Biologia I.veloso Modulo 1-4 Medio

Colegio Alberto Blest Gana 1
Jvenes emprendedores para el siglo XXI

Coordinacin Acadmica
SUBSECTOR DE APRENDIZAJE: BIOLOGIA

NOMBRE MDULO DE APRENDIZAJE: INFORMACIN GENICA Y PROTEINAS
NIVEL: 4MEDIO
PROFESORA: IVETTE VELOSO
OBJETIVOS MODULO DE APRENDIZAJE:
Describir los experimentos clsicos (Friedrich Griffith, Oswald Avery, Hershey y Chase) que revelaron al DNA como la molcula que
contiene la informacin gentica y reflexionar sobre la simpleza de su composicin qumica en comparacin con las protenas.
Explicar las caractersticas ms elementales y el hecho que el DNA es un polmero de estos nucletidos (base nitrogenada, azcar:
desoxirribosa, fosfato) unidos con una orientacin bien definida, llamada 3 5.
Describir el modelo de la doble hebra del DNA de Watson y Crick (bases pirimidicas se unen a bases pricas) y su relevancia en la
replicacin y transcripcin del material gentico.
Identifica al nucletido como la subunidad que se repite y forma al ADN.
Reconoce que cada nucletido consiste en un grupo fosfato unido a un azcar de 5 carbonos que a su vez se une a una base
orgnica. El fosfato le da carcter cido a los nucletidos. Las bases generalmente se abrevian A, G, C, y T. Por conveniencia, esta
abreviacin de una sola letra se usa cuando se escriben las largas secuencias de nucletidos en el DNA.
Identificar al ARN como el candidato intermediario entre el gen y la protena, lo que se pudo establecer a travs del experimento de
pulso y caza.
Explica el dogma central de la biologa molecular, que plantea que la informacin gentica contenida en el ADN es transcrita en forma
de ARN y traducida en protenas.
Explicar el proceso de replicacin del ADN, las enzimas que participan en este proceso, as como las hiptesis propuestos sobre los
mecanismos de replicacin (Conservativa, Semiconservativa, Dispersa).
Explicar el proceso de transcripcin as como las enzimas que participan en dicho proceso.
Cdigo gentico. Explicar el proceso de traduccin sntesis de protenas as como las enzimas involucradas en dicho proceso.
I. En busca del soporte fsico de la herencia

Si bien el perodo entre principios de siglo y la Segunda Guerra Mundial (1900 a 1940) ha sido considerado la edad de oro de la
gentica, los cientficos an no haban determinado que, en el ADN y no en las protenas, se encontraba el material hereditario. Sin
embargo en esa poca se realizaron muchos descubrimientos genticos y se estableci la relacin entre gentica y evolucin.
El ADN fue aislado por Friedrich Miescher en 1869 de esperma de salmn y de pus de heridas abiertas. Dado que la encontr
solamente en los ncleos, Miescher denomin a este compuesto nuclena. Posteriormente se lo cambi a cido nucleico y por
ltimo a cido desoxirribonucleico (ADN).
Robert Feulgen, en 1914, describi un mtodo para revelar por tincin el ADN, basado en el colorante fucsina. Se encontr,
utilizando este mtodo, la presencia de ADN en el ncleo de todas las clulas eucariotas, especficamente en los cromosomas.
Durante los aos 20, el bioqumico P.A. Levene analiz los componentes del ADN. Encontr que contena cuatro bases
nitrogenadas: citosina, timina, adenina, y guanina; el azcar desoxirribosa; y un grupo fosfato.
El concluy que la unidad bsica (nucletido) estaba compuesta de una base pegada a un azcar y que el fosfato tambin estaba
pegado al azcar y, lamentablemente tambin concluy errneamente que las bases estaban en cantidades iguales y, que un
tetranucletido era la unidad repetitiva de la molcula.
Sin embargo queda su idea de la estructura del nucletido el cual es realmente la unidad fundamental (monmero) del cido
nucleico (polmero).
1. Descubrimiento del Principio de transferencia

En 1928, un bacterilogo britnico llamado Frederick Griffith intentaba desarrollar una vacuna contra el neumococo, la
bacteria causante de la neumona.
Este investigador trabaj con dos cepas para este propsito: una de las cepas forma colonias lisas y cada bacteria est
encapsulada por una cubierta de naturaleza glucosdica. La otra cepa forma colonias rugosas y las clulas carecen de cpsula
envolvente. La presencia o ausencia de cpsula es un rasgo hereditario.
Lo ms curioso en el trabajo de Griffith era el hecho de que las bacterias encapsuladas causaban la muerte a las ratas a
las cuales se les inyectaba. Las bacterias de tipo "sin cpsula" no les causaban dao.
Un resultado inslito se produjo cuando las ratas fueron inyectadas con una mezcla de neumococo sin cpsula y con
neumococo encapsulados, estos ltimos muertos por accin del calor. Las ratas enfermaron y murieron, y lo ms sorprendente de
todo fue que de las ratas muertas se recuperaron bacterias vivas encapsuladas.
Griffith explic el fenmeno de la "transformacin bacteriana" afirmando que "algo" de las clulas encapsuladas muertas
haba convertido a las clulas inofensivas vivas, en clulas encapsuladas vivas; y este algo pasaba de generacin en generacin.
En 1944: O. Avery, C.Macleod y M.McCarty se propusieron descubrir la naturaleza del principio transformador.
-Repitieron los experimentos de transformacin en un tubo de ensayo.
-Descubrieron que podan convertir la cepa R en cepa S simplemente aadiendo un extracto sin clulas de la cepa S a la cepa R.
Pero qu haba en este extracto sin clulas capaz de convertir la cepa R en cepa S?
Era una protena?
Era un cido nucleico?
Era un lpido?
Para poder llegar a una conclusin, tomaron el extracto sin clulas y lo trataron con varias enzimas para probar si segua siendo
efectivo a la hora de transformar R S.
1) Trataron el extracto sin clulas con proteasas (que cortan protenas) el extracto segua siendo activo, por lo que no se trataba
de una protena
2) Trataron el extracto sin clulas con ribonucleasa (corta el ARN) el
extracto segua siendo activo, por lo que no era el ARN.
3) Trataron el extracto sin clulas con deoxiribonucleasa (corta ADN)
NO era activo, DEBA SER EL ADN.
La naturaleza del material que transformaba la cepa R en cepa S era

ADN (cido desoxiribonucleico).
A pesar de la prueba que supusieron estos ensayos, la gente no estaba
convencida de que el ADN constituyese el material gentico.
Por qu? Porque el ADN se consideraba una molcula poco
interesante. Las protenas eran consideradas mucho ms interesantes;
haba muchos tipos de protenas!
2. Estructura del ADN

El ADN est formado por 3 componentes:
a) Azcar (una pentosa): Los carbonos corresponde a las puntas del pentgono (excepto el oxgeno) y por conveccin se utilizan
nmero para hacer referencia a ellos. Por ejemplo, en el caso de la desoxirribosa al carbono 2 se une un hidrgeno, al carbono 1 se
une la base nitrogenada y para unir a otro nucletido se hace al carbono 3. El carbono 5 est fuera del anillo (pentgono)
Azcar + base = nuclesido

b) Base: en el ADN hay 4 tipos: La base est ligada al carbn C1 del azcar.
Bases del ADN

Purinas: Adenina (A) y Guanina (G).
Piramidinas: Citosina (C) y Timina (T).
c) Trifosfato: 3 grupos fosfato

Azcar + base + grupo fosfato = nucletido
La polimerizacin de los nucletidos:

