1 DEFINICIN

Es el resultado de los procesos de digestin, asimilacin y metabolizacin de

un compuesto orgnico llevado a cabo por bacterias, hongos, protozoos y
otros organismos. En principio, todo compuesto sintetizado biolgicamente
puede ser descompuesto biolgicamente. Sin embargo, muchos compuestos
biolgicos (lignina, celulosa, etc.) son difcilmente degradados por los
microorganismos debido a sus caractersticas qumicas.
La biodegradacin es un proceso natural, ventajoso no slo por permitir la
eliminacin de compuestos nocivos impidiendo su concentracin, sino que
adems es indispensable para el reciclaje de los elementos en la biosfera,
permitiendo la restitucin de elementos esenciales en la formacin y
crecimiento de los organismos (carbohidratos, lpidos, protenas).

2 TIPOS DE BIODEGRADACIN

2.1 BIODEGRADACIN AEROBIA

Presencia de oxgeno y otros nutrientes elementales, los microorganismos

degradan los contaminantes orgnicos hasta convertirlos en dixido de
carbono, agua y biomasa celular.

2.2 BIODEGRADACIN ANAEROBIA:

Se realiza en ausencia de oxgeno, los contaminantes orgnicos son

metabolizados hasta metano y cantidades limitadas de dixido de carbono e
hidrogeno molecular. Bajo condiciones sulfato- reductoras, el sulfato es
transformado a un sulfuro o azufre elemental; y bajo condiciones nitrato-
reductoras se genera como producto final nitrgeno molecular

2.3 BIODEGRADACIN ENZIMTICA:

Consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con el fin de
degradar las sustancias nocivas.
Ejemplos: La enzima peroxidasa se emplea para iniciar la degradacin de
fenoles y aminas aromticas presentes en aguas residuales de muchas
industrias.

2.4 BIODEGRADACIN MICROBIANA:

Se refiere al uso de microorganismos directamente en el foco de la

contaminacin.
Ejemplo: LAS bacterias y hongos pueden degradar con relativa facilidad
petrleo y sus derivados, benceno, tolueno, acetona, pesticidas, herbicidas,
teres, alcoholes simples, entre otros. Los metales pesados como uranio,
cadmio y mercurio no son biodegradables, pero las bacterias pueden
concentrarlos de tal manera de aislarlos para que sean eliminados ms
fcilmente

3 ORGANIC WASTE SYSTEMS (OWS)

Organic Waste Systems (OWS) es una empresa lder mundial en la construccin
y el funcionamiento de plantas de digestin anaerobia, pruebas de
biodegradabilidad de biopolmeros y consultora de gestin de residuos.
Las tres actividades principales de las empresas son:
Construccin de plantas de digestin anaerobia
Consultora y asistencia en materia de biogs
Pruebas de biodegradacin y consultora de gestin de residuos

En base a su tercera actividad hablaremos especficamente de la

Biodegradabilidad, compostabilidad y ecotoxicidad, acerca de las pruebas y
proyectos de biodegradacin realizados por esta empresa.
PROYECTO: DEGRADACIN ABITICO DE PLSTICOS OXO-
DEGRADABLES
Plsticos oxo-degradables son plsticos formados de plsticos comunes, como
polietileno (PE), polipropileno (PP), poliestireno (PS) y tereftalato de polietileno
(PET), a los cuales se aadieron aditivos con el objetivo de (bio) degradar los
plsticos por un proceso iniciado por oxgeno y acelerado por luz y/o calor.
A continuacin se explicar las 3 fases del proceso de biodegradacin de este
proyecto.
3.1 FASE1. DEGRADACIN ABITICA
OXIDATIVA
Utilizando condiciones aceleradas, las muestras son
sujetas a un rgimen de calor, humedad y/o exposicin
a la luz con el objetivo de determinar el tiempo
necesario para reducir el peso molecular y/o las
caractersticas mecnicas (p.e. elongacin de ruptura).
Se realiza la prueba en etapas de 300 horas (12,5 das)
y se puede ser realizada en lnea con ASTM D5208 o
ISO 4892-3.
La fragmentacin del material es monitoreada al inicio y
al final de cada etapa. Se toman fotos de cada etapa.

