdese la diversidad de receptores de la superficie del macrfago: para LPS, para

glucanos de bacterias, para opsoninas como la porcin Fc de los Ac o del C3b del
complemento.
Cuando un macrfago reconoce por alguno de estos receptores a un microorganismo,
se pueden seguir tres importantes consecuencias:

1. fagocitosis y destruccin intracelular del patgeno (Tema 2 y Tema 13). Esto es

suficiente para muchas bacterias, pero algunas poseen cpsulas polisacardicas
gruesas que no son reconocidas por esos receptores (p. ej., Streptococcus
pneumoniae).

2. El macrfago comienza a secretar citoquinas, que como veremos, sern

esenciales para la fase siguiente de la respuesta natural.

3. Procesamiento proteoltico de protenas del patgeno, con ulterior presentacin

de algunos de sus pptidos en el surco de molculas MHC-II (Repase el Tema
9). Ello supone un papel clave para la induccin de la respuesta adquirida
adaptativa.

INMUNIDAD NATURAL (SEGUNDA ETAPA, INDUCIDA POR LA ANTERIOR)

Si el microorganismo ha escapado a la activacin del complemento por ruta alternativa

o a la fagocitosis por macrfagos, se pone en marcha una segunda fase de inmunidad
natural que tiene por objetivo mantener a raya al patgeno, "a la espera" de la
actuacin del sistema adaptativo. Es un mecanismo rpido, debido a que no requiere
expansin clonal de clulas.

Al cabo de unas 4 horas del comienzo de la infeccin acta una serie de respuestas
carentes de memoria y de especificidad, dependientes de receptores relativamente
invariantes. Su importancia estriba en lo siguiente:

en muchos casos, por s mismas pueden repeler al patgeno;

pero sobre todo mantienen a raya al microorganismo mientras se est preparando la
respuesta del sistema inmune especfico;
influyen sobre las respuestas especficas adaptativas.

Las citoquinas secretadas por los macrfagos actan sobre el endotelio para
amplificar la respuesta local a la infeccin
El principal papel de los macrfagos tisulares en esta fase de la infeccin es reclutar
ms fagocitos y molculas efectoras al foco de infeccin, por medio de una serie
de citoquinas que van a "orquestar" las siguientes respuestas.

As, p. ej., el TNF-a es muy importante para iniciar la respuesta inflamatoria (Vea el
Tema 16) Su principales consecuencias:

vasodilatacin, con aumento de la permeabilidad capilar, lo que supone que entre al

 tejido fluido rico en complemento, inmunoglobulinas y otras proteinas sricas.
El endotelio produce molculas de adhesin celular. Ello hace que aumente la
capacidad de los leucocitos PMN neutrfilos y de los monocitos de adherirse a dicho
endotelio, lo que les llevar a la extravasacin (paso al tejido inflamado). Dichas
clulas fagocticas (al pasar los monocitos se convierten en macrfagos) migran
ahora bajo el estmulo de citoquinas quimioatrayentes, hasta que llegan al foco de
infeccin. La extravasacin de los leucocitos ocurre en cuatro fases:

1. Fase de rodamiento: Los leucocitos primero interactan de modo dbil con las
clulas endoteliales (van "rodando" de una clula a otra). Esta primera
interaccin se debe a contactos entre carbohidratos de glucoprotenas del
leucocito (como la s-LeX) y la E-selectina de las clulas endoteliales, inducida por
el TNF-a .

2. Adhesin ms fuerte, debida ahora a interacciones entre las molculas de

ICAM-1 tambin inducidas por el TNF-a en el endotelio y molculas de integrinas
del leucocito (como la LFA-1). Lo interesante aqu es resaltar que normalmente la
interaccin entre ICAM-1 y LFA-1 es dbil, pero que la IL-8 secretada por
macrfagos tisulares cercanos al endotelio induce un cambio
conformacional en la LFA-1 del fagocito circulante que aumenta
enormemente su afinidad hacia la ICAM-1.

3. Diapdesis: el fagocito pasa entre dos clulas endoteliales, y entra al tejido.

4. Migracin del leucocito fagoctico hasta el lugar de infeccin bajo el influjo de

citoquinas quimioatrayentes.
Coagulacin sangunea local: las clulas endoteliales son inducidas a expresar
molculas que desencadenan la cascada enzimtica de coagulacin sangunea, de
modo que los capilares quedan ocluidos. Esto es importante como mecanismo para
evitar que el microorganismo entre a circulacin y se disemine a todo el cuerpo.
Mientras tanto, el fluido que se ha vertido al espacio tisular desde el plasma
transporta al patgeno, bien solo o englobado por clulas fagocticas y
presentadoras de antgeno, por la linfa hasta los ganglios linfticos regionales, donde
se va a iniciar la respuesta inmune especfica.
Ahora bien, si el microorganismo logra a pesar de todo llegar a circulacin sangunea
(septicemia), se pone en marcha un mecanismo que puede llegar a ser catastrfico
para el hospedador: Los macrfagos liberan la misma TNF-a que se distribuye por todo
el cuerpo. Esta liberacin sistmica de TNF-a causa una vasodilatacin y prdida de
plasma generalizadas, con shock septicmico. Ahora se produce una coagulacin
diseminada, lo que conduce a la formacin de pequeos trombos y al agotamiento de
las enzimas de coagulacin, por lo que el paciente pierde su capacidad de coagular
adecuadamente. Ello conduce con frecuencia al fallo funcional de diversos rganos
vitales, como riones, hgado, corazn y pulmones, con gran peligro de muerte.
Las citoquinas secretadas por los macrfagos activados tambin conducen a
respuestas defensivas sistmicas
Repasar lo dicho oportunamente en el captulo 16 (apartado sobre el papel de las
citoquinas en la reaccin de inflamacin aguda).