El ADN est compuesto de monmeros denominados desoxiribonucletidos trifosfato (dNTPs). Los dNTPs estn ligados entre s
mediante uniones de azcar-fosfato, que constituyen el esqueleto del ADN:
El azcar (la desoxiribosa) est ligada covalentemente al grupo fosfato a travs de una unin fosfodiester.
Esqueleto azcar-fosfato del ADN:
ADN: cido desoxiribonucleico
3. Virus bacterianos y el experimento de Hershey-Chase

1952: El rol gentico del ADN recibi ms muestras de apoyo tras los experimentos realizados por A. Hershey y M. Chase con un
virus que infecta a las bacterias E.coli.
Estos virus se denominan bacterifagos (virus o patgenos viriones (partculas de virus). La clula se va lisando
que infectan a las bacterias). conforme se va liberando la descendencia del virus,
resultando as la muerte celular.
Cmo tiene lugar el proceso de infeccin?
Inyecta el bacterifago su ADN, su cpside proteica o
ambos?
Para poder identificar qu material se introduca en la clula,
era necesario distinguir entre el ADN y las protenas.
Para encontrar la ubicacin del ADN y de la protena en el
interior de la clula, emplearon radioistopos.
- Utilizaron el istopo 32P para marcar el ADN viral (slo
seala el ADN, porque el fsforo no est presente en las
El material gentico del virus se almacena en el interior de
protenas).
una cpsida proteica.
- Utilizaron el istopo 35S para marcar la protena viral (slo
Cuando el fago infecta las bacterias, inyecta su ADN viral en
seala la protena, porque el azufre no est presente en el
el interior de la clula. El ADN se replica y se crean nuevos
ADN).
Las partculas de virus, ms pequeas que las bacterias, permanecieron, tras la centrifugacin, o bien en la parte lquida o en el
sobrenadante de la mezcla del tubo de ensayo. Las bacterias, por el contrario, y debido a su mayor peso, formaron una pequea
aglutinacin en el fondo del tubo de ensayo.
Resultado del experimento:

1) La mayor parte del marcador 32P (ADN del fago) se encontr en el interior de las clulas bacterianas.
2) La mayor parte del marcador 35S (protena del fago) se encontr en el sobrenadante.
Conclusin: Ya que en el interior de las clulas se encontr principalmente ADN, concluyeron que el ADN era el material gentico.
Se encontr una cierta cantidad de marcador 35S asociado a las clulas bacterianas, por lo que algunas personas creyeron que el
material gentico era la protena que estaba pegada a la clula.
PERO, en general, la mayora de la gente crey que el ADN era el material gentico.
Estos experimentos reforzaron las nociones propuestas anteriormente por Avery, MacLeod y McCarty.
4. La estructura del ADN

Los estudios realizados por E.Chargaff (1950) y M.Wilkins (principios de los aos cincuenta) permitieron obtener alguna informacin
acerca de la naturaleza del ADN.
A partir de los resultados de estos estudios, J.Watson y F.Crick dedujeron la estructura del ADN en 1953.
Modelo de la estructura del ADN: 1953 J.Watson y F.Crick Enlaces C con 3 puentes de hidrgeno (C=G)
1) El ADN consiste en 2 polinucletidos antiparalelos y 4) Hay 10 pares de bases (pb) en cada vuelta de hlice = 34
complementarios que se envuelven mutuamente formando ngstroms
una doble hlice dextrgira.
2) Las bases de purina y pirimidina se sitan en el interior de **El aspecto ms importante del modelo de ADN de Watson-
la hlice mientras que el esqueleto azcar-fosfato se ubica Crick fue el emparejamiento de bases encontrado en el ADN.
en el exterior de la hlice. Las purinas siempre estaban emparejadas con las
3) Las dos cadenas se mantienen unidas mediante puentes pirimidinas, pero la A slo se poda emparejar con la T y la G
de hidrgeno, formados especficamente entre las bases: slo se poda emparejar con la C debido a los requisitos de
los puentes de hidrgeno.
Enlaces A con T 2 puentes de hidrgenos (A=T)

Pares de bases encontradas en el ADN:

- Antes (en 1950, con anterioridad a los descubrimientos de
Watson y Crick), E.Chargaff haba analizado el contenido de
purinas y pirimidinas de varias cadenas de ADN de fuentes
diferentes: levaduras, bacterias, humanos, etc.
- Chargaff descubri que el porcentaje de A era siempre igual

al de T, y que el porcentaje de G era siempre igual al de C.
Reglas de Chargaff
%A=%T
%G=%C
Pero Chargaff no supo explicar sus descubrimientos. Hasta

que Watson y Crick propusieron su modelo de la estructura
del ADN, las reglas de Chargaff no tuvieron sentido.
Entonces, ahora que ya se haba deducido el modelo del ADN, qu es lo que haca del ADN algo realmente emocionante?
Era el ADN el secreto de la vida? Cmo transmite uno la herencia a los hijos?
El conocimiento de la estructura del ADN permiti que se comenzasen a elaborar respuestas para algunas de estas preguntas.
Cada hebra de la doble hlice de ADN es una copia complementaria de la otra hebra.
El modelo de doble hlice del ADN sugera la existencia de un mecanismo para la replicacin (copia) del ADN.
La estructura del ADN (dos hebras complementarias de ADN) explica:

1) El proceso de replicacin del ADN : Cada hebra acta de molde para el copiado: acorde con el modelo de herencia
2) Las mutaciones: Las mutaciones (cambios en la secuencia de ADN) seran el resultado de errores en el proceso de replicacin
del ADN (la insercin de una base no complementaria en el copiado del ADN).
5. La puesta a prueba del modelo de Watson-Crick

Durante la replicacin del ADN, cada hebra sirve de molde para la sntesis de la otra hebra. Cada nueva molcula de ADN consistir
de una hebra parental (vieja) y una hebra hija (nueva).
Si cada hebra sirve de molde para la replicacin del ADN, la replicacin del ADN debera tener lugar mediante un mecanismo
semiconservativo: esto es, cada nueva molcula de ADN est compuesta de una hebra nueva y otra vieja.
El mecanismo semiconservativo de la replicacin del ADN fue propuesto por Watson y Crick.
Se propuso otro modelo: el del la Replicacin Conservativa.
1957 M. Meselson y F. Stahl queran confirmar si la replicacin del ADN tena lugar mediante un mecanismo semiconservativo.
Para ello, utilizaron un istopo pesado (15N) de 14N (nitrgeno).
Experimentos:
1) - Cultivaron bacterias E. Coli en un medio que contena 15NH4Cl como nica fuente de nitrgeno.
- El 15N se incorpora a las bases de pirimidina y purina; por lo tanto, el ADN pasa a ser ms pesado de lo habitual.
- Cultivaron muchas generaciones de bacterias en 15N para que las hebras de ADN contuviesen 15N. Aislaron una parte de este ADN
pesado.
2) Tomaron las bacterias cultivadas en 15N y las transfirieron a un medio que contena 14NH4Cl. El ADN fue aislado en varias
ocasiones a partir de la nueva ubicacin de la bacteria en el medio 14N. Cultivaron las bacterias durante dos generaciones ms y
aislaron el ADN.
3) Utilizaron la tcnica denominada centrifugacin por gradiente de densidad, que permite separar entre s molculas de ADN segn
su densidad.
Centrifugacin por gradiente de densidad