3.2 FASE 2. BIODEGRADACIN

Los residuos de las pruebas de la fase 1 son sujetos a la prueba de
biodegradacin utilizando el medio ambiente a donde por fin son destinados los
residuos despus de la eliminacin (p.e. compost, tierra, agua, vertedero,).
Los residuos se mezclan con el inculo y se mide la cantidad y la velocidad de
produccin de CO2 en caso de biodegradacin aerobia y tambin se mide la
produccin de CH4 en caso de biodegradacin anaerobia.
La prueba de biodegradabilidad se realiza sobre condiciones de certificacin o
cribado. Se requiere condiciones de certificacin en caso que los resultados
sern utilizados para la certificacin y/o haciendo reclamaciones pblicas. Se
sugiere las condiciones de cribado en caso de investigacin temprana y cuando
los resultados solo sern utilizados interiormente.
La prueba se realiza conforme ISO 14855, ASTM D 5338 y/o EN 14046 (en
compost), ISO 17556, ISO 11266 y/o ASTM D5988 (en tierra), ISO 14851, ISO
9408, EN 29408, ASTM D 5271, OECD 301F y/o OECD 302C (en agua dulce)
y ASTM D 6691 (en agua marino). Se ofrece mltiples descuentos de pruebas
en caso que se necesita hacer el anlisis de varias muestras en paralelo.

3.3 FASE 3. ECOTOXICIDAD

Para mostrar que los residuos de los procesos abiticos y los procesos de
biodegradacin no hacen dao al medio ambiente, se necesita realizar medidas
del efecto de los residuos de la fase 1 o la fase 2 en la variedad de los
organismos vivos.
Este anlisis puede incluir la medida de ndice de germinacin de semillas
como berro, el crecimiento y ndice de supervivencia de los lombrices de tierra
(OECD Guideline 207), el crecimiento de una variedad de plantas (OECD
Guideline 208) y tambin la supervivencia, crecimiento y/o inmovilizacin de
organismos acuticos como Rotifers, Daphnia o algas.
4

BIODEGRADACIN DE HIDROCARBUROS DE LODOS

RESIDUALES DE CENTROS DE AUTOLAVADOS
CON BFNA

4.1 DESCRIPCIN:
En los servicios de autolavado se utilizan pequeas plantas de
tratamiento las cuales generan lodos residuales, de manera particular
en el presente trabajo se utilizan los lodos residuales generados de
una planta de tratamiento que utiliza procesos de floculacin para el
tratamiento de las aguas obtenidas del proceso de lavado de
automviles. Esta agua residual contiene una gran cantidad de
slidos totales e hidrocarburos y componentes tpicos del agua como
grasas jabn1 etc. Se ha estudiado a los microorganismos que crecen
en sitios contaminados como los degradadores idneos para estos
compuestos. Se han encontrado diversos gneros de
microorganismos degradadores de hidrocarburos como son bacterias,
algas, levaduras y hongos filamentosos. As se han sido aislado en
diversos ambientes: Pseudomonas, Arthrobacter, Micrococcus,
Nocardia, Vibrio, Acinetobacter, Brevibacterium, Corynebacterium,
Flavobacterium, Candida Rhodotorula y Sporobolomyces. Entre los
hongos se encuentran; Penicillium, Cunninghamella, Verticilium,
Beauveria, Mortieriella, Phoma, Scolebasidium6, 7. Se han estudiado
hongos que degradan el 0,4% de lodos en 3 semanas y por cultivo
bacteriano en dos semanas7 . Tambin se ha estudiado cultivos BFNA
degradadores de hidrocarburos en condiciones de fijacin de
nitrgeno8,6 estos cultivos tambin han mostrado la capacidad de
producir biosurfactantes utilizando hidrocarburos como fuente de
carbono9 , en un proceso de biorremediacin por bioaumentacin con
biopilas los cultivos de bacterias de vida libre fijadoras de nitrgeno
(BFNA) removieron hasta 120 g de petrleo crudo por kg de suelo con
una eficiencia del 90 % en un lapso de un ao. Se encontr tambin
que en medio lquido cultivo de BFNA poda utilizar 20000 ppm de
hidrocarburos del petrleo como fuente de carbono y energa en
donde las BFNA en 10 das eliminaban hasta un 95% de los
hidrocarburos presentes el petrleo10. Se ha determinado tambin
que estos cultivos tienen la capacidad de producir biosurfactantes
cuando se encuentran en contacto con hidrocarburos.