Como ya dijimos, una de las respuestas sistmicas ms importantes es la

llamada respuesta de fase aguda. Se debe sobre todo al efecto de la IL-6 del
macrfago sobre los hepatocitos del hgado, que ahora producen grandes cantidades
de protenas de fase aguda:

Protena C-reactiva (CRP): se une a fosforil-colina, que es un componente muy

habitual en las envueltas microbianas. Al unirse a una bacteria, no solamente la
opsoniza, sino que adems activa la cascada del complemento.
Protena de unin a manosa (MBP): es una lectina dependiente de Ca ++ que se une
a grupos manosa de las envueltas de muchas bacterias. La estructura de la MBP se
parece a la del componente C1q del complemento y puede activar un complejo
proteoltico capaz de iniciar la ruta clsica de activacin del complemento a partir del
C4 (ruta de las lectinas).
As pues, la respuesta de fase aguda logra que, al cabo de uno o dos das del inicio de
la infeccin, el hospedador disponga de dos tipos de molculas inespecficas pero que
sin embargo logran algo parecido a las inmunoglobulinas: opsonizacin del patgeno
(por C3b y CRP) y activacin del complemento (rutas alternativa y de lectinas).

OTROS MECANISMOS DE DEFENSA INESPECFICOS

Los interferones no inmunes (IFN-a , IFN-b ) inhiben la multiplicacin intracelular

de los virus y pueden activar ciertas respuestas del hospedador
Los alumnos saben ya, por la asignatura de Virologa, el mecanismo de induccin y de
accin de estos interferones sobre la multiplicacin de los virus. Pero, adems, tienen
dos efectos adicionales:

mejoran la capacidad de las clulas infectadas por virus para presentar

pptidos virsicos a los linfocitos T CD8+: ello se debe a que inducen en estas
clulas un mayor nivel de expresin de molculas MHC-I y de protenas TAP
implicadas en el transporte de los pptidos procedentes de procesamiento citoslico
hasta el interior del retculo endoplsmico (vea el Tema 9).
Activan a las clulas NK (Repase Tema 13)

Las clulas agresoras naturales (NK) cumplen un papel defensivo en las primeras
fases de una infeccin por parsitos intracelulares.
Las clulas T g d de los epitelios pueden contribuir a la defensa del hospedador
en las superficies internas.
Cfr. lo dicho al respecto en el Tema 11. Como ya sabemos, estos linfocitos T son
abundantes en muchos epitelios, formando en cada epitelio poblaciones relativamente
homogneas (poco diversas) respecto de la variedad de receptores TCR. Se cree que
de hecho estos linfocitos slo son capaces de reconocer clulas epiteliales sometidas a
estrs (p. ej., por una infeccin intracelular) y de proceder a su eliminacin.

Las clulas B de tipo CD5+ forman una poblacin distinta que produce
anticuerpos frente a productos bacterianos comunes que funcionan como
antgenos timo independientes de tipo 2 (TI-2).
Cfr. lo expuesto al final del captulo 12. A diferencia de los linfocitos "normales"
los linfocitos B CD5+ poseen un repertorio muy limitado de receptores (mIg), debido a
que usan pocos segmentos V, y se multiplican en la periferia (no en los ganglios),
siendo muy abundantes en la cavidad peritoneal. Parece que estn "especializados" en
reconocer antgenos polisacardicos de tipo TI-2. No hay maduracin de afinidad ni
cambio de clase, por lo que la inmunoglobulina predominante es la IgM. Tampoco hay
memoria inmunolgica. Sin embargo, la respuesta de los CD5 + es mucho ms rpida
que la de los otros linfocitos B, siendo operativa al cabo de slo 48 horas. Por todo ello,
esta respuesta puede considerarse como parte de la respuesta temprana previa a la
inmunidad especfica clsica.

Se puede hacer una especulacin evolutiva: los T gd epiteliales y los B CD5+ quiz sean
tipos primitivos de linfocitos (an no plenamente de la inmunidad innata), que
evolucionaron para defender los dos principales compartimentos corporales de los
animales primitivos (piel y cavidad interna).

INMUNIDAD ADAPTATIVA O ESPECIFICA

La respuesta adaptativa se induce con un nivel umbral de antgeno cuando los

mecanismos naturales no han sido suficientes. Obsrvese cmo al poco tiempo de la
induccin la infeccin va remitiendo, y cmo tras la eliminacin del patgeno el
individuo queda con una memoria inmunolgica especfica.

La respuesta adaptativa tarda varios das en ser operativa, debido al tiempo requerido
para la activacin de los linfocitos T y B, y para su proliferacin hasta diferenciarse en
las correspondientes clulas efectoras.

17.6.1 La activacin de las clulas T comienza cuando los linfocitos T

especificos circulantes encuentran el antgeno en los rganos linfoides
perifricos
Los Ag son drenados desde el tejido de entrada y quedan retenidos en los ganglios
linfticos regionales, mientras que los que entran por la sangre quedan en el bazo. El
hecho de que el Ag quede atrapado en el rgano por clulas presentadoras de Ag
(APC), junto con el que los linfocitos T estn recirculando continuamente asegura que
las pocas clulas T especficas de un determinado Ag terminen por interactuar con ste
sobre la superficie de alguna APC profesional.