El ADN est mezclado con una solucin de cloruro de cesio (CsCl). La mezcla de CsCl y ADN se centrifuga a una fuerza G alta en
un tubo de centrifugacin. El ADN dejar banda en el gradiente de CsCl (formada por la centrifugacin) a su densidad
correspondiente.
Se centrifug una pequea cantidad del 15N / 15N ADN
y las diferentes muestras de ADN tomadas de las
generaciones 1 y 2, en el gradiente CsCl. Tras la
centrifugacin de las diferentes muestras:
Por qu razn forma el ADN una banda en una

posicin determinada del gradiente CsCl?
El ADN se sedimenta formando una capa en la
posicin del tubo en la cual la densidad de la solucin
de CsCl es igual a la del ADN.
Los experimentos de Meselson y Stahl demostraron
que el ADN se replica siguiendo un mtodo
semiconservativo.
** La ausencia de la banda en la posicin pesada del

gradiente tras 1 generacin contradeca el mtodo conservativo; por lo tanto, la replicacin era semiconservativa.
** El modelo de Crick y Watson era correcto la replicacin del ADN mediante un mtodo semiconservativo: 1 hebra de cada
molcula de doble hebra de ADN se conserva en la nueva molcula hija de ADN.
El flujo de la informacin gnica

En los aos veinte se encontr una molcula similar al ADN, tambin un
cido nucleico, que tena unidades similares pero con diferencias en el
azcar y en una de sus bases nitrogenadas, que se llam cido
ribonucleico (ARN). Esta molcula apareca en mayor concentracin en
aquellas clulas que mostraban una alta actividad de sntesis de
protenas. Lo interesante del ARN era que a diferencia del ADN
exclusivamente
nuclear, pareca
encontrarse tanto en
el ncleo como en el
citoplasma de la
clula. Teniendo
presente que las
protenas se
sintetizan justamente
en el citoplasma, se
postul que podra
servir de mediador Fig 4
entre el ADN y la
sntesis proteica. En base a esta hiptesis, un grupo de investigadores ide un
experimento que aprovecha la composicin particular que tiene el ARN: en vez
de la base nitrogenada timina, posee uracilo.
En el experimento se incubaron clulas con uracilo marcado radiactivamente con
tritio (un istopo del hidrgeno) durante 60 minutos, lo que se llama "un pulso".
Luego de retirar el nucletido radiactivo, se reemplaz con uracilo normal,
incubando por dos horas ms. Las clulas se observaron mediante autoradiografa, una tcnica que permite localizar marcas
radiactivas, en dos momentos: inmediatamente tras el pulso radiactivo y luego de las dos horas de incubacin con los nucletidos
normales. En la figura 4 se muestran los resultados.
Tal como muestran las autoradiografas, el uracilo (y por tanto el ARN) migra desde el ncleo hacia el citoplasma. Con esto se
confirma la posibilidad que el ARN sirve de intermediario entre el gen del ADN y la sntesis de protenas. Con posterioridad, a esta
molcula se le llam ARN mensajero o ARNm.
De esta manera, el flujo de la informacin gnica se podra representar de la siguiente manera:
Figura 5. El modelo de la accin gnica: el dogma central de la biologa molecular:

El ADN contiene la informacin gentica en forma de un cdigo de cuatro letras (A,T,G,C)
Un tipo de cido ribonucieico llamado ARN mensajero toma esta informacin de la molcula de ADN (transcripcin) y la transporta
hasta los ribosomas. En estos organelos el mensaje portado por el ARN mensajero es
traducido expresndose en forma de polipptidos (traduccin).
El modelo de la accin gnica, esquematizado en la figura 5, llamado el dogma central de

la biologa molecular, contiene varias ideas importantes que es necesario subrayar.
El ADN controla el fenotipo de cada individuo a travs de la formacin de protenas que
actan desencadenando las reacciones bioqumicas propias de la especie a la que
pertenece el ADN.
La formacin de determinada protena implica la ordenacin de los aminocidos que la
constituyen en una secuencia determinada.
La informacin codificada en la molcula de ADN se transmite al ARN mensajero
(transcripcin) que la lleva al sitio de sntesis proteicas (ribosomas). ARN
Una vez en los ribosomas, el cdigo es traducido fielmente, formndose la protena m
indicada (traduccin).
Observa cuidadosamente la figura a la derecha que seguramente te resulta familiar.
Ella te permitir relacionar el proceso de transcripcin y traduccin con las estructuras
celulares en que ocurren (temas tratados en 2 medio).
Transcripcin
La expresin gnica se concretiza por la transformacin de la informacin gentica desde molculas de ADN a molculas de ARN y
desde estas hasta los polipptidos correspondientes.
Las molculas de ARN son sintetizadas usando como molde a segmentos especficos de ADN, en la reaccin de polimerizacin que
es catalizada por la enzima conocida como ARN polimerasa.
Existen 3 clases principales de ARN, todas ellas participan en la sntesis de protenas: ARN ribosomal (rRNA), ARN de
transferencia (tRNA) y ARN mensajero (mRNA): todos ellos son sintetizados a partir de moldes de ADN en un proceso denominado
transcripcin.
En 1958, Francis Crick resumi la relacin entre ADN, el ARN y las protenas en un diagrama de flujo que nombr como el DOGMA
CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR:
"el ADN dirige su propia replicacin y su transcripcin a ARN, el cual a su vez dirige su traduccin a protenas"
Actualmente, dogma significa un punto fundamental de

una doctrina religiosa o filosfica, cuando Crick formul
es de la Biologa molecular, se refiri a una idea para la
cual no hay evidencia razonable.
Papel del ARN en la sntesis de protenas.

Las protenas que han de construirse, estn
especificadas en el mRNA y se sintetizan en los
ribosomas. Esta idea surge del estudio de la induccin
enzimtica, que es un fenmeno en el cual las bacterias
varan sus velocidades de sntesis de protenas en
respuesta a cambios en el ambiente. Este proceso
ocurre como consecuencia de la regulacin de la
sntesis de mRNA por protenas que se unen
especficamente a los templados para el mRNA en el
ADN.
Debemos tener en cuenta antes de sumergirnos en el proceso de transcripcin:

A) Los precursores en la sntesis de ARN (unidades estructurales) son cuatro ribonucletidos trifosfatados: rATP; rCTP; rGTP; rUTP
B) La secuencia de bases, del ARN a polimerizar, esta determinada por medio de la secuencia de bases de la molcula de ADN
utilizada como molde para su sntesis. He ah que se la denomine Cadena Molde de ADN.
C) La cadena de ARN crece en direccin 5 3. Esta direccin coincide con la sntesis de ADN.
D) La ARN polimerasa, a diferencia de la ADN polimerasa, es capaz de iniciar su sntesis sin la presencia de ningn tipo de
molcula cebadora.
Etapas en la sntesis del ARN mensajero

Con la finalidad de ordenar el estudio de la transcripcin, dividiremos la misma en cuatro etapas fundamentales:
1 etapa- UNIN de la ARN polimerasa al ADN
2 etapa- INICIACIN de la sntesis
3 etapa- ELONGACIN de la cadena de ARN mensajero
4 etapa- TERMINACIN de la sntesis y liberacin de la cadena de ARNm.
Caractersticas de la ARN polimerasa procariota

La ARN polimerasa es una de las enzimas ms grandes que se conoce. Consta de cinco sub-unidades: dos alfa (), beta (), beta
prima () y sigma ( ). La enzima completa es denominada Holoenzima y se divide en dos componentes principales:
La enzima central, denominada Core, formada por las sub unidades 2 , y
El Factor Sigma (el polipptido )
Los nombres indican que solamente la Holoenzima tiene la capacidad de unirse a la cadena molde de ADN e iniciar la transcripcin;
pero una vez realizada esta, el factor es liberado, dejando que el Core contine con la elongacin. En definitiva, es el factor
el que le da la capacidad a la ARN polimerasa para poder iniciar la sntesis del ARN mensajero en el sitio apropiado.
La Holoenzima reconoce un sitio de unin especfico en el ADN, este sitio es denominado Promotor.
Como consecuencia de lo dicho, la ADN polimerasa puede encontrarse en dos estados:

1) Un estado apropiado para la unin con el Promotor: estado de iniciacin u Holoenzima.
2) Un estado apropiado para la elongacin: Core de la enzima
La unin de la Holoenzima con el promotor, determina el Complejo Promotor Abierto, y esto es posible
gracias a la presencia del factor
La ARN polimerasa es lo bastante grande como para tomar contacto con muchas bases del ADN, as la enzima cubre
aproximadamente unas 60 pb (pares de bases), aunque el segmento de ADN desenrollado, y que sirve como molde, comprende
nicamente unos 17 pb.
El Promotor Procariota: la seal de inicio

Se mencion anteriormente que la ARN polimerasa se una a un sitio especfico del ADN denominado Promotor. La enzima es
capaz de reconocer este sitio del ADN y,convenientemente, abrir localmente las cadenas de ADN para poder leer la cadena molde.
Es de esperarse entonces que, el sitio de contacto con la Holoenzima tuviese regiones comunes a todos los Promotores.
Se ha comprobado que estos sitios mencionados contienen secuencias de bases comunes, a las que se las ha denominado
Secuencias de Consenso.
Por mera convencin entre los cientficos, se
considera que el sentido de la transcripcin de un
gen determinado es hacia la derecha. Al punto en
el cual se inicia este proceso se lo denomina
punto 0. Con nmeros negativos se sealan las
bases ubicadas a la izquierda del punto 0. Con el
mismo criterio, se sealan con nmeros positivos
a las bases ubicadas a la derecha del punto 0.
La secuencia de consenso ms importante y mejor

estudiado, comprende seis bases y su centro est ubicado a diez bases a la izquierda del punto de inicio (-10). La secuencia de
consenso es TATAAT y se la denomina TATA box o Caja Pribnox. Esta caja es responsable de orientar a la ARN polimerasa en la
direccin de sntesis de ARN y es la regin en la cual la doble hlice se abre para formar el Complejo Promotor Abierto. El hecho de
que la TATA box contenga las bases A-T no es mera casualidad, ya que estas se unen con sus complementarias por medio de dos
enlaces del tipo Puente de Hidrgeno, lo cual implica un menor gasto de energa para la apertura del ADN.
INICIACIN de la sntesis del ARN mensajero

La iniciacin se produce mediante la unin de la ARN polimerasa (Holoenzima) al ADN de doble cadena. Para que la cadena molde
est disponible para el apareamiento de bases con los
ribonucletidos, las dos cadenas de ADN deben separarse. El
desenrollamiento es local y se produce cuando la Holoenzima
contacta con la TATA Box.
Una vez que el complejo promotor se encuentra abierto, la
ARN pol. Comienza la sntesis. La fase de iniciacin no se
completa hasta que se hallan polimerizado los primeros seis
ribonucletidos.
ELONGACIN de la cadena:
Despus que se han colocado los primeros seis
ribonucletidos, la ARN polimerasa sufre un cambio en su
conformacin, perdiendo la subunidad . Se contina la
sntesis en el estado de Core anteriormente descrito.
El
Core se mueve a lo largo del ADN colocando los ribonucletidos

complementarios a la cadena de ADN molde, abriendo la hlice a medida que
se desplaza. Los ribonucletidos se unen al extremo 3 de la cadena de
ARN en crecimiento, formndose un Hbrido ARN-ADN en la regin
desenrollada, el cual se mantiene estabilizado mediante enlaces puente de
Hidrgeno. El hbrido tiene una longitud aproximada de 12 pb y el nuevo
ARN es liberado de estas uniones cuando el ADN recupera su estado de
doble hlice por desplazamiento del Core.
TERMINACIN y LIBERACIN del ARN sintetizado

La terminacin ocurre en una secuencia determinada del ADN, denominada Secuencia Terminadora. En este punto, la enzima deja
de aadir los ribonucletidos a la cadena de ARN en crecimiento, liberando el producto terminado y disocindose del ADN.
La terminacin requiere que todos los enlaces Puente de Hidrgeno, que mantenan al Hbrido ARN ADN, se rompan volvindose
a reconstituir el ADN dplex.
Las secuencias terminadoras muestran las siguientes similitudes:
i) Todas contienen secuencias Palindrmicas justo antes del punto de terminacin. El palndromo est caracterizado por poseer
repeticiones inversas conteniendo un segmento central no repetido (ej. ATCATCGACTA).
ii) La secuencia palindrmica contina con una secuencia de pares A-T, las cuales producen en el ARN mensajero una secuencia de
6 a 8 Uracilos en el extremo transcripto.
La secuencia de Uracilos suministra la seal que

permite a la ARN polimerasa disociarse del ADN molde.
Transcripcin en Clulas Eucariotas

La estructura de los ARNm y el proceso de transcripcin en las clulas eucariotas, es similar a lo expresado anteriormente para las
clulas procariotas. Sin embargo, debemos considerar las siguientes diferencias:
a) Las clulas eucariotas poseen tres clases de ARN polimerasas (I, II y III), las cuales se utilizan para sintetizar los distintos tipos
de ARN existentes.
b) Los extremos 3 y 5 de los ARNm estn modificados. En el caso del extremo 5 encontraremos una estructura denominada CAP
y, en el correspondiente extremo 3, se encuentra adherido una larga secuencia de nucletidos cuya base nitrogenada es la Adenina
(Cola Poly A)
c) Las molculas de ARNm, luego de ser sintetizas, son modificadas. Los transcriptos primarios eucariotas sufren un proceso por
el cual determinadas secuencias (Intrones) son eliminadas.
d) Los ARNm eucariotas son Monocistrnicos. Las ARN polimerasas eucariotas:
Ya se ha mencionado que, en las clulas del tipo
Eucariota, encontramos tres tipos de ARN
polimerasa las cuales se denominan: ARN
polimerasa I, ARN polimerasa II y ARN polimerasa
III. Sus composiciones en sub unidades son
complejas y aun no se conoce en exactitud la
funcin de cada una de estas sub unidades. Lo que
s se conoce con exactitud, es la localizacin y el
producto de cada una de ellas.
El ARN mensajero en Eucariotas:

Si bien la sntesis y estructura de los ARN mensajeros en Eucariotas es similar a las Procariotas, deben mencionarse las siguientes
diferencias:
a) Ambos extremos estn modificados, el 5 presenta una estructura denominada CAP (caperuza) y el 3 contiene una secuencia de
cido Poliadenlico denominada Cola Poly A.
b) La molcula que sirve de molde para la sntesis de protena (ARNm maduro) es ms corta que el ARN mensajero recin
sintetizado (Pre ARN mensajero). Esto se debe a que los ltimos sufren un proceso de eliminacin de secuencias no codificantes.
Dicho proceso se denomina Splicing.
Modificaciones de los extremos del ARN mensajero Eucariota :

El extremo 5 contiene dos nucletidos conectados que siempre estn metilados (-CH3).
La reaccin de la incorporacin del CAP ocurre inmediatamente despus de iniciada la transcripcin y siempre precede a cualquier
modificacin que se le realice al ARN m precursor. El CAP tendra la funcin de proteger al ARNm de la degradacin, con lo cual
aumenta su vida media.
En el extremo 3, segn se mencion antes, los ARNm Eucariotas contienen una secuencia de 20 a 200 nucletidos que poseen
como base nitrogenada a la Adenina. La secuencia Poly A no est codificada en el ADN, sino que es aadida al ARN despus de
finalizada la transcripcin. La funcin de la Cola Poly A es la de aumentar la estabilidad de los ARN m.
Maduracin del ARNm