4.2 METODOLOGA

Microorganismos. El cultivo de BFNA aislado de suelo

contaminado por hidrocarburos del estado de Tabasco, fue
sembrado por estra en placa en medio Rennie modificado
(1987), se incub a 27C, durante cinco das. El cultivo obtenido
fue inoculado en medio liquido mineral usando queroseno como
nica fuente de carbono, en cultivo en lote, incubado a 27C,
180 rpm en un agitador orbital incubado durante 72 h. El cultivo
fue utilizado como inculo despus de haber centrifugado a
5000 rpm durante 15 min, el paquete celular fue resuspendido
con 30 ml de solucin salina isotnica estril obteniendo una
DO=1 determinada a 620 nm.
Lodo residual. Se muestrearon 20 l de aguas residuales de un
reactor de sedimentacin despus del proceso fisicoqumico de
un tren de tratamiento de diez ciclos en la planta de
tratamiento del servicio de autolavado, ubicado en Av. Anillo
Perifrico Blvd. Adolfo Lpez Cortines 40000-Bis. lvaro
Obregn. Col. Jardines del Pedregal (Toyota)12, en donde se da
mantenimiento, lavado de autos, motores y carroceras. Los
recipientes, muestras y almacenamiento de las mismas se
realizaron de acuerdo a la norma NMX-AA-003-SCFI-198013 . La
muestra se guard en refrigeracin por 48 h, el lodo
sedimentado obtenido fue utilizado para realizar los estudios
del presente trabajo.

Caracterizacin de los lodos del agua residual de un

servicio de autolavado. Para la caracterizacin de los lodos
se determinaron los siguientes parmetros de densidad del
lodo, pH, slidos totales, conductividad, grasas y aceites,
coliformes y huevos de helminto, grasas, aceites e
hidrocarburos de acuerdo a las normas correspondientes13,2 .

Determinacin de CO2 producido. La medicin de CO2

producido por los microorganismos, durante la incubacin de los
lodos residuales en un sistema cerrado se realiz por volumetra
de acuerdo al mtodo propuesto por Bartha y Pramer14. Se
 tomaron muestras de 4 ml de la cmara de reaccin con la
solucin de KOH 0.01 N, al tiempo cero y cada 24 horas hasta
los 7 das.

4.3 EFICIENCIA

Como puede observarse en la tabla 2 los resultados son bastante

favorables, con una remocin de solidos totales tiene una eficiencia
del 50%. Tambin al revisar la apariencia del color negro presentado
llega a transparente y sin olor a gasolina, lo que permite que pueda
reutilizarse por el personal porque no tendr olor ftido que es uno de
los principales problemas para que el personal del centro de lavado la
utilice.
El porcentaje de eficiencia obtenido en la remocin de grasas y
aceites es del 80%, aunque considerando que el agua contiene varios
contaminantes como el jabn y las ceras pues sigue siendo atractivo
el tratamiento con los cultivos de BFNA.

Un resultado sobresaliente es que el color del agua inicial era negro y,

despus de 48 horas de crecimiento, el agua se observaba
transparente y el olor a gasolina desapareci. En los matraces se
pudo determinar a lo largo del experimento. El cultivo de las BFNA
permanece activo durante 180 horas en donde empieza a decaer el
crecimiento del cultivo de BFNA, lo que tambin se ve reflejado en las
grasas y aceites que contiene el lodo. Ello es debido a que el cultivo
de BFNA los utiliza como fuente de carbono, y aunque cuando an
queda sustrato el cultivo no lo utiliza, posiblemente debido a su
naturaleza qumica y que el cultivo de BFNA ya no tiene la capacidad
metablica para utilizarlos como fuente de carbono. Al cuantificar los
cultivos de BFNA se observa un crecimiento hasta 100 horas y
despus se encuentra que la fase estacionaria termina a las 80 horas.
En este lapso de tiempo se cuantificaron los hidrocarburos y se
encontr que hay 60 gramos de hidrocarburos por litro de lodo
residual. Despus de 180 horas se obtiene un 80 % de eliminacin,
por lo que la eficiencia del tratamiento permitira proponer la
utilizacin del reactor para la eliminacin biolgica de los
hidrocarburos

5 BIODEGRADACIN DE HIDROCARBUROS EN
SUELOS CONTENIDOS EN TERRARIOS

5.1 RESUMEN

Las tecnologas conocidas como Landfarming, Land Treatment o Land

Application, son mtodos de remediacin de hidrocarburos del petrleo a
travs de la Biodegradacin. Se inocularon suelos de landfarming con
distintas cepas de bacterias aisladas del mismo suelo contaminado con
hidrocarburos y propagadas en el laboratorio. Se aplicaron distintas
concentraciones de nutrientes y se mantuvieron los suelos a la intemperie
durante 90 das. La mayor tasa de biodegradacin obtenida fue del 45 % en
uno de los suelos ensayados.

