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Secuencia del Genoma Completo de un

Fowl Aviadenovirus
serotipo 8b aislado en Amrica del Sur

Por: Ray Izquierdo-Lara,a,b,# Katherine Caldern,a Ana Chumbe,a Ricardo Montesinos,a

ngela Montalvn,a Armando E. Gonzlez,b Eliana Icochea,b Manolo Fernndez-Daz,a

A
FARVET S.A.C., Chincha Alta, Ica, Per.
B
Laboratorio de Patologa Aviar, Universidad Nacional Mayor de San Marcos,
Facultad de Medicina Veterinaria, San Borja, Lima, Per.

Introduccin su estructura genmica los FAdVs han sido agrupados en

Los Fowl aviadenovirus (FAdVs) estn distribuidos en todo
el mundo y son los agentes causales de la hepatitis por
cuerpos de inclusin (HCI) en pollos (1). La HCI se caracte-
riza por causar necrosis heptica con cuerpos de inclusin
intranucleares de eosinfilos o de basfilos en hepatocitos
y tasas de mortalidad de alrededor de 10% (2). En base a
5 especies (FAdV-A a FAdV-E) y luego subdivididos en 12
serotipos (FAdV-1 a 8a y -8b a 11), basados en pruebas
de neutralizacin cruzada (1). Todos los serotipos han sido
asociados con brotes de HCI. A pesar de la presencia de
brotes de HCI en Amrica del Sur (3-5), la informacin sobre
las cepas que circulan en este continente es an limitada.

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Metodologa
En enero de 2016, se observ un brote HCI en pollos de
engorde en una granja ubicada en Arequipa, Per. El bro-
te se caracteriz por causar una disminucin en la ganan-
cia de peso, tasas de mortalidad entre 5 y 10% en pollos
jvenes (2-4 semanas) y la presencia de hgados necr-
ticos en las aves afectadas. El virus (FV211-16) fue aisla-
do en clulas LMH a partir de los hgados colectados. El
DNA viral fue secuenciado en el secuenciador Genome
Sequencer FLX (Roche, Mannheim, Alemania). Se utiliz
el programa De Novo Assembler 2.6 para el ensamblaje
de novo. El alineamiento de las secuencias y el anlisis fi-
logentico se realizaron en los programas PRANK y Mega
6.0, respectivamente. Una inoculacin intramuscular de la
cepa FV211-16 en pollos libres de patgenos especficos
(SPF) de 21 das de edad, seguida durante 3 semanas, se
llev a cabo bajo la aprobacin del Comit de Cuidado y
Uso de Animales Institucional de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos (UNMSM), Lima, Per.

Resultados
La secuencia completa del genoma de FV211-16 es de
43,976 nucletidos (nt) de longitud, con un contenido de
G + C de 57,9%. El virus codifica 46 marcos de lectura
abiertos (ORFs) y tiene una organizacin gentica similar
a la de otros FAdV-E (serotipos 6, 7, 8a y 8b). Ambas se-
cuencias repetidas terminales invertidas (ITR) son de 71
nt de longitud y son perfectamente complementarias en-
tre s. Las comparaciones con los otros seis genomas de
FAdV-E disponibles en el GenBank (julio, 2016) mostraron
identidades desde 84,9 hasta 97,1% (Tabla 1). Los anlisis
filogenticos basados en los genomas completos mos-
traron que FV211-16 se agrupa junto con cepas del se-
rotipo 8b (nmeros de accesin: KU517714, GU734104 y
KT862811) (Figura 1), con identidades entre 95,4 y 97,1%,
estando estrechamente relacionado con la cepa de Mala-
sia UPM04217 (6). Alineamientos de amino-cidos revela- tena de Fibra se encuentran en las posiciones 198 (tallo)
ron que la protena Pentn est altamente conservada a y 396 (cabeza).
travs de todos los FAdV-E, con identidades entre 97,8 y
100%. Comparaciones con otros FAdV-E, mostraron que Bajo condiciones experimentales, FV211-16 (1.3x108 uni-
las protenas Fibra y Hexn de FV211-16 tienen 9 y 2 mu- dades formadoras de placa / ave) mostr 0% de mortali-
taciones nicas, respectivamente. Las mutaciones en el dad (0/20) y signos clnicos mnimos (Figura 2). Del mismo
Hexn se encuentran principalmente en las regiones del modo, la necropsia revel lesiones macroscpicas leves
loop-1 y del loop-2, mientras que las mutaciones en la pro- tpicas de HCI en el hgado y en el tracto intestinal.