El proceso de maduracin del ARNm solo ha sido observado en eucariontes, en donde los ARNm recin sintetizados o transcritos
forman complejos con protenas nucleares, ribonucleoprotenas, que pueden desempear una funcin bsica en el mecanismo de
cortar y empalmar el ARN y, por lo tanto, regular la
expresin gnica.
De acuerdo a esto se puede establecer que el

ARNm recin transcrito no es igual al ARNm que se
usa finalmente para formar las protenas. El ARNm
original posee dos zonas claramente definidas: una
zona donde existen segmentos que no participan en
la sntesis de protenas, llamados intrones, que son
eliminados por las enzimas de restriccin que se
encuentran en el ncleo, que funcionan como
verdaderas tijeras y cortan el ARNm exactamente en
el lugar correcto.
Las otras zonas de la cadena contiene los
segmentos que participan en la sntesis de
protenas, que se llaman exones, y que son unidos
entre s por enzimas presentes al interior del ncleo. Por lo tanto, existe un sofisticado sistema de corte de intrones y empalme de
exones, que finalmente determina una molcula de ARNm madura, ms corta que la original, pero con capacidad de traduccin.
Existen otras modificaciones? Una de las ms importantes es la poliadenilacin. Esta consiste en agregar una larga secuencia de
nucletidos adenina, que se denomina cola poliA. Esta cola es una seal para permitir la exportacin del ARNm al citoplasma.
Sntesis de Protenas
La secuencia de bases de un gen es colineal con la secuencia aminoacdica de su producto polipeptdico. El cdigo gentico es la
relacin entre la secuencia de bases en el ADN (o su ARN transcrito) y la secuencia de aminocidos en una protena.
Los aminocidos son codificados por un grupo de tres bases (llamadas codones) comenzando de un punto determinado (ver fig.
12).
Se pueden definir cuatro caractersticas generales del cdigo gentico:
1) El cdigo no requiere de puntuacin ni seal alguna para indicar el final de un triplete y el comienzo del siguiente, es decir el
cdigo gentico no tiene comas. nicamente requiere de una molcula de mARN que este ubicada correctamente para su
lectura (53) adems de contar con el codn de inicio, AUG (en procariontes codifica la incorporacin de N-formilmetionina
y en eucariontes metionina).
2) 61 de 64 codones especifican algn aminocido en particular. De esta forma, para la mayora de los aminocidos hay ms
de un triplete (o codn). En otras palabras, el cdigo es DEGENERADO. Codones que especifican el mismo aminocido son
llamados sinnimos. La mayora de los sinnimos difieren solamente en la ltima base del triplete. Esto presenta una
ventaja, debido a que la mayora de las mutaciones conducen a la formacin de tripletes sinnimos no provocando un cambio
en la secuencia peptdica.
3) La tercera base de los tripletes es menos especifica que las dos primeras. La degeneracin implica solamente la tercera base
en la mayora de los casos (excepto para Arginina, Leucina y Serina).
4) 3 de los 64 tripletes no codifican para aminocido alguno y estos son UAG, UAA y UGA llamados originalmente codones sin
sentido que constituyen las seales de termino de la sntesis de la cadena polipeptdica.
La sntesis de protenas tienen lugar en la superficie de los ribosomas. Dicha sntesis requiere que los aminocidos sean
activados en el citoplasma por la accin de aminoacil- tARN-sintetasas, que catalizan la formacin de steres de
aminocidos de tARN homlogos (unin de un aminocido con su tRNA respectivo) y en forma conjunta en el proceso de activacin
se hidroliza ATP produciendo AMP y pirofosfato. Las aminoacil-tARN-sintetasas son altamente especficas tanto para el
aminocido como para su correspondiente tARN.
Aminocido + ATP aminoacil AMP + PPi

Aminoacil- AMP + tARN aminoacil-tARN + AMP
Aminocido + ATP + tARN aminoacil tARN + AMP + PPi

El aminocido se une al extremo 3 del tARN que posee la secuencia CCA, mientras que el anticodn esta a 80 de distancia en
el otro extremo (ver fig. 13).
Sitio de unin al
aminocido
3
A
C
5 C
Loop DHU Loop TC
anticodn
Figura 13. Estructura de hoja de trbol caracterstica de un tARN
El ARN mensajero reconoce el anticodn de un tARN en vez de reconocer el aminocido. Un codn en mARN se aparea con el
anticodn en el tARN. Algunos tARNs reconocen ms de un codn porque la tercera base que se aparea de un codn es menos
especifica que las otras dos ( ver cdigo gentico).
Los Ribosomas.
La sntesis de protena tiene lugar en los ribosomas, que estn formados por una subunidad mayor y una menor, cada una de las
cuales estn compuestas de dos tercios de ARNs y un tercio de protenas. En E. coli, por ejemplo, el ribosoma 70 S ( 2.500
kdal) est formado por una sub-unidad de 30 S y una de 50 S. En cambio en eucariontes el ribosoma es de 80 S, formado por uno
de 40 S y uno de 60 S.
Hay tres fases en la sntesis de protena: inicio, elongacin y trmino.
CADENA NASCIENTE
40 S
5' 3'
STOP
INICIO
INICIO
ELONGACION TERMINO
40 S 60 S
60S
40 S
60 S
Figura 14. Ciclo de la sntesis de protena

Inicio.
En procariontes el ARN mensajero, la formilmetionina- tARN y la sub-unidad ribosomal 30 S, forman el complejo iniciacin de la
sntesis (en cambio para eucariontes este complejo est formado por mARN, metionina-tARN y la sub-unidad 40 S, ver fig. 14).
La seal de inicio en el mARN es AUG y esta precedida por una secuencia rica en purina que puede aparearse con el rARN 16 S
de la sub-unidad 30 S del ribosoma. La subunidad mayor ribosomal de 50 S se une a este complejo para formar un complejo de
iniciacin de 70 S, (ver fig. 15) que esta listo para la siguiente fase (elongacin). En el proceso de iniciacin estn participando
una serie de factores protecos que son descritos en la Tabla IV.
mARN
fMet.tARNMet
30S
IF-1 IF-3 IF-1 IF-3
IF-2 GTP
IF-2GTPfMet-tARN Met GDP +Pi
IF1
IF2
50 S
Figura 15. Fase de inicio de la sntesis de protenas en

bacterias (procariontes). 30S y 50S son la subunidad menor
y mayo del ribosoma respectivamente. IF, son los factores 30 S
proteicos del inicio
Complejo de inicio 70 S
Elongacin.
El ciclo de elongacin consiste en (ver fig. 16) :
1) La unin de aminoacil-tARN (reconocimiento del codn).
2) Formacin del enlace peptdico.
3) Transposicin.
Tambin durante la elongacin se requiere la presencia de factores proteicos que son descritos en la Tabla V.
La direccin de lectura del mARN es de 5 3y el crecimiento de la cadena polipeptidica es hecho