5.2 METODOLOGA

1. El suelo se obtuvo de un landfarming perteneciente a Refinera San

Lorenzo S. A. ubicada en la Ciudad de San Lorenzo, Provincia de Santa
Fe. El hidrocarburo inicial calculado expresado como extractables en
ter etlico fue igual a 5% p/p.El Carbono Orgnico Total inicial del
suelo del landfarming fue de 1,07% p/p.
2. Se construyeron 11 terrarios metlicos de 50 lts. de capacidad, en
donde se colocaron 30 Kg. de suelo de landfarming por terrario. Para
evitar el contacto del suelo con el metal del terrario, se procedi a
recubrir interiormente a los terrarios con una capa gruesa de resina
epoxi no biodegradable en las condiciones del ensayo.
3. Se eligieron 3 cepas bacterianas para las inoculaciones, previa
propagacin en medio mineral lquido con extractable etreo (EE)
como nica fuente de carbono. El EE se obtuvo por extraccin del
 suelo del Landfarming durante 6 hs. con ter etlico mediante el
empleo de un equipo Soxhlet.
4. Las propagaciones se realizaron en reactores compuestos por
recipientes cilndricos de polipropileno de 1,5 lts. de capacidad con
sistema de agitacin continua. Se descart semanalmente el
sobrenadante libre de biomasa y se repuso el medio mineral lquido
con la fuente de carbono. Las cepas elegidas para inocular se aislaron
del mismo suelo del landfarming y se nombraron como W1, W2 y W3,
ya que no pudo llegarse a la identificacin total de las mismas. Se
realiz una sola aplicacin de fertilizantes del tipo NPK al comienzo
del ensayo. Los fertilizantes empleados se formularon y se aplicaron
de acuerdo a las siguientes proporciones:

En cada uno de los terrarios se coloc el suelo, el fertilizante y el

inoculo bacteriano de acuerdo al siguiente cuadro
 Figura 1. Temarios

5. Los terrarios una vez inoculados se mantuvieron a la intemperie

durante 90 das, desde Julio a Octubre de 1996, se airearon
semanalmente mediante mezclado de todo el contenido. Al comienzo
del ensayo y cada 30 das se determin en cada suelo contenido en
los terrarios los siguientes parmetros: pH, humedad, contenido de
hidrocarburos, recuento de microorganismos aerobios totales y
microorganismos degradadores de hidrocarburos.
6. El recuento de microorganismos aerobios totales (MAT) se efectu
mediante un recuento directo en placa por la tcnica del vertido
empleando como medio de cultivo Plate Count Agar (Merck), los
cultivos se incubaron a 30C durante 24 horas.

La determinacin de microorganismos degradadores de hidrocarburos

(MDH) se realiz mediante la tcnica del Nmero Ms Probable
empleando como medio de cultivo el caldo Bushnell - Haas (BH)
(DIFCO) con n-hexadecano como nica fuente de carbono.

5.3 EFICIENCIA

En la mayora de los terrarios, los porcentajes ms altos de reduccin de

hidrocarburos se observaron en los primeros 30 das. La mayor eficiencia de
biodegradacin se obtuvo en los terrarios N9, 4 y 7. En el terrario N 9 se
obtuvo la mayor reduccin, 45%, la cual es coincidente con algunos trabajos
La cepa W2 es la que parece poseer la mayor capacidad hidrocarburoltica.
El Fertilizante Z2 ha demostrado ser ms efectivo que el Z1; excepto en los
terrarios en los cuales se inocul la cepa W3. De acuerdo a la formulacin
de los fertilizantes, el proceso de biodegradacin para la cepa W2 depende
en gran manera del aporte de Fsforo, el cual podra ser uno de los
nutrientes limitantes del proceso. Los recuentos bajos que se obtuvieron de
MAT comparados con los MDH, se debe en principio a que se emple la
tcnica de vertido en placa, en la cual, no todos los microorganismos
capaces de crecer en superficie pueden crecer en profundidad. En general,
la fertilizacin estimul el proceso de biodegradacin. Este tipo de cepa, una
vez propagada, podra ser empleada para acelerar los procesos de
biodegradacin de hidrocarburos en suelos contaminados.

6 CONCLUSIONES

Suele aplicar mayormente en hidrocarburos debido a que las

bacterias y hongos poseen mayor facilidad para degradarlas.
Los estudios detallados anteriormente son a pequeas escalas y
nicamente son desarrollados para investigacin
La eficiencia entre los dos diferentes proyectos es muy similar siendo
menor que un 60% a pesar de que se desarrollaron uno 1998 y el otro
el 2015.