Conclusin
Este es el primer reporte de una secuencia completa del genoma de un FAdV que circula en Amrica del Sur. Por otro
lado, la presencia de FAdV-8b sugiere que otras cepas pueden estar circulando en nuestro pas. La vigilancia epide-
miolgica debe ser incrementada para ayudar en la prevencin de HCI.

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Nmero de accesin de la secuencia de nucletidos

La secuencia completa del genoma de FV211-16 ha sido depositada en el GenBank bajo el N de accesin KX258422.

Palabras Clave
Hepatitis por cuerpos de inclusin, Fowl Aviadenovirus, secuenciacin de genomas, Fibra, Hexn.

Figura 1. Anlisis filogentico basado en el genoma completo de los aviadenovirus. El rbol fue construido con el mtodo de Maximum
Likelihood, utilizando un bootstrap de 1000 rplicas. La cepa FV211-16 est sealada en rojo. FAdV = Fowl Aviadenovirus;
TAdV = Aviadenovirus de pavo; DAdV = Aviadenovirus de pato; GoAdV = Aviadenovirus de ganso; PiAdV = Aviadenovirus de paloma.

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Tabla 1. Distancias genticas entre la cepa FV211-16 y otras cepas del FAdV-E en base a la secuencia completa del genoma

Cepa Serotipo Nmero de Acc. % Identidad

UPM04217 8b KU517714 97,1

HG 8b NC_014969 96,9
764 8b KT862811 95,4
TR59 8a KT862810 90,2
YR36 7 KT862809 85,7
CR119 6 KT862808 84,9

Figura 2. Lesiones macroscpicas en rganos de pollos no infectados (control) y de pollos infectados con la cepa FV211-16 (imgenes de la
derecha). Los pollos fueron inoculados de manera intramuscular con 0.5 ml de PBS (control) o de FV211-16 (pollos 1 y 2). Las necropsias fueron
realizadas a los 6 das post inoculacin. Se puede observar necrosis y palidez en los hgados de los pollos 1 y 2, mientras que en el pollo control
se observa un hgado sano de color oscuro. En ninguno de los casos se observ sndrome de hidropericardio en el corazn.

Control Pollo 1 Pollo 2

REFERENCIAS 4. Mazaheri A, Prusas C, Vo M, Hess M. Some strains of serotype 4

1. Hess M. Detection and differentiation of avian adenoviruses: a
review. Avian Pathol J WVPA. 2000 Jun;29(3):195206.
2. Mase M, Nakamura K, Minami F. Fowl adenoviruses isolated from
chickens with inclusion body hepatitis in Japan, 2009-2010. J Vet Med
Sci Jpn Soc Vet Sci. 2012 Aug;74(8):10879.
3. Marek A, Gnes A, Schulz E, Hess M. Classification of fowl
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melting-curve analysis of the hexon L1 gene region. J Virol Methods.
2010 Dec;170(12):14754.
fowl adenoviruses cause inclusion body hepatitis and hydropericardium
syndrome in chickens. Avian Pathol. 1998 Jun 1;27(3):26976.
5. Mettifogo E, Nuez LFN, Parra S, H S, Astolfi-Ferreira CS,
Ferreira AJP. Fowl adenovirus Group I as a causal agent of inclusion
body hepatitis/hydropericardium syndrome (IBH/HPS) outbreak in
brazilian broiler flocks. Pesqui Veterinria Bras. 2014 Aug;34(8):7337.
6. Alemnesh W, Hair-Bejo M, Aini I, Omar AR. Pathogenicity of fowl
adenovirus in specific pathogen free chicken embryos. J Comp Pathol.
2012 Apr;146(23):2239.

AVISO: Este documento es una traduccin no oficial hecha por FARVET S.A.C. con el objetivo de facilitar la informacin a personas de habla
hispana. La traduccin est basada en el documento original Complete Genome Sequence of Fowl Aviadenovirus Serotype 8b Isolated in South
America de la revista Genome Announcements 4(5). pii: e01174-16. doi: 10.1128/genomeA.01174-16. El artculo original se encuentra en el
siguiente link: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27795284

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