El mecanismo por el que los linfocitos T vrgenes entran a los rganos linfoides
secundarios es bastante parecido al que ya hemos descrito para la extravasacin de los
fagocitos al tejido foco de infeccin, salvo el detalle de que en este caso la selectina
est en la superficie del linfocito y no en el endotelio. La selectina-L del linfocito se une
a las diriginas (adresinas) vasculares del rgano linfoide (p. ej., GlyCAM-1 y CD34), que
slo se expresan en las clulas especiales de endotelio alto de las vnulas (HEV).

En primer lugar, la L-selectina del linfocito se une dbilmente a las diriginas GlyCAM o
CD34, durante la fase de rodamiento. Las citoquinas producidas en las cercanas
inducen un aumento de afinidad de la LFA-1 del linfocito hacia la ICAM-1 e ICAM-2
(constitutivas) de las clulas de HEV, lo que lleva a la unin firme. Finalmente tiene
lugar la diapdesis y entrada del linfocito al interior del rgano linfoide.

Tras entrar al ganglio, si la clula T virgen reconoce a su combinacin especfica de

pptido-MHC presentada por una APC, deja de migrar. Ahora se produce todo el
proceso ya estudiado de activacin del linfocito T, con su proliferacin y diferenciacin a
clulas efectoras (Cfr. Tema 11). Esto supone que, durante unos das los linfocitos
especficos quedan tambin "secuestrados" de la circulacin, y al cabo de unos das
salen por el linftico eferente en mayores nmeros de los que entraron.

Las citoquinas producidas durante las primeras fases de la infeccin influyen en

la diferenciacin funcional de las subpoblaciones de linfocitos T colaboradores
Durante la interaccin de las clulas T CD4 + vrgenes con el Ag en los tejidos linfoides
perifricos es cuando se decide la diferenciacin preferente hasta clulas T H1 o hasta
TH2, lo cual a su vez tendr una enorme importancia (como ya vimos: Cfr. Tema 14) en
el resultado de la respuesta adaptativa: si predominan las T H1 se activarn sobre todo
las funciones inflamatorias de los macrfagos y la respuesta celular frente a parsitos
intracelulares (Ver la respuesta de hipersensibilidad de tipo retardado, DTH); si, en
cambio se diferencian clulas TH2, stas actuarn como coadyuvantes en las
respuestas humorales y en la produccin de eosinfilos y mastocitos. Como ya
sabemos, lo que decide uno u otro resultado es el entorno particular de citoquinas
presentes durante las primeras fases de activacin y proliferacin de los
linfocitos CD4+ (Tema 13).

In vitro se ha comprobado que cuando las clulas T CD4 + son estimuladas en

presencia de IL-12 (producido por macrfagos) e IFN-g (producido por NK) tienden a
diferenciarse a TH1, en parte debido al efecto inhibitorio que ejerce el IFN-g sobre la
diferenciacin de las TH2. Esta situacin parece que es la que se produce ante las
infecciones de ciertos parsitos intracelulares, como bacterias del gnero Listeria.
 En cambio, las clulas T CD4 + que se activan en un entorno rico en IL-4 (que ha
podido ser secretada previamente por clulas como los mastocitos ante parsitos
extracelulares) se convierten en linfocitos TH2, mientras que la misma IL-4 inhibe la
proliferacin de las TH1. Los linfocitos TH2 funcionan como colaboradores (sobre todo
mediante la secrecin de IL-2, IL-4, IL-5, etc) respecto de los linfocitos B en su ruta
de activacin, proliferacin y diferenciacin a clulas plasmticas secretoras de
anticuerpos (Cfr. Tema 12), y ayudan a montar las respuestas mediatizadas por la
IgE en las que participan los mastocitos y los eosinfilos, que son importantes frente
a helmintos.
Las clulas T efectoras acuden a los sitios de infeccin debido a que expresan
determinadas molculas de superficie.
Las clulas T que salen ya activadas de los rganos linfoides secundarios han sufrido
un cambio importante: pierden su L-selectina, es decir, su receptor de alojamiento
("homing") (por lo que ya no vuelven a alojarse en dichos rganos) y en cambio
aumentan la expresin de otras molculas de superficie, entre ellas la integrina VLA-4,
que se une a la VCAM-1 existente en la superficie de las clulas endoteliales cercanas
al foco de infeccin. (A su vez, la VCAM-1 ha sido inducida en esas clulas endoteliales
de los capilares debido al estmulo de citoquinas producidas en el foco de infeccin).

Incluso ciertas subpoblaciones de linfocitos T migran a ciertos tejidos de modo

preferente, como las placas de Peyer.

No todas las clulas T efectoras y de memoria que migran al tejido van a encontrarse
con el Ag especfico; en este caso vuelven a ganglios linfticos por los vasos linfticos
aferentes y retornan a circulacin, por lo que tienen otra oportunidad. Si despus de
varios das las clulas efectoras siguen sin haber interactuado con su Ag, mueren por
apoptosis, mientras que las de memoria tienen una vida de varios aos e incluso
decenios.

Las T armadas secretan TNF-a e IFN-g, que actan sinrgicamente para cambiar la
forma de las clulas endoteliales, lo que a su vez favorece el flujo de leucocitos y de
plasma.

La respuesta especfica humoral se desarrolla en los tejidos linfoides perifricos

bajo la direccin de clulas TH
Las clulas T CD8+ (citotxicas) y las TH1 ("inflamatorias") ejercen sus acciones
efectoras en los tejidos infectados (Cfr. Tema 13), pero en cambio las TH2
(colaboradoras clsicas) deben interaccionar con las clulas B, y ello slo es posible en
el entorno especializado de los rganos linfoides secundarios.