desde el extremo amino al extremo carboxilo.
Sitio E f-Met Arg

f- Met Ingreso del
aminoacil-
Sitio A
tARN al sitio A
Sitio P
GTP GDP+ Pi
AUG- CGA- GCU------------3 ----------------AUG.CGA -
Inicio de un
nuevo ciclo Formacin del enlace
peptdico catalizado por
la peptidil transferasa
f- Met Sitio A
| vaco f- Met
Arg |
| Arg
|
Translocacin
GDP + Pi GTP
-AUG-CGA-GCU------ ----------------- AUG-CGA-GCU
Figura 16. Fase de elongacin de la cadena peptdica: unin del aminoacil-tARN, formacin del enlace peptdico y translocacin.
Termino.
La sntesis de protena es terminada por factores de liberacin, que reconocen los codones de terminacin UAA, UGA y UAG
provocando la hidrlisis entre el polipeptido y el tARN (Tabla VI).
La energa requerida tanto en la formacin del complejo de iniciacin son 70 S como en la unin del aminoacil- tARN al ribosoma,
y en la transposicin son obtenidos de la hidrlisis del GTP ( ver Tabla VII ).
Varios pasos en la sntesis de protena son especficamente inhibida por toxinas y antibiticos. Por ejemplo, puromicina inhibe la
sntesis de la cadena peptdica por su interaccin con el peptidil - tARN en la ribosoma, formando peptidil- puromicina que libera el
complejo ribosomal ( ver Tabla VIII).
Por otro lado, los polirribosomas, tambin denominados polisomas, consisten en molculas de mARN a las que estn adheridos
muchos ribosomas, cada uno de los cuales, leen el mARN independientemente y construyen una cadena polipeptdica. En las
clulas eucariticas, la sntesis proteca puede tener lugares en ribosomas libres, o bin, en los ribosomas unidos al retculo
endoplasmtico.
Tambin existe sntesis proteca en las mitocondrias y en los cloroplastos, los cuales poseen mARNs, tARNs especficos,
aminoacil- tARN-sintetasas y ribosomas.
SNTESIS DE ADN
Requerimientos para la duplicacin del ADN.
En todos los organismos los requerimientos generales para la sntesis de ADN son los mismos:
- una hebra de ADN como molde, en otras palabras una seccin de ADN que ser copiado.
- la enzima encargada de copiar el ADN, llamada ADN polimerasa.
El proceso de sntesis puede ser resumido como sigue:
Mg+2
d (NMP)n + d NTP d (NMP) n+1 + PPi
ADN polimerasa
donde d NTP es el deoxirribonuclesido trifosfato y d (NMP)n se refiere a un polmero de n deoxirribonucleotidos. El pirofosfato

(PPi) generado por la reaccin anterior es hidrolizado a fosfato inorgnico conduciendo la reaccin hacia la derecha ( PPi 2Pi)
Enzimas que participan en la duplicacin.

En procariontes.-
La duplicacin es un proceso complejo en la que participan muchas protenas. En bacterias, como E.coli, existen 3 polimerasas
(Tabla I) y una ADN ligasa.
- ADN polimerasa I.
Es una de las enzimas que es capaz de catalizar la sntesis
de ADN.
Posee una sola cadena polipetdica de 109 kDa.
Contiene un tomo de zinc como cofactor.
Esta enzima sintetiza en la direccin 5-->3 ( ver fig. 2).
Todas las ADN polimerasas poseen una actividad exonucleasa; esto corresponde a la actividad de hidrolizar el ADN de hebra
simple, removiendo deoxirribonucleotidos terminales desde el extremo 3 (actividad exonucleasa 3 5) o desde el extremo 5
(actividad exonucleasa 5 3).
- ADN polimerasa II
Esta enzima sintetiza ADN en forma similar a la ADN polimerasa I, pero no tiene actividad exonucleasa 5 3.
-ADN polimerasa III

La enzima esta compuesta por lo menos por 10 subunidades. Todas las subunidades son requeridas para que la enzima exprese su
actividad total. Esta enzima es la responsable de la sntesis de ADN en E.coli.
Origen de duplicacin.
La sntesis del cromosoma de E.coli siempre comienza en el mismo punto, llamado sitio ori C, una regin de 245 pares de bases.
oriC
Enzimas que participan en la sntesis de ADN en Eucariontes.

Por otro lado, existen cinco polimerasas en eucariontes son conocidas como alfa , beta , gamma , delta y psilon. Todos ellas
tienen mecanismos de accin similares a las enzimas en procariontes (E.coli).
- Las ADN polimerasas alfa y delta son las encargadas de la duplicacin del ADN cromosomal.
- La ADN polimerasa beta consistente de una sola cadena polipeptdica es la responsable de la reparacin del ADN.
- La ADN polimerasa gamma se encuentra en mitocondrias y es responsable de la duplicacin del ADN mitocondrial.
- La ADN polimerasa psilon, enzima recientemente descubierta y su actividad es similar a la polimerasa delta.
Proceso General de Sntesis de ADN (Fig. 2).
Las hebras de ADN son antiparalelas y la cadena del ADN que va en direccin 3 5 es copiada directamente por la enzima
ADN polimerasa III. La hebra hija sintetizada (5 3) es llamada HEBRA PRINCIPAL o ADELANTADA.
La otra hebra del ADN padre que tiene la direccin opuesta, 5 3, no puede ser copiada directamente, debido que no es sustrato
para la enzima y solamente puede ser sintetizada hasta que una parte del ADN se ha desdoblado. La hebra hija resultante se llama
HEBRA RETRASADA y es sintetizada en forma discontinua.
Esta sntesis discontinua resulta de la formacin de cortas secciones de ADN de aproximadamente 1000 a 2000 nucletidos que
reciben el nombre de FRAGMENTOS DE OKASAKI. Estas secciones son unidas por la accin de la enzima ADN ligasa
produciendo una hebra de ADN continua, que algunas veces se conoce como ADN+.
ADN girasa (reduce los giros)

Protenas SSB (cubren ADN de una hebra)
Helicasas
(desdobla ADN) Primosoma (hace el primer)
Holopolimerasa III
Primer (agrega dNTPs)
Topoisomerasa El primer es
(relaja tensin) removido y
llenado el espacio
Hebra
Adelantada Hebra
Pol I
Retrasada
Ligasa
Figura 2. Proceso de sntesis de ADN.
Previo a la sntesis.
Previo al proceso de sntesis del ADN propiamente tal, el ADN padre de doble hebra debe desenrollarse, para lo cual se requiere
la accin de la protena REP o HELICASA que necesita energa proveniente del ATP. Adems en este proceso de desenrollamiento
participa la enzima ADN girasa, que acta dando giros negativos al ADN padre cuando este se encuentra sobre enrollado.
Etapa inicial de la sntesis.

Para comenzar la sntesis de ADN se requiere la presencia de doble hebra como patrn-cebador. La segunda hebra corresponde
a una hebra de ARN, llamada PRIMER o PARTIDOR y es sintetizada por una enzima llamada PRIMASA. La forma activa de
esta enzima requiere una serie de protenas. Entre estas protenas se encuentra la PROTEINA N o dnaB, que selecciona el sitio
en que la primasa actuar. El complejo formado entre la primasa y las protenas auxiliares recibe el nombre de PRIMOSOMA.
Regla para la Sntesis.

La regla principal para la actividad de la ADN polimerasa es que cataliza la formacin de un enlace fosfodiester solamente si la base
entrante es complementaria al nucletido de la hebra padre. En otras palabras las ADN polimerasas son enzimas dirigidas por la
hebra patrn o padre.
Como mencionamos anteriormente las ADN polimerasas I. II y III poseen la actividad exonucleasa que permite aumentar la
fidelidad de la duplicacin o replicacin del ADN, removiendo los nucletidos que fueron puestos erradamente.
Proceso de Sntesis en procariontes

Una vez desenrollado la doble hebra de ADN, la enzima primasa coloca el ARN partidor y de ah comienza la sntesis de la hebra
hija por la accin de la enzima ADN polimerasa III. Recordemos que esta enzima es la responsable de la duplicacin, mientras que
la ADN polimerasa I acta como enzima auxiliar sacando la hebra de ARN partidor y luego sintetizando el trozo faltante, adems
ella tambin participa en la reparacin del ADN.
Durante el proceso de duplicacin del ADN circular (E.coli) se produce una estructura caracterstica, formada por dos horquillas (o
frentes) de duplicacin.
Direccin de la
replicacin
La velocidad de sntesis en E.coli , es de 800 bases por segundo.
Otras protenas del proceso de sntesis.

A continuacin describiremos otras protenas que participan en el proceso de duplicacin del ADN:
- HELICASA: son enzimas requeridas para desdoblar y abrir la molcula de ADN padre debido que esto no ocurre
espontneamente. Las helicasas requieren ATP como cofactor.
Dos diferentes helicasas han sido descritas, una de ellas se mueve en direccin 3 5 del ADN padre y recibe el nombre
de REP o HELICASA II o COPOL III (subunidad beta de la ADN polimerasa III) y las otras se mueve en direccin 5 3
, llamadas HELICASA I y III.
- PROTEINAS QUE SE UNEN A HEBRA SIMPLE (SSB): Las hebras simples de ADN generadas por las helicasas
son mantenidas separadas por la unin de las protenas SSB a la hebra de ADN. (ver figura 3 y Tabla II)
- ADN LIGASA es una enzima que cataliza la formacin de enlaces fosfodiester entre polinucletidos preformados. La
ADN ligasa esta involucrada en la sntesis de ADN discontinua, uniendo los fragmentos de OKASAKI una vez que se ha
reemplazado el partidor de RNA. Ellas tambin estn involucradas en los mecanismos de reparacin del ADN daado.
Existe un solo tipo de ADN ligasa en procariontes y dos en eucariontes; ambas funcionan en el ncleo.
Tabla II. Principales protenas de la duplicacin de E.coli.
Protenas Funciones
Protena N o dnaB Capacita a la primasa para comenzar la duplicacin
Primasa Sintetiza el ARN partidor.
Helicasas Desdobla la doble hlice.
Protenas SSB Estabiliza regiones de hebra simple.
ADN girasa Introduce giros a la superhlice.
ADN polimerasa III Sintetiza el ADN.
ADN polimerasa I Saca la hebra partidora y completa los espacios.
ADN topoisomerasa I Corta una hebra de ADN.
ADN topoisomerasa II Corta ambas hebras de ADN.
ADN ligasa Une los extremos de los polinucleotidos preformados.
Duplicacin del ADN en Eucariontes.

El mecanismo de sntesis del ADN en eucariontes es probablemente similar al proceso en procariontes.
La velocidad de las polimerasas en eucariontes es mucho menor que en procariontes. Para compensar esto, las clulas
eucarioticas contienen ms de 20.000 molculas de enzimas. Adems, las clulas eucarioticas tienen un gran nmero de horquillas
de duplicacin y fragmentos de Okasaki mas pequeos de 40 - 300 bases. De esta forma la velocidad de duplicacin del ADN es
mayor en eucariontes.
La ADN polimerasa delta es la encargada de sintetizar la hebra principal o adelantada y la polimerasa alfa la hebra retrasada. El
ADN en eucariontes esta unido con histonas, por lo tanto la duplicacin involucra dos pasos extras;
- Primero el ADN se debe disociar de las histonas para comenzar la duplicacin.
- La sntesis de histonas tiene lugar al mismo tiempo que la sntesis de ADN y las histonas se deben unir al nuevo ADN.
Algunos virus poseen otra forma de sintetizar ADN, debido que tienen una enzima llamada TRANSCRIPTASA REVERSA (Inversa)
capaz de usar como hebra molde la molcula de ARN.
5 3 Figura 3: Esquema que muestra el loop que se

forma en la hebra retrasada para que la ADN
polimerasa III tenga la misma posibilidad de actuar
en ambas hebras
3 Procariontes
3 5 3 5
Hebra Hebra
adelantada retrasada
Figura 4. Sntesis de ADN en eucariontes.

5'
Primasa
Pol
3'
5'
Helicasa
PCNA
Pol
EJERCICIOS
1. Cules eran las hiptesis de partida sobre la naturaleza de la molcula de la herencia? Cul era la hiptesis ms apoyada por
la comunidad cientfica?
2. Explica a travs de un mapa conceptual el experimento de Griffith y su principio transformante
3. Explica a travs de un mapa conceptual el experimento de Avery, C.Macleod y M.McCarty.
4. De acuerdo a las hiptesis razonables de partida, por qu crees que Avery, McLeod y McCarthy experimentaron con cinco
fracciones: polisacridos, lpidos, protenas, ARN y ADN?
5. Qu cientficos aportaron la primera evidencia experimental de que el DNA es el material gentico?
6. En el experimento de Griffith (1928), cuando mueren los ratones.
7. Si el ADN de una bacteria contiene una cadena marcada con N15 y otra sin marca (N14) es colocada sucesivamente en medios
N14, entonces como sern las cadenas de ADN en la cuarta generacin.
8. En el experimento de replicacin del DNA de Meselson y Stahl, qu porcentaje del DNA est formado por una hebra ligera y otra
hebra pesada despus de una generacin creciendo en un medio que contiene 14N?
9. Griffith (1928) utiliz dos cepas de las bacterias

Diplococcus pneumniae: la cepa R (por rough) que forma 10. Hershey y Chase (1952) demostraron que el DNA era el
colonias rugosas en medio slido y que no tiene efectos material gentico, al mismo tiempo que establecieron la
patolgicos en el ratn; y la cepa S (por smooth) que naturaleza de la infeccin viral. Teniendo en cuenta que los
constituye colonias lisas y produce una infeccin letal en el cidos nucleicos contienen fsforo, mientras las protenas no
ratn. Griffith encontr que ni las bacterias R intactas ni las lo contienen, y que la mayora de las protenas contienen
bacterias S muertas por calor, podan por s mismas causar azufre y los cidos nucleicos no, estos investigadores
una infeccin letal en el ratn. Sin embargo, al inyectar un disearon un experimento de mareaje radiactivo con azufre
ratn con una mezcla de ambas (R intacta + S muertas), se (35S) o fsforo (32P), que permita seguir la trayectoria,
desencadenaba una infeccin similar a la que causaban las respectivamente, de las protenas o cidos nucleicos virales,
bacterias S normales (vase Figura 5.1) en el proceso de infeccin de una bacteria. Hershey y Chase
demostraron as, que la cubierta proteica del virus no ingresa
a la bacteria que es infectada, mientras que el material
interno consistente de DNA s lo hace. Entonces, siendo el
DNA el responsable de la produccin de los nuevos fagos
(virus) durante el proceso de infeccin, ste es el material
hereditario y no las protenas (vase Figura 5.3).
a. Qu parte o partes de este experimento prueban que el