Una de las cuestiones ms interesantes (y que an no est totalmente resuelta) es

cmo dos linfocitos especficos distintos, el linfocito B maduro virgen y el linfocito
TH activado especfico, se llegan a encontrar para iniciar la respuesta humoral frente a
antgenos timo-dependientes. La posible respuesta estriba en la ruta migratoria que
siguen las clulas B a travs de los tejidos linfoides y el hecho de que existan clulas
TH efectoras a lo largo de dicha ruta:

Las clulas B maduras vrgenes entran al ganglio de modo parecido a las clulas T,
es decir, a travs de las clulas de vnulas de endotelio alto (HEV). Se piensa que
las clulas TH en reposo de la paracorteza (rea T del ganglio) son activadas e
inducidas a proliferar por el contacto con el Ag presentado por las clulas dendrticas
interdigitantes. Esto supone que en esta zona va a haber una alta concentracin de
linfocitos TH especficos activados.
Cuando una clula B en reposo y especfica para ese Ag llega a esa zona del ganglio
tras salir por las HEV, queda retenida en el lmite entre la corteza y la paracorteza,
donde sufrir su primera fase de activacin tras internalizar el Ag; inmediatamente
alguno de los linfocitos TH especficos contacta a su vez con ese linfocito B (que
ahora acta como APC respecto del T H), formndose el conjugado TH:B. De esta
forma se produce una primera "oleada" de proliferacin y maduracin de linfocitos B
hasta clulas plasmticas, que secretan Ac.
Pero unas pocas de las clulas B que han proliferado en esta primera oleada migran
a la corteza, hasta el folculo primario, donde al seguir su proliferacin y maduracin
constituirn el centro germinal del folculo secundario bajo la influencia del Ag
atrapado en la superficie de las clulas dendrticas foliculares (FDC). Como
sabemos, es aqu donde se produce la hipermutacin somtica (fase de
centroblastos) y la seleccin darwiniana en base a la mayor afinidad de las variantes
de Ig de membrana de los centrocitos por unirse al Ag sobre las FDC (Cfr. el Tema
12, y para detalles sobre la hipermutacin somtica, el tema 7). De esta forma,
conforme pasa el tiempo va madurando la afinidad de los anticuerpos. Como ya
dijimos, el Ac formado al inicio de la respuesta no slo suministra proteccin, sino
que parte de l se une a Ag, para formar inmunocomplejos, que a su vez quedan
retenidos sobre las clulas dendrticas foliculares, y que "dirigen" la maduracin de la
afinidad en fases ms tardas de la respuesta primaria, y son predominantes durante
la respuesta secundaria.
Las clulas plasmticas pueden tener dos destinos:

pueden permanecer en el rgano secundario donde se produjeron: cuerdas

medulares en el caso de ganglios, o pulpa roja en el caso del bazo; en esas zonas
hay macrfagos que ayudan a evitar que el microorganismo salga del respectivo
rgano.
Algunos centrocitos abandonan el centro germinal y migran a la mdula sea como
plasmablastos, donde se terminan de diferenciar a clulas plasmticas. Esta es la
razn por la que oportunamente dijimos (Cfr. Tema 3) que la mdula es un rgano
linfoide muy importante durante la respuesta secundaria. De hecho, el 90% de las
clulas plasmticas residen en la mdula de los grandes huesos, donde secretan
ms anticuerpos y viven ms tiempo que sus "parientes" de bazo y ganglios.
VISIN GENERAL DEL SISTEMA INMUNITARIO
El sistema inmunitario consta de varias "lneas de defensa" principales:

Inmunidad innata (= natural o inespecfica): es una lnea de defensa que permite

controlar a mayor parte de los agentes patgenos. Inmunidad adquirida (= adaptativa o
especfica): suministra una respuesta especfica frente a cada agente infeccioso.
Posee memoria inmunolgica especfica, que tiende a evitar que el agente infeccioso
provoque enfermedad en una segunda infeccin. Pero incluso antes de que acte la
inmunidad inespecfica, el organismo posee una serie de barreras naturales que lo
protegen de la infeccin de los agentes patgenos, as como una proteccin biolgica
por medio de la microflora (microbiota) natural que posee. Comenzaremos nuestro
estudio de la inmunidad precisamente por estas primeras lneas defensivas.

SISTEMA DE INMUNIDAD INNATA, NATURAL O INESPECFICA

Elementos del sistema de inmunidad natural. Si el microorganismo o partcula extraos
logran atravesar la piel y los epitelios, se pone en marcha el sistema de inmunidad
natural (inespecfica o innata), en el que participan los siguientes elementos:

Clulas:

Fagocitos (o sea, leucocitos del sistema retculo-endotelial, que se originan en la

medula sea): en la sangre: los PMN neutrfilos (de vida corta) y los monocitos; en los
tejidos: los macrfagos, que se diferencian a partir de los monocitos. Todos ellos
fagocitan y destruyen los agentes infecciosos que logran atravesar las superficies
epiteliales.
Clulas asesinas naturales (clulas NK): son leucocitos que se activan por
interferones inducidos en respuesta a virus. Reconocen y lisan clulas "enfermas",
infectadas por virus o malignizadas (cancerosas).
Factores solubles:

Protenas de fase aguda: aumentan su concentracin rpidamente unas 100 veces

ante una infeccin Una de ellas (la protena C-reactiva) se une a la protena C de la
superficie del neumococo, favoreciendo que ste sea recubierto por el sistema de
protenas del complemento (al que aludiremos enseguida), lo cual a su vez facilita la
fagocitosis por los fagocitos.
Sistema del complemento: se trata de un conjunto de unas 20 protenas del suero que
interaccionan entre s y con otros componentes de los sistemas inmunes innato y
adquirido. En el sistema de inmunidad innata el sistema se activa por la llamada ruta
alternativa. He aqu un resumen de sus efectos:
El complemento se activa por ruta alternativa al contacto con la superficie del
microorganismo. El hecho de que el complemento quede activado tiene una serie de
consecuencias:
 - lisis directa del microorganismo
- quimiotaxis sobre fagocitos
- recubrimiento del microorganismo con una de las protenas del complemento (la
C3b), lo que facilita la fagocitosis (a este fenmeno se le llama opsonizacin)
- la activacin del complemento controla tambin la reaccin de inflamacin
aguda.
Funcionamiento del sistema de inmunidad natural

Endocitosis

La endocitosis es la ingestin de material soluble (macromolculas) del fluido

extracelular por medio de invaginacin de pequeas vesculas endocticas. La
endocitosis puede ocurrir de dos maneras distintas:

A) Pinocitosis

La internalizacin de las macromolculas ocurre por invaginacin inespecfica de la

membrana plasmtica. Debido a esa inespecificidad, la cuanta de la internalizacin
depende de la concentracin de las macromolculas.

B) Endocitosis mediada por receptor

Las macromolculas son selectivamente internalizadas debido a su unin a un receptor

especfico de la membrana.

En cualquiera de estos dos casos, tras la internalizacin, las vesculas endocticas se

fusionan entre s y despus con los endosomas. En el caso de endocitosis, el contenido
cido de los endosomas hace que se disocie la macromolcula de su receptor. El
endosoma se fusiona con el lisosoma primario, para dar el lisosoma secundario. Los
lisosomas primarios derivan del aparato de Golgi y transportan grandes cantidades de
enzimas hidrolticos (proteasas, nucleasas, lipasas, etc.). Dentro de los lisosomas
secundarios, las macromolculas ingeridas son digeridas hasta productos hidrolizados
(pptidos, aminocidos, nucletidos y azcres), que finalmente son eliminados de la
clula.

Fagocitosis

La fagocitosis es la unin del microorganismo (o, en general, un agente particulado,

insoluble) a la superficie de una clula fagoctica especializada (PMN, macrfago), por
algn mecanismo inespecfico, de tipo primitivo (ameboide): emisin de pseudpodos y
englobamiento, para crear un fagosoma (10-20 veces mayor que el endosoma) al que
se unen lisosomas; a partir de aqu el proceso es similar al descrito anteriormente. La
fusin de los grnulos de los fagocitos origina la destruccin del microbio en unos pocos
minutos. La expansin de la membrana en la fagocitosis (emisin de pseudpodos)
requiere la participacin de los microfilamentos, cosa que no ocurre en la pinocitosis-
endocitosis.

La destruccin del microorganismo en los lisosomas secundarios de los fagocitos se

produce por dos tipos de mecanismos:

Mecanismos dependientes de oxgeno: Se activa una ruta metablica (hexosa

monofosfato) que consume grandes cantidades de oxgeno, lo que a su vez produce
grandes cantidades de radicales txicos antimicrobianos (como el O2-, H2O2, OH-,
O21), que a su vez pueden reaccionar para dar otras sustancias txicas, como
hipocloritos y cloruros. Estas sustancias provocan una intensa halogenacin que
afecta a muchas bacterias y virus.
Mecanismos dependientes de xido ntrico (NO).
Mecanismos independientes de oxgeno: Liberacin de enzimas hidrolticos:
lisozima, protenas catinicas, proteasas, etc., que ejecutan un efecto bactericida o
bacteriosttico.
Pero como hemos dicho, el paso inicial de la fagocitosis implica que el fagocito debe ser
capaz de unirse al microorganismo y activar la membrana para poder englobarlo. Para
ello, cuenta con una ayuda evolutiva que se ha "aadido" al sistema primitivo ameboide,
y que aumenta su eficacia: el sistema de activacin del complemento por la va
alternativa.

Activacin del complemento por la ruta alternativa: Como ya dijimos, el

complemento es un conjunto de 20 protenas del plasma, que interactan entre s y con
otros elementos de los sistemas inmunitarios innato y adquirido, para mediar una serie
de importantes respuestas inmunolgicas. El complemento se activa por dos rutas
diferentes: la ruta clsica, (que corresponde al sistema de inmunidad especfica, y que
depende de interacciones antgeno-anticuerpo), y la ruta alternativa (perteneciente al
sistema natural). Ambas rutas consisten en un sistema de activacin enzimtica en
cascada, que sigue la lgica de que el producto de una reaccin es a su vez una
enzima para la siguiente reaccin, producindose una respuesta rpida y
amplificada del estmulo inicial.

En la ruta alternativa podemos distinguir dos grandes fases: la iniciacin por el

componente C3 y el ensamblaje del complejo de ataque a la membrana (CAM).

a) Iniciacin de la ruta alternativa por el componente C3.

La accin concertada del polisacrido microbiano y de la properdina del

hospedador estabiliza a la C3-convertasa, que de esta forma comienza a producir
grandes cantidades de C3b que se fijan a la superficie del microorganismo; a su vez, el
C3b fijado provoca la produccin y fijacin de mayores cantidades de convertasa
(C3bBb).

b) Ensamblaje sobre la membrana del microorganismo del complejo de ataque a la

membrana (CAM), por la "va post-C3":

Ahora comienzan a juntarse, junto al C3b, y en orden secuencial, una serie de otros
componentes del sistema complemento, que finalmente constituyen el
llamado complejo de ataque a la membrana (CAM), que representa un canal
totalmente permeable a iones y agua. Como lo que acabamos de describir ocurre en
toda la superficie del microorganismo, el resultado son innumerables complejos CAM
ensamblados en la membrana citoplsmica, por los que entran grandes cantidades de
agua con iones Na+, que pueden provocar la lisis del microorganismo.

En este proceso se liberan algunos componentes solubles del complemento, de los

cuales los ms importantes son el C3a y el C5a.

Funciones biolgicas del complemento activado por la ruta alternativa:

a) Como acabamos de ver, una primera secuela (aunque no siempre ocurre en todos
los microorganismos) es la lisis celular por el CAM. El recubrimiento del microorganismo
por numerosas unidades de C3b es un ejemplo de opsonizacin: facilita la unin de
los fagocitos al agente extrao, para su inmediata fagocitosis. Papel de los pequeos
pptidos solubles C3a y C5a:

b) estimulan la tasa respiratoria de los PMN neutrfilos, lo que supone una

activacin de sus mecanismos destructivos dependientes de oxgeno (citados ms
arriba). estos pptidos son anafilotoxinas, es decir, estimulan la desgranulacin de
los mastocitos y de los PMN basfilos, lo cual supone la liberacin de una variedad
de sustancias

histamina: provoca vasodilatacin y aumento de la permeabilidad de los

capilares sanguneos.
heparina: efecto anticoagulante.
factores quimiotcticos que atraen a PMN neutrfilos y eosinfilos.
Todo ello, como se puede ver, va encaminado a congregar hacia el foco de infeccin a
las clulas fagocticas, parte de las cuales se activan para mecanismos defensivos.
Pero adems, estas anafilotoxinas inducen el que los mastocitos
sinteticen prostaglandinas (PG) y leucotrienos (LT), cuyos papeles fisiolgicos son:

intervenir en el mecanismo fisiolgico del dolor

 favorecer an ms la quimiotaxis de los PMN
favorecer ms la vasodilatacin.
Reaccin de inflamacin aguda: La inflamacin es una reaccin ante la entrada de un
microorganismo a un tejido, con sntomas de dolor (debido a PG y LT), enrojecimiento,
hinchazn y sensacin de calor, con un edema debido a la acumulacin de lquido rico
en leucocitos. Esta reaccin deriva de algunos de los componentes citados en el
anterior epgrafe:

Los pptidos C3a y C5a, junto con los factores quimitcticos segregados por los
mastocitos atraen hacia el tejido afectado a los PMN que estn circulando por la
sangre, que atraviesan los capilares ayudados por el efecto de vasodilatacin de la
histamina. Al llegar al foco del microorganismo invasor, las clulas atradas despliegan
todo su arsenal: los PMN neutrfilos reconocen (por medio de unos receptores
especficos) a los microorganismos "opsonizados" (recubiertos) por C3b, los fagocitan, y
en el fagolisosoma formado descargan su "artillera qumica", entre ella los mecanismos
dependientes de oxgeno, que han sido activados por C3a y C5a.

La vasodilatacin y el incremento en la permeabilidad capilar facilitan la entrada al tejido

daado de las enzimas del sistema de coagulacin sangunea: se activa una cascada
enzimtica que conduce a la acumulacin de cadenas insolubles de fibrina, que
constituyen el cogulo sanguneo.

Una vez ocurrida la respuesta de inflamacin aguda, y eliminado el microorganismo por

los fagocitos, tiene lugar la reparacin del tejido daado y la regeneracin con tejido
nuevo. La reparacin comienza con el crecimiento de vasos capilares en el entramado
de fibrina del cogulo sanguneo. Conforme el cogulo se disuelve, va siendo sustituido
por fibroblastos nuevos. La cicatriz es el resultado de la acumulacin de nuevos
capilares y de fibroblastos.

Otros mecanismos de inmunidad inespecfica:

A) Mecanismos humorales:

Protenas de fase aguda. Estas protenas incrementan su concentracin

espectacularmente cuando se produce una infeccin. Una de las m<s importantes es la
protena C-reactiva (CRP), que se produce en el hgado ante dao en tejidos. Se une al
llamado polisacrido C de la pared celular de una amplia variedad de bacterias y de
hongos. Esta unin activa a su vez al complemento, lo que facilita su eliminacin, bien
sea por lisis dependiente del complemento (por el complejo de ataque a la membrana,
CAM), bien sea por potenciacin de la fagocitosis mediada por el complemento.
Interferones (consultar lo estudiado en Virologa). Los interferones modulan, adems la
funcin de las clulas NK.

B) Mecanismos celulares: dependen de clulas que destruyen "desde fuera" (no por
fagocitosis):

clulas NK (asesinas naturales): son linfocitos grandes, distintos de los B y T que

veremos ms adelante, y que a diferencia de estos poseen grnulos
citoplsmicos. Su papel es reconocer clulas tumorales o infectadas con virus,
se unen a ellas y liberan al espacio que queda entre ambas el contenido de sus
grnulos.

una perforina, protena que se ensambla en la superficie de la clula enferma y

origina un canal parecido al de CAM, provocando la lisis. factores citotxicos,
que matan a la clula enferma PMN eosinfilos: especializados en atacar
grandes parsitos, incluyendo helmintos.