DNA es el material hereditario?
b. Si hubiera habido ingreso de las protenas virales
a. Explique por qu las bacterias S fueron muertas y por qu marcadas a la bacteria, se descartara al DNA como
se utiliz calor. material hereditario?
b. Hubiera dado los mismo inyectar al ratn con una mezcla c. Por qu las bacterias que iban a ser infectadas no
de bacterias S intactas y bacterias R muertas?. Por qu? deban tener marca?
c. Cul es la conclusin del experimento? d. Cmo piensa que fueran marcados radiactivamente los
virus?
11. Avery, MacLeod y McCarty (1944) investigaron sobre la naturaleza qumica del principio transformante a travs de anlisis
qumicos, enzima-ticos, serolgicos y de espectroscopia ultravioleta. Llegaron a establecer que la "fraccin activa" (transformante)
no contena protenas, ni lpidos, ni polisacridos serolgicamente activos, sino que consista principalmente, si no exclusivamente,
de una "forma viscosa de cido desoxirribonucleico altamente polimerizado". El valioso aporte de Avery y colaboradores respecto de
la naturaleza qumica del material hereditario fue ms meritorio an, por cuanto la mentalidad cientfica de la poca atribua dicha
capacidad transformante a las protenas cromosmicas, y ninguna, o escasa participacin a los cidos nucleicos.
a. En relacin con lo relatado, qu resultados experimentales debieron haber obtenido Avery y col. en los tratamientos enzimticos
que se enumeran ms abajo, corno para llegar a concluir que principalmente el DNA deba ser el principio transformante? Complete
la Tabla 5.2.
TABLA 5.2
Conservacin de la actividad del principio transformante en extractos celulares tratados con diferentes enzimas
Extracto celular Tratamiento Actividad del principio transformante
enzimatico
a) Extracto celular Ninguno S
b) Extracto celular Lipasas
c) Extracto celular Proteasas
d) Extracto celular Ribonucleasas
e) Extracto celular DNAsas
b. Considera Ud. que los resultados experimentales de la Tabla 5.2 son probatorios de la naturaleza del principio transformante?
12. Stardate 7.012.10.4.00 Diario personal del Mdico militar del USS Hackerprise: Al regresar de una misin en Europa, su
compaero de tripulacin, Noslen, se pone muy enfermo. Explora a Noslen en bsqueda de seales de infeccin y descubre que
est incubando un virus aliengena.
Descubre que este virus porta cidos nucleicos, protenas y lpidos. Tambin averigua que este Virus puede infectar a las clulas de
E. coli, pudindose as analizar fcilmente en el laboratorio.
I. Si cultiva este virus con uno de los siguientes radioistopos: 32P, 3H , o 35S.
a) Qu macromolcula viral ser marcada con 32P?
b) Qu macromolcula viral ser marcada con 3H?
c) Qu macromolcula viral ser marcada con 35S
II. Analiza el cido nucleico y encuentra lo siguiente:
a) Qu cido nucleico tiene el virus?. Por qu?

b) Dado que se trata de un virus aliengena, usted quiere determinar qu macromolcula (cidos nucleicos, protenas y lpidos)
constituye el material hereditario. Explique cmo procedera.
13. Escribir la secuencia complementaria en direccin 5 3, luego transcriba la hebra complementaria y tradzcala.
a) 5- GATCAA- 3
b) 3- ACTGGCCTAA -5
c) 5- ACCTAGGGTA -5
d) 3- CCTGGATTAAG -5
14. Escribir las secuencias de los mARN sintetizados de los siguientes ADNs
a) 3- ATTGCCATGCTA-5
b) 5- AGCTACTTAACG-3
c) 3-GGACCTACGTT.5
Adems indique cuales son los codones sin sentido presentes.
15. Cuantos aminocidos pueden ser codificados de las siguiente secuencia de mARN.
a) Asumiendo que comienza la lectura en el extremo 5 inmediatamente.
b) Comenzando en forma normal establecida por el cdigo gentico.
3. 1- 5- UUGCCUAUGGAUUGGAUG-3
3. 2- 3-AUGUAGGUAAAGGUAGGCC-5
3. 3- 3- AGCGCCAGUGACCAUGUA-5
16. Que secuencia es formado por la adicin de un poli (UUAC) a un sistema de sntesis de protenas.
17. Observa la siguiente imagen que representa a la molcula de ADN y luego:

a) Determina los posibles errores que hay en la imagen
b) Seala bases nitrogenadas pricas, pirimidcas, azcares (desoxirribosa), grupo fosfato.
c) Encierra un nucletido y luego enumera los carbonos del azcar.
d) Se cumplen las reglas de Chargaff.

Biologia I.veloso Modulo 1-4 Medio

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Biologia I.veloso Modulo 1-4 Medio

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Colegio Alberto Blest Gana 1

Jvenes emprendedores para el siglo XXI

SUBSECTOR DE APRENDIZAJE: BIOLOGIA

I. En busca del soporte fsico de la herencia

1. Descubrimiento del Principio de transferencia

La naturaleza del material que transformaba la cepa R en cepa S era

2. Estructura del ADN

Azcar + base = nuclesido

Bases del ADN

c) Trifosfato: 3 grupos fosfato

La polimerizacin de los nucletidos:

Esqueleto azcar-fosfato del ADN:

ADN: cido desoxiribonucleico

3. Virus bacterianos y el experimento de Hershey-Chase

Resultado del experimento:

4. La estructura del ADN

Enlaces A con T 2 puentes de hidrgenos (A=T)

Pares de bases encontradas en el ADN:

- Chargaff descubri que el porcentaje de A era siempre igual

Pero Chargaff no supo explicar sus descubrimientos. Hasta

La estructura del ADN (dos hebras complementarias de ADN) explica:

5. La puesta a prueba del modelo de Watson-Crick

Se propuso otro modelo: el del la Replicacin Conservativa.

Centrifugacin por gradiente de densidad

Por qu razn forma el ADN una banda en una

** La ausencia de la banda en la posicin pesada del

El flujo de la informacin gnica

Figura 5. El modelo de la accin gnica: el dogma central de la biologa molecular:

El modelo de la accin gnica, esquematizado en la figura 5, llamado el dogma central de

Actualmente, dogma significa un punto fundamental de

Papel del ARN en la sntesis de protenas.

Debemos tener en cuenta antes de sumergirnos en el proceso de transcripcin:

Etapas en la sntesis del ARN mensajero

Caractersticas de la ARN polimerasa procariota

Como consecuencia de lo dicho, la ADN polimerasa puede encontrarse en dos estados:

El Promotor Procariota: la seal de inicio

La secuencia de consenso ms importante y mejor

INICIACIN de la sntesis del ARN mensajero

Core se mueve a lo largo del ADN colocando los ribonucletidos

TERMINACIN y LIBERACIN del ARN sintetizado

La secuencia de Uracilos suministra la seal que

Transcripcin en Clulas Eucariotas

El ARN mensajero en Eucariotas:

Modificaciones de los extremos del ARN mensajero Eucariota :

Maduracin del ARNm

De acuerdo a esto se puede establecer que el

Aminocido + ATP aminoacil AMP + PPi

Aminocido + ATP + tARN aminoacil tARN + AMP + PPi

Loop DHU Loop TC

Figura 14. Ciclo de la sntesis de protena

IF-2GTPfMet-tARN Met GDP +Pi

Figura 15. Fase de inicio de la sntesis de protenas en

La direccin de lectura del mARN es de 5 3y el crecimiento de la cadena polipeptidica es hecho

Sitio E f-Met Arg

AUG- CGA- GCU------------3 ----------------AUG.CGA -

-AUG-CGA-GCU------ ----------------- AUG-CGA-GCU

El proceso de sntesis puede ser resumido como sigue:

donde d NTP es el deoxirribonuclesido trifosfato y d (NMP)n se refiere a un polmero de n deoxirribonucleotidos. El pirofosfato

Enzimas que participan en la duplicacin.

-ADN polimerasa III

Enzimas que participan en la sntesis de ADN en Eucariontes.

Proceso General de Sntesis de ADN (Fig. 2).

ADN girasa (reduce los giros)