EL SISTEMA DE INMUNIDAD ADAPTATIVA O ESPECFICA

Algunos microorganismos no desencadenan activacin del complemento por la ruta
alternativa, y no pueden ser lisados porque no llegan a quedar opsonizados por la
protena C3b. Incluso existen microbios que escapan al control de los fagocitos. Para
poder enfrentarse con estos "invasores", la evolucin ha desarrollado en los
vertebrados, y principalmente en los mamferos, una barrera defensiva adicional, an
ms sofisticada, consistente en un tipo de molculas que funcionan como "adaptadores
flexibles", que por un lado se unen a los fagocitos, y por el otro se unen al
microorganismo, no importa de qu tipo se trate. Este tipo de adaptadores son los
anticuerpos.

En cada tipo de anticuerpos existen 3 regiones:

- una que reconoce especficamente a cada invasor dos con funciones biolgicas:
unin al complemento, activndolo por la ruta clsica;

- unin a fagocitos.

- En la inmunidad especfica se dan dos tipos de respuesta:

Inmunidad especfica humoral

Inmunidad especfica celular. A continuacin se expone un breve resumen de ambas

respuestas, que nos servir para "abrir boca" de cara al estudio con ms detalle que
emprenderemos ms tarde.
Los anticuerpos son los mediadores de la inmunidad especfica humoral.

La unin entre el antgeno (Ag) y el anticuerpo especfico (Ac) provoca:

- la activacin del complemento por la ruta clsica, que puede conducir, al

igual que en la ruta alternativa, a la lisis del microorganismo invasor;
- opsonizacin (recubrimiento) de los fagocitos con complejos Ag-Ac, lo cual
facilita la fagocitosis;
- neutralizacin directa de ciertas toxinas y virus por la simple unin Ag-Ac.
Obsrvese que los dos primeros efectos son formas que tiene el sistema
especfico de "aprovechar" elementos del sistema de inmunidad innata, mediante
los cuales determinados elementos de este sistema inespecfico son
"encarrilados" mediante los anticuerpos (que son especficos) hacia el foco de la
infeccin de un determinado microorganismo, para su eliminacin.
Los Ac estn producidos por las clulas plasmticas, diferenciadas a partir de los
linfocitos B.

Los Ag son las molculas del microorganismo o partcula extaa que evocan y
reaccionan con los Ac. Son los Ag los que seleccionan el Ac especfico que les har
frente. Sin embargo, cada tipo de Ac est preformado antes de entrar en contacto por
primera vez con el Ag. Cada linfocito B que se diferencia en la mdula
sea est programado genticamente para sintetizar un solo tipo de Ac, a la espera de
contactar con el Ag especfico.

Tras su primer contacto con el Ag especfico, cada linfocito B se multiplica y diferencia

hasta dar un clon de clulas plasmticas, que fabrican y excretan grandes cantidades
del Ac especfico para el que estaba programado el linfocito original. A este fenmeno
se le conoce con el nombre de seleccin y expansin clonal. En cada individuo existen
cientos de miles, o millones de tipos de linfocitos B, cada uno preparado para originar
un clon productor del correspondiente Ac.

La respuesta de formacin de Ac provocada tras el primer contacto de cada Ag con el

linfocito B se llama respuesta primaria. Este primer contacto confiere al individuo
una memoria inmunolgica, de forma que el cuerpo se encuentra preparado para
afrontar la eventualidad de una segunda infeccin por el mismo agente. En la
respuesta secundaria la formacin de Ac es ms rpida y ms intensa. Ello se
debe a que a partir del linfocito primario que tuvo el primer contacto, aparte del clon de
clulas plasmticas (responsable de la respuesta primaria), se gener en paralelo otro
clon de clulas B de memoria: cuando el Ag entre por segunda vez, hay en el cuerpo
m<s clulas preparadas que las que encontr en la primera ocasin. Adems, estos
linfocitos cebados de memorianecesitan menos divisiones celulares antes de poder
diferenciarse a su vez en clulas plasmticas productoras de Ac.
La memoria inmunolgica es especfica para cada antgeno. Su base es que cada
anticuerpo reconoce un solo antgeno (an ms: como veremos, reconocen porciones
concretas de cada antgeno, denominadas epitopos).

Cmo puede el organismo reconocer tan especficamente molculas "extraas", a las

que ataca, y discriminarlas respecto de sus propias molculas, a las que respeta? En
1960 Burnett y Fenner propusieron un hiptesis que se demostrara b<sicamente
correcta aos ms tarde: El cuerpo desarrolla ontogenticamente un sistema
para distinguir lo propio y evitar reaccionar contra l. Cuando el sistema linfoide se
est desarrollando (desde la fase fetal a la perinatal) van llegando a l componentes
circulantes de las molculas de las distintas partes del cuerpo; as, el sistema inmune
"aprende" a reconocer a estos componentes, y se provoca una incapacidad
permanente para reaccionar contra ellos (se "suprimen" o inactivan los clones de
linfocitos que reconocen "lo propio").

La inmunidad celular es la otra rama de la inmunidad especfica

La inmunidad humoral, por s misma, sera de poca utilidad frente a patgenos

intracelulares, bien sea los estrictos (virus) o facultativos (como losMycobacterium o
muchos protozoos, como las Leishmania). Para ello ha evolucionado un sistema de
inmunidad celular, que est mediatizado por linfocitos T, parecidos citolgicamente a
los B, pero que se diferencian en el timo.
Los linfocitos T reconocen al Ag extrao siempre que est situado sobre la superficie
de clulas del propio organismo hospedador. Pero no pueden reconocer al Ag por s
solo, sino que ste ha de estar en combinacin con una molcula marcadora de la
superficie celular, que le "dice" al linfocito que est en contacto con una clula
"enferma".
El receptor de los linfocitos T (TCR) es diferente a los Ac, aunque ambos comparten
algunos rasgos estructurales.
Las molculas marcadoras de superficie pertenecen al llamado sistema principal de
histocompatibilidad (MHC, de "Major Histocompatibility Complex").
Los linfocitos T, al igual que los B, se seleccionan y se activan combinndose con el
antgeno (aunque necesitan junto a l molculas MHC), lo que provoca su expansin
clonal.
Funcionalmente, existen dos tipos de linfocitos T:

linfocitos T citototxicos o matadores (TC);

linfocitos T colaboradores o coadyuvantes ("helper") (TH);
Los linfocitos T citotxicos son los principales efectores de la inmunidad especfica
celular: destruyen clulas del propio organismo infectadas por virus. En el cuerpo existe
multitud de clones distintos de TC, cada uno de los cuales posee en su
superficie receptores distintos de los Ac, aunque con porciones parecidas a las de
los Ac.
Cada clon de TC est programado para fabricar un solo tipo de receptor, y
reconoce la combinacin de un determinado Ag junto con una molcula MHC de
clase I, situados sobre la superficie de la clula diana enferma. De esta forma, el
TC entra en estrecho contacto con la clula diana, tras de lo cual le da el llamado "beso
de la muerte", consistente en la secrecin de sustancias citotxicas, que la matan.
Tambin secreta interfern gamma (IFN-(), que tiende a reducir la diseminacin del
virus en caso de que ste no induzca bien el IFN-" o el IFN-8.

Los linfocitos T colaboradores no tienen actividad matadora, sino que ocupan un papel
central en el sistema inmune, activando a otras clulas: macrfagos, linfocitos T C y B.

Se unen a una combinacin de {Ag + MHC de clase II} presente en la superficie de

macrfagos que tengan en su interior algn parsito que ha logrado sobrevivir
intracelularmente. (En estos casos, el macrfago, aunque no ha logrado vencer por s
mismo al parsito, ha logrado al menos procesar y enviar a la superficie antgenos del
invasor). Al unirse al macrfago de esta manera, se induce en el T H la produccin de
IFN-gamma y de linfocinas, que activan las funciones del macrfago, provocando la
muerte intracelular del parsito. De nuevo nos encontramos con otro ejemplo de
conexin entre el sistema de inmunidad natural y el adquirido. (El sistema de inmunidad
adquirida, que es muy especfico, y que supone un logro evolutivo "reciente" -apareci
en los vertebrados- aprovecha lo que ya saba hacer el ms primitivo sistema de
inmunidad natural, mejorndolo y confirindole especificidad de modo indirecto; esto es
un buen ejemplo de que la evolucin no suele desechar logros antiguos, sino que los
reutiliza y modifica para integrarlos en sistemas cada vez ms complejos y perfectos).

Los linfocitos TH juegan un papel importante en la activacin y expansin clonal de los

linfocitos B para producir anticuerpos, y de los linfocitos T citotxicos.

Como se ve, la inmunidad innata y la adquirida no se dan independientes una de la

otra, sino que interactan estrechamente entre s en toda respuesta inmune. Como ha
quedado indicado, los macrfagos y otras clulas del sistema innato de inmunidad
intervienen en la activacin de la respuesta inmune especfica (adquirida); por otro lado,
varios factores solubles del sistema de inmunidad adquirida (citoquinas, componentes
del complemento) potencian la actividad de las clulas fagocticas del sistema innato.

Principales caractersticas de las respuestas inmunes especficas:

Especificidad hacia antgenos distintos. De hecho, como veremos oportunamente la

especificidad es hacia porciones concretas del antgeno o partcula extraa,
denominados epitopos o determinantes antignicos. Dicha especificidad es anterior
al contacto con el antgeno, y se produce durante las primeras fases de vida del
individuo, en las que se originan clones diferentes de linfocitos T y B, cada uno con un
tipo de receptor capacitado para enfrentarse ulteriormente a epitopos concretos.
Diversidad: el repertorio de linfocitos en cada individuo es gigantesco (se calcula que
en humanos es al menos de mil millones), y se deriva de variaciones en los sitios de
unin para el antgeno en los correspondientes receptores de clulas T y B. El origen de
dichas variantes reside en un complejo conjunto de mecanismos genticos.
Memoria inmunolgica, de modo que el organismo guarda recuerdo de cada agente o
partcula extraa tras su primer contacto con l. En los ulteriores encuentros del sistema
inmune con cada antgeno se producir una respuesta secundaria ms rpida, ms
intensa y en el caso de los anticuerpos, cualitativamente superior a la respuesta
primaria. La memoria inmunolgica se aprovecha para las tcnicas de vacunacin
activa, que tan importantes son en la profilaxis de enfermedades infecciosas.
Autolimitacin, de modo que la respuesta va decayendo con el tiempo, conforme se
va eliminando el agente extrao, debido a unos sistemas de retrorregulacin que
devuelven el sistema inmune a su nivel basal, preparndolo para nuevas respuestas.
Existen varias patologas por hipersensibilidad, en las que se produce una reaccin
excesiva del sistema inmune, que puede ser lesiva para el hospedador.
Discriminacin entre lo propio y lo ajeno: durante las primeras fases ontogenticas
del individuo el sistema inmune especfico "aprende" a reconocer lo propio, de modo
que se induce un estado de autotolerancia (incapacidad de atacar a los componentes
del propio individuo). Esto supone que lostrasplantes de tejidos procedentes de
donadores genticamente distintos sean rechazados. Los fallos en este sistema de
discriminacin entre lo propio y lo ajeno puede desembocar en enfermedades por
autoinmunidad (ataque a componentes